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Laboratorio: Observacin de clulas vegetales y vegetales.

A. OBJETIVOS Con esta prctica de laboratorio se pretende: 1. 2. 3. 4. Observar algunos tipos de clulas tanto animales como vegetales. Observar estructuras celulares como pared celular, cloroplastos, ncleo, mitocondrias y ribosomas. Determinar algunas semejanzas y diferencias entre la clula procariota y la eucariota. Determinar la importancia de ciertos colorantes y soluciones en la identificacin de estructuras y sustancias celulares. 5. Verificar que las clulas tienen formas y tamaos variables. B. MATERIALES Microscopio. Portaobjetos. Cubreobjetos (laminillas). Goteros. Beakers o frascos pequeos con agua. Aceite de inmersin. Palillos de dientes. Bistur. Lugol al 1% Azul de metileno. Bulbos de cebolla de huevo. Elodea (Anacharis sp.) Papas (Solanum tuberosun). Placas con sangre humana. Tela para limpiar. C. PROCEDIMIENTO 1. Clulas vegetales. a. Cebolla de huevo. Tome una cebolla de huevo y divdala en ocho partes. Note que consta de varias partes o escamas. Cada capa est recubierta, en ambas superficies por una membrana transparente formada por clulas epidrmicas o epiteliales. Separe una porcin pequea de la membrana externa (que es ms pigmentada y coloreada que la interna). Extindala sobre un portaobjetos, agregue una gota de agua y pngale un cubreobjetos tratando de evitar la formacin de burbujas. Dibuje varias clulas en 10X y en 40X. Qu forma tienen las clulas? Agregue una gota de solucin de lugol a un lado del cubreobjetos y al lado opuesto ponga un pedazo de papel absorbente para facilitar la entrada del colorante a la muestra. Observe nuevamente en 10x y en 40x. Qu diferencia encuentra en relacin con la observacin que hizo anteriormente? b. Elodea Ponga una hoja de la planta acutica sobre un portaobjetos, agregue una gota de agua y colquele un cubreobjetos. Esquematice varias clulas en 10x y en 40x. Se ve le ncleo celular? Se nota en ellas algn movimiento? Si es as, Cmo se llaman las estructuras que permiten darse cuenta de ese movimiento? Qu nombre recibe este fenmeno?

c. Papa Con una cuchilla qutele la cascara a un pedazo de papa. A continuacin saque porciones en forma de palitos de aproximadamente medio centmetro de ancho. Luego haga un corte muy delgado, transparente, en uno de los extremos y depostelo sobre un portaobjetos, agregue una gota de agua y pngale un cubreobjetos. Observe que hay un gran nmero de estructuras transparentes, de tamaos variables y formas ms o menos ovaladas. Estas estructuras tambin son plastidios, como los cloroplastos. Cmo se llaman? Coloree una preparacin de lugol. Qu coloracin toman los plastidios? Por qu? 2. Clulas animales a. Epitelio de Mucosa oral humana. Ponga una gota de agua sobre un portaobjeto. Enjuguese la boca y con un palillo de dientes haga un raspado suave sobre la pared interna de las mejillas. Mezcle el raspado con la gota de agua, esprzalo sobre el portaobjetos, pngale un cubreobjetos y observe con los objetivos de 10x y de 40x. Qu estructuras observa en estas clulas? Coloree la preparacin con azul de metileno. Qu diferencias encuentra entre esta observacin y la inmediatamente anterior? Dibuje algunas de las organelas observadas (membrana celular, ncleo, nuclolo, citoplasma). b. Sangre humana La sangre est compuesta de diferentes tipos de clulas que se encuentran suspendidas en un lquido llamado plasma. Cada centmetro cubico de sangre puede contener millones de estas clulas. Las tres formas de clulas sanguneas son los eritrocitos o glbulos rojos, los leucocitos o glbulos blancos y los trombocitos o plaquetas. Para observar estas clulas tome una placa permanente de extendido de sangre, que ha sido tratada con colorante de Wright, y enfquela con los objetivos de 40x y de 100x. Cuntas clases diferentes de clulas hay? Qu funcin tiene cada una de las diferentes tipos de clulas sanguneas? Dibuje lo observado con el objetivo de 40x y con el de 100x. c. Observacin de organismos unicelulares. En los cuerpos de agua dulce como estanques, humedales, lagos y lagunas habitan un sinnmero de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias y hongos hasta protistas como algas microscpicas. Descubra como en una gota de agua de un ecosistema acutico habitan diversas formas de vida celular. 1. Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna. 2. Cbrala con una laminilla. 3. Observa a menor y mayor aumento, diferenciando los organismos unicelulares. 4. Dibuja lo observado. D. OBSERVACION DE CLULAS VEGETALES Y ANIMALES. INFORMACIN

El laboratorio se realiz bsicamente con el fin de identificar los diferentes montajes a observar en el microscopio. Para completar un proceso de identificacin de clulas fue necesario llevar a cabo diferentes montajes hmedos para lograr reconocer las clulas animales y vegetales. En la primera parte del laboratorio se observaron ambos tipos de clulas en los montajes de papa, cebolla, tomate y epitelio de la mucosa oral humano. Cada uno de estos se observa en tres diferentes aumentos del microscopio (4x, 10x, 40x) el aumento de 100x o de inmersin no puede cumplirse ptimamente debido a que los montajes necesitan ser lo suficientemente buenos para lograr un buen aumento con aceite de inmersin. Para la segunda parte del laboratorio se cumplieron los montajes faltantes (extendido de sangre y elodea en agua y colorante de Wright y solucin salina) los cuales representan un mayor grado de complejidad, sin embargo con estos tres montajes si se logra realizar el aumento de 100x o con aceite de inmersin. De cada montaje, fue propio realizar dibujos en los cuales se tom como referencia una sola clula para realizar las observaciones debidas y esto tambin es indicado en los respectivos dibujos indicados posteriormente en este informe. Se logr tambin observar un proceso visto tericamente con anterioridad en el portafolio de Procesos biolgicos (homeostasis) el cual produce reacciones fcilmente observables en la clula vegetal (montaje de elodea y extendido de sangre humana), realizado en la segunda parte del laboratorio. Pese a que se deben observar diferentes partes de la clula, esto es bastante complicado dado la dificultad para diferenciar las partes de sta, el organelo ms notable es el ncleo el cual se logra observar con mayor claridad en las clulas animales, debido a su tamao claramente diferenciado como lo es el caso del epitelio oral humano y la cebolla, tambin se logra diferenciar claramente en todos los montajes de clula el citoplasma, el cual rodea a la clula y permite que exista la transferencia de alimentos hacia el ncleo, en el citoplasma se encuentran todos los dems organelos de la clula, pero estos no podan ser diferenciados pese a que se utilizaron todos los aumentos posibles en el microscopio teniendo en cuenta que los impedimentos de ste han sido superados por el innovador microscopio electrnico por medio del cual ha sido posible comprobar la existencia de organelos celulares de los cuales se dudaba anteriormente. De sta manera se puede comprobar cmo la ciencia y su avance permiten da a da comprender el sentido de la existencia, y los procesos que sta conlleva, como lo son los movimientos y actividades que la clula, igualmente llegamos a identificar y diferenciar la morfologa y funcionamiento de las diferentes clases de clula y los organelos que componen a sta sin ignorar el previo estudio del tema para as cumplir a cabalidad con los objetivos que la prctica requiere y con igual importancia contar con el asesoramiento de del tutor (indicaciones del profesor Martn Barrera) que es quien indic cmo llevar a cabo el proceso anteriormente planteado. A. DESCRIPCION El proceso fue dividido en dos partes claramente diferenciadas, en la primera parte del proceso se utilizaron las muestras de la cebolla en solucin de lugol al 1%, una muestra de epidermis oral

humana y papa a continuacin en la segunda parte ms compleja con la hoja de Elodea en agua y en solucin salina y como otra muestra la frotis de sangre, para llevar a cabo ste proceso en su orden debieron ser utilizados diferentes materiales. En el primer laboratorio se realizo, como primero, el montaje de la cebolla, se tom una hoja del bulbo de la cebolla y luego se hizo un corte cuadrado de 1cm x 1cm, con las pinzas se levant la capa mas externa, la cual es muy delicada y puede rasgarse con mucha facilidad, y esta fue llevada a la lamina en un montaje hmedo. Se procedi a observar el montaje en los tres primeros y ms sencillos aumentos del microscopio de luz (10x, 40x) observando lo siguiente: 1. Corte de cebolla (10 x)

Cebolla en solucin lugol 1%

Montaje hmedo

Montaje en solucion salina

Con los diferentes aumentos las diferencias antes descritas se hacan ms notables, pero an no se lograban diferenciar las vacuolas, la membrana citoplsmica o los nuclolos.

1.1 Corte de cebolla (40x)

vista microscpica

Para el corte de papa se quit totalmente la cascara que recubre el tubrculo y luego se realizaron varios cortes transversales, estos deban ser muy finos y transparentes al verlos a trasluz, en la caja de petri se enjuago el corte para evitar el exceso de almidn y para lograr notar los diferentes cortes y cul era el ms indicado para realizarlo, una vez puesto en la lamina, a el corte se le agreg una gota de lugol para lograr distinguir alguno organelos de la clula Tambin este corte se observo bajo los tres aumentos principales del microscopio ptico y esto fue lo observado : 1.2 Corte de papa (4x)

En este corte se puede observar por medio del aumento del lente las divis montaje tiene.

corte de papa en solucin de lugol

En este montaje se vieron fcilmente las divisiones de las clulas y los cloroplastos, los cuales se encontraban distribuidos por toda la hoja de Elodea

Corte de papa (10x) En este aumento se puede determinar ms claramente dichas divisiones con clula independiente cada una de la otra, logrando apreciar el ncleo, e nuclear y la pared celular.

2.7 Elodea en Agua (10x) En este aumento, en la clula de Elodea se lograba notar la pared celular, pero ninguno de las otras organelas se logra notar an, pero se observa perfectamente la ciclosis.

Corte de papa (40x) Ya en sta ltima etapa podemos observar netamente lo mismo que en l claridad y nitidez, claro est que es debido al tamao que ste aumento of 2. OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES

2.8 Elodea en agua (40x)

2.9 Elodea en agua (40x) Tanto en este como en el siguiente aumento no se ve mayor diferencia entre lo observado salvo que los organelos antes mencionados de la clula se logran notar con una mayor claridad. 3. Observacin de organismos unicelulares

3.1 Mtodo Hemos de tener en cuenta que esos animales, cuando las condiciones ambientales son desfavorables, se enquistan, por lo que los meses de fro no son buenos para su recogida. Si as fuera, habr que dejar el recipiente con agua en un lugar iluminado y a una buena temperatura durante varios das antes de su observacin al microscopio. Cuando tomemos unas gotas de agua con un cuentagotas y puestas a la lupa observemos actividad biolgica, es el momento de poner una gota de un portaobjetos y visualizarla al microscopio, una vez hemos colocado encima un cubre objetos con cuidado de no aplastar demasiado la gota. El tiempo de exposicin ha de ser pequeo, porque de lo contrario se nos secara el medio y moriran los organismos, con lo que pueden adoptar formas muy lejanas de la realidad biolgica. 3.2 Observaciones

Los protozoos son animales unicelulares de sistemas de rganos simples, por lo general de tamao microscpico, y que pueden formar colonias. Viven libres en medios acuticos tanto dulces como salados, as como parsitos o comensales en el interior de los seres vivos. Los de vida libre son de sumo inters en las cadenas trficas, pues los hay productores (Auttrofos) y consumidores (Carnvoros), etc. Existen siete filos a cada cual ms interesante, pero en aras a la brevedad y con la intencin de dar una idea general de cmo son estos desconocidos seres, vamos a recurrir a tomar agua de cualquier charca y dedicarnos a observarla durante varios das. Los primeros rdenes que aparecen son: 1. Orden Dinoflagellida Su forma es redondeada con una floja estrangulacin a modo de cinturn transversal que divide al protozoo en dos porciones o tecas: Epiteca e Hipoteca, y otro perpendicular al primero y en su interseccin surge un largo flagelo. Dentro de este orden, los gneros ms frecuentes que podemos encontrar son : Dinophisis: Con los bordes del surco transversal y longitudinal con prolongaciones Piridinium: Con una prolongacin en la epiteca y dos apndices en la hipoteca. Ceritium: Con una larga prolongacin (mayor que en Peridinium) en la epiteca y largos apndices en la hipoteca.

2. Orden Euglenida: Son flagelados verdes o incoloros con una cavidad denominada reservorio con dos flagelos que comunican con una vacuola pulstil. Poseen cloroplastos grandes y pirenoides, as como grnulos de material de reserva o paramilos. En una muestra de agua de charca, los gneros que posiblemente se vean son: Euglena: Son de color verde y poseen un pirenoide. Su tamao est entre 20 y 400 micras. Destacan las especies: Euglena gracilis y Euglena desses. Ms adelante surgirn rdenes del Subfilo Sarcodina, caracterizados por poseer Seudpodos de funcin locomotora, as como en algunos casos caparazones, esqueletos que permiten la salida de pseudpodos de varios tipos: finos, transparentes y ramificados pero no anastomosados, o gruesos y redondeados, o finos y rectos, etc.

3. Orden Arcellinida: Con el G. Arcella 4. Orden Actinophrys: Con el G. Actinosphyrum 5. Orden Amoebida: Con los gneros Amoeba y Mayorella El filo Ciliophora, caracterizado por la presencia de cilios y anejos intracelulares, contiene gneros muy conocidos: G. Paramecium: Tiene forma de zapatilla y su tamao oscila entre 200 y 30 0 micras. G. Coleps: Presenta forma de tonel cubierto por una pelcula con placas esculpidas, aunque es difcil de ver por la gran velocidad a la que se mueve.

G. Didinium: Cuerpo con forma de barril y dos coronas de cilios. Posee un citostoma anteri or y circular que es capaz de abrir desmesuradamente y fagocitar a otros protozoos de tamao similar al suyo, como por ejemplo Paramecios. G. Colpidium: Posee aspecto reniforme alargado, filiacin uniforme y una citofaringe. Su tamao oscila entre 90 y 110 micras. G. Vorticella: Posee un cuerpo en forma de campana y carente de ciliatura, existiendo cilios sin embargo slo en la zona bucal. De vida fija al sustrato inorgnico, vegetal o animal. Su tamao, sin tener en cuenta lo longitud del pednculo, es de 50 a 150 micras. En los gneros Stentor, Spirostomun y Condylostoma, se observa una cavidad bucal grande en la que, adems de la zona oral de membranelas, se ve una larga membrana. G. Dinophisis: Con los bordes del surco transversal y longitudinal con prolongaciones G. Piridinium: Con una prolongacin en la epiteca y dos apndices en la hipoteca. G. Ceritium: Con una larga prolongacin (mayor que en Peridinium) en la epiteca y largos apndices en la hipoteca. Destacan las especies Ceritium fusus, Ceritium tripos y Ceritium furca.

A. COMPARACIONES Unos de los grandes dilemas de la vida es que aunque exista un gran conocimiento terico, nunca puede llegar a equilibrar la prctica del mismo, por lo tanto la comparacin fundamental de la existencia es llevar lo escrito al verbo. En los libros, en la tutora y en general las fuentes de conocimiento que fueron utilizadas antes de los procesos realizados representaron un papel fundamental en la correcta elaboracin de los procesos experimentales referentes a la clula, sin embargo al momento de utilizar el microscopio fuimos conscientes de las limitaciones que ste representa frente a la completa determinacin de los

diferentes organelos, aquellos que desafortunadamente no lograron lucir como lo anteriormente investigado, sin embargo fue posible identificar las partes ms fundamentales de las clulas comprobando as que la importancia de la actividad de cada organelo es directamente proporcional al tamao del mismo. B. ANLISIS DE LA INFORMACIN Hoy en da al igual que desde el comienzo de los tiempos los seres pensantes se han preguntado acerca de la vida y el porqu de sta, por lo tanto al momento de descubrir la clula, o como le llaman algunos: el origen de todo ser vivo, se puede atribuir la gran importancia que merece. Con el transcurrir de los aos la informacin acerca de la clula ha ido avanzando gracias a las invenciones cientficas que cada vez hacen ms posible hallar el sentido de todo cuanto nos rodea, un ejemplo claro de ste es el hecho de poder identificar las partes fundamentales de la unidad estructural y funcional de los seres vivos (la clula), con ste innovador instrumento cientfico que es el microscopio manual, sin embargo la vida transcurre y con sta aumenta el inters por saber ms, debido a esto se ha creado la inconformidad con la no claridad de que al momento de querer identificar todos los diferentes organelos que conforman la clula no sea posible llegar a hacerlo, por lo tanto surge dentro de la curiosidad de quien aprende el hecho de tomar como nuevo instrumento de trabajo el nuevo microscopio electrnico, el ltimo a saber que ha logrado revolucionar con toda la historia de ste gran invento. Por otro lado la teora y la prctica se hayan encontradas en el momento en el que se comprueba la una en la otra identificando bsicamente la congruencia de la fisiologa y estructura de los dos tipos de clula, detalles claramente definidos y comprobados, en ste momento del proceso es interesante y gratificante ver como se puede entender el porqu de lo que aparece consignado en los libros y dejar a un lado la idea de que todo se hace por inercia, ya que todo tiene una razn de ser y esa es la causa del avance tanto del hombre individual y en sociedad, por lo tanto consideramos fundamental entender el hecho de empezar por el comienzo para poder dar un paso adelante. Que claro est es nuestra meta a seguir. Al momento de realizar un proceso es fundamental el hecho de manejar bien los instrumentos y pasos a seguir dentro del mismo, por lo tanto aprendimos a correlacionar con los medios de trabajo como lo fueron, en primer lugar: la instrumentacin brindada de parte del tutor (profesor Martn Barrera), el laboratorio del Colegio Colombo Britnico, al que tenemos acceso y las diferentes ayudas como los colorantes e instrumentos, confirmando una vez ms lo fundamental de la ciencia en nuestros das CONCLUSIONES 1. Despus de haber realizado de una manera ptima los procesos inicialmente planteados en la prctica de laboratorio, se puede llegar a determinar y comprender la importancia del avance de la ciencia en el campo de la citologa, ste convirtindose en un sinnimo del avance personal de quien quiere aprender y acomodarse a las etapas de crecimiento del mundo, por lo tanto en sta parte de finalizacin dejaremos claro el grande inters en comprender el porqu de las cosas, en ste caso la trascendencia del trabajo celular en la estructuracin de la vida misma. 2. Por otro lado llegamos al punto de establecer, claramente, la importante posicin que la previa preparacin de un proceso de ste tipo implica, por lo tanto la teora sigue y seguir representando un papel fundamental si se habla de una respuesta ptima que cumpla con todas las expectativas planteadas anteriormente, sin olvidar que las limitaciones del material deben ser superadas en algn momento por alguien que al igual que todos los descubridores se dejan llevar por la curiosidad de llegar a respuestas claramente establecidas pero sin desarrollar en el campo de la ciencia. 3. Dejando a un lado las conclusiones generales pasaremos a lo netamente relacionado con el tema de la Clula; es paradjico notar cmo es que las diferencias que nos separan de los vegetales estn claramente definidas, ya que desde la unidad ms pequea hasta el momento descubierta se marca claramente, desde su morfologa hasta su funcionamiento, las grandes distancias existentes

respecto al ser humano tanto como el animal, en ste caso enmarcados en un mismo grupo (clula animal). 4. Es impresionante cmo es que un sencillo aumento de un lente puede abrirnos las puertas a un mundo antes desconocido, gracias a esto es que surge una interrogacin muy objetiva respecto a lo que existe pero que an no ha sido descubierto, quiz ms adelante con las otras generaciones, la clula pasar a un segundo lugar en el que existir una unidad an no descubierta en la que se resuma el porqu de la existencia, de la vida; esa es la realidad del avance del conocimiento humano que ha estado presente desde el comienzo y no terminar mientras el ser humano contine en la bsqueda de respuestas cientficas a sus interrogantes. 5. Un ser vivo es un conjunto de tejidos, a la vez estos estn formados por un conjunto de rganos y estos por un conjunto de clulas. De lo anterior se infiere que la unidad ms pequea de un ser vivo es la clula. 6. Este trabajo de laboratorio fue enfocado especialmente a la observacin de clulas vegetales. 7. En este laboratorio se observ el tejido de cebolla, dentro de este tejido se encuentran un grupo de clulas con sus determinados elementos. Para apreciar estas clulas se utilizo una herramienta de suma importancia para nuestro objetivo El Microscopio, las observaciones con este instrumento arrojaron las formas hexagonales de las mltiples clulas constituidas en el trozo de tejido de cebolla. Los aumentos de los lentes utilizados fueron de 4X, 10X, 40X, observndose ntidamente las clulas, el aumento 100X tambin fue utilizado, pero sin un mayor provecho para nosotros, ya que con este lente no fue posible aumentar ms o ver ms ntidamente nuestro objetivo. 8. Cabe sealar que aunque pudimos ver las clulas del tejido de cebolla no pudimos observar sus distintos componentes, esto es porque el microscopio utilizado no es el ms potente. Con un microscopio de mayor definicin como es el microscopio electrnico se podran haber visto todos los elementos celulares, ya sea membrana, bacterias, hongos, etc. 9. Lo observado en laboratorio fue de clulas de forma ms bien rgidas, esto es por la pared celular de los vegetales, esta pared es ms gruesa que la de los animales, por esto es que las distintas clulas vegetales forman figuras ms bien geomtricas. 10. Al ponerles una tincin (azul de metileno) estas clulas se pudieron ver con mayor definicin, a la vez hubo mltiples reacciones donde esta tincin, ms especficamente con el azul de metilo, se observo que al parecer desintegraba la clula en sus distintos componentes, pudindose ver grupos de partculas que daban la impresin de ser fibras y otras agrupadas que se dedujo que podran ser distintos componentes de la clula. 11. Otro detalle importante observado es el de las vacuolas, estas se encuentran solamente en los vegetales y en gran tamao, estas son contenedoras de diversos elementos, como son, sales minerales, nutrientes, protenas, etc. BIBLIOGRAFIA TERESA AUDESIRK, Biologa, La vida en la tierra. Ed. Pearson, Mxico, 2003.

JARAMILLO MARIA ELENA Y OTROS, Ciencia experimental 6. Grupo editorial Educar, Bogot, 2005. Uribe Frank y otros, Manual de laboratorio de biologa general. UdeA, 2008 www.monografias,com trabajo/, protozoos.

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