Rspunsul imun reprezint un sistem de recunoatere a moleculelor strine fa de cele proprii.

Genetica rspunsului imun

Moleculele strine (proteine, glicoproteide, hidrai de carbon, monocatene de ADN, virusuri) ori pri din moleculele strine poart denumirea de antigeni. Ptrunderea antigenilor n circuitul sangvin declaneaz un rspuns imun prin recunoaterea specific a antigenilor strini i distrugerea lor.

Imunodeficiene
Tipul Originea Defecte genetice n maturizarea limfocitelor B Consecine Unele infecii piogene, infecii virale

De reaciile imune sunt responsabile: B limfocitele (din oase bone) T limfocitele (n timus) macrofagii Fiecare clas de limfocite utilizeaz rearanjri n moleculele de ADN pentru a asigura sinteza unei game largi de proteine implicate n rspunsul imun.
3

Deficiena limfocitelor B

Deficiena limfocitelor T

Defecte genetice n maturizarea limfocitelor T

Infecii virale, micotice, prtozoare, bacterii intracelulare SCID (Severe Combined Immune Deficiency) orice agent patogen

Deficiena combinat (B Mutaii n gene pentru i T) interleukine, deficiena ADA (adenozindezaminaza), absena moleculelor MHC

Deficiena macrofagilor

Mutaii recesive autosomale sau Xlinkate n subunitile genei pentru citocromul B Afectarea cilor de activare sau de reglare a complementului

Boala granulomatoas cronic (lipsa digestiei intracelulare)

Deficiena complementului

Susceptibilitate crescut la infeciile cu piogeni i bacterii intracelulare

Rspunsul imun
Umoral determinat de Blimfocite; mediat de secreia unor anticorpi = imunoglobuline.

Rspunsul umoral
producerea de Ac responsabil de recunoaterea Ag. Ag circulnd n curentul sangvin interacioneaz cu Ac dup principiul complementaritii configuraiei, formnd complexul Ac-Ag; complexele Ac-Ag sunt atrase de alte componente ale sistemului imun: Ac-Ag este recunoscut de complement - format din aproximativ 20 proteaze, care asigur distrugerea antigenului, sau Ac-Ag este recunoscut de macrofagi, care asigur distrugerea acestor complexe. pentru asigurarea rspunsului imun i secretarea Ac este necesar o interaciune ntre celulele B cu celulele T, numite celule T-Helper.
8

Celular determinat de T- limfocite; mediat de producerea TcR.

Rspunsul celular
este realizat de T-limfocite, numite T-celule citotoxice (killer). acest tip de rspuns imun are loc n cazul: infeciei virale sau bacteriene reacia tuberculinei respingerea grefelor. Ag virali sunt expui pe suprafaa celulei infectate prin intermediul unor proteine, numite MHC (major histocopatibility complex). complexele MHC-antigen strin sunt recunoscute de receptorii celulelor T-killer (TcR).

10

!!! att Ig, ct i TcR niciodat nu atac proteinele proprii, proces fiind numit toleran. Pierderea proprietii de toleran duce la dezvoltarea bolilor autoimune.

11

12

Principii generale ale RI

Dup ce un organism a fost expus unui anumit Ag el devine imun, adic rezistent la atacul repetat cu acelai antigen. n organism exist 106-108 de limfocite T i B imature, fiecare fiind capabil de a sintetiza un anumit tip de anticorpi sau TcR. La atacul antigenic Ac sau TcR ai unor clone celulare complementare moleculelor strine - interacioneaz cu ele: aceste clone celulare se divid rapid, producnd molecule de aprare (rspunsul imun primar); dup nlturarea antigenului, aceste celule se pstreaz, transformndu-se n celule cu memorie. La un nou atac cu acelai antigen aceste celule rapid trec n stare activ, provocnd rspunsul imun secundar.

13

14

Ac sau TcR interacioneaz doar cu o parte mic a antigenului (5-6 aminoacizi). Pot fi mai multe linii limfocitare contra unui antigen, dintre care una este mai efectiv.

Genele care codific pentru proteinele sistemului imun aparin unei superfamilii a genelor de imunitate: gene p/u Ig gene p/u TcR gene p/u complement gene MHC ... Acest set de gene s-a format prin duplicaii multiple a unei gene ancestrale.

15

16

Structura anticorpilor
n celule exist 106-108 tipuri Ac = Ig. Fiecare Ac reprezint o imunoglobulin constituit din: 2 catene polipeptidice identice uoare L light (60%) (40%) 2 catene identice grele H heavy. Fiecare polipeptid are: captul N variabil (V) captul C constant (C).

17

18

 Pentru fiecare tip de polipetid din anticorp exist numerose gene V i C, dispersate n cromozomii 2, 14 i 22. pentru sinteza unui polipeptid are loc conexiunea fizic a fragmentelor de ADN ce codific anumite regiuni V i C prin intermediul recombinrii somatice, care are loc ntre cromatidele surori. aranjarea genelor V i C este diferit la diferite clone celulare limfocitare i difer de cea a celulelor STEM sau a altor celule somatice.

Numrul i localizarea genelor pentru imunoglobuline

Familia (Kappa) Crs. 2p12 % 60 40 100 V 300 300 300 J 5 6 6 D 0 0 20 C 1 6 9

(Lambda) 22q11 H (Heavy) 14q32

19

20

Genele pentru imunoglobuline conin:

multe gene pentru regiunea variabil (V), secvene de jonciune (J), secvene de divesificare (D) gene pentru regiunea constant (C).

Recombinarea somatic a genelor pentru Ig

Genele Una dintre cele 300 gene V (format din Exon 1 regiunea lider, intron, exon 2) se va uni cu una din cele 6 gene C prin intermediul regiunii J, situate n faa fiecrei gene C. Dup transcripie, n procesul de maturizare a ARN are loc eliminarea intronilor. n procesul de maturizare a proteinei are loc eliminarea regiunii lider.

!!! Pentru realizarea transcripiei este necesar asocierea fizic a genelor V i C ntr-o unitate transcripional.
21

22

L V

L V

125

L V

299

L V

300

L V

Recombinare
1 2 125 2 6

Recombinarea somatic a genelor pentru Ig

Genele Una dintre cele 300 gene V se va uni cu una din cele 5 regiuni J, urmat de unica gen C. Dup transcripie, n procesul de maturizare a ARN toate regiunile J situate dup cea care a realizat jonciunea sunt considerate intron i sunt eliminate. n procesul de maturizare a proteinei are loc eliminarea regiunii lider.

L V

L V

L VJ

Transcripie
125 5

L VJ

C
3

Maturizare ARN
5 AAAAAAA

Translaie Maturizare protein

IgL Lambda

23

24

L V

L V

L V

99

299

L V

300

L V

1 2 3 4 5 6 J J J J J J

Recombinare
1 2

L V

L V

99 2 3 4 5 6 L VJ J J J J

Recombinarea somatic a genelor pentru Ig

Genele H - recombinarea are loc n 2 etape: n prima etap una din cele 20 regiuni D se unete la una dintre cele 6 regiuni J, urmat de blocul de gene C. n a doua etap una dintre cele 300 gene V se va uni la jonciunea D-J.

Transcripie
5 99 2 3 4 5 6 L VJ J J J J

Maturizare ARN
2J
5 AAAAAAA

Translaie Maturizare protein

IgL Kappa

25

26

300

L V

L V

L V

1 2 3 DDD

20 D

1 2 3 4 5 6 J J J J J J

Recombinare 1
L V
1

L V

300

L V

1 2 35 6 D D DJ J

L V

L V

Recombinare 2
C C

Transcripie
C
5

C
3

Anticorpii funcioneaz n diferite medii i asigur rspunsuri n diferite condiii. Tipul de anticorp este determinat de varianta de gen C din catena H. Exist 5 tipuri de gene CH, i deci 5 clase de anticorpi.

Maturizare ARN
5 AAAAAAA

Translaie Maturizare protein

IgH

27

28

Clasele principale de imunoglobuline

Tip Catena H % IgM 5%
Activeaz complementul

IgD 1%

IgG 80%

IgA 14%

IgE <1%
Rspunsul alergic

Funcia

Tolerana Activeaz (n complemen n secreii membrane) tul

Genele CH se unesc pe rnd la jonciunea VDJ n ordinea localizrii lor pe cromozom. Unirea se realizeaz prin zona S situat n faa genelor C. De obicei primul tip de Ig este IgM, deoarece gena C este localizat prima n irul de gene C. Formarea noilor tipuri de Ig este determinat de deleia acelor gene C, care se gsesc n faa genei necesare.

29

30

Mecanismele de asigurare a diversitii anticorpilor

Existena mai multor gene codificatoare Recombinarea somatic Splicing-ul alternativ Alelismul multiplu Excluderea alelic Erori n recombinare Mutaii somatice
31

Recombinarea somatic
n toate sistemele genele V sunt precedate, iar J anticipate de secvene consens. Recombinarea ntre comatidele surori este asigurat de recunoaterea complementar a acestor secvene consens. Mecanismul de recombinare este determinat de clivare situs-specific, urmat de reunire, dar este diferit de cel al crossing-overului.

32

Excluderea alelic
Fiecare tip de limfocite produce un anumit tip de anticorpi. Cromozomii omologi conin variante alelice diferite. De aceea, de regul, recombinarea somatic are loc doar ntre cromatidele unui cromozom, motenit de la un printe, cellalt cromozom rmnnd ca i n celulele STEM. Ca rezultat se formeaz doar o singur unitate transcripional funcional, astfel asigurndu-se excluderea alelic. n cazul dac n ambii cromozomi are loc recombinarea, doar unul dintre ei este utilizat pentru transcripie, cealalt unitate transcripional fiind neproductiv.

Dereglri n recombinare
n pofida existenei heptamerilor i nonamerilor n cazul recombinrii somatice, reunirea VJ nu este ntotdeauna exact. Impreciziile se refer la decalri de 3 nucleotide, astfel dou regiuni V i J pot s recombine n mod diferit, producnd o diversitate mai larg de combinaii posibile n unitile transcripionale.

33

34

Mutaii somatice
Genele V pentru imunoglobuline prezint situsuri hipervariabile, inte pentru mutaiile somatice. Astfel se asigur o varietate i mai mare de uniti transcripionale

MHC (Major Histocompatibility Complex)

Sistem multigenic i polimorf Situat pe cromozomul 6p Important n activarea i reglarea rspunsului imun celular Implicat n rejetul grefelor Const din 3 clase de gene

35

36

 Clasa I Gene HLA A, B, C ce codific Ag pe membrana tuturor celulelor nucleate Clasa II Ag de suprafa celular HLA D pe macrofage, limfocite B, T-activate i uneori pe alte celule Clasa III Proteine serice, receptori membranari implicai n reaciile imune (factorul Bf, C2, C4) Proteine cu funcii heterogene (HSP, TNF,, 21hidroxilaza implicat n hiperplazia suprarenalelor, HFE hemocromatoza ereditar

Asocierea HLA (Human Leukocyte Antigen) cu diverse afeciuni

Boala Hiperplazia suprarenalelor Spondilita anchilozant Diabet zaharat Hemocromatoza ereditar Alele HLA Bw47 B27 DR3/DR4 DQ8 A3/B14 Risc 80-100% 90% 20% 14% 90%
38

37

Interferonul
Grup de proteine cu M=15-30 kDa extrem de variabile Sinteza indus de ageni strini Au activitate antiviral nescepecific, determinnd inhibarea sintezei proteinelor virale (nu afecteaz translaia ARNm propriu) Activeaz macrofagele, inhib proliferarea celulelor canceroase

Interferon Induce o proteinkinaz activarea unei endonucleaze degradarea ARNm viral

39

40

Clase de IFN
IFN
Produs de macrofage Activitate antiviral

Tolerana imunologic
IFN

IFN
Produs de macrofage Antibacterian, antiviral, antineoplazic

Produs de limfocitele Antibacterian, antiviral, antineoplazic

Tip de rspuns imun n care lipsete reactivitatea specific a clonelor celulare imune fa de un anumit Ag, care n alte condiii ar dezvolta un rspuns imun normal Poate aprea datorit contactului cu un Ag n stadiul fetal sau la adult
41 42

Imunodeficiene
Lipsa sau funcionarea anormal a componentelor sistemului imun Poate fi primar sau secundar Cea primar poate fi ereditar sau dobndit Poate fi:
Deficiena limfocitelor B Deficiena limfocitelor T
43

Imunodeficiena
Poate fi:
Deficiena limfocitelor B Deficiena limfocitelor T Deficiena combinat (B i T) Deficiena macrofagelor sau a procesului de fagocitoz Deficiena complementului

44

Imunodeficiena
Determin o susceptibilitate crescut fa de anumii ageni patogeni Apariia infeciilor severe Apariia tumorilor Declanarea proceselor autoimune

Bolile autoimune
Lipsa toleranei ctre antigenii proprii Producerea autoanticorpilor Declanarea unor reacii autoimune Ex., bullous pemphigoid, miastenia Grave, unele forme de diabet melitus, lupus erythematosis sistemic, anemia hemolitic autoimun, glomerulonefrita, purpura trombocitopenic autoimun.
46

45