ESCUELA POLITCNICA DEL EJRCITO DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA PROYECTOS INVESTIGACIN Y DESARROLLO

Integrantes: Cevallos Ma. Fernanda Garzn Marilyn Gonzlez Ana Villagmez Ma. Beatriz Curso: Octavo B

Evaluacin de la calidad nutricional del ensilaje de alfalfa (Medicago sativa) a partir de bacterias acido lcticas Uno de los factores que ms afecta a los pequeos ganaderos en el Ecuador, es la limitada disponibilidad de forrajes de buena calidad nutritiva durante la poca seca. Los forrajes constituyen la fuente ms econmica de nutrientes para el ganado y su disponibilidad se caracteriza por pocas de abundancia que coinciden con las lluvias; y de escasez, que coinciden con la sequa, aspecto que conduce al sobrepastoreo, a la disminucin de la produccin de leche, a la prdida de peso de los animales, al retraso en el crecimiento, al incremento de los costos de produccin y a un menor ingreso percibido. OBJETIVOS: GENERAL Establecer la calidad nutricional del ensilaje de alfalfa (Medicago sativa) utilizando bacterias acido lcticas.

ESPECFICOS Aislar y seleccionar las bacterias acido lcticas eficientes para la produccin de de ensilaje de alfalfa (Medicago sativa) para animales de granja. Establecer medios de cultivo y conservacin de bacterias acido lcticas ptimos para la elaboracin de ensilaje de la alfalfa (Medicago sativa). Evaluar la eficiencia de las bacterias acido lcticas utilizadas para la elaboracin de ensilaje de la alfalfa (Medicago sativa).

PREGUNTAS: Qu tipo de bacterias acido lcticas mejoraran la calidad nutricional del ensilaje? Existe un medio ptimo de cultivo y conservacin de bacterias acido lcticas? Qu variables influyen en la calidad del ensilaje?

JUSTIFICACIN En el Ecuador se genera una gran variedad de forrajes que pueden ser utilizados para la elaboracin de ensilaje mediante el uso de bacterias acido lcticas y transformados en alimento de mejor calidad con alto valor nutritivo para especies bovinas. El ensilaje, adems, permite almacenar grandes volmenes de alimento para pocas de escasez o incrementar el nmero de animales por hectrea. La fermentacin lctica que realizan las bacterias acido lcticas da un valor agregado a los productos vegetales porque mejora su contenido nutricional, digestibilidad y palatabilidad. Tambin permite manejar los pastizales como un cultivo de corte y no exclusivamente como zona de pastoreo, lo cual mejora la rentabilidad y eficiencia de las explotaciones ganaderas. Adems se produce un alimento natural, ecolgico y ms econmico que los concentrados, cuyas materias primas son en su mayora importadas, lo que hara del silo una alternativa para el ganadero.

VIABILIDAD La Alfalfa (Medicago sativa) es una gran alternativa para generar ensilaje porque puede ser cosechada con facilidad en el Ecuador, debido a que hay buenas condiciones climticas y los suelos poseen caractersticas adecuadas para el desarrollo de dicha planta. Los procesos de ensilaje en si no son muy costosos, sin embargo hasta conocer la bacteria cido lctica ideal y las condiciones adecuadas para mantener el producto ensilado, se deben realizar pruebas que optimice el proceso lo cual implica un gasto considerable, pero una vez estandarizado el mtodo los egresos se ven reducidos. Los recursos financieros se obtendrn gracias a la Escuela Politcnica del Ejrcito, ya que este es un proyecto de innovacin e investigacin de la industria ganadera del Ecuador, el proyecto ser aprobado por las autoridades respectivas de la ESPE y se realizar un convenio para respetar el derecho a la propiedad intelectual y se otorgar ciertos derechos a la ESPE sobre el proyecto por el aporte financiero brindado, con el mutuo acuerdo entre los estudiantes y la universidad. El desarrollo experimental ser realizado en los laboratorios del IASA y biotecnologa, dentro de los recursos humanos se cuenta con los estudiantes de sptimo nivel de la carrera de Ingeniera en biotecnologa e ingeniera agropecuaria, con la asesora de ingenieros del IASA y biotecnologa competentes en el rea vegetal (Mster Jadn), microbiolgica (Dra. Alma Koch) y animal (Dr. Juan Geacometti), adems se tendr el apoyo de estudiantes de biotecnologa de niveles superiores que se encuentren vinculados al rea vegetal y microbiolgica. MARCO TERICO La limitada disponibilidad de forrajes de buena calidad nutritiva durante la poca seca es una gran limitante para el ganadero ecuatoriano. Los forrajes constituyen la fuente ms econmica de nutrientes para el ganado y su disponibilidad y calidad afecta en la produccin de leche, a la prdida de peso de los animales, al retraso en el crecimiento, al incremento de los costos de produccin y a un menor ingreso percibido. Para superar estas limitantes, se requieren estrategias de conservacin de forrajes que conduzcan a la disponibilidad de forraje de buena calidad en forma permanente y a bajo costo durante la poca crtica del verano. Existen forrajes adaptados a las diferentes zonas agroecolgicas, aspectos que de alguna manera conoce el ganadero, pero con

serias deficiencias en su aprovechamiento y en especial, de improvisaciones para las contingencias resultantes de la escasez. (Giraldo, 2004) La prctica del ensilado se inicio hace aproximadamente 3000 aos. En las ruinas de Catargo se descubrieron indicios del ensilaje alrededor de 1200 a.c. Sin embargo la primera referencia sobre la conservacin del follaje verde se data en 1786, cuando en Italia se observ la preservacin de hojas verdes en toneles de madera. En 1852 se descubri en Londres el proceso de gramneas y leguminosas en fosas tal como se conoce hoy en da. En 1873 se introdujo su prctica en los Estados Unidos, en donde se generaliz rpidamente como ensilaje de maz, en la dcada de 1920, con el uso de ensilaje en gramneas y leguminosas. Los primeros productos que se conservaron en silos fueron granos. Posteriormente su uso se extendi a races, tubrculos y hierbas frescas y finalmente a las leguminosas. El objetivo final que se busca con el proceso del ensilaje es el de preservar en lo posible, todos o la mayora de los nutrimentos originales de los follajes verdes, especialmente los componentes energticos y proteicos, mediante la aplicacin de un mtodo de conservacin, basado en el proceso de fermentacin anaerbica en el cual el ensilado experimenta una serie de cambios bioqumicos que lo mantienen estable por largos perodos. (Lara, 2011) Segn Stefanie (1999), el ensilaje es un mtodo de conservacin de forrajes con alto contenido de humedad, que se fundamenta en la fermentacin cido lctica espontnea del forraje bajo condiciones anaerbicas. Las bacterias cido lcticas (BAL), propias del material a ensilar, fermentan los carbohidratos solubles del forraje, produciendo principalmente cido lctico y, en menor grado, cido actico. El xito del proceso fermentativo que ocurre en los ensilajes depende, principalmente, de una cantidad suficiente de BAL y de una concentracin adecuada de carbohidratos solubles en el forraje que genera el cido lctico. De esta manera, el pH se mantiene bajo y el ensilaje se preserva mejor (Jaster 1995).El ensilaje como mtodo de conservacin de excedentes forrajeros y aprovechamiento de algunos recursos no utilizados tiene un amplio porvenir en la actualidad para la alimentacin del ganado vacuno lechero, y de forma general para el resto de la ganadera. Si bien la prctica de ensilar alimentos en la actualidad no est muy bien difundida, ni tan arraigada, es innegable su uso prctico, y en especial en estos momentos cuando el uso eficiente y diversificado de los recursos es una cuestin necesaria e indispensable en toda empresa para la buena salud de su economa (Jaster 1995). El proceso de ensilado se registra en diversas especies como por ejemplo maz, trigo (Rojas, 2000), cebada (Rojas, 1997), pulpa de caf (Ramn, 1995), entre otros; los resultados indican que el proceso de ensilaje permite una mayor preservacin del alimento as como tambin la conservacin de las propiedades nutricionales del mismos, con lo cual se puede hacer una proyeccin para el empleo de este proceso en la conservacin y el mantenimiento de alfalfa en el Ecuador. El cultivo de alfalfa se ha extendido ampliamente en el Ecuador dado su valor nutricional para alimento de ganado vacuno, criadero de cobayos, conejos, etc., se extienden en los valles interandinos a alturas entre 1500 y 2400 m; a pesar de que el proceso de henificacin es el que prevalece para el mantenimiento de alfalfa, sin embargo en un ambiente de alta humedad y

mayor probabilidad de lluvias el ensilaje se muestra como la puerta de salida para la conservacin de alfalfa (Romero, 2004). En el ensilaje permite la fermentacin de los carbohidratos solubles del forraje que permiten la conservacin del alimento con la inhibicin del crecimiento de los microorganismos y conservando el material nutritivo. La materia orgnica ptima que se ha venido utilizando en proceso de ensilaje ha sido el maz, que por medio de bacterias cido lcticas se puede transformar y almacenar manteniendo las condiciones nutritivas para su posterior consumo. El producto que permite la transformacin y conservacin del silo es el cido lctico producto del metabolismo bacteriano, a temperaturas de 250 a 400 C. Ventajas A consecuencia de los numerosos cambios que se dan durante el proceso de ensilaje, se obtiene un producto suculento y cido, que los animales consumen con gran avidez. El valor nutritivo no se pierde mientras no se destape el silo y el contar con material ensilado permite establecer estrategias de alimentacin para las pocas de escasez de forrajes. En el caso de leguminosas como la alfalfa, el proceso de ensilaje evita la prdida de hojas, comparado con el henificado (Sagarpa, 2003). Desventajas Si no se tiene cuidado con el manejo de las condiciones que favorecen la accin de las bacterias acidolcticas, respecto al mantenimiento de anaerobiosis, temperatura menor a los 30 C y disponibilidad de carbohidratos, las prdidas del alimento pueden ser cuantiosas o su valor nutrimental bajo. Normalmente, el ensilado no debe exceder el 50 % de la dieta; vacas en etapas finales de lactacin, vacas secas y vaquillas pueden engordar demasiado si se alimentan, lo que puede conducir a cetosis o reducir la produccin de leche en el siguiente ciclo de lactacin (Sagarpa, 2003). A pesar de que el proceso de ensilaje se produce naturalmente en condiciones anaerbicas gracias a la poblacin natural de bacterias en la propia planta, se han identificado inoculantes microbiales que exhiben ventajas en la conservacin de alimentos como es el caso de Lactobacillus buchneri, la cual se ubica como la principal bacteria heterofermentativa utilizada en ensilaje (Contreras, 2008). HIPTESIS DE INVESTIGACIN Hiptesis de investigacin (H1) Las bacterias cido lcticas permiten una ptima conservacin de los excedentes en la cosecha de alfalfa (Medicago sativa) y la oportunidad de que pueda ser utilizado como reserva alimentaria en poca de escasez. Hiptesis nula (H0) Las bacterias cido lcticas no permiten una ptima conservacin de los excedentes en la cosecha de alfalfa (Medicago sativa) y la oportunidad de que pueda ser utilizado como reserva alimentaria en poca de escasez.

Diseo experimental Recoleccin de la muestra Tabla 1: Diseo experimental para obtener consorcios bacterianos aptos para el ensilaje. BLOQUE AREA 1 AREA 2 (A) (B) 1 1 2 2 3 4 3 4

BOSQUE PRIMARIO

AREA 3 AREA 4 (C) (D) 1 1 2 2 3 4 3 4

En la tabla 1 se observa cmo se realizar el anlisis de los bosques primarios para obtener consorcios bacterianos para el proceso de ensilaje. Se escoger un bosque primario del cual se tomaran cuatro reas de las mismas dimensiones y a su vez se tomarn cuatro muestras de cada rea, es necesario tomar en cuenta la ubicacin exacta donde se tomar la muestra en caso de ser necesario un anlisis posterior. No se har muestra compuesta, se evaluar cada porcin tomada de cada rea y de cada bosque para obtener mayor variedad de consorcios bacterianos. Para realizar el proceso de seleccin del mejor consorcio bacteriano se realizar los siguientes tratamientos, tabla 2: Tabla 2. Tratamientos para la seleccin del mejor consorcio bacteriano para el proceso de ensilado de alfalfa. Temperatura 15C AREA 1 A Humedad 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65

20C

25C

15C AREA 2 B

20C 25C

15C AREA 3 C

20C

25C

15C AREA 4 C

20C

25C

65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70 50-60 60-65 65-70

Los parmetros que se tomarn en cuenta para la seleccin del mejor consorcio bacteriano que servir para el proceso de ensilado de alfalfa sern: pH antes y despus del proceso de ensilado. Calidad Nutricional o Protenas totales o Fibra o Carbohidratos solubles totales, etc Materia Seca Tiempo de ensilado Energa metabolizable

La prueba de Duncan ser utilizada para establecer cul es el mejor tratamiento entre los que se sealan en la tabla 2, con un = 0,05.

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