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Bioqumica
Tcnicas de Pipetagem
Professor: Jefferson Rodrigues Data do Experimento: 02/04/2014 Nome: Bianca Aparecida Amaral Nmero: 6 Data de Entrega: 10/04/2014 Turma: 2AC
Resumo Foi realizado o manuseio de mecanismos em pipetagem, onde o processo feito com base em diversos mtodos, respeitando as tcnicas exigidas, desde a preparao do material a ser pipetado at o desprezo da amostra ou reagente, sendo assim obtm-se bons resultados em relao pipetagem e ao teste. Quando a pipeta for manuseada, jamais deve-se coloc-la na bancada ou segur-la de maneira incorreta, pois assim a pipeta pode se contaminar e consequentemente contaminar o reagente, interferindo no resultado.
Introduo O mtodo de pipetagem considerado o meio mais eficaz para a transferncia de reagentes e/ou amostras. Em corantes e reagente mais comum a observao de meniscos superiores. A utilizao da pipeta eficiente uma vez que possui pluralidade em volumes o que permite a transferncia de valores exatos e precisos para realizao de testes e exames que exigem quantidades precisas. Quando a pipeta for manuseada, jamais deve-se coloc-la na bancada ou segur-la de maneira incorreta, pois assim a pipeta pode se contaminar e consequentemente contaminar o reagente, interferindo no resultado. Deve-se observar tambm a subdiviso das pipetas, pois cada exame exige uma escala diferente, sendo assim a seleo errnea das pipetas em relao a escala e ao volume interfere no resultado. Geralmente em laboratrios so utilizadas com mais frequncia valores de nmeros inteiros, sendo assim usa-se as pipetas graduadas que permitem mais facilidade de manuseio, isso se deve pois, com uma mesma pipeta possvel realizar mais de um exame.
Objetivo Utilizar pipetas graduadas e automticas a fim de adquirir experincia, para que dentre as vrias formas de manuseio, a operao da mesma resulte em exatido.
Procedimento Experimental
Materiais utilizados: Pipetas automticas Pipetas Graduadas Ponteiras (azul, branca e amarela) Papel absorvente Balo de fundo chato Bquer Reagentes Pera
Procedimento: Primeiramente foi observado se o lquido era transparente ou opaco que logo foi apresentado lquidos de colorao roxa e rosa, porm permaneciam translcidos, dando origem a meniscos inferiores. Logo aps adicionou-se pera uma pipeta graduada e foi utilizada a pipeta automtica, ambas aleatoriamente para que estes mesmos lquidos fossem pipetados. Houve a verificao do volume das pipetas graduadas e tambm foi possvel observar que para cada determinado volume na pipeta automtica existe uma ponteira especfica, onde a ponteira amarela ou branca usada para medies de volumes entre 1 e 200m, a ponteira branca maior utilizada em medies de 200 a 250m e azul para medies acima de 250m.
Ento, para que a ponteira seja fixada, deve-se coloca-la na ponta da pipeta e torcer, o encaixe das ponteiras so devidamente corretas s pipetas, no momento do encaixe a pipeta foi segurada na parte superior e as letras voltadas para frente. Aps a preparao das pipetas, foi pipetado altura dos olhos os reagentes preparados, o lquido foi aspirados at posicionar o menisco na altura dos olhos e ento o mbulo foi soltado lentamente at o 1 estgio e em seguida o 2 estgio. Logo, foi observado pelo T1 a semelhana e/ou diferena entre duas pipetas graduadas de volumes diferentes.
Resultado e discusso Foi possvel observar que, as pipetas analisadas pelo T1, apesar de transparecerem idnticas ou com caractersticas semelhantes, possuam diferenas. Foi observado que a pipeta marrom possua volume de 0,2L e uma subdiviso de 1/10001L, enquanto a amarela continha volume de 1mL e subdiviso de 1/100- 0,01L. Outra observao realizada , foi que a pipetagem exige tcnica, objetividade e pacincia. A pipetagem dos reagentes foi realizada com xito deixando alguns pontos a desejar, como por exemplo levar altura dos olhos, que aps ser corrigido pelo professor, o erro no foi cometido novamente.
Concluso Aps a realizao de todos os procedimentos exigidos nesta tcnica, pode-se concluir que, a pipetagem de reagente e/ou solues extremamente importante e eficiente , tanto para a exatido de vrios exames, quanto para a excelncia de resultados que utilizam reagentes de volumes exatos. A tcnica de pipetagem primordial em testes bioqumicos, pois permitem a anlise de amostras especficas que necessitam de valores precisos.