Microbiologa General 2012

INTRODUCCION
De manera general se denomina medio de cultivo a cualquier material que presente una adecuada combinacin de nutrientes para permitir el crecimiento o el incremento del nmero de clulas de una poblacin microbiana. En los Laboratorios de Microbiologa se utiliza una gran variedad de medios de cultivos para mantener las cepas, aislar o identificar microorganismos con varias finalidades: determinar la existencia de contaminacin de alimentos, medicamentos o cosmticos; diagnosticar alguna enfermedad, elaboracin de vacunas bacterianas, etc. Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de cultivo provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles. Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que, adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales, tienen capacidad de atacar los aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona. El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio. Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a muchos medios sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica. Objetivo: El alumno debe ser competente en explicar los requerimientos nutritivos de los microorganismos, preparar los medios de cultivo slidos y lquidos y demostrar la importancia de esterilizar los medios de cultivo.
Ing:Vilma Reyes De la Cruz

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REVISION BIBLIOGRAFICA
La rama de la microbiologa que estudia los hongos (reino Fungi) se conoce como la micologa. Los hongos se clasifican en 4 grupos principales a base de su modo de reproduccin sexual (MartinF y Robert F-1997):

El filo Chytridiomycota,

conocido

comnmente

como

Qutridos

Quitridiomicetes, incluye unas 800 especies que son encontradas en ambientes hmedos o acuticos (dulces o salados). Son los hongos ms sencillos y ms simples. Algunos son unicelulares y otros poseen micelios formados por cadenas ramificadas de clulas. Los qutridos forman unas estructuras llamadas esporangios que contienen esporas provistas de un flagelo. Son saprofitos, si obtienen nutrientes a partir de materia orgnica muerta, o parsitos de plantas, animales, algas y otros hongos. Algunos no necesitan oxgeno para vivir y solo se desarrollan en el estmago de herbvoros, donde digieren la celulosa y otros compuestos. En ocasiones fueron clasificados dentro del reino Protoctistas porque tienen esporas mviles; sin embargo, actualmente se clasifican dentro del reino Hongos porque su pared celular est formada principalmente por quitina.(MartinF y Robert F-1997):

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El filo Zygomycota, conocido con el nombre comn de Zigomicetos, incluye unas 900 especies, la mayora de las cuales poseen hifas cenocticas (hifas sin tabiques transversales). En este grupo se encuentran varios hongos descomponedores, los hongos formadores de micorrizas y los parsitos de araas e insectos. Uno de los zigomicetos ms conocidos es el moho negro del pan (Rhizopusnigricans), que produce masas de hifas sobre el pan, la fruta y otros alimentos. El hongo forma una especie de filamentos enmaraados en los que se observan pequeos puntos negros que son esporangios creciendo al final de hifas especializadas. Los esporangios producen esporas asexuales, que no son mviles y que reciben el nombre de esporangiosporas. Los zigomicetos se reproducen sexualmente mediante la formacin de zigosporas con paredes gruesas. ( Ainsworth, G. C. y Sneath, P. H.A. 1992)

Phycomycetes: mohos (molds) del agua, del pan y trerrestres. Las esporas reproductivas son externas y descubiertas. .( Lexus 1998) Ascomycetes: levaduras (yeast) y mohos. Poseen esporas sexuales llamadas ascosporas. Estas se producen en sacos llamados ascos. .( Lexus 1998)

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Basidiomycetes: setas. Forman esporas reproductivas conocidas como basidio esporas en estructuras llamadas basidios. .( Lexus 1998)

Deuteromycetes: Tambin llamados hongos imperfectos porque no tienen fase reproductiva sexual. .( Lexus- 1998).

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CUADRO 1.Caracteristicas de los principales grupos de microorganismos: ALGAS VERDES PROTOZOOS HONGOS Y LEVADURAS Requieren luz solar; crecen en medios sin vida Se multiplica por fisin y sexualmente Crecen en la obscuridad en medios sin vida Se multiplica por fisin binaria y medios sexuales Mucho mayores que las bacterias; Mucho mayores que las bacterias volumen generalmente centenares o miles de veces mayor Crecen en la obscuridad en medios sin vida Se multiplica por yemas, a condicione sexuales Volumen mucho mayor que las bacterias filamentos y otras estructuras frecuentemente macroscpicas No atraviesan los filtros No atraviesan los filtros No atraviesan los filtros Generalmente no pueden atravesar los filtros Estructura celular similar a la de plantas mayores Estructura celulares Estructura celular, internas bien desarrolladas; ncleo, vacuolas, abertura bucaletc. No pueden ingerir Pueden ingerir No pueden ingerir No pueden ingerir especialmente ncleo, visible con microscopio ordinario No tiene rganos definidos en la clula visibles con microscopios ordinarios. Formas redondas no mayores de unos 5 micrmetros, de ordinario no mayores de 2 a 3 um. BACTERIAS (ESQUIZOMICETOS) Crecen en la oscuridad en medios sin vida Se multiplican por fisin binaria

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sustancias solidas partculas slidas (excepto unas pocas formas parasitarias ) Celular Celular Celular Celular sustancias solidas sustancias solidas

(Stanier R y Apoyantes-1970)

Los hongos son organismos heterotrficos, eucariotas capaces de metabolizar gran variedad de sustratos orgnicos. Los hongos pueden ser de gran beneficio as como tambin perjudiciales al ser humano. Aquellos que habitan en el suelo ayudan a descomponer plantas y animales muertos, manteniendo frtil el terreno. Los hongos que llevan a cabo fermentacin son de gran importancia industrial. La industria de la cerveza, el vino, los quesos, los antibiticos, las enzimas, la repostera, dependen de los hongos. Algunas actividades detrimentillos de los hongos son por ejemplo: el moho que le da a las frutas , vegetales y granos, el dao a los alimentos en general. Algunas especies son capaces de producir drogas como toxinas y alucingenos. Algunas especies pueden causar enfermedades al hombre.(Ainsworth G y Seneat P-1992).

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MATERIALES Y METODOS Materiales:

AZUL DE METILENO

ALGODON

MICROSCOPIO

PORTA Y CUBREOBJETOS

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ASA DE KOLLE

MECHERO

MUESTRAS INFECTADAS

PLACAS CON AGAR SABOUROAD

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MTODOS:

AISLAMIENTO DE HONGOS DEL MEDIO AMBIENTE

Fijamos un lugar determinado del ambiente que queramos analizar.

Colocamos en un lugar fijo la placa petri con el Agar Sabouraud al descubierto de 5 10 min.

Anotamos el tiempo de exposicin. El lugar la fecha y el nmero de grupo.

Incubamos de 25 30 C durante 4 a 5 das.

Observamos el nmero de colonias.

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CULTIVO EN CAMARA HUMEDA

Cortamos el agar, en condiciones estriles; pequeos trozos (rectngulos 1x0.5cm)

Colocamos una porcin rectangular sobre la lmina portaobjeto

Depositamos con el asa de Kolle las esporas del hongo a estudiar

Colocamos el conjunto dentro de una placa petri agregando gotas de agua destilada.

Envolvimos la placa petri con papel craft y llevamos dejamos por una semana

Observamos la muestra al microscopio

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RESULTADOSY DISCUSION Resultados:
Muestra en fresco Morfologa (grfica) Descripcin El hongo del pan recibe el nombre de mucus. Es un hongos filamentoso, se reproduce de forma asexual, por esporas que al caer en el sustrato adecuado dan origen a nuevas hifas, en este tipo de reproduccin el ncleo de la clula madre se divide en varios ncleos, cada uno toma una parte del citoplasma de la clula madre que luego se rodea de una membrana celular, la clula madre se rompe y se liberan varias clulas hijas.

Pan

Pimentn

Los hongos pluricelulares forman una serie de filamentos denominados hifas; el conjunto de hifas forman un micelio.

naranja

Presenta esporas con esporangio esporas.

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Micro Cultivo

Morfologa (grfica)

Descripcin

Tomate

Cabeza con esporangio esporas

Pimentn

Presenta hifas septadas

naranja

Presenta hifas no septadas

Pan

Este hongo pertenece al gnero Rizo pus Nigricans

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Ambiente

N hongos

Gnero

Grafico

Almacn de materiales de construccin

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ActinomycesIsraelli

Saln de clases

1 1 1 1

Fusarioroseu Fusario x seti Penicillium Rodotorula

Cafetn cerca del bao de SSHH

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Levadura

Calle

5 Desconocido

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Discusin:
Segn: Martnez Gonzlez, E.; Barrios Sanrom G.; Rovesti L. y Santos Palma R., dice: El MOHO del pan se llama RHIZOPUS nigricans y son hongos, generalmente saprfitos, pertenecientes a la Familia de los FICOMICETES. Presentan el aspecto de una suave pelusa griscea o verdosa que se desarrolla en la superficie de la materia orgnica en descomposicin sobre la que viven. Vistos al microscopio presentan un MICELIO formado por abundante cantidad de hifas blanquecinas y sin tabiques. En el extremo de algunas hifas se desarrollan los Esporangios de forma y nmero variado segn las especies. Las Esporas contenidas en los esporangios son generalmente negras o verdosas. Cuando quedan libres dan origen a la formacin de nuevos Micelios. Presentan un Micelio formado por abundante cantidad de HIFAS blanquecinas y sin tabiques, que son largas clulas en forma de tubos llenos de Protoplasma con abundantes Ncleos. Algunas Hifas se introducen en la sustancia sobre la que se desarrolla el moho (pan) y son las encargadas de nutrirlo y su extremidad se hace Globulosa para adaptarse a la reproduccin. En el extremo de algunas Hifas se desarrollan los Esporangios, que tienen forma de Cabecitas, dentro del cual se encuentran las Esporas, que al salir son diseminadas por el viento, generalmente BLANCAS. En la reproduccin, los Esporangios se separan del resto de la Hifa por un Tabique (ASEXUAL). En la SEXUAL se observa que las Hifas emiten un Brote y al tocarse los brotes, se reabsorbe la membrana de sus extremidades y se mezclan con sus contenidos formando un Cigoto, llamado Cigospora, que es llevada por el viento y cuando germina da una Hifa. Se los encuentra en el suelo, degradando frutos y vegetales, heces animales y residuos.

El hongo del pimentn, en forma de esporas de pared espesa llamadas esporas, puede sobrevivir en el suelo en condiciones adversas por un largo tiempo. Durante su ciclo vegetativo, el hongo tambin produce otro tipo de esporas (zoosporas).

As, en la masa blanca del micelio del hongo, se forman estructuras microscpicas con forma de limn llamadas esporangios, que son fcilmente dispersadas por las

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salpicaduras del agua de lluvia o riego y en menor medida tambin por el viento. Visto en el microscopio se determina que es un Hongo Phytophthoracapsiciobservado. En presencia de agua libre, de los esporangios se liberan muchas zoosporas, que son mviles y originan la infeccin enviando un tubo germinativo que penetra en la planta a travs de la cutcula. Este patgeno se localiza naturalmente en muchos suelos y puede infectar los cultivos en diferentes etapas, pero siempre que se presenten las condiciones adecuadas como la excesiva humedad del suelo y el clima clido hmedo. La infeccin tambin puede originarse por la semilla, debido a la capacidad del patgeno de sobrevivir en la misma. En el campo, casi siempre la enfermedad empieza por las reas ms bajas y despus de fuertes lluvias. Las condiciones favorables para su desarrollo incluyen la elevada humedad del suelo y largos perodos de humedad ambiental, con temperaturas del aire entre los 24 y 30 C.

CONCLUSIONES

En nuestra muestra de pan obtuvimos que existen mohos, que se llaman RHIZOPUS NIGRICANSpertenecientes a la Familia de los FICOMICETES. Vistos al microscopio presentan micelio con abundante cantidad de hifas. En el extremo de las hifas se forman los esporangios. En nuestra muestra del pimentn obtuvimos que el hongo existente tiene el nombre de PHYTOPHTHORA CAPSICIOBSERVADO, los cuales forman esporangios, el cual puede sobrevivir en condiciones de un largo tiempo. Los hongos de las muestras utilizadas, vistas al microscopio en general, fueron hongos con hifas septadas, con cabezas rotas y algunos sin cabeza, con esporangios. Algunos presentaban forma de micelios.

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BIBLIOGRAFIA

Ainsworth, G. C. y Sneath, P. H.A. (1992) ClasificacionMicrobianaEDITORIAL: Society for General Microbiology, New York.

Lexus (1998) Enciclopedia Estudiantil EDITORIAL :Thema Equipo, S.A Corcega- Barcelona.

MartinF y Robert F(1997) MicrobiologiaEDITORIAL :Interamerica, S.A de C.V Cedro- Mxico.

StanierR,Doudoroff

Adelberg(1970)

The

Microbial

World

EDITORIAL:Thema Equipo, S.A Corcega- Barcelona.

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CUESTIONARIO
1. cuales son los valores promedios de las dimensiones de cada elemento del cuerpo

vegetativo en hongos filamentosos? El cuerpo de los hongos est constituido por filamentos tubulares microscpicos que se ramifican y se entrecruzan. Cada filamento se denomina hifa, y un conjunto de hifas forma lo que se conoce con el nombre de micelio. Las hifas de la mayora de los hongos miden entre 5 y 10 de dimetro y su longitud no es fija; oscila desde pocos micrmetros hasta varios metros. Esta variacin depende de la disponibilidad de nutrientes y del tipo de hongo. En los superiores, la hifas son delgadas (2-5 ) y las clulas fngicas que las forman estn separadas entre s por tabiques provistos de un poro que permite el intercambio de material citoplasmtico entre clulas contiguas. Forman esporas (conidias) directamente en las hifas o en estructuras especficas llamadas conidiforos, constituyendo espora externa. En los hongos inferiores las hifas son manchas (10-15 ) y no estn tabicadas, por lo que las clulas forman un conjunto Coenocitico con mltiples ncleos y un citoplasma nico; las esporas, denominadas esporangio esporas, se forman en el interior de estructuras saculares, llamadas esporangios (esporas internas). Cuando los hongos filamentosos crecen en un medio de cultivo solido, una parte del micelio penetra en el medio para absorber nutrientes (micelio vegetativo), mientras que el micelio areo se proyecta hacia el exterior, dando lugar a matas de apariencia tena, algodonosa o pulverulenta, caractersticas fcilmente diferenciables de las colonias de las levaduras 2. Cul es el tamao promedio de las levaduras? Los caracteres morfolgicos de las levaduras se determinan mediante su observacin microscpica. Adems, los criterios morfolgicos se basan en el modo de reproduccin vegetativa de la morfologa celular, de la formacin de pseudomicelio y de micelio. La forma de la levadura puede ser desde esfrica a ovoide, en forma de limn, piriforme,

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cilndrica, triangular, e incluso alargada formando un verdadero micelio o un falso micelio. Tambin se diferencian en cuanto a su tamao, miden de 1-10 um ancho por 2-3 um de longitud. Son partes observables de su estructura, la pared celular, el citoplasma, las vacuolas, los glbulos de grasa, y los grnulos, los cuales pueden ser meta cromticos, de albmina o de almidn. Para poder observar el ncleo es preciso utilizar tinciones especiales. La estructura celular es de tipo eucaritico, pero sin sistema fotosinttico. La pared rgida, se caracteriza por la presencia, en su composicin, de dos polisacridos: manano y glucano. Algunas levaduras producen una cpsula constituida por fosfomanos. El ncleo est rodeado de una membrana que persiste durante la divisin celular. El nmero de cromosomas es variable de unas a otras. Las levaduras en ningn caso son mviles. 3. Qu genero del hongo se encuentra ms frecuentemente en alimentos? 4. podran las especies de hongos patgenos estar presentes en el aislamiento del medio ambiente que realiza? Explique. S, Este medio es utilizado para el cultivo de hongos patgenos, particularmente de aquellos asociados con infecciones de piel. La alta concentracin de dextrosa y la acidez del pH hacen a ste un medio selectivo para hongos. Con la adicin de cicloheximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un excelente medio para el aislamiento primario de dermatofitos. Este medio es tambin utilizado para la determinacin microbiolgica en cosmticos y para evaluar la presencia de hongos en alimentos. En este medio las peptonas proveen la fuente de carbono y nitrgeno para el crecimiento de los microorganismos, la dextrosa acta como fuente de energa y el agar es agregado como agente solidifican te. 5. los nombres genricos de muchos hongos son derivados de caractersticas morfolgicas.decuales derivan los nombres penicillium, aspergillus, rhizopus? Penicillium: De la palabra en latn penicillus que significa brocha. Aspergillus: En latn significa hisopo.

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Rhizopus: De la palabra en latn hizo que significa raz. 6. Por qu razn alguna colonia aislada del medio ambiente no desarrollan espora en el medio de cultivo utilizado? Slo las esporas y los organismos y los organismos formadores de esporas pueden existir en un ambiente seco, y nuestro medio de cultivo es un medio hmedo.

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INTRODUCCION
En la presente prctica de laboratorio hablaremos bsicamente de los hongos que no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus caractersticas tanto a las unas como a los otros. Las plantas son organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y mientras estn vivos no cesan de crecer. Los hongos tienen la caracterstica de presentar pared celular como las de las plantas, estas paredes celulares fngicas son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro el esqueleto externo de los insectos. En realidad, este tipo de organismos tienen diferentes orgenes razn por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayora de estos conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungi o Eumycota). Existen otros que se ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoo, siendo un ejemplo de ellos los hongos mucilaginosos; y otros ms, entre los que se cuentan ciertos mohos acuticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscpicas de curiosa simetra. Se calcula aproximadamente ms de un milln de especies de hongos en el planeta, pero alrededor de 70,000 de ellas han sido descritas por los especialistas,. Mientras tanto, muchas especies de hongos se han extinguido y otras se encuentran amenazadas en todo el mundo. Esto es particularmente cierto en pases tropicales ricos en diversidad.. Los hongos tienen distintos hbitos de vida, por ejemplo en el caso de los hongos saprfitos(los que son descomponedores de materia orgnica), cumplen una funcin ecolgica tan importante como es la de garantizar el reciclaje de la materia muerta y, por lo tanto, la recirculacin de sustancias nutritivas en los ecosistemas. En el caso de los hongos parsitos, que viven sobre o dentro de otros seres vivos, obtienen su alimento de stos y llegan a producir enfermedad en su hospedero. Los hongos simbiontes son aquellos que se asocian de manera mutualista con otros organismos estos constituyen alianzas vivas de beneficio mutuo como por ejemplo los lquenes (asociacin de hongo y alga) y las micorrizas, simbiosis estas de gran importancia en la naturaleza en procesos de colonizacin de hbitat y de circulacin de nutrientes. Estos organismos nos llegan a ofrecen mltiples servicios, pues lo podemos emplear como alimentos, en la fermentacin para la produccin de vino y cerveza, en el control biolgico de plagas agrcolas. As miso son d gran utilidad en la medicina y en la bioindustria , no olvidemos que tambin existen aquellos que son dainos para la salud. En el siguiente trabajo le presentamos a una sntesis de los hongos, cual es su clasificacin, abarcando la clase y los gneros aspectos que lo ayudaran a entender con mayor facilidad en tema as mismo tendr un mejor panorama de dicho tema.

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Nuestro objetivo al concluir la prctica es lo siguiente:Al trmino de la prctica el alumno debe ser competente en diferenciar e identificar los hongos mediante las diversas caractersticas morfolgicas, caracteres naturales, proceso de evolucin en su desarrollo. Reproduccin y esporas.

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