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i"a re#isin: $0%&'0( A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e De-gad). C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%%'0('$$

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA LA IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7 A PARTIR DE MATERIA FECAL.
C1DI/O: +NL2R0%.00%.304020$0 VERSI1N: 00

Instituto Nacional de Salud

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

REDES EN SALUD PBLICA REFERENCIA EN SALUD PBLICA

AUTORES: +AR5A ELENA REALPE6 COORDINADORA /RUPO +ICROBIOLO/IA 7N/ELA BIBIANA +U8O96 BACTERI1LO/A6 +.Sc +ICROBIOLO/5A. /RUPO +ICROBIOLO/IA :OS; ANTONIO C<AVE9 =ELA. IN/. ALI+ENTOS6 Es . EPIDE+IOLO/5A. /RUPO +ICROBIOLO/IA

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 2 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

Agosto !" 2#11

TABLA DE CONTENIDO

1 2 $ ' 5 6

INTRODUCCIN OB%ETI&OS ALCANCE DEL MANUAL DEFINICIONES BUENAS PR(CTICAS DE LABORATORIO E)UIPOS * MATERIALES E)UIPOS

$ ' ' ' ' 5 5

1.2 1.$
1 2 $ ' 5 6

MATERIALES

EPIDEMIOLO+,A DIA+NSTICO DOCUMENTOS DE REFERENCIAS CONTROL DE RE+ISTROS CONTROL DE RE&ISIONES ANE.OS

6 6 1# 11 11

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina $ de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

1. INTRODUCCIN
Escherichia coli es 0n *aci-) gra" nega?i#)6 anaer)*i) @ac0-?a?i#) de -a @a"i-ia Enterobacteriaceae6 A0e c)-)niBa e- in?es?in) de- h)"*re )cas h)ras des 0Cs de- naci"ien?) D se -e c)nsidera 0n "icr))rganis") de @-)ra n)r"a-6 sin e"*arg)6 e!is?en ce as A0e 0eden ser a?genas D ca0sar daE) r)d0ciend) di@eren?es c0adr)s c-,nic)s F%G6 es?as ce as en 0n c)"ienB) eran den)"inadas E. coli en?er) a?genas6 er) ah)ra a es?)s "icr))rganis")s se -es ha se arad) en ca?eg)r,as de ac0erd) as,ndr)"e c-,nic) c)n e- c0a- han es?ad) as)ciadas D a -)s a?ri*0?)s de #ir0-encia. Se han dis?ing0id) -)s *i)?i )s de E. coli en?er)?)!igCnica6 en?er) a?gena6 en?er)in#asi#a6 en?er)adheren?e6 en?er)agrega?i#a6 en?er)adheren?e di@0sa D en?er)he")rrgica6 es?a H-?i"a6 ?a"*iCn c)n)cida c)") r)d0c?)ra de ?)!ina Ver) ) ?)!ina se"eIan?e a Shiga F%6$G. La E. coli enterohemorrgica FE<ECG @0e descri?a desde -a dCcada de -)s (0 D adici)na-"en?e @0e re-aci)nada c)n *r)?es carac?eriBad)s )r d)-)r a*d)"ina-6 diarrea ac0)sa c)n sangre D )c) ) nada de @ie*re6 c0adr) a- A0e se -e --a" c)-i?is he")rrgica FC<G D A0e era de*id) a -a inges?in de carne cr0da ) "a- c)cida F4G6 a- ?i i@icar -)s ais-a"ien?)s re-aci)nad)s c)n es?a a?)-)g,a segHn s0 an?,gen) s)"?ic) FOG D @-age-ar F<G6 se enc)n?r A0e en ?)d)s -)s cas)s @0e E. coli de- ser)?i ) O%3>:<>6 e- c0a- @0e "s ade-an?e as)ciad) c)n cas)s ais-ad)s de s,ndr)"e he")-,?ic) 0rC"ic) FS<UG carac?eriBad) )r daE) rena- ag0d)6 ?r)"*)ci?) enia D ane"ia he")-,?ica "icr)angi) ?ica6 recedida )r diarrea c)n sangre F%G. Adici)na-"en?e en -as ce as de E. coli O%3>:<>6 se )*ser#a -a resencia de 0na ci?)?)!ina A0e es

ne0?ra-iBada c)n an?i?)!ina )*?enida a ar?ir de Shigella dysenteriae ?i ) %6 )r -) A0e se -e --a"a Jshiga2 -iKe ?)!inL ) ?)!ina se"eIan?e a shiga FSLTG ) Jshiga ?)!inL FSTMG6 h)D se sa*e A0e es es?a ?)!ina erinci a- "ecanis") de a?)genicidad de E<EC F%G.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina ' de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

E. coli es 0n "icr))rganis") as)ciad) a -a resen?acin de En@er"edades Trans"i?idas )r A-i"en?)s FETAG -)s c0a-es )c0rren genera-"en?e )rA0e Cs?)s han sid) c)n?a"inad)s )r e- ers)na- encargad) de s0 "ani 0-acin d0ran?e e- r)ces) D c)n c)nsec0encias a ni#e- de sa-0d H*-ica F&G. RaBn )r -a c0a- c)*ra i" )r?ancia e- hech) de ?ener es?andariBad)s "C?)d)s D ?Ccnicas ara rea-iBar -a *HsA0eda de es?e a?gen) en "0es?ras de "a?eria @eca- de -)s indi#id0)s in#)-0crad)s en cas)s de ETA F acien?es D "ani 0-ad)res de a-i"en?)sG.

2. OB%ETI&O Es?a*-ecer -a "e?)d)-)g,a ara -a rec)-eccin6 ?rans )r?e D de?eccin E. coli O%3>:<> de a ar?ir de "a?eria @eca-.

3.

ALCANCE DEL MANUAL

Es?e d)c0"en?) a -ica ara -a rec)-eccin6 ?rans )r?e D de?eccin E. coli O%3>:<> de a ar?ir de "a?eria @eca-.

'. DEFINICIONES B/0t!12/: Organis") 0nice-0-ar6 ca aB de re r)d0cirse a s, "is"). E!is?en dis?in?)s ?i )s de *ac?erias6 c-asi@icadas segHn s0s r) iedades de creci"ien?) Faer*icas ) anaer*icas6 e?c.G6 s0 ca acidad de ?eEirse c)n c)-)ran?es es ecia-es F/ra" )si?i#as6 /ra" Nega?i#asG6 segHn s0 @)r"a F*aci-)s6 c)c)s6 es ir)A0e?as6 e?c.G. A-g0nas r)d0cen in@ecci)nes en e- ser h0"an) A0e 0eden ser gra#es. M! 2o ! t1/3s4o1t! C/15 B"/21: "edi) de ?rans )r?e ara agen?es anaer)*i)s D /ra" nega?i#)s6 0?i-iBad) ara -a rec)-eccin D en#i de "0es?ras c-,nicas F"a?eria @eca-G. E- *aI) c)n?enid) de n0?rien?es en e- "edi) D -a 0?i-iBacin de- @)s@a?) c)") ?a" n en -0gar de- g-icer)@)s@a?) e#i?a es)*recreci"ien?) de "icr))rganis")s c)") ?a"*iCn "ini"iBa -a des?r0ccin *ac?eriana. E?i)g-ic)-a?) de S)di) r)#ee 0n *aI) )?encia- Red)!. M201oo1g/32s6o !3t!1o4/t7g!3o: Es aA0e- A0e 0ede r)d0cir en@er"edad a ni#e- en?Cric).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 5 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

S83 1o6! 9!6o"8t20o :1;620o: E- Sndrome urmico hemoltico FSU<G6 in?ernaci)na-"en?e <ae")-D?ic20rae"ic sDndr)"e F<USG6 es 0na en@er"edad in@ec?)2c)n?agi)sa A0e se carac?eriBa )r ins0@iciencia rena-6 ane"ia he")-,?ica6 ?r)"*)ci?) enia Fde@iciencia c)ag0-acin D sign)s ne0r)-gic)s #aria*-es. Se 0na in@eccin )r E. coli O%3>:<>. -aA0e?ariaG6 de@ec?)s de -a )s?eri)r a r)d0ce genera-"en?e c)") sec0e-a

5.

BUENAS PR(CTICAS DE LABORATORIO

Re"i?irse a- "an0a- de *i)seg0ridad de- -a*)ra?)ri) de "icr)*i)-)g,a INS. Re@ . MNL< A#5.##1.5#$#<##1 6. E)UIPOS * MATERIALES 5.1 E)UIPOS Inc0*ad)ras Fgrad0ar a 43 N'2 $OCG +icr)sc) i) Ca*ina de *i)seg0ridad C)nge-ad)r a 2>0OC C0ar?) @ri) P &OC 5.2 MATERIALES F)r"0-ari) de regis?r) ara e- en#,) de de "0es?ras D ce as de- es?0di) cen?ine-a de

Bac?eri)-)g,a genera- RE+<R#1.##1.5#$#<##5 +edi) de ?rans )r?e CarD B-air Ca-d) de enriA0eci"ien?) Se-eni?) FVer ane!) %G Agar +ac C)nKeD S)r*i?)-. FVer ane!) $G Agar B<I. FVer ane!) 4G Asas de c0-?i#) C)-)ran?es de /ra" Re@. INT< R#1.##1.5#$#<##1 Reac?i#) ara r0e*a de )!idasa Ce a c)n?r)- de creci"ien?): E. coli O157:H7. Ce as de -a Q<O /-)*a- Sa-"2S0r#.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 6 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

Leche descre"ada a- $0R FAne!) &G CaIas de e?ri Esc)*i--)nes es?Cri-es T0*)s de ?a a r)sca +echer) Ba?er,a de r0e*as *i)A0,"icas: TSI6 LIA6 Ci?ra?)6 Urea6 /-0c)sa6 Lac?)sa6 Sacar)sa6 Ce-)*i)sa6 S)r*i?)-6 Ind)-6 +)?i-idad6 Lisina6 Orni?ina6 B2/-0c)n)ridasa An?,gen) O%3> An?,gen) <>

7.

EPIDEMIOLO+,A

Den?r) de- gr0 ) E. coli en?er) a?genas6 E. coli O%3>:<> es e- ser)?i ) ais-ad) "s @rec0en?e"en?e D aA0e se -e a?ri*0De -a )c0rrencia de -a "aD)r,a de -)s grandes *r)?es c)") e- de -a C)s?a Oes?e de Es?ad)s Unid)s en %SS4 F3G6 D e- de :a n en %SST FTG. Res ec?) a La?in)a"Crica6 en C)-)"*ia 0n re )r?e re-i"inar c)"0nic A0e E. coli O%3>:<> @0e e-

agen?e ca0sa- de- >6$R de -)s cas)s de diarrea D A0e e- T63R de- ganad) era )r?ad)r de es?e a?gen) F>G6 en Chi-e6 E. coli O%3>:<> es? as)ciad) a cas)s de diarrea D s,ndr)"e 0rC"ic) he")-,?ic)6 D e4&63R de- ganad) es )r?ad)r F(G. En Argen?ina6 es?0di)s rea-iBad)s en ganad) *)#in) de"0es?ran A0e -a @rec0encia de de?eccin es de 063R ara STEC O%3>:<>6 FS6%0G. En re-acin a a-i"en?)s "0es?read)s se de?ec? E. coli O%3>:<> en e- 46SR de -)s r)d0c?)s crnic)s F%%G. Recien?e"en?e ara -a si?0acin de E. coli O%3>:<> C)-)"*ia se han re )r?ad) es?0di)s A0e 0?i-iBan a?gen) en d)nde se ha enc)n?rad) s0 a?gen) en "0es?ras re?ende -a

?Ccnicas de *i)-)g,a ")-ec0-ar ara -a iden?i@icacin de es?e

circ0-acin en di@eren?es B)nas de- a,s a ar?ir de "0es?ras de "a?eria @eca-6 ag0a D a-i"en?)s F%$6%4G6 es?0di)s A0e de"0es?ran -a necesidad de c)n?in0ar c)n -a *HsA0eda de es?e c-,nicas6 de?eccin de es?e "icr))rganis") en e- a,s. ara -) c0a- se es?andariB -a ?Ccnica descri?a en es?e "an0a-6 c)n -) A0e se

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 7 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

8.

DIA+NSTICO FVer @-0I) gra"a Ane!) 3G

=.1 R!0o"!00273> t1/3s4o1t! 5 !3?8o ! 6:!st1/s Se de*e rec)-ec?ar 0na "0es?ra de "a?eria @eca- en 0n reci ien?e -s?ic) de ri"er 0s) de *)ca ancha6 ) )r "edi) de his) ad) rec?a-. La "0es?ra se 0ede "an?ener a ?e" era?0ra a"*ien?e F$&OCG )r "!i") $ h)ras ara s0 r)cesa"ien?) in"edia?)6 ) se de*e ?rans@erir a "edi) de ?rans )r?e CarD B-air ara ser re"i?id) -) "s r)n?) )si*-e ara e- r)cesa"ien?) D de?eccin de E. coli O157:H76 es?e "edi) de ?rans )r?e de*e ser en#iad) a ?e" era?0ra a"*ien?e F%T2$3OCG. Para e- en#,) a- /r0 ) de +icr)*i)-)g,a de- Ins?i?0?) Naci)na- de Sa-0d se de*e di-igenciar D adI0n?ar e@)r"a?) de en#,) e iden?i@icacin de "0es?ra. Regis?r) ca-idad E312@:!0262!3to 5 C:"t2?o F?)"ad) D ada ?ad) de: /NF J/-)*a- F))d*)rne In@ec?i)ns Ne?U)rKL FTGG

Se rea-iBa en Ca-d) de enriA0eci"ien?) ara en?er)*ac?erias Se-eni?) Fane!) %G6 in)c0-and) -a "0es?ra e inc0*ad) a 43 N'2$OC6 en?re T D %$ h)ras. C0" -id) e- ?ie" ) de inc0*acin en ca-d) Se-eni?) se ?)"an de $ a 4 asadas de- c0-?i#) sin "eBc-ar eca-d) D se sie"*ran en @)r"a direc?a s)*re -acas de agar +ac C)nKeD S)r*i?)- Fane!) $G D se inc0*an a 43 N'2$OC se )r %( a $& h)ras. c)-)nias eA0eEas6 inc)-)ras6 ?rans-0cidas D s)r*i?)nega?i#) r)*a*-e"en?e )r Des 0Cs de -a inc0*acin se de*e )*ser#ar ")r@)-)g,a D carac?er,s?icas de -as c)-)nias ais-adas6 c0and) )*ser#en c)rres )ndern a c)-)nias de E. coli O%3>:<>. Es?as c)-)nias de*ern ser in)c0-adas en 0n "edi) de enriA0eci"ien?) n) se-ec?i#) FB<I ' Tri ?icasa P S)Da. Ane!) 4G e- c0a- se de*e inc0*ar a 43 N'2$OC %( a $& h)ras6 ara )s?eri)r"en?e rea-iBar -as r0e*as *i)A0,"icas: TSI6 LIA6 Ci?ra?)6 Urea6 /-0c)sa6

Lac?)sa6 Sacar)sa6 Ce-)*i)sa6 S)r*i?)-6 Ind)-6 +)?i-idad6 Lisina6 Orni?ina6 B2/-0c)n)ridasa6 -as c0a-es de*en ser inc0*adas a 43 N'2$OC )r %( a $& h)ras ara s0 )s?eri)r -ec?0ra6 c0and) c)rres )nda a E. coli se )*?endr -)s sig0ien?es res0-?ad)s:

PRUEBA Fer"en?acin de g-0c)sa

RESULTADO PARA E. coli P)si?i#)

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina = de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

Fer"en?acin de -ac?)sa P)si?i#) Fer"en?acin de sacar)sa P)si?i#) Fer"en?acin de ce-)*i)sa Nega?i#) Fer"en?acin de s)r*i?)Nega?i#) F)r"acin de <$S Nega?i#) Pr)d0ccin de /as P)si?i#) U?i-iBacin de- ci?ra?) Nega?i#) Pr)d0ccin de ind)P)si?i#) +)#i-idad +#iAc?i#idad de -a g-0c)r)nidasa Nega?i#) Ac?i#idad de -a -isina P)si?i#) Ac?i#idad de -a )rni?ina P)si?i#) Pr)d0ccin de ig"en?) a"ari--) Nega?i#) T)"ada de: +an0a- )@ C-inica- +icr)*i)-)gD F>OEdG. %SSS g. &3S Co"o1/0273 ! +1/6 6o 2A20/ o

Las c)-)nias s)s ech)sas 0eden ser e!a"inadas a ?ra#Cs de -a c)-)racin de /ra" FVer ins?r0c?i#) C)-)racin de /ra" INT< RO1.##1.5#$#<##1G6 en d)nde se enc)n?rarn *aci-)s /ra" nega?i#)s. P1:!B/ ! oC2 /s/.

Pre arar e- reac?i#) dehidr)c-)r0r) de ?e?ra"e?i-2 ara@eni-endia"ina a- %R en 0n ?0*) de Vhan c)n $24 g)?as de ag0a D 06.%gr de- reac?i#) en )-#)W se i" regna 0n a e- @i-?r) c)n $ ) 4 g)?as de es?e reac?i#)6 c)n 0na asa desecha*-e ) 0n a-i--) se ?)"an c)-)nias ais-adas D se c)-)can s)*re ea e- @i-?r) )si?i#a6 se i" regnad). La a aricin de 0n c)-)r #i)-e?a a -)s %0 240 seg0nd)s indica reaccin

rec)"ienda 0?i-iBar *as?an?e inc0-). An?es de e" eBar -a r0e*a a- ais-a"ien?) en es?0di)6 se de*e hacer c)n?r)- de- reac?i#) c)n ce as c)n)cidas6 0na reaccin )si?i#a se e#idencia )r 0n c)-)r #i)-e?a s)*re e- si?i) d)nde se c)-)c) -a ce a. Para E. coli se de*e )*?ener 0n res0-?ad) nega?i#) de es?a r0e*a. I !3t2A20/0273 A23/" O*?enid)s -)s res0-?ad)s de -as r0e*as an?eri)res6 D 0na #eB iden?i@icad) e- ais-a"ien?) c)") E. coli se r)sig0e c)n -a iden?i@icacin de an?,gen)s ara de?er"inar si c)rres )nde a O%3>:<>. A3t8g!3o so6Dt20o O157: Para -a de?eccin de es?e an?,gen) se 0ede 0?i-iBar -a ag-0?inacin en -"ina c)n an?is0er) )-ic-)na- an?i O%3>6 -)s an?ic0er )s de- an?is0er) ag-0?inan c)n -a *ac?eria c0and) ean?,gen) O%3> es? resen?e en e- -i ) )-isacarid) *ac?erian).

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina - de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

C)n e- asi-a"ien?) s)s ech)s) 0na

re are 0na s)-0cin "eBc-nd)-) en 0n ?0*) c)n % "- de s)-0cin

@)r")-ada a- %R has?a )*?ener 0na ?0r*ideB ig0a- a -a de- ?0*) nH"er) 3 de -a esca-a de +ac @ar-and6 en -aca de ser)?i i@icacin c)-)car en @)r"a se arada d)s g)?as de $00- de -a s0s ensin A0e se re ar an?es6 )*ser#ar -as d)s s0s ensi)nes i-0"innd)-as c)n 0na -" ara ara #eri@icar A0e n) e!is?a a0?)ag-0?inacin6 )s?eri)r"en?e agregar %30- de- an?is0er) a 0na de -as d)s s0s ensi)nes D "eBc-ar s0a#e"en?e "edian?e r)?acin s0a#e )r 0n "in0?) D )*ser#ar n0e#a"en?e -as s0s ensi)nes a -a -0B de 0na -" ara. E- ensaD) es )si?i#) si s)-) en -a "eBc-a de -a s0s ensin c)n e- an?is0er) se )*ser#a ag-0?inacin ) @)r"acin de eA0eE)s gr0")s6 e- ensaD) es nega?i#) si a"*as s0s ensi)nes se )*ser#an h)")gCneas sin ag-0?inacin. En cas) de A0e -a ce a resen?e a0?)g-0?inacin se rec)"ienda rea-iBar sie?e ases s0cesi#)s en agar ?ri ?icasa s)Da D re e?ir e- ensaD). A3t8g!3o A"/g!"/1 H7: Para -a de?eccin de es?e an?,gen) se 0?i-iBa -a r0e*a de inhi*icin de ")#i-idad6 ara rea-iBar es?e r)cedi"ien?) se 0?i-iBa 0n agar ")?i-idad D 0n agar ")?i-idad c)n adicin de S0 0- de an?is0er) <>6 en a"*)s se in)c0-a -a ce a en es?0di)6 se inc0*an a 43OC )r $& h)ras D se c)nsidera 0na r0e*a )si?i#a c0and) -a *ac?eria es "#i- en e- agar ")?i-idad sin an?is0er) D se inhi*e -a ")#i-idad de -a *ac?eria en e- agar A0e c)n?iene an?is0er). Es i" )r?an?e resa-?ar A0e ara es?as r0e*as se de*e 0sar 0na ce a c)n?r)- D en cas) de c)n?ar c)n an?is0er)s di@eren?es @a*rican?e. Co3s!1?/0273 ! "/s 0!4/s 0o3A216/ /s. Una #eB -)s res0-?ad)s de -as r0e*as c)n@ir"en A0e e- ais-a"ien?) c)rres )nde a E. c)-i O%3>:<>6 -a ce a se de*e g0ardar en c)nge-acin a 2>0OC ara -) c0a- se de*e 0sar "edi) -eche descre"ada a- $0R FAne!) &G. I3Ao16! ! 1!s:"t/ os. Teniend) -)s res0-?ad)s de ais-a"ien?) e iden?i@icacin se e"i?e e- res0-?ad) ERE+<R#1.##1.5#$#<#$#F. -. DOCUMENTOS DE REFERENCIAS 1. R)drig0eB6 /0ada-0 e. $00$. Princi a-es carac?er,s?icas D diagns?ic) de -)s gr0 )s a?gen)s de Escherichia coli. Sa-0d PH*-ica +e! $00$W &&:&T&2&>3. ara -a iden?i@icacin de es?)s an?,gen)s6 se de*en seg0ir -as ins?r0cci)nes de-

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1# de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

2. Bra#)6 V. :. B. X Vi--a-)*)s de Bas?ard)6 L. B. $00$. Escherichia coli enterohemorrgica en r)d0c?)s crnic)s c)"ercia-iBad)s en e- "ercad) "0nici a- de C0"an6 VeneB0e-a. e!. Soc. "en. #icrobiol.6 I0-6 #)-.$$6 n).$6 .%%S2%$%. ISSN %4%32$33T. 3. /)0-d6 L. <annah. et al. $00S. Rec)""enda?i)ns @)r Diagn)sis )@ Shiga T)!in22Pr)d0cing Escherichia coli In@ec?i)ns *D C-inica- La*)ra?)ries. Oc?)*er %T6 $00S ' 3(FRR%$GW%2%& &. Pesca O. Pr)?)c)-) de #igi-ancia de en@er"edades ?rans"i?idas )r a-i"en?)s. Ins?i?0?) Naci)nade Sa-0d C)-)"*ia $00> 5. Q<O /-)*a- Sar" S0r#. $00>. +an0a- de r)cedi"ien?)s. Diagns?ic) D carac?eriBacin de Escherichia coli O%3> r)d0c?)r de ?)!ina Shiga a ar?ir de a-i"en?)s. 6. Qa?ana*e <6 Qada A6 InagaKi =6 I?)h V6 Ta"0ra V. O0?*reaKs )@ en?er)hae")rrhagic Escherichia coli O%3>:<> in@ec?i)n *D ?U) di@@eren? gen)?D e s?rains in :a an. Lance? %SSTW 4&(: 4(%2$. 7. +a??ar6 S.W VsA0eB6 E. Escherichia coli O%3>:<> In@ec?i)n in C)-)"*ia. Fac0-?ad de Ciencias6 Uni#ersidad :a#eriana6 B)g)?6 C)-)"*ia. E"erging In@ec?i)0s Diseases. Le??ers. &F%G. En -inea: h?? :''UUU.cdc.g)#'ncid)d'EID'#)-&n)%'-e??ers.h?". %SS(. 8. R,)s +6 Prad) V6 Tr0cKsis +6 Are--an) C6 B)rie C6 A-e!andre +6 Fica A6 Le#ine ++. C-)nadi#ersi?D )@ Chi-ean is)-a?es )@ en?er)he")rrhagic Escherichia coli @r)" a?ien?s Ui?h he")-D?ic2 0re"ic sDndr)"e6 asD" ?)"a?ic s0*Iec?s6 ani"a- reser#)irs6 and @))d r)d0c?s. :. C-in. +icr)*i)-. %SSSW 4>: >>(2(%. 9. +eich?ri L6 +i-iUe*sKD E6 /i)@@rC A6 Chinen I6 BaschKier A6 Chi--e"i /6 /0?h BEC6 +asana +6 Ca?a-di A6 R)dr,g0eB <R6 and Ri#as +. JShiga ?)!in2 r)d0cing Escherichia coli in hea-?hD D)0ng *ee@ s?eers @r)" Argen?ina: re#a-ence and #ir0-ence r) er?ies. I. :. F))d +icr)*i)-. 10. Chinen I6 O?er) :L6 +i-iUe*sKD E6 R)-dn +-6 Chi--e"i /+6 BaschKier A6 N*)-i C6 FriBB) L6 Ri#as. $004. Charac?eriBa?i)n )@ Shiga2 r)d0cing Escherichia coli O%3>:<> is)-a?ed @r)" ca-#es in Argen?ina. Res. Ve?. Sci. $004W >&: $(42T. 11. Chinen I6 Tanar) :D.6 +i-iUe*sKD E.6 L)0nd L<6 Chi--e"i /+6 Ledri S.6 BaschKier A.6 Scar in +.6 +an@redi E.6 Ri#as +. Is)-a?i)n and charac?eriBa?i)n )@ Shiga2 r)d0cing Escherichia coli O%3>:<> @r)" re?ai- "ea?s in Argen?ina. :. F))d. Pr)?ec?. $00%W T&: %4&T23%. 12. RHge-es LC6 Bai :6 +ar?,neB A:6 Vanegas +C6 /"eB2D0ar?e O/. $0%0. +)-ec0-ar charac?eriBa?i)n )@ diarrheagenic Escherichia c)-i s?rains @r)" s?))-s sa" -es and @))d r)d0c?s in C)-)"*ia. In? : F))d +icr)*i)-. $0%0 A r %3W%4(F4G:$($2T. E 0* $0%0 :an $(. 13. /"eB2D0ar?e O/6 ArB0Ba O6 Ur*ina D6 Bai :6 /0erra :6 +)n?es O6 P0e--) +6 +end)Ba V6 Cas?r) /=. $0%0. De?ec?i)n )@ Escherichia coli en?er) a?h)gens *D "0-?i -e! )-D"erase chain reac?i)n @r)" chi-drenYs diarrhea- s?))-s in ?U) Cari**ean2C)-)"*ian ci?ies. F))d*)rne Pa?h)g Dis. $0%0 Fe*W >F$G:%SS2$0T. 1#. CONTROL DE RE+ISTROS
CONTROL DE RE+ISTROS IDENTIFICACION ORDENACIO N DOCUMENTA L Se )rdena cr)n)-gica"e n?e ARCHI&O DE +ESTION RESPONSAB LE E- r)@esi)nares )nsa*-e de- r)gra"a TIEMPO DE RETENCIO N 4 aE)s ARCHI&O CENTRAL METODO UTILIGA DO Se "an?iene en earchi#) de RESPONSAB LE Secre?aria de/r0 ) de +icr)*i)-)g,a TIEMP O 3 aE)s ARCHI&O HISTRICO METODO UTILIGADO E-i"inacin

COD

NOMBRE

LU+AR

RE/2 R0%.00%.30 402003

En#,) de ais-a"ien?) de Bac?eri)-)g,a

Archi#) de Bac?eri)-)g, a generaSa?C-i?e

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 11 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

genera-.

RE/2 R0%.00%.30 402040

Res0-?ad) Bac?eri)-)g,a genera-.

Se )rdena cr)n)-gica"e n?e

E- r)@esi)nares )nsa*-e de- r)gra"a

Archi#) de Bac?eri)-)g, a generaSa?C-i?e

4 aE)s

ges?in de +icr)*i))g,a has?a A0e ase aarchi#) cen?raSe "an?iene en earchi#) de ges?in de +icr)*i))g,a has?a A0e ase aarchi#) cen?ra-

Secre?aria de/r0 ) de +icr)*i)-)g,a

3 aE)s

E-i"inacin

11. CONTROL DE RE&ISIONES FECHA APROBACION AA MM DD $0%% 0( $$

&ERSIO N 00

DESCRIPCIN Creacin de d)c0"en?)

12. ANE.OS A3!Co 1. C/" o ! E312@:!0262!3to 4/1/ E3t!1oB/0t!12/s. S!"!32to A3!Co 2. Ag/1 M/0 Co3H!5 So1B2to" A3!Co $. M! 2os ! 0:"t2?o BHI A3!Co '. L!09! !s01!6/ / /" 2#I A3!Co 5. F":Jo g1/6/ ! 2 !3t2A20/0273 ! E. coli O157:H7.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 12 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

A3!Co 1. C/" o ! E312@:!0262!3to 4/1/ E3t!1oB/0t!12/s. S!"!32to Casas c)"ercia-es: BBL 2 DIFCO 2 +ERCV F0nda"en?) Es 0n "edi) de enriA0eci"ien?) ara e- ais-a"ien?) de En?er)*ac?erias a ar?ir de heces6 )rina6 ag0a D a-i"en?)s. Las e ?)nas de- "edi) s0"inis?ran -)s c)" 0es?)s car*)nad)s D ni?r)genad)sW e- se-eni?) inhi*e ecreci"ien?) de /ra" )si?i#)s inc-0Dend) en?er)c)c)s D )?r)s /ra" nega?i#)s n) @er"en?ad)resW -)s @)s@a?)s "an?ienen es?a*-e e- < D dis"in0Den -a ?)!icidad de- se-eni?). P1!4/1/0273 Siga -as ins?r0cci)nes de -a casa c)"ercia-6 en cas) de reA0erir ca-en?a"ien?) ara -a dis)-0cin ?)?ade- "edi)6 ca-en?ar a 0na ?e" era?0ra "!i"a de T0OC. Dis?ri*0Da %0 "- en ?0*)s c)n ?a a de r)sca %T!%00 es?Cri-es. E- ca-d) 0na #eB re arad) de*e 0sarse in"edia?a"en?e. Si se resen?a 0n sedi"en?) de*e descar?arse. I3o0:"/0273 C)n 0n his) ) ?)"e a r)!i"ada"en?e % a $ g de -a "a?eria @eca-. C)-A0e-a en e- ca-d)6 agi?e D descar?e e- esc)*i--n.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1$ de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

Inc0*e )r %$ a %( h)ras D s0*c0-?i#e

Co3t1o" ! C/"2 / Cada -)?e de "edi) de*e c)n?ar c)n -as es?eri-idad.Z r0e*as de c)n?r)- de ca-idad ?an?) de creci"ien?) c)") de

Para e- c)n?r)- de creci"ien?)6 se"*rar 0na ce a c)n)cida c)") en?er) a?gena6 -ac?)sa nega?i#a FSalmonella o ShigellaGW inc0*e )r %$ a %( h)ras D s0*c0-?i#e. A- rec0 erar e- "icr))rganis") en e- c0-?i#)6 Cs?e de*er c)nser#ar -as carac?er,s?icas de creci"ien?) D ")r@)-)g,a ?, icas. Z Es?e ca-d) )r ser 0n "edi) de enriA0eci"ien?) a-?a"en?e se-ec?i#) n) reA0iere de c)n?r)es?eri-idad6 sin e"*arg)6 an?e c0a-A0ier ca"*i) en s0 as ec?)6 de*er descar?arse. re#i) de

A3!Co 2. Ag/1 M/0 Co3H!5 So1B2to" Casas c)"ercia-es: BBL 2 DIFCO 2 +ERCV F0nda"en?) Es 0n "edi) de c0-?i#) ara e- ais-a"ien?) de en?er)*ac?erias6 A0e er"i?e #is0a-iBar -a @er"en?acin des)r*i?)- "edian?e -a resencia de c)-)nias r)sadas6 ) -a n) @er"en?acin de- s)r*i?)- "edian?e -a resencia de c)-)nias ?rans-0cidas e inc)-)ras.

P1!4/1/0273 Siga -as ins?r0cci)nes de -a casa c)"ercia- ara -a re aracin D dis)-0cin de es?e "edi). A0?)c-a#e e- "edi) dis0e-?) a %$%OC D %3 -* de resin )r %3 "in0?)s. Dis?ri*0Da en caIas de e?ri n0e#as ) es?Cri-es6 D #eri@iA0e A0e cada caIa ?enga 0n gr)s)r de 4 a & "". A-"acene a &OC )r "!i") ( d,as.

Co3t1o" ! C/"2 / Cada -)?e de "edi) de*e c)n?ar c)n -as es?eri-idad. r0e*as de c)n?r)- de ca-idad ?an?) de creci"ien?) c)") de

Para e- c)n?r)- de creci"ien?)6 se"*rar 0na ce a c)n)cida c)n?r)- de E. c)-i O%3>:<>6 A0e se sa*e A0e es s)r*i?)- nega?i#a6 inc0*e )r %( a $& h)ras. A- rec0 erar e- "icr))rganis") en e- c0-?i#)6 Cs?e de*er c)nser#ar -as carac?er,s?icas de creci"ien?) D ")r@)-)g,a ?, icas.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 1' de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

A3!Co $. M! 2os ! 0:"t2?o BHI C/s/s 0o6!102/"!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERCV F:3 /6!3to Es 0n "edi) de c0-?i#) A0e c)n?iene s0@icien?es n0?rien?es ara e- ais-a"ien?) de c0a-A0ier "icr))rganis") aer)*i) "es@i-). P1!4/1/0273 Siga -as ins?r0cci)nes de -a casa c)"ercia- ara -a re aracin D dis)-0cin de es?e "edi). A0?)c-a#e e- "edi) dis0e-?) a %$%OC D %3 -* de resin )r %3 "in0?)s. Dis?ri*0Da en caIas de e?ri n0e#as ) es?Cri-es6 D #eri@iA0e A0e cada caIa ?enga 0n gr)s)r de 4 a & "". A-"acene a &OC )r "!i") ( d,as.

Co3t1o" ! C/"2 / Cada -)?e de "edi) de*e c)n?ar c)n -as es?eri-idad. r0e*as de c)n?r)- de ca-idad ?an?) de creci"ien?) c)") de

Para e- c)n?r)- de creci"ien?)6 se"*rar 0na ce a c)n?r)- c)n)cida6 inc0*e )r %( a $& h)ras. A- rec0 erar e"icr))rganis") en e- c0-?i#)6 Cs?e de*er c)nser#ar -as carac?er,s?icas de creci"ien?) D ")r@)-)g,a ?, icas.

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 15 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

A3!Co '. L!09! !s01!6/ / /" 2#I C/s/s 0o6!102/"!s: BBL 2 DIFCO 2 +ERCV F:3 /6!3to La -eche descre"ada se 0sa c)") 0n "edi) c)" -e?)6 ) c)") ingredien?e de )?r) "edi) es ecia-6 ara -a r) agacin de "icr))rganis")s en r)d0c?)s -c?e)s. E)-#) de -eche descre"ada es 0n )-#) desecad) a ar?ir de grandes #)-H"enes de -eche descre"ada6 es s)-0*-e D @ci- de re arar. La -eche descre"ada a- $0R es 0sada c)") cri) r)?ec?)r ara c)nser#ar "icr))rganis")s aer*ic)s D anaer*ic)s a 2>0O C as, c)") -e#ad0ras D h)ng)s. P1!4/1/0273. Dis0e-#a $0 gra")s de- "edi) deshidra?ad) en %00 "- de ag0a des?i-ada ) desi)niBada. Es?eri-ice a %%T[C )r %0 "in0?)s En c)ndici)nes de es?eri-idad6 0sand) 0na ca*ina de seg0ridad dis?ri*0Da %6( "- en cri)#ia-es de ?a a r)sca. Tenga c0idad) en e#i?ar s)*re2ca-en?a"ien?) ) A0e -a -eche ?)"e 0n c)-)r cara"e-) Da A0e de es?a "anera n) c)nser#ar -)s "icr))rganis")s. La d0racin de- "edi) es de $ "eses. E"an?enerse a T6% N'2 0.$. < de- "edi) de*e ara er)ces) de -i)@i-iBacin de -a "aD)r,a de -)s "icr))rganis")s inc-0Dend)

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD Versin: 00 Pgina 16 de 16 LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIAS Fecha r!i"a re#isin: $0%$'0> A r)*ad) )r: +ar,a E-ena Rea- e C))rdinad)ra /r0 ) +icr)*i)-)g,a Fecha: $0%0'%0'%3

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE Escherichia coli O157:H7

Co3t1o" ! 0/"2 / Para e- c)n?r)- de es?eri-idad6 inc0*e 0n ?0*) d0ran?e &( h)ras D -0eg) rea-ice -a sie"*ra en agar sangre de c)rder) a- 3R. P1o0! 262!3to 4/1/ /"6/0!3/1 "/s 0!4/s Este $rocedimiento debe reali%arse en cabina de bioseguridad && Para )*?ener 0na *0ena c)nser#acin se de*e ar?ir de 0n c0-?i#) 0r) de %( a $& h)ras en 0n "edi) n) se-ec?i#) B<I ) Tri ?icasa P S)DaG. En -)s cri)#ia-es c)n -eche descre"ada a- $0R haga 0na s0s ensin densa de- "icr))rganis"). R)?0-e e- #ia- c)n e- cdig) c)rres )ndien?e de -a ce a D -a @echa de rec)-eccin.

L)s #ia-es de*en ser "arcad)s c)n 0na ?in?a A0e resis?a *aIas ?e" era?0ras D a-"acenad)s en caIas es ecia-es6 de*ida"en?e "arcadas.

A3!Co 5. F":Jo g1/6/ ! 2 !3t2A20/0273 ! E. coli O157:H7.

DETECCIN DE E. coli O157:H7

Muestras en medio de transporte Cary Blair a Temperatura ambiente

Enri ue!imiento sele!ti"o en !aldo #elenito $n!ubar de 6 a 12 %oras a 35&'(2)C *epi!ar en a+ar M! Con,ey sorbitol

$n!ubar de 18 a 2- %oras a 35 &'(2)C Colonias sospe!%osas .sorbitol ne+ati"o/ *epi ue en a+ar B0$ 1 Tripti!asa soya

1. '.

Identificacin serolgica: $n!ubar de 18 a 2- %oras a 35 &'(2)C eaccin en !laca de ant"geno#anticuer!o !ara la identificacin de ant"genos so$%ticos &157 eaccin en tu(o de ant"geno#anticuer!o !or !rue(a de $otilidad !ara ant"geno flagelar )7 2ruebas bio u3mi!as4 5ram y o6idasa