Você está na página 1de 24

s novas funes de hoje e as que ainda viro

FLVIA CARVALHO ALcANTARA GOMES, VANESSA PEREIRA TORTELLI e LUAN DINIZ


Introduo
SISTEMA

Glia: dos velhos conceitos

Nervoso Central (SNC) apresenta a maior diversidade celular dos sistemas orgnicos do corpo humano, alm de estar associado a atividades extremamente complexas que envolvem a relao do indivduo com o meio ambiente, a vida afetiva e a atividade intelectual. Para efeito de comparao, enquanto rgos to vitais como corao e fgado possuem 3-5 tipos celulares diferentes, o encfalo possui mais de uma centena. Aliado sua complexidade morfolgica e funcional, o SNC sede de diversas doenas incapacitantes, como as doenas neurodegenerativas de Alzheimer e Parkinson; tumores e desordens neurolgicas como esquizofrenia, autismo, dentre outras. Essas enfermidades, alm de afetarem diretamente a qualidade de vida desses indivduos, implicam altos custos nanceiros para a sade pblica e perdas econmicas para o pas. Entender o funcionamento do sistema nervoso fundamental para a elaborao de estratgias e de polticas pblicas e ecazes de medicina regenerativa, teraputica e preventiva. Muito se conquistou, especialmente nas duas ltimas dcadas, sobre o conhecimento do crebro. Se por um lado esses avanos so extraordinrios e suas consequncias abrangem desde o desenvolvimento do tecido nervoso propriamente dito ao seu funcionamento normal e patolgico, decepcionante reconhecer que eles so fruto no de perguntas cientcas originais, jamais pensadas ou feitas por nossos antecedentes neurocientistas, mas fruto do avano tecnolgico do sculo XXI (pelo menos no que se refere s clulas gliais...). Esse progresso permitiu o desenvolvimento de ferramentas metodolgicas potentes, de forma que o cientista hoje no apenas visualiza uma clula em seu contexto tecidual esttico, mas capaz de observar e alterar sua biologia, seja por tcnicas microscpicas de alta resoluo, seja analisando os genes e protenas expressos pelo tecido mediante tcnicas de transcriptoma ou proteoma ou ainda manipulando as clulas geneticamente pelas tcnicas de gerao de animais mutantes, RNA de interferncia ou ainda pela recente optogentica. No exageraria em dizer que a Neurocincia contempornea responde hoje a questes propostas sobre as clulas gliais h mais de um sculo pelo pai
27 (77), 2013

ESTUDOS AVANADOS

61

da neurocincia, o neuroanatomista espanhol Santiago Ramon y Cajal. Analisando o hipocampo humano adulto, Cajal observou Astrocitos gemelos sugerindo que astrcitos pudessem proliferar, dando origem a outros tipos celulares. Hoje, sabemos que as clulas gliais (glial radial, astrcitos, ependimcitos) tm funo essencial como progenitores neurais, tanto ao longo do desenvolvimento quanto no indivduo adulto. Em virtude de suas relaes com o sistema vascular, Cajal sugeriu que os astrcitos intermediavam a transferncia de substncias nutritivas para os neurnios (pela movimentao de seus ps vasculares os astrcitos modulam a dilatao e constrio das arterolas...); sabemos hoje que os astrcitos tm papel essencial na manuteno do tnus vascular, atravs da sntese e secreo de uma srie de molculas vasoativas. Mais ainda, o contato dos astrcitos com os soma e terminaes axonais fez que Cajal sugerisse que as clulas gliais tinham uma ntima relao com as sinapses. Como veremos neste estudo, os astrcitos tm papel essencial na modulao do ambiente sinptico. Os meados do sculo XIX foram marcados por uma grande revoluo conceitual na cincia. Em 1839, surge a Teoria Celular proposta pelo botnico Matthias Jakob Schleiden e o siologista Theodor Schwann, alemes, que estabelecia a clula como a unidade morfosiolgica de todos os seres vivos. Utilizando uma tcnica histolgica de impregnao pela prata, o neurocitologista espanhol Santiago Ramn y Cajal descreveu o que denominou de primeiro elemento do SNC o neurnio, elaborando em 1889 a Doutrinal Neuronal, que, baseada na Teoria Celular de Scheleiden e Schwann, determinava ser o neurnio a unidade funcional do sistema nervoso. Embora, como veremos a seguir, Ramon y Cajal tenha contribudo enormemente para a neurocincia contempornea, a Teoria Neuronal representou por dcadas um obstculo ao entendimento do papel das outras clulas neurais. H 150 anos, em 3 de abril de 1858, aos 37 anos de idade, o patologista alemo Rudolf Virchow (1821-1902) anunciava numa conferncia no Instituto de Patologia da Universidade de Berlim uma nova descoberta sobre o tecido cerebral. Analisando tecidos humanos post mortem em 1846, Virchow notou a presena de uma substncia conectiva de natureza acelular no crebro e medula, na qual estavam embebidos os elementos do sistema nervoso. A essa substncia, Virchow deu o nome de Nervenkitt (cimento de nervo), mais tarde traduzida como neuroglia. Nessa poca, Virchow atribuiu glia uma nica funo, de suporte, cola, das clulas neuronais. Certamente, o patologista no imaginava que mais tarde essas clulas assumiriam um papel to relevante quanto seus parceiros, neurnios, no funcionamento do sistema nervoso. O primeiro tipo glial foi descrito em 1851 por Heinrich Mller, na retina de diferentes espcies (peixes, anfbios, aves e humanos): as clulas radiais, conhecidas hoje como as clulas de Mller. Tambm em meados do sculo XIX, Otto Deiters desenhou ilustraes de um tipo de clula que se assemelha nossa

62

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

noo moderna de um astrcito, tipo glial mais abundante e que ser o foco deste estudo. Contribuies adicionais no campo da identidade das clulas gliais resultaram dos esforos de diversos histologistas, em particular Camillo Golgi, Santiago Ramn y Cajal e Po Del Ro Hortega (Somjen, 1988). Utilizando uma variedade de tcnicas de colorao tecidual e microscopia, descreveram uma ampla diversidade de clulas gliais no crebro dos vertebrados. Por suas descobertas, o neuroanatomista espanhol Santiago Ramon y Cajal e o patologista italiano Camillo Golgi compartilharam o prmio Nobel de Medicina e Fisiologia em 1906. A neuroglia pode ser classicada no SNC em dois grandes grupos distintos morfolgica e funcionalmente, de acordo com sua origem embriolgica: a microglia, de origem mesodermal, e a macroglia, de origem ectodermal (Ransom; Kettenmann, 1990). A microglia, descrita inicialmente por Po Del Ro Hortega em 1932, tem como principal funo a defesa imune do SNC, sendo, em geral, recrutada aps infeces, leses ou doenas degenerativas do SN. Quando ativada no stio da leso, a microglia sofre mudanas morfolgicas, tornando-se capaz de proliferar intensamente e realizar fagocitose. A ativao dessas clulas tem importantes consequncias siopatolgicas em doenas infecciosas e neurodegenerativas. A macroglia compreende 1) oligodendroglia, responsvel pela mielinizao dos axnios e composta pelos oligodendrcitos; 2) ependimoglia que compreende os ependimcitos, clulas que revestem os ventrculos enceflicos e o canal central da medula; as clulas epiteliais pigmentares da retina; e as clulas do plexo corioideo, presentes no interior dos ventrculos e que produzem o lquido cefalorraquidiano, lquor; 3) astroglia que inclui astrcitos, principal fonte de fatores de crescimento para os neurnios e presentes em diversas regies do SNC; alm de alguns tipos especializados de astroglia como, glia de Bergmann, no cerebelo; glia de Mller, na retina; tanicitos no hipotlamo e os pituicitos, na neuro-hipse e clulas de glia radial (Ransom; Kettenmann, 2005). Estas ltimas, responsveis por guiar a migrao neuronal durante o desenvolvimento das estruturas em camadas do SN como crtex cerebral, cerebelo e medula espinhal, atualmente tm sido foco de grandes estudos, uma vez que, alm de gerarem astrcitos, so consideradas as principais clulas-tronco do crtex cerebral, gerando, tambm, neurnios. Recentemente, uma nova populao de clulas macroliais tem sido estudada, os polidendrcitos ou sinantcitos, inicialmente descritas como precursoras de oligodendrcitos e caracterizadas, dentre outras, pela expresso do antgeno de superfcie celular, o proteoglicano de condroitin-sulfato NG2 (por isso, tambm chamadas clulas NG2 positivas). No adulto, essas clulas mantm a capacidade proliferativa e participam da modulao das sinapses. Embora essas clulas ainda sejam objeto de muita controvrsia, pelo menos em algumas regies do SNC, acredita-se que tambm possam gerar astrcitos e neurnios durante o desenvolvimento. Recentemente, foi demonstrado que as clulas NG2 residentes no SNC adulto expressam canais voltagem-dependentes. Embora em nveis insucientes para

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

63

a gerao de potencial de ao, essas clulas podem receber inputs sinpticos inibitrios e excitatrios (Trotter et al., 2010), desaando o conceito de que os neurnios sejam as nicas unidades funcionais e de transporte da informao neural, proposta pela Teoria Neuronal do sculo XIX.

Astrcitos: muito alm do clssico conceito de cola de nervo (nerve glue)


O termo astrcito foi originalmente introduzido pelo mdico anatomista hngaro Michael von Lenhossek, em 1893, para descrever clulas em forma de estrela observadas em amostras histolgicas do crebro e medula espinhal humanas. Ao contrrio da viso acelular de Virchow acerca da neuroglia, von Lenhossek percebeu que a neuroglia, na verdade, era uma mistura de diferentes elementos celulares individuais. Os astrcitos (Figura 1) so as clulas gliais mais abundantes no SNC, e constituem aproximadamente metade das clulas do crebro humano. Correspondem a um grupo de clulas heterogneas, com diferentes subtipos, que apresentam diferenas quanto a morfologia, desenvolvimento, metabolismo e siologia. Dentre os mais importantes subtipos podemos citar: astrcitos protoplasmticos, presentes na substncia cinzenta; astrcitos brosos, presentes na substncia branca; astrcitos velados, presentes no cerebelo; astrcitos perivasculares e marginais; astrcitos interlaminares, e os astrcitos de projeo varicosa, estes ltimos caracterizados mais recentemente, apenas em homindeos. Entre as caractersticas gerais dos astrcitos maduros destaca-se a presena de prolongamentos com lamentos intermedirios (brilas gliais), cujo componente principal a protena acdica brilar glial (GFAP); a protena ligadora de clcio, S-100 beta e a enzima conversora de glutamato em glutamina, glutamina sintetase. Mais recentemente, um novo marcador antignico para a clula astrocitria foi identicado, a enzima metablica, aldedo desidrogenase 1 (Aldh1L1), cujo padro de especicidade mostrou-se maior do que o clssico marcador, GFAP (Cahoy et al., 2008). Os astrcitos desempenham uma srie de funes essenciais para a homeostase do SNC (Figura 1), incluindo manuteno dos nveis inicos do meio extracelular, alterados com a descarga de potenciais de ao dos neurnios; captao e liberao de diversos neurotransmissores, tendo um papel crtico no metabolismo do neurtransmissores, glutamato e GABA; participao na formao da barreira hematoenceflica; secreo de fatores trcos essenciais para a sobrevivncia e diferenciao dos neurnios, direcionamento de axnios e formao e funcionamento das sinapses (para reviso Volterra; Meldolesi (2005); Stipursky et al. (2010; 2011; 2012)), este ltimo discutiremos a seguir. Tambm esto envolvidos na regulao do uxo sanguneo cerebral e do acoplamento neurovascular, bem como no auxlio na defesa imune, por meio da sntese e secreo de diversas citocinas inamatrias. Alm disso, essas clulas tm grande impacto no controle energtico cerebral, em razo do fornecimento de energia e metablitos (Rouach et al., 2008).
ESTUDOS AVANADOS

64

27 (77), 2013

Figura 1 Principais funes dos astrcitos.

Evidncias recentes demonstram que astrcitos de algumas regies do SNC, como hipocampo, tambm podem contribuir para a gnese celular no SN adulto atuando tanto como clula-tronco como gerando nichos neurognicos permissivos sobrevivncia de progenitores neuronais e gliais (Stipursky et al., 2010). O nmero cada vez maior de funes astrocitrias, associado ao alto grau de heterogeneidade entre eles, s novas tcnicas de mapeamento gentico e perl de expresso gnica, coloca em evidncia a crise de identidade do astrcito e desaa os neurocientistas: anal, o que um astrcito? Ouso dizer que essa pergunta est longe de ser respondida. Esse fato agravado pela demonstrao da participao dos astrcitos como componentes-chave no desenvolvimento de doenas neurodegenerativas e desordens neurolgicas. Essas evidncias, associadas ao reconhecido aumento da complexidade da astroglia ao longo da escala evolutiva, sugerem que essa classe de clulas tenha desempenhado papel fundamental na organizao do SNC dos vertebrados, incluindo o dos humanos.

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

65

A Pesquisa em glia no Brasil e no mundo: um pouco de histria


As neurocincias surgiram na segunda metade do sculo XX da conuncia dos domnios de siologia, anatomia e bioqumica do sistema nervoso, associados psicologia experimental, neurologia e psiquiatria, e que, mais recentemente, agregou a engenharia, a robtica e a imageologia no invasiva. As neurocincias rapidamente tornaram-se uma das reas mais relevantes do conhecimento humano, frequentemente relatadas como a ltima fronteira do conhecimento (o crebro), apresentando enorme impacto na produo cientca internacional, com grande destaque nos peridicos internacionais de divulgao e na mdia. A dcada do crebro (1990-2000) foi um marco na consolidao das neurocincias, com grande visibilidade para as sociedades e institutos devotados ao estudo dessa cincia, tanto em mbito regional como nacional (SBNeC, Sociedade Brasileira de Neurocincias e Comportamento, Institutos Nacionais de Cincia e Tecnologia) e internacional, destacando a IBRO (International Brain Research Organization), ISN (International Society of Neurochemistry) e a SFN (American Society for Neuroscience), esta ltima hoje com mais de 40 mil aliados. Durante as trs ltimas dcadas, a neurocincia foi cenrio de uma mudana de paradigma caracterizada pelo surgimento de evidncias de que as clulas gliais so componentes celulares ativos no funcionamento e nas patologias do SNC (Barres, 2008). Apesar disso, ainda muito pouco se conhece sobre essas clulas, tanto na sociedade cientca quanto na comunidade leiga. Nos ltimos anos, tanto no Brasil quanto no mundo, os grupos de pesquisa interessados em estudar as clulas gliais apresentaram um considervel aumento. Para isso, o Brasil contou com o pioneirismo de grandes estudiosos da glia, como os professores Vivaldo Moura Neto e Leny Alves Cavalcante, ambos da Universidade Federal do Rio de Janeiro. Apesar do aumento da comunidade glial, os grupos da Amrica do Sul que estudam o tema ainda esto desarticulados e aqum do seu potencial colaborativo se comparados com aqueles da Europa e dos Estados Unidos. Foi nesse cenrio, e fruto da percepo da necessidade de criao de um frum especco para a discusso sobre esse tema que, h aproximadamente dois anos, nasceu o Instituto Sulamericano da Glia (iGLIA). Esse Instituto tem como objetivo a integrao de grupos de pesquisa com interesse na clula glial, de Brasil, Argentina, Chile e Uruguai, promovendo o desenvolvimento e a cooperao de atividades multidisciplinares que discutam avanos do conhecimento sobre a participao das clulas gliais tanto no desenvolvimento quanto nas patologias cerebrais, alm de contribuir para a formao de recursos humanos nessa rea. A rede formada, atualmente, por quatro pases, totalizando aproximadamente oitenta pesquisadores subdivididos em trinta grupos de pesquisas e 25 diferentes instituies: Brasil (vinte grupos distribudos por todas as regies do pas), Argentina (cinco grupos), Chile (dois grupos) e Uruguai (trs grupos). A rede desenvolve projetos de fronteira, incluindo 1) investigao do po-

66

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

tencial neurognico e gliognico de clulas-tronco neurais (diferentes tipos de clulas gliais) durante o desenvolvimento e na fase adulta; em processos degenerativos e regenerativos; 2) Investigao da contribuio das funes e disfunes gliais no estabelecimento e progresso de doenas do SNC e SN perifrico. O propsito da Rede Glial integrar esses grupos promovendo eventos cientcos que potencialize interaes, alavancando, fortalecendo e consolidando a ps-graduao com nfase no papel da clula glial, reetindo no aumento da qualidade das publicaes e formao de recursos humanos, ii) integrar pesquisadores sul-americanos com projetos de interesse para a comunidade glial brasileira, alm de estimular a colaborao cientca intrarregional, como forma de contribuir para a diminuio das assimetrias nacionais e, eventualmente, mudar de modo substancial a participao do continente no cenrio mundial.

A glia e a transmisso da informao neural: papel dos astrcitos no funcionamento das sinapses
A transmisso sinptica constitui a base para a maior parte dos eventos de transferncia de informao no SNC. A acuidade e a complexidade desses processos durante o desenvolvimento humano formam o substrato para atividades superiores como aprendizado, memria, percepo e cognio. Dcits no estabelecimento e funes das sinapses podem acarretar uma srie de desordens neurolgicas incluindo autismo, epilepsia, esquizofrenia e, mais recentemente, tem sido associado a doenas neurodegenerativas, como a doena de Alzheimer. Alm disso, grande parte do insucesso da Medicina Regenerativa e Terapia Celular em processos neurodegenerativos ou ps-traumticos no encfalo advm da inecincia na integrao e formao de sinapses de novos neurnios na circuitaria neural preformada. Durante a ltima dcada, participar das sinapses e da transferncia de informao neural deixou de ser privilgio dos neurnios. Evidncias crescentes vm corroborando para o papel dos astrcitos em diversas etapas da formao, eliminao, estabilizao e eccia das sinapses (Gomes et al., 2001; Stipursky et al., 2010; 2011; 2012). No entanto, apenas recentemente o mecanismo preciso pelo qual esses processos ocorrem vem sendo desvendado. Compreender os mecanismos de formao dos circuitos neuronais e o estabelecimento de sinapses funcionais essencial para o sucesso de abordagens teraputicas capazes de restaurar o sistema nervoso humano. As sinapses representam o elemento central funcional do sistema nervoso; elas so classicamente descritas como uma regio de encontro entre um neurnio pr-sinptico com um neurnio ps-sinptico, no qual o neurnio pr-sinptico produz mensageiros qumicos, denominados neurotransmissores, que cam armazenados em vesculas sinpticas. Na sinapse qumica, o neurnio pr-sinptico libera o neurotransmissor que se liga ao seu receptor presente na membrana do terminal ps-sinptico. Esse evento desencadeia uma resposta eltrica, levando excitao ou inibio do neurnio ps-sinptico (Figura 2) (Pyka et al., 2011).
ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

67

Figura 2 Estrutura da sinapse tripartite: composta pelos neurnios pr e ps-sinpticos (em azul) e a clula astrocitria (em verde). Pr-sinapse: Antes do lanamento na fenda sinptica, o neurotransmissor glutamato empacotado em vesculas que controlam a concentrao de glutamato liberado na fenda sinptica. Atravs de impulsos, ocorre a fuso das vesculas sinpticas na membrana plasmtica e a consequente liberao do glutamato para a fenda sinptica. O receptor metabotrpico tipo II mGluR tambm est presente pr-sinapticamente, e pode limitar diretamente a liberao sinptica de glutamato. Astrcito: pode liberar diretamente o glutamato, regulando a atividade pr- e ps-sinptica. Aps a liberao de glutamato, este rapidamente distribudo na fenda sinptica, ativando receptores na regio pr-sinptica. O excesso de glutamato na fenda sinptica removido pelos transportadores astrocitrios. Ps-sinapse: receptores do tipo AMPA, quando ativados pelo glutamato, permitem inuxo de sdio e a consequente despolarizao da membrana neuronal, desempenhando um papel importante na aprendizagem e na memria por meio de regulao do metabolismo do clcio, plasticidade, e estresse oxidativo. J os receptores do tipo NMDA (N-metil D-Aspartato), tambm so ativados pelo glutamato, juntamente com seu co-agonista, a D-serina.

O efeito sobre a clula ps-sinptica dependente das propriedades do binmio neurotransmissor-receptor podendo levar a respostas excitatrias ou inibitrias. Alguns neurotransmissores excitatrios, como o glutamato, apresen68

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

ta como efeito biolgico uma excitao da clula ps-sinptica, isto , aumenta a probabilidade desse neurnio de disparar um potencial de ao. Outros neurotransmissores, tais como o GABA (cido gama-aminobutrico), tm efeitos inibitrios (embora o GABA, possa funcionar como um neurotransmissor excitatrio durante as primeiras semanas do desenvolvimento (Porcher et al., 2011), isto , aumentam a chance de hiperpolarizao da clula ps-sinptica. Durante muitos anos, o conceito clssico de sinapse qumica baseou-se na sinapse bipartite, cujos componentes centrais eram os neurnios, pr- e ps-sinpticos. Esse cenrio comeou a ser alterado a partir do nal da dcada de 1990, com o surgimento de estudos que desaavam esse conceito e emergiam com um novo de que a funo cerebral decorrente de uma atividade coordenada de uma rede composta pelos neurnios e clulas gliais (Figura 2) (Araque; Perea, 2004; Perea et al., 2009). A partir da dcada de 1990, os neurocientistas Alfonso Araque, Vladimir Parpura e Philip Haydon introduzem o termo sinapse tripartite, vocbulo que se refere a um conceito estrutural e siolgico baseado na presena de uma comunicao bidirecional entre os astrcitos e neurnios no ambiente sinptico. ntima relao fsica entre processos astrogliais e neurnios nos terminais sinpticos inicialmente observada e descrita (embora no interpretada) por Santiago Ramon y Cajal, utilizando colorao histolgica pela prata e mais tarde conrmada pela tcnica de microscopia eletrnica de transmisso (Araque et al., 1999; Halassa et al., 2009; Perea et al., 2009) foi adicionado o conceito de que glia e sinapse trocam informaes, molculas, fatores trcos, neurotransmissores etc. Mais do que o contato fsico, a sinapse tripartite impe que a relao entre neurnios e clulas gliais funcional. A observao de que astrcitos expressam uma srie de receptores de neurotransmissores na sua membrana, assim como a identicao da sntese e secreo dos chamados gliomoduladores pelos astrcitos, mostraram que essas clulas so responsivas s atividades neuronais, bem como podem modul-las. Mais recentemente, o grupo de Beth Stevens, da Universidade de Harvard, adicionou um novo conceito sinapse qumica, o de sinapse quad-partite, que prev no s a participao dos neurnios pr e ps-sinpticos e dos astrcitos, mas a presena da microglia, recentemente descrita como importante no processo de eliminao e establizao das sinapses (Schafer et al., 2013). A primeira evidncia experimental que comprovou o papel de fatores solveis (molculas secretadas pelos astrcitos no meio extracelular com ao na clula neuronal) astrocitrios como reguladores das sinapses foi descrita pelo grupo de Ben Barres da Universidade de Stanford (Pfrieger; Barres, 1997; Barker et al., 2008). Nesse estudo, utilizando um modelo de cultura de neurnios de retina, os autores demonstraram que neurnios cultivados na ausncia de astrcitos apresentavam baixa atividade eletrosiolgica. Em contrapartida, os neurnios apresentavam nveis elevados de atividade sinptica, quando cultivados na presena de uma camada de astrcitos ou na presena dos fatores solveis liberados por eles.

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

69

Atualmente, a propriedade sinaptognica dos astrcitos foi conrmada para diferentes modelos experimentais e diversas regies do SNC e SNP. Diversas molculas derivadas de astrcitos promotoras de sinaptognese foram identicadas, incluindo as molculas de matriz extracelular, trombospondina, hevina e o sulfato de condroitin; o colesterol e as citocinas, TNF- e TGF-1, esta ltima, recentemente, identicada por nosso grupo, como falaremos a seguir. A primeira molecula sinaptognica derivada de astrcito descrita foi o lipidio, constituinte de membrana, colesterol. Os neurnios do SNC sintetizam colesterol em nveis sucientes para sua sobrevivncia; no entanto, para a formao de um grande nmero de sinapses maduras necessria uma ampla quantidade dessa substncia, sendo a disponibilidade de colesterol um limitante para a maturao sinptica. Em 2001, o grupo de Frank Pfrieger caracterizou o colesterol ligado apolipoprotena-E como o primeiro fator solvel secretado por astrcitos regulador da sinaptognese. Decits na homeostase do colesterol ou lipoprotenas esto associados a defeitos sinpticos e comportamentais em roedores. Os astrcitos constituem a pricipal fonte de molculas de matriz extracelular para os neurnios. Diversas molculas de matriz extracelular sintetizadas por astrcitos apresentam efeito sinaptognico como a trombospondina (TSP), hevina e glipican. Recentemente, foi demonstrado que astrcitos humanos oriundos de pacientes com sndrome de Down apresentam uma reduo drstica na produo de TSP, tal fato acarreta um quadro de dcit no nmero de sinapses e no grau de maturao delas, sugerindo um papel dos astrcitos na etiologia dessa doena. Recentemente, nosso grupo demonstrou que a citocina TGF-1 (fator de crescimento transformante beta 1) secretada por astrcitos do crtex cerebral de camundongos e humanos induz a formao de sinapses. Em mamferos, a famlia TGF- composta por trs membros (TGF-1, TGF-2 e TGF-3) que sinalizam atravs de trs classes de receptores do tipo serina treonina cinases: o receptor do tipo I (TR-I), o receptor do tipo II (TR-II) e o receptor do tipo III (TR-III) que foram classicados de acordo com o peso molecular de cada membro (53, 70-100, 200-400 kDa, respectivamente). Os receptores do tipo I e II so responsveis pela transduo do sinal, enquanto o receptor do tipo III auxilia na ligao do fator aos outros receptores. A sinalizao cannica de TGF-1 envolve a ligao do fator ao dmero de TR-II, que recruta o dmero de TR-I, originando um complexo hetero-tetramrico com o ligante. Ento, TR-II fosforila resduos de serina de TR-I, tal fato, promove a ativao de TR-I que d incio a uma cascata de fosforilao dos fatores de transcrio da famlia Smads (R-Smads, receptores-regulados por Smads,: Smad2 e Smad3). A fosforilao de Smad2-3 seguida por sua associao com Smad 4 (a comum Smad Co-Smad), formao de complexos heteromricos no citoplasma e sua translocao nuclear, culminando com o controle da expresso dos genes alvos de TGF-1 (Moustakas, Souchelnytskyi et al., 2001; Derynck & Zhang, 2003).

70

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

Diversas evidncias apontam uma correlao entre a via de sinalizao de TGF- e a funo sinptica em diferentes modelos experimentais. A atividade sinptica neuronal regula a expresso e liberao de TGF-2 e TGF-3, enquanto a despolarizao induzida por ons de K+ ocasiona a translocao nuclear de Smad 2 e regulao dos genes alvos de TGF-, indicando que a atividade sinptica regula a ativao da via de TGF- (Lacmann et al., 2007). As primeiras evidncias experimentais do papel de TGF-1 na sinapse vieram com estudos de formao sinptica e memria no invertebrado, a lesma do mar, Aplsia (Chin et al., 1999; 2006). A importncia dos membros de TGF- na formao e funo sinptica em vertebrados foi corroborada, recentemente, com a gerao de animais mutantes para membros desta via de sinalizao. A deleo de TGF-2 ou de Smad 4 (transdutora nuclear comum para os membros da famlia TGF-) em camundongos est associada a disfunes sinpticas e cognitivas graves (Heupel et al., 2008). Recentemente, tm crescido as evidncias de que as clulas gliais podem controlar a formao e funo sinptica atravs da sntese e secreo de TGF-1, tanto no SNC quanto perifrico (SNP). A secreo de TGF-1 pelas clulas de Schwann, glia responsvel pela mielinizao do SNP, tem papel crucial na induo de clusters de receptores de acetilcolina na juno neuromuscular (Feng; Ko, 2008). Corroborando o papel de TGF-1 como mediador dos efeitos sinaptognicos da glia, camundongos transgnicos com superexpresso de TGF-1 nos astrcitos apresentam aumento da responsividade ao neurotransmissor glutamato em neurnios do hipocampo (Bae et al., 2011). A mais recente evidncia experimental do papel de TGF-1 na formao de sinapses excitatrias no SNC foi descrita por nosso grupo (Diniz et al., 2012). Utilizando um largo espectro de abordagens experimentais, que inclui abordagens morfolgica, eletrosiolgica, molecular e farmacolgica, descrevemos que astrcitos de crtex cerebral de camundongos e humanos regulam a formao de sinapses excitatrias atravs da secreo de TGF-1 (Figura 3). Utilizando uma cultura puricada de clulas do sistema nervoso, astrcitos e neurnios, mostramos que a secreo de TGF-1 pelos astrcitos induz a sntese e secreo de uma segunda molcula, o neuromodulador D-serina (Figura 3). A D-Serina um d-aminocido, descrito como o principal coagonista do receptor glutamatrgico N-metil D-Aspartato (NMDA) no crtex cerebral (Fossat et al., 2011). Essa molcula tem forte envolvimento na formao da potenciao de longa durao (LTP), plasticidade sinptica e memria (Yang et al., 2003; Henneberger et al., 2010). Recentemente, foi demostrado que a administrao sistmica de D-Serina, em camundongos, resulta em melhora na memria de reconhecimento, trabalho e aprendizado (Bado et al., 2011). Em contrapartida, animais que apresentam a deleo da enzima Serina Racemase (responsvel pela produo de D-Serina), tem dimuio do nmero de prolongamentos, no tamanho e na densidade de espinhas dendriticas neuronais, resultando em dcits cognitivos e sinpticos (Devito et al., 2011).

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

71

Figura 3 Astrcitos induzem a formao de sinapse atravs da produo de TGF-1. Os astrcitos constituem importantes fontes da protena TGF-1. Essa citocina lanada no meio extracelular e liga-se aos receptores presentes na membrana da clula neuronal. De uma maneira ainda desconhecida, esse evento desencadeia um aumento nos nveis do aminocido, D-Serina, no espao extracelular. A D-Serina, em associao com o glutamato, ativa uma classe de receptores glutamatrgicos chamados de receptores do tipo NMDA (N-metil D-Aspartato). A ativao desse receptor provoca um aumento do nmero de sinapses glutamatrgicas (ou excitatrias) em neurnios do crtex cerebral.

Observamos que a diminuio dos nveis da enzima Serina Racemase atravs de manipulao gnica (RNA de interferncia) inibe a ao de TGF-1, demonstrando que D-serina um mediador de TGF-1 na formao das sinapses de neurnios do crtex cerebral de camundongos. Para investigar o papel da glia humana na formao de sinapses, isolamos astrcitos de material de crebro humano a ser descartado aps cirurgia teraputica para epilepsia. Observamos que astrcitos humanos tambm induzem a formao de sinapses atravs da
72

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

via de sinalizao de TGF-1 embora com ecincia maior do que os murinos (Figura 4). Este trabalho abre perspectivas para se entender no s o papel das clulas gliais na formao das sinapses, mas a caracterizao de um mecanismo conservado evolutivamente do potencial sinaptognico da via de sinalizao de TGF-. Mais ainda, o fato de termos caracterizado o potencial sinaptognico de astrcitos humanos nos desaa a questionar quais as implicaes de defeitos na biologia dos astrcitos para a formao e funcionamento das sinapses. Existe relao entre disfunes astrocitrias e quadros de doenas do sistema nervoso associadas com dcit sinptico e cognitivo?

Figura 4 Isolamento e cultura de astrcitos humanos e murinos. Astrcitos humanos foram isolados do lobo temporal de pacientes submetidos a procedimento cirrgico para tratamento da epilepsia (tecido descartado da cirurgia) (1A, 2A) e mantidos em cultura (3A, 4A). Posteriormente, o meio de cultura contendo os fatores solveis liberados pelos astrcitos foi recolhido (4A) e adicionado a uma cultura de neurnios do crtex cerebral de camundongos (1-4B). Posteriormente, o nmero de sinapses formadas entre esses neurnios foi vericado utilizando marcadores especcos (5).

O lado bom e o lado mau dos astrcitos: as clulas gliais como novos protagonistas das patologias neurais
Alteraes astrocitrias so comuns a diversas patologias neurais e leses cerebrais caracterizadas por alteraes morfolgicas, siolgicas e moleculares
ESTUDOS AVANADOS
27 (77), 2013

73

nos astrcitos, conhecidas como reatividade astrocitria (Quadro 1). Na reatividade astrocitria, a clula tem um ganho de funes anormais e perde a capacidade de exercer suas funes de suporte do tecido neural. Esse processo constitudo por um grupo de alteraes graduais, como mudanas na morfologia, na expresso de um grande nmero de protenas e na captao e liberao de diversos fatores. Esse proceso ambguo e muitas vezes pode causar um efeito contraditrio, j que em alguns casos exerce um efeito neuroprotetor e, em outros, um resultado negativo, culminando na perda sinptica e at na morte neuronal.
Quadro 1 Efeitos das alteraes astrocitrias em diferentes patologias. Os astrcitos desempenham uma srie de funes no sistema nervoso. Decincias nessas funes so prejudiciais ao tecido nervoso e esto associadas a uma srie de patologias neurais. Se esses efeitos so causa ou consequncia das disfunes nos neurnios uma questo que ainda permanece sob investigao. nion Superxido (O2-), enzima Superxido Dismutase (SOD1), Esclerose Lateral Amiotrca (ELA), transportadores de glutamato (EAAT2/ GLT1), canal reticador de potssio (Kir4.1), Peptdeo amiloide (A)

Dentre as alteraes astrocitrias com efeito benco, podemos observar a formao de cicatrizes gliais, constituda principalmente por astrcitos reativos, resultando na reorganizao da arquitetura do tecido para isolamento fsico da rea da injria (Dong & Benveniste, 2001; Seifert et al., 2006; De Keyser et al., 2008), como a que ocorre no isolamento de placas amiloides e internalizao de peptdeos de A observados na doena de Alzheimer (Dong; Benveniste, 2001); reconstruo da barreira hematoenceflica (Attwell et al., 2010); alm da liberao de vrios fatores neuroprotetores como citocinas anti-inamatrias, neurotronas e fatores de crescimento (Moisse; Strong, 2006).

74

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

Astrcitos reativos tm uma reduo na sua capacidade de sequestrar espcies reativas de oxignio (EROs), devido diminuio na liberao de enzimas antioxidantes. Como os astrcitos so as principais clulas de defesa antioxidante no tecido nervoso, os nveis de radicais lives e outros tipos de espcies reativas de oxignio aumentam signicativamente em diversas patologias com reatividade astrocitria. Associado a isso, quando reativos, os prprios astrcitos so mais vulnerveis a desbalanos metablicos e mitocondriais, o que os torna tambm produtores de estresse oxidativo. Alm disso, a capacidade de regular os nveis neurotransmissores na fenda sinptica, importante funo astrocitria est prejudicada em diversas patologias. Esse processo caracterizado pela elevao da concentrao de glutamato extracelular e estimulao excessiva de receptores de glutamato, conhecido como excitotoxicidade do glutamato e responsvel por perda sinptica e morte neuronal (Rao et al., 2003). H dcadas, esse quadro de disfuno astrocitria conhecido como uma consequncia da morte ou dcit neuronal; no entanto, nos ltimos anos, tm crescido as evidncias de que disfunes astrocitrias possam ser causas primrias da patognese de diversas doenas neurodegenerativas, tais como a Doena de Parkinson (DP), Doena de Alzheimer (DA), tumor, acidente vascular cerebral, a neurotoxicidade associada ao HIV e Esclerose Lateral Amiotrca (ELA). Esclerose Lateral Amiotrca (ELA): uma doena neurodegenerativa progressiva descrita pela primeira vez no Brasil em 1909, caracterizada pela morte de neurnios motores da medula espinhal, e que at hoje no apresenta cura. Em condies siolgicas, os neurnios motores inervam os msculos esquelticos e so cercados por microglia e astrcitos. Na medula espinhal, eles recebem entradas sinpticas glutamatrgicas pelas bras descendentes. O glutamato liberado pelos terminais pr-sinpticos estimula seus receptores na membrana plasmtica dos neurnios ps-sinpticos e astrcitos (Forsberg et al., 2011). A ao do neurotransmissor nalmente terminada pela interveno do transportador de glutamato EAAT2/GLT1 astrocitrio, que capta o glutamato do ambiente sinptico. Na ELA, os axnios danicados dos neurnios motores nas junes neuromusculares tornam as clulas gliais progressivamente reativas, reduzindo sua capacidade de transportar gluatamato. Como consequencia, h uma diminuio da captao desse neurotransmissor do ambiente extracelular, causando um progressivo aumento de sua concentrao e excitotoxicidade (Vargas; Johnson, 2010). Recentemente, foi descrita nessa patologia a presena de astrcitos aberrantes (AbA), que apresentam maior proliferao prximo a neurnios motores. Esses astrcitos aberrantes possuem marcadores diferentes dos astrcitos normais e apresentam uma mutao na expresso da enzima Cu/Zn Superxido Dismutase (SOD1), causando uma decincia na liberao dessa, que a principal responsvel em converter o nion superoxido em oxignio e perxido de hidrognio, diminuindo signicativamente os nveis deste agressivo radical livre

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

75

(Vargas; Johnson, 2010). Alm desse aumento de estresse oxidativo, recentes estudos in vitro apontam vrias alteraes funcionais nas mitocndrias destes astrcitos aberrantes, causando decincia no consumo de oxignio e controle respiratrio da clula, aumentando signicativamente a produo de espcies reativas de oxignio e prostaglandina D2 pelos astrcitos, gerando um ambiente txico aos neurnios motores (Daz-Amarilla et al., 2011). Epilepsia: um transtorno neurolgico que atinge aproximadamente 50 milhes de pessoas no mundo, 40 milhes delas em pases em desenvolvimento. Na epilepsia, astrcitos reativos ocorrem tanto em animais modelo para a doena como em pacientes com displasia cortical focal, esclerose mesial temporal, esclerose tuberosa, encefalopatia de Rasmussen, entre outras sndromes que causam epilepsia. Nesses casos, os astrcitos apresentam no s reduo da expresso de transportadores de glutamato, o que causa excitotoxicidade, mas reduo da expresso dos canais de potssio reticadores de inuxo (canais Kir4.1) (Bordey; Sontheimer, 1998; Bedner; Steinhuser, 2013) responsveis pela remoo de ons K+ que cam acumulados durante intensa atividade sinptica. Isso causa um desbalano osmtico e aumento local de ons K+, ocasionando crises epilticas e enfatizando a importncia do estudo desta clula como possvel alvo farmacolgico em casos de epilepsia (Devinsky et al., 2013) . Doena de Parkinson (DP): essa patologia foi descrita por James Parkinson, em 1817, como, paralisia agitante, e uma das doenas neurolgicas mais comuns e intrigantes dos dias de hoje. Estima-se uma prevalncia de 100 a 200 casos por 100 mil habitantes, aumentando com a idade (Tanner et al., 1999). Clinicamente, essa patologia descrita como uma desordem neurodegenerativa crnica e progressiva, caracterizada por tremores, bradicinesia, rigidez, lentido de movimentos e perda de equilbrio. As principais caractersticas neuropatolgicas so degenerao e morte dos neurnios pigmentados dopaminrgicos da poro compacta da substncia negra e diminuio dos neurnios dopaminrgicos no estriatum. Com a progresso da doena, possvel observar incluses eosinoflicas intracitoplasmticas (corpos de Lewy) que so utilizadas como marcadores da doena. Os corpos de Lewy so agregados proteicos compostos principalmente por -sinuclena, protena de aproximadamente 14 KDa presente nos neurnios de todo os sistema nervoso central (Irizarry et al., 1998), e encontrada na maioria dos compartimentos celulares, porm em maior quantidade nos terminais pr-sinpticos (Spillantini et al., 1994). A funo siolgica da -sinuclena ainda no foi totalmente elucidada, mas evidncias apontam papel na liberao vesicular de alguns neurotransmissores, incluindo a dopamina (Fortin et al., 2010). Em condies patolgicas, a -sinuclena pode formar agregados oligomricos solveis ou briliares e insolveis, que apresentam nveis variados de neurotoxicidade. Os astrcitos tem a

76

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

capacidade de captar essas formas de -sinuclena e degrad-las via lisossomos, funo prejudicada na DP (Lee et al., 2010). Doena de Alzheimer (DA): a forma mais comum de demncia nos idosos, representando 50%-80% do total de casos (Abbott, 2011). Em 2010, o total de pessoas no mundo com demncia alcanava 35,6 milhes (aproximadamente 0,5% da populao mundial), e esse nmero deve alcanar 67,5 milhes em 2030 e 115,4 milhes em 2050, devido ao aumento de expectativa de vida das populaes, especialmente nos pases em desenvolvimento (Abbott, 2011). A DA foi primeiramente descrita em 1906, pelo neuropatologista alemo Alois Alzheimer, que em seu primeiro relato observou, dentre outros dcits cognitivos, alteraes comportamentais, delrios e perda de memria. As leses neuropatolgicas caractersticas da DA foram identicadas apenas aproximadamente 80 anos depois da descrio da doena e caram conhecidas como emaranhados neurobrilares, e placas senis ou amiloides. Apesar dos avanos diagnsticos na DA, aps mais de cem anos desde a primeira descrio da doena, ainda no esto totalmente elucidados os mecanismos envolvidos em sua patognese. Durante muitos anos, as placas amiloides foram consideradas o achado siopatolgico decisivo para a caracterizao e desenvolvimento da DA. No entanto, vrios estudos nas ltimas dcadas demonstraram que essas placas, formadas por grandes agregados extracelulares de peptdeos -amiloide (A), so fracamente relacionadas com o declnio cognitivo (McLean et al., 1999; Nslund et al., 2000). O peptdeo A gerado a partir da clivagem da protena precursora amiloide (APP); protena transmembrana abundante no sistema nervoso central, onde exerce vrias funes de regulao celular, e est envolvida na plasticidade sinptica e sinaptognese (Gralle; Ferreira, 2007). Dada a presena de uma regio hidrofbica em sua sequncia, esses monmeros do peptdeo A tendem a agregar, formando estruturas maiores (como dmeros, trmeros, tetrmeros e agregados de maior peso molecular) conhecidos como oligmeros de A (AOs). A partir da dcada de 1990, cresceram as evidncias de que essas formas oligomricas so as principais responsveis pela neurotoxicidade observada no crebro de pacientes com DA (Gong et al., 2003; Ferreira et al., 2007). Formas oligomricas pequenas e solveis de A, conhecidas tambm como ADDL (do ingls A-Derived Diffusible Ligands), tambm promovem danos aos neurnios; alm disso, a toxicidade desses oligmeros de A resulta em severa disfuno da plasticidade sinptica, incluindo a diminuio da potenciao de longa durao (LTP) e facilitando a depresso de longa durao (LTD) (Lambert et al., 1998; Gong et al., 2003). Acreditava-se que a presena de astrcitos reativos na DA era restrita regio da placa amiloide, porm so crescentes os estudos que demonstram que astrcitos reativos ocorrem em locais distantes da placa amilide (Simpson et

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

77

al., 2010), ou at mesmo na ausncia de deposio de A (White et al., 2005). Em paralelo com esses dados, estudos com animais transgnicos modelos para DA demonstram que a ativao glial precede deposio de placas amiloides, provavelmente em resposta a oligmeros ou protobrilas (White et al., 2005; Heneka et al., 2005). A complexidade da relao entre astrcitos reativos e DA tambm enfatizada pelo aumento na concentrao de protenas especcas de astrcitos, como S100 (Petzold et al., 2003), GFAP (Fukuyama et al., 2001) e ACT (1antiquimiotripsina) (Nielsen et al., 2007) no uido cerebroespinal de pacientes com DA. Os nveis e atividade dos transportadores de glutamato astrocitrios tambm so afetados signicativamente na DA, potencializando o fenmeno conhecido como excitotoxicidade glutamatrgica (Koh et al., 1990; Mattson et al., 1992; Harkany et al., 2000; Louzada et al., 2001; Tominaga-Yoshino et al., 2001). Esse processo excitotxico autopropagvel, pois os neurnios que morrem liberam mais glutamato para o meio extracelular, ativando mais receptores e promovendo um ciclo de injria neuronal. Nessa perspectiva entender a biologia astrocitria nas neurodegenerao do SNC constitui um importante desao para o desenvolvimento de estratgias teraputicas nessas desordens. Os astrcitos tambm so personagens de destaque em algumas doenas neurodegenerativas raras, como a doena de Alexander. Essa patologia foi descrita, em 1949, por dois patologistas, o neozelandsWilliam Stuart Alexander e a australiana Dorothy Rusell, no Hospital de Londres. Analisando o caso de um menino de 15 meses de idade acometido por uma doena neurolgica associada a hidrocefalia, os mdicos observaram que o crebro da criana continha mielina anormal e astrcitos exibindo alteraes degenerativas e proliferativas (Mignot et al., 2004). Atualmente, sabe-se que essa encefalopatia causada por mais de vinte mutaes no gene que codica GFAP, ocasionando astrcitos distrcos com agregados de lamentos intermedirios associados a alteraes progressivas na bainha de mielina, macrocefalia progressiva, retardo no desenvolvimento psicomotor, atraso mental, ataxia e ataques epilpticos.

Perspectivas: o que esperar do conhecimento sobre as clulas gliais na prxima dcada?


O conhecimento sobre as clulas da glia sofreu uma revoluo nos ltimos anos quando praticamente todos os dogmas sobre o que se conhecia acerca dessas clulas foram quebrados, um a um, criando novos paradigmas para o funcionamento do sistema nervoso, tais como a descoberta de que clulas gliais so excitveis e se comunicam qumica e eletricamente com outras clulas ou, ainda, so clulas-tronco, podendo gerar diferentes tipos celulares. Esses novos paradigmas somente a partir de 2010 comeam a ser testados congurando-se, sem dvida, um dos temas mais efervescentes na neurocincia atual. Certamente, demos um grande passo da glia passiva descrita por Virchow quase um sculo atrs, para os astrcitos atuais. No entanto, apesar disso, muitas
ESTUDOS AVANADOS

78

27 (77), 2013

questes permanecem sobre a biologia glial. Se a disfuno glial o dcit primrio ou uma consequncia do dano neuronal um fato ainda a ser investigado. Essa questo torna-se ainda mais complexa diante do cenrio atual de que as clulas gliais so heterogneas, tanto no que se refere expresso de diferentes fatores de crescimento, receptores de neurotransmissores, marcadores moleculares, quanto no que se refere ao potencial sinaptognico e como progenitores neurais. A identicao de molculas derivadas de glia, moduladoras da funo sinptica, pode no s abrir um novo caminho para compreender o mecanismo envolvido nas doenas neurolgicas associadas disfuno sinptica, mas ajudar a conceber novas abordagens teraputicas para danos cerebrais. De fato, a gerao de abordagens de terapias celulares para reposio de clulas gliais (e no neuronais) em tecidos lesados, assim como o desenvolvimento de frmacos tendo como alvo as clulas gliais poder abrir novas perspectivas para a restaurao do crebro humano. O nmero relativo de astrcitos expresso como uma proporo do nmero neuronal parece aumentar com a logenia e complexidade do crebro (Nedergaard et al., 2003). Tem sido proposto que a evoluo cortical do crebro humano seja acompanhado por aumento da complexidade da forma e da funo dos astrcitos, o que reete uma expanso do seu papel funcional na modulao sinptica e circuitos corticais. Isso exemplicado pela observao de que cada domnio de um astrcito roedor nico abrange cerca de 90 mil sinapses, ao passo que no crtex humano cada astrcito modula a funo de cerca de dois milhes de sinapses. Embora no se possa atribuir completamente a capacidade intelectual dos seres humanos complexidade de astrcitos, a perda de domnios astrocticos (rede neuronal alimentada por um nico astrcito) tem sido associada a distrbios da funo neuronal, encontrados em vrias desordens neurolgicas tais como epilepsia e esquizofrenia. Podemos especular que a combinao na entre diferentes modos de transferncia de informao na circuitaria neuronal (potencial de ao) e glial (ondas de clcio) seja determinante para a funo do crebro na produo de pensamentos, memrias e emoes, o que, em essncia, dene a nossa natureza humana.
* * *

Eu me preparava para terminar o texto aqui, quando um reprter me contatou pedindo para que eu desse uma entrevista acerca de um novo estudo sobre glia que acabara de ser publicado na conceituada revista Cell Stem Cell. Ttulo da reportagem: Glia humana torna camundongos mais inteligentes. O grupo da pesquisadora Maiken Nedergaard, da Universidade de Rochester, Estados Unidos, acabara de demonstrar que o transplante de clulas gliais humanas em camundongos estimula a plasticidade sinptica e o aprendizado nesses animais (Han et al., 2013). Os autores isolaram progenitores gliais de fetos humanos (obtidos por aborto espontneo) e os enxertaram no crebro de camundongos. Essas clulas deram origem a astrcitos funcionais que se comunicavam atravs
ESTUDOS AVANADOS
79

27 (77), 2013

de ondas de clcio mas com caractersticas siolgicas e morfolgicas diferentes dos astrcitos dos camundongos. Camundongos transplantados com astrcitos humanos tiveram incremento da plasticidade sinptica e facilitao do seu aprendizado, ao contrrio daqueles transplantados com astrcitos de roedores. Dessa forma, reescrevo o que seria o ltimo pargrafo do meu texto, na expectativa de que a pesquisa sobre as clulas gliais ainda nos reserve muitas outras surpresas... A combinao entre diferentes modos de transferncia de informao na circuitaria neuronal e, especialmente, glial determinante para a funo do crebro humano na produo de pensamentos, memrias e emoes, o que, em essncia, denem a nossa natureza humana.

Referncias
ABBOTT, A. Dementia: a problem for our age. Nature, v.475, n.7355, p.S2-4, 2011. ARAQUE, A.; PEREA, G. Glial modulation of synaptic transmission in culture. Glia, v.47, n.3, p.241-8, 2004. ARAQUE, A. et al. Tripartite synapses: glia, the unacknowledged partner. Trends Neurosci., v.22, n.5, p.208-15, 1999. ATTWELL, D. et al. Glial and neuronal control of brain blood ow. Nature, v.468, p.232-43, 2010. BADO,P. et al. Effects of low-doseD-serineon recognition and working memory in mice. Psychopharmacol.,v.218, n.3, p.461-70, 2011. BAE, J. J. et al. Increased transforming growth factor-1 modulates glutamate receptor expression in the hippocampus. Int. J Physiol. Pathophysiol. Pharmacol., v.3, n.1, p.9-20, 2011. BARKER, A. J. et al. Developmental control of synaptic receptivity. J Neurosci., v.13, n.28, 33, p.8150-60, 2008. BARRES,B. A. The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease. Neuron 6; 60(3):430-440: 10.1016. Review. 2008. BEDNER, P.;STEINHUSER, C. AlteredKirandgapjunctionchannelsintemporal lobeepilepsy. Neurochem. Int.,v.S0197-0186, n.13, 000144, 2013. BORDEY,A.;SONTHEIMER,H. Properties of human glial cells associated with epileptic seizure foci. Epilepsy Res., v.32, n.1-2, p.286-303, 1998. CAHOY,J. D. et al. A transcriptome database for astrocytes, neurons, and oligodendrocytes: a new resource for understanding brain development and function. J. Neurosci., v.28, n,1, p.264-78, 2008. DE KEYSER, J. et al. Dysfunctional astrocytes as key players in the pathogenesis of central nervous system disorders. J Neurol. Sci., v.267, n.1-2, p.3-16, 2008. DERYNCK,R.;ZHANG,Y.E. Smad-dependent and Smad-independent pathways in TGF-beta family signalling. Nature 9;425(6958):577-584,2003.

80

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

DEVINSKY, O.et al. Glia and epilepsy: excitability and inammation. Trends Neurosci.,pii: S0166-2236(12)00205-6, 2013. DEVITO,L. M. et al. Serine racemase deletion disrupts memory for order and alters cortical dendritic morphology. Genes Brain Behav.,v.10, n.2, p.210-22, 2011. DAZ-AMARILLA, P. et al. Phenotypicallyaberrantastrocytesthatpromote motoneurondamagein amodelofinheritedamyotrophic lateral sclerosis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., v.1, 108, n.44, p.18126-131, 2011. DINIZ,L. P. et al. Astrocyte-induced synaptogenesis is mediated by transforming growth factor signaling through modulation of D-serine levels in cerebral cortex neurons. J Biol. Chem., v.30, 287, n.49, p.41432-45, 2012. DONG, Y.; BENVENISTE, E. N. Immune function of astrocytes. Glia, v.36, n.2, p.180-90, 2001. FENG,Z.;KO,C.P. Schwann cells promote synaptogenesis at the neuromuscular junction via transforming growth factor-beta1. J Neurosci. v.24; 28, n.39, p.9599-9609, 2008. FERREIRA,S. T. et al. Soluble proteinoligomersas emerging toxins in Alzheimers and other amyloid diseases. IUBMB Life, v.59, n.4-5, p.332-45, 2007 Review. FORSBERG, K. et al. Glialnuclearaggregatesofsuperoxidedismutase-1areregularlypresentinpatientswithamyotrophic lateral sclerosis. Acta Neuropathol.,v.121, n.5, p.623-34, 2011. FORTIN,G. D. et al. Basal somatodendriticdopaminerelease requires snare proteins. J Neurochem., v.96, n.6, p.1740-9, 2006. FOSSAT,P., et al. Glial D-serine gates NMDA receptors at excitatory synapses in prefrontal cortex. Cereb Cortex. v.22, n.3, p.595-606, 2012. FUKUYAMA, R. et al. The cerebrospinal uid level of glial brillary acidic protein is increased in cerebrospinal uid from Alzheimers disease patients and correlates with severity of dementia. Eur. Neurol., v.46, n.1, p.35-8, 2001. GOMES, F. C. et al. Cross-talk between neurons and glia: highlights on soluble factors. Braz. J Med. Biol. Res.,v.34, n.5, p.611-20, 2001Review. GONG, Y. et al. Alzheimers disease-affected brain: presence of oligomeric A beta ligands (ADDLs) suggests a molecular basis for reversible memory loss. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v.100, p.10417-422, 2003. GRALLE, M.; FERREIRA, S. T. Structure and functions of the human amyloid precursor protein: the whole is more than the sum of its parts. Prog. Neurobiol., v.82, p.111-32, 2007. HALASSA, M. M. et al. Tripartite synapses: roles for astrocytic purines in the control of synaptic physiology and behavior. Neuropharmacol., v.57, n.4, p.343-6, 2009. HAN, X. et al. Forebrain engraftment by human glial progenitor cells enhances synaptic plasticity and learning in adult mice.Cell Stem Cell, v.12, n.3, p.342-53, 2013. HARKANY, T. et al. Beta-amyloid neurotoxicity is mediated by a glutamate-triggered excitotoxic cascade in rat nucleus basalis. Eur. J Neurosci., v.12, n.8, p.2735-45, 2000. HENEKA, M. T. et al. Focal glial activation coincides with increased BACE1 activation and precedes amyloid plaque deposition in APP[V717I] transgenic mice. J Neuroinammation, v.7, p.2-22, 2005.

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

81

HENNEBERGER,C. et al. Long-term potentiation depends on release of D-serine from astrocytes. Nature, v.14, 463, n.7278, p.232-62, 2010. HEUPEL,K., et al. Loss of transforming growth factor-beta 2 leads to impairment of central synapse function. Neural Dev.14;3:25, 2008. IRIZARRY,M. C. et al. Nigral and corticalLewybodies and dystrophic nigral neurites inParkinsons disease and corticalLewybody disease contain alpha-synuclein immunoreactivity. J Neuropathol. Exp. Neurol., v.57, n.4, p.334-7, 1998. KETTENMANN, H.; RANSOM, B. Neuroglia. New York; Oxford: Oxford University Press, 2005. KOH,J. Y. et al. Beta-amyloid protein increases the vulnerability of cultured cortical neurons to excitotoxic damage. Brain Res.,v.19, 533, n.2, p.315-20, 1990. LACMANN,A. et al. Activity-dependent release of transforming growth factor-beta in a neuronal network in vitro. Neurosci. v.12; 150, n.3, p.647-657, 2007. LAMBERT, M. P. et al. Diffusible, nonbrillar ligands derived from A142 are potent central nervous system neurotoxins. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v.95, n.11, p.6448-53, 1998. LEE,H. J. et al. Direct transfer of alpha-synuclein from neuron to astroglia causes inammatory responses in synucleinopathies. J Biol. Chem.,v.19, 285, n.12, p.9262-72, 2010. LOUZADA, P. R. et al. Dual role of glutamatergic neurotransmission on amyloid beta(1-42) aggregation and neurotoxicity in embryonic avian retina. Neurosci. Lett., v.301, n.1, p.59-63, 2001. MATTSON, M. P. et al. Beta-Amyloid peptides destabilize calcium homeostasis and render human cortical neurons vulnerable to excitotoxicity. J Neurosci., v.12, n.2, p.376-89, 1992. McLEAN, C. A. et al. Soluble pool of Abeta amyloid as a determinant of everity of neurodegeneration in Alzheimers disease. Ann. Neurol., v.46, n.6, p.860-6, 1999. MIGNOT, C. et al. Alexanderdisease:putative mechanismsof anastrocytic encephalopathy. Cell. Mol. Life Sci.,v.61, n.3, p.369-85, 2004. MOISSE, K.; STRONG, M. J. Innate immunity in amyotrophic lateral sclerosis. Biochim. Biophys. Acta, v.1762, n.11-12, p.1083-93, 2006. MOUSTAKAS,A., et al. Smad regulation in TGF-beta signal transduction. J Cell Sci. 114(Pt 24):4359-4369, 2001.NSLUND, J. et al. Correlation between elevated levels of amyloid beta-peptide in the brain and cognitive decline. JAMA, v.283, n.12, p.15717, 2000. NEDERGAARD,M. et al. New roles forastrocytes: redening the functional architecture of the brain. Trends Neurosci.,v.26, n.10, p.523-30, 2003 Review. NIELSEN, N. P. et al. Associations between AQT processing speed and neuropsychological tests in neuropsychiatric patients. Am. J Alzheimers Dis. Other Demen., v.22, n.3, p.202-10, 2007. PEREA, G. et al. Tripartite synapses: astrocytes process and control synaptic information. Trends in neurosci., v.32, n.8, p.421-31, 2009. PETZOLD, A. et al. Cerebrospinal uid (CSF) and serum S100B: release and wash-out pattern. Brain Res. Bull., v.15, 61, n.3, p.281-5, 2003.

82

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

PFRIEGER, F. W.; BARRES, B. A. Synaptic efcacy enhanced by glial cells in vitro. Science, v.277, n.5332, p.1684-7, 1997. PORCHER, C. et al. Positive feedback regulation between gamma-aminobutyric acid type A (GABA(A)) receptor signaling and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) release in developing neurons. J Biol. Chem., v.286, n.24, p.21667-77, 2011. PYKA, M. et al. Astrocytes are crucial for survival and maturation of embryonic hippocampal neurons in a neuron-glia cell-insert coculture assay. Synapse, v.65, n.1, p.41-53, 2011. RANSOM,B. R.;KETTENMANN,H. Electrical coupling, without dye coupling, between mammalian astrocytes and oligodendrocytes in cell culture. Glia, v.3, n.4, p.25866, 1990. RAO, T. S. et al. Glutamate-dependent glutamine, aspartate and serine release from rat cortical glial cell cultures. Brain Res., v.18, 978, n.1-2, p.213-22, 2003. ROUACH,N. et al. Astroglial metabolic networks sustain hippocampal synaptic transmission. Science, v.5, 322, n.5907, p.1551-5, 2008. SCHAFER,D. P. et al. The quad-partite synapse: Microglia-synapse interactions in the developing and mature CNS. Glia, v.61, n.1, p.24-36, 2013. SEIFERT G, et al. Astrocyte dysfunction in neurological disorders: a molecular perspective. Nat. Rev. Neurosci., v.7, p.3, p.194-206, 2006. SIMPSON, J. E. et al. Population variation in oxidative stress and astrocyte DNA damage in relation to Alzheimer-type pathology in the ageing brain. Neuropathol. Appl. Neurobiol., v.6, n.1, p.25-40, 2010. SPILLANTINI, M. G. et al. alpha-Synuclein in lamentous inclusions of Lewy bodies fromParkinsons disease and dementia with lewy bodies. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, v.26, 95, n.11, p.6469-73, 1998. SOMJEN,G. G. Nervenkitt: notes on the history of the concept of neuroglia. Glia,v.1, n.1, p.2-9, 1988. STIPURSKY,J. et al. Neuron-astroglial interactions in cell fate commitment in the central nervous system. In: Ulrich, A.H. (Org.). Stem Cells: from tools for studying mechanism of neuronal differentiation towards therapy. Springer, v.1, p.145-164, 2010. _______. Neuron glia signaling: implications for astrocyte differentiation and synapse formation. Life Sci., v.89, p.524-531, 2011. _______. Neuron-astroglial interactions in cell-fate commitment and maturation in the central nervous system. Neurochem Res., v.37, n.11, p.2402-18, 2012. TANNER,C. M. et al. Occupation and risk of parkinsonism: a multicenter case-control study. Arch. Neurol., v.66, n.9, p.1106-13, 2009. TOMINAGA-YOSHINO, K. et al. Neurotoxic and neuroprotective effects of glutamate are enhanced by introduction of amyloid precursor protein cDNA. Brain Res., v.918, n.1-2, p.121-30, 2001. TROTTER,J., et al. NG2cells: Properties, progeny and origin. Brain Res Rev. 63(12): 72-822010, 2010.
VARGAS, M. R.; JOHNSON, J. A. Astrogliosisinamyotrophic sclerosis: lateralroleandtherapeuticpotentialofastrocytes. Neurotherapeutics, v.7, n.4, p.471-81, 2010.

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013

83

VOLTERRA,A.; MELDOLESI,J. Astrocytes, from brain glue to communication elements: the revolution continues. Nat. Rev. Neurosci., v.6, n.8, p.626-40,2005. WHITE, J. A. et al. Differential effects of oligomeric and brillar amyloid-beta 1-42 on astrocyte-mediated inammation. Neurobiol. Dis., v.18, n.3, p.459-65, 2005. YANG,Y. et al. Contribution of astrocytes to hippocampal long-term potentiation through release of D-serine. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., v.9, 100, n.25, p.15194-9, 2003. YOKOYAMA, H. et al. Roleofglialcellsinneurotoxininduced animalmodels of Parkinsons disease. Neurol. Sci., v.32, n.1, p.1-7, 2011. Descritas h mais de 150 anos, as clulas gliais, constituintes do tecido nervoso juntamente com os neurnios, foram consideradas at pouco tempo clulas de suporte do crebro, passivas e margem do seu funcionamento. Especialmente na ltima dcada, as neurocincias foram palco de uma mudana de paradigma relacionada funo e ao papel dessas clulas na siologia e patologia neurais. Neste artigo, discutimos como os avanos acerca do conhecimento sobre os astrcitos, o mais abundante tipo glial, contriburam para o entendimento do funcionamento cerebral. Apresentamos evidncias da relao entre disfunes gliais e doenas neurodegenerativas e desordens neurolgicas, discutindo o potencial papel dessas clulas na elaborao de abordagens teraputicas para o sistema nervoso adulto. PALAVRAS-CHAVE: Clulas gliais, Astrcitos, Interao neurnio-glia, Doenas neurodegenerativas, Sinapses.
RESUMO ABSTRACT Described over 150 years ago, glial cells, nerve tissue constituents together with neurons, were until recently considered supporting cells of the brain. Especially in the last decade, the Neurosciences have witnessed a paradigm shift related to the function and role of these cells in neural physiology and pathology. In this chapter, we discuss how advances in the knowledgement about astrocytes, the most abundant glial cell type, contributed to the understanding of brain functioning. We will present evidence of the relationship between glial dysfunction and neurodegenerative diseases and neurological disorders, discussing the potential role of these cells in the development of therapeutic approaches for the adult nervous system. KEYWORDS:

Glial cells, Astrocytes, Neuron-glia interaction, Neurodegenerative diseases,

Synapses.

Flvia Carvalho Alcantara Gomes professora titular do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade Federal do Rio de Janeiro e chefe do Laboratrio de Neurobiologia Celular do ICB/UFRJ. Desde 2011, coordenadora do Instituto da Glia (iGLIA), rede temtica sulamerica para o estudo das clulas gliais e patologias associadas. @ fgomes@icb.ufrj.br Vanessa Pereira Tortelli doutoranda do Programa de Ps-Graduao em Cincias Morfolgicas da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ). @ vtortelli@yahoo.com.br Luan Diniz mestrando do Programa de Ps-Graduao em Cincias Morfolgicas da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ). @ luan@icb.ufrj.br Recebido em 8.3.2013 e aceito em 18.3.2013.

84

ESTUDOS AVANADOS

27 (77), 2013