Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

Captulo 6. Carcinognesis qumica.

La palabra cncer se utiliza para agrupar aproximadamente 200 enfermedades que se caracterizan por un crecimiento anormal de clulas, situacin que es transmitida a clulas hijas y que se manifiesta por una reduccin del control del crecimiento y la funcin celular. Aunque existen muchas causas que originan este grupo de padecimientos, stas se pueden agrupar en los siguientes grupos: * predisposicin gentica. * factores ambientales (ocupacionales, dieta, frmacos, contaminantes). * factores ambientales interaccionando con predisposiciones genticas. * factores desconocidos. Ejemplos tpicos del primer grupo lo constituyen dos padecimientos cancerosos que se presentan en nios: el retinoblastoma (cncer de la retina), y el neuroblastoma (cncer del cerebro). Del tercer grupo podemos mencionar al xenoderma pigmentoso, una condicin gentica caracterizada por una deficiencia en los mecanismos de reparacin de las rupturas de ADN provocadas por la exposicin a la luz ultravioleta. Aquellos padecimientos cancerosos donde no se ha determinado la participacin de factores genticos o ambientales, se clasifican dentro de causas desconocidas. El segundo y el cuarto grupo, probablemente son los responsables del 60% al 90% de todos los tipos de cncer. Los factores ambientales involucran, en este contexto, no solamente al agua, al aire o al suelo, sino tambin alimentos, bebidas, estilos de vida, exposicin ocupacional, frmacos, y prcticamente todas las interacciones de los individuos con su medio ambiente. Esta definicin implica que una buena parte de los trastornos cancerosos, podran

ser prevenidos al evitar exponerse a agentes que presenten la potencialidad de producirlos (carcingenos = cancergenos). En la Repblica Mexicana la mortalidad por la presencia de tumores malignos ha sufrido cambios en su incidencia. En el periodo de 1955 a 1957 el cncer ocupaba el noveno lugar como causa de mortalidad, y pas al tercer lugar en 1988. De acuerdo a estos datos epidemiolgicos, esta enfermedad constituye un grave problema de salud pblica. En el Instituto Nacional de Cancerologa se ha publicado informacin sobre sus registros de diagnstico de cncer presentes en los pacientes que acuden a esa institucin considerando las edades de los individuos y la aparicin de tumores. El cncer crvico uterino represent el 24 % de todos los pacientes con cncer, y por frecuencia, ocup el primer lugar, independientemente del sexo. El cncer de rganos genitales, junto con los tumores de mama, representaron ms del 50 % de tumores en mujeres mexicanas.

6.1. Los carcingenos qumicos.

Los carcingenos son un tipo de agentes que exhiben un efecto adverso especfico, la produccin de cncer en animales y en seres humanos. Se han dividido en tres grupos que son: sustancias qumicas, agentes fsicos y agentes virales. Dentro de los agentes fsicos se encuentran los rayos X y la luz UV; dentro de los agentes virales podemos citar al virus Epstein Barr que provoca el linfoma de Birkett. En este captulo se van a estudiar los aspectos relacionados con los agentes qumicos, a los cuales denominaremos carcingenos qumicos.

69

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

El hecho de que ciertas sustancias del medio ambiente provoquen varias formas de cncer ha sido conocido desde hace aproximadamente 200 aos. Las primeras conjeturas de que los xenobioticos pudiesen provocar cncer viene de las observaciones de la alta incidencia de esta enfermedad en grupos expuestos laboralmente; aunque se tuvo que esperar mucho tiempo para que las investigaciones en los laboratorios confirmaran estas sospechas.

cncer de piel en conejos, al aplicarles tpicamente, alquitrn de hulla. En la dcada de los 20s, el alquitrn de hulla fue analizado, y los componentes activos encontrados fueron hidrocarburos aromticos policclicos, tales como el dibenz[a,h]antraceno y el benzo[a]pireno.

En la tabla siguiente se presenta de forma resumida la historia de los descubrimientos y las confirmaciones que se dieron a los primeros carcingenos qumicos.
dibenz[a,h]antraceno benzo[a]pireno

Esquema 6.1. Carcingenos encontrados en el alquitrn de hulla Tabla 6.1. Descubrimientos de xenobioticos que causan cncer en seres humanos. Carcingeno observado rgano Registrado por Ao afectado holln escroto Pott 1775 humo de pipas labios Sommering 1795 alquitrn de hulla piel Volkman 1875 colorantes sintticos vejiga Rehn 1895 rayos X piel Van Trieben 1902 extracto de tabaco cavidad oral Abbe 1915 luz solar piel Molesworth 1937 humo de tabaco pulmn Muller 1939 asbestos pleura Wagner 1960 cadmio prstata Kipling, 1967 Waterhouse

En 1860, Alemania se convirti en el centro de manufactura de los colorantes sintticos, que se formaban por aminas aromticas. Treinta aos ms tarde fue sealado que la exposicin a este tipo de compuestos resultaba peligrosa. En 1895, Ludwig Rehn, un cirujano de Frankfurt, report carcinomas de vejigas en trabajadores de las empresas de colorantes. Evidencias epidemiolgicas mostraron que la 2-naftilamina era el carcingeno probable; pero esto no fue confirmado sino hasta 1938, cuando Hupper y colaboradores, en experimentos

Una de las primeras observaciones registradas fue por Sir Percivall Pott en 1775. En Londres, este doctor se percat que muchos de sus pacientes con cncer de escroto (bolsa de piel que cubre los testculos), eran limpiadores de chimeneas domsticas, por lo que relacion la presencia de esta anormalidad con la exposicin al holln y al alquitrn* de hulla presente en esos lugares. Sus anotaciones no fueron confirmadas sino hasta 1916, cuando se pudo inducir

con perros, indujeron carcinoma de vejiga, al alimentarlos con 2-naftilamina. Despus de estos primeros descubrimientos histricos, se han estado reportando otras sustancias carcinognicas. En la actualidad se encuentran registrados y confirmados varios compuestos, tanto sintticos como de origen natural, que pueden provocar cncer en el ser humano. Una muestra, a manera de ejemplos, se presenta en los dos esquemas siguientes.

suatancia resinosa, residuo de la destilacin de la lea de pino o del carbn vegetal (hulla)

70

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

NO2 NH2 N N N(CH3)2 N 2-naftilamina 4-dimetilaminoazobenceno O 4-nitroquinolin-1-oxido O S NH2CNH2 CH3 tiourea 3-metilcolantreno O C2H5 O C NH2 C2H5 N C2H5 dietilnitrosamina N O NH2 C2H5SCH2CH2CHCOOH uretano etionina O N OH HN N N H

Asimismo, debido a la importancia que se ha dado a la contaminacin, hoy en da se ha establecido el potencial carcinognico de algunos contaminantes ambientales.

3-hidroxixantina

Tabla 6.2. Contaminantes ambientales que producen cncer Xenobiotico rgano afectado arsnico piel, pulmn asbestos pulmn, pleura* benceno leucemia ter di(clorometilico) Pulmn cromo Pulmn 2-naftilamina vejiga, nquel pulmn, fosas nasales cloruro de vinilo Hgado productos de la combustin del piel, pulmn, vejiga carbn productos de la combustin del pulmn, faringe, boca, esfago, laringe, tabaco pncreas, vejiga, rin *membrana serosa que tapiza el pulmn

Algunos contaminantes ambientales presentan, aparte de los efectos carcingenos, efectos mutagnicos y teratognicos en roedores.
OCH3 O OCH3

Esquema 6.2. Ejemplos de agentes carcinognicos de origen sintticos

O O O zafrol (azafrn, canela) OH OH H2N HO O H3C OH O quercetina (flavonoide de helechos) OH O mitomicina C (Estreptomices caespitosus ) N NH O O CH2OCNH2 OCH3 H2N CH3 O N C H alcaloides de pirrolizidinas (senecio y heioltropos) CH2CH=CH2 RO N CH3O Cl CH2OCR

O O CH3 griseofulvina (Penicillium griseofulvum)

Tabla 6.3. Efectos crnicos de algunos compuestos presentes en la gasolina Efecto en ratas y ratones Benceno Tolueno Xileno Carcingeno ++++ +++ +++ teratgeno ++ +++ ++ mutgeno +++ ++ ---

Otro grupo de carcingenos son aquellos que se generan en el proceso de coccin de los alimentos, ejemplos de ellos se presentan a continuacin.

N-metil-N-formilhidrazina (hongos no comestibles)

Esquema 6.3. Ejemplos de agentes carcinognicos de origen natural

71

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

CH3 N N H 3-amino-1-metil-5H-pirido(2,3-b)indol (Trp-P-2) NH2 N H3C N N CH3 N 2-amino-3,8-dimetilimidazo(4,5-f)quinoxalina (MeIQx) NH2

NH2 N N CH3 N 2-amino-3-metilimidazo(4,5-f)quinolina (IQ)

* El mecanismo, particularmente con respecto a la interaccin y alteracin de elementos gnicos y otras macromolculas, es diferente con relacin al que presentan otros tipos de sustancias txicas.

6.2.. Crecimientos o cambios que provocan rganos y tejidos mayores que lo normal:

N NH2 N N CH3 2-amino-1-metil-6-fenilimidazo(4,5-b)piridina (PhIP)

* hipertrofia: desarrollo exagerado de los elementos anatmicos de una parte u rgano sin alteracin de su estructura, de lo que resulta un aumento de peso y volumen del rgano. * hiperplasia: incremento del tamao de rganos y tejidos provocado por un aumento del nmero de clulas.

Esquema 6.4. Carcingenos formados durante la coccin de alimentos

En muchos aspectos, los carcingenos qumicos, son similares a los frmacos o a otros agentes txicos. Esta similitud se presenta en las siguientes facetas:

6.2.1. Crecimiento aberrante en rganos y tejidos:

* metaplasia: produccin por las clulas de una especie de tejido distinto del * Sufren biotransformacin, como cualquier xenobiotico. * Sus efectos cambian dependiendo de la especie, raza y sexo de los animales de experimentacin. * Interactan con otros agentes ambientales; sus efectos son algunas veces incrementados o disminuidos (sinergismo y antagonismo). Por otro lado, los carcingenos presentan algunos aspectos distintivos que se pueden resumir en la siguiente forma: que producen normalmente. * displasia: un cambio reversible el cual incluye una alteracin, en la forma o tamao, y relacin en la organizacin de los rganos. * anaplasia: un cambio marcadamente regresivo de un tipo de clula especfica (diferenciada) hacia clulas que presentan naturaleza embrionaria e indiferenciada (no especializada). * neoplasia: nuevo crecimiento relativamente autnomo. El trmino tumor se utiliza como sinnimo. * Sus efectos biolgicos son persistentes, acumulativos y tardos * Dosis fraccionadas son, en algunos casos, ms efectivas que una sola dosis alta (aquellas que alcanzan valores cercanos a su DL50) * cncer. tumor maligno. * quiste: tumor formado por un saco cerrado, normal o accidental, especialmente contiene lquido o sustancia semislida.

72

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

* metstasis: proceso por el cual las clulas tumorales invaden y destruyen otros rganos y tejidos.

6.2.4. Sntomas asociados con enfermedades carcinognicas.

anemia: presente en casi la mitad de los enfermos de cncer. Se considera el primer sntoma de la enfermedad.
Tabla 6.4. Clasificacin de tumores Tumor benigno Tumor Maligno encapsulado no encapsulado no invasivos invasivos poca divisin celular divisiones celulares comunes altamente diferenciados poco diferenciados crecimiento lento crecimiento rpido escasa anaplasia presentan anaplasia no hay metstasis hay metstasis material gentico estable inestabilidad en el material gentico poca secrecin de proteasas alta secrecin de proteasas requiere de factores de crecimiento no requiere de factores de crecimiento

hemorragia: ocurre como una consecuencia de la invasin de tumores a los vasos sanguneos, provocando coagulacin intravascular y

trombocitopenia. fiebre: se presenta en muchos pacientes con cncer, usualmente provocada por infecciones oportunistas. caquexia: resulta de una combinacin de anorexia (falta de apetito), prdida de tejido adiposo, efectos de intolerancia a la glucosa. dolor, desordenes neurolgicos, hipercalcemia.

Tabla 6.5. Calificativos para tumores Tejido Tumor benigno Tumor maligno epidermis papiloma epidrmico carcinoma epidrmico tracto biliar cholangioma cholangiocarcinoma corteza adrenal adenoma carcinoma adrenocortical adrenocarcinoma estmago plipo gstrico carcinoma gstrico hgado hepatoma carcinoma hepatocelular tejido fibroso fibroma fibrosarcoma cartlago chondroma chondrosarcoma tejido graso lipoma liposarcoma msculo rabdomyoma rabdomyosarcoma hueso osteoma osteosarcomas rin adenoma renal adenocarcinoma renal pulmn adenoma pulmonar adenocarcinoma pulmonar El sufixo "oma" es comunmente utilizado para denotar neoplasmas benignos; "Carcinoma" es usado para tumores malignos de clulas epiteliales y "sarcoma" para tumores malignos de msculo y huesos.

6.3. Etapas principales del proceso carcinognico.

La forma en que una sustancia provoca cambios en una clula normal y la transforma en una clula neoplsica, no ha sido totalmente comprendida para todos los compuestos. Sin embargo, en algunos de ellos se ha logrado un avance en la comprensin de sus mecanismos carcinognicos. Hoy se sabe que el cncer es un fenmeno que se lleva a cabo en dos tiempos, la conversin y el desarrollo neoplsico, mismos que a su vez abarcan tres etapas: iniciacin, promocin, progresin. La ubicacin de todos ellos se ilustra en el siguiente esquema.

Para sustancias que producen sarcomas se est utilizando la forma de denominacin como oncgenos para muchos autores, aunque el trmino carcingeno es el ms ampliamente difundido.

73

Carcinognesis qumica
Conversin neoplsica procarcingeno
activacin metablica destoxificacin metablica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

Desarrollo neoplsico clula neoplsica letente
fallas en el sistema inmune PROMOCIN crecimiento

carcingeno
+ ADN INICIACIN

destoxificacin metablica

neoplasma diferenciado
PROGRESIN

tumor no diferenciado
reparacin del ADN

alteracin en el ADN
expresin

metstasis

Esquema 6.5. Etapas principales de la generacin de cncer por sustancias qumicas.

Algunas caractersticas de las tres etapas se presentan en la siguiente tabla.

Tabla 6.6. Caractersticas generales de las tres etapas del desarrollo carcinognico Iniciacin Promocin Progresin Tipo de irreversible reversible irreversible interaccin Factores mutgenos Metabolitos (dieta / ambientales, causales hormonas) dieta Aparicin espontnea ------espontnea Participacin en Interferencia Va a potenciar el Alteraciones el proceso con el ADN. crecimiento celular morfolgicas carcinognico Determinado anormal. Depende de la en el genoma. por el tiempo dosis a que se ha Aparicin de de latencia expuesto. Determina el neoplasia. tiempo de latencia Relacin Dosis- sin posible Medible ? respuesta umbral Dependencia de del nmero de de la capacidad de del tejido la efectividad alteraciones expansin de la progenie inducido celular que ha sufrido la induccin Sustancias genotxicas mitticas clastgenas

Esquema 6.6. Integracin de las etapas de la carcinognesis

6.3.1. Aspectos esenciales de iniciacin y promocin en los estudios de laboratorio.

* El iniciador debe ser administrado primero. Pocos o ningn tumor se presenta si el promotor es administrado primero. * Si el iniciador es administrado en dosis nica con un nivel inferior al que pueda provocar cncer, no produce la formacin de tumores durante la vida del animal de experimentacin. Sin embargo, dosis repetidas del iniciador pueden formar tumores an en ausencia del promotor. * La accin del iniciador es irreversible; los tumores generados se presentan aproximadamente en las mismas proporciones, si el intervalo de 74

A continuacin presentamos esquemticamente la integracin de estos eventos con algunas alteraciones que se van presentando en la carcinognesis.

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

administracin entre el iniciador y el promotor es extendido de una semana o un ao. * El iniciador es un electrfilo, el cual se une covalentemente al ADN para provocar un cambio mutagnico que no se expresa, pero que es permanente y hereditario. * La funcin esencial del agente promotor es completar el proceso carcinognico suscitado por el iniciador. * Los promotores generalmente no son electrfilos, y no se tienen evidencias de que se unan covalentemente a macromolculas. * La accin de los promotores es reversible en una etapa inicial, y usualmente se requieren varias exposiciones a dichos compuestos.

A continuacin se muestran algunos ejemplos de sustancias que en los trabajos de experimentacin se les ha ubicado como iniciadores, promotores y agentes progresivos.
Tabla 6.7. Xenobioticos que participan en la carcinognesis Xenobiotico Iniciacn Promocin Progresin sulfato de dimetilo fuerte --------cloruro de bencilo fuerte --------acetona --------dbil TPA ----fuerte dbil perxido de benzoilo ----dbil fuerte perxido de hidrgeno ----dbil fuerte

6.3.2. Cambios en una clula normal al convertirse en neoplsica.

Esquema 6.7. Cambios en una clula normal que se ha convertido en neoplsica.

Cuando una clula normal se transforma en una clula neoplsica, se presentan algunos cambios en su fisiologa, los cuales se ilustran en el siguiente esquema.

Uno de los aspectos relevantes es que las clulas neoplsicas alcanzan a segregar una mayor cantidad de proteasas, enzimas que se encargarn de romper estructuras proticas para que estas clulas puedan invadir otros rganos y tejidos del organismo. 75

Carcinognesis qumica
proliferadores peroxisomas de

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

estimula la sobreproduccin de H2O2 que activa la expresin de oncogenes Clofibrato. steres ftalatos, lactofen de

6.3.3. Clasificacin de los carcingenos. Se clasifican segn su mecanismo de accin para desarrollar el cncer, en dos categoras o clase definidas y una tercera en donde se colocan aquellos compuestos cuyo mecanismo de accin no ha sido del todo elucidado. Tabla 11.8. Clasificacin de carcingenos.
Categora Carcingenos genotxicos No necesitan bioactivacin (directos) Necesitan bioactivarse (procarcingenos) Inorgnicos Posibles mecanismos Ejemplos

11.4. Carcingenos genotxicos.

Se ha establecido que el ADN es la molcula "blanco" de varios agentes que van a provocar cncer; las evidencias que sustentan esta afirmacin son las siguientes:

Son electrfilos que alteran el material gentico por medio de mutaciones o clastognesis. Sus productos metablicos son electrfilos que actan de manera semejante a los anteriores. de

agentes alquilantes (mostazas nitrogenadas, sulfato de dimetilo, etc.) hidrocarburos aromticos policclicos, nitrosaminas

a. muchos carcingenos, reaccionan qumicamente con el ADN b. muchos carcingenos son mutgenos c. individuos con problemas de reparacin en su ADN, estn predispuestos a

alteran la fidelidad replicacin del DNA. Continuacin de la Tabla 11.8 Categora Posibles mecanismos Carcingenos epigenticos promotores

Metales como el nquel, el cromo, el cadmio. Ejemplos

desarrollar cncer d. muchos tumores muestran anormalidades cromosmicas e. muchos tumores presentan productos de oncognes.

Dentro del grupo de compuestos que actan sobre el ADN, se encuentran

complementa la accin de sustancias inductoras en el proceso carcinognico. incrementa la incidencia de mutaciones espontneas Altera la diferenciacin celular. Promueve el crecimiento celular. deprime el sistema inmune permitiendo el crecimiento de clulas malignas. la forma de la partcula es crucial aunque se desconoce su mecanismo. steres de forbol, catecoles, disolventes, etanol, insecticidas organoclorados, sacarina cido nitriloactico, tetracloroetileno, quemaduras. estrgeno, amitrole

aquellos que no necesitan de ninguna biotransformacin para poder actuar. Este tipo de compuestos se considera de alto riesgo para la poblacin o grupo profesional que est expuesto. El manejo de estos compuestos dentro de los laboratorios se har con precauciones extremas, cuidando todo el tiempo la proteccin del organismo.

citotxicos

modificadores hormonales inmunosupresores

anlogos de purina, azatriopina Plsticos y asbestos

6.4.1. Agentes alquilantes monofuncionales y bifuncionales.

partculas slidas

Entre los agentes alquilantes se encuentran varios compuestos de importancia industrial y frmacos anticancergenos. Su toxicidad radica en que pueden introducir un grupo alquilo en las macromolculas biolgicas, particularmente 76

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

el ADN. La mayora de ellos son genotxicos directos y se clasifican en dos grupos: aquellos que van a provocar una sola alquilacin (monofuncionales), y aquellos que logran provocar dos alquilaciones (bifuncionales). Ejemplos del primer grupo lo constituyen el sulfato de dimetilo (DMS), -propiolactona (BPL). Este ltimo ha sido utilizado en medicina como agente esterilizante y para inactivar al virus del SIDA presente en las muestras biolgicas.

quienes laboraban en la fabricacin de gas mostaza con fines blicos. Estos trabajadores presentaron alta incidencia de cncer en el tracto respiratorio.

Tabla 6.9 . Ejemplos del algunos alquilantes mono y bifuncionales Xenobiotico Estructura

Alquilantes monofuncionales
alquiliminas

Los agentes alquilantes bifuncionales se caracterizan porque pueden alquilar dos sitios nucleoflicos en el ADN. Tales sustancias pueden provocar enlaces cruzados entre una base nitrogenada y una protena o con otra base nitrogenada, la cual puede estar en la misma hebra o en la hebra alterna del ADN. El compuesto prototipo para los agentes bifuncionales es el gas mostaza, el cual pertenece a su vez al grupo de los compuestos referidos como mostazas, que pueden presentar al tomo de azufre o al tomo de nitrgeno como elemento para la cooperacin de grupo vecino (cooperacin ananquimrica).

H2C

CHR N H

etilenimina

steres de sulfato sulfato de dimetilo lactonas pequeas

O

(CH3)2SO4

-propiolactona (BPL)
O

compuestos con halgeno activo cloruro de bencilo yoduro de metilo CH3I

CH2Cl

Alquilantes bifuncionales
Cl N: R Cl Mostaza nitogenada R Cl + N R Cl BN BN N: R BN ' + N R BN N BN ' BN

alquilenepxidos 1,2,3,4-butadienepxido
H2C CH O CH O CH2

Formacin de un "enlace cruzado"

mostazas
ClCH2CH2

Esquema 6.8. Forma de accin de un agente alquilante bifuncional

sulfuro de bis(2-cloroetilo) (gas mostaza, yperita)

ClCH2CH2

Estos compuestos inicialmente no fueron identificados, en pruebas con animales de laboratorio, como agentes carcinognicos. Posteriormente, fueron implicados como tales, al estudiarse los casos de trabajadores japoneses

bis(2-cloroetil)amina

ClCH2CH2 ClCH2CH2

77

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

mediante el mecanismo SN2. Aunque el N1 de la adenina y el N3 de la citosina estn involucrados en la formacin de puentes de hidrgeno, por la desnaturalizacin que sufre el ADN a 37 C, se presentan alteraciones de estas interacciones moleculares, con la consecuente alquilacin de las posiciones mencionadas. Para electrfilos suaves la alquilacin de los tomos de oxgeno es mnima. La relacin MeG-O6/MeG-N7 es muy baja (< 0.004).

ciclofosfamida (cytoxan)

ClCH2CH2 ClCH2CH2

O N N P O

6.4.2. La alquilacin por electrfilos suaves y duros.

La alquilacin del ADN ha sido investigada durante ms de 40 aos. Como molcula diana (blanco), el ADN ofrece una amplia variedad de sitios nucleoflicos por los nitrgenos, oxgenos y carbonos que lo constituyen. Mucha atencin ha sido dada a la interaccin regioselectiva de varios electrfilos en esta macromolcula. Los oxgenos y nitrgenos en las cuatro bases nitrogenadas (excepto aquellos que forman el enlace glicosdico), pueden ser alquilados en solucin acuosa a pH neutro.

En contraste, la N-metil-N-nitrosourea (MNU) y su anlogo N-etil-Nnitrosourea (ENU), son electrfilos duros y exhiben un mecanismo de alquilacin del tipo SN1. Ellos muestran tendencia a la alquilacin de los tomos de oxgeno, incluyendo a los de los fosfatos. Aunque las bases son todava preferencialmente alquiladas en el tomo de nitrgeno, una gran proporcin de O-alquilacin se presenta con la siguiente tendencia: G-O6>TO2>T-O4C-O2. La relacin MeG-O6/MeG-N7 es generalmente mayor a 0.15.

CH3

NO N C

CH3CH2 N C

NO

El sitio de la alquilacin puede estar determinado por el principio de Pearson: HSAB (Hard, Soft, Acid, Base): cidos/bases duros y cidos/bases suaves.
H O fosfato H O
3

NH2

O ENU

NH2

MNU

T
N1 azucar O
3

H N N H N1

N base 3' N7 O P O N azucar H O 5' O base

Esquema 6.10 N-metil-N-nitrosourea y N-etil-N-nitrosourea

C
N
7

N1 azucar O

N H N1 H N H

A
3

En general los electrfilos duros han presentado mayor poder carconognico que los suaves. Estos carcingenos, alquilan especialmente a G-O6 y al fosfato. Este procedimiento requiere de un desplazamiento 1-2 de un hidruro, el cual se encuentra favorecido por el carcter de carbocatin en el C4 de la guanina alquilada. Una de las consecuencias de la alquilacin de la guanina, es el equilibrio tautomrico que se presenta al llevarse a cabo esta reaccin. Con ello, se cambia a una citocina por una timina. Al ocurrir esto, se dice que se

N azucar

G
3

diana para electrfilos "duros" diana para electrfilos "suaves"

Esquema 6.9. Posiciones de electrfilos suaves y duros en bases nitrogenadas

El sulfato de dimetilo es un electrfilo suave, por lo que provoca la alquilacin del ADN en G-N >A-N >C-N >T(U)-N , primordialmente
7 1 3 3

78

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

present una mutacin puntual en donde el par G:C es sustituido por el par A:T. Esta mutacin ha sido implicada en la actividad carcinognica de MNU, al activar el oncogn H-ras-1.
H N O H
3

El diazometano parece ser el intermediario en la accin de estos compuestos sobre el ADN al transfererir directamente el grupo metilo a esta macromolcula

T
OCH3 N1
4

C
N1 azucar H N O H O
3

N1 N7 N azucar Segunda replicacin Primera replicacin azucar O

N H H N H N1

OCH3
4

N7 N azucar

6.4.3.2. Las nitrosoureas y nitrosoguanidinas Algunos agentes alquilantes, necesitan hidrolizarse para liberar a la especie reactiva, tal es el caso de las nitroureas, nitrosoguanidinas y nitrosouretanos.

H N

G*
3

G*
3

C
N1 azucar O H N

metilacin N7 N azucar

H N1 N H

G
3

mutacin C:G

T:A

G*:T

La N-metil-N-nitrosourea (MNU) se hidroliza rpidamente a pH 7 y 37 C, para dar hidroxildiazometano, mientras que la N-metil-N-nitro-N-

Esquema 6.11. Consecuencias de la alquilacin exocclica de la guanina

nitrosoguanidina (MNNG), lo hace lentamente. Como resultado de esto, se ha postulado que una forma acelerada de alquilacin por MNNG, implicara una

6.4.3. Agentes alquilantes que necesitan bioactivarse.

catlisis de un grupo tiol en las clulas.

6.4.3.1. Las nitrosaminas. La mayora de los carcingenos N-alquilados requieren de activacin enzimtica para transformarse en compuestos activos contra el ADN. Estas biotransformaciones involucran generalmente reacciones de oxidacin mediadas por el citocromo P 450. Como ejemplo presentamos a continuacin, la bioactivacin de la N,N-dimetilnitrosamina (NDMA).
OHOH CH3 N CH3 N NDMA O CH3
P 450

CH3

N=O N C CH3 N=N NH2 MNU OH + O=C=NH hidroxildiazometano

H N

a a

CH3 N=N NH NO2

OH

+ (NC

NH NO2)

OH N=N N N O H C H O CH3 CH3 trans N=N OH cis CH3 N=N

b

CH2

C N CH3 N O NH
b

SH

diazometano (especie alquilante)

CH3 N=N

OH

+ R

C NHNO2

MNNG

hidroxildiazometano

Esquema 6.13. Generacin de hidroxildiazometano por MNU y MNNG

Esquema 6.12. Activacin y alquilacin por una nitrosamina

79

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

Con la preparacin de una variedad estructural de HAP carcinognicos que no Este tipo de compuestos se utilizan en los laboratorios de sntesis, como precursores de diazometano. 6.4.3.3. Los hidrocarburos aromticos policclicos (HAP). presentaban las regiones estructurales antes mencionadas se ha tenido que cambiar esta idea original ante la evidencia de estos hechos experimentales.

Se ha propuesto una segunda teora de aceptacin ms reciente, la denominada regin baha. En esta, se considera que aquellos HAP que presente esta regin

Este grupo de compuestos se presentan en forma de mezclas complejas en una variedad de productos ambientales tales como el holln, alquitrn, humo de tabaco, combustin incompleta del petrleo. Dos ejemplos de este tipo de compuestos lo constituyen el benzo[a]pireno (BP) y el dibenz[a,h]antraceno cuyas estructuras se han presentado anteriormente. En 1964, se demostr que el benzo[a]pireno se una covalentemente al ADN de la piel del ratn in vivo y este fenmeno se reprodujo in vitro utilizando microsomas de ratas como fuente de citocromo P 450. Con la intencin de relacionar la estructura de los HAP con su actividad carcinognica. Uno de los primeros postulados, propuso la existencia de una regin denominada K (Krebs = cncer) y una regin L en la estructura. Ambas posiciones se determinaron basndose en la densidad electrnica que presentaban los HAP.
regin L

estructural sern de riesgo carcingnico ya que al metabolizarse producirn dos epxidos, uno de los cuales ser el responsable de interaccionar con el ADN.
regin baha
10 9 12 1

O
3

HO
8 7 6 4

HO OH HO BP 7,8-diol-9,10-epxido (segundo epxido)

benzo[a]pireno (BP)

BP 7,8-epxido ( primer epxido)

BP 7,8-diol

Esquema 6.15. Propuestas de biotrasformacin de la teora baha

Esta biotransformacin implica algunas consideraciones estereoqumicas que a continuacin se presentan:

regin K Esquema 6.14. Regin K y L de un hidrocarburo aromtico policclico

80

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

Es importante puntualizar, que la biotransformacin de estos compuestos

O
CYP 2
8 7 10 9

primeramente conducir a la destoxificacin mediante la reaccin de glucuronidacin. Slo por la saturacin de este proceso se presentarn aquellos
7

benzo[a]pireno
CYP 2

O
epxido hidrolasa

HO HO
CYP 1

(+) syn BP 7,8-diol9,10-epxido

cambios estructurales que provoquen la produccin de sustancias con riesgo carcinognico.

CYP 2 BP CYP 1 CYP 1 BP 7,8-diol9,10- epxido receptor Ah transcripcin del ADN BP 7,8-diol glucuronidacin BP 7,8-glucurnido DESTOXIFICACION ACTIVACION TOXICA ADN receptores regulatorios promocin mitsis mutacin

epxido hidrolasa
8 7

HO
epxido hidrolasa

HO

O
CYP 1
10 9

HO

HO (+) anti OH BP 7,8-diol9,10-epxido

OH

Esquema 6.16. Aspectos estereoqumicos en la biotransformacin del benzo[a]pireno

El BP 7,8-diol-9,10-epxido de conformacin (+)anti (dado por la relacin entre el epxido y el hidroxilo en posicin 7) es el que va a interaccionar con las bases nitrogenadas.

Esquema 6.18. Alternativas de biotransformacin de hidrocarburos aromticos policclicos

6.5. Carcingenos epigenticos

Los epigenticos van a ejercer su accin mediante mecanismos diferentes a aquellos que presentan los genotxicos.
O H N N HN N N azucar HO N O N N azucar

* Alterar el comportamiento toxocintico del carcingeno (absorcin, distribucin, etc.)

HO O HO

H2N

N H HO OH

* Incrementar la penetracin del carcingeno dentro de las clulas. * Inhibir los mecanismos de reparacin del ADN. * Acrecentar la proporcin de carcingenos activos. * Disminuir los nuclefilos que puedan nulificar al carcingeno electroflico. * Aumentar la conversin de lesiones del ADN a alteraciones permanentes

Aducto del hidrocarburo policclico y la guanina

Esquema 6.17. Interaccin del BP-7,8-dihidrodiol-9,10-epoxido con la guanina

81

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

ampliacin de las clulas iniciadas

6.5.1. Agentes promotores.

alteracin en la expresin gnica neoplasia

Los promotores son sustancias que cuando son administradas despus de una dosis pequea de un iniciador, complementan el desarrollo del cncer. Los promotores pueden, ya sea, incrementar el nmero de tumores o disminuir el periodo de latencia para la aparicin de los mismos. Los promotores no son generalmente electrfilos y no se unen al ADN. El ejemplo tpico de un agente promotor es el TPA, un compuesto presente en el aceite de Cotton (aceite presente en las semillas de las plantas del gnero Gossypium), su estructura se presenta a continuacin:
O C(CH2)12CH3 O O CCH3 O HO

6.5.2. Cocarcinognesis y sincarcinognesis

Un cocarcingeno es un agente que administrado de manera conjunta o antes de un carcingeno, incrementa la formacin de tumores. Otro trmino de importancia es el de sincarcinognesis. Este ltimo deriva del comportamiento sinergsta que presentan algunos compuestos bioactivos en general, pero con algunas particularidades. Para distinguir entre los trminos de

cocarcinognesis, sincarcinognesis y promocin se presentan en la siguiente tabla algunas caractersticas de los mismos.
Tabla 6.11. Distincin entre sincarcinognesis, cocarcinognesis y promocin Proceso sincarcinognesi s simultnea Caracterstica operacional Dos carcingenos simultneamente actan Diferencias mecansticas Ambos carcingenos genotxicos son

OH

CH2OH

Esquema 6.19. 13-acetato de 12-O-tetradecanoilforbol (TPA)

cocarcinognesis

Aumenta la accin del carcingeno cuando se administra antes o simultneamente; o cuando el efecto carcingenico todava persiste Dos carcingenos administrados en tiempos diferentes; el orden de la secuencia puede ser revertida conservando el efecto carcingeno. Complementa secuencia de la accin carcinognica iniciada por el genotxico

Favorece la accin del genotxico y/o la aparicin de una mayor cantidad de tumores.

La forma en como ocurre la promocin, es a travs de la expansin de la clula que ha sufrido la iniciacin (expansin clonal). Esto se puede presentar a travs de tres mecanismos que son: inhibicin diferencial, estimulacin diferencial, recuperacin diferencial. En el hgado de las ratas, se ha demostrado que la inhibicin diferencial juega un papel central en el desarrollo de cncer heptico.
promocin sincarcinognesis secuencial

Ambos carcinognos genotxicos

son

Facilitar neoplsico genotxico

el desarrollo siendo un no

Varios cocarcingenos han sido investigados por su relacin con la generacin de tumores del tracto respiratorio. Los polvos de dioxido de silicio en combinacin con benzo[a]pireno, presenta un comportamiento de 82

Carcinognesis qumica

Departamento de Farmacia, Fac. de Qumica, UNAM

cocarcingeno para la formacin de tumores de la laringe, traquea y pulmones en animales de experimentacin. Un comportamiento similar lo presentan los polvos de asbestos y el hbito de fumar. Los trabajadores que estn expuestos a asbestos y fuman, presentan una incidencia once veces mayor de cncer de pulmn con relacin a las personas que no estn en contacto con asbestos pero que si fuman; y una proporcin de 53 veces mayor, cuando se comparan con personas que no fuman y no estn expuestas a las partculas de asbestos. En el caso de sincarcinognesis, se puede presentar cuando dos genotxicos son administrados de manera secuencial o de manera simultnea. Se ha enfatizado que estas dos formas de sincarcinognesis pueden tener mecanismos diferentes de accin y adems, deben ser distinguidos de los conceptos de iniciacin-promocin y cocarcinognesis. La promocin y la cocarcinognesis se distinguen de la sincarcinognesis en que los dos primeros trminos comprenden aspectos de no genotoxicidad, mientras que en el ltimo concepto, el dao genotxico es considerado como esencial. Adems, si en la sincarcinognesis secuencial el orden de aplicacin es revertido, el efecto se presenta. Este no es el caso para los cocarcingenos o los promotores, a menos que el agente tenga adicionalemente propiedades genotxicas. El fenmeno de la sincarcinognesis ha sido reportado en varios rganos, incluyendo la piel, el hgado y la vejiga urinaria. La sincarcinognesis ocurre cuando ambos agentes tienen el mismo rgano diana ("blanco").

hembras. Esto se debe en parte, a la mayor actividad de sulfotransferasas en ratas machos. Esta actividad se puede deprimir en ratas castradas por la administracin de -estradiol.
O CCH3 N H
P 450

O CCH3 N OH N

O CCH3 O glucurnido O CCH3 N +

N-hidroxi-AAF 2- acetilaminofluoreno (2-AAF)

sulfotransferasa

O CCH3 N O SO3electrfilo unin a macromolculas

sulfato de AAF

Esquema 6.20. Activacin de la 2-acetilnaftilamina

Bibliografa
1. McGregor, D. Carcinogenicity. En Fundamental Toxicology for Chemists. Editado por Duffus, J.H., Worth, G.J. The Royal Society of Chemistry. UK.1996, 90-99. 2. Huici A. et al. Antecedentes genotxicos en la industria de los encurtidos. AQEIC. 1992, 3, 119-127. 3. Mehlman, M.A. Dangerous properties of petroleum refining products: Carcinogenecity of motor fuel. Teratogenesis, Carcinogenesis and Mutagenesis 1990, 10, 399-408.

6.5.3. Modificadores hormonales

Las hormonas pueden jugar un papel importante en la modulacin del proceso de carcinognesis. Por ejemplo, las ratas machos son ms susceptibles a la incidencia de tumores con 2-AAF (2-acetilaminofluoreno) que las ratas 83