ADHSINES DE S.

MUTANS ET INFLAMMATION PULPAIRE ET PRIDENTAIRE

RLE DES ADHSINES DE S. MUTANS DANS LINFLAMMATION PULPAIRE ET PRIDENTAIRE

INVOLVEMENT OF S. MUTANS ADHESINS IN DENTAL PULPAL AND PERIRADICULAR INFLAMMATION

MARC ENGELS-DEUTSCH JEAN-PAUL KLEIN INSERM U 392, Universit Louis Pasteur, Facult de Pharmacie, 74 route du Rhin, 67400 ILLKIRCH 67085 STRASBOURG Cedex

Remerciements : Ce travail a t soutenu par le Ministre de lEducation, de la Science, des Sports et Culture et de Technologie du Japon ainsi que par lInstitut franais pour la recherche odontologique.

Streptococcus mutans possde diffrentes molcules de paroi telles la protine I/II, les polysaccharides de srotype polymres de rhamnose-glucose (RGPs) et les acides lipoteichoques (LTAs) qui sont des adhsines et des modulines qui permettent S. mutans de coloniser les surfaces dentaires et provoquent caries et pulpites. En utilisant diffrents mutants de S. mutans nexprimant pas la protine I/II et/ou les RGPs, ainsi que des modulines purifies telles la protine I/II, les RGPs et les LTAs, nous avons test leurs capacits dadhsion et dactivation sur des cellules pulpaires et ligamentaires dentaires issues de cultures primaires. Nos rsultats montrent que la protine I/II ainsi que les RGPs jouent un rle prpondrant dans ladhrence bactrienne aux cellules fibroblastiques comparativement aux LTAs. Dans ltude du processus dactivation, la scrtion de cytokines est principalement provoque par la protine I/II et les RGPs. La scrtion maximale dIL-8 par les cellules fibroblastiques est obtenue par la protine I/II dans sa forme purifie comparativement aux autres modulines testes alors que se sont les RGPs qui provoquent une synthse maximale dIL-8 lorsquon utilise les bactries entires. Les LTAs provoquent une synthse dIL-8 beaucoup plus faible. Lors de lactivation, en utilisant la cytochalasine D ou des bactries tues, nous avons observ une synthse dIL-8 lgrement diminue, ce qui signifie que linternalisation de S. mutans, des mutants de S. mutans, ainsi que des ligands bactriens purifis ntait pas ncessaire pour provoquer la synthse dIL-8 par les cellules fibroblastiques.

S. mutans possesses different wall molecules like protein of the I/II family, serotype rhamnose glucose polymer (RGP) and lipoteichoc acid (LTA) which act like adhesins and modulins allowing S. mutans to colonize teeth and cause dental caries and pulpitis. By use of several isogenic mutants of S. mutans defective in protein I/II or/and RGP, and purified modulins such as protein I/II, RGP and LTA, we tested their binding and activation ability on dental pulp and periodontal ligament cells. Our results demonstrate that both protein I/II and RGP play an important role in streptococcal adherence to human fibroblastic cells whereas LTA is only a minor adhesin. Even if protein I/II seems to be more efficient in its purified form in triggering cells to release IL-8, RGP is the most efficient cytokine stimulating component in intact bacteria, while LTA plays only a minor role. In cell activation, we showed, by using cytochalasin D, that internalization of either S. mutans, S. mutans isogenic mutants or purified ligands are not necessary to trigger cells to release IL-8.

S. MUTANS PROTINE I/II POLYMRES DE RHAMNOSE-GLUCOSE (RGPS) ACIDES LIPOTEICHOQUES (LTAS) FIBROBLASTES PULPAIRES ET LIGAMENTAIRES CYTOKINES INFLAMMATION

S. MUTANS PROTEIN I/II RHAMNOSE GLUCOSE POLYMERS (RGPS) LIPOTEICHOIC ACIDS (LTAS) DENTAL PULP AND PERIODONTAL LIGAMENT CELLS CYTOKINES INFLAMMATION

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INTRODUCTION Streptococcus mutans a t clairement identifi comme tant la principale bactrie de la cavit orale responsable de linitiation puis du dveloppement des caries (Tanzer, 1992). S. mutans envahit la pulpe par les tubulis dentinaires permables (Ackermans et al., 1981) provoquant ainsi des pulpites aiges et chroniques (Fabricius et al., 1982). Au fur et mesure de la propagation carieuse, S. mutans entre en contact avec les cellules pulpaires, puis aprs diffusion dans le systme canalaire, avec les cellules du ligament dentaire en provoquant inflammation et dommages tissulaires (Yoshida et al., 1987). S. mutans possde sa surface diffrentes molcules (Jenkinson et Lamont, 1997) qui agissent comme des facteurs de virulence qui lui permettent dadhrer au film salivaire, de saccumuler dans le biofilm dentaire, de produire des acides, denvahir les tubulis dentinaires jusqu la pulpe puis, datteindre le priapex. Linteraction entre S. mutans et les cellules de lhte, provoque une modification des activits cellulaires comme la synthse de cytokines ou le changement phnotypique (Agarwal et al., 1998 ; Hahn et al., 2000). Parmi les molcules streptococciques, la protine I/II, les polysaccharides de srotype f de rhamnose-glucose (RGPs) et les acides lipoteichoques (LTAs) ont t identifis comme des adhsines responsables de la colonisation puis de lenvahissement des tissus dentaires (Jenkinson et Demuth, 1997 ; Michalek et al., 1984 ; Rlla, 1976) ou des modulines responsables de diffrentes ractions cellulaires suite leur fixation leurs rcepteurs spcifiques (Soell et al., 1994 ; Soell et al., 1995 ; Sugawara et al., 1999 ; Vernier et al., 1996 ; Wang et al., 2001). Ces constituants streptococciques forment un modle dtude des ractions ligands-rcepteurs ou selon Medzhitov et Janeway (1998), PAMPs (Pathogen Associated Molecular Patterns)-PRRs (Pattern Recognition Receptors). La protine I/II (P.M. 195kDa) est une adhsine capable de se fixer diffrents ligands. Elle est implique dans ladhsion de S. mutans de nombreuses glycoprotines salivaires. Elle permet la colonisation prcoce par les bactries des surfaces orales ainsi que la coaggrgation puis lagglutination interbactrienne

(Brady et al., 1992 ; Jenkinson et Demuth, 1997 ; Munro et al., 1993). La protine I/II est essentielle linvasion des tubulis dentinaires par les bactries en interagissant avec le collagne de type I (Love et al., 1997 et 2000). Aprs fixation un rcepteur selon un mode de type lectine, la protine I/II agit comme une moduline en induisant la synthse de cytokines pro-inflammatoires par des cellules pithliales, endothliales, monocytaires et articulaires (Gourieux et al., 2001 ; Soell et al., 1994 ; Soell et al., 1995 ; Vernier et al., 1996). La fixation de la protine I/II aux intgrines 51 est responsable de la synthse dIL-8 par les cellules endothliales (Al-Okla et al., 1999). Les polysaccharides de srotype f (RGPs), sont des adhsines qui permettent la fixation de S. mutans aux surfaces dentaires, au myocarde et aux reins (Michalek et al., 1984 ; Stinson et al., 1980). Les RGPs provoquent la synthse de cytokines pro-inflammatoires par des cellules monocytaires, pithliales et endothliales (Soell et al., 1995 ; Vernier et al., 1996), une surexpression des rcepteurs Fc des immunoglogulines G (Benabdelmoumene et al., 1991) et la production de NO par les cellules aortiques du rat (Martin et al., 1997). Les RGPs induisent la synthse de cytokines en se fixant au CD14 (Soell et al., 1995). Leur nature hydrophilique joue un rle primordial dans la rsistance de S. mutans la phagocytose par les polynuclaires neutrophiles humains (Tsuda et al., 2000). Les acides lipoteichoques (LTAs) ancrs dans la membrane plasmique des bactries Gram+ sont galement capables, aprs fixation au CD14, de provoquer des ractions biologiques comme la synthse de cytokines pro-inflammatoires et la production doxyde nitrique (English et al.,1996). Les LTAs de S. sanguis ou Bacillus subtilis agissent respectivement comme antagonistes et agonistes du lipopolysaccharide au niveau de fibroblastes gingivaux humains (Sugawara et al., 1999). Les LTAs jouent galement un rle important dans la pulpite en induisant lapoptose chez les cellules pulpaires (Wang et al., 2001). Le but de cette tude est de mettre en vidence les rles fonctionnels des diffrents facteurs de virulence prsents la surface de S. mutans. Dans le cadre de la raction inflammatoire locale, quel est

limpact de chaque moduline streptococcique sur lventuelle synthse de cytokines par les cellules dentaires ? En utilisant des mutants insertionnels de S. mutans nexprimant pas la protine I/II et/ou les RGPs et des modulines purifies, nous allons essayer danalyser limpact de chaque composant de paroi streptococcique sur ladhsion et lactivation des cellules pulpaires et ligamentaires dentaires. MATRIELS ET MTHODES
I SOUCHES BACTRIENNES, MANIPULATIONS GNOMIQUES ET CARACTRISATION DES MUTANTS INSERTIONNELS Les souches sauvage et mutantes de S. mutans nous ont t fournies par le docteur Y. Yamashita du Dpartement de Dentisterie prventive de la Facult de mdecine dentaire de lUniversit de Kyushu Fukuoka (Japon). S. mutans KO pour la protine I/II a t obtenu en interrompant le gne pac codant pour la protine I/II par un gne spectinomycine rsistant issu de Enterococcus faecalis. S. mutans KO pour les RGPs a t obtenu en interrompant le gne rmlB codant pour le rhamnose qui constitue la charnire centrale des RGPs par un gne rytromycine rsistant issu de Echerishia Coli. S. mutans KO pour la protine I/II et les RGPs a t obtenu partir du mutant RGPs en appliquant la mme procdure que pour obtenir le mutant KO pour la protine I/II. Leurs caractrisations ont t confirmes par western-blot et analyse par chromatographie selon un protocole pralablement tabli (Tsukioka et al., 1997). I OBTENTION DES ANTIGNES BACTRIENS PURIFIS partir dextraits de paroi de S. mutans srotype f (Soell et al., 1994) ; la protine I/IIf a t purifie selon la mthode mise au point par Ackermans et al., 1985 et les RGPs de srotype ont t obtenus selon un protocole tabli par Benabdelmoumene et al., 1991. La puret de chaque composant bactrien a t confirme par lectrophorse en conditions dnaturantes et immunoblots. Les LTAs purifis de S. mutans proviennent de Sigma-Aldrich (France).
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I CULTURES CELLULAIRES ET EXTRAITS MEMBRANAIRES Les fibroblastes ligamentaires et pulpaires sont issus de prlvements effectus sur des dents extraites pour raison orthodontique de sujets sains. Les cultures primaires se font dans du RPMI 1640 contenant 2 mM de L-glutamine, 50 U de pnicilline/ml, 50 g de streptomycine/ml et 10% de srum de veau ftal dcomplment (v/v) (Agarwal et al., 1998 ; Wang et al., 2001). Aprs caractrisation, les cellules sont utilises entre le 3e et le 10e passage (Tryoen-Toth et al., 2002). Pralablement chaque exprimentation, les cellules sont sevres du srum pendant 24 heures et laves trois reprises dans du RPMI 1640 seul. Aprs activation, la viabilit cellulaire est mesure par un test au MTT (Mosmann, 1983). Les extraits membranaires fibroblastiques sont obtenus puis biotinyls selon les mthodes dcrites par Weersink et al., 1993 et Soell et al., 1994. I ESSAIS DADHSION

Ladhsion entre les extraits membranaires fibroblastiques biotinyls et les bactries ou les antignes purifis est value par des tests ELISA. Bactries ou antignes bactriens sont adsorbs au fond des puits de plaques 96 puits. Aprs saturation et lavages, les extraits membranaires fibroblastiques sont ajouts. Aprs incubation de la phosphatase alcaline avec son substrat, la liaison ligand-rcepteur est mesure par labsorbance 405nm. Ladhsion non-spcifique est teste en parallle en utilisant un excs dextraits membranaires non marqus. Ladhsion spcifique est alors obtenue par soustraction de labsorbance de ladhsion non spcifique celle de ladhsion spcifique.
I ESSAIS DACTIVATION

Figure 1. Fixation spcifique des extraits membranaires biotinyls sur les diffrentes souches de S. mutans (A) ou sur les adhsines purifies (B). (A) Fixation de concentrations croissantes dextraits membranaires fibroblastiques biotinyls sur S. mutans sauvage (I), S. mutans I/II KO (G), S. mutans RGPs KO (L), S. mutans I/II et RGPs KO (H) fixs. (B) Fixation de concentrations croissantes dextraits membranaires fibroblastiques biotinyls sur la protine I/II (G), les RGPs (L) et les LTAs (H) fixs. Les rsultats sont exprims sous la forme de moyennes dune triple dtermination issue de trois exprimentations diffrentes. Les barres derreurs expriment lcart-type la moyenne. Les valeurs sont statistiquement reprsentatives : *, P<0.05 ; **, P<0.01 ; ***, P<0.001.

Dans une plaque 96 puits, les cellules fibroblastiques forment au fond de chaque puits un tapis cellulaire confluent (2.104 cellules). Pour les exprimentations utilisant la vitamine D3, les cellules sont ensemences 72 heures avant lactivation et prconditionnes avec 40 ng/ml de vitamine D3. Dans certaines exprimentations dactivation, les cellules ont t pr-traites 45 minutes avec 2,5 g/ml de cytochalasine D.

Les bactries vivantes, tues ou prtraites lazide de sodium sont dposes dans les puits raison de 50 bactries/cellule. Les antignes bactriens sont dposs une concentration de 10g/ml pour la protine I/II et de 50 g/ml pour les RGPs et les LTAs. Les priodes dactivation sont tales de 4 heures 48 heures. Les surnageants dactivation sont

rcolts et les dosages de cytokines sont effectus par des tests ELISA sandwich selon les indications du fabricant.
I ANALYSE DES RSULTATS

Le test t de Student a t utilis pour lanalyse statistique des rsultats. Les valeurs avec P < 0.05 ont t considres comme significatives.

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RSULTATS
I ADHSION DES SOUCHES DE S. MUTANS AUX CELLULES FIBROBLASTIQUES Avant dinduire la libration de cytokines, S. mutans doit se fixer sur les cellules de lhte par lintermdiaire de ses adhsines. Pour cela, les diffrentes souches bactriennes ainsi que les constituants de paroi purifis sont tests sur des concentrations dextraits membranaires fibroblastiques biotinyls allant de 0 20 g/ml. Les extraits membranaires des fibroblastes pulpaires et ligamentaires se fixent spcifiquement aux 4 souches bactriennes de manire dose-dpendante et saturable ( partir de 10g/ml dextraits membranaires). La fixation maximale a t obtenue avec la souche sauvage de S. mutans tandis quelle est diminue de 22 % avec le mutant RGPs KO, 34% avec le mutant I/II KO et 69% avec le double mutant RGPs-I/II KO. Ces rsultats montrent que la protine I/II et les RGPs sont des adhsines impliques dans la fixation de S. mutans aux fibroblastes pulpaires et ligamentaires. La fixation spcifique rsiduelle du double mutant RGPs-I/II KO serait due dautres adhsines comme les LTAs par exemple. Cela est confirm lorsque lon observe les courbes de fixation des extraits membranaires fibroblastiques aux constituants de paroi purifis de S. mutans. La fixation est dose-dpendante et saturable avec la protine I/II, les RGPs, et les LTAs. Toutefois, la fixation des LTAs est diminue de moiti par rapport la fixation de la protine I/II et des RGPs. Ces rsultats montrent que la protine I/II et les RGPs jouent un rle majeur dans la fixation des streptocoques aux cellules fibroblastiques dentaires humaines tandis que les LTAs sont moins impliqus.

Figure 2. Libration dIL-8 par les fibroblastes pulpaires activs par les diffrentes souches de S. mutans (A) ou les composants de paroi purifis (B). (A) Production dIL-8 par les fibroblastes pulpaires activs par S. mutans sauvage, S. mutans I/II KO, S. mutans RGPs KO, S. mutans I/II et RGPs KO. (B) Production dIL-8 par les fibroblastes pulpaires activs par la protine I/II, les RGPs et les LTAs. Ligands non traits (I), cellules pr-conditionnes par la vitamine D3 (I), cellules prtraites par la cytochalasine D (). Les rsultats sont exprims sous la forme dune moyenne cart-type reprsentant trois exprimentations en triplicate. Les valeurs sont statistiquement reprsentatives : *, P<0.05 ; **, P<0.01 ; ***, P<0.001.

Figure 3. Signalisation intracellulaire induite par la protine I/II et les RGPs. FAK: Focal Adhesion Kinase; MAPK: Mitogen-Activated Protein Kinase; MyD88: Myeloid Differenciation primary response gene 88 (molcule adaptatrice); NF-B : Nucleor Factor kappa B.
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I ACTIVATION DES CELLULES FIBROBLASTIQUES PULPAIRES ET LIGAMENTAIRES PAR S. MUTANS ET SES COMPOSANTS DE PAROI PURIFIS Aprs fixation spcifique de S. mutans aux extraits membranaires des fibroblastes pulpaires et ligamentaires par lintermdiaire des adhsines de paroi, nous avons tudi la synthse de cytokines pro- et anti-inflammatoires par les fibroblastes dentaires. La priode dactivation retenue est de 18 heures car la concentration en cytokines dans les surnageants y est optimale. Nous avons dos les concentrations en TNF-, IL-6, IL-8 et IL-10. Nous navons mesur que de faibles quantits de TNF- et dIL-10 scrts par les fibroblastes pulpaires et ligamentaires qui correspondent des seuils basaux de scrtion biologique. Les quantits dIL-6 et dIL-8 scrtes par les fibroblastes tant similaires, nous avons dcid dtudier le rle de chaque adhsine streptococcique dans lactivation des cellules de lhte et de prsenter les rsultats obtenus par les dosages dIL-8. Dans ltude de lactivation des fibroblastes pulpaires et ligamentaires par les bactries entires, la synthse maximale dIL-8 a t obtenue avec la souche sauvage de S. mutans. Lactivation est moindre en utilisant les mutants insertionnels de S. mutans puisque la quantit dIL-8 scrte est diminue de 20% avec la souche I/II KO, 65% avec la souche RGPs KO et 85% avec la souche I/II-RGPs KO. En utilisant les composants de paroi purifis, la protine I/II semble tre plus efficace que les RGPs pour stimuler les fibroblastes pulpaires et ligamentaires synthtiser de lIL-8. Les LTAs provoquent une synthse dIL-8 beaucoup plus faible. Ces rsultats montrent que la protine I/II stimule davantage les cellules scrter de lIL-8 dans sa forme purifie alors que ce sont les RGPs prsents sur les bactries entires qui provoquent une synthse maximale dIL-8. Comparativement, les LTAs sont les modulines les plus faibles. Dans une exprimentation parallle o les fibroblastes sont prconditionns par la vitamine D3 qui surexprime au niveau de leur membrane plasmique le CD14, la scrtion dIL-8 est la plus marque lorsquon stimule les cellules avec la

souche sauvage de S. mutans, le mutant I/II KO ainsi que les RGPs purifis. Dans ces mmes conditions dactivation mais lorsque les fibroblastes pulpaires et ligamentaires sont incubs avec des anticorps anti-CD14, nous observons une diminution de moiti de la synthse dIL-8 (donnes non prsentes). Ces rsultats nous permettent de confirmer que lun des rcepteurs membranaires des fibroblastes pulpaires et ligamentaires aux RGPs est le CD14. Lorsque les bactries sont tues par la chaleur ou traites par lacide de sodium, la quantit dIL-8 scrte diminue lgrement. Un traitement pralable lactivation par la cytochalasine D ne modifie que peu la scrtion dIL-8 par les cellules fibroblastiques. Ces rsultats dmontrent que ladhsion de S. mutans aux cellules de lhte est suffisant pour induire la synthse dIL-8 et que linternalisation de ligands streptococciques nest pas ncessaire. DISCUSSION S. mutans induit la scrtion de cytokines pro-inflammatoires ; parmi les composants streptococciques, seuls la protine I/II, les RGPs (Chatenay-Rivauday et al., 1998 ;2000), les superantignes de S. mutans (Matsushita et al., 1995) sont capables de provoquer la synthse de cytokines pro-inflammatoires par les cellules de lhte. Notre travail permet dtudier la raction inflammatoire au niveau de la pulpe et du ligament dentaire. En utilisant des souches de S. mutans KO pour la protine I/II et/ou les RGPs, nous avons pu mettre en vidence lactivit de chaque composant de paroi dans la raction inflammatoire. Nos travaux confirment le rpertoire dadhsion trs large que possde la protine I/II vis--vis de molcules de lhte comme les glycoprotines salivaires (Petersen et al., 2002), les protines de la matrice extracellulaire (Love et al., 1997), les intgrines 51 (Al-Okla et al., 1999) ou des composants de surface dautres bactries (Egland et al., 2001). Nous avons galement observ limportance des RGPs dans ladhsion aux cellules fibroblastiques dentaires humaines. En testant simultanment la souche sauvage de S. mutans et les diffrentes souches

mutes ainsi que la protine I/II, les RGPs et les LTAs sous leur forme purifie, nous avons pu conclure que la protine I/II et les RGPs sont des adhsines majeures impliques dans le processus dadhsion de S. mutans aux cellules testes. Daprs nos exprimentations dactivation, nous constatons que la protine I/II et les RGPs sont dimportantes modulines capables dinduire la scrtion dIL-8 et dIL-6 par les fibroblastes pulpaires et ligamentaires. Nous navons jamais dtect de synthse de TNF- et dIL-10 suprieure au taux basal de scrtion cellulaire. Ces rsultats suggrent que les fibroblastes dentaires tests possdent un profil de scrtion de cytokines pro-inflammatoires semblables aux cellules pithliales (Agace et al., 1993) et endothliales (Al-Okla et al.,1999) certainement li au fait de confiner la raction inflammatoire localement aprs contact avec des antignes streptococciques. Si lactivit adhsine est quivalente pour les RGPs et la protine I/II, leur activit moduline est diffrente. Les RGPs provoquent une synthse de cytokines suprieure par rapport la protine I/II lorsquils se trouvent la surface des bactries entires. Lors des tests dactivation par les modulines purifies, cest la protine I/II qui provoque la synthse maximale de cytokines. Ceci peut tre du une expression et une disponibilit suprieures de rcepteurs pour les ligands polysaccharidiques. La structure plus flexible et plus hydrophile des RGPs offrirait davantage de sites de fixation aux rcepteurs fibroblastiques. Leur abondance la surface bactrienne masquerait en partie dautres molcules de surface comme la protine I/II par encombrement strique. Laffinit de chaque composant de paroi streptococcique pour son rcepteur ainsi quune transduction du signal diffrente peut galement expliquer ces rsultats. Nos rsultats montrent que linternalisation des bactries ou de composants de paroi nest pas ncessaire pour dclencher la synthse dIL-8. De prcdentes tudes ont galement dmontr que la seule fixation des PAMPs aux PRRs induit la synthse de cytokines comme le LPS qui se lie au CD14 et TLRs (Toll-like receptors)et la protine I/II qui se lie aux intgrines 51 (AlOkla et al., 1999).

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Nos exprimentations ont galement mis en vidence que le CD14 est prsent la surface des fibroblastes pulpaires et ligamentaires et quil est un des rcepteurs aux RGPs. Lorsque les fibroblastes sont prconditionns par la vitamine D3, la scrtion dIL-8 nest pas augmente lorsquon stimule les cellules avec le mutant RGPs KO, le double mutant I/II et RGPs KO ainsi que la protine I/II purifie. Ceci confirme que le CD14 nest pas un rcepteur la protine I/II. Les LTAs sont les inducteurs de scrtion de cytokines les plus faibles et il est probable, du fait de leur grande variabilit de structure chez les bactries Gram+ (Fischer et al., 1983), que dans nos conditions dactivation ils soient incapables dinduire une synthse de cytokine plus importante. CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES Nous avons dmontr que ladhsion de S. mutans aux fibroblastes pulpaires et ligamentaires est principalement due la protine I/II et aux RGPs et que les autres constituants bactriens, tels les LTAs, ninterviennent que peu dans ce phnomne. La fixation de la protine I/II et des RGPs leurs rcepteurs respectifs entrane la synthse de cytokines la plus importante. Ces PAMPs constituent la majorit de lactivit inflammatoire de S. mutans. Leur internalisation nest pas ncessaire pour provoquer la synthse dIL-8. Nous avons galement observ que les fibroblastes pulpaires et ligamentaires participent la rponse immunitaire au sein de la pulpe et du ligament dentaire. Les voies de signalisation conduisant la synthse de cytokines suite la fixation de la protine I/II aux intgrines 51 sont en passe dtre identifies (Neff et al., 2003). Il reste dterminer lassociation du CD14 avec les TLRs comme PRRs aux RGPs ainsi que limplication de la protine adaptatrice MyD88 dans la transduction du signal aboutissant la synthse de cytokines. La connaissance des voies de transduction du signal et une caractrisation du domaine de la protine I/II impliqu dans la fixation aux intgrines 51, nous permettrait dutiliser des inhibiteurs spcifiques

la fixation des PAMPs streptococciques aux PRRs des cellules pulpaires et ligamentaires dentaires et de bloquer localement le processus inflammatoire provoqu par S. mutans.

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ADHSINES DE S. MUTANS ET INFLAMMATION PULPAIRE ET PRIDENTAIRE

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