INTRODUCCIN:

Las tcnicas cromatogrficas se emplean para separar los componentes individuales de una mezcla
y, en ciertos casos, para identificar un compuesto comparando su comportamiento
cromatogrficas con el desustancias conocidas empleadas como patrn. La base de la tcnica es
que cuando un determinado soluto interacta con dos fases, una de ellas, habitualmente slida,
llamada fase estacionaria, experimenta una serie de procesos (adsorcin en fase slida,
solubilizaran en cada fase, arrastre por la fase mvil, etc.) que, en ltimo extremo, llevan a que el
soluto se reparta entre ambas fases. En el equilibrio, la relacin entre las concentraciones del
soluto entre ambas fases es constante, y se denomina coeficiente de reparto. Si en una mezcla,
cada componente tiene un coeficiente de reparto diferente del de los otros, la separacin ser
buena. Naturalmente, dicho coeficiente depende de la naturaleza de las fases, as como de las
condiciones de la cromatografa. Una de las tcnicas cromatogrficas ms sencillas es la que se
realiza en capa fina, llamada as porque la fase estacionaria es una capa fina de un material poroso
(gel de slice, almina, etc.) extendida para su manejo mecnico sobre un soporte inerte. La fase
mvil es una mezcla de disolventes en diferentes proporciones, que emigra por la fase
estacionaria debido, sobre todo, a la capilaridad. En su movimiento, arrastra ms o menos a los
componentes de una mezcla en funcin de sus mayores o menores coeficientes de reparto. El
coeficiente de reparto es poco empleado en la prctica. En su lugar, y relacionado con l, se
emplea el denominado Rf, caracterstico de cada sustancia, definido como la relacin entre la
distancia que recorre dicha sustancia y la que recorre la fase mvil. Las ms insolubles tendrn, en
el disolvente empleado, un Rf prximo a cero, mientras las ms solubles se acercarn a uno.
Cromatografa en columna:
Se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala preparativa. Como
fase estacionaria se usa, generalmente, gel de slice o almina dentro de una columna. La eleccin
del disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho disolvente pasa a travs de la columna
por efecto de la gravedad o bien por aplicacin de presin (cromatografa flash). La columna se
prepara mezclando el soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de sta
un poco de algodn o lana de vidrio, para evitar que la slica o la almina queden retenidas en la
columna y que el disolvente se engrasada hasta el nivel del soporte. A continuacin se introduce la
muestra por la parte superior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogindose por
lo general en tubos de ensayo. Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una
sustancia slida de propiedades
Adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son las ms usadas. Este
rellenes lo que se conoce en cromatografa como la fase estacionaria. A travs de la columna se
har pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada
Eluyente y/o fase mvil
.La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y se
coloca sobre el adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo.
A continuacin se pasa un flujo de eluyente a travs de la columna. Los compuestos
constituyentes de la mezcla son arrastrados por el eluyente a su paso, hacindoles avanzar a lo
largo de la columna. Sin embargo,
No todos los compuestos avanzan a la misma velocidad, y esta es precisamente la clave de la
cromatografa .Algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente (fase
estacionaria) y por lo tanto avanzarn ms despacio. Por el contrario, otros apenas son retenidos y
avanzarn a mayor velocidad. En general se dice que la separacin en la cromatografa se basa en
la afinidad diferencial de los distintos compuestos por la fase mvil o la fase estacionaria


El orden aproximado de elucin de compuestos y de polaridad es aproximadamente el que se
indica: Cromatografa en Capa finaLa separacin de mezclas de molculas mediante la
cromatografa de capa fina se basa en el principio del reparto entre dos fases. En general, una
cromatografa se realiza permitiendo que la mezcla de molculas que se desea separar (muestra)
interaccione con un medio o matriz de soporte que sedenomina fase estacionaria. Un segundo
medio (la fase mvil) que es inmiscible con la fase estacionarias hace fluir a travs de sta para
"lavar" (elur) a las molculas en la muestra. Debido a que las distintas molculas en la muestra
presentan diferente coeficiente de reparto, la fase mvil "lavar" a los distintos componentes con
diferente eficiencia, de modo que aquellos que "prefieren disolverse" en la fase mvil sern
eludos ms rpido que los que sean preferencialmente solubles en la fase estacionaria. En la
cromatografa de capa fina, la fase estacionaria es una delgada capa de un soporte slido
granulado, tal como gel de slica, almina, cido silcico u otros, que se depositan sobre una placa
de vidrio, aluminio u otro soporte inerte. Para que adquiera firmeza y no se desmorone, la capa de
fase estacionaria se aglutina con una pequea cantidad de sulfato de calcio u otro agente
cementante. Las muestras se aplican aadiendo pequeas gotas de solucin en un pequeo
crculo cerca del extremo inferior de la placa. La gota se deja secar y si se desea poner ms
muestra se pueden aplicar ms gotas, cuidando de que la mancha no se haga demasiado grande.
La placa seca se sumerge en un pequeo volumen de fase mvil (mezcla de solventes). La
polaridad dela mezcla de solventes se elige de acuerdo a la mezcla de compuestos que se desea
separar. En cromatografa de capa fina la fase estacionaria est hidratada, por lo que se le
considera como la fase polar. Como slo la base de la placa queda sumergida, el solvente
comienza a mojar la fase estacionaria y asciende por capilaridad. Al recorrer la placa la fase mvil
va arrastrando a las substancias apolares y aquellas ms polares son retenidas por la fase
estacionario dando lugar a la separacin. La placa desarrollada se deja secar y se revela con un
reactivo que tia a las substancias de inters. La movilidad relativa o Rf
es la relacin entre la distancia recorrida por la mancha de un compuesto, dividida por la distancia
recorrida por el frente de solvente al momento de sacar la placa del solvente. La tcnica de
cromatografa en capa fina (TLC), entre otras cosas permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto
Comparar muestras
Realizar el seguimiento de una reaccin
Controlar el contenido de las fracciones obtenidas en cromatografa de columna Cromatografa en
columna (por fase inversa): Esta es una cromatografa de interaccin en la que la fase estacionaria,
con molculas hidrofbicas, interacta con molculas hidrofbicas en la muestra. La matriz
consiste de fibras de silicato con cadenas de hidrocarburos. Estas atraern a las molculas
hidrofbicas de la muestra mientras que las hidrofilias salen con el amortiguador. Las molculas
son eludas de la columna lavando con soluciones de distinta concentracin de alcohol o cualquier
otro solvente no polar

1. Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografa de adsorcin.
La cromatografa de adsorcin se caracteriza por utilizar una fase estacionaria slida
(Adsorbente) de carcter polar y una fase mvil lquida (Eluyente) apolar, y se utiliza
tanto con fines analticos (identificacin de sustancias) como con fines preparativos
(aislamiento), siendo su limitacin ms importante la dificultad de separar sustancias de
polaridad parecida.
2. Diga cul es la diferencia entre una cromatografa en capa fina y la de columna.
La cromatografa en capa fina se usa para determinar la pureza de un compuesto, para
controlar el contenido de las fracciones obtenidas en la cromatografa en columna y la
cromatografa en columna para separar distintos compuestos, En la CCF la separacin se
realiza por distancias mientras que en columna se hace por tiempos ( o volmenes ). en
cromatografa en columna la separacin de varias muestras, se realiza de forma
secuencial, es decir, cada una de ellas debe someterse individualmente al mismo proceso
de introduccin en la columna, separacin y deteccin, adems de proceder a reequilibrar
la columna antes de introducir la siguiente muestra. En CCF por el contrario, la separacin
de varias muestras se realiza de forma simultnea, siendo todas ellas sometidas al mismo
tiempo al proceso separativo.
3. Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto que se
purificara en cromatografa en columna?
De acuerdo a la polaridad de la muestra se determina la polaridad del eluyente y
determinar las dems fases que rodean la columna para evitar que la muestra no se
desplace ms de lo necesario
4. Por qu es necesario realizar una cromatografa en capa fina a los eluatos obtenidos de la
columna cromatogrfica?
Para saber la pureza del reactivo que se trado de identificar.

5. Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografa en columna en orden de polaridad
creciente. Anote su bibliografa.
Carbn activado
xido de magnesio
Almina
Gel de slice
cido silcico
Sulfato de calcio
Silicato de magnesio
Celulosa.
CONCLUSIONES.
En esta prctica se realiz la separacin por columna de una mezcla de azul de metileno con cido
benzoico para obtener fracciones (eluatos) colectadas y despus por cromatografa en capa fina
compararlas con una muestra testigo para poder identificar los eluatos que contenan cido
benzoico y por destilacin simple obtener la muestra deseada que era de cido benzoico
La cromatografa por columna se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de
sustancias, reteniendo en su fase estacionaria a algunos compuestos por su propiedad de
adsorcin, por la que a travs de ella se har pasar una corriente de disolventes o mezcla de
disolventes (fase mvil : eluyente) que arrastrar a los compuestos constituyentes de la mezcla,
hacindoles avanzar a travs de la columna. Este tipo de cromatografa se utiliza para saber en que
recipientes se encuentra un componente buscado y para determinar la cantidad de este
cuantitativamente, contrario a la cromatografa por capa fina donde solo se puede hacer un
anlisis cuantitativo.
BIBLIOGRAFA:
http://www.fq.uh.cu/dpto/qi/Aimee/sintesis_inor_web/conf_3.htm
http://www.monografias.com/trabajos13/sepal/sepal.shtml
http://www.panreac.com/new/esp/productos/practicas/practicas27.htm
http://www2.uah.es/bioquimica/b-fbbma/cromat/iupac/nomenclatura.html