Fosas nasales y farngeas

Se realiza el frotis en la zona amigdaleana, y en las fosas nasales, con la finalidad

de obtener muestras de S. aureus, ya que este hace parte de la flora natural del
cuerpo y se encuentra en estas partes del cuerpo, adems de estar en la piel, para
evidenciar la presencia o no del microrganismo en la muestra tomada, se hace
posteriormente la siembra en agar baird Parker, el cual contiene las fuentes de
carbono y nitrgeno necesarias para el crecimiento del microrganismo estudiado.
La glicina, el cloruro de litio y el telurito potsico actan como agentes selectivos,
lo cual propicia la caracterstica de inhibir el crecimiento de flora acompaante. La
yema de huevo constituye el sustrato para determinar la produccin de lecitinasa
y, adems, la actividad de lipasa. Los estafilococos producen colonias de color de
gris oscuro a negro debido a la reduccin del telurito, lo cual se evidencio durante
la toma de resultado al trascurrir el tiempo indicado y necesario, ya que se realiz
la lectura a las 24 y 48 horas, tambin suministrando a la bacteria la condicin de
temperatura ptima para el crecimiento, por ser una bacteria considerada
mesfilo, donde en este grupo de organismos poseen este rango de temperatura
para tener un crecimiento adecuado y presencia de colonias caractersticas,
temperatura que se asemeja a la corporal, por ende este micro ser tiene la
posibilidad de vivir en muestro cuerpo, es decir la incubacin se lleva a cabo a 37
.
Al verificar la posible presencia del S aureus, se somete a la tincin de gram para
ambas pruebas(fosas nasales, y farngea), Los estafilococos son bacterias Gram
positivas por lo cual durante la tincin adquieren el color del primer colorante
usado, es decir se observan de color violeta, para nuestro caso especfico,
adems encontraban agrupados, en forma de racimos caractersticos de las uvas,
estas son caractersticas observadas al microscopio, en objetivo de 100x, lo cual
evidencia para ambas muestras tomadas la presencia de S aureus, segn la
tincin de Gram.
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/bairdpark
er.pdf
Manos
Evaluacin del mtodo de desinfeccin
Se considera al manipulador como una de las fuentes de contaminacin mas
importantes en la industria, ya que es quien se encuentra en contacto, antes
durante y despus de procesamiento con el alimento.
Una de las formas ms efectivas de disminuir esta situacin es realizar y tener
una buena higiene personal, lo que incluye el hecho de un buen lavado de
manos.
La manera de comprobar que tan efectivo es el mtodo de lavado de manos se
realiza a travs de a diferencia en el nmero de ufc antes y despus del lavado
habitual realizando una siembra donde se pone en contacto la pal parte interna
de la mano del manipulador con el medio, que en este caso es l agar plate count
ya que este es un medio usado normalmente para el recuento de
microrganismos, suple las necesidades de microrganismos con exigencias
nutricionales medias, por esta razn se utiliza este medio para cuantificar las ufc
antes y despus del lavdo de manos, dando como resulta mayor crecimiento en
la caja marcada como antes del lavado de manos.
Esto es posible explicarlo sabiendo que el lado de manos en el laboratorio se hizo
como se realiza de manera habitual con el uso de jabon en este caso liquido, se
da por el llamado Arrastre mecnico, mtodo que consiste en la eliminacin de los
microorganismos junto con grasas naturales, suciedad y clulas descamativas, por
medio del uso de agua, jabn y friccin.
Evaluacin de contaminacin fecal

Hacer el frotis sobre la superficie de las manos se realiza para obtener muestras
de microrganismos, ya que es con las manos que realizamos la mayor parte de las
actividades diarias, y por ende existe la posibilidad de tener mayor cantidad de
microrganismos alojados en zonas como uas y los dedos.
Se sumerge el tubo con caldo brilla por que en este medio de cultivo, la peptona
aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y
el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias
Gram positivas y Gram negativas a excepcin de coliformes, las cuales
esperamos tengan proliferacin en el medio, y la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable.
Con este objetivo se siembra en este caldo ya que solo las coliformes tiene la
capacidad de fermentar la lactosa, presentando como evidencia la formacin de
gases y la turbidez del medio. Resultados que no fueron observados luego de
haber sembrado e incubado a 37 y esperar hasta las 48 tiempo en el cual, bajos
las condiciones suministradas al microrganismo, debe presentarse el crecimiento.
Para nuestra experiencia el resultado no fue el esperado, por lo cual podemos
decir que dentro del procedimiento se di lugar a errores o que los medios usados
no estaban bien preparados o tal vez se dio su contaminacin, tambin es posible
que las condiciones no fueran monitoreadas y esto inhibiera el crecimiento, sin
embargo si la prueba resulta positiva se considera el resultado como presuntivo,
es decir que an no es segura la presencia de coliformes totales por lo tanto se
realiza una siembra en agar EMB, el cual es un medio selectivo que pretende
confirmar la presencia de lo microrganismos objeto de estudio, este medio que
permite el crecimiento de bacilos gramnegativos, principalmente de la Familia
Enterobacteriaceae, inhibiendo el crecimiento de las bacterias grampositivas.
Tambin es un medio diferencial ya que nos permite saber por la coloracin de las
colonias si los microorganismos que crecen fermentan lactosa o sacarosa. Esta
capacidad es posible apreciarla ya que las bacterias que fermentan lactosa o
sacarosa, acidifican el medio y la eosina vira dando lugar a la aparicin de
colonias grades verdosas, que son las colonias caractersticas para los coliformes
en este medio, realizando la incubacin a una temperatura de 37 durante 24
horas para favorecer la proliferacin y brindar condiciones ambientales
adecuadas.

Con el fin de conocer si tambin se presentan coliformes fecales se hacen
resiembras una en caldo indl y otra en caldo brilla.
El caldo indl, produce el indol mediante la desaminacin reductiva del triptfano y
esta reaccin es llevada a cabo por algunas bacterias que poseen las enzimas
denominadas en su conjunto triptofanasas, estas estn presentes en los
coliformes por lo tanto le es posible a estas bacterias hacer el desdoblamiento del
triptfano en indl y a su vez permitir luego de la incubacin (no recuerdo a
cuantos grados fue q se hizo ) durante 24 a 48 horas al agregar las 5 gotas del
reactivo de kovack se da la formacin inmediata de un halo rosado en al superficie
lo que significa que la prueba es positiva.
En el caldo brilla la evidencia es la formacin de gas, la cual se mide con la ayuda
de tubos durham, que permiten observar de mejor manera esta presencia de
gases en el caldo, debido a la fermentacin de la lactosa.
El resultado positivo en ambos tubos permite afirmar la presencia de coliformes
fecales, ya que estos tiene la capacidad de obtener el indl atraves del triptfano
y adems son capaces de fermentar la lactosa.
4.1. ESTUDIO MICROBIOLGICO A UTENSILIOS, EQUIPOS Y
SUPERFICIES.
Procedimiento de la esponja o gasa estril
Se realiz el muestreo en el meson, por el hecho de tener mucho mas contacto
con los manipuladores en el laboratorio y con los utensilios del laboratorio, se llevo
a cabo usando el caldo lactosado por ser un medio rico en nutrientes, y no
contiene inhibidores del crecimiento bacteriano.
El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrgeno, mientras
que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentacin de la lactosa, se
produce cido y gas, y ste ltimo se demuestra al usar las campanas Durham,
mide esa capacidad en los microrganismos y permite saber cul es el organismo
que se encuentra en crecimiento, pues solo los coliformes tienen esta propiedad
de realizar ambos proceso y dar ambos resultados. Adems es recomendado
como prueba presuntiva para investigar la presencia de bacterias del grupo
coliformes. Se hace la incubacin con el fin de propiciar la temperatura para el
crecimiento, y el tiempo de 24 horas en el cual se debe dar este mismo proceso.
Al darse el resultado en el cual se observa el gas y el enturbiamiento en el medio,
se procede a sembrar en caldo brilla para realizar en los utensilios el proceso que
se hace en los manipuladores para la identificacin de coliformes fecales en ltima
instancia.
En nuestro caso luego de la siembra no se observaron las evidencias, esto se
puede deber a mala preparacin del medio, o a no controlar de la mejor manera
las condiciones del medio.
4.2. ESTUDIO MICROBIOLOGICO AL AMBIENTE.
Evaluacin de la Contaminacin Bacteriana.
La caja se deja abierta completamente para permitir el contacto del medio de
cultivo con el ambiente, y se deja durante 10 minutos ya que se conoce el nmero
de ufc aceptables en este periodo de tiempo.
El agar usado es el pc ya que este permite el conteo de las colonias, adems es
un medio para microrganismos poco exigentes, por lo tanto los organismos que se
encuentran en el ambiente podrn crecer en el medio, sabiendo q en el tiempo de
10 minutos hay un lmite de 10 ufc, al suministrarse, la incubacin a 37 y durante
24 a 48, tiempo en el cuales tomaron los resultados que muestran gran cantidad
de microrganismos o contaminacin bacteriana en el laboratorio.
4.2.1. Evaluacin de la Contaminacin Fngica.
1. Para medir la contaminacin por parte de hongos en el ambiente del
laboratorio se deja el medio PDA en contacto con el ambiente para observar la
proliferacin de microrganismos capaces de crecer en este medio, ya que se
considera un medio selectivo y muy usado para el recuento de hongos y
levaduras. Lo que indica que por su selectividad solo de dar el crecimiento de
hongos en las cajas que tiene el lmite de 10 UFC en 10 min.
2. Durante esta prueba no se dio crecimiento en el medio, esto puede ser
producto de ausencia de hongos en el laboratorio, o el medio no estaba acto, o
las condiciones no eran las adecuadas para el crecimiento.

Resultados
5.1. Fosas nasales y zona faringea
Prueba positiva en ambos caso, para S, aureus.
5.2. Manos
Evaluacin del mtodo de desinfeccin.
Esta prueba sirve para establecer la eficacia del lavado de las manos en
manipuladores y se reporta la diferencia entre las UFC antes y despus del
lavado.
Evaluacin de la contaminacin fecal.
ausencia de coliformes fecales, el proceso de sanitizacion es el ideal
5.3. Estudio microbiolgico a utensilios, equipos o superficies.
ausencia de coliformes totales y fecales, adecuado proceso de desinfeccin y
no hay contaminacin de origen fecal.Evaluacin microbiolgica al ambiente.
para la fngica, no se dio la formacin de ufc.
0 ufc < 10ufc