INMUNIDAD INNATA

Adalucy Alvarez Aldana. Bacteriloga, MSc, PhD(c)

SISTEMA DEL COMPLEMENTO
GENERALIDADES
El sistema del C hace parte de una de
las primeras lneas de defensa contra
las infecciones.

Lisa microorganismos y clulas
extraas, refuerza la fagocitosis e
incrementa los mecanismos de
inflamacin.

Su funcin es reforzar las respuestas
inmune innata y adquirida.



Es conformado por una serie de
protenas solubles, los respectivos
receptores de membrana y los
reguladores que frenan su activacin.

La mayora de componentes son de
tipo enzimtico y son transportados
por la sangre de forma inactiva hasta
cuando se activan de forma secuencial
por la presencia de PAMPs, uniones
Ag-Ac (membrana de M.O o clulas) o
la produccin de protenas durante la
fase aguda de la inflamacin.
GENERALIDADES
Rodney R. Porter (1917-1976). Premio
Nobel en 1972, por sus trabajos sobre
los Ac. Adems esclareci los
mecanismos de accin del
complemento.

Jules Bordet (1870-1961). Premio
Nobel en 1919 por sus trabajos que
demostraron la actividad bactericida
y hemoltica del complemento.

Se conocen unas 37 distintas
protenas que integran el sistema,
se les conoce como factores y
representan el 10% de las protenas
presentes en el plasma (La
importancia del sistema).

Aproximadamente 20 pertenecen
al circuito de activacin, 9 son del
sistema de control y 8 sirven de
receptores para las molculas
originadas durante el proceso de
activacin.

COMPONENTES
Al ser activado el C, algunos de sus componentes se
fragmentan en dos tipos de molculas. Las de mayor
tamao se adhieren a la membrana de los M.O o clulas y
actan como complejos enzimticos activadores del
siguiente factor en una reaccin en cadena. Los de menor
tamao son los que quedan en circulacin durante las
primeras etapas, para aumentar los mecanismos de
inflamacin.


ACTIVACIN
La activacin de la cascada culmina cuando los factores del
C, anclados a las membranas forman estructuras tubulares
(complejo de ataque a membrana) que las atraviesan e
inducen la lisis.


ACTIVACIN
Tres vas diferentes lo pueden
activar: Clsica, Alternativa (o del
Properdn) y de las Lectinas.

Estas vas difieren en los estmulos
iniciales que las activan y en los
componentes que reconocen dichos
estmulos.

La cascada de activacin se da en
tres fases: (i) reconocimiento, (ii)
activacin, (iii) ataque a la
membrana.


ACTIVACIN
VAS
En la va clsica la fase de activacin
tiene los factores: C1q, C1r, C1s, C2,
C3 y C4.

Para la va alternativa, la fase de
activacin tiene factores B, D y
properdin.

En la va de las Lectinas, actan la
lectina ligadora de manosa (MBL),
ficolina y proteasas de serina
(MASP1 y MASP2) en la fase de
activacin.
COMPONENTES ACTIVACIN
FACTORES DEL COMPLEMENTO
LA FASE DE ACTIVACIN
ES DIFERENTE EN LAS
TRES VAS, PERO PARA
LA FASE DE ATAQUE A
MEMBRANA LAS TRES
VAS CONVERGEN.
SITIOS DE PRODUCCIN DE LOS
FACTORES
La mayora de los componentes del sistema se sintetizan en el hgado,
a excepcin de C1q (DC, macrfagos, timo, intestino, corazn y clulas
epiteliales del bazo).

Factor D (adipocitos) y C7 (macrfagos). Los factores C2, C3 y C4
(etapas iniciales de la va clsica) se producen adems en macrfagos,
C6 y C8 adems en el bazo, C3 y C4 tienen una alta produccin en el
rin.

La produccin de los factores es constitutiva, pero durante una
infeccin la IL-6 induce una sobreexpresin de las protenas del
complemento.






1. Participa en la defensa del hospedero contra microorganismos
patgenos, a travs de los siguientes mecanismos:
Opsonizacin.
Liberacin de pptidos quimiotcticos que atraen PMN.
Activacin de la fagocitosis.
Amplificacin de la inflamacin.
Lisis de clulas o bacterias por dao a la membrana.

FUNCIONES

2. Servir de puente entre la inmunidad innata y la adquirida,
aumentando la activacin de los LB para que produzcan ms
Ac y promover la diferenciacin de LT reguladores.



FUNCIONES
3. Favorecer el transporte e inactivacin de complejos
inmunes y la eliminacin de cuerpos apoptticos.

FUNCIONES
RESUMEN
Se activa secuencialmente en forma de cascada.
1- Primer paso es la seal de peligro (exgena o endgena).
2- Segundo paso es identificar la seal por parte de los RPR (receptores
para el reconocimiento de patrones). Los RPR involucrados en el
sistema del C son Ac especficos, MBL, ficolinas, protena C reactiva
(PCR) y anticuerpos naturales IgM.
3- Tercer paso es la formacin de las convertasas C3 y C5.
4- Cuarto paso es la liberacin de anafilotoxinas.
5- Quinto paso es la formacin del MAC.

VAS DE ACTIVACIN DEL SISTEMA
VA CLSICA: FASE DE RECONOCIMIENTO
Se inicia por una molcula de IgM (son los mejores
activadores al tener cinco sitios de reconocimiento) que se ha
unido a un Ag en la superficie de un microorganismo o de una
clula que deba ser destruida.


VA CLSICA: FASE DE RECONOCIMIENTO

La IgG tambin puede actuar siempre y cuando los Ags estn muy cerca para
que el Ac pueda unirse a dos molculas y as forme una especie de puente.

En orden de mayor a menor fijacin de C:
IgG3, IgG1 e IgG2

Las IgG4, IgE, IgA e IgD no fijan el complemento.
oCuando se une el Ac al Ag tiene lugar
una modificacin en la estructura de
los carbohidratos que estn en las
cadenas constantes de la molcula de
Ac que facilita la unin de C1q.

oC1q se puede unir directamente a
PAMP y a algunas pentraxinas como
la protena C reactiva y al amiloide P.
VA CLSICA: FASE DE RECONOCIMIENTO
oUna vez se une C1q al Ac, los
factores C1r y C1s se unen a
C1q.

oLa interaccin de estas tres
unidades (C1q, C1r y C1s)
constituyen la llamada
activacin del factor C1.


VA CLSICA: FASE DE RECONOCIMIENTO
VA CLSICA: FASE DE RECONOCIMIENTO,
RESUMEN
Cumplida la fase de reconocimiento se inicia la de activacin:

El factor C1 acta sobre el factor C4, fraccionndolo en C4b y C4a
C4b se liga a la membrana de la clula que activ la cascada, mientras
C4a queda libre en el torrente sanguneo. El fragmento C4b
unido a la membrana acta sobre C2 que al ser activado tambin se
divide en dos fragmentos, C2a se adhiere a la molcula C4b y C2b
queda libre.

VA CLSICA: FASE DE ACTIVACIN
El heterodmero (C4b y C2a) es llamado la convertasa de C3, ya que
tiene como sustrato a este factor.

El C3 es codificado por el cromosoma 19, es producido por el hgado y
es el factor ms abundante.

Cuando la convertasa entra en contacto con C3, este se fragmenta en
C3a y C3b.

VA CLSICA: FASE DE ACTIVACIN
C3a (anafilotoxina) queda libre en el suero y amplifica la respuesta
inflamatoria ya que aumenta la permeabilidad capilar, contrae la
musculatura lisa e induce la liberacin de histamina por parte de los
mastocitos.
C3b se une al complejo C4bC2a e inicia la activacin del prximo
factor (C5).
C3b tambin puede unirse al receptor CR1 presente en las clulas
fagocticas, actuando como opsonina para favorecer la fagocitosis.

VA CLSICA: FASE DE ACTIVACIN
VA CLSICA: FASE DE ACTIVACIN,
RESUMEN
Se inicia con la activacin de C5, por la convertasa C4bC2aC3b o C5
CONVERTASA, que genera dos molculas, C5a y C5b. C5a es un
componente quimiotctico para los PMN y un amplificador del
proceso inflamatorio.

VA CLSICA: FASE DE ATAQUE ALA
MEMBRANA (MAC)
C5b se liga fuertemente a los factores C6 y C7, formando un
complejo que se adhiere a la membrana celular en un lugar
diferente a C3b El complejo C5bC6C7 activa al factor C8 que
inicia la lesin en la membrana, la lesin ocasionada por C8 es
poco estable, por lo cual hay que afianzarla con la activacin de
C9, C9 permite la formacin de una estructura tubular capaz de
producir un dao permanente en la membrana.

VA CLSICA: FASE DE ATAQUE ALA
MEMBRANA (MAC)
El microtbulo formado por el complejo C5b a C8 y C9 establece un
flujo continuo entre citoplasma y el medio externo.

Por el microtbulo entra mucha agua y se produce un estallido
osmtico de la clula o microorganismo.





VIDEO VIA CLASICA
VA CLSICA: FASE DE ATAQUE ALA
MEMBRANA (MAC)
Hace parte de la inmunidad innata y acta de inmediato; no requiere
como la anterior de la presencia de Ac.

Se inicia con el reconocimiento de monosacridos expresados en la
membrana de microorganismos, tales como N-acetilglucosamina.

El reconocimiento se da por RPR como MBL y las ficolinas L, H y M,
cuya estructura es homologa a C1q.
VA DE LAS LECTINAS
VA DE LAS LECTINAS
La lectina MBL se unen a polisacridos, la ficolina L reconoce ms de
250 glucanos diferentes y las ficolinas H, M reconocen azcares
acetilados.

Estos receptores activan proteasas de serina (MASP-1, MASP-2),
estructuralmente similares a C1r y C1s.
MASP-2 es la enzima que al igual a C1s fragmenta C4 para formar la
convertasa de C3 y MASP-1 es capaz de dividir directamente a C3.
VA DE LAS LECTINAS
Cumplido el reconocimiento y la activacin, se contina con los pasos
comunes a la va clsica (formacin de convertasa de C3 y dao en la
membrana).







Organismos como Salmonella, Neisseria y Streptococcus son
destruidos por esta va.
VA DE LAS LECTINAS
1.
2.
Es la va evolutivamente ms antigua.

Se activa por la presencia de:
Zimosn (-glucanos presentes en la pared celular de
levaduras).
Inulina
Lipopolisacridos
Adems la ausencia de cido silico en la PC de los M.O

Se inicia a travs de molculas de reconocimiento (iC3by
properdn) y depende de la ausencia de un factor regulador
(factor H), en la membrana de la clula blanco.

VA ALTERNA O DEL PROPERDN

El iC3b se genera constitutivamente en pequeas cantidades, debido a
la inestabilidad de un enlace triester dentro del C3. As, el C3 que
circula en la sangre es hidrolizado (iC3b) en pequeas cantidades y se
une covalentemente a la superficie de todas las clulas cercanas en
contacto con la sangre.

El iC3b es poco especfico y sus ligandos de mayor afinidad son:
residuos de tirosina, treonina, xilosa, manosa, N-acetil-glucosamina,
residuos de serina, galactosa, glucosa, fucosa e inositol.

Debido a su poca especificidad, la presencia del factor H en las clulas
del hospedero evita la activacin de la va en dichas clulas.
VA ALTERNA O DEL PROPERDN
1- Presencia de iC3b y ausencia de factor H en las membranas.

2- C3b es reconocido por el factor B (fB). El dmero C3b-fB es
fragmentado en presencia de Mg++ por el factor D (fD).

3- Luego este complejo es estabilizado por el properdn (P), para
formar la convertasa de C3.
VA ALTERNA O DEL PROPERDN
Hay otro mecanismo de activacin en el que el properdn se
une directamente a la clula blanco y esto tambin
depende de la ausencia del factor H.

El complejo clula-properdn, permite la posterior unin de
C3b (convertasa C3).
VA ALTERNA O DEL PROPERDN
PROPERDN: Es una molcula compuesta por seis unidades de
estructura similar que circulan en la sangre como trmeros o
dmeros y que se sintetizan en los macrfagos, LT y clulas
polimorfonucleares.
VA ALTERNA O DEL PROPERDN
En la activacin de la va alterna no participan C1, C4 y C2 de la va
clsica, en su lugar participan los factores D (similar al C1) y B
(similar al C2).

Esta va suple deficiencias genticas de los factores C1, C4 y C2.

Las molculas Ba (subproductos de activacin de la va), tienen
efecto sobre los macrfagos y promueven la adherencia a
membranas.


VA ALTERNA O DEL PROPERDN
VIDEO VIA
ALTERNA
RESUMEN DE LAS TRES VAS
FUNCIN DE LAS MOLCULAS
C4a: Tiene una accin quimiotctica,
pero ms baja potencia que C3a y
C5a.

C4b: Es capaz de neutralizar virus. Se
une covalentemente a los complejos
inmunes aumentando su solubilidad y
reconocimiento. Tambin hace parte
de la convertasa de C3.

C2 quininas: Se forma por la accin de
la plasmina sobre el C2b. La C2
quinina incrementa la permeabilidad
capilar como la histamina.
iC3b: es una opsonina para
microorganismos por lo que optimiza la
fagocitosis.

C3d: Acta sobre los LB para estimular la
produccin de Ac.

C3e: Producto del catabolismo del C3b,
permite la salida de PMN de la mdula a
los vasos.


FUNCIN DE LAS MOLCULAS
C3a y C5a: Son pptidos
pequeos con carga
positiva, que actan sobre
las clulas mieloides, el
endotelio y el msculo
liso. Se les conoce como
anafilotoxinas por su
capacidad para aumentar
la respuesta inflamatoria
aguda (anafilaxis).
FUNCIN DE LAS MOLCULAS
ANAFILOTOXINA
Al actuar sobre los mastocitos estimula su
degradacin y la liberacin de histamina.

En los PMN activan la quimiotaxis y la
liberacin de leucotrienos.

En las clulas endoteliales incrementan la
expresin de selectinas.

Todos estos efectos generan vasodilatacin
e incremento de la permeabilidad capilar.
Edema y contraccin del musculo liso en
intestino y vas areas.

RECEPTORES PARA EL COMPLEMENTO
Los receptores para los factores del complemento pueden
compartir la especificidad por un mismo ligando .
Receptor para C1q: Une molculas de C1q, mann, surfactante y
coaglutininas. Est presente especficamente en PMN y activa su
respuesta oxidativa.

CR1 o CD35: Reconoce las fracciones C3b/C4b. Es una glucoprotena
de membrana de 25 kDa presente en eritrocitos, macrfagos, PMN,
DC, LB y glomrulos renales. Estimula la fagocitosis mediada por el C,
regulacin px Ac (Ls B) y formacin fibronectina por M.

Los glbulos rojos capturan los complejos inmunes mediante este
receptor y los transportan hacia el sistema reticuloendotelial para ser
eliminados.

La deficiencia de CR1 disminuye la desactivacin de los complejos
inmunes y predispone a la neumona por Mycoplasma y el lupus
sistmico.

RECEPTORES PARA EL COMPLEMENTO
CR2 o CD21: Reacciona con el C3d, C3dg e iC3b. Est presente en los
Ls B y en las DC foliculares de los ganglios linfticos. Este receptor
disminuye el umbral de activacin del LB y aumenta la produccin de
Ac hasta en 1000 veces. Tambin es receptor para el virus de Epstein-
Barr.

CR3 o CD11b/CD18: Est presente en PMN, macrfagos y NK. Una
mutacin en el gen que codifica CR3 causa un sndrome llamado
deficiencia de la adhesividad de los leucocitos.

Reacciona con el iC3b adherido a patgenos o clulas. Es importante
en la adherencia celular ya que interacta con otros ligandos como
ICAM-1. Reconoce componentes como lipopolisacridos, glicolpidos
y -glucn.

RECEPTORES PARA EL COMPLEMENTO
CR4 o CD11c/CD18: Es el
receptor de iC3b ms
abundante en los macrfagos.
Se expresa adems en PMN,
plaquetas y LB. Estimula la
fagocitosis. Pertenece a la
familia de las integrinas.

C3aR y C5aR: Se expresa e
todas las clulas inflamatorias.
La interaccin de las
anafilotoxinas con sus
receptores en las clulas, libera
enzimas almacenas en los
grnulos y produce anin
superxido.

RECEPTORES PARA EL COMPLEMENTO
REGULACIN DEL COMPLEMENTO
Adems del
catabolismo
normal de los
factores del
complemento y su
alta labilidad,
existen varias
protenas
reguladoras que
inhiben su accin.
INACTIVADOR DEL C1: Es una enzima que
inhibe la actividad de C1, uniendose a C1r/s
causando la disociacin del C1q. Inhibe el
sistema de las quininas para frenar la
produccin de bradiquinina.

Cuando hay deficiencia gentica de este factor
se produce una enfermedad llamada edema
angioneurtico hereditario (aumento
permeabilidad capilar).
REGULACIN DEL COMPLEMENTO
INHIBIDOR DE C4 Y C2 (CRIT): Es una protena soluble que
regula a C4 y C2. Forma un complejo con la protena S
(vitronectina), que le permite unirse indirectamente a la
fosfatidilserina expresada en la membrana de las clulas
que mueren por apoptosis.
REGULACIN DEL COMPLEMENTO
FACTOR H: Importante para regular la va
alterna. Previene la unin del iC3b al
factor B, alterando el ensamblaje de la
convertasa C3.

CD46: Es un receptor que protege a las
clulas del husped del ataque del
complemento. Se une a C3b y C4b
depositados en las membranas y favorece
la accin del factor I, el cual los degrada y
evita la formacin de la convertasa C3.
CD46 tambin sirve como receptor para
el ingreso de patgenos a las clulas.

CLUSTERIN, SP40: Inhibe la formacin del
MAC.



REGULACIN DEL COMPLEMENTO
PROTENAS S o VITRONECTINA: Inactivador del C5b, evitando la
formacin del MAC.

CD59: Se une a la membrana por medio de GPI
(glucosilfofatidilinositol). Inhibe la formacin del MAC al impedir el
anclaje de C9. La carencia de GPI es responsable de la anemia
paroxstica nocturna (clon de eritrocitos carente de GPI), por la
activacin del C en la membrana.

DEFENSINAS b-2: Pptidos antimicrobianos de los PMN, se unen al
C1q, impidiendo su accin.

CD55: Se expresa en leucocitos y clulas endoteliales e interfiere con la
funcin de las convertasas C3 y C5.



REGULACIN DEL COMPLEMENTO
COMPLEMENTO E INFECCIONES
Microorganismo como N. gonorrhoeae y N.
meningitidis pueden ser destruidos por la accin del
complemento en ausencia de PMN.

La mayora de las cepas de Staphylococcus aureus y
S. epidermidis activan la va alterna y pueden ser
fagocitados en ausencia de Acs.

E. Coli KI ha desarrollado una capsula rica en cido
silico que simula la membrana de una clula normal
y evita el ataque del C.

Las endotoxinas generan gran cantidad de C3a y
C5a, que contribuyen al choque sptico
desencadenado por BG-.
COMPLEMENTO COMO ENTRADA A PATGENOS
El virus de Epstein-Barr entra a los LB por el CR2.

Las micobacterias sintetizan un anlogo a C4 que fija a C2a y
es capaz de fragmentar C3. El C3b generado opsoniza la
bacteria y permite que entre a los macrfagos por el CR3.

El virus del sarampin, adenovirus grupo B y D, virus del
herpes 6 y Neisseria spp ingresan a travs de CD46.

Los picornavirus entran a las clulas del tracto digestivo al
interactuar con CD55.
La presencia de acido silico incrementa la afinidad por el factor H. La
protena M en Streptococcus del grupo A se une al factor H,
disminuyendo la formacin de la convertasa C3.

Staphylococcus aureus secreta una protena inhibidora de la
quimiotaxis que se une al receptor C5aR; adems produce un
inhibidor de la convertasa de C3.
MECANISMO DE EVASIN DEL COMPLEMENTO
COMPLEMENTO Y SEPSIS
La sepsis se caracteriza por un aumento de la T (39C) o disminucin
(36C), hipotensin, aumento de la frecuencia cardiaca, leucocitosis y
evidencia de infeccin. Este cuadro es creado en parte por la
liberacin de C5a. El incremento de esta anafilotoxina satura los
receptores PMN y paraliza sus funciones efectoras; por lo tanto se
incrementa la infeccin y la bacteriemia si es el caso.

C5a tambin afecta las funciones del endotelio, aumentado la
liberacin de IL-8, quimioquinas y factor tisular, que induce
coagulopata.

En la sepsis los Ls T aumentan la expresin de C5aR y al interactuar
con su ligando entran en apoptosis, as que la inmunosupresin
asociada a la sepsis se debe en parte a la apoptosis de los Ls T y a la
parlisis de los PMN.
COMPLEMENTO Y RESPUESTA INMUNE
ESPECFICA
Este sistema estimula la respuesta
humoral (produccin de Acs) la unin
de C3d al receptor CD21 del LB
incrementa hasta 1000 veces la
produccin de Acs.

La carencia de C3 impide la
produccin de IgG.

El complemento permite tambin la
diferenciacin de LT CD4+ a clulas
reguladoras, o sea productora de IL-
10.

COMPLEMENTO Y ELIMINACIN DE CLULAS
APOPTTICAS Y COMPLEJOS INMUNES
Las clulas apoptticas se generan
constantemente en el cuerpo como
resultado de un recambio fisiolgico y
son eliminadas rpidamente por
clulas fagocticas sin inducir
inflamacin.
ELIMINACIN DE CLULAS APOPTTICAS
iC3b participar en la limpieza
silenciosa de cuerpos
apoptticos.

La eliminacin de complejos
inmunes est regulada por la va
clsica del complemento, donde
C1q reconoce la fraccin
constante de IgM e IgG y
aumenta su reconocimiento por
las clulas fagocticas.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
LIBROS:

Abbas, A K, et al. Celular and Molecular Immunology. 7 ElSeiver Saunders, 545 pages.

Rojas, W et al. Inmunologa, 16. edicin, Ed. Corporacin para Investigaciones Biolgicas, 2012,

Kindt TJ. et al. Inmunologa de Kuby. 6 Ed. Interamericana- McGraw Hill. Espaa.2008. 665 Pags.