INSTITUTO SUPERIOR DANIEL

ALCIDES CARRIN

Especialidad : Laboratorio clnico
Tema : DETERMINACIN GRUPO SANGUNEO
PRUEBA CELULAR Y SRICA EN TUBO
Profesor : Lic. Juan Carlos Vergaray
Ciclo : 6 to.
Curso : INMUNOHEMATOLOGIA Y BANCO DE
SANGRE
Alumno (a) : Ramos Armaulia, Jessenia Shirley



Lima Per
2014

INTRODUCCIN

El presente informe detalla la prctica N 03 de Inmunohematologia y Banco de
Sangre, el tema que se llev a cabo en la prctica fue Determinacin de Grupo
Sanguneo Prueba Celular y Srica en Tubo. A pesar de que la sangre cumple las
mismas funciones en todos los individuos, no es idntica en todos. Existen diferentes
"tipos de sangre. Esta caracterstica es gentica, es decir, nacemos con una sangre
que pertenece a determinado grupo. Por lo tanto, nuestro organismo acepta slo la
sangre del mismo grupo (la sangre compatible) y rechaza la de los otros grupos, con
reacciones que pueden llegar a ser muy graves.
Los sistemas de grupos sanguneos ms conocidos son el Sistema ABO (grupo A,
grupo B, grupo AB y grupo O) y el Sistema Rhesus, conocido como Factor Rh,
(Positivo o Negativo). Estos Sistemas estn presentes simultneamente en todos los
individuos. Cuando se habla de Grupo y Factor nos referimos al Sistema ABO y Rh.
El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, convirtindolo en el
primer grupo sanguneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que
se identifican: los de antgeno A, de antgeno B, y "O". Las transfusiones de sangre
entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica que puede
desembocar en hemlisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte.


MARCO TERICO: Determinacin de Grupo Sanguneo Prueba
celular y Srica en Tubo
Los grupos sanguneos son los distintos tipos en que se clasifica el tejido
sanguneo. Fueron descubiertos por Karl Landsteiner en el ao 1901, quien los
agrup de acuerdo a la presencia o no de aglutingenos en la membrana
plasmtica de los glbulos rojos. En los humanos existen los aglutingenos A y
B. Por otra parte, en el plasma sanguneo se encuentran las aglutininas anti A
y anti B, que son anticuerpos que reaccionan contra los aglutingenos A y B.
Se denomina antgeno a toda sustancia extraa al organismo capaz de generar
anticuerpos como medida de defensa, provocando una respuesta inmune. La
mayora de los antgenos son sustancias proteicas, aunque tambin pueden ser
polisacridos. La pared celular, la cpsula y los cilios de las bacterias pueden
actuar como antgenos, como tambin los virus, los hongos, las toxinas, el
polen, las sustancias qumicas y las partculas del aire. La reaccin antgeno-
anticuerpo se produce cuando los anticuerpos, tambin de origen proteico,
capturan a los antgenos con el fin de eliminarlos del organismo, ya sea por
fagocitosis o por medio de la aglutinacin. La aglutinacin es una reaccin que
ocurre cuando las aglutininas (anticuerpos) presentes en el plasma sanguneo
se unen a los aglutingenos (antgenos) transportados o ubicados en la
membrana plasmtica de los glbulos rojos y los glbulos blancos. Como
resultado de la reaccin se forman grumos y apilamientos de clulas
sanguneas, producto de la destruccin de sus membranas celulares. Un claro
ejemplo de aglutinacin sucede cuando se transfunde sangre de grupos
incompatibles. Los antgenos, adems de estar presentes en la membrana
plasmtica de los eritrocitos, se encuentran tambin en diversos tejidos del
organismo.
Landsteiner demostr que los glbulos rojos contienen por lo menos dos
factores designados como aglutingenos A y b, con los cuales se poda explicar
los cuatro grupos que existan y as postulo que cada persona poda tener uno
de ellos (A o B), ambos (AB) o ninguno (O). Reconoci la presencia de
anticuerpos en el suero y sealo la relacin reciproca que haba entre ellos y los
antgenos presentes en los glbulos rojos demostrando que cuando un
determinado antgeno estaba ausente, su correspondiente anticuerpo se
encontraba en el suero o plasma. As qued establecido que los antgenos del
sistema ABO son los nicos para las cuales existe el correspondiente
anticuerpo, siendo ella una caracterstica constante y predecible en el suero de
individuos normales.
En la especie humana, los grupos sanguneos son cuatro, y se denominan con
las letras A, B, O y AB.
- Sangre de grupo A: posee aglutingenos A en la membrana plasmtica de los
glbulos rojos y aglutininas anti B, es decir contra el aglutingeno B en el
plasma sanguneo.
- Sangre de grupo B: tiene aglutingenos B en los eritrocitos y aglutininas anti
A (contra el aglutingeno A) en el plasma sanguneo.
- Sangre de grupo O: carece de aglutingenos en la superficie de sus
eritrocitos. En el plasma contiene dos tipos de aglutininas, las anti A y las anti
B, o sea contra ambos tipos de aglutingenos.
- Sangre del grupo AB: posee los dos aglutingenos A y B en las membranas
plasmticas de los glbulos rojos, y no tiene aglutininas plasmticas.










Esta clasificacin deja en claro que los grupos sanguneos se establecen de
acuerdo a la presencia o no de aglutingenos y aglutininas. Estas dos
sustancias, como ya fue sealado, son molculas de protenas. Los individuos
cuya sangre es del grupo A (protena de membrana A) producen anticuerpos
contra la protena B de membrana. Los del grupo B elaboran aglutininas
contra el protena A. Aquellas personas que poseen el grupo AB (aglutingenos
A y B en sus eritrocitos) no producen anticuerpos contra las protenas A y B.
Por ltimo, los representantes del grupo O elaboran anticuerpos contra las
protenas A y B.
La distribucin mundial de los grupos sanguneos indica que el grupo O es el
ms numeroso, mientras que el AB obtiene el menor porcentaje.
La clasificacin del grupo ABO comprende dos partes:
1. Prueba celular para determinacin de antgenos.
2. Prueba srica o grupo inverso, para la determinacin de los
anticuerpos. Las dos pruebas se deben practicar simultneamente
porque ellas se complementan y en esta forma se verifican los resultados
de la otra. Debe realizarse a temperatura ambiente 20C -24C; la
incubacin a 37C debilita la reaccin.
En aquellos casos en que haya discrepancia entre ambas pruebas, la
investigacin adicional revelar una condicin que podr ser de importancia
clnica o simplemente interesante desde el punto de vista serolgico.
Las discrepancias en la determinacin del sistema ABO son el resultado de:
Errores tcnicos
Material sucio causa falsos positivos
Contaminacin bacteriana de las muestras
Contaminacin de reactivos suero o clulas
Proporcin incorrecta de la relacin clulas a suero.
Exceso o falta de centrifugacin produce falsos positivos y
negativos
No agregar reactivos o sueros
Temperatura de incubacin incorrecta
Perdida de actividad de los reactivos.
Empleo inadecuado de reactivos y clulas
Presencia de hemolisis total, la cual no se identific, conducen a
lecturas falsas negativas.
Incorrecta identificacin de las muestras de los tubos, fallas en la
anotacin de los resultados y errnea interpretacin de los
mismos es causa de falsos positivos, negativos y resultados finales
incorrectos.

Problemas inherentes a las clulas:
Cuando las clulas estn suspendidas en su propio suero, un exceso de
protenas o presencia de protenas anormales, de la gelatina de
Wharton (en sangre del cordn) o de otras macromolculas pueden
causar la formacin de rouleaux, simulando aglutinacin. El lavado
previo de los hemates que van a ser usados en todas las pruebas
celulares evita estos problemas, porque con este se eliminan dichas
sustancias.







TRABAJO EN PRCTICA
MATERIALES
Agua destilada qumicamente pura
Envase de vidrio
Goteros
Micropipetas de 100 - 1000l y 10 100l
Reactivos : Suero Anti A, Anti B, Anti D

EQUIPOS
* Centrifuga

OBJETIVO
Objetivo: realizar la determinacin correcta del grupo sanguneo y factor Rh.
I. 3 muestras sanguneas por grupo (Tubo lila)
II. Con las 3 muestras sanguneas preparar suspensin GR 5%
III. Preparar Glbulos rojos de grupo sanguneo conocido al 50% pool de
glbulos rojos conocidos A, B, O (positivo)

INTERPRETACIN
Centrifugar a 3500 rpm por 15 segundos o 1000 rpm por 1
minuto (lectura), observar.
Observar el sobrenadante contra un fondo blanco bien iluminado
para apreciar la aglutinacin.
Anotar inmediatamente el tubo en mano los resultados de la
aglutinacin segn patrn.
Todas las discrepancias entre los resultados globular y srico deben
resolverse antes de registrar la interpretacin de tipo ABO del
paciente o donante.





TIPIFICACIN ABO
Prueba celular: Antigeno

50 l de Glbulos Rojos lavados al 5% del paciente ms reactivo Anti A,
Anti B, Anti D cada tubo correspondiente (1 gota)










Prueba srica: Anticuerpo
100 l y/o 2 gotas de suero paciente (cada tubo) mas 50 l y/o 1 gota
de Glbulos Rojos al 50% (pool) de GR. de grupo sanguneo conocido a,
b, o.










OBSERVACION:
En la mesa N 4 se observ que la prueba celular y prueba srica no coincidan ya que
la muestra que trabajamos fue de un paciente de grupo sanguneo B Rh positivo, en la
prctica, la prueba celular nos sali D y la prueba srica A siendo este resultado
errneo debido a que en la prueba celular nos debi de haber salido el antgeno B
debido a que nuestro paciente era de grupo sanguneo B Rh positivo siendo su
antgeno B en la prueba serolgica y teniendo como anticuerpo correspondiente a
en la prueba srica, esto demuestra que hubo un error a la hora de procesar la
muestra, ya que la prueba srica es la prueba que nos permite corroborar el grupo
sanguneo.
COMENTARIO:
Lo realizado en la prctica nos permite decir que la sangre contiene una sustancia llamada
antgeno, que estimula la produccin de anticuerpos en una persona. Por eso es muy importante
conocer el tipo de sangre que tenemos, ya que si algn da se requiere de una transfusin de
sangre o de algn rgano, se puede evitar el "choque" y con ello la muerte. El sistema para
clasificar la sangre se llam ABO y dentro de este sistema fueron identificados y clasificados
4 grupos sanguneos, el A-B-O y AB, segn el antgeno que contienen y que es el que marca la
diferencia. Los tipos de sangre tienen un comportamiento diferente que permite su
intercambio o donacin: El grupo O puede dar sangre a todos los dems, pero solamente puede
recibir de otra persona con tipo O. El grupo A puede dar y recibir sangre de donadores del
grupo A o del O. El grupo B puede dar y recibir sangre de donadores del grupo B o del O. El
grupo AB solo puede recibir sangre de personas de todos los grupos, pero no puede ser
donador. El tipo de sangre es determinado, en parte, por los antgenos de los grupos sanguneos
A, B, O presentes en los glbulos rojos.

Webgrafia:
Enciclopedia Panamericana especialidad Laboratorio 6to. CICLO Tomo 1 [pag. 77]
http://www.portalesmedicos.com/diccionario_medico/index.php/Grupos_sangu%C3%ADneos
http://hnncbiol.blogspot.com/2008/01/grupos-sanguneos.html
http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema17/etexto17.htm
http://wiki.fisiologia.me/images/8/8c/Practic8.pdf

PRUEBA CELULAR (Antgeno) PRUEBA SRICA (Anticuerpo)

RESULTADOS
A B D a b o
Mesa 1 3 + 0 4 + 0 4+ 0 A positivo
Mesa 2 0 0 4 + 3+

3+ 0 O positivo
Mesa 3 0 0 4 + 3+ 3+ 0 O positivo
Mesa 4 0 4 + 0 4+ 0 0 B positivo