ANTGENOS Y ANTICUERPOS C A P T U L O 4 105

furo intracadena invariable que cierra un asa que abarca 50 a

70 residuos.
Casi ninguno de los miembros de la superfamilia de las in-
munoglobulinas puede unir antgeno. Por consiguiente, la es-
tructura caracterstica del pliegue de Ig que se encuentra en
tantas protenas de membrana debe tener alguna funcin aparte
de unir antgeno. Una posibilidad es que dicho pliegue facilite
las interacciones entre protenas de membrana. Como ya se des-
cribi, pueden ocurrir interacciones entre las caras de lminas
plegadas de dominios homlogos de la inmunoglobulina (p. ej.,
interaccin C
H
2/C
H
2) y dominios no homlogos (como interac-
ciones V
H
/V
L
y C
H
1/C
L
).
Anticuerpos monoclonales
Como ya se dijo, la mayora de los antgenos ofrece mltiples
eptopos y por consiguiente induce la proliferacin y diferen-
ciacin de una variedad de clonas de clulas B, derivadas todas
de una clula B que reconoce un eptopo particular. Los anti-
cuerpos sricos resultantes son heterogneos y comprenden una
mezcla de anticuerpos, cada uno especfco para un eptopo (fg.
4-25). Esta respuesta de anticuerpo policlonal facilita la locali-
zacin, fagocitosis y lisis de antgeno mediada por complemen-
to; por lo tanto, tiene ventajas claras para el organismo in vivo.
Por desgracia, la heterogeneidad de anticuerpos que aumenta
la proteccin inmunitaria in vivo suele reducir la efcacia de un
antisuero para varios usos in vitro. Para casi todos los propsi-
tos de investigacin, diagnsticos y teraputicos, son preferibles
anticuerpos monoclonales, derivados de una sola clona y, por
consiguiente, especfcos para un solo eptopo.
No es factible la purifcacin bioqumica directa del anti-
cuerpo monoclonal a partir de un preparado de anticuerpo
policlonal. En 1975, Georges Khler y Cesar Milstein disearon
un mtodo para obtener anticuerpo monoclonal, que se cons-
tituy con rapidez en una de las tecnologas fundamentales de
la inmunologa. Mediante la fusin de una clula B productora
de anticuerpo activada de modo normal con una clula de mie-
loma (una clula plasmtica cancerosa) pudieron obtener una
clula hbrida, llamada hibridoma, que posea las propiedades
de crecimiento inmortal de la clula de mieloma y secretaba el
FIGURA 4-25 El antisuero policlonal ordinario que se produce
en respuesta a un antgeno complejo contiene una mezcla de
anticuerpos monoclonales, cada uno especco para uno de los
cuatro eptopos que se muestran en el antgeno (recuadro). En
contraste, un anticuerpo monoclonal, que se deriva de una clula
plasmtica nica, es especco para un eptopo en un antgeno com-
plejo. Se ilustra aqu el esbozo del mtodo bsico para obtener un
anticuerpo monoclonal.
2
1
4
3
Antgeno
Eptopos
1
2
3
4
+
1
2
3
4
1
1
1
2
2
2
3
3
3
4
4
4
Aislamiento
de clulas
esplnicas Hibridacin Seleccin
Clulas
plasmticas
Clulas de
mieloma
Hibridomas
Aislamiento
de suero
Antisuero policlonal Anticuerpos monoclonales
Ab-2
Ab-1
Ab-3
Ab-4
Ab-1
Ab-2
Ab-3
Ab-4
Ab-4 Ab-3 Ab-2 Ab-1
Clonas
106 P A R T E I I RESPUESTAS DE LAS CLULAS B Y T
anticuerpo producido por la clula B (fg. 4-25). Las clonas re-
sultantes de clulas de hibridoma, que secretan grandes canti-
dades de anticuerpo monoclonal, pueden cultivarse de manera
indefnida. El desarrollo de tcnicas para producir anticuerpos
monoclonales, cuyos detalles se comentan en el captulo 22,
proporcion a los inmunlogos un instrumento de investiga-
cin poderoso y verstil. La importancia del trabajo de Khler
y Milstein se reconoci cuando ambos recibieron el premio
Nobel.
Los anticuerpos monoclonales tienen
usos clnicos importantes
Los anticuerpos monoclonales estn siendo muy tiles como
reactivos diagnsticos, imagenolgicos y teraputicos en medici-
na clnica. Al principio se emplearon sobre todo como reactivos
diagnsticos in vitro. Entre los mltiples reactivos diagnsticos
de anticuerpo monoclonal disponibles en la actualidad se en-
cuentran productos para detectar embarazo, diagnosticar ml-
tiples microorganismos patgenos, medir las concentraciones
sanguneas de varios frmacos, valorar la compatibilidad de an-
tgenos de histocompatibilidad y reconocer antgenos liberados
por ciertos tumores.
Tambin es posible usar in vivo anticuerpos monoclonales
radiomarcados con el fn de identifcar o localizar antgenos tu-
morales y posibilitar el diagnstico ms temprano de algunos
tumores primarios o metastsicos. Por ejemplo, se marca con
yodo-131 el anticuerpo monoclonal contra clulas de cncer
de mama y se introduce en la sangre para detectar la disemina-
cin de un tumor a ganglios linfticos regionales. Esta tcnica
de imagen monoclonal puede revelar metstasis de cncer de
mama que no se reconoceran mediante otras tcnicas de estu-
dio menos sensibles.
Como se expone en el enfoque clnico (vase antes), el uso
de anticuerpos como agentes teraputicos tiene una larga his-
toria. En fechas recientes la disponibilidad de anticuerpos mo-
noclonales y la posibilidad de humanizarlos por tcnicas de
ingeniera gentica ha dado nuevo mpetu a este campo. Los
primeros intentos de usar anticuerpos monoclonales murinos
para tratar a seres humanos enfrentaban la posibilidad de una
intensa reaccin contra estas protenas extraas. En la actuali-
dad, los productos se obtienen en sistemas humanos o mediante
ingeniera gentica (cap. 5) para incorporar regiones V o CDR
de anticuerpos no humanos en regiones C y armazones de an-
ticuerpos humanos, lo que minimiza la posibilidad de inducir
una inmunorreaccin a ellos.
Hay un nmero creciente de anticuerpos teraputicos apro-
bados, y ms de cien nuevos se encuentran en proceso de de-
sarrollo. stos representan varios miles de millones de dlares
anuales en ventas. Las principales reas en que la terapia con
anticuerpos ha sido til son el tratamiento del cncer y el alivio
de trastornos artrticos. Los productos rituximab para el trata-
miento del linfoma no Hodgkin e infiximab o adalimumab para
la artritis reumatoide estn entre los ms ampliamente usados.
Los nombres genricos de los frmacos indican el tipo de anti-
cuerpo; por ejemplo, el sufjo -umab denota un anticuerpo mo-
noclonal humano, mientras que -imab denota un anticuerpo
quimrico, con secuencias de ser humano y de otras especies.
Las abzimas son anticuerpos monoclonales
que catalizan reacciones
La unin de un anticuerpo a su antgeno es similar en muchos
sentidos a la unin de una enzima a su sustrato. En ambos casos,
la unin incluye interacciones no covalentes y dbiles, muestra
una especifcidad alta y con frecuencia una gran afnidad. Lo
que distingue una interaccin de anticuerpo y antgeno de la
interaccin de una enzima y sustrato es que el anticuerpo no
altera el antgeno, en tanto que la enzima cataliza un cambio
qumico en su sustrato. Sin embargo, al igual que las enzimas,
los anticuerpos de especifcidad apropiada pueden estabilizar el
estado de transicin de un sustrato unido y reducir as la energa
de activacin para la modifcacin qumica del sustrato.
Las similitudes entre interacciones de antgeno y anticuerpo
y de sustrato y enzima suscitaron la pregunta sobre la posibili-
dad de que algunos anticuerpos puedan actuar como enzimas
y catalizar reacciones qumicas. Con objeto de investigar esta
posibilidad, se sintetiz un complejo de hapteno y portador en
el cual el hapteno semejaba estructuralmente el estado de tran-
sicin de un ster sometido a hidrlisis. Se fusionaron clulas
esplnicas de ratones inmunizados con este anlogo de estado
de transicin con clulas de mieloma para generar anticuerpos
monoclonales antihapteno monoclonal. Cuando se incubaron
estos anticuerpos monoclonales con un sustrato ster, algunos
de ellos aceleraron la hidrlisis alrededor de 1 000 veces, es de-
cir, actuaron como la enzima que en condiciones normales ca-
taliza la hidrlisis del sustrato. La actividad cataltica de estos
anticuerpos fue muy especfca; es decir, slo hidrolizaron ste-
res cuya estructura en estado de transicin semejaba de modo
estrecho el anlogo de estado de transicin utilizado como un
hapteno en el conjugado inmunizante. Estos anticuerpos catal-
ticos se denominaron abzimas en alusin a su funcin doble de
anticuerpo y enzima.
Un objetivo central de la investigacin del anticuerpo catal-
tico es la obtencin de un grupo de abzimas que corten enlaces
peptdicos en residuos de aminocidos especfcos, tal y como las
enzimas de restriccin cortan DNA en sitios especfcos. Estas
abzimas podran ser instrumentos inestimables en el anlisis es-
tructural y funcional de protenas. Adems, quiz sea posible ge-
nerar abzimas con capacidad de disolver cogulos sanguneos o
segmentar glucoprotenas vricas en sitios especfcos y bloquear,
en consecuencia, la infectividad del virus. Por desgracia, ha re-
sultado en extremo difcil obtener anticuerpos catalticos que
rompan enlaces peptdicos de protenas. Gran parte de la inves-
tigacin que se lleva a cabo en la actualidad en este campo est
encaminada a solucionar este importante pero difcil problema.
RESUMEN
Todos los inmungenos son antgenos, pero no todos los an-
tgenos son inmungenos. Por ejemplo, los haptenos son ant-
genos de molcula pequea, pero slo pueden inducir una
inmunorreaccin (son inmungenos) cuando se conjugan
con una molcula grande.
La inmunogenicidad depende de muchos factores que inclu-
yen alteridad, tamao molecular, composicin qumica, com-
plejidad, dosis, susceptibilidad a procesamiento y presentacin