Resultados

Luego de realizar los clculos se obtuvieron los siguientes datos:

Ensayo N1 Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de reaccin de la fosfatasa
alcalina
Tubos B 1 2 3 4 5 6 7 8
Absorbancia (A) 0.091 0.191 0.196 0.219 0.225 0.247 0.307 0.314 0.324
Absorbancia real
(A)
0.1 0.105 0.128 0.134 0.156 0.216 0.223 0.233
Concentracin de
sustrato [S] (mol/L)
0.002 0.004 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1
Velocidad
enzimtica V (mg/h)
0.176 0.184 0.225 0.235 0.274 0.379 0.391 0.409
1/[S] (L/mol) 500 250 100 50 25 16.7 12.5 10
1/V (h/mg) 5.69 5.43 4.45 4.25 3.65 2.64 2.56 2.45


Ensayo N2 Efecto de los activadores y de los inhibidores en las reacciones enzimticas
Efector Velocidad enzimtica V (mg/h) Tipo de efector
Blanco 6.39 x 10
-3
-
Sol. MgCl
2
7.64 x 10
-3
Activador
Sol. EDTA 1mM 3.47 x 10
-4
Inhibidor acompetitivo
Sol. L- Fenilalanina 0.1M 4.64 x 10
-3
Inhibidor no competitivo









Grficas para hallar km y Vmx de la enzima fosfatasa alcalina frente a su sustrato b-
glicerofostato
Ensayo N1 Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad dela reaccin de la fosfatasa
alcalina

Grfica 1. Representacin de Michaelis Menten: velocidad enzimtica de la fosfatasa alcalina vs
concentracin del sustrato b-glicerofosfato


Grfica 2. Representacin de Lineweaver- Burk: inversos de las velocidades enzimticas de la fosfatasa
alcalina vs los inversos de las concentracines del sustrato b-glicerofosfato
Grfica 2. Grfica Lineweaver Burk
Resultados
Luego de realizar los clculos se obtuvieron los siguientes datos:
Ensayo N1 Efecto de la concentracin de la enzima
Tubos B 1 2 3 4 5
Absorbancia (A) 0.250 0.334 0.419 0.557 0.665 0.705
Absorbancia real (A) 0.084 0.169 0.307 0.415 0.455
Velocidad enzimtica
V (mg/min*mL)
8.58 x 10
-4
1.73 x 10
-3
3.13 x 10
-3
4.24 x 10
-3
4.65 x 10
-3

Volumen de la enzima
(mL)
0.25 0.5 1 1.5 2

Ensayo N2 Efecto del pH
Tubos B 1 2 3
Absorbancia (A) 0.232 0.275 0.367 0.330
Absorbancia real (A) 0.043 0.135 0.098
Velocidad enzimtica V (mg/min*mL) 1.2 x 10
-3
3.76 x 10
-3
2.73 x 10
-3

pH 4 8.6 10

Ensayo N3 Efecto del tiempo de incubacin
Tubos B 1 2 3 4
Absorbancia (A) 0.008 0.316 0.365 0.418 0.439
Absorbancia real (A) 0.308 0.357 0.410 0.431
Concentracin de P liberado (mg) 0.1887 0.2187 0.2512 0.2641
Tiempo de incubacin (min) 0 10 30 40

EnsayoN4 Efectos de la temperatura
Tubos B 1 2 3 4
Absorbancia (A) 0.012 0.376 0.414 0.435 0.307
Absorbancia real (A) 0.364 0.402 0.423 0.295
Velocidad enzimtica V (mg/min*mL) 7.43 x 10
-3
8.21 x 10
-3
8.64 x 10
-3
6.6 x 10
-3

Temperatura (C) 4 20 37 80

Grficas para analizar los factores que modifican la actividad enzimtica de la fosfatasa
alcalina frente a su sustrato b-glicerofosfato
Ensayo N1 Efecto de la [E]

Grfica 1. Representacin del efecto de la enzima: velocidades enzimtica de la fosfatasa alcalina vs los
volmenes de la enzima
Ensayo N2 Efecto del pH

Grfica 2. Representacin del efecto del pH del medio: velocidades enzimtica de la fosfatasa alcalina vs los
pH 4, 8.6 y 10.
Ensayo N3 Efecto de tiempo de incubacin

Grfica 3. Representacin del efecto del tiempo de incubacin: concentraciones de producto (fosfato
liberado) vs el tiempo de incubacin de la enzima fosfatasa alcalina con el sustrato b- glicerofosfato

Ensayo N4 Efecto de la temperatura

Grfica 4. Representacin del efecto de la temperatura: velocidades enzimtica de la fosfatasa alcalina vs la
temperatura en donde se encuentra reaccionando la enzima fosfatasa alcalina con el sustrato b-
glicerofosfato.