OBSERVACIN DE ESTOMAS Y CLOROPLASTOS

OBJETIVOS
- Observar la morfologa tpica de las clulas vegetales y la presencia de estomas.
- Practicar las tcnicas de tincin de preparaciones microscpicas.
- Reconocer los principales orgnulos fotosintticos vegetales.

FUNDAMENTO TERICO
La EPIDERMIS es un tejido formado por una nica capa de
clulas unidas entre s, sin dejar espacios intercelulares. Se
encuentra en las hojas, tallo y races de las plantas jvenes. Sus
clulas no poseen cloroplastos y pueden estar engrosadas
exteriormente con materiales lipdicos, formando una capa
impermeable llamada cutina. Cuando esto es as, la capa de
cutina impide el necesario intercambio de agua y gases con la
atmsfera, por lo que aparecen, especialmente en el envs de las
hojas, unas estructuras denominadas estomas que hacen posible
ese intercambio. Los estomas poseen un mecanismo que regula
su apertura y cierre.
La epidermis es un tejido protector cuya funcin es la de
proteger al vegetal de la desecacin y de la agresin de los
agentes externos. En la raz permite la absorcin de agua y sales
minerales.
La forma de las clulas epidrmicas y la de los estomas depende
del tipo de planta que estemos estudiando. En ocasiones el ostiolo
no se ve por encontrarse cerrado; en estos casos se debe preparar
otra muestra utilizando una hoja que est recin cortada, ya que los ostiolos suelen estar cerrados en las
hojas marchitas o bien que llevan mucho tiempo cortadas.

Las clulas de la epidermis de la hoja Lirio son alargadas e incoloras, tienen ncleos bien visibles (n).
Cada estoma est formado por dos clulas simtricas arrionadas, clulas estomticas u oclusivas (est),
stas son las nicas de la epidermis que contienen granos de clorofila (cp). Entre las dos clulas se
percibe un orificio de forma oval, el ostiolo (ost). Si aparecen granos de cloroplastos en las clulas de
la epidermis pertenecen al parnquima
cloroflico de la hoja (par).
Los vegetales son seres auttrofos
fotosintticos. Gracias a la clorofila son
capaces de sintetizar materia orgnica,
fundamentalmente glcidos, a partir de
compuestos inorgnicos como el CO
2
. Los
cloroplastos son los principales orgnulos
implicados en dicho proceso.
En la hoja de musgo, el citoplasma aparecer
lleno de abundantes grnulos de color verde,
cloroplastos (cp). La forma y tamao de los
cloroplastos vara de acuerdo con el material
que observemos, en general, son ms o menos
esfricos u ovalados.




MATERIAL
Material de laboratorio
Microscopio.
Escalpelo o bistur
Pinzas.
2 Portaobjetos/ 2 Cubreobjetos.
Banco de tincin o Placa de Petri.
Papel de filtro.
Frasco Lavador.
Reactivos
Glicerina al 50% en frasco cuentagotas
Verde de metilo actico.
Material biolgico
Hojas recin cortadas de lirio, tulipn, gladiolo, cebolla o
puerros (cualquier monocotilednea)
Hojas de musgo o Elodea (alga acutica).

Verde metilo actico: 1 gramo de colorante en polvo, 100 ml de alcohol etlico y 1 ml de cido
actico glacial.
MTODO
a) Obervacin de estomas de epidermis de Lirio

1. Hacer una incisin transversal, con una cuchilla, de medio
centmetro de longitud, en el tercio superior de la hoja. Con
las pinzas tirar de uno de los bordes del corte rasgando en
sentido longitudinal de la hoja. Se desprender fcilmente
una fina membrana, que es la epidermis de la hoja.
2. Con el portaobjetos situado encima de la placa de Petri,
aade a la muestra unas gotas de colorante verde de metilo
actico y espera, ms o menos 5 minutos, para que este
ejerza su accin.


3. Transcurrido los cinco minutos, elimina el colorante vertiendo agua sobre la muestra, que
habrs sujetado al porta con ayuda de unas pinzas. El exceso de agua o de colorante que
queda en los alrededores de la muestra se seca con un trozo de papel de filtro.
4. Aade unas 2 3 gotas de glicerina al 50% y con cuidado coloca el cubreobjetos sobre el
fragmento de epidermis, cuidando de que no queden burbujas de aire entre el cubre y el
portaobjetos. Observa al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento, para
luego ir pasando a otros de mayor aumento.
b) Observacin de cloroplastos en la hoja de musgo.
1. Sobre un portaobjetos con una gota de glicerina al 50 % colocar una hoja de musgo. Poner
el cubre siguiendo la tcnica de las prctica anterior.
2. Observar al microscopio, empezando por los objetivos de menor aumentos cambiando
progresivamente a los de mayor aumento



ANLISIS Y DISCUSIN DE LOS RESULTADOS.
De los dibujos que se muestran a continuacin indica cul de ellos representa mejor la imagen que
observas en el microscopio.
Cules son las partes de la clula que observas ms claramente?
Cmo se encontraban los estomas que has observado, abiertos o cerrados?. A que es debido?
Por qu piensas que debe teirse la epidermis antes de observarla al microscopio?
Qu es la epidermis de una hoja y qu finalidad tiene? Porqu encontramos en ella plastos?
Has podido ver algn otro orgnulo celular? Cules?
Las clulas que ves presentan una membrana fcilmente visible. Se trata de la membrana
plasmtica o de la pared celular?
Realiza un esquema de la imagen observada y sobre l seala la membrana, el ncleo, el
citoplasma y los estomas. Colorea el ncleo de la clula.
Con cuntos aumentos ests observando la imagen?
Qu funcin realizan los estomas?
Cul es el pigmento que contienen los cloroplastos?Qu funcin tienen?
Establece la relacin que existe entre el color observado en los cloroplastos y la funcin que tienen
en las plantas.
Al observar con el MO. Qu aspecto tendrn las clulas de una planta que germin bajo una
roca? Argumenta tu respuesta. Propn un experimento que te permita apoyar el argumento
anterior.
Esta actividad prctica permite corroborar la teora celular. Fundamenta este planteamiento.