Bioquimica II Biomedicina -Prof.

Andreza Martins









DETERMINAO DA UREIA EM
AMOSTRA DESCONHECIDA






Marlene Ratkiewicz








Porto Alegre 04 de junho de
2012
1- INTRODUO

A uria um produto do catabolismo de aminocidos e protenas. Gerada no
fgado, a principal fonte de excreo do nitrognio do organismo. difundida
atravs da maioria das membranas celulares, e a sua maior parte excretada pela
urina, sendo que pequenas quantidades podem ser excretadas pelo suor e
degradadas por bactria intestinais. Os nveis glicocorticide e o hormnio
tireoidiano aumentam, e os andrognios e o hormnio do crescimento diminuem
seus nveis sricos. Apesar de ser um marcador da funo renal, considerada
menos eficiente do que a creatinina pelos diferentes fatores no-renais, que podem
afetar sua concentrao. No entanto, sua elevao mais precoce, e no sofre com
a variao da massa muscular. A avaliao conjunta com a creatinina til no
diagnstico diferencial das causas de leso renal.
A uria a principal forma excretora do nitrognio proveniente do catabolismo
protitico. Forma-se no fgado a partir dos gripos NH2 (amonaxo) liberados pela
desanimao dos aminocidos (ciclo da ornitina). Sua dosagem constitui o recurso
mais utilizado para uma avaliao grosseira do estado de funcionamento renal.
Antigamente utilizava-se a tcnica gasomtrica comparativa de Yvon, na qual o teor
de uria era deduzido do volume de N desprendido por um determinado volume de
sangue sob ao do hipobromito de sdio. Hoje determina o teor de uria a partir da
amnia liberada pela ao cataltica da enzima urase.
A finalidade da dosagem da uria no sangue utilizada para avaliar a funo
renal, ou para confirmar e/ou avaliar a evoluo de uma patologia que afete a funo
dos rins. Ajuda a avaliar a intensidade de uma desidratao.
A taxa normal de uria no plasma ou soro varia de 15 40 mg/dL
Valores aumentados de uria no sangue ou hiperazotemia: pode ser devida a
causas renais, pr-renais e ps-renais, ou indicam aumento da destruio de
protenas no organismo, como nas queimaduras extensas. Patologia renal.
Obstruo urinaria (clculo renal ou hipertrofia de prstata). Reduo do fluxo
sangneo renal (desidratao).
Nas causas renais contam-se a glomerulonefrite aguda (so afeces que
acometem o glomrulo, estrutura microscpica formada por um emaranhado de
capilares semelhantes a um novelo de l. a principal estrutura renal responsvel
pela filtrao do sangue.), na qual s se observam aumentos moderados, nefrite
crnica, rim policstico, nefrosclerose, necrose tubular aguda e coma diabtico.
Nas causas pr-renais, existem dois grandes mecanismos capazes de provoc-la
(que amide coexistem no mesmo enfermo):
Oferta deficiente de sangue no rim e;
Superproduo de resduos nitrogenados.
A insuficincia cardaca, desidratao, choque, hemorragias digestivas,
quadros neurolgicos agudos e insuficincia cortio-supra-renal representam as
principais causas de hiperazotemia pr-renal.
As causas ps-renais so constitudas por qualquer tipo de obstruo
acentuada do trato urinrio( hipertrofia prosttica, tumores).
As causas da uria baixa podem esta relacionada : Insuficincia heptica
grave, nefrose no complicada de insuficincia renal, caquexia ( a perda de peso,
atrofia muscular, fadiga, fraqueza e perda de apetite por algum que no est
tentando perder peso, ou seja, uma desnutrio aguda.), hemodiluio (diluio da
massa eritrocitria).
Para fins de avaliao do estado de funcionamento renal comum solicitar-se
a dosagem de uria juntamente com a de creatinina. A elevao desta ltima no
sangue mais tardia do que a da uria, de modo que exibe maior valor prognstico.
As dosagens de uria no soro ou plasma so muito menos sensveis, como provas
de funo renal, do que teste de depurao; a taxa de uria pode manter-se dentro
dos limites normais at que a depurao da uria ou da creatinina se tenha reduzido
a menos 50%.



H
2
O + ureia urease 2NH
3
+ CO
2


Cetoglutanato + 2 NH
3
glutamato desidrogenase NAD + L-Glutamato



2 OBJETIVO

Conhecer a tcnica que determina a absorbncia da ureia na amostra


3- REAGENTES

Kit para determinao de uria disponvel comercialmente;
Soro sanguneo normal;
Padro de uria 70mg/dL.


4- MATERIAIS UTILIZADOS

- Tubo de ensaio
- Pipeta graduada
- Pipeta automtica
- Estante para tubo de ensaio
- Cronmetro
- Pisseta
- Cubeta


5- MTODOS

- Misturar os reagentes, toda a quantidade que vem no kit.
- Cuidado com a estabilidade da soluo: 2 dias em temperatura ambiente e
28 dias na geladeira (2C a 8C).
- Preparar em dois tubos de ensaio os seguintes reagentes:



Tabela 1
Tubos Teste Padro
Reagente 1,0 1,0
Padro - 100 L
Amostra 2 100 L -

- Homogeneizar os tubos, aps a pipetagem;
- Aguardar o tempo de um minuto, mantendo-os na incubao a 37C;
- Zerar o espectrofotmetro;
- Ler em comprimento de onda de 340nm;
- Com o cronmetro realizar a leitura no tempo de 30 segundos e 90
segundos, anotando a absorbncia das solues;
- Descartar e limpar os materiais adequadamente.


6- RESULTADOS OBTIDOS

30
segundos
90
segundos
Teste 1,082 1,073
Padro 0,711 0,531

Calcular Fc:
Fc = Concentrao padro
Absorbncia padro
Absorbncia padro = Abs 90 segundos Abs 30 segundos
Abs padro= 0,531 0,711 = - 0,18

Fc = 70 = 388,8
0,18


Concentrao da ureia amostra = Fc x Abs amostra
Abs amostra = 1,073 1,082 = 0,009
[ ] ureia amostra = 388,8 x 0,009= 3,499



Grfico 1: Concentrao x absorbncia



7- CONCLUSO

Um aumento na taxa de ureia sangunea pode ser observado em dietas ricas
em protenas, insuficincia cardaca congestiva, nefrite, insuficincia renal aguda,
carcinomas no trato urinrio ou com a idade.
As causas pr-renais de elevao da ureia no sangue ocorrem por deficincia
na perfuso dos rins como na insuficincia cardaca congestiva, desidratao,
choque e diminuio do volume sanguneo (hemorragias internas).
Elevaes da ureia ocorrem tambm por catabolismo proteico elevado; febre,
septicemia, stress e queimaduras.
As causas renais de elevao da ureia so nefrites, pielonefrites e
insuficincia renal aguda e crnica.
As causas ps-renais so obstrues no trato urinrio (clculos, carcinomas
ou plipos).
y = 0.0026x + 3E-17
R = 1
0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
0.12
0.14
0.16
0.18
0.2
0 10 20 30 40 50 60 70 80
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a


Concentrao mg/dL
J a diminuio na taxa de ureia est relacionada com insuficincia heptica
grave, aumento da diurese, reduo do catabolismo proteico, gravidez normal e em
indivduos submetidos a dietas de baixo valor proteico e alto teor glicdico.
Drogas e circunstncias que podem alterar os resultados:
Aminoglicsideos, anfotericina, cloranfenicol, meticilina, m funo heptica


7- REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
BIBLIOTECA on-line. Disponvel em:
http://www.goldanalisa.com.br/produtos/UREIA_PP.pdf Acesso em: 08 de junho
de 2012.
<http://www.goldanalisa.com.br/produtos/UREIA_PP.pdf> Acesso em 10 de junho de
2012.
<http://bioquimicaenf.blogspot.com.br/2010/11/dosagem-de-ureia.htmlho de 2012>
acesso em 10 de junho de 2012.