UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

ESCUELA MEDICINA VETERINARIA


Microbiologa Veterinaria

Proyecto de investigacin

AVANCE 4
Carga bacteriana en alimento balanceado para caninos de expendio al peso en el
mercado El Eden distrito de Santiago de Surco, departamento de Lima.

Docente: MV. Franco Ceino Gordillo

Elaborado por:
Alex Flores Alzamora
Cristina Razo Oliva
Jackeline Torres Pia
Valeria Castro Viguria




Surco, 19 de Mayo del 2014
RESUMEN

El tema del proyecto de investigacin es Carga bacteriana en alimento balanceado
para caninos de expendio al peso en el mercado (El Edn), distrito de Santiago de Surco,
departamento de Lima y nuestro propsito es comprobar la falta de cuidado en el
almacenamiento y distribucin de alimento balanceado de expendio al peso para caninos
teniendo en cuenta los microorganismos presentes, a travs del anlisis y toma de posicin
sustentada frente a la informacin existente. Para esto, primero recolectaremos las muestras
de alimento balanceado para desarrollar las tcnicas comunes de aislamiento de alimentos en
medios de cultivos y poder identificar la presencia de bacterias en alimento balanceado para
caninos de expendio al peso como finalidad del proyecto de investigacin. Luego,
informaremos las consecuencias que trae la mala administracin de alimento, como las
enfermedades que ocasiona.
Este anlisis y sustento de nuestra posicin nos llev a concluir en que el mal manejo
de saneamiento respecto al alimento balanceado para caninos en el mercado El Eden, puede
ocasionar la produccin de microorganismos sean de naturaleza patgena e oportunista, a fin
de poder comprobar la presencia de las mismas por medio de las tcnicas de aislamiento
para alimentos.


Palabras clave: Carga bacteriana, alimento balanceado, mercado El Edn, tcnicas de
aislamiento, enfermedades.





INTRODUCCIN

En este ltimo siglo, la cantidad de informalidad de expendio de alimentos balanceaos
para caninos se ha incrementado. Frente a esto seleccionamos el mercado El Edn, el cual
se ubica en el distrito Santiago de Surco del departamento de Lima. Donde procedimos a
visitarlo para poder comprar una cantidad adecuada de alimento balanceado para caninos y
as poder recolectar la muestra. Lo que pretendemos con este proyecto de investigacin es
poder comprobar la falta de cuidado en el almacenamiento y distribucin de alimento
balanceado de expendio al peso para caninos teniendo en cuenta los microorganismos
presentes, mediante el desarrollo de tcnicas comunes de aislamiento de alimentos en
medios de cultivos. Como tambin pretendemos responder: Cules son las bacterias que se
presentan en alimento balanceado para caninos de expendio al peso? Cules son los
efectos que ocasionan estas bacterias?
Para responder a estas interrogantes, contamos con el equipo adecuado de investigaciones
del laboratorio de Microbiologa Veterinaria de la Universidad Ricardo Palma
especializados en agentes microbianos, as como informacin obtenida de libros, reportajes,
folletos, peridicos e internet.
El objetivo es aplicar las tcnicas de aislamiento de alimentos en medios de cultivos
adecuados para as poder explicar los tipos de bacterias que se encuentran en las muestras,
identificar la presencia de las mismas en el alimento balanceado para caninos de expendio
al peso, su morfologa, clasificacin y los efectos que ocasionan en el organismo del
canino.
El propsito del estudio de este tema es para conocer e identificar los tipos de bacterias, su
clasificacin sea por sus componentes. Y ver tambin en que situacin nos encontramos
con respecto al almacenamiento y distribucin de alimento balanceado para caninos de
expendio al peso en el mercado El Edn, ubicado en el distrito de Santiago de Surco de
Lima metropolitana, a travs de puntos especficos que hemos considerado para
informarnos bien.
MARCO TEORICO

VARIABLES DEL ESTUDIO
CUALITATIVAS
Medidas sanidad en la venta de alimento balanceado para caninos de expendio al peso.
Marcas de alimentos.

CUANTITATIVAS
Carga microbiolgica.
MUESTRAS
La toma de muestra se realiz en el mercado el Edn, ubicado en la Av. Benavides, cuadra 36. A 2
cuadras del Ovalo Higuereta, en el distrito de Surco, En el departamento de Lima.
Elegimos un stand del primer piso, dedicado a alimentacin e higiene de animales menores. En el
cual encontramos diferentes marcas de comida para caninos, que son los siguientes:
- Ricocan: precio s/ 6.00/ kg
- Dog Chow: precio s/ 8.00/kg
- Super Can: precio s/5.00/kg


Imagen 1

Tomamos una muestra de un kg de cada una de estas bolsas y tomando nuestros tubos con
tioglicolato sumergimos la muestra de las galletas tomada con el hisopo estril.
DETERMINACIN MICROBIOLGICA
Se realizar la determinacin de la carga microbiana total en alimentos de expendio al peso en agar
nutritivo y el conteo de las coliformes (bacilos entricos) se realizar en el agar Mc Conkey.

MATERIALES Y EQUIPOS
Muestras de alimento balanceado para caninos de expendio al peso
Balanza Analtica
Autoclave
Estufa
Microscopio
Gradillas
Pipetas Pasteur
Pipetas graduadas
Tubos de ensayo
Placas Petri
Mechero
Pipetas Pasteur

REACTIVOS
Agar Nutritivo
Agar Mac conkey
Tioglicolato

Todo material que se utilice en la toma de muestras, sean, bolsas, pinzas, guantes, etc. Tienen que
estar estriles para evitar la contaminacin de la muestra.

RECOLECCIN DE LAS MUESTRAS
1. Los alimentos expuestos al aire mismo y a otros contaminantes, no requieres requieren
precauciones estrictamente aspticas, ya que al estar expuestos al medio ya no se
encuentran en un medio estril.
2. En los productos agranel se debe tomar la muestra de varios puntos del contenedor para
obtener una muestra representativa, se tomarn tres muestras por envase.
3. Como las muestras se toman de un envase de venta a granel, antes de tomar la muestra se
debe dejar pasar las primeras fracciones del producto para limpiar dicha salida.
4. Las muestras deben ser identificadas correctamente, debiendo consignarlas en un acta
correspondientes a: nombre del producto, marca del producto, datos de la firma
elaboradora, fecha y hora de la extraccin de la muestra, datos del rtulo (n de lote),
condiciones en las que se extrae la muestra, fecha de elaboracin y vencimiento del
producto.

IDENTIFICACIN Y CONSERVACIN DE LA MUESTRA
1. Se debe rotular las muestras para que cada una de estas est identificada y as se evite la
confusin entre ellas.
2. Para la conservacin de la muestra usaremos el tioglicolato, que es un medio de transporte
el cual es capaz de mantener la muestra por un tiempo prolongado sin concentracin
microbiana.

TECNICAS MICROBIOLOGICAS BASICAS
Los requisitos son dictados por la naturaleza de la muestra. La correcta manipulacin y
preparacin de muestras preserva la integridad de la misma, minimiza cualquier cambio en
la carga microbiana y garantiza la seguridad de quienes las manejan.
Medios de cultivo
El agar se funde a 90 C, y se solidifica cuando se enfra a 40 C. Se puede aadir
ingredientes sensibles, tales como nutrientes mientras este tibio.
El agar por lo general se prepara con una concentracin de 1,5 % para producir los medios
de cultivos propicios, y deben de tener la consistencia de una gelatina.
Otros medios artificiales que se pueden usar o aadir pueden ser:
-Agua
-Cloruro de sodio (y otros electrolitos)
-Peptona (una protena digestiva animal o vegetal a partir de una enzima)
-Carne o extracto de levadura (utilizado para enriquecer los medios de cultivos)
-Sangre o suero (generalmente de caballo o de oveja)
-Indicadores de pH (por ejemplo agar Mc Conkey)
-pH, sustancias reguladoras
-Inhibidores selectivos o promotores.
La mayora de los medios de comunicacin se suministra en forma de polvo deshidratado que se
reconstituye y se esteriliza antes de verterse en placa Petri de plstico estril.
El uso de medios solidos permite colonias separadas, que se forman y utilizan para su identificacin
por parte de su morfologa.
Tambin permite la cuantificacin de la carga bacteriana.
Algunos medios de cultivos contienen ingredientes selectivos que inhibirn el crecimiento de no
contaminantes.
Estos medios tambin pueden tener indicadores que demuestren la presencia de bacterias en
particular por diferenciacin de color.
Al hacer instrucciones microbiolgica seguimiento.
Uso de agua destilada o desionizada estril para evitar cualquier impureza que pueda estar presente.
Las instrucciones pueden requerir que el pH de los medios de cultivos se ajuste segn sea necesario
en la preparacin.
Las placas Petri con agar deben dejarse secar y solidificar a temperatura ambiente (18-22 C)
durante 20-30 min antes de ser invertida y almacenada en la oscuridad a 2-8C.
Se debe asignar una fecha de caducidad a las placas e identificar el tipo de medio en la base de la
placa Petri.


Tcnica de siembra
El asa de cultivo debe ser esterilizado y encima de la placa Petri hacer un recorrido en forma de zig-
zag, despus puede ser girado 180 .
La placa se vuelve a girar un cuarto de vuelta y el proceso se repite.
Este procedimiento se repite una tercera vez y se termina con una lnea en zig zag.
La temperatura ptima de la mayora de las bacterias que se aisl en alimento animal es de 37 C.
La incubacin debe realizarse en un laboratorio adecuado, en una incubadora lejos de la luz directa
y la placa inoculada invertida para evitar goteos de condensacin que cae sobre los medios de
cultivo.





Tcnica de siembra en Placa Petri con agar
































Diagrama que indica la inoculacin de un medio slido para colonias individuales

















BIBLIOGRAFA


European co-operation for accreditation. 2002. EA-04/10 Accreditation for microbiology
laboratories EA-04/10 G: 2002. Paris, France.
ISO 6497:2002. Animal feeding stuffs Sampling. Geneva, Switzerland.
ISO 6498:2012. Animal feeding stuffs Guidelines for sample preparation. Geneva,
Switzerland.
ISO 21528-2:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal methods
for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae Part 2: Colony-count method.
Geneva, Switzerland.
VDLUFA. 2012. Methods book III 8th Supplement 2012, No 28.1.1. Standard operating and
procedure to enumerate micro-organism using solid culture media. Speyer, Germany.