Manual de Practicas

Facultad de Bioanlisis, Veracruz Manual de Prcticas de Hematologa
MANUAL DE PRCTICAS DE
LABORATORIO
SERIE BLANCA

ELABOR:

Q.C. MARIA ESTHER DESCHAMPS LAGO
Serie Blanca 1
SERIE BLANCA: PRACTICA NO.1
OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE
1. INTRODUCCIN
Obtencin De Sangre Cai!ar
Es el mtodo empleado cuando se necesita tan solo una pequea cantidad de sangre, ya
que los estudios a realizar as lo requieren
El sitio ms apropiado para o!tener sangre capilar es la yema del dedo En los nios ms
pequeos, es ms con"eniente o!tenerla del tal#n # del dedo pulgar del pie $os detalles
relati"os a los recipientes y portao!%etos que se utilizan, se indican a continuaci#n
VENTAJAS.
Facilidad
con que puede o!tenerse
Especialm
ente &til en pacientes geritricos y en nios, en particular, recin nacidos
DESVENTAJAS.
'#lo logra
o!tenerse una pequea cantidad de sangre que puede ser insu(iciente
Es un
mtodo por lo general tardado y que tiende a pro"ocar )em#lisis de la muestra
En pacientes inmunocomprometidos puede pro"ocar in(ecciones, e*cepto cuando se
realiza la punci#n despus de + a ,- min de contacto con la piel con un !uen
antisptico
Obtencin De Sangre "en#$a .
Es el principal mtodo de e*tracci#n de sangre en el la!oratorio de anlisis clnicos, ya que
es relati"amente (cil de realizar
VENTAJAS.
.os permite )acer m&ltiples e*menes y en repetidas "eces si se desea, con la misma
muestra
$as alcuotas de plasma y suero pueden congelarse para (utura re(erencia
DESVENTAJAS
Puede pro"ocar la coagulaci#n de la sangre si el procedimiento lle"a muc)o tiempo
/lgunos componentes no son esta!les en sangre anticoagulada
Puede di(icultarse en nios, pacientes o!esos # en estado de s)oc0
Puede ocasionarse )em#lisis de las muestras a(ectando ciertas determinaciones, por
las siguientes causas1
Serie Blanca 2
Por (orzar el paso de la sangre al tu!o
Por agitar el tu!o enrgicamente
Por e*traer sangre de un )ematoma
Antic#ag%!ante$ E&!ea'#$
Estas sustancias impiden la (ormaci#n de cogulos El mecanismo por el que se e"ita la
coagulaci#n, "ara seg&n el anticoagulante2 por e%emplo, E34/, citrato y o*alato se unen con
el calcio, mientras que la )eparina impide la con"ersi#n de protrom!ina en trom!ina
E%emplos de anticoagulantes son E34/, citrato de sodio, y )eparina en (orma de sal de
litio ,$os tu!os de!en in"ertirse "arias "eces para asegurar la mezcla adecuada despus e
la recolecci#n, de acuerdo con las instrucciones del (a!ricante
(. PRINCIPIO ) METODOLOG*A .
El sitio ms prctico para o!tener sangre "enosa es la (le*ura anterior del !razo, de
pre(erencia %usto por arri!a de alguna de las ramas "enosas que all se encuentran $as
"enas super(iciales de la cara anterior del ante!razo son las ms com&nes para la
"enopunci#n $as tres "enas principales que se utilizan son1
,5 "ena ce(lica, u!icada en la parte superior del ante!razo y del lado del pulgar de la
mano2 65 "ena !aslica, u!icada en la parte in(erior del ante!razo y del lado del dedo
meique de la mano2 y 75 "ena cu!ital mediana, que conecta las "enas !aslica y ce(lica
en la (osa antecu!ital 8 (le*i#n del codo5 y es la "ena de elecci#n'i el paciente aprieta el
puo despus de aplicar el torniquete, la "ena se tornar ms prominente
El torniquete (acilita la o!tenci#n En los nios pequeos se pueden utilizar otros sitios2 si es
as, es me%or que la sangre la o!tenga alguna persona con e*periencia 9sar una agu%a
puntiaguda, nunca menor de cali!re 6, y una %eringa de : ml # de ,- ml 4anto la agu%a como
la %eringa de!ern estar limpias, secas y estriles ;on prctica se puede o!tener sangre
usando s#lo una agu%a con un tu!o de goma por el que se de%a correr la sangre )asta los
tu!os en los que se recoge la muestra Para esta tcnica se utilizan agu%as de cali!re ,<

+. LISTA DE RE,UERIMIENTOS
+.1 Materia!e$ 'e Lab#rat#ri#

Serie Blanca 3
CANTIDAD DESCRIPCIN
6 4u!os de recogida de muestras con E34/
, /gu%a de Vacutainer
, ;ontenedor de Vacutainer
, =eringa
, $anceta
, 4orundas de algod#n con alco)ol isoproplico
, $igadura

-. PROCEDIMIENTO.
-.1 P%ncin Cai!ar
>,, ?ndicaciones
En lactantes, se realiza en la super(icie plantar interna # e*terna del tal#nEn nios de ms
de un ao, en la super(icie palmar de la &ltima (alange del segundo, tercero # cuarto dedo
de la mano$a punci#n no de!er realizarse en una parte edematosa # congestionada, #
donde la piel se encuentra (ra y cian#tica
>,6 ?denti(icaci#n del Paciente
/segurarse de que el paciente llegue en condiciones #ptimas y
tranquilizarlo
;olocar al paciente adecuadamente
;)ecar el material para la e*tracci#n1
>,7 4cnica
>,7, $impiar cuidadosamente la piel en el sitio de punci#n y a su alrededor con
algod#n mo%ado en alg&n desin(ectante , como alco)ol de @-A
>,76 'ecar el rea con gasa estril seca
>,77 Puncionar con una lanceta estril # agu%a desec)a!le El mo"imiento de!e ser
rpido y la punci#n su(icientemente pro(unda para asegurar que la sangre (luya
li!remente$a salida de la sangre puede (acilitarse e%erciendo una sua"e presi#n
en la cara lateral del dedo / corta distancia del sitio de punci#n
Serie Blanca 4
>,7> $a sangre de!er (luir li!remente 'i se e%erce demasiada presi#n, se diluir
con los lquidos tisulares, lo que la puede )acer inapropiada para estudio
>,7: 3escartar siempre la primera gota de sangre, limpindola con una gasa seca y
de%ar el sitio de punci#n limpio y seco
>7,B C!tener la cantidad requerida de muestra, aspirando la sangre con pipeta #
colocndola en un portao!%etos
-.( P%ncin "en#$a
>6, ?ndicaciones
3e!e indicarse al paciente la posici#n correcta, que puede ser sentado # recostado,
apoyando !ien el !razo en posici#n )orizontal
Elegir la "ena adecuada, pre(irindose la cu!ital mediana, la "ena !aslica, la ce(lica, las
"enas de la mueca, to!illo y mano, ya que resultan (ciles de palpar
>66 4cnica
, 3esin(ectar la piel en el sitio de punci#n con algod#n mo%ado en un desin(ectante
apropiado como alco)ol de @-A
6 Preparar la %eringa y la agu%a, # en su de(ecto la agu%a con el contenedor en el caso del
sistema de tu!os al "aco, cuidando que la tcnica sea asptica
7 /plicar un torniquete en el !razo 8 por arri!a del sitio de punci#n5, su(icientemente
apretado para que restrin%a el (lu%o de la sangre "enosa
> 3esin(ectar nue"amente el sitio de punci#n, y secar la piel con algod#n # gasa limpios,
secos y estriles
: /segurarse de que el m!olo de la %eringa est )asta el (ondo , es decir, que la %eringa
no contenga aire ?nsertar la agu%a de la %eringa en una "ena con un mo"imiento
preciso
B =alar lentamente el m!olo y o!tener 6 a 7 ml de sangre
@ Detirar la %eringa de la agu%a y sustituirla por otra %eringa que contenga la soluci#n
anticoagulante de citrato de sodio C directamente introducir el tu!o del sistema de
"aco
+ C!tener el "olumen de sangre deseado %alando el m!olo muy despacio
< 'oltar el torniquete y colocar una gasa seca so!re el sitio de la punci#n, retirando
despus la agu%a con un solo mo"imiento
,- Presionar ligeramente la gasa so!re el sitio de punci#n durante algunos momentos y
despus pedir al paciente que contin&e aplicando la presi#n durante unos minutos
,, ;uando la sangre se o!tiene empleando s#lo una agu%a sin %eringa, se emplea el
mismo procedimiento y cantidad de anticoagulante 3e!en usarse tu!os graduados
para o!tener la proporci#n adecuada de anticoagulante y sangre
Serie Blanca 5
Acti.i'a'e$:
E Practicar la toma de sangre capilar
E Practicar la toma de sangre "enosa
EDealizar esquemas de punci#n capilar
EDealizar esquemas de punci#n "enosa y de las principales "enas empleadas
Serie Blanca 6
EDealizar esquema de los di(erentes sistemas de e*tracci#n1 %eringa y sus partes2 sistema
"acutainer y sus partes2 tipos de tu!os y colores de tapones empleados en el sistema
"acutainer, de acuerdo con el anticoagulante empleado
Serie Blanca 7
E Deporte de resultadosFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (
0E1TENDIDOSDE SANGRE2
1. INTRODUCCIN.
$os e*tendidos de sangre se realizan dentro del estudio del )emograma completo, # !ien de
manera aislada En ellos se pueden estudiar los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas, y el
prop#sito de ello es determinar las caractersticas mor(ol#gicas de cada tipo celular y e"aluar la
(recuencia relati"a de los distintos tipos de leucocitos
'e de!en teir con una de las tinciones de DomanoGs0y las cuales "aran en sus propiedades
de tinci#n, y por lo tanto, es importante seleccionar una y (amiliarizarse con ella $a coloraci#n
de Hrig)t es muy con(ia!le y sencilla, pero otras tam!in lo son, tales como la de Iiemsa
$eis)man # MayEIrJnGald, las cuales son igualmente satis(actorias, aunque puede "ariar la
tinci#n de un lote a otro de colorante
$os (rotis de sangre de!en con(eccionarse con lminas portao!%etos de "idrio que
pre"iamente se )ayan la"ado y secado de manera con"eniente, con la (inalidad de eliminar
cualquier resto de grasa que pudiera quedar en ellos y e"itar as una mala calidad en la
tinci#n $os (rotis de sangre son esenciales para el estudio mor(ol#gico y cuantitati"o de las
clulas sanguneas ;uando un (rotis se encuentra !ien realizado, se podrn distinguir en l
tres reas importantes1 la ca!eza # zona de inicio, el cuerpo # zona media y la cola # rea
(inal del mismo 9n (rotis no de!er ser ni grueso ni delgado, pues en ninguno de ellos se
podrn apreciar !ien las reas antes mencionadas En un (rotis !ien realizado, la tinci#n ser
de me%or calidad
+.LISTA DE RE,UERIMIENTOS
+.1 Materia!e$ 'e Lab#rat#ri#
Serie Blanca 8

-. PROCEDIMIENTO.
T3cnica 'e !#$ '#$ P#rta#b4et#$.
, ;olocar a una distancia de ,:E,< cm del e*tremo derec)o de un portao!%etos, una
pequea gota desangre 8 del tamao de 7 ca!ezas de al(iler5 o!tenida por punci#n capilar
del tal#n, del l#!ulo de la ore%a # por e*tracci#n "enosa
6 'i se emplea sangre "enosa mezclada con anticoagulante, el (rotis de!er realizarse lo
ms pronto posi!le, de!ido a que el contacto prolongado con ste altera la mor(ologa
celular
7 /pro*imar el portao!%etos e*tensor a la gora, de%ando que )agan contacto y que por
capilaridad ste se e*tienda a lo largo del !orde
> 'e desliza el portao!%etos e*tensor )acia el e*tremo contrario, para lograr una pelcula
delgada de sangre
: de%ar secar y teir
ACTI"IDADES:
Serie Blanca 9
N5MERO DESCRIPCIN
6 4u!os de recogida de muestras
, /gu%a de Vacutainer
, ;ontenedor de Vacutainer
, =eringa
, 4orundas de algod#n con alco)ol isoproplico
, $igadura
, ;a%a de portao!%etos limpios
EDealizar ,- (rotis correctamente con(eccionados
EDealizar esquema que muestra las partes de un (rotis
EDealizar esquema de tres (rotis1 demasiado grueso, demasiado delgado y correctamente
realizado
Serie Blanca 10
E Deporte de resultadosFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA: PRACTICA NO. +
0TINCIN DE 6RIG7T ) REACTI"OS COMUNMENTE
EMPLEADOS EN 7EMATOLOGIA 0
1. INTRODUCCIN
$a (inalidad de la tinci#n de Hrig)t es lograr que el alumno se sienta capacitado para
preparar adecuadamente algunos de los reacti"os y colorantes ms com&nmente empleados
en las reas de )ematologa y micro!iologa, que como qumico clnico tiene la o!ligaci#n de
conocer y dominar
COLORANTES.
/ los colorantes de les puede clasi(icar en tres grupos1
18 Aci'#$. 'on aquellos constitudos por sales cuya !ase es incolora y cuyo cido es
coloreado / este grupo pertenecen las eosinas Estas soluciones se usan para la coloraci#n
citoplasmtica # coloraci#n de (ondo
Serie Blanca 11
(8 Ba$ic#$. 'on aquellas sales de cido incoloro y !ase coloreada como el clor)idrato
de azul de metileno Estos colorantes tien por lo general algunos elementos del n&cleo
+8 Ne%tr#$. 'on aquellas sales con el cido y la !ase coloreados, por e%emplo, los
eosinatos de azul y azur de metileno , los ms empleados en )ematologa El mtodo de
R#&an#9$:;, que emplea estos colorantes, )a sido la !ase de las coloraciones pan#pticas
utilizadas en la actualidad ya que )a tenido un gran *ito en la tinci#n di(erencial de la
mayora de las estructuras normales y anormales de la sangre $a mayor parte de estos
colorantes policromos deri"ados del mtodo de DomanoGs0y, se disuel"en en alco)ol
metlico, com!inando as, la (i%aci#n con la tinci#n $os ms conocidos de todos ellos, son los
de Gie&$a y de 6rig<t.
Ti# 'e Err#r Ca%$a$ C#&# $e C#rrige
4inci#n demasiado azul 4iempo e*cesi"o de tinci#n
$a"ado de(iciente
P) muy alcalino
3isminuir el tiempo de tinci#n
$a"ar adecuadamente
/cidi(icar el pH
4inci#n demasiado rosa 4iempo insu(iciente de tinci#n
$a"ado e*cesi"o
pH muy cido
/umentar el tiempo de tinci#n
$a"ar adecuadamente
Ele"ar el pH
Precipitaci#n de colorante ;olorante no (iltrado
'ecado de la laminilla durante la
tinci#n
Filtrado de colorante
Procurar que siempre )aya un
!uen menisco de colorante durante la
tinci#n

ANTICOAGULANTES.
$os > anticoagulantes ms usados son1 mezcla de o*alato am#nico y de potasio 8 #
simplemente o*alato am#nico 5, citrato tris#dico, sequestrene 8 E34/ 5, y )eparina
$os 7 primeros impiden la coagulaci#n sustrayendo el calcio del plasma sanguneo por
precipitaci#n # (i%aci#n en (orma no ionizada $a )eparina neutraliza la trom!ina y otras (ases
de la acti"aci#n de los (actores de coagulaci#n
El citrato tris#dico, el E34/ y la )eparina, pueden emplearse para impedir la
coagulaci#n de la sangre destinada a trans(usiones, sin em!argo, la mezcla de o*alatos, no,
por ser t#*ica
$os o*alatos pueden usarse para determinaciones como )emoglo!ina, )ematocrito y
recuentos glo!ulares, aunque para e*tensiones sanguneas puede usarse tan s#lo en los
primeros minutos, pues ms tarde pueden desarrollarse alteraciones de las clulas
sanguneas como (ormas dentadas de los )emates, "acuolizaci#n en el citoplasma de los
granulocitos, (agocitosis de los cristales de o*alato, arte(actos en los n&cleos de los lin(ocitos
y monocitos, etc/dems no de!en emplearse para determinaciones qumicas de nitr#geno y
potasio Para in"estigaciones de coagulaci#n, es muy &til el citrato tris#dico
El E34/ # sequestrene es tal "ez el anticoagulante ms usado para el recuento de
clulas sanguneas 'e le compara con el o*alato para el estudio del )ematocrito y
Serie Blanca 12
)emoglo!ina, pero para estudios mor(ol#gicos, es toda"a me%or, pues con l, no se (orman
alteraciones ni arte(actos en las clulas sanguneas, a&n despus de un !uen tiempo de estar
)ec)a la mezcla, si la sangre se re(rigera 8 6 )oras a 6> )oras 5
$a )eparina tam!in puede usarse para determinaciones como )ematocrito y
)emoglo!ina, pero no de #ptimos resultados en las e*tensiones sanguneas, ya que produce
un (ondo azul en aqullas que son teidas con el colorante de Hrig)t

+.1 Reacti.#$.
NUM. NOMBRE DEL REACTI"O CANTIDAD
, ;olorante de Hrig)t -, g
6 Metanol B- ml
7 .a6HPC> 6:B g
> KH6PC> BBB g
: E34/ 7g
B C*alato de amonio -+g
@ /gua destilada ,:$
+.( E=%i# 'e Lab#rat#ri#
Balanza Iranataria
Balanza /naltica
+.+ Materia!e$ 'e Lab#rat#ri#
Serie Blanca 13
NUM CANTIDAD DESCRIPCIN
, , Mortero
6 6 Pro!etas de ,-- ml
7 , Matraz Volumtrico de ,-- ml
> > Varillas de "idrio
: , Frasco de "idrio color m!ar de ,$ de capacidad
B 7 Frascos de "idrio color m!ar de ,:- ml de capacidad
@ , =eringa # sistema "acutainer para toma de muestra
+ , $igadura
< ,- Portao!%etos
+.- Prearacin 'e !#$ reacti.#$

+.-.1C#!#rante 'e 6rig<t:

;olorante de Hrig)t1 -, g
Metanol1 B- ml
'e tritura el colorante con el alco)ol en un mortero2 sto se )ace poco a poco Esta
operaci#n de!e durar 7- min )asta completar disoluci#n 'e de%a reposar dos das y se (iltra
+.-.( > A&#rtig%a'#r B%??er 'e ?#$?at#$
.a6HPC> 6:B g
KH6PC> BBB g
/gua destilada para a(orar a , $
Mezclar las sales con poca cantidad de agua destilada, e ir agregando poco a poco
ms agua, )asta a(orar a , $ Iuardar en un (rasco m!ar de , $

+.-.+> EDTA.
E34/ 7 g
/gua destilada ,-- ml
Mezclar el E34/ poco a poco con el agua destilada
+.-.- >S#!%cin 'e O@a!at# 'e a&#ni#.
C*alato de amonio -+ g
/gua destilada +- ml

Mezclar poco a poco el o*alato de amonio con el agua destilada

En am!os, se utiliza , gota de soluci#n por ml de sangre
Serie Blanca 14
-.PROCEDIMIENTO.
-.1 T3cnica: Tincin 'e 6rig<t.
>,, 'eleccionar un portao!%etos nue"o de 6: L @: mm para )acer e*tendidos, que
tenga la orilla relati"amente lisa
>,6 C!tener una pequea cantidad de muestra de sangre peri(rica
>,7;olocar una pequea gota de sangre a 6 # 7 mm de la orilla de un portao!%etos
limpio y seco ;olocar el portao!%etos para )acer e*tendido en un ngulo de 7- a >: grados
con respecto al portao!%etos que tiene la muestra y )acer contacto cn la gota Esta de!e
e*tenderse rpidamente a lo largo de la orilla del portao!%etos para )acer los e*tendidos
3eslizar el portao!%etos de e*tensi#n so!re la super(icie dispersando la muestra de sangre El
e*tendido de sangre de!e medir apro*imadamente 7- mm de largo El portao!%etos de
e*tensi#n no se despegar )asta )a!er e*tendido toda la sangre El grueso del e*tendido de
sangre puede regularse modi(icando el ngulo del portao!%etos de e*tensi#n, "ariando el
tamao de la gota de sangre, la presi#n # la "elocidad de e*tensi#n
>,> El e*tendido de sangre se seca con el aire 9na "ez seco, se escri!e con lpiz el
nom!re del paciente en una orilla del portao!%etos
>,: Fi%ar el e*tendido de sangre en alco)ol metlico a!soluto durante 6 a 7 minutos El
color del e*tendido de sangre cam!iar de ro%o a ca( claro Esta (i%aci#n es recomenda!le
aunque el colorante que se "aya a emplear se encuentre diludo en alco)ol metlico a!soluto
>,B ;u!rir el portao!%etos completamente con el colorante 3espus de 7 minutos
aadir un "olumen igual de amortiguador 'oplar ligeramente para mezclar uni(ormemente
/parecer un !rillo metlico "erde
>,@ 3espus de : minutos en%uagar cuidadosamente con agua de la lla"e #
amortiguador de (os(atos, al principio con c)orro delgado y sua"emente y despus con el
c)orro (uerte para eliminar todo e*ceso de colorante $impiar el re"erso del portao!%etos en
posici#n erecta ;uando se )aya secado, cu!rir el portao!%etos con un cu!reo!%etos
rectangular y (i%arlo con una gota de lquido de monta%e 'e puede usar s#lo aceite de
inmersi#n en una preparaci#n temporal
El alumno de!er ensayar tiempos )asta a%ustar aquellos que ms con"engan para una
#ptima coloraci#n /s, con tres (rotis ms de!er ensayar1 6 minutos de colorante y > de
amortiguador2 B minutos de colorante y B minutos de amortiguador2 B minutos de colorante y
,, minutos de amortiguador
-.( Re$%!ta'#$ E$era'#$.
$os resultados esperados en la tinci#n sern los siguientes1
Hemates en color rosa
.&cleos de los leucocitos de azul p&rpura, con la cromatina y paracromatina netamente
di(erenciadas
Irnulos neutr#(ilos del citoplasma, lila # "ioleta
Irnulos eosin#(ilos, ro%o tirando a naran%a
Serie Blanca 15
Irnulos !as#(ilos, p&rpura tirando a azul oscuro
Plaquetas, color lila oscuro
;itoplasma de los lin(ocitos, azul claro
;itoplasma de los monocitos, ligero azul
Acti.i'a'e$:
EPracticar la tinci#n de Hrig)t con (rotis de sangre peri(rica
E;orregir de acuerdo al recuadro , errores encontrados en la tinci#n
E Deporte de resultados FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. -
0E"ALUACIN DE SANGRE PERIABRICA2
1.INTRODUCCIN.
9na "ez que se )a )ec)o y teido un (rotis satis(actorio, ste puede ser e"aluado en
!&squeda de anormalidades ;ada e*amen de!era incluir anlisis con !a%o poder 8 ,-L 5, con
alto poder 8 >- # >: L5, e inmersi#n 8 ,--L 59n error com&n consiste en comenzar el e*amen
con el o!%eti"o de inmersi#n;iertos pro!lemas de la muestra y anormalidades mor(ol#gicas
signi(icati"as pueden pasarse por alto a menos que todos los o!%eti"os sean empleados
$a presencia de eritrocitos anormales en el (rotis de sangre peri(rica a menudo
!rinda importantes cla"es en el diagn#stico di(erencial de las anemias, y puede ser tam!in
de ayuda en el diagn#stico de otras en(ermedades $a mor(ologa de los eritrocitos puede
"erse alterada con cam!ios en el tamao, en la (orma, en las propiedades tintoriales de
clulas indi"iduales # por la presencia de ciertos materiales dentro de ellas ?ncluso, la
Serie Blanca 16
presencia de solo una &nica clula con ciertos cam!ios, puede considerarse signi(icati"a2 en
otros, la anormalidad se considera importante s#lo si un n&mero signi(icati"o de clulas se "en
a(ectadas
/simismo, en la serie !lanca, es importante realizar el recuento di(erencial, a&n cuando
los nue"os contadores electr#nicos den un resultado anticipado del mismo, ya que s#lo puede
con(irmarse ste por medio de dic)a lectura 3el mismo modo, se !uscarn anormalidades en
las clulas !lancas y stas se reportarn, as como la presencia de clulas que normalmente
no se "en en sangre peri(rica, sino &nicamente en mdula #sea, a menos que e*ista alguna
patologa presente
$o mismo aplica para las plaquetas, las clulas ms pequeas de sangre peri(rica'e
puede )acer un recuento indirecto de las mismas cuando as se requiera, y !uscar
anormalidades en su (orma y en su tamao /lgunas anormalidades pueden requerir que se
indique le se"eridad del cam!io 4odas estas determinaciones pueden di(erir de o!ser"ador a
o!ser"ador, conduciendo a una "ariaci#n considera!le en el anlisis del mismo (rotis de
sangre
$os la!oratorios actualmente tratan de controlar estas inconsistencias desarrollando
criterios para estandarizar la e"aluaci#n de la mor(ologa /s, muc)os la!oratorios usan un
mtodo semicuantitati"o de e"aluaci#n, consistente en los trminos1 le"e, moderado #
se"ero C !ien un sistema M por crucesM 1,N, 6N, 7N, etc
4an importante como el que )aya consistencia entre los o!ser"adores, es importante
tam!in la selecci#n de una rea apropiada del (rotis para la e"aluaci#n En un (rotis en M
cua M, en el rea MaplumadaM # terminal del (rotis, demuestran cam!ios que pueden
considerarse patol#gicos, pe macrocitosis, es(erocitosis, clulas en Mdiana M, etc En el rea
gruesa del (rotis, las clulas pueden interpretarse como microcticas en (orma equi"ocada, y la
mor(ologa puede ser di(cil de e"aluar 4am!in tendern a (ormar apilamientos 8 rouleau* 5
en esta rea Por ello, el rea ideal para e*aminar un (rotis, es aquella que contiene
apro*imadamente 6--E6:- clulas por campo a seco (uerte Esto corresponde a una rea en
donde los eritrocitos se tocan pero no se enciman En el "erdadero Doleau*, los mrgenes
indi"iduales de las clulas son di(ciles de distinguir y dan una imagen como de pilas de
monedas que )an sido empu%adas y tiradas, imagen que persiste a&n en las reas ms
delgadas del (rotis, aunque a) e*ista menor cantidad de clulas $a intensidad de la
(ormaci#n de Mrouleau*M depende de la concentraci#n de las protenas plasmticas,
especialmente el (i!rin#geno En en(ermedades in(lamatorias, los ni"eles de (i!rin#geno
pueden aumentar 4am!in la ele"aci#n de gama glo!ulinas, como se o!ser"a en el Mieloma
m&ltiple, pro"oca (ormaci#n de Mrouleau*M
Serie Blanca 17
(.1 AnC!i$i$ c#n ba4# #'er.
Este o!%eti"o de!e utilizarse para e"aluar la calidad de la tinci#n$as clulas !lancas
de!eran "erse (cilmente con este aumento'i no es asi, el (rotis de!e ser nue"amente
teidoEl !orde aplumado de!e ser e*aminado para !uscar c&mulos de plaquetas #
(ilamentos de (i!rina, indicando esto que de!e realizarse una nue"a toma, ya que esta
e"idencia de coagulaci#n podra inter(erir con muc)as prue!as )ematol#gicas $os e*tremos
laterales y aplumado de!en e"aluarse en !&squeda de un n&mero desproporcionado de
leucocitos,$as clulas ms grandes 8 por e%emplo los neutr#(ilos y los monocitos, tienden a
acumularse ms en estos lugares y si el (rotis est mal )ec)o, se acumularn ms en estas
reas, las cuales estn (uera del rea ideal de o!ser"aci#n'i la mayora de las clulas se
encuentran en el !orde aplumado, el (rotis de!er descartarse y prepararse uno nue"o
(.( AnC!i$i$ c#n a!t# #'er.
;on este o!%eti"o e*isten dos pro!lemas por resol"er En primer lugar, se de!e
seleccionar el rea apropiada para iniciar la cuenta di(erencial Esta de!e ser donde los
eritrocitos se tocan pero no se so!reponen, y puede ser un rea en donde se encuentren 6--
eritrocitos por campo 'i la cuenta de leucocitos es muy !a%a, puede ser necesario incluir
reas (uera del rea ideal con el (n de encontrar su(icientes clulas !lancasEl segundo
pro!lema por resol"er con este o!%eti"o, ser estimar la cuenta total de leucocitos Estando en
el rea ideal, contar el n&mero de clulas !lancas o!ser"adas en cinco a diez campos y
determinar el promedio El promedio, multiplicado por un (actor de correcci#n que a menudo
est entre 6--- y 6,:-- 8 6 a 6: en miles5 representar la cuenta total del leucocitos
(.+ AnC!i$i$ c#n #b4eti.# 'e in&er$in.
;on este o!%eti"o, la cuenta di(erencial de leucocitos de!e estimarse, la cuenta de
plaquetas, tam!in de!e poder estimarse y los tres tipos de clulas 8 leucocitos , eritrocitos y
plaquetas 5 de!en o!ser"arse en !&squeda de anormalidades mor(ol#gicas
$a cuenta di(erencial consiste en identi(icar cuando menos ,-- leucocitos consecuti"os, y
reportar estos "alores como un porcenta%e Es importante incluir las clulas de los mrgenes,
as como las del cuerpo del (rotis /s, para lograr esto, de!e seguirse el patr#n de
o!ser"aci#n de la imagen siguiente1
Serie Blanca 18

El n&mero de plaquetas tam!in puede ser estimado con este o!%eti"o Empleando la
misma rea que para la cuenta di(erencial, es decir, donde los eritrocitos se tocan pero no se
so!reponen, de!en contarse las plaquetas en al menos diez campos Este n&mero ser
con"ertido en no de plaquetasOPl de sangre, como se )izo con la cuenta de leucocitos
3e!er calcularse el n&mero promedio de plaquetas por campo, y dic)o n&mero se
multiplicar por un (actor determinado por el propio la!oratorio en !ase a la com!inaci#n de
los o!%eti"os y oculares empleados en sus microscopios Por e%emplo, cada plaqueta,
o!ser"ada representa ,:,--- plaquetas # 6-,--- O Pl 'i se llegaron a o!ser"ar un promedio
de ,6 plaquetas por campo, entonces, la cuenta total de plaquetas sera de ,+-,---O Pl en el
primer caso, # 6>-,--- O Pl en el segundo caso
$a &ltima acti"idad a realizar con este o!%eti"o, sera e"aluar la mor(ologa celular Esto
puede irse )aciendo a medida que se "a realizando la cuenta di(erencial ;ualquier
anormalidad # inclusi#n en clulas ro%as y !lancas, de!er reportarse 4am!in es importante
e"aluar la (orma y el tamao de los eritrocitos en esta misma rea $as clulas suelen
distorsionarse en reas muy delgadas, # demasiado gruesas $as plaquetas tam!in de!ern
e"aluarse en su tamao y (orma Ms de una (orma inusualmente grande de plaquetas, en
cada cinco campos de!ern ser reportadas
+. LISTA DE RE,UERIMIENTOS.
+.1 E=%i# 'e !ab#rat#ri#.
Microscopio de $uz
+.( Materia!e$ 'e Lab#rat#ri#
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frotis de sangre peri(rica teido con colorante de Hrig)t
-. PROCEDIMIENTO.
-.1 AnC!i$i$ c#n ba4# #'er.
>,,E"aluar la calidad de la tinci#n
Serie Blanca 19
>,6E*amen en el !orde aplumado del (rotis en !&squeda de c&mulos de plaquetas #
(ilamentos de (i!rina
>,7E"aluar e*tremos laterales y aplumado en !&squeda de leucocitos
desproporcionados
-.( AnC!i$i$ c#n a!t# #'er.
>6,'eleccionar el rea apropiada para iniciar la cuenta di(erencial
>67Estimar la cuenta total de leucocitos
-.+AnC!i$i$ c#n #b4eti.# 'e in&er$in.
>7,Dealizar el recuento di(erencial, contando cien clulas en total, y di(erenciando la
lnea celular a la que pertenecen
>76Dealizar el recuento indirecto de plaquetas
>77Buscar anormalidades mor(ol#gicas tanto de los leucocitos como de los eritrocitos
y de las plaquetas
ACTI"IDADES:
> Re#rte 'e re$%!ta'#$
1. AnC!i$i$ c#n ba4# #'er.
,, ;alidad de la tinci#n1FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
,6 E*amen del !orde aplumado del (rotis FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
,7 E*amen de los e*tremos laterales y aplumado del (rotisFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
(. AnC!i$i$ c#n a!t# #'er.
6, 'eleccionar el rea apropiada para iniciar la cuenta di(erencialFFFFFFFFFFFFFFFF
Serie Blanca 20
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
66 Estimar la cuenta total de leucocitosFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
+. AnC!i$i$ c#n #b4eti.# 'e in&er$in.
7, Decuento di(erencial
Metamielocitos FFFFF
Bandas FFFFF
'egmentados FFFFF
$in(ocitos FFFFF
Monocitos FFFFF
Eosin#(ilos FFFFF
Bas#(ilos FFFFF
,--
76 Busqueda de anormalidades mor(ol#gicas de1
leucocitos FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. D
0AORMULA LEUCOCITARIA RECUENTO DIAERENCIAL2
1.INTRODUCCIN.
$a (#rmula leucocitaria nos da in(ormaci#n so!re el porcenta%e de leucocitos de cada tipo, en
!ase a su mor(ologa y caractersticas tintoriales
/ partir de estos "alores y de la cuenta total de gl#!ulos !lancos o!tenidos en microlitros,
podremos calcular los "alores a!solutos de cada lnea celular en sangre peri(rica, y as
compararlos con los "alores normales de cada una de ellas
(.PRINCIPIO ) METODOLOG*A .
'e realizar el recuento di(erencial, de acuerdo como se indica en el procedimiento, y se
comparar contra los siguientes "alores normales 'e ane*an tam!in, adems de los "alores
normales en A, los "alores normales a!solutos, que indican el n&mero de cada estirpe celular
e*presado por microlitro 8 para o!tenerlos, "er prctica no@ 5
>"ALORES NORMALES.
Serie Blanca 21
TIPO CELULAR PORCENTAEE F G 8 L*MITES ABSOLUTOS
Metamielocitos -E6 Q,-E:--
Bandas -E,, ,--E+--
'egmentados >-E@> 6---EB---
$in(ocitos ,6E>B ,---E>6--
Monocitos ,E,7 ,--E+--
Eosin#(ilos -E@ Q,--E6--
Bas#(ilos -E7 Q,-E6-
+.1 E=%i# 'e Lab#rat#ri#
, Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frotis de sangre peri(rica teido con colorante de Hrig)t
-. PROCEDIMIENTO.
;on el o!%eti"o de inmersi#n, identi(icar cuando menos ,-- leucocitos consecuti"os en un
(rotis teido con Hrig)t, y reportar estos "alores en por ciento'e aconse%a identi(icar el
rea ideal para la o!ser"aci#n1 el rea del cuerpo del (rotis, donde las clulas se tocan pero
no se so!reponen El recorrido de!e )acerse de manera "ertical, para no omitir clulas de
los mrgenes y para no salirse del rea ideal para el recuento
ACTI"IDADES.
?n"estigar en qu casos pueden encontrarse cada una de las lneas celulares reportadas en
la cuenta di(erencial, con "alores por arri!a y por de!a%o de lo normal
REPORTE DE RESULTADOS:
TIPO CELULAR PORCENTAEE F G 8 "ALORES
ABSOLUTOS
Metamielocitos
Bandas
Serie Blanca 22
'egmentados
$in(ocitos
Monocitos
Eosin#(ilos
Bas#(ilos
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. H
0RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS2
1.INTRODUCCIN.
$a e"aluaci#n de los gl#!ulos !lancos considera el conteo total de leucocitos y la
cuenta di(erencial de cada uno de ellos $a medici#n del n&mero total de leucocitos sir"e en
ocasiones de gua para e"aluar la se"eridad de una en(ermedad, siempre que se le asocie a
la clnica que sta presenta9n aumento de los gl#!ulos !lancos por encima de ,-,--- OPl, se
llama leucocitoi, que con (recuencia es acompaada por incremento de los granulocitos
neutr#(ilos, aunque no es la &nica causa Es menos (recuente que aumenten todas las lneas
celulares, lo que podra de!erse en realidad a una !e"oconcentraci#n 9na disminuci#n en
el recuento de gl#!ulos !lancos por de!a%o de los "alores normales esta!lecidos, se conoce
como leuco$enia.
Serie Blanca 23
$as pipetas empleadas para el recuento manual de gl#!ulos !lancos, son similares a
las que se usan para el recuento de gl#!ulos ro%os, pero presentan en su capilar superior, la
gra!aci#n ,,, y en la in(erior, la gra!aci#n -:, lo cual indica una diluci#n distinta, que es en
este caso de ,16- 'e emplea la misma cmara cuentagl#!ulos llamada cmara de .eu!auer,
nada ms que el conteo y los clculos se realizan de di(erente manera
$a cmara cuentagl#!ulos presenta un retculo con una super(cie total de <mmR, de
, mmR cada uno $os cuadrados de las cuatro esquinas estn su!di"ididos en ,B cuadrados,
y el cuadrado central, en 6:

Serie Blanca 24
;uadrculas 8 $ 5 para recuento
de gl#!ulos !lancos
+.LISTA DE RE,UERIMIENTOS.
+.1 Reacti.#$
NUM NOMBRE DEL REACTI"O CONCENTRACIN CANTIDAD
, /cido /ctico 6A :- M$
+.+ Materia! 'e Lab#rat#ri#
CANTIDAD DESCRIPCIN
, ;mara de .eu!auer
, Pipeta para recuento de gl#!ulos !lancos
, 4u!o de ensaye de ,7 L ,--
, Boquilla
-.( Prearacin 'e! reacti.#
-.(.1LI=%i'# 'e T%r: <e&#!iJante:
Esoluci#n de cido actico al 6A
E /gregar , gota de azul de metileno lquido
D PROCEDIMIENTO.
D.1 T3cnica.
>,, Pipetear sangre )asta la marca de -:
>,6 $impiar cuidadosamente con una gasa o papel sua"e el e*tremo de la pipeta
y completar con el lquido de diluci#n )asta la marca de ,,
>,7 Mezclar en el agitador por 6 minutos
>,> ;argar la cmara con la diluci#n !ien )omogeneizada
>,: 3e%ar reposar
Serie Blanca 25
>,B ;ontar los leucocitos contenidos en los cuatro retculos de las esquinas
Estos se encuentran di"ididos en ,B cuadros cada uno
>,@ Dealizar clculos como indica la (#rmula1
.FFFFFF*FFFFFF6-FFFFFF*FFFFFF,- S . L :-
>
En donde1
. S suma de los leucocitos encontrados en los > retculos
6- S 4tulo de la diluci#n
,- S ;orrecci#n de la cmara para lle"ar a , mmT
> S n&mero de retculos
-.( "a!#re$ N#r&a!e$:
A'%!t#$: DKLLL > 1LKLLL M &&T
NiN#$ <a$ta D aN#$: HKLLL > 1DKLLL M &&T
Reci3n naci'#$: 1LKLLL > 1DKLLLM &&T
-.+ Ca%$a$ 'e err#r
>7, Decolecci#n de la sangre en condiciones de cianosis 'i se practica la punci#n
"enosa, e"itar la compresi#n e*agerada y prolongada
>76 Pipetas mal cali!radas
>77 3iluci#n agitada insu(icientemente
>7> ;arga de la cmara con la primera gota de la pipeta
>7: 3istri!uci#n desigual de la cmara
>7B ?ncorrecto a%uste del cu!reo!%etos
>7@ ;uenta de(ectuosa de los elementos celulares
>7+ ;on(undir a los eritro!lastos con leucocitos Para e"itar dic)o error, se de!e
realizar una correcci#n con la siguiente (#rmula1
U S AFeritro!lastosFcontados L .o 3e leucocitos contados
,-- N A de eritro!lastos contados
.umero real de leucocitosS .o 3e leucocitos contados V U
E%emplo1 .o 3e leucocitosS ,:,---
A de eritro!lastosS 7:
U S 7: F * ,:,---
,-- N 7:
.o Deal de leucocitosS ,:,--- V 7,@:-
Serie Blanca 26
.o Deal de leucocitosS ,,,6:-
/;4?V?3/3E'
Dealizar un esquema de la pipeta empleada para el conteo de Il#!ulos Blancos
Enlistar causas de leucocitosis as como de leucopenia
Serie Blanca 27
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. O
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON LEUCOCITOSIS )
DES"IACIN A LA IP,UIERDA2
1.INTRODUCCIN.
9n cam!io en sangre peri(rica que no est asociado con ning&n cam!io mor(ol#gico
celular pero que est asociado con en(ermedad, es un incremento en las !andas
Esto puede ser re(erido como una M des"iaci#n )acia la izquierda M, particularmente si
(ormas a&n ms %#"enes son encontradas en la circulaci#n .ormalmente la cuenta de
neutr#(ilos tam!in se encuentra aumentada, ya que si no es as, sto puede indicar un peor
pron#stico para el paciente, por lo que algunos autores se re(ieren a la primera circunstancia
como un M cam!io regenerati"o )acia la izquierda M, y a la segunda , con cuenta normal #
!a%a de leucocitos, como un M cam!io degenerati"o )acia la izquierda M
Ccasionalmente, el aumento en la cuenta total de !lancos y la aparici#n de (ormas
neutro(licas %#"enes, es tan marcada, que pareciera la sangre peri(rica que se analiza en
pacientes con leucemia mieloctica cr#nica
Este e*ceso de salida de estas (ormas a la circulaci#n, de )ec)o s es de!ido a alg&n
otro proceso patol#gico y de!e ser distinguido de leucemia El trmino M Deacci#n
$eucemoide M es el indicado en esta situaci#n
En general, una cuenta de gl#!ulos !lancos ele"ada, se conoce como
WleucocitosisX/unque ms (recuentemente se de!e a un aumento en los neutr#(ilos
8 neutro(ilia 5, no siempre es as1 puede estar ele"ada a causa de un incremento en los
Serie Blanca 28
lin(ocitos 8 lin(ocitosis5, en los eosin#(ilos 8 eosino(ilia 5, y casi siempre se de!e a alguna
alteraci#n

'e de!ern !uscar tanto en el (rotis sanguneo como por medio del recuento de gl#!ulos
!lancos en el contador electr#nico # por el mtodo manual, el n&mero apro*imado de
leucocitos en una muestra que pre"iamente )aya sido analizada y de la cual se )aya
reportado leucocitosis y des"iaci#n a la izquierda El )allazgo de un n&mero aumentado de
leucocitos y el de (ormas %#"enes que incluyan principalmente (ormas en !anda y
metamielocitos, con(irmarn dic)o diagn#stico
-.PROCEDIMIENTO.
C!ser"ar imgenes en laminillas yO# diapositi"as correspondientes con estas
alteraciones

ACTI"IDADES.
Serie Blanca 29
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. Q
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON EOSINOAILIA2
1.INTRODUCCIN.
;omo ya se )a mencionado, la ele"aci#n de los gl#!ulos !lancos a partir de neutr#(ilos, es
la ms com&n 'in em!argo, puede )a!er un incremento en los eosin#(ilos que lle"en a una
leucocitosis /un cuando la cuenta de gl#!ulos !lancos no estu"iera ele"ada, se podra decir
que puede )a!er eosino(ilia, y sto se determinar en !ase al clculo de los "alores
a!solutos 'i los "alores a!solutos de los eosin#(ilos se encuentran por arri!a de lo normal, se
podra decir que )ay Weosino(iliaX 'on dos las causas ms comunes de esta condici#n1 las
en(ermedades y reacciones alrgicas, y ciertas parasitosis, sin em!argo, no son las &nicas
'e analizarn muestras en las que e*ista el )allazgo de eosino(ilia, )acindose el recuento
di(erencial as como la determinaci#n de los "alores a!solutos de los eosin#(ilos
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 Frotis de sangre peri(rica teido con colorante de Hrig)t
Serie Blanca 30
-. PROCEDIMIENTO.
alteraciones

ACTI"IDADES.
Dealizar una lista de en(ermedades en las que se encuentren ele"ados los eosin#(ilos
Serie Blanca 31
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. R
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON PICNOSIS )
MICROORGANISMOS INTRACELULARES2
1.INTRODUCCIN.
Picn#$i$.
El n&cleo del neutr#(ilo normalmente es algo picn#tico, pero pueden distinguirse la
paracromatina y la cromatina$as clulas muertas # las que estn a punto de morir, sin
em!argo, tendrn un n&cleo o!scuro y redondo sin e"idencia de estructura nuclear $os
l#!ulos pueden estar separados # puede )a!er un &nico y redondo n&cleo en degeneraci#n
$as clulas pueden distinguirse como neutr#(ilas porque el citoplasma retiene el tiente rosa
)a!itual Estas clulas tam!in pueden ser identi(icadas como necro!i#ticas En una muestra
(resca, estas clulas son e"idencia de que el organismo est M perdiendo la !atalla M en un
paciente con in(ecci#n2 tam!in pueden aparecer en pacientes que reci!en quimioterapia
Estos cam!ios tam!in pueden encontrarse como resultado de una prolongada e*posici#n al
E34/
Organi$&#$ intrace!%!are$.
Esta es un tipo de inclusi#n muy rara de encontrar e indica la presencia del organismo
in(ectante, ya que una sola clula que presente un microorganismo es signi(icati"o Puede ser
o !ien una !acteria, # !ien una le"adura, y puede o!ser"arse intra # e*tracelularmente, e
indica una septicemia a!rumadora, de mal pron#stico aunque podra ser un arti(icio originado
por la toma de la muestra a tra"s de alg&n catter contaminado
'e analizarn muestras en las que e*ista el )allazgo de picnosis y microorganismos
intracelulares
Serie Blanca 32
7, Equipo de $a!oratorio
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frotis de sangre peri(rica teido con Hrig)t
-.PROCEDIMIENTO.
C!ser"ar imgenes en laminillas yO# diapositi"as correspondientes con estas alteraciones
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 33
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1L
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON CAMBIOS
MORAOLGICO>BENIGNOS: GRANULACIONES T1ICASK
"ACUOLIPACIONESK CUERPOS DE DO7LE )
AGRANULACIN CITOPL/SMICA2
1.INTRODUCCIN.
Gran%!aci#ne$ T@ica$.
Este cam!io representa la presencia de grnulos primarios no espec(icos, los cuales se
tien de color azulEp&rpura con la tinci#n de Hrig)t como sucede con los del promielocito
Pueden de!erse al menor n&mero de mitosis realizadas durante la maduraci#n celular
/lgunas clulas pueden contener s#lo unos pocos grnulos, otras, pueden contener muc)os
$as granulaciones t#*icas pueden ser "istas en una "ariedad de des#rdenes in(lamatorios #
t#*icos, como por e%emplo, en in(ecci#n !acteriana, ataque al coraz#n, insu(iciencia renal,
gota, artritis reumatoide, as como en respuesta a una neoplasia
9na granulaci#n aumentada tam!in puede ser "ista cuando el (rotis es teido por muc)o
tiempo 'i estos grnulos (ueran realmente de!idos a un proceso patol#gico, no seran "istos
en todas las clulas, y adems aquellas que en "erdad presenten granulaciones t#*icas, lo
)arn en "ariedad de grados 'i todas las clulas se "en a(ectadas y en el mismo grado de
intensidad, sto de!e considerarse como un arti(icio del (rotis
"ac%#!iJacin.
Ua que la principal (unci#n de los neutr#(ilos es la (agocitosis, si e*iste acti"idad
(agoctica aumentada, pueden )a!er numerosas "acuolas dentro del citoplasma como una
e"idencia de sto Estas son identi(icadas mor(ol#gicamente como M )oyos M dentro del
citoplasma 'in em!argo, sto tam!in puede ser el resultado de una e*posici#n prolongada
Serie Blanca 34
al E34/ /l igual que en las granulaciones t#*icas, si todas las clulas se "en a(ectadas en el
mismo grado, de!e sospec)arse un arti(icio del (rotis
$a "acuolizaci#n puede encontrarse (recuentemente cuando el paciente tiene una
in(ecci#n !acteriana, especialmente con las !acterias pi#genas 4am!in es (recuente
o!ser"arlas %unto con las granulaciones t#*icas
C%er#$ 'e DS<!e.
Estas inclusiones son a menudo encontradas %unto con las granulaciones t#*icas yO#
"acuolizaci#n, aunque no siempre / "eces pueden ser la &nica e"idencia de un proceso
t#*ico # reacti"o en un paciente $os cuerpos de 3Y)le son pedazos de D./ residual
8 retculo endoplsmico rugoso 5 en el citoplasma 4ienen el caracterstico color azul tenue del
D./ y se les encuentra (recuentemente cerca de la mem!rana citoplasmtica de la clula
En algunas clulas, pueden ser muy prominentes, y en otras, pequeos y muy tenues, y
pueden pasarse por alto si el o!ser"ador no tiene su(iciente cuidado en la o!ser"aci#n
En ocasiones pueden o!ser"arse los tres tipos de cam!ios t#*icos en la misma clula
Agran%!acin cit#!C$&ica.
En ocasiones, la &nica e"idencia de neutr#(ilos acti"ados es una rea clara agranular
en la peri(eria de la clula, que indica la (ormaci#n de un pseud#podo Estas clulas tam!in
se distinguen por un !orde citoplsmico irregular en contraste con el !orde redondo usual del
neutr#(ilo 4am!in sto puede ser "isto %unto con las granulaciones t#*icas, la "acuolizaci#n,
y los cuerpos de 3Y)le, aunque cada uno de ellos puede "erse indi"idualmente, y a menudo
estos cam!ios se asocian con aumento en las (ormas en !anda y cuenta ele"ada de
leucocitos, aunque no siempre

'e analizarn muestras con alteraciones en las que e*ista el )allazgo de "arios cam!ios
mor(ol#gicoE!enignos
Micr#$c#i# 'e L%J
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frois de sangre peri(rica teido con Hrig)t
-. PROCEDIMIENTO.
alteraciones
Serie Blanca 35
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 11
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON LINAOCITOS
AT*PICOS2
1.INTRODUCCIN.
El trmino M atpico M, )a sido utilizado para descri!ir cualquier (orma que "are del
criterio mor(ol#gico empleado para un lin(ocito normal 3e!ido a que "arias (ormas son el
resultado de in(ecci#n "iral, el trmino M reacti"oM y el ms espec(ico de M "irocito M )an sido
asociados con esta respuesta Puede aplicarse el trmino M lin(ocitos "ariantes M ya que no
todos los cam!ios son M reacti"os M # asociados con in(ecci#n "iral
$a mayora de las (ormas "ariantes estn asociadas con in(ecciones "irales,
especialmente con el grupo )erpes "irus 8 por e%emplo, el "irus EpsteinEBarrEla causa de
mononucleosis in(ecciosa, citomegalo"irus # )erpes simple* tipos , y 6 5, y "irus de )epatitis
B y ; 4am!in pueden encontrarse en casos de to*oplasmosis, s(ilis # tu!erculosis
3e!ido a que ocasionalmente puede encontrarse alg&n lin(ocito atpico y considerarse
normal, algunos la!oratorios los reportan como un porcenta%e separado de leucocitos, por
e%emplo, un porcenta%e de lin(ocitos normales y un porcenta%e de (ormas "ariantes Ctros
pueden usar un mtodo semicuantitati"o, como M ,N, 6N, 7N M # M le"e, marcado # se"ero M,
para indicar su (recuencia relati"a 'iempre que ms del ,-A sean clasi(icados como
"ariantes, el )allazgo es considerado clnicamente signi(icati"o y de!e ser reportado
Ctra de las (ormas se aseme%an muy a menudo a un monocito 'on grandes, con
citoplasma a!undante y a menudo "acuolado, el cual puede ser ms gris, comparando con el
usual color azul cielo del lin(ocito normal El n&cleo puede ser redondo, do!lado, indentado #
lo!ulado y tiene una apariencia ms a!ierta y color ms tenue que lo usual .o presenta
nucleolos / "eces, el citoplasma es predominantemente azul cielo, y contiene reas de un
azul ms intenso, que tienden a irradiar del n&cleo # a concentrarse en la peri(eria de la
clula, especialmente en donde )ace contacto con las clulas que la rodean / esta
caracterstica se le conoce como !aso(ilia radial # !aso(ilia peri(rica, respecti"amente
Estas clulas, como puede "erse, pueden ser especialmente di(ciles de distinguir de los
monocitos /lgunos rasgos &tiles para distinguirlos es que los monocitos son clulas que
Serie Blanca 36
empu%an a otras y tienden a indentarlas cuando estn muy pr#*imas a ellas En cam!io, los
lin(ocitos ms (cilmente su(ren esa indentaci#n El n&cleo del monocito, tpicamente es ms
do!lado # lo!ulado, y el patr#n cromatnico es ms delicado y (ino Por otro lado, si se est
en duda, puede seguirse una regla general que menciona que si )ay muc)os lin(ocitos en el
(rotis, la clula que se sospec)a ms seguramente es un lin(ocito tam!in
En un momento dado, )ay quien puede con(undir estas clulas con (ormas malignas #
!lastos 3e!e recordarse entonces que en casos de leucemia, las clulas tienden a ser muy
similares mor(ol#gicamente, dando una apariencia mon#tona, )omognea, especialmente al
o!ser"arse con pocos aumentosEn contraste, las en(ermedades asociadas con (ormas
"ariantes, demostrarn una apariencia muy )eterognea

'e analizarn muestras en las que e*ista el )allazgo de lin(ocitos atpicos
Micr#$c#i# 'e L%J
CANTIDAD DESCRIPCIN
-. PROCEDIMIENTO.
alteraciones
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 37
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1(
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON LINAOCITOS
PLASMOCITOIDES2
1.INTRODUCCIN.
9na de las (ormas en que se presenta el lin(ocito atpico, comparte rasgos con la clula
plasmtica, la cual no es encontrada normalmente en sangre peri(rica /m!as tienen un
citoplasma azul muy intenso y pueden medir de ,:E6- Z $os dos pueden distinguirse por su
patr#n de cromatina nuclear En el lin(ocito M plasmacitoide M, el n&cleo tiene una apariencia
a!ierta y la*a y tiene un color ro%oEp&rpura ms tenue Pueden "erse tam!in nucleolos Esto
es en contraste con la apariencia amontonada, a!ultada del n&cleo de la clula plasmtica y
su localizaci#n e*cntrica dentro de la clula .o )ay una rea clara perinuclear en el lin(ocito
plasmacitoide como la )ay en la clula plasmtica
$os lin(ocitos plasmocitoides son com&nes de encontrar en ciertas en(ermedades
"irales como el dengue y las en(ermedades e*antemticas de la in(ancia
'e analizarn muestras que tengan el )allazgo de lin(ocitos plasmocitoides
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
Serie Blanca 38
-. PROCEDIMIENTO.
alteraciones
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1+
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON
7IPERSEGMENTACIN NUCLEAR EN NEUTRAILOS2
1.INTRODUCCIN.
Los ncleos de los neutrfilos normalmente tienen de dos a cinco lbulos
nucleares.La mayora tendrn dos tres. Si existe un aumento en las clulas con
cuatro cinco lbulos, el observador debera buscar cuidadosamente clulas con
ms de cinco lbulos.La presencia de una sola clula con seis distintos lbulos
nucleares, puede tener significancia clnica. Por otro lado, si ms del ! de los
neutrfilos tienen cinco lbulos si la mayora tienen cuatro, sto tambin puede
ser un "alla#go importante.
Los neutrfilos "ipersegmentados son la indicacin ms temprana en
sangre perifrica de anemia megaloblstica $ por deficiencia de vitamina %&' de
folatos (, y es importante )ue se reporten. *uando menos deben identificarse seis
lbulos distintos para )ue la clula sea identificada como "ipersegmentada.+n
casos severos, pueden encontrarse clulas con nueve lbulos an ms.
'e analizarn muestras que tengan el )allazgo de )ipersegmentaci#n nuclear en neutr#(ilos
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
Serie Blanca 39
-. PROCEDIMIENTO.
alteraciones
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 40
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1-
0ESTUDIO DE MBDULA SEA2
1.INTRODUCCIN.
El estudio medular es un procedimiento especializado de gran utilidad clnica Puede
ser realizado tanto por aspirado 8mielograma5 como por !iopsia percutnea seg&n las
caractersticas clnicas del paciente y el diagn#stico presunti"o El estudio medular permite
identi(icar las di(erentes series )ematopoyticas, estudiar el estroma medular y o!tener
material para estudios !acteriol#gicos, micol#gicos, de citometra de (lu%o y genticos entre
otros
$a decisi#n de solicitar un estudio de mdula #sea de!e !asarse en la )ip#tesis de que los
)allazgos que se esperan del estudio %usti(iquen someter al paciente al riesgo y la molestia, a
pesar de stos ser mnimos
$os )allazgos medulares esperados 8o inesperados5 en parte dependen del cuadro clnico, de
los )allazgos en sangre peri(rica y de la in(ormaci#n que se requiere en algunos casos
espec(icos En la actualidad el estudio medular )ace parte integral del estudio sistematizado
de un importante n&mero de en(ermedades )ematol#gicas, in(iltrati"as y neoplsicas que
estn !ien protocolizadas 3e!ido a que el aspirado de mdula #sea est "irtualmente li!re de
riesgo 8e*cepto si se )ace en el estern#n5 y que la !iopsia medular es un procedimiento
in"asi"o mnimo, el estudio se recomienda en todos los casos en donde se pueda %usti(icar un
pro!a!le !ene(icio con la in(ormaci#n o!tenida
E$t%'i# &e'%!ar .
El tipo de procedimiento utilizado para el estudio de la mdula #sea 8aspirado, !iopsia
o am!os5, depende de la sospec)a clnica En trminos generales se plantean cuatro
posi!ilidades1
;ompromiso de precursores )ematopoyticos con alteraciones citol#gicas, como en las
anemias y leucemias En estos casos, est me%or indicado el aspirado medular o mielograma
Serie Blanca 41
;ompromiso de las estructuras de soporte del te%ido )ematopoytico o del mismo )ueso como
en la mielo(i!rosis, metstasis o granulomas, o que )aya disminuci#n del te%ido
)ematopoytico y se requiera determinar con certeza la celularidad, como en la anemia
aplstica En estos casos est me%or indicada la !iopsia medular
Fie!re de origen desconocido, en donde se de!e solicitar un estudio de aspirado y !iopsia
'ospec)a clnica o se desee estudiar una en(ermedad in(ecciosa por !acterias, mico!acterias
y )ongos En estos casos, se de!e solicitar estudio de culti"os de material medular o!tenido
por aspirado
/lgunos pacientes con coagulopata 8especialmente los )emo(licos5 requieren terapias de
reemplazo para )acer el procedimiento cuando est indicado )acer el estudio
;omo la mdula #sea es un te%ido !lando, se pueden o!tener muestras introduciendo una
agu%a adecuada en la mdula y aspirando con %eringa $os sitios donde se puede o!tener
mdula #sea en los adultos y nios mayores de un aos son1 el estern#n, las espinas ilacas
superiores anterior o posterior2 la cresta ilaca y las ap#(isis espinosas de las "rte!ras
$a punci#n esternal, )asta donde sea posi!le, no se de!e )acer de rutina, de!ido al riesgo de
lesi#n cardio"ascular
En nios menores de un ao se puede tomar material medular por aspirado en el tu!rculo
ti!ial / partir del primer ao de "ida se toma similar a la del adulto
Pr#ce'i&ient#$ e$ecia!e$ en e! &ateria! &e'%!ar
$as muestras de mdula #sea son coloreadas con Hrig)t cuando son o!tenidas por
aspiraci#n y con )emato*ilinaEeosina, cuando es por !iopsia2 de acuerdo con los resultados
o!tenidos el )emat#logo apoyado en los )allazgos de sangre peri(rica y en el e*amen (sico,
puede recurrir que tipo de procedimientos especiales estn indicados para con(irmar el
diagn#stico
6,Princii#
$os e*tendidos de mdula #sea se colorean con Hrig)t siguiendo la tcnica usual
?nicialmente son o!ser"ados macrosc#picamente para determinar la presencia de partculas
$uego el e*tendido es e*aminado en !a%o poder 8,-L5 para apreciar la relati"a cantidad de
grasa y de contenido celular )ematopoytico de acuerdo al cual la mdula se puede clasi(icar
como1 )ipocelular, normocelular e )ipercelular
3espus de la o!ser"aci#n en ,-L el e*tendido se e*amina con o!%eti"o de ,--L localizando
los campos donde se )allan las partculas y se procede al anlisis de las clulas sanguneas
que )a!itan en la mdula #sea 'e esta!lece la relaci#n del n&mero de las clulas !lancas
(rente al n&mero de clulas ro%as nucleadas Esta proporci#n se denomina Wrelaci#n mielo E
eritroideX 8M1E5 Para estimar esta relaci#n es necesario la identi(icaci#n y ta!ulaci#n de 7-- E
:-- clulas nucleadas 'e o!ser"a aumento en la relaci#n mieloEeritroide, cuando se
aumentan los precursores mieloides como sucede en los procesos in(lamatorios agudos,
Serie Blanca 42
leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la insu(iciencia renal
cr#nica 9na disminuci#n en la relaci#n mieloEeritroide se presenta cuando se disminuyen los
precursores mieloides como en la anemia aplstica o cuando aumentan los precursores
eritroides como en las anemias )emolticas y megalo!lsticas
En (orma simultnea se realiza una "aloraci#n cuidadosa de la mor(ologa de las di(erentes
lneas celulares1 serie eritroide, granuloctica, lin(oide, monoctica, megacarioctica, clulas
plasmticas y otras clulas
(.( Met#'#!#gIa
E$t%'i# 'e M3'%!a O$ea

El estudio de mdula #sea, comprende los siguientes aspectos1
(.(.1 Sec# D3bi! 1L1.
%elulari&a& 'lo(al) Auencia # Au"ento &el No. De %*lula +raa ,-#
"e+acariocito.
%elurari&a& .e"ato$o,*tica
E.ormal
E/umentada1 )iperceluraridad
E3isminuda1 )ipoceluraridad # aplasia
(.(.( E@a&en a Gran A%&ent# 1LL1.
2.2.2.1 Recuento Global:
Serie 'ranuloc/tica con predominio1mielocitos y metamielocitos 1 B-A

Serie Eritroc/tica1 Predominio1 Policromat#(ilos y Crtocromticos 6-A
Serie lin0oi&e) 1onoc/tica , 1e+acarioc/tica2 6-A
Serie Blanca 43
2.2.2.2 Caractersticas Morfolgicas:
E/umento de Mielo!lastos
E/umento de $in(ocitos # clulas plasmticas
EBaso(ilia, Eosino(ilia, aumento de clulas ;e!adas # de Macr#(agos
EMegacariocitos1 )ipo # )ipersegmentaci#n nuclear2 alteraciones de la madurez
citoplsmica, megacariocitos de tamao muy pequeo
E'erie Eritoide con cam!ios Megalo!lsticos # diseritropoyesis
EPresencia de clulas no )ematopoyticas1 clulas metastsicas

(.(.+ Re#rte 'e! Mie!#gra&a ; "a!#re$ N#r&a!e$.
L*MITES DE NORMALIDAD FG8
Serie Blanca 50.4370.3
Mielo!lastos -6E,:
Promielocitos 6,E>,
Mielocitos +>E,@-
Metamielocitos ,--E 6B+
Bandas N segmentados ,:@ E7,
Serie Roja
Proeritro!lastos -6E,7
Eritro!lastos Bas#(ilos -:E6>
Eritro!lastos Policromticos ,@<E6<6
Eritro!lastos Crtocromticos ->E>B
4in0ocito ,,,E67,
Ba#0ilo , %*lula %e(a&a -E-6
1e+acariocito -E->
1onocito 5 "acr#0a+o -E-+
6la"ocito ->E7,<
7elaci#n 1ieloi&e3Eritroi&e ,:E77
Serie Blanca 44
+.( Materia! 'e Lab#rat#ri#
CANTIDAD DESCRIPCIN
1 $aminillas yO# diapositi"as con muestra de aspirado de mdula #sea
-.PROCEDIMIENTO.
C!ser"ar las laminillas # diapositi"as y reportar el mielograma de acuerdo con el (ormato
que aparece en el reporte de resultados

ACTI"IDADES.
EC!ser"aci#n de laminillas yO# diapositi"as con imgenes de aspirados de mdula #sea
normal
>Deportar un mielograma normal
Serie Blanca 45
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1D
0 INTRODUCCIN A LAS LEUCEMIAS ) E"ALUACIN DE
AROTIS DE S.P. CON LEUCEMIA GRANULOC*TICA
CRNICA2
1.INTRODUCCIN.
$as leucemias mieloides son neoplasias malignas del Sistema Hematopo!tico.
Serie Blanca 46
R E P O RT E D E M I E L O G R A M A
Serie Blanca
Mielo!lastos
Promielocitos
Mielocitos
Metamielocitos
Bandas N segmentados
Serie Roja
Proeritro!lastos
Eritro!lastos Bas#(ilos
Eritro!lastos Policromticos
Eritro!lastos Crtocromticos
"infocitos
Basfilos C!lulas Cebadas
Megacariocitos
Monocitos # macrfagos
$lasmocitos
Relacin Mieloide%&ritroide
;omo las neoplasias en general, las clulas leucmicas1
Proli(eran de manera independiente de sus (actores de crecimiento 8 producidos por las
clulas estromales de su microam!iente5
4ampoco responden a (actores que las in)i!en pues estn protegidas de la a$o$toi.
Esta autonoma en la reproducci#n celular se de!e a mutaciones en los genes que
codi(ican para1
, (actores de crecimiento
, (actores de transcripci#n
, protenas (os(oriladoras8 que meten a la clula en ciclo celular5
, (actores in)i!idores de la apoptosis
, (actores in)i!idores del ciclo celular
El t*r"ino 4E8%E19A i+ni0ica : au"ento &e leucocito neo$l;ico en la an+re<) $or lo cual
e un t*r"ino ina$ro$ia&o.
$as $E9;EM?/' son neoplasias clonales que pro"ienen de una sola clula maligna original
la cual tiene una gran capacidad proli(erati"a, como la ;4H # las ;F;1
4a leuce"ia $ue&en er a+u&a # cr#nica
"&'C&M()S CR*+(C)S
En las $eucemias ;r#nicas, las clulas neoplsicas maduran terminalmente
.o producen la muerte en las etapas iniciales
El n&mero de clulas maduras es normal # aumentado
'eg&n el predominio de la lnea celular )acia la cual maduran pueden distinguirse1
"eucemia Granuloctica Crnica
"eucemia Mielomonoctica Crnica
$olicitemia ,era
-rombocitemia esencial
Mielofibrosis crnica idiop.tica con metaplasia mieloide.
"&'C&M() GR)+'"/C0-(C) CR*+(C)
$a mutaci#n original se produce en una ;4H, que madura terminalmente )acia todas las
lneas celulares, pero lo )ace de predominantemente 1acia la lnea granuloctica2
frecuentemente 1acia la megacarioctica.
(.1 Dat#$ CaracterI$tic#$ en e! Diagn$tic#:
Serie Blanca 47
*-.
*-.
*/* 0+11
$eucocitosis generalmente por arri!a de :-,---leucocitos totales, y en ms del @-A
de los casos, por arri!a de ,--,---
Presencia de granulocitos en todas las etapas de maduraci#n
Eosino(ilia y so!re todo !aso(ilia a!solutas
Presencia de eritro!lastos
/nemia moderada # ausencia de sta
Plaquetas normales # aumentadas
Fos(atasa alcalina en leucocitos disminuda
Mdula [ea con Hiperplasia de c!lulas granulocticas en todas las etapas de
maduracin y con abundantes megacariocitos.
(.( Dat#$ De?initi.#$ Para E! Diagn$tic#
3atos ;itogenticos 1
Presencia del ;romosoma P)iladelp)ia1 translocaci#n recproca entre los cromosomas
< y 66 8 aumento de tirosina 0inasa intracelular5
Presencia de translocaci#n con (ormaci#n del gen )!rido B;DOa!l
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frotis de sangre peri(rica teido con Hrig)t yO# diapositi"as
, /spirado de mdula #sea teido con Hrig)t yO# diapositi"as
Serie Blanca 48
-.PROCEDIMIENTO.
C!ser"ar imgenes en laminillas yO# diapositi"as correspondientes con estas alteraciones
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1H
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. ) M.O. CON
POLICITEMIA "ERA ) MIELOAIBROSIS IDIOP/TICA CON
METAPLASIA MIELOIDE2
1.INTRODUCCIN.
Serie Blanca 49
En las leucemias mieloides cr#nicas, la ;4H tienen toda"a ms capacidad de di"idirse que
una ;4H normal
'i la maduraci#n predomina )acia la lnea de los eritrocitos, se tendr1$olicitemia 3era
;uando la proli(eraci#n es predominantemente )acia la lnea de los megacariocitos, pero
stos se mueren en la etapa de megacariocito maduro, a esta neoplasia se le llama
Mielofibrosis con Metaplasia Mieloide.

1.1 POLICITEMIA "ERA

P#!icite&ia 8 ele"aci#n de los gl#!ulos ro%os # masa eritroctica total5 de orgen
ri&ari# en la que )ay que descartar otras causas de policitemia secundaria como son1
En(ermedades con di(icultad en la o*igenaci#n sangunea1 ta!aquismo cr#nico,
sndrome de Pic0Gic0
Fstulas arterio"enosas # cardiopatas congnitas
Hemoglo!inas anormales que producen )ipo*i tisular
4umores productores de eritropoyetina
1.( MIELOAIBROSIS CRNICA IDIOP/TICA CON METAPLASIA MIELOIDE
'e origina tam!in en una ;4H que madura 1acia todas las lneas mieloides pero
predominantemente 1acia los megacariocitos
En la Mdula [sea e*iste aumento de todas las lneas, pero predominantemente
1acia los megacariocitos los cuales mueren en la etapa de megacariocitos maduros,
li!erando los factores de crecimiento fibrobl.sticos, lo cual lle"a a la mielofibrosis.
/l ocuparse el te%ido medular por el te%ido (i!roso, se origina la 1ematopoesis
e4tramedular.
En sangre peri(rica usualmente )ay un cuadro leucoeritrobl.stico8 ele"aci#n del
n&mero de granulocitos inmaduros y muc)os eritro!lastos
(.1 Criteri#$ ara e! Diagn$tic# 'e P#!icite&ia "era:
Proli(eraci#n de la ;4H )acia todas las lineas c#n re'#&ini# <acia !a !Inea
eritr#cItica:plaquetas ,eritro!lastos ,!aso(ilia , eosino(ilia, granulocitosis
con clulas no ms inmaduras que los mielocitos'in em!argo la Biometra
Hemtica no es de(initi"a
Serie Blanca 50
4rom!ocitosis \ >--,---O Pl
$eucocitosis \ ,6,---O Pl sin (ie!re # in(ecci#n
/umento de (os(atasa alcalina leucocitaria sin (ie!re # in(ecci#n
/umento de "itamina B,6 srica # transco!alamina
;romosoma P)iladelp)ia negati"o
E$t%'i# 'e C#rte$ 7i$t#!gic#$ 'e M3'%!a $ea en $olicitemia ,era
Hiperplasia nota!le, con aumento de todas las lneas celularesK rincia!&ente
eritr#b!a$t#$ ; &egacari#cit#$.
;lulas Irasas disminudas # ausentes
El 7-A de pacientes desarrollan mielofibrosis con metaplasia mieloide
(.( Criteri#$ ara e! Diagn$tic# 'e Mie!#?ibr#$i$ I'i#Ctica Crnica c#n Meta!a$ia
Mie!#i'e.
En mdula #sea, aumento de todas las lneas, pero predominantemente )acia
los megacariocitos
Mielo(i!rosis desde el principio en algunos pacientes, aunque no en todos, que
se demuestra con gruesas (i!ras de colgena en mdula #sea y sustituci#n de
la celuraridad normal por te%ido (i!roso, ocasionada por li!eraci#n de (actores de
crecimiento (i!ro!lstico por los megacariocitos malignos
En sangre peri(rica puede )a!er ele"aci#n o disminuci#n de plaquetas y
granulocitos
En sangre peri(rica, cuadro leucoeritro!lstico 8 granulocitos inmaduros y
muc)os eritro!lastos , anemia y poiquilocitos 8 so!re todo dacriocitos 5
Dealizar diagn#stico di(erencial con otras en(ermedades que causan
mielo(i!rosis8 los dems sindromes mieloproli(erati"os cr#nicos 5

Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
Serie Blanca 51
-.PROCEDIMIENTO. C!ser"ar imgenes en laminillas yO# diapositi"as correspondientes
con estas alteraciones
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1O
LEUCEMIA MIELOMONOC*TICA CRNICA )
TROMBOCITEMIA ESENCIAL2
1.INTRODUCCIN.
Serie Blanca 52
;uando la maduraci#n de la ;4H es predominantemente )acia los neutr#(ilos y
monocitos, la leucemia se llama "eucemia Mielomonoctica Crnica
;uando la maduraci#n predomina )acia las plaquetas, se trata de -rombocitemia esencial.
1.1LEUCEMIA MIELOMONOC*TICA CRNICA
Le%ce&ia Mie!#&#n#cItica Crnica Mie!#'i$!a$ia Ti# I".
;uadro parecido al de la $I;, pero c#n %n incre&ent# en !a &a'%racin <acia !a !Inea
'e !#$ &#n#cit#$
1.(TROMBOCITEMIA ESENCIAL F Pri&aria 7e&#rrCgica 8
$a clula que su(re la mutaci#n neoplsica, es la ;4H, que &a'%ra <acia t#'a$ !a$
!Inea$K pero c#n re'#&ini# <acia !a !Inea 'e &egacari#cit#$>!a=%eta$.
(.1 Criteri#$ ara e! Diagn$tic# 'e Le%ce&ia Mie!#&#n#cItica Crnica.
Monocitos displsicos, # clulas )!ridas entre mielocitos y monocitos
Menos del ,:A de los granulocitos son inmaduros
Cambios displ.sicos ###8 apndices nucleares 2 n&cleos de neutr#(ilos muy
largos 5
Ms de ,--- monocitos OPl 8 # ms del 7A 5,
/nemia le"e
En mdula #sea los mielo!lastos son Q6-A
(.( Criteri#$ ara e! Diagn$tic# 'e Tr#&b#cite&ia E$encia!
;uenta de Plaquetas por arri!a de B--,---OPl
Hemoglo!ina Q ,7 gOdl
/usencia de ;romosoma P)iladelp)ia # del gen )!rido B;4Oa!l
Fi!rosis medular ausente # menos de ,O7 de la !iopsia
/usencia de otra causa de trom!ocitosis 8 trom!ocitosis secundaria 5
Mdula [sea con )iperplasia moderada de las lneas eritro!lstica y granuloctica
y aumento marcado de megacariocitos.
3escartar otras causas de 4rom!ocitosis 'ecundaria, como13e(iciencia de
Hierro,Hemorragias cr#nicas, Procesos in(lamatorios # in(ecciosos cr#nicos,
.eoplasias malignas no )amatopoyticas, Pacientes esplenectomizados
Serie Blanca 53
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1Q
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. ) M.O.
CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA ML 2
1.INTRODUCCIN.
"&'C&M()S )G'5)S
En las leucemias agudas, las clulas neoplsicas no maduran teminalmente2
generalmente maduran )asta la etapa de !lasto # un poco ms all
Serie Blanca 54
Para que se consideren agudas de!en tener \ 6-A de !lastos en MC
$as clulas !lsticas in)i!en la proli(eraci#n de las clonas normales
$os pacientes tienen ane"ia) $la=ueto$enia) +ranulocito$enia.
$a muerte so!re"iene por )emorragias, por la plaquetopenia e in(ecciones
$a $eucemia M-, es una leucemia aguda cuya cuenta tpica de Mdula Csea es la siguiente1
RHG 'e Mie!#b!a$t#$ 8 ,a5
-G 'e eritr#b!a$t#$ 8 eritro!lastos y granulocitos en maduraci#n1 muy
disminudos 5 Por lo tanto1 -E7A de los !lastos son positi"os para tinci#n citoqumica de
19E4>6E7>?9DASA.

;riterios para el diagn#stico de la $eucemia /guda M-
3emostrar con anticuerpos antiEmielopero*idasa, la presencia de esta enzima 8 MPC5
en el Detculo Endoplsmico Dugoso # en el /parato de Iolgi 3emostrar la
presencia de protenas de mem!rana ;3,7 # ;377 con anticuerpos monoclonales
3emostrar la ausencia de esterasas espec(icas, que son propias de la serie
monoctica, 3emostrar la ausencia del marcador monoctico ;3,> y que descartan
la $eucemia M:a # monobl.stica
3emostrar la ausencia de marcadores megacariocticos como ;3>, # ;3B,, que
descartan $eucemia M@ # Megacariobl.stica.
3emostrar la ausencia de marcadores de lin(ocitos que descartan leucemia lin(o!lstica1
de Precursores B1 ;3,-, ;3,<, y 434 6 de Precursores 41 ;36, ;37, ;3:, ;3@ y 434
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
, Frotis de sangre peri(rica teido con Hrig)t y O# diapositi"as
, /spirad de mdula #sea teido con Hrig)t yO# diapositi"as
Serie Blanca 55
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. 1R
CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M1 2
1.INTRODUCCIN.
$a cuenta tpica de la leucemia aguda M, es1
Mielo!lastos1 +7A
Promielocitos1 7A
Serie Blanca 56
Mielocitos1 6A
Eritro!lastos1 ,6A
$os criterios para el diagn#stico de la leucemia aguda M,, son1
\7A y Q ,-A de clulas tienen grnulos MPC positi"os # !astones de /uer
o!ser"a!les con la tinci#n citoqumica para MPC # son clulas con un poco ms de
maduraci#n 8 que pueden ser1 mielo!lastos ,! 8 mielopero*idasa N 5 , mielo!lastos 6,
promielocitos , mielocitos
<-A de clulas son mielo!lastos sin grnulos @ "ielo(lato 1A Bne+atiCo $ara
"ielo$eroDi&aa E
Hay anemia, granulocitopenia, trom!ocitopenia
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 57
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (L
CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M( 2
1.INTRODUCCIN.
$a $eucemia mieloide aguda M6, presenta la siguiente cuenta tpica de Mdula Csea1
Mie!#b!a$t#$: D(G
Pr#&ie!#cit#$: ++G
Serie Blanca 58
Mie!#cit#$: OG
Gran%!#cit#$ &C$ &a'%r#$: +G
Eritr#b!a$t#$: DG
;riterios para el diagn#stico de la $eucemia /guda M61
Entre 7- y +<A de clulas de mdula #sea 8 e*cluyendo eritro!lastos 5 son
mielo!lastos y \ ,-A de clulas son promielocitos # granulocitos ms maduros 5 El rango
puede ser1 desde 6-A de !lastos con +-A de promielocitos # clulas ms maduras , )asta
+-A de !lastos con 6-A de promielocitos # clulas ms maduras
4a lla"a&a 4euce"ia A+u&a &e Eoin#0ilo) &e Ba#0ilo , &e %*lula ce(a&a)
on i"ilare a la 12) aun=ue con &i0erenciaci#n a cada lnea respectiva
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
, /spirado de Mdula #sea teido con Hrig)t yO# diapositi"as
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 59
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (1
LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M+ 2
1.INTRODUCCIN.
$a leucemia M7 es una leucemia aguda, en la cual, la clula neoplsica original es la
;F; IEMM y no la ;4H U en donde el <-A de las clulas de mdula #sea maduran )asta
la etapa de promielocitos 'u complicaci#n principal y la causa de su gra"edad es la ;?V3, la
cual se e"ita con el /cido 4ransretinoico, , que (a"orece la di(erenciaci#n de las celulas
malignas
Serie Blanca 60
;riterios para el diagn#stico de la leucemia aguda M7
<-A de clulas de Mdula Csea maduran )asta la etapa de PDCM?E$C;?4C' , los
cuales son anormales, y en mayor cantidad que los promielocitos normales2 algunas clulas
pueden madurar )asta neutr#(ilos segmentados y las clulas que maduran ms pueden
presentar anomala de PseudoEPelger Pueden ser de dos "ariedades1
18 Variedad de grnulos grandes, los cuales son o!ser"a!les, y cristalizan
(ormando !astones de /uer, generalmente en cantidad m&ltiple, llamados (aggots,
en el <-A de las clulas 5
(8 $a Variedad Microgranular, en la que los grnulos pueden no "erse claramente,
teniendo estos casos el n&cleo plegado, de aspecto monocitoide, por lo que puede
ser con(undida con una leucemia M:! 8 mono!lstica 5, por lo cual de!e
realizarse para su diagn#stico, tinciones de Mielopero*idasa U esterasas do!les1
MPC Esterasas

M7 NNN E
M:! N NNN
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
Serie Blanca 61
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. ((
LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M- 2
1.INTRODUCCIN.
En la leucemia M>, la maduraci#n de la clona neoplsica se dirige )acia dos lneas
de manera simultnea1 la de los granulocitos y la de los monocitos, por lo que la mor(ologa
es compati!le tanto con una M6 como con una M:
;uenta tpica en Mdula Csea1
Serie Blanca 62
Mie!#b!a$t#$ ; r#&ie!#cit#$: -DG
Mie!#cit#$: QG
M#n#b!a$t#$ ; r#&#n#cit#$: -+G
Eritr#b!a$t#$: -G
;riterios para el diagn#stico de la $eucemia /guda M>
6-A de las clulas son !lastos, que inluyen1 mielo!lastos , y 62 mono!lastos , y 6
y promonocitos 8 # ms de :,--- clulas de estirpe monoltica 5
Ms del 6-A y Q +-A de clulas son !lastos, promonocitos y granulocitos ms
maduros8 $os granulocitos y clulas de estirpe monoltica se encuentran en
proporciones muy similares
'i \ +-A de clulas (ueran de estirpe monoctica, sera una M:
Microscopio de $uz
CANIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 63
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (+
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. ) M.O.CON LEUCEMIA
MIELOIDE AGUDA MD 2
1.INTRODUCCIN.
'e distinguen dos tipos de leucemias Mono!lsticas1 la 15a # $oco &i0erencia&a) , la 15( #
(ien &i0erencia&a. El diagn#stico se realiza al encontrar en MC \ +-A de clulas de estirpe
monoctica1 mono!lastos, promonocitos y monocitos en una cuenta sin eritro!lastos
;uenta tpica de la leucemia M:a1
Serie Blanca 64
M#n#b!a$t#$: RLG
Pr#&#n#cit#$ ; &#n#cit#$: HG
Eritr#b!a$t#$: -G
;uenta tpica de la leucemia M:!1
M#n#b!a$t#$: HG
Pr#&#n#cit#$: QDG
M#n#cit#$: OG
Eritr#b!a$t#$: (G
(.PRINCIPIO ) METODOLOG*A.
;riterios para el diagn#stico de la $eucemia M:
M:a M:!
\ +-A de clulas son de estirpe
monoctica1 mono!lastos, promonocitos y
monocitos en una cuenta sin eritro!lastos
\ +-A de clulas son de estirpe monoctica1
mono!lastos, promonocitos y monocitos en
una cuenta sin eritro!lastos
\+-A de clulas de estirpe monoctica
son mono!lastos
Q6-A de clulas de estirpe monoctica son
mono!lastos
Serie Blanca 65
$a M:a poco di(erenciada 8 equi"alente a
la M-5 se (orma de mono!lastos ,] y
constituye el ,:A de los casos de
M:a3e!e distinguirse de la M- # de la
$61
Eusando anticuerpos monoclonales para
;3,>
E3emostrando la presencia de esterasas
no espec(icas en el DED con el
microscopio electr#nico, # la ausencia de
MPC
\ +-A de las clulas de estirpe monoctica
son promonocitos y monocitos2 stos se
distinguen por sus grnulos azur#(ilos con
Hrig)t
$a M:a !ien di(erenciada, se (orma de
mono!lastos ,! y 6 y EEEes positi"a para
esterasas no espec(icas
Ees positi"a para anticuerpos
monoclonales anti ;3,>, ;37B y ;3B+
EMPC negati"a, pero ocasionalmente
positi"a

Puede con(undirse son la M7 "ariedad
microgranular
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
Serie Blanca 66
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (-
MIELOIDE AGUDA MH 2
1.INTRODUCCIN.
Serie Blanca 67
En esta leucemia, tam!in llamada eritroleucemia, la ;4H maligna madura de manera
simultnea )acia las lneas eritro!lstica y granuloctica
Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a !e%ce&ia MH.
/l menos :-A de clulas de Mdula osea de!en ser eritr#b!a$t#$ que
(recuentemente, pero no siempre, tienen anormalidades mor(ol#gicas ) al menos 7-A
de clulas de la mdula #sea de!en ser mielo!lastos # promielocitos que pueden
tener !astones de /uer
7-A E><A de clulas medulares sean eritro!lastos con alteraciones mor(ol#gicas
nota!les ) que al menos 7-A de clulas de Mdula Csea sean mielo!lastos #
promielocitos
C !ien los siguientes criterios reunidos1
;uadro de leucemia aguda
'e"era anemia
Ctras citopenias
$a mayora de las clulas de la Mdula Csea sean eritro!lastos muy anormales
en distintas etapas de maduraci#n # con predominio de eritro!lastos
Frecuentemente no ms de :A de mielo!lastos, a lo que antes se llama!a
M?E$C'?' ED?4D^M?;/, que por lo general e"oluciona )acia una MB tpica con
\ 7-A de mielo!lastos
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCION
Serie Blanca 68
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (D
MIELOIDE AGUDA MO 2
1.INTRODUCCIN.
Las clulas proliferantes en las 12 maduran "asta megacarioblastos y en
ocasiones "asta promegacariocitos y megacariocitos.3 este tipo de neoplasias ,
formadas casi exclusivamente por clulas de aspecto blstico sin diferenciacin
morfolgica, y diagnosticables principalmente a travs de tcnicas
inmunocito)umica, se les llama 4leucemias5 megacarioblsticas 12.
Serie Blanca 69
Criteri#$ ara e! Diagn$tic# 'e !a !e%ce&ia MO.
\7-A de !lastos en Mdula osea, de los cuales1 \:-A de!en pertenecer a la lnea de
los megacariocitos
$as clulas son positi"as para los anticuerpos anti ;3>, y ;3B,, que ponen en
e"idencia las +lico$rote/na $la=uetaria. @ t*cnica in"unocito=u/"ica E
1ielo$eroDi&aa ne+atiCa en los !lastos 8 megacario!lastos 5
Eteraa no e$ec/0ica $oitiCa 0ocal"ente en el aparato de Iolgi
De ac%er'# c#n !a etaa <a$ta !a c%a! !!egan a &a'%rar !a$ c3!%!a$ $e c#n$i'eran:
MOa: $a clona proli(erante madura )asta la etapa de megacarioblasto.
M7b8 $a clona proli(erante madura )asta promegacariocitos e incluso
megacariocitos. Pudiendo presentar plaquetas normales y aumentadas #
mor(ol#gicamente anormales 8 gigantes y sin grnulos
En am!as se o!ser"a tam!in proli(eraci#n de otras lneas celulares,
especialmente de eritro!lastos ;on (recuencia presentan (i!rosis medular
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 70
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (H
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON LEUCEMIA
LINAOC*TICA CRNICA ) LEUCEMIA DE CBLULAS
PELUDAS 2
1.INTRODUCCIN.
Le%ce&ia Lin?#cItica Crnica B
Serie Blanca 71
Esta es la ms com&n de las leucemias lin(oides;ursa con lin(ocitosis nota!le En ella, el
resto de la )ematopoyesis se conser"a normal'e presenta con crecimiento ganglionar
!ilateralEl "infoma de "infocitos bien diferenciados es la mani(estaci#n tisular
8ganglionar 5 de la misma en(ermedad$os lin(ocitos tienen pocas inmunoglo!ulinas de
super(icie
Le%ce&ia 'e C3!%!a$ Pe!%'a$
$as tricoleucemias o leucemia de clulas peludas se presenta generalmente con
esplenomegalia, $in lin(adenomegalias y con anemia # citopenias$as clulas proli(erantes
tienen una mor(ologa caracterstica que ayuda a su diagn#stico
(.1Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a !e%ce&ia Lin?#cItica Crnica B.
Hallazgo de lin(ocitosis y lin(adenomegalias en pacientes de ms de :- aos de edad,
sin otra causa de lin(ocitosis
Dasgos Mor(ol#gicos1 numerosos lin(ocitos pequeos con escaso citolasma, cromatina
gruesa, WsegmentadaX, como re!anadas de pastel
En su e"oluci#n pueden aparecer $rolin0ocito acompaados por citopenias "aria!les
?nmuno(enotpicamente, los lin(ocitos son positi"os a ;3,<, ;36- y a ;3:2 ste
&ltimo los caracteriza por tener la capacidad de (ormar autoanticuerpos
(.( Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a Le%ce&ia Lin?#cItica Crnica T CDQT 'e
Lin?#cit#$ Gran'e$ Gran%!are$.
$in(ocitosis menos nota!le.
;lulas con grnulos azur#(ilos citoplsmicos y cromatina gruesa, pero
no segmentada
$in(ocitos con capacidad de in)i!ir la proli(eraci#n de clulas
)ematopoyticas
El cuadro leucmico se acompaa de neutropenia # pancitopenia
?nmuno(enotpicamente son clulas positi"as a ;36, ;37 y ;3+
(.+ Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a Le%ce&ia 'e C3!%!a$ Pe!%'a$.
Dasgos mor(ol#gicos caractersticos de ayuda al diagn#stico por !ases mor(ol#gicas1
;lulas pequeas
;itoplasma muy plido y con muc)as micro"ellosidades (ili(ormes
.&cleos pequeos como los de los lin(ocitos, pero cromatina no tan densa
$as clulas tienen caractersticamente grnulos con (os(atasa cida re$i$tente a!
Cci'# tartCric#
Serie Blanca 72
$a mdula #sea es di(cil de aspirar, ya que, como es tpico, tiene (i!rosis
?nmuno(enotpicamente son positi"as para ;3,< y ;36-, ;3,, y ;36:
Microscopio de $uz
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (O
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. CON LEUCEMIA
LINAOBL/STICA 2
1.INTRODUCCIN.
$a clasi(icaci#n F/B seala 7 tipos (undamentales1 $,, $6, y $7, independientemente de su
inmuno(enotipo
Serie Blanca 73
CANTIDAD DESCRIPCIN
Le%ce&ia L1. ;orresponden al tipo ms com&n de leucemia aguda in(antil y es la que tiene
el me%or pron#stico de las 7
Le%ce&ia L(.4ienen un peor pron#stico que las $,
Le%ce&ia L+. ;asi todos los casos corresponden a clulas B.4ienen mal pron#stico
(.1Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a Le%ce&ia L1.
!lastos muy pequeos, en donde el n&cleo ocupa la mayor parte de la super(icie y por
lo tanto )ay muy escaso citoplasma, el cual carece de "acuolas # presenta muy
escasas2
)ay )omogeneidad en cuanto al tamao celular y densidad cromatnica2
la cromatina es (ina, aunque no tanto como la de los mielo!lastosE
Ccasionalmente, la cromatina es gruesa y pueden con(undirse con lin(ocitos pequeos
$os lin(o!lastos ocasionalmente adquieren (orma de Wraqueta de manoX
(.( Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a Le%ce&ia L(.
;lulas muy "aria!les en tamao
$as clulas ms grandes tienen cromatina (ina y nucleolos !ien demarcados, como los
de los mielo!lastos2 las de tamao intermedio, tienen cromatina ms gruesa, y las ms
pequeas, tienen cromatina condensada
;on (recuencia, los n&cleos tienen m&ltiples indentaciones Wcere!ri(ormesX 8 en cuyo
caso, si se acompaan de grnulos positi"os a la (os(atasa cida y a _Ena(til acetato
esterasa, corresponden a leucemias 4 y tienen un mal pron#stico5
;itoplasma ms a!undante que en las $,, generalmente sin grnulos y con pocas #
ninguna "acuola
(.+ Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e !a Le%ce&ia L+
;lulas muy caractersticas, con citoplasma !as#(ilo repleto de "acuolas claras, que
contienen lpidos neutros, positi"as con ro%o oleoso y P/' negati"as
.&cleos con cromatina (ina granular y enormes nucleolos
$as clulas son mor(ol#gica e inmuno(enotpicamente indistingui!les de las que
proli(eran en el lin(oma de Bur0itt
Serie Blanca 74
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
SERIE BLANCA:PR/CTICA N#. (Q
0E"ALUACIN DE AROTIS DE S.P. ) M.O.CON MIELOMA
M5LTIPLE 2
1.INTRODUCCIN.
Serie Blanca 75
.eoplasia )ematopoytica, en la que proli(eran clulas plasmticas, que )an madurado
independientemente de una estimulaci#n antignica;uando llegan a salir las clulas
plasmticas a la circulaci#n, el diagn#stico que se esta!lece en el de W $eucemia de clulas
plasmticasX
3ic)as clulas (orman inmunoglo!ulinas )omogneas, monoclonales, que se reconocen por
electro(oresis de protenas$a proli(eraci#n se restringe a la mdula #sea, ocasionando zonas
de oste#lisis reconocidas por radiogra(as, y que se mani(iestan clnicamente por dolor #sea
y (racturas patol#gicas y por )ipercalcemia
(.1 Criteri#$ ara e! 'iagn$tic# 'e! Mie!#&a MU!ti!e.
En el aspirado de mdula #sea1
/umento nota!le de clulas plsmticas 8 lo normal es Q7A5
/lgunas clulas presentan n&cleos irregulares y multilo!ulados
;lulas plasmticas con cristales m&ltiples intracelulares, constitudos por
inmunoglo!ulinas # cristales azur#(ilos alargados
;lulas plasmticas con !ordes citoplsmicos irregulares y de color ro%o 8 clulas en
(lama5
Microscopio de $uz
CANTIDAD DESCRIPCIN
ACTI"IDADES.
Serie Blanca 76
SERIE BLANCA: PRACTICA NO. (R
0TINCIN CITO,U*MICA PARA MIELOPERO1IDASA 0
1.INTRODUCCIN
Serie Blanca 77
$a citoqumica constituye en la prctica )ematol#gica un complemento indispensa!le de la
mor(ologa #ptica con"encional
'u (inalidad es estudiar la presencia de ciertos componentes qumicos 8enzimas o sustancias
di"ersas5 en el interior de las clulas sanguneas tanto )ematopoyticas como circulantes en
sangre peri(rica
/ menudo resulta di(cil di(erenciar los !lastos leucmicos de la leucemia lin(o!lstica aguda
de los de la leucemia mielo!lastica 8M,5, mono!lstica aguda 8M:/5 y la leucemia
megacario!lstica aguda 8M@5 utilizando solamente e*tensiones con las coloraciones de MayE
IrJnGaldEIiemsa
Decientemente se )a propuesto estudiar las leucemias agudas !asndose en tres ni"eles
secuenciales de in"estigaci#n que son1 los mtodos citoqumicos en primer lugar, el
inmuno(enotipo intracelular en segundo lugar y por &ltimo el inmuno(enotipo de mem!rana
3i"ersos procedimientos de tinci#n citoqumica contri!uyen a lle"ar a ca!o esta distinci#n
;uando se utilizan las reacciones citoqumicas adecuadas %unto con el aspecto mor(ol#gico de
las e*tensiones con tinci#n de Hrig)tEIiemsa, puede esta!lecerse un diagn#stico preciso en
la mayora de los casos 3esde el punto de "ista tcnico todas las reacciones citoqumicas
tienen en com&n 7 etapas (undamentales1 (i%aci#n, incu!aci#n y contraste
Estas tinciones pueden realizarse so!re sangre peri(rica, e*tensiones de medula #sea,
preparaciones de n#dulos lin(ticos u otros te%idos
$a mielopero*idasa se sintetiza en el retculo endoplasmtico rugoso, de donde pasa a las
cisternas del aparato de Iolgi quedando localizada (undamentalmente en la granulaci#n prim
aria o azur#(ila
3ic)a enzima se com!ina in "i"o con per#*ido de )idr#geno trans(ormndose en un potente
agente !actericida, "iricida y (ungicida /s, muestra acti"idad en todos los estadios del
desarrollo de los neutr#(ilos y se )alla en los grnulos azur#(ilos $os eosin#(ilos muestran una
acti"idad intensa $os lin(ocitos, !as#(ilos y las (ormas eritroides no se tien
$a tinci#n citoqumica de mielopero*idasa es (undamental en el diagn#stico di(erencial de las
leucemias agudas 8positi"a en las mielo!lsticas y negati"a en las lin(o!lsticas5 $a acti"idad
pero*idasa puede (altar en algunos neutr#(ilos t#*icos de pacientes con in(ecci#n y leucemia
aguda, y en casos raros de de(iciencia congnita de mielopero*idasa
$a demostraci#n citoqumica de esta enzima se !asa en la acci#n o*idante de la
pero*idasa so!re el su!strato, !encidina, en presencia de per#*ido de )idr#geno, apareciendo
un precipitado amarillo ocre en el lugar del citoplasma en donde se )a producido la reacci#n
+.LISTA DE RE,UERIMIENTOS
+.1 Reacti.#$.
Serie Blanca 78
NUM NOMBRE DEL REACTI"O CONCENTRACIN CANTIDAD
, Formol 7@A ,-ml
6 Etanol a!soluto <-ml
7 3i)idrocloruro de !encidina -7g
> `n'C>@H6C 7+A ,ml
: /cetato de sodio7H6- ,g
B H6-6 7A -@ml
@ .aCH ,-. ,:ml
+ 'a(ranina -6g
Balanza granataria
Balanza analtica
+.+ Materia! 'e Lab#rat#ri#
CANTIDAD DESCRIPCIN
6 Vasos de precipitados de ,-- ml
6 Matraces a(orados de ,-- ml
, Pipeta graduada de ,- ml
6 Pipetas graduadas de : ml
, Pipeta graduada de , ml
6 Frascos de 6:- ml
,- Frotis de sangre peri(rica
+.- Prearacin 'e !#$ Reacti.#$
+.-.1 S#!%cin Ai4a'#ra
Formol al 7@A ,- ml
Etanol a!soluto <- ml
+.-.( S#!%cin C#!#rante
Modo de Preparaci#n1

Etanol al 7-A 8 "O" en agua 5 ,-- ml
3i)idrocloruro de !encidina -7 g
`n'C>@H6C al 7+A , ml
Serie Blanca 79
/cetato de sodio 7H6C , g
H6C6 al 7A -@ ml
.aCH ,- . ,: ml
'a(ranina -6 g
$os reacti"os se mezclan en el orden indicado $a !encidina a "eces contiene un material
insolu!le /l aadir el sul(ato de zinc se (orma un precipitado que se disuel"e al aadir los
dems reacti"os El pH de la soluci#n de!e a%ustarse a B-- N --: $a soluci#n se (iltra y
se guarda a temperatura am!iente2 puede usarse de manera repetida por meses
-.PROCEDIMIENTO.
-.1 T3cnica:
>,, $os (rotis se (i%an por un minuto con la soluci#n (ormol etanol
>,6 $a"ar con agua de la lla"e
>,7 'ecar al aire PEDFE;4/ME.4E
>,> 'umergir en la soluci#n colorante por 7- segundos
>,: $a"ar con agua de la lla"e
>,B ;ontrateir por 7- segundos con soluci#n acuosa de sa(ranina al ,A
>,@ $a"ar con agua de la lla"e
>,+ 'ecar al aire
>,< 'ellar con resina sinttica y cu!rir con cu!reo!%etos del a,
/cti"idades1
EPracticar la tinci#n citoqumica para Mielopero*idasa con (rotis de sangre peri(rica
-.( Re$%!ta'#$ E$era'#$.
SERIE BLANCA: PRACTICA NO. +L
0ALAA NAATIL ACETATO ESTERASA EN
LEUCOCITOS 0
1. INTRODUCCIN.
Serie Blanca 80
$as esterasas son un grupo de enzimas capaces de )idrolizar steres en sus
componentes cidos y alco)oles E*isten di(erentes "ariedades seg&n el su!strato
empleado
'e utilizan > su!stratos1 na(tolE/'E;Ecloroacetato, na(tolE/'E3Eacetato, _ Ena(tilEacetato,
_ Ena(tilE!utirato, los cuales al ser )idrolizados en presencia de una sal diazoica dan un
precipitado insolu!le en el lugar de la reacci#n
9tilizando como su!strato el na(tolE/'E;Ecloroacetato 8;/E5 se detecta una esterasa
que es espec(ica de la granulopoyesis neutr#(ila en la que es positi"a a partir del
mielo!lasto y se e*presa en (orma de un precipitado ro%o anaran%ado muy !rillante 'u
utilidad diagn#stica se centra !sicamente en el reconocimiento de clulas !lsticas
mieloides, si !ien su aparici#n es ms tarda que la de la mielopero*idasa aunque
iguala a sta en especi(icidad
9tilizando como su!strato el na(tolE/'E3Eacetato, se o!tiene una intensa positi"idad en
la serie monoctica que, a di(erencia de las restantes clulas )ematopoyticas, es
(luoruro sensi!le 3ada su positi"idad ms restricti"a es pre(erente usar el su!strato V>
na?ti!>acetat# # V>na?ti!>b%tirat# para marcar la serie monoctica y sus precursores,
cuya positi"idad es intensa y se mani(iesta en (orma de un precipitado di(uso por todo
el citoplasma

+.1 Reacti.#$.
NUM NOMBRE DEL REACTI"O CONC. CANTIDAD
, .a6HPC> 6- mg
6 KH6PC> ,--mg
7 Formalde)ido 7@A 6: ml
> /cetona >: ml
: .a6HPC> 67BB
B KH6PC> 66B@ g
@ ;loruro de Pararosanilina 6:- mg
+ H;l ;oncentrado ,6: ml
< /l(a .ap)t)yl acetato :- mg
,- Etiln glicol monometil Eter 6: ml
,, .itrito de sodio >A ,: ml
Balanza granataria
Balanza analtica
Serie Blanca 81
+.+Materia!e$ 'e Lab#rat#ri#
CANTIDAD DESCRIPCIN
6 Vasos de precipitados de ,-- ml
6 Vasos de precipitados de :-- ml
6 Pro!etas de ,-- ml
6 Pro!etas de :-- ml
, Matraz "olumtrico de :- ml
, 4u!o de ,7L,-- ml
7 Pipetas de ,- ml
> Pipetas de : ml
6 Ioteros de ,- ml
6 Ioteros de ,-- ml
6 Frascos de :-- ml
,- Frotis de sangre peri(rica
+.-Prearacin 'e Reacti.#$
S#!%ci#ne$ 'e Ai4acin
+.-.1 S#!%cin A
.a6HPC> 6- mg
KH6PC> ,-- mg
/gua destilada 7- ml
+.-.( S#!%cin 'e ?i4acin 7 H.H
Formalde)do al 7@A 6: ml
/cetona >: ml
'oluci#n / 8 a, 5 7- ml
8 Esta soluci#n se guarda a >b; 5

+.-.+ A&#rtig%a'#r 'e ?#$?at#$ 1M1D M 7 O.H
a5 .a6HPC> 67BB g
H6C destilada 6:- ml

!5 KH6PC> 66B@ g
H6C destilada 6:- ml
Serie Blanca 82
Preparaci#n del amortiguador1
'olucion a5 >6: ml
'oluci#n !5 @: ml
S#!%ci#ne$ 'e Tincin
+.-.- S#!%cin 'e Parar#$ani!ina

;loruro de Pararosanilina 6:- mg
/gua destilada : ml
H;l concentrado ,6: ml
3isol"er calentando sua"emente y agitando
3e%ar en(riar la soluci#n y (iltrar
8 Esta soluci#n se conser"a a temperatura am!iente 5
+.-.D S#!%cin 'e A!?a Na<t<;! acetat#
/l(a .ap)t)yl acetato :- mg
Etiln glicol monometil Eter 6: ml
8 Esta soluci#n se prepara (resca , en cada ocasi#n 5
+.-.H S#!%cin 'e Parar#$ani!ina <e@aJ#tiJa'a
'oluci#n de Pararosanilina ,: ml
.itrito de sodio al >A recin preparado ,: ml
8 Esta soluci#n se prepara (resca, en cada ocasi#n 5
+.-.O MeJc!a 'e inc%bacin.
Bu((er de Fos(atos ,O,: M, pH @B >: ml
'oluci#n de Pararosanilina )e*azotizada 7 ml
'oluci#n de .ap)t)yl acetato 6: ml
/%ustar el pH a B,N -7 con .aCH ,. y (iltrar
8 Esta soluci#n se prepara (resca , en cada 5
-.PROCEDIMIENTO.
Serie Blanca 83
-.1 T3cnica:
>,, Fi%ar los (rotis a >b; por 7- segundos
>,6 $a"ar los (rotis con agua de la lla"e
>,7 3e%ar secar a temperatura am!iente
>,> ;olocar los (otis en la mezcla de incu!aci#n a temperatura am!iente por >:
minutos en la oscuridad
>,: $a"ar con agua de la lla"e
>,B ;ontrateir con )emato*ilina de Iill por ,- minutos
>,@ $a"ar con agua de la lla"e
>,+ 'ecar a temperatura am!iente
>,< 'ellar con resina sinttica y cu!rir con cu!reo!%etos del a,

Acti.i'a'e$:
EPracticar la tinci#n citoqumica para Esterasas con (rotis de sangre peri(rica
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
FFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFFF
B?B$?CID/Fc/
, B$CC3 ;E$$ MCDPHC$CIU Perip)eral 'mear E"aluation Manual ,$ynn Maedel and
'andra 'ommer/merican 'ociety o( ;linical Pat)ologysts;)icago
Serie Blanca 84
6B$CC3 ;E$$ MCDPHC$CIU Benign or Deacti"e ;)anges in HB;s and
PlateletesManual 7 $ynn Maedel and 'andra 'ommer/merican 'ociety o( ;linical
Pat)ologysts;)icago
7El /tlas de Hematologa3r =oaqun ;arrillo Farga
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Serie Blanca 85

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