Mutaciones en la diana especifica del antgeno.

Transferencia horizontal de genes

Un medio por el que las bacterias pueden adquirir resistencia a los antibiticos es por la
transferencia horizontal de genes resistentes a los antibiticos. Esta transferencia de genes
de resistencia es frecuente (Gmez, 1998; Top et al., 2000), y da cuenta de muchos casos de
resistencia en las bacterias. Sin embargo, la transferencia horizontal involucra meramente la
transferencia de genes de resistencia que ya existen en el mundo de las bacterias.

En tanto que la adquisicin horizontal de genes de resistencia es beneficiosa para las
bacterias expuestas a un antibitico determinado, esta transferencia de genes no da cuenta
del origen de la diversa variedad de estos genes. Como tal, no proporciona un mecanismo
gentico para el origen de ningunos de los genes de resistencia a los antibiticos existentes
en el mundo biolgico. La evolucin predice que por medio del proceso de la
descendencia comn con modificacin puede explicar el origen y la diversidad de la vida
sobre la tierra; sin embargo, la mera transferencia de genes preexistentes entre organismos
mediante transferencia gentica no proporciona el necesario mecanismo gentico para
satisfacer esta prediccin. Tampoco puede explicar satisfactoriamente el desarrollo
simultneo de ambas cosas, la biosntesis de los antibiticos y los genes de resistencia lo
cual constituye un enigma evolutivo (Penrose, 1998). De modo que la transferencia
horizontal de los genes de resistencia no puede presentarse como un ejemplo apropiado de
evolucin en la cpsula de Petri.
Mutaciones

Las mutaciones, que se definen como cualquier cambio en la secuencia del ADN (Snyder y
Champness, 2003), proporcionan el nico mecanismo gentico conocido para la produccin
de nuevas actividades y funciones genticas en el mundo biolgico. A la luz de esto, solo
las mutaciones tienen el potencial de proporcionar un mecanismo para la evolucin que
explique el origen de la resistencia a los antibiticos. As, solo aquella resistencia que
resulte de una mutacin constituye un ejemplo potencial de evolucin en accin (esto es,
de descendencia comn con modificacin).

En presencia de un antibitico determinado (o de otros microbicidas), cualquier mutacin
que proteja a la bacteria de la cualidad letal de dicho compuesto presenta evidentemente un
fenotipo beneficioso. La seleccin natural seleccionar de manera enrgica y bastante
precisa aquellos mutantes resistentes, lo que se ajusta al marco de una respuesta adaptiva.
Pero el anlisis molecular de dichas mutaciones revela una gran incongruencia entre la
verdadera naturaleza de la mutacin y las demandas de la teora de la evolucin (Tabla I).
Tabla I. Fenotipos resultado de mutaciones conducentes a resistencias a antibiticos
especficos
Antibitico Fenotipo que proporciona la resistencia
Actinonina Prdida de actividad enzimtica
Ampicilina Respuesta SOS que detiene la divisin celular
Azitromicina Prdida de una protena reguladora
Cloranfenicol Reduccin de la formacin de una porina o de una protena reguladora
Ciprofloxacina Prdida de una porina o prdida de una protena reguladora
Eritromicina Reduccin de afinidad a ARNr 23S o prdida de una protena reguladora
Fluoroquinolonas Prdida de afinidad a la girasa
Imioenema Reduccin de la formacin de una porina
Kanamicina Reduccin de la formacin de una protena de transporte
cido nalidxico Prdida o desactivacin de una protena reguladora
Rifampina Prdida de afinidad a la ARN-polimerasa
Estreptomicina Afinidad reducida al ARNr 16S o reduccin de la actividad de transporte
Tetraciclina Formacin reducida de una porina o de una protena reguladora
Zwittermicina A Prdida de fuerza motriz del protn

La resistencia bacteriana al antibitico rifampina puede resultar de una mutacin comn. La
rifampina inhibe la transcripcin bacteriana interfiriendo con la actividad normal de la
ARN-polimerasa (Gale et al., 1981; Levin y Hatfull, 1993). Las bacterias pueden adquirir
resistencia por una mutacin puntual de la subunidad de la ARN-polimerasa, que est
codificada por el gen rpoB (Enright et al., 1998; Taniguchi et al., 1996; Wang et al., 2001;
Williams et al., 1998). Esta mutacin altera de forma suficiente la estructura de la
subunidad de modo que pierde especificidad para la molcula de la rifampina. Como
resultado, la ARN-polimerasa deja de tener afinidad por la rifampina, y ya no queda
afectada por el efecto inhibidor del antibitico.

De hecho, el nivel de resistencia a la rifampina que puede adquirir una bacteria de forma
espontnea puede ser sumamente elevado. En mi laboratorio obtenemos rutinariamente
estirpes mutantes con un nivel de resistencia varias magnitudes mayor que el de la estirpe
silvestre. Cuando hay rifampina presente, esta mutacin proporciona una clara ventaja para
la supervivencia en comparacin con las clulas que carecen de estas mutaciones
especficas. Pero cada una de estas mutaciones elimina la afinidad de la ARN-polimerasa
por la rifampina. Como tales, estas mutaciones no proporcionan un mecanismo que
expliquen el origen de la afinidad, sino solo su prdida.

La resistencia espontnea a las fluoroquinolonas (como la ciprofloxacina o la norfloxacina)
es tambin una mutacin frecuente en algunas bacterias. La diana primaria del antibitico
es el enzima ADN-girasa, que est formado por dos protenas codificadas por los genes
gyrA y gyrB (Hooper y Wolfson, 1993). El anlisis gentico ha descubierto que la
resistencia a esta clase de antibiticos puede ser resultado de una mutacin puntual en
cualquiera de estos genes (Barnard y Maxwell, 2001; Griggs et al., 1996; Heddle y
Maxwell, 2002; Heisig et al., 1993, Willmott y Maxwell, 1993). Estas mutaciones de las
subunidades de la girasa parecen ser causa de un cambio de conformacin suficiente de la
girasa de modo que reduce o pierde su afinidad por las fluoroquinolonas (Figura 1). Una
vez ms, a pesar de su naturaleza beneficiosa, estas mutaciones no proporcionan un
modelo til que explique el origen de la afinidad de la girasa por las fluoroquinolonas.

Figura 1. Mecanismo de la resistencia a la ciprofloxacina. (A) La ciprofloxacina
interacta con la girasa, e inhibe su actividad enzimtica. (B) Una mutacin en
cualquiera de ambos genes, gyrA o gyrB, puede cambiar la estructura que
conforma la girasa y reducir la afinidad del enzima por la ciprofloxacina. Esto
resulta en una incapacidad del antibitico para inhibir la girasa, y la clula se
vuelve resistente al antibitico.
Tambin la resistencia a la estreptomicina puede proceder de mutaciones bacterianas
espontneas. En este caso, la estreptomicina bloquea la sntesis de protena de la bacteria
aparentemente unindose con el segmento del ARNr 16S del ribosoma e interfiriendo con
la actividad del ribosoma (Carter et al., 2000; Leclerc et al., 1991). La resistencia al
antibitico puede surgir por mutaciones en el gen ARNr 16S, que reduce la afinidad de la
estreptomicina para la molcula 16S (Springer et al., 2001). La reduccin de unas
actividades de transporte especficas de oligopptidos lleva tambin a una resistencia
espontnea frente a diversos antibiticos, incluyendo la estreptomicina (Kashiwagi et al.,
1998). En estos ejemplos, la resistencia surgi como resultado de la prdida de un
componente o actividad funcionales.

La prdida de actividad enzimtica puede dar como resultado la resistencia al metronidazol.
El metronidazol intracelular se tiene que activar mediante enzimas antes que pueda servir
como agente antimicrobiano. Esta activacin se consigue mediante el enzima
nitrorreductasa NADPH (Figura 2). Si el metronidazol no es activado no ejerce un efecto
inhibidor sobre la bacteria. Por ello, si no hay actividad de nitrorreductasa NADPH en la
clula, el metronidazol permanece inactivo. Puede haber prdida de la actividad de la
reductasa por mutaciones terminadoras o de delecin en rdxA (Debets-Ossenkopp et al.,
1999; Goodwin et al., 1998; Tankovic et al., 2000). Adems, la actividad de la
nitrorreductasa NADPH se puede reducir a causa de una sola mutacin de aminocido (un
solo cambio de aminocido), que reduce su capacidad para activar el metronidazol (Paul et
al., 2001). Todas estas mutaciones resultan en la prdida de la actividad enzimtica
necesaria para que el frmaco sea efectivo en la clula, y por ello la clula se vuelve
resistente al metronidazol. Pero la prdida de actividad enzimtica no da ningn ejemplo
gentico de cmo evolucion originalmente dicho enzima. Por ello, las mutaciones que
proporcionan resistencia frente al metronidazol no pueden presentarse como verdaderos
ejemplos de evolucin en una cpsula de Petri.

Figura 2. La activacin del agente antimicrobiano, el metronidazol. Despus de
ser transportado al interior de la clula, el metronidazol necesita una
modificacin estructural para adquirir su forma activa, antimicrobiana. Esta
activacin se logra por la accin del enzima nitrorreductasa NADPH, que es
producto del gen rdxA. Las mutaciones del rdxA pueden impedir la sntesis de
una nitrorreductasa NADPH con actividad funcional, lo que impide la
activacin del metronidazol.
Una diversidad de bacterias, incluyendo la Escherichia coli, construyen una bomba de
eflujo de resistencia mltiple a los antibiticos (MAR) que proporciona a la bacteria una
resistencia a mltiples tipos de antibiticos, incluyendo la eritromicina, la tetraciclina, la
ampicilina y el cido nalidxico. Esta bomba expulsa el antibitico del citoplasma de la
clula, lo que ayuda a mantener los niveles intracelulares por debajo de una concentracin
letal (Grkovic et al., 2002; Okusu et al., 1996) (Figura 3). La bomba para MAR est
compuesta de las protenas MarA y MarB, la sntesis de las cuales resulta inhibida por la
protena reguladora, MarR (Alekshun y Levy, 1999; Poole, 2000) (Figura 3). Las
mutaciones que reducen o eliminan el control de la represin de MarR resultan en una
sobreproduccin de la bomba de eflujo MarAB, lo que posibilita a la clula expulsar
mayores concentraciones de antibiticos o de otros agentes bactericidas (Oethinger et al.,
1998; Poole, 2000; Zarantonelli et al., 1999).

La protena MarA acta tambin como un regulador positivo estimulando una mayor
produccin de las protenas MarA y MarB (Alekshun y Levy, 1999) [Figura 3]. Adems, la
protena MarA inhibe indirectamente la produccin de la porina, OmpF, un canal en la
membrana que permite la entrada de algunos antibiticos en la clula (Cohen et al., 1988).
Por ello, la expresin aumentada de MarA aumenta la expulsin de antibiticos de la clula,
y reduce el transporte de algunos antibiticos al interior de la clula (Figura 3). Las
mutaciones de marR que reducen la expresin o la actividad de la protena MarR
posibilitarn as una expresin excesiva de la bomba de eflujo MarAB (Linde et al., 2000;
Okusu et al., 1996), y proporcionarn una mayor resistencia de la bacteria a diversos
antibiticos (Eaves et al., 2004; Hans-Jorg et al., 2000; Notka et al., 2002) [Figura 3]. Los
mutantes defectuosos de MarR presentan tambin una mayor tolerancia bacteriana a
algunos agentes qumicos orgnicos, como el ciclohexano (Aono et al., 1998).

Figura 3. Bomba de eflujo para resistencia a mltiples frmacos. (A) Bacteria
sensible a antibiticos. Los antibiticos entran en la clula a travs de diversos
portales, incluyendo la porina OmpF. La expresin del gen marP produce la
protena reguladora, MarR. Esta protena se une al promotor (rotulado como P)
del opern de resistencia mltiple a los frmacos, inhibiendo la expresin de los
genes marA y marB. (B) Bacteria resistente a los antibiticos. Una mutacin de
marR que que reduce la actividad de MarR hace posible que el promotor
funcione constitutivamente. Ahora se expresan marA y marB. Estas dos
protenas forman una bomba de eflujo, que transporta las molculas de
antibitico fuera del citoplasma de la clula. MarM tambin se une al promotor
(rotulado como P) y aumenta la velocidad de transcripcin del opern, lo que
aumenta la produccin tanto de MarA como de MarB. Adems, la produccin
de MarA reduce de forma indirecta la sntesis de la porina OmpF, con lo que se
reduce la cantidad de estas porinas en la membrana, La combinacin de un
nmero inferior de porinas para el transporte de un antibitico al interior de la
clula, y el aumento de la cantidad de bombas de eflujo que eliminan el
antibitico de la clula, proporciona a la bacteria una mayor tolerancia a
diversos antibiticos.

Las mutaciones que aumentan la produccin de esta bomba de eflujo hacen posible que
estas bacterias sobrevivan la exposicin a diversos antibiticos. Como tal, esta es una
mutacin beneficiosa cuando el antibitico est presente en el medio. Sin embargo, una
mutacin que es causa de una prdida de control de regulacin (en este caso de la protena
represora, MarR) no ofrece un mecanismo gentico que pueda dar cuenta del origen de este
control regulador.

En otros ejemplos, la resistencia a la eritromicina puede tambin originarse debido a la
prdida de un segmento de once pares de bases del gen ARNr 23S (Douthwaite et al.,
1985), o por una mutacin que altera la conformacin del ARNr 23Slo que reduce la
afinidad del ribosoma hacia el antibitico (Gregory y Dahlberg, 1999; Vannuffel et al.,
1992). La resistencia al cloranfenicol se obtuvo por delecin de una regin de 12 pares de
bases en el dominio II del gen de la peptidiltransferasa (Douthwaite, 1992). La resistencia a
las cefalosporinas se ha vinculado con una gran alteracin de la cintica del transporte en
membranas que es semejante a las estirpes deficientes en porinas (Chevalier et al., 1999).
La resistencia a la actinonina en el Staphylococcus aureus resulta de mutaciones que
eliminan la expresin del gen fmt (Margolis et al., 2000). La resistencia a la zwittermicina
A en la E. coli est asociada con la prdida de fuerza motriz protnica (Stabb y
Handelsoman, 1998). En el caso del Streptococcus gordonii, la tolerancia a la penicilina
puede involucrar la prdida del control regulador del opern arc (Caldelari et al., 2000). Y
la E. coli puede sobrevivir a la presencia de las -lactamas, como la ampicilina, deteniendo
la divisin celular, lo que hace a la clula menos sensible al efecto letal del antibitico
(Miller et al., 2004).

Estas mutaciones resistentes que se describen aqu llevan a la prdida de un sistema
biolgico preexistente, incluyendo la divisin celular y la fuerza motriz protnica. Aunque
la supervivencia frente al antibitico sea un fenotipo beneficioso, estas mutaciones no
pueden ser un ejemplo gentico de cmo se origin cada uno de estos sistemas. Como tales,
no proporcionan ningn medio gentico para cumplir las predicciones de descendencia
con modificacin.

La resistencia a otros antibiticos, como la kanamicina, puede resultar de la prdida o
reduccin de sntesis de una protena transportadora (OppA) [Kashiwagi et al., 1998]. La
resistencia a la ciprofloxacina y a la imipenema puede resultar, al menos en parte, de una
disminucin en la formacin de la porina de la membrana exterior, OmpF (Armand-Lefvre
et al., 2003; Hooper et al., 1987; Yigit et al., 2002). Un aumento en la resistencia al
meropenem y a la cefepima va tambin asociado a la prdida de OmpF y de otra porina,
OmpC (Yigit et al., 2002). Y el Enterobacter aerogenes puede llegar a hacerse resistente a
diversos antibiticos cuando una mutacin reduce en gran proporcin la conductancia de
una porina de membrana (D et al., 2001).

Cada una de las resistencias que se describen en el prrafo anterior resulta de la reduccin o
de la prdida de un sistema de transporte. Sin embargo, los mecanismos genticos
necesarios para la evolucin tendran que dar cuenta del origen de estos diversos sistemas
de transporte. As, estas mutaciones originadoras de la resistencia a los antibiticos no
proporcionan los cambios genticos precisos para la descendencia comn. Al contrario,
son genticamente incongruentes con las necesidades de la evolucin, siendo que cada una
de ellas involucra la prdida de una actividad de transporte preexistente.

Como grupo, las mutaciones asociadas con la resistencia a los antibiticos involucran la
prdida o reduccin de una funcin o actividad celular preexistente, esto es, la molcula
diana ha perdido una afinidad hacia el antibitico, el sistema de transporte de antibiticos
ha quedado reducido o eliminado, ha habido reduccin o eliminacin de un sistema
regulador o de una actividad enzimtica, etc. (Tabla I). Estas no son mutaciones que puedan
dar cuenta del origen de dichos sistemas y actividades celulares. Aunque estas mutaciones
pueden ciertamente considerarse como beneficiosas para la supervivencia de la bacteria
cuando est presente un antibitico en el medio ambiente, este beneficio tiene lugar a
expensas de una funcin previamente existente. Esto es anlogo a eliminar una pared
interior de una casa para conseguir un comedor ms grande. Aunque este comedor mayor
pueda ser deseable (esto es, beneficioso), el mecanismo de derribo de esta pared no puede
ofrecerse de manera legtima como un ejemplo de cmo se construy originalmente esta
pared interior. Igualmente, el beneficio de la supervivencia de una mutacin es solo una
parte de los rasgos genticos necesarios para que las mutaciones puedan dar la evolucin
en una cpsula de Petri. Estas mutaciones tambin pueden proporcionar la base gentica
para una descendencia comn con modificacin. Aunque esto contradice de forma
directa las pretensiones hechas por muchos proponentes de la evolucin, los datos
moleculares acerca de la resistencia a los antibiticos son muy claros.

Estas mutaciones tampoco pueden proporcionar un mecanismo que siga evolucionando
el nivel de especificidad o de actividad de las protenas que se necesitan para la normal
funcin celular. Aunque estas mutaciones constituyen unos excelentes ejemplos de
adaptacin bacteriana, son en realidad lo directamente contrario de los cambios por
mutacin necesarios para la evolucin. Sin embargo, estos son precisamente los ejemplos
que los evolucionistas presentan como demostraciones verificables del cambio evolutivo.
Cosa irnica, estas mutaciones son en realidad ejemplos verificables de un modelo
creacionistauna complejidad inicial que pasa por mutacin a un nivel de mayor
simplicidad.

La adquisicin espontnea de resistencia a los antibiticos es designada con frecuencia
como una ganancia de resistencia, pero es ms apropiado identificarlo como una prdida
de sensibilidad. As, la resistencia a los antibiticos es resultado de la prdida de sistemas
previamente existentes en la clula bacteriana. Est claro que estos cambios no
proporcionan ningn mecanismo gentico para el origen de caractersticas scelulares como
la especificidad enzimtica, la actividad de transporte, la actividad reguladora, o la afinidad
de las protenas. Sin embargo, los evolucionistas afirman insistentemente que las
mutaciones proporcionan un mecanismo gentico para el origen de la actividad biolgica y
de una descendencia comn con modificacin, y presentan repetidamente los tipos de
mutacin que se acaban de describir como ejemplos de evolucin en accin

Mutaciones en los ribosomas.
Ribosoma

La resistencia a antibiticos que se presenta debido a la alteracin de nbosomas,
puede involucrar componentes de las subunidades 50S, 30S o al RNA nbosomal 23S o
16S.
Subunidad 50S. Macrlidos y lrncomicinas. Los macrlidos son antibiticos efectivos
contra organismos gram positivos causantes de neumona, difteria, diarreas y algunas
enfermedades de transmisin sexual; constituyen una alternativa til al uso de la
penicilina G. La resistencia a macrlidos puede darse por metilacin postranscnpcional
del rRNA 23S. La modificacin postranscripcional del rRNA 23S por metilacin de
adenina (posicin 2058), est asociada con la resistencia a eritromicina, lincomicina y
clindamicina y causa un decremento en la afinidad de los antibiticos a sus blancos en
el ribosoma.
39
En Sacharopolyspora erythrea y Streptomyces fradie, la resistencia a
macrlidos involucra a los genes ermE y tlrA (ermSF) respectivamente EnnE se
expresa constitutivamente a travs de su propio promotor, mientras que tlrA (ermSF)
es inducido postranscnpcionalmente por medio de un mecanismo denominado
atenuacin traduccional. El mRNA transcnto de un gen erm inducible (que codifica para
una RNA metilasa), puede adoptar conformaciones alternativas que detenmnan su
disponibilidad para la traduccin. Este mRNA previamente inactivo es activado en
presencia del antibitico inductor y los nbosomas pueden traducir una secuencia corta
reguladora del lder (aunque el acceso a la parte codificadora de erm est bloqueado).
La induccin involucra la detencin de un nbosoma dentro del lder, debido a la accin
del antibitico inductor, lo cual desestabiliza la conformacin del mRNA inactivo y
favorece la adopcin de un estado alternativo, en el cual el ribosoma ahora tiene
acceso a la secuencia codificadora erm y as la traduccin puede comenzar.

Subunidad 30S. Aminoglucsidos. La modificacin a nivel de la subunidad 30s del
nbosoma, es un mecanismo comn en la resistencia a aminoglucsidos, donde
productos de las cepas resistentes modifican al RNA ribosomal 16S, como en el caso de
las metilasas codificadas por los genes kgmA (M purpurea) y kgmB (S. tenebrarius) y
que confieren resistencia a kanamicina y gentamicina.
31
Estas protenas actan sobre
la subunidad 30S intacta, mientras que las metilasas Tsr y Erm actan sobre el rRNA
libre.

Protenas ribosomales. Estreptomicina. En la resistencia a estreptomicina, tambin se
ha observado un cambio importante en la secuencia de aminocidos en la protena S-
12 de la subunidad nbosomal 30S.
40

Protenas relacionadas con sntesis y fincionamiento de crdos nuclicos
DNA girasa. Quinolonas. Las quinolonas son frmacos antimicrobianos derivados del
cido nalidxico, conuna alta actividad contra organismos gram negativos. La
introduccin de un tomo de fluor a la estructura bsica de las quinolonas, produjo un
grupo de antibiticos formado principalmente por la ofloxacina, pefloxacina, enoxacina,
norfloxacina y ciprofloxacina. La interaccin del tomo de flor en la posicin 6 y de
piperazina en la posicin 7, incrementan bastante la actividad antimicrobiana (figura 3,
b).
41


Las quinolonas actun sobre la DNA girasa, una enzima topoisomerasa tipo II
involucrada en los procesos de replicacin, transcripcin y recombinacin.
42-45
La DNA
girasa est compuesta por dos subunidades A codificadas por el gen gyrA y dos
subunidades B codificadas por el gen gyrB. Produce superenrollamiento negativo sobre
DNA circular, y separa reversiblemente DNA concatenado,
42
procesos que requieren
ATP. La enzima causa el rompimiento de las dos cadenas de DNA y posteriormente las
reunifica. Estas actividades son inhibidas por quinolonas
46
Se ha encontrado in vitro
que la subunidad A de la DNA girasa forma un enlace 0
4
-fosfotirosina entre los
extremos 5' de las cadenas rotas de DNA y la tirosina 122 de la girasa.
44
Se piensa que
este complejo representa un paso intermedio entre el rompimiento y la reunificacin
que realiza la DNA girasa sobre el DNA, de manera que las quinolonas inhiben
selectivamente la reaccin de reunificacin
45


Hasta ahora no se han descrito enzimas bactenanas capaces de hidrolizar o inactivar
quinolonas. Sin embargo, s se han descnto mutaciones en los genes gyrA y gyrB que
producen resistencia a cido nalidxico. Otras mutaciones cercanas a la tirosina
cataltica 122 de gyrA, confieren resistencia a las nuevas quilononas.
47
Mutaciones en
el gen gyrB seleccionadas con cido nalidxico, denominadas NalC y NalB, han sido
identificadas en la parte central de la secuencia codificadora de la subunidad B y se
deben tambin a mutaciones puntuales.
45,46
La. frecuencia de las mutaciones a cido
nalidxico es prcticamente la misma en ambas subunidades de la girasa.
48


Las mutaciones que confieren resistencia a quinolonas, se presentan en el cromosoma
bacteriano y nunca en plsmidos Algunos plsmidos de resistencia parecen aumentar
la susceptibilidad de las clulas a las quinolona las cuales tienden a eliminarlos,
inhibiendo tanto su replicacin como su transferencia 49s0 Algunas mutaciones en
gyrB disminuyen la capacidad de las bacterias para actuar como receptoras o
donadoras y para mantener DNA extracromosomal en forma estable.
49


RNA polimerasa. Rifampicina. Esta sustancia acta sobre la subunidad de la RNA
polimerasa, inhibiendo la extensin del RNA durante su sntesis. La resistencia a
rifampicina se presenta cuando cambios en un anunocido de esta subunidad alteran la
unin del antibitico a la RNA polimerasa.
40
Esta resistencia es comn en
enterobacterias y puede desarrollarse en Staphylococcus, N. meningitidis y H.
infuenzae.

Ribosoma

La resistencia a antibiticos que se presenta debido a la alteracin de nbosomas,
puede involucrar componentes de las subunidades 50S, 30S o al RNA nbosomal 23S o
16S.
Subunidad 50S. Macrlidos y lrncomicinas. Los macrlidos son antibiticos efectivos
contra organismos gram positivos causantes de neumona, difteria, diarreas y algunas
enfermedades de transmisin sexual; constituyen una alternativa til al uso de la
penicilina G. La resistencia a macrlidos puede darse por metilacin postranscnpcional
del rRNA 23S. La modificacin postranscripcional del rRNA 23S por metilacin de
adenina (posicin 2058), est asociada con la resistencia a eritromicina, lincomicina y
clindamicina y causa un decremento en la afinidad de los antibiticos a sus blancos en
el ribosoma.
39
En Sacharopolyspora erythrea y Streptomyces fradie, la resistencia a
macrlidos involucra a los genes ermE y tlrA (ermSF) respectivamente EnnE se
expresa constitutivamente a travs de su propio promotor, mientras que tlrA (ermSF)
es inducido postranscnpcionalmente por medio de un mecanismo denominado
atenuacin traduccional. El mRNA transcnto de un gen erm inducible (que codifica para
una RNA metilasa), puede adoptar conformaciones alternativas que detenmnan su
disponibilidad para la traduccin. Este mRNA previamente inactivo es activado en
presencia del antibitico inductor y los nbosomas pueden traducir una secuencia corta
reguladora del lder (aunque el acceso a la parte codificadora de erm est bloqueado).
La induccin involucra la detencin de un nbosoma dentro del lder, debido a la accin
del antibitico inductor, lo cual desestabiliza la conformacin del mRNA inactivo y
favorece la adopcin de un estado alternativo, en el cual el ribosoma ahora tiene
acceso a la secuencia codificadora erm y as la traduccin puede comenzar.

Subunidad 30S. Aminoglucsidos. La modificacin a nivel de la subunidad 30s del
nbosoma, es un mecanismo comn en la resistencia a aminoglucsidos, donde
productos de las cepas resistentes modifican al RNA ribosomal 16S, como en el caso de
las metilasas codificadas por los genes kgmA (M purpurea) y kgmB (S. tenebrarius) y
que confieren resistencia a kanamicina y gentamicina.
31
Estas protenas actan sobre
la subunidad 30S intacta, mientras que las metilasas Tsr y Erm actan sobre el rRNA
libre.

Protenas ribosomales. Estreptomicina. En la resistencia a estreptomicina, tambin se
ha observado un cambio importante en la secuencia de aminocidos en la protena S-
12 de la subunidad nbosomal 30S.
40

Protenas relacionadas con sntesis y fincionamiento de crdos nuclicos
DNA girasa. Quinolonas. Las quinolonas son frmacos antimicrobianos derivados del
cido nalidxico, conuna alta actividad contra organismos gram negativos. La
introduccin de un tomo de fluor a la estructura bsica de las quinolonas, produjo un
grupo de antibiticos formado principalmente por la ofloxacina, pefloxacina, enoxacina,
norfloxacina y ciprofloxacina. La interaccin del tomo de flor en la posicin 6 y de
piperazina en la posicin 7, incrementan bastante la actividad antimicrobiana (figura 3,
b).
41


Las quinolonas actun sobre la DNA girasa, una enzima topoisomerasa tipo II
involucrada en los procesos de replicacin, transcripcin y recombinacin.
42-45
La DNA
girasa est compuesta por dos subunidades A codificadas por el gen gyrA y dos
subunidades B codificadas por el gen gyrB. Produce superenrollamiento negativo sobre
DNA circular, y separa reversiblemente DNA concatenado,
42
procesos que requieren
ATP. La enzima causa el rompimiento de las dos cadenas de DNA y posteriormente las
reunifica. Estas actividades son inhibidas por quinolonas
46
Se ha encontrado in vitro
que la subunidad A de la DNA girasa forma un enlace 0
4
-fosfotirosina entre los
extremos 5' de las cadenas rotas de DNA y la tirosina 122 de la girasa.
44
Se piensa que
este complejo representa un paso intermedio entre el rompimiento y la reunificacin
que realiza la DNA girasa sobre el DNA, de manera que las quinolonas inhiben
selectivamente la reaccin de reunificacin
45


Hasta ahora no se han descrito enzimas bactenanas capaces de hidrolizar o inactivar
quinolonas. Sin embargo, s se han descnto mutaciones en los genes gyrA y gyrB que
producen resistencia a cido nalidxico. Otras mutaciones cercanas a la tirosina
cataltica 122 de gyrA, confieren resistencia a las nuevas quilononas.
47
Mutaciones en
el gen gyrB seleccionadas con cido nalidxico, denominadas NalC y NalB, han sido
identificadas en la parte central de la secuencia codificadora de la subunidad B y se
deben tambin a mutaciones puntuales.
45,46
La. frecuencia de las mutaciones a cido
nalidxico es prcticamente la misma en ambas subunidades de la girasa.
48


Las mutaciones que confieren resistencia a quinolonas, se presentan en el cromosoma
bacteriano y nunca en plsmidos Algunos plsmidos de resistencia parecen aumentar
la susceptibilidad de las clulas a las quinolona las cuales tienden a eliminarlos,
inhibiendo tanto su replicacin como su transferencia 49s0 Algunas mutaciones en
gyrB disminuyen la capacidad de las bacterias para actuar como receptoras o
donadoras y para mantener DNA extracromosomal en forma estable.
49


RNA polimerasa. Rifampicina. Esta sustancia acta sobre la subunidad de la RNA
polimerasa, inhibiendo la extensin del RNA durante su sntesis. La resistencia a
rifampicina se presenta cuando cambios en un anunocido de esta subunidad alteran la
unin del antibitico a la RNA polimerasa.
40
Esta resistencia es comn en
enterobacterias y puede desarrollarse en Staphylococcus, N. meningitidis y H.
infuenzae.



http://microral.wikispaces.com/3.+Gen%C3%A9tica+bacteriana.
http://www.binasss.sa.cr/revistas/rccm/v16n3/art8.pdf
http://bvs.insp.mx/rsp/articulos/articulo.php?id=001714