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COLERA PORCINO











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INTRODUCCION

El ciclo productivo del cerdo consiste en etapas bien diferenciadas (nacimiento
lactancia, destete-recra, y desarrollo-terminacin) las cuales tienen
requerimientos nutricionales, de instalaciones y ambientales bien particulares.
Asimismo, la mayora de las enfermedades infecciosas que potencialmente
pueden afectar a los cerdos, lo hacen en una de estas particulares etapas
productivas, siendo muy raro, que un mismo agente ataque a los animales
lactantes y adultos y produzca el mismo sndrome en ambas categoras. El
conocimiento de las principales enfermedades que afectan estas etapas
facilitar el diagnostico de las mismas y tambin la toma de decisiones para las
medidas de tratamiento y control en el caso que sucedan brotes.
La peste porcina clsica, conocida como clera porcina, es una enfermedad
infecciosa de origen viral y que, por su carcter altamente contagioso y amplia
difusin en el mundo, es considerada la afeccin ms importante del cerdo, al
ser la que ms prdidas produce a la industria porcina a nivel internacional.
En Cuba, el mal estuvo bajo control durante ms de 20 aos, gracias a
medidas de bioproteccin y alimentarias de los animales, que estaban en
condiciones fsicas aceptables para enfrentar cualquier contingencia.
Pero en 1993 comienzan a presentarse casos, inicindose una epizootia que
tuvo su mxima expresin en el 96. Esta situacin llev a la constitucin del
Puesto de Mando Nacional contra Catstrofes, ya que el rebrote de clera
porcino se consider como una emergencia en todo el pas.
El brote de clera porcino en Cuba puso en evidencia fallos: el pas estaba
desprovisto de medios de diagnstico y faltaba profundidad en el conocimiento
de la epizootiologa y de la vacuna en uso.
Ello enfrent a los investigadores cubanos a un problema al que haba que dar
solucin, propsito al que se sumaron varias expertas del Centro Nacional de
Sanidad Agropecuaria (CENSA), entre las que estuvo la doctora Mara Teresa
Fras, jefa del Grupo de Virologa Animal de dicha institucin.
3


La investigadora cubana dijo: "La situacin nos llev a estudios moleculares
que esclarecieran el posible origen de la epizootia, por qu reemergi el virus o
era nueva variante de este y si la vacuna no estaba en concordancia con las
cepas que se estaban desarrollando.
Para conocer el origen del brote de clera porcino se acometieron
investigaciones con la tecnologa ms moderna. Detalla Mara Teresa Fras
que se desarrollaron medios y mtodos de diagnstico en el animal en vivo,
tcnicas para deteccin de anticuerpos y estudios de relaciones filo-genticas
entre las cepas circulantes en el pas y la cepa vacunal para conocer el grado
de parentesco.
Ello evidenci que no se trataba de un virus introducido del exterior, sino que
era la reemergencia del agente biolgico propio de Cuba, y que la vacuna en
uso era til en el control de la enfermedad.
Concluimos que el problema estaba en las condiciones objetivas del pas en
cuanto a los cambios en la crianza animal, pues con el perodo especial se
produjo un aumento casi explosivo de la tenencia familiar de cerdos, los cuales
no se encontraban protegidos".














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INDICE

INTRODUCCION ........................................................................................................................ 2
MARCO TEORICO ..................................................................................................................... 6
1. CLERA PORCINO (PPC) ............................................................................................... 6
ETIOLOGIA ................................................................................................................................. 6
1.1. RELACIONES ANTGENICAS Y GENTICAS ......................................................... 7
1.2. PROPIEDADES FISICO QUMICAS ........................................................................... 7
1.3. RESISTENCIA A CONDICIONES AMBIENTALES .................................................. 8
1.4. MULTIPLICACIN Y PROPAGACIN DEL VIRUS ................................................... 9
2. PATOGENIA Y TRANSMISIN ..................................................................................... 11
3. CUADRO CLNICO Y ANATOMOPATOLGICO ....................................................... 12
4. DIAGNSTICO ................................................................................................................. 13
4.1. VIRUS O ANTGENOS VRALES .............................................................................. 13
4.1.1. AISLAMIENTO VIRAL ............................................................................................. 14
4.1.2. INMUNOFLUORECSCENCIA DIRECTA EN TEJIDOS ..................................... 14
4.1.3. ELISA DE CAPTURA ............................................................................................... 15
4.2. DETECCIN DEL CIDO NUCLEICO VIRAL ........................................................ 15
4.3. DETECCIN DE ANTICUERPOS ............................................................................. 16
4.3.1. SERONEUTRALIZACIN ....................................................................................... 16
4.3.2. ELISA DIFERENCIAL .............................................................................................. 16
4.4. MUESTRAS A REMITIR AL LABORATORIO ......................................................... 17
5. MATERIAL NECESARIO PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS ............................. 18
5.1. INMUNIZACIN FRENTE AL VPPC .......................................................................... 19
5.2. VACUNA DE SUBUNIDADES ..................................................................................... 21
Sensibilidad ........................................................................................................................... 23
CEDITEST ......................................................................................................................... 23
6. SNTOMAS ........................................................................................................................ 24
6.1. AGUDA: ......................................................................................................................... 24
6.2. CRNICA ...................................................................................................................... 24
6.3. LEVE: ............................................................................................................................. 24
7. DIAGNOSTICO ................................................................................................................. 24
8. TRANSMISIN ................................................................................................................. 25
9. PREVENCIN .................................................................................................................. 25
5


9.1. CONTROL Y VACUNACION ...................................................................................... 26
10. TRATAMIENTO ............................................................................................................ 26
CONCLUSIONES ..................................................................................................................... 27
BIBLIOGRAFIA ......................................................................................................................... 28





























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MARCO TEORICO

1. CLERA PORCINO (PPC)

Enfermedad viral altamente contagiosa del cerdo. Afecta a animales de todas
las edades y presenta una alta morbilidad y mortalidad. Las cepas menos
virulentas causan la enfermedad crnica o leve, fracaso reproductivo y
aumento de mortinatos. El clera porcino es una enfermedad endmica en la
mayora de los pases.

ETIOLOGIA

La PPC est producida por un virus perteneciente al gnero Pestivirus y
familia Flaviviridae. (Franki, 1991). La partcula vrica presenta un
dimetro de entre 40 a 50 nm con envuelta, la cpside tiene forma
icosadrica. Su gnoma viral est formado por una molcula de RNA
de banda simple y polaridad positiva que presenta una longitud de
12,284 nucletidos ( 2,2 Kb) con una fase de lectura abierta capaz de
codificar 3.989 aminocidos. El genoma viral acta como ARN
mensajero y se traduce en una poliprotena que procesada por la accin
de proteasas virales, no bien conocidas, y de la clula husped, para dar
lugar a las protenas maduras. El genoma ha sido clonado y
secuenciado en su totalidad caracterizndose cuatro protenas
estructurales, la protena p14, localizada en la nucleocpsida y tres
glicoprotenas: gp 55, tambin denominada (E1), gp 44, tambin
conocida como E2 y gp 33. Las gp 55 y 44 estn localizadas en la
envuelta. Existe al menos una protena no estructural denominada gp 2.
El genoma ha sido clonado y secuenciado en su totalidad conocindose
su distribucin y localizacin. Entre los nucletidos 364 y 1.100 se
localizan en primer lugar la gp 44, seguidamente la gp 33y la gp 55. La
gp 55 induce anticuerpos neutralizantes y una gran variabilidad en una
regin lo que permite diferenciar distintas cepas virales. (Weiland y col.
1992, Ruggli y col. 1996., Van Rijn y col. 1997).
7


1.1. RELACIONES ANTGENICAS Y GENTICAS

El virus de la PPC (VPPC) se encuentra estrechamente relacionado,
tanto antignica como genticamente con otros dos virus integrantes del
mismo gnero pestivirus, el virus de la Diarrea vrica bovina (BVD) y el
de la Enfermedad de Border (BD). Estos dos virus son primariamente
patgenos para los rumiantes, aunque el VBVD puede tambin infectar
el ganado porcino causando en algunas ocasiones infecciones con
cuadro clnico y lesiones similares a la PPC. Gracias a la utilizacin de
los anticuerpos monoclonales frente a diferentes epitopos de la gp 55 se
pueden estudiar las diferencias antignicas entre los distintos virus. Por
otra parte, estudios comparativos de secuencias entre el VPPC y el
VBVD han demostrado la presencia de zonas de alta homologa entre
ambos virus tanto a nivel de protenas como de nucletidos, donde
puede ser del entre 66 al 74 % como de nivel de aminocidos cuyos
resultados ronda el 85 %. No obstante, mediante la comparacin de la
secuencia de los nucleotidos de las regiones 5- NTR (entre las bases
190 a 339), Felsenstein, 1989 o mediante estudios de la regin de la
glicoprotena gp 55 (Lowings, et al. 1996) se han podido clasificar los
diferentes virus de la PPC en tres subgrupos.


1.2. PROPIEDADES FISICO QUMICAS

Debido a la presencia de lipoprotenas en su envoltura, el virus se
inactiva rpidamente con disolventes orgnicos, como cloroformo y
ter, as como detergentes, como Nonidet P-40, desoxicolato y
saponina. Tambin es sensible a la accin de radiaciones ultravioleta
y a pH entre 3-4 y 11-12. La infectividad se destruye fcilmente
sometiendo al virus a temperaturas de 60C durante un mnimo de 10
minutos. Esto mismo se consigue a menos temperatura si se
aumenta el tiempo de exposicin. De ah que se observe igual efecto
a una temperatura de 56C durante 60 minutos, 50C durante 3 das
8


o 35C durante 15 das. Las enzimas proteolticas, como la tripsina,
ejercen una inactivacin moderada.

El virus de la PPC es estable en un rango de pH entre 8 y 9, a
temperaturas de 20C y 70C, y liofilizado, donde puede
mantenerse durante aos. Asimismo puede durar semanas a
temperatura de refrigeracin en recipientes de cristal hermticos, sin
una disminucin marcada de la infectividad.los conservantes, como
glicerina al 1% o bien fenol al 0,5%, aumentan la efectividad del
proceso de conservacin. La destruccin del virus se aconseja en
hipoclorito 2%, cresol6%, fenol5%, hidrxido sdico 2% y lechada de
cal al 5%.


1.3. RESISTENCIA A CONDICIONES AMBIENTALES

La supervivencia del virus de la PPC en la naturaleza depende
tanto del medio ambiente como del medio en que ste se
encuentre protegido ( sangre, saliva, heces ). Aunque se trata de
un virus bastante resistente a la desecacin y al medio externo,
sobre todo cuando se encuentra en exudados, sangre o cualquier
medio proteico, no llega, a alcanzar la resistencia de otros virus
porcinos, como por ejemplo el virus de la peste porcina africana.

La putrefaccin lo destruye en 1 a 3 das. Da ah que se inactive
fcilmente en estircol (24- 48 horas ), si no se encuentra en
sangre o exudado nasal. En locales deshabitados suele
desaparecer entre 1 a 15 das, tambin puede permanecer
durante varios das en heces, orinas y secreciones. En los purines
se recomienda mantenerlos durante 45 das para conseguir su
inactivacin.

La permanencia del virus en los productos curados del cerdo fue
realizado por nosotros (Mebus, y col, 1992). Los animales fueron
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inoculados con el virus de PPC y en el momento de mxima
viremia todos los animales fueron sangrados y sacrificados, se
seleccionaron los tejidos a estudiar con los que se realizaran
posteriormente los diferentes productos (jamn ibrico y serrano,
paletilla ibrica y lomo ibrico). Las muestras fueron tomadas en
el momento de sacrificio y a intervalos durante el proceso de
curacin, realizndose ensayos para comprobar la supervivencia
del virus en muestras de grasa, ganglios, mdula sea y msculo
de los tejidos, utilizando tcnicas in vitro y cuando stas
resultaron negativas, inoculando las muestras in vivo. Los
resultados obtenidos pusieron de manifiesto que el virus se
inactivaba antes de terminar el perodo establecido para la
curacin comercial de cada producto.


1.4. MULTIPLICACIN Y PROPAGACIN DEL VIRUS

El nico Hospedador natural del virus de la PPC es el cerdo tanto
domestico como silvestre, aunque el virus es capaz de replicarse
en otras especies animales como rumiantes domsticos, venados
y animales de experimentacin, provocando una reaccin febril,
prcticamente asintomtico. Entre ellas, el conejo es la ms
importante, ya que dieron lugar a la obtencin de las clsicas
cepas vacunales atenuadas, utilizadas en Europa en los aos 70
y primeros de los 80 para el control y erradicacin de la
enfermedad.

En el cerdo el virus suele entrar principalmente por ingestin
seguido de la piel, por semen o por inhalacin, es decir todas las
vas son posibles en la infeccin del VPPC. La multiplicacin
primaria se lleva a cabo en las clulas endoteliales y fagocticas
de amgdalas y ganglios linfticos regionales (segn la puerta de
entrada) posteriormente se produce una fase viremia para
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localizarse finalmente en los rganos diana donde se producir de
nuevo replicacin viral. (Mengeling, W, ycol. 1969).

La replicacin del virus in vitro en cultivos primarios se produce en
clulas de rin porcino, testculos de ratn y cerdo, clulas
porcinas embrionarias, cultivos primarios de clulas de rin de
cobayo, zorro, conejo y ardilla entre otros.

El virus adems replica en una gran variedad de lneas celulares
establecidas de origen porcino, bovino, caprino, primate y cobayo.
La de uso ms frecuente en laboratorio es la lnea de rin de cerdo
PK-15. Pese a que la replicacin del virus en estos cultivos tiene un
mayor grado de reproducibilidad y un comportamiento ms
uniforme, la propagacin del virus en ellas solo proporciona
moderados o bajos ttulos virales, por lo que los rendimientos en
produccin no son muy elevados.

El uso de cultivos primarios trae consigo un elevado riesgo de
contaminaciones con otros virus, bacterias y microplasmas
procedentes del organismo donante. Este riesgo disminuye en gran
medida con el uso de lneas celulares establecidas. En este caso
ltimo caso, la contaminacin ms importante es la infeccin del
cultivo con el virus de BVD, que puede ir contaminando el suero
fetal bovino, utilizado en los cultivos como nutriente. Por tanto es
necesario realizar comprobaciones peridicas frente a los distintos
agentes contaminantes y principalmente frente a este virus. Las
clulas primarias de origen ovino o cultivos permanentes que
contengan suero ovino como nutriente presentan el mismo
problema de contaminacin con el virus de BD.

La replicacin del virus en las diferentes lneas celulares no produce
efecto citoptico en la clula infectada, con la excepcin de muy
reducido nmero de cepas citopatopatognicas, por lo que para su
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deteccin ha de ser monitorizado por distintas tcnicas serolgicas
de inmunofluorescencia o inmunoperoxidasa.


2. PATOGENIA Y TRANSMISIN

El VPPC suele penetrar en el organismo por ingestin, inhalacin, piel, o
semen. Una vez en el animal , el virus se replica en amgdalas (infeccin
oral o nasal) o en los ganglios linfticos regionales (vaginal, piel) . Tras
una primera fase de replicacin el virus pasando a sangre produciendo
viremia (12 a 20 horas post infeccin hasta varias semanas). Tras esta
fase el virus se localiza en los rganos diana (bazo, ganglios, rin,
pulmn, mdula sea) donde se producen nuevas replicaciones vricas y
las lesiones caractersticas de carcter hemorrgico.

El contacto directo entre animales infectados (en fase aguda
portadores) y animales sanos es la forma ms comn de transmisin del
VPPC.

La eliminacin del virus en animales infectados puede comenzar a partir
del segundo da post infeccin por saliva, secreciones oculares y
nasales, aire. Despus de unos das el virus se puede eliminar tambin
por orina, heces y semen. Es importante, destacar la transmisin de
madres portadoras inaparentes a sus lechones u a otros animales
adultos susceptibles.

El VPPC se mantiene infeccioso en la carne porcina cruda por largos
periodos de tiempo que van desde los 27 das en el tocino a los 1.500
das en la carne congelada. En los productos curados, el tiempo de
inactivacin del VPPC, va de los 250 das para el jamn ibrico a los 140
y 126 para el jamn serrano y el lomo ibrico respectivamente.

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Adems del contacto de animales enfermos o portadores con animales
sanos o de la ingestin de productos contaminados existen otras
importantes vas de contagio de esta enfermedad, entre ellas destacar:

o El transporte contaminado

o La ropa y calzado

o Los prines

o Equipo quirurgico y/o de exploraciones mdicas

o Insectos y roedores

Los recientes brotes de PPC en Europa han puesto de nuevo de manifiesto que
el transporte juega un papel muy importante en la transmisin de la PPC, as se
ha podido comprobar que del 25 al 50% de los brotes estaban originados por el
transporte contaminado (Snchez-Vizcano, 1999).



3. CUADRO CLNICO Y ANATOMOPATOLGICO

La PPC puede cursar con una enorme variedad de manifestaciones
clnicas y anatomopatolgicas dependiendo de la virulencia de la cepa,
del estado inmunitario y edad del animal. Las lesiones caractersticas
descritas para esta enfermedad, en general, se presentan solamente con
cepas de alta virulencia, en animales no inmunizados y con ms facilidad
en lechones que en adultos. Pueden existir animales portadores
asintomticos de gran importancia en la eliminacin de virus.


En general se han descrito en cerdos adultos las formas: aguda,
subaguda y crnica de la enfermedad. Adems, existe una
forma trasplacentaria de la PPC que puede dar lugar a diversas
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afecciones fetales y neonatales e infecciones persistentes
asintomticas.


4. DIAGNSTICO

Dada la gran variedad de sntomas y lesiones con las que puede cursar
la PPC as como la gran cantidad de lesiones comunes que puede
presentar con otras enfermedades hemorrgicas del cerdo (Peste
porcina africana, Pasterelosis aguda, Salmonelosis, Mal rojo, etc) el
diagnstico laboratorial es esencial en esta enfermedad.

Como en otras enfermedades infecciosas, el diagnstico laboratorial se
puede establecer por la deteccin de:

o Virus o antgenos vrales
o cido nucledo viral.
o Anticuerpos Especficos


4.1. VIRUS O ANTGENOS VRALES

Son varias las tcnicas disponibles para la deteccin de virus o
antgenos vrales en la PPC. La eleccin de una u otra se determina
segn los siguientes criterios:

- Infeccin primaria: Es la primera vez que se sospecha de la
enfermedad en un rea determinada.

- Rapidez: Necesidad de tener los datos urgentemente.

Segn estos criterios los mtodos ms utilizados sera:


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4.1.1. AISLAMIENTO VIRAL

El aislamiento del VPPC en cultivos celulares est considerada en la
actualidad como la tcnica de referencia obligada en zonas exentas
de la enfermedad o como tcnica confirmatoria en caso de dudas.
Este mtodo est basado en la capacidad de multiplicarse el VPPC
en la lnea celular de rin de cerdo conocida como lnea PK 15.
Sobre esta lnea, se coloca un macerado extrado de los rganos
sospechosos. Cada 24 72 horas se realizar una tincin
(fluorescencia directa) con un anticuerpo monoclonal (diferencial de
pestivirus) para observar la presencia o no del VPPC. En caso
negativo se recultivara hasta un mnimo de tres veces. Esta es una
tcnica muy sensible (ya que por poco virus que tenga la muestra se
multiplicara en la lnea) y muy especfica gracias a los anticuerpos
monoclonales. Presenta como nico problema que es muy laboriosa
y lenta, pudiendo llevar de entre 3 a 5 das.


4.1.2. INMUNOFLUORECSCENCIA DIRECTA EN TEJIDOS

Consiste esta tcnica en la puesta en evidencia de antgenos virales
en corte histolgico de los rganos sospechosos mediante la tinccin
con un conjugado policlonal (contra todas las protenas del virus, no
permite la diferenciacin entre los pestivirus) o monoclonal (frente a
la protena gp 55, permite la diferenciacin entre los diferentes
pestivirus) marcado con fluorescena o peroxidasa.

Las ventajas de esta tcnica es su gran rapidez (dos a tres horas) el
inconveniente es que no se pueden realizar un gran nmero de
muestras. Su utilizacin est recomendada para diagnstico rpido
en zonas ya infectadas o con altas sospechas de estar infectadas o
cuando el nmero de muestras no sea muy elevado.


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4.1.3. ELISA DE CAPTURA

Recientemente, se ha utilizado con xito, dado el aceptable nivel de
correlacin con el aislamiento viral, sobre todo a partir de los 7 a 10
das post infeccin, la deteccin de un sistema ELISA de
captura para la deteccin de los antgenos virales a partir de rganos
o de leucocitos sanguneos de animales sospechosos. La tcnica
est basada en un sistema ELISA sandwich en el que se utilizan
anticuerpos monoclonales (diferenciales de pestivirus) para capturar
y revelar la captacin de los antgenos virales. Esta tcnica presenta,
frente a la anterior, la capacidad de ser utilizada para gran nmero de
muestras, pues las diferentes etapas de la tcnica ELISA, incluyendo
la lectura, estn automatizadas. El tiempo total de realizacin de este
mtodo es de 36 horas, mucho ms largo que la inmunofluorescencia
directa, pero mucho menos que el aislamiento vrico.

Esta tcnica est recomendada en zonas ya afectadas o con alta
probabilidad de ser infectada as como cuando el nmero de
muestras sea muy elevado.


4.2. DETECCIN DEL CIDO NUCLEICO VIRAL

La tcnica PCR para la deteccin de cidos nucleicos virales est
resultando tremendamente practica, rpida y eficaz en el
diagnstico de gran nmero de enfermedades infecciosas.
Consiste esta tcnica en la deteccin de un pequeo fragmento
especfico del RNA del VPPC mediante la amplificacin de la
reaccin en cadena de la polimerasa. Se ha seleccionado un
fragmento de RNA comn a todos los pestivirus y otro fragmento
especfico de cada uno de los componentes de este grupo viral,
de manera que se puede hacer un diagnstico diferencial de gran
sensibilidad y especificidad. Adems, es una tcnica
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relativamente rpida y econmica. Sin duda, una tcnica de
eleccin para cualquier situacin.


4.3. DETECCIN DE ANTICUERPOS

La deteccin de anticuerpos es de gran utilidad para comprobar la
presencia o no de zonas libres y no vacunadas, pero no cuando
se sospeche de una infeccin reciente. En ese ltimo caso se
debera realizar deteccin de antgeno y/o anticuerpos.
Varios mtodos han sido descritos para la deteccin de
anticuerpos de PPC, de entre ellos destacaremos los siguientes:


4.3.1. SERONEUTRALIZACIN

El mtodo de seroneutralizacin (SN) consiste en determinar la
capacidad que tiene el suero objeto de estudio de neutralizar el
efecto de un virus sobre la lnea celular PK 15. Se utilizan diferentes
diluciones del suero problema y se comparan sus resultados frente a
un suero control. Dado que el VPPC no produce efecto citoptico, la
posible accin del virus sobre la clula, se visualiza mediante
fluorescencia directa o inmunoperoxidasa. La SN es una tcnica muy
especfica y sensible pero, tiene el inconveniente de su gran
laboriosidad, por lo que no est indicada para un gran nmero de
muestras aunque si como tcnica de referencia.


4.3.2. ELISA DIFERENCIAL

Este mtodo est basado en un ELISA COMPETICIN en el que se
utiliza un anticuerpo monoclonal frente a la gp 55 lo que permite
adems diferenciar los anticuerpos de PPC de los de BVD. El suero
problema se pone en contacto con la gp 55 y tras un periodo de
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incubacin se pone la mezcla a competir con un monoclonal contra la
gp 55. Este mtodo permite la realizacin de un gran nmero de
muestras gracias al sistema ELISA(todas las fases se pueden
automatizar) en un relativo corto perido de tiempo


El gran inconveniente de los dos mtodos descritos es que no
permiten diferenciar los anticuerpos de enfermedad de los
anticuerpos vacunales, de las vacunas actualmente comercializadas
en la actualidad.




4.4. MUESTRAS A REMITIR AL LABORATORIO

Con el fin de poder realizar un adecuado diagnstico es muy importante
que la eleccin de la muestra sea la adecuada as como que llegue en buen
estado al laboratorio. NO PUEDE HABER UN BUEN DIAGNSTICO SIN UNA
BUENA MUESTRA.

En el caso de la PPC las muestras a enviar seran:

o SANGRE CON ANTICOAGULANTE
o SANGRE SIN ANTICOAGULANTE
o TONSILAS
o GANGLIO MESENTRICO
o BAZO
o LEON DISTAL
o RIN

Las muestras deben llegar a su destino de la forma ms rpida y segura
posible y en ningn caso deben mantenerse POR LARGO TIEMPO a
temperatura ambiente.
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Una vez recogidas del animal objeto de estudio, deben ser identificadas de
forma inequvoca y estable (etiquetas adhesivas o rotulando los botes) y
mantenidas a 4 C. Se debe utilizar un frasco para cada animal y siempre
deben quedar cerrados hermticamente.

Si el anlisis laboratorial se va a efectuar en menos de 72 horas no es
necesario congelar las muestras y siempre es mejor mantenerlas a 4 C.

Si el anlisis se fuera a realizar despus de las 72 horas, es mejor
congelarlas a - 40 C y transportarlas en congelacin.



5. MATERIAL NECESARIO PARA LA RECOGIDA DE MUESTRAS

Una ficha de historia clnica. Debe colocarse en el exterior de la caja en
sobre cerrado. Se deben incluir los siguientes datos:

Nombre y direccin del propietario
Enfermedad sospechosa
Pruebas solicitadas
Especies animales en la explotacin y tiempo que llevan en la misma. Es
muy importante sealar si ha habido alguna nueva incorporacin.
Fecha de los primeros sntomas
Distribucin de la enfermedad por la explotacin
Nmero de bajas y de animales con sintomatologa
Tipo de alojamiento y sistema productivo
Medicacin y vacunaciones administrada
Lista de muestras remitidas

Una nevera de transporte de muestras con abundantes bolsas de
refrigerante.
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Botes de cierre hermtico para la recogida de las muestras de rganos y
tubos de vaco para la sangre.

Otro bote, tambin de cierre hermtico, para guardar los botes de las
muestras.

Etiquetas y rotulador.

Si no se usaran tubos al vaco, se llevaran jeringas de 20 ml desechables
con agujas apropiadas a la edad del cerdo.

En caso de que el envo no se realice por carretera y tuvieran las muestras
que ir como equipaje, se traspasaran de la nevera de transporte a cajas
con aislante trmico y refrigeracin suficiente para el tiempo de viaje. La
caja ser cerrada hermticamente, se colocar el cartel de Material
Biolgico y se aadir la direccin del destinatario y del remitente. Siempre
se debe informar de la llegada del material al destinatario con antelacin
mediante llamada o fax indicando el medio de envo y la llegada prevista.


5.1. INMUNIZACIN FRENTE AL VPPC

Muchos son los mtodos que se han utilizado para inmunizar frente al
VPPC desde primeros de siglo, desde la serovacunacin a diferentes tipos
de vacunas vivas e inactivadas han sido utilizados para combatir esta
enfermedad en varios pases durante las ltimas dcadas, la utilizacin de
las vacunas vivas atenuadas permitieron la eliminacin de la enfermedad
de los pases de la actual unin europea entre los aos 1970 y 1980.

En la actualidad, las vacunas ms utilizadas en diferentes programas de
erradicacin de la enfermedad son las vacunas vivas atenuadas,
provenientes de las conocidas como CEPA CHINA y/o CEPA
THINVERVAL.

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CEPA CHINA

La conocida como cepa China es una cepa lapinizada
denominada tambin como Cepa Suvac, C y K. Su origen es
desconocido y segn varios autores podra tener cerca de 480
pases en conejo. La cepa, que se utiliza en la actualidad, no
presenta virulencia residual siendo totalmente a patgena incluso
en madres gestantes y lechones. Esta cepa fue muy utilizada en la
pasada dcada en varios pases europeos con xito. Tiene una
actuacin rpida por lo que adems de inducir inmunidad presenta
interferencia viral con el virus patgeno.



CEPA THIVERVAL

Es una cepa de origen francs proveniente de una clonacin viral
sobre la lnea celular PK 15. Es decir, est adaptada y producida en
cultivo celular. Se ha probado su inocuidad incluso en animales
inmunosuprimidos, no presentando virulencia residual ni reversin a
virulencia.

Con ambas cepas se confiere inmunidad contra el VPPC de forma
rpida pudiendo los cerdos sobrevivir a una infeccin experimental
incluso a los cinco das post inoculacin.

Para conseguir una buena inmunidad es absolutamente esencial
inmunizar a los animales de forma adecuada, con las dosis
correctas y sin concomitancia de virus patgenos pues, del
contrario, es muy fcil poder inducir animales portadores, sobre todo
en hembras gestantes, que pueden trasmitir el virus virulento de
forma horizontal y vertical. Se ha demostrado en multitud de
ocasiones, que madres gestantes infectadas antes o
inmediatamente posteriores a la vacunacin, pueden parir camadas
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infectadas de forma persistente, que puede excretar virus patgeno
durante meses sin mostrar signos de la enfermedad. Por ello,
cuando se llega a este tipo de situaciones se tiene que mantener los
programas de vacunacin por lo menos durante 3 aos. Adems,
de este grave problema otro importante inconveniente que estas
vacunas presenta, es que los anticuerpos inducidos por ellas no
pueden ser diferenciados de los anticuerpos del virus virulento, no
pudindose por tanto diferenciar los posibles animales enfermos o
portadores de los vacunados sanos.




5.2. VACUNA DE SUBUNIDADES

Recientemente, se ha desarrollado una vacuna de subunidades formada
exclusivamente por la protena gp 55 que induce inmunidad y proteccin
a nivel experimental contra el VPPC. El gen de la gp 55 (E2) ha sido
clonada y expresada mediante un sistema de baculovirus. Este sistema
es muy eficaz para expresar protenas heterlogas en la lnea celular de
insecto. La protena as producida e inoculada en cerdos experimentales
ha producido anticuerpos neutralizantes capaces de proteger la infeccin
con el virus virulento. Los anticuerpos al ser solamente inducidos por la
gp 55 (E2), se pueden diferenciar de la infeccin del virus patgeno, ya
que este ltimo, induce anticuerpos no solamente contra la gp 55 sino
tambin contra la E- rns. En definitiva, la gp 55 (E2) induce inmunidad y
se puede diferenciar de la enfermedad. Se sabe que dicha protena
induce la produccin de anticuerpos neutralizantes que desempean un
papel fundamental en la proteccin de los cerdos frente a la PPC. En
condiciones normales los animales infectados no slo producen
anticuerpos frente a la protena E2, sino tambin frente a otras protenas
del virus como la E-rns. La presencia de anticuerpos frente a esta
protena permitira distinguir a los animales vacunados con la vacuna
marcada de aquellos infectados.
22



La informacin suministrada por las compaas productoras de las
vacunas indicaba que estos productos inducan un aceptable nivel de
inmunidad (proteccin frente a los signos clnicos de la enfermedad,
reduccin de la diseminacin de virus de un animal a otro) despus de
20 das post-vacunacin. Sin embargo, existen dos situaciones de
emergencia en las cuales el uso de las vacunas marcadas podra ser
discutible:

La introduccin del virus de la PPC en una poblacin poco tiempo
despus de haber sido vacunada (cuando la inmunidad podra
an no ser completa).

La introduccin del virus de la PPC en una poblacin poco tiempo
antes de la vacunacin (cuando los animales se encuentran an
durante el periodo de incubacin de la enfermedad).

Ambas situaciones podran originar la persistencia del virus en estas
poblaciones mediante formas crnicas o inaparentes de la enfermedad,
de difcil deteccin. El riesgo es mayor an cuando se trata de lechones
y en cerdas a los 60-80 das de gestacin. Para aclarar estos datos, la
Comisin Europea decidi obtener informacin adicional para el
potencial uso de las vacunas marcadas antes de conceder la
autorizacin comercial para la UE. Para ello, durante el primer semestre
de 1999 se han llevado a cabo diferentes experiencias en los
laboratorios nacionales de referencia de PPC de la UE con dos vacunas
marcadas de PPC de los Laboratorios BAYER (BAYOVAC-CSF Marker)
e INTERVET.

En forma de resumen, el uso de la vacuna marcada en casos de
emergencia reducira la transmisin del virus dentro de una granja, y
consecuentemente reducira el riesgo de transmisin de la enfermedad a
otras granjas, especialmente en reas de alta densidad porcina. Sin
embargo, debido a la aparicin de formas subclnicas de la enfermedad,
23


la deteccin de focos secundarios dependera slo de los test
discriminatorios. La sensibilidad y especificidad de estas tcnicas por lo
tanto es crucial. La transmisin transplacental en condiciones de una
vacunacin de emergencia no se pudo evitar en la mayora de las cerdas
vacunadas. Debido a la aparicin de lechones positivos al virus de PPC,
cada cerda debera ser analizada individualmente mediante los ELISAs
discriminatorios despus de la vacunacin de emergencia, por lo que
estos test deberan ser de gran sensibilidad. Sin embargo, los resultados
obtenidos con el ELISA no han sido muy satisfactorias con ndices de
sensibilidad y especificidad bajos

Sensibilidad Especificidad
CEDITEST 73,5% 91,8%
CHEKIT 94,1% 70,6%


Estos resultados se resumen en los siguientes comentarios:
Ceditest Marker: Si se emplea en una granja, se podra detectar una
infeccin de PPC, aunque existe cierto riesgo de no detectar la
infeccin en animales individuales. No se detectaran apenas falsos
positivos.
Chekit Marker: Aquellos animales positivos a BVD/BD resultaran
como falsos positivos, siendo considerado por lo tanto como posible
foco de PPC al no existir ningn test que permitiera diferenciar entre
anticuerpos frente a PPC de aquellos especficos de BVD/BD una
vez que los animales han sido vacunados con la vacuna marcada.
En la actualidad la deteccin de una infeccin de PPC despus de la
vacunacin depende completamente de los ELISAs discriminatorios,
pero ambos tests no se pueden emplear para animales individuales,
teniendo una sensibilidad y especificidad inferior a los ELISAs
convencionales. Es necesaria la ecistencia de un test de
confirmacin.
24


Las limitaciones de los test discriminatorios representan la principal
limitacin en el empleo de las vacunas marcadas.

Estas vacunas, una vez resuelto la falta de sensibilidad y especificidad de sus
mtodos de diagnstico podran ser una importante alternativa en un futuro muy
prximo para luchar contra esta enfermedad ya que resuelven el gran problema
de poder diferenciar el animal vacunado del enfermo son especificas y seguras.
6. SNTOMAS

6.1. AGUDA:

Fiebre.
Letargo.
Anorexia.
Hiperemia cutnea multifocal.
Conjuntivitis.
Estreimiento seguido de diarrea.
Vmitos.
Disnea.
Ataxia, paresis y convulsiones.
Amontonamiento.


6.2. CRNICA

Apata.
Apetito caprichoso.
Pirexia.
Diarrea.
Recuperacin aparente.
Muerte.

6.3. LEVE:

Pirexia pasajera e inapetencia.
Abortos.
Mortinatos.
Lechones dbiles al nacer.

7. DIAGNOSTICO
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La presencia de signos y sntomas.
Examen directo por inmunofluorescencia en tejidos frescos y
cultivos celulares.
Pruebas serolgicas.
ELISA.

8. TRANSMISIN

En el cerdo el virus suele entrar principalmente por ingestin seguido de
la piel, por semen o por inhalacin, es decir todas las vas son posibles
en la infeccin del VPPC.

Adems del contacto de animales enfermos o portadores con animales
sanos o de la ingestin de productos contaminados existen otras
importantes vas de contagio de esta enfermedad, entre ellas destacar :

o El transporte contaminado
o La ropa y calzado
o Los purines
o Equipo quirrgico y/o de exploraciones mdicas
o insectos y roedores


9. PREVENCIN

Aumentar las medidas de bioseguridad para no ser infectadas, esto
implica controlar de forma exhaustiva el movimiento de animales y los
medios de transporte utilizados, para evitar que puedan venir de las
zonas afectadas, as como informar bien a trabajadores para que tomen
las medidas de sanidad necesarias.
Sospechar rpidamente de cualquier animal que no coma para poder
descartar que se trate de PPC.

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9.1. CONTROL Y VACUNACION

Rifle Sanitario: (Sacrificio, enterrados o incineracin. En la misma
granja)




9.2. VACUNACIN:
Vacunas a virus vivo atenuado (Lapinizada-LPC-virus china), en
lechones entre los30 y 60 das de edad.




10. TRATAMIENTO

Aplicacin de suero hiperinmune en las etapas inciales de la
enfermedad.
Vacunacin.
Eliminacin de positivos










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CONCLUSIONES

Actualmente la regin con mayor nmero de pases afectados es
Amrica del Sur, destacndose pases como Colombia, Per, Ecuador,
Bolivia, Brasil (algunas regiones) y Venezuela, mientras que en la
regin de Amrica Central y el Caribe se mantienen Nicaragua,
Honduras, Cuba, Hait y Repblica Dominicana.
Aunque desde el ao 2000 hasta la actualidad se han observado
notables progresos en el control y erradicacin de la enfermedad, dado
el carcter transfronterizo de la misma.
Es necesario un estricto control a nivel de fronteras en los pases libres,
con el objetivo de mantener su estatus debido a beneficios que esto
implica para la produccin y el comercio.
Las indisciplinas como el movimiento ilegal de cerdos, la incorporacin
de nuevos animales sin control a otros rebaos, el mal manejo de
vacunas y su aplicacin deficiente, las violaciones de la bioseguridad,
etc. constituyen formas fundamentales de desencadenamiento y
propagacin de la enfermedad.










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