Atividade antifungica de tricotecenos Fusarium sp.

contra isolados clnicos de

Paracoccidider brasiliensis

INTRODUO
o Parte da Juhhh
o Problema de sade pblica na America Latina (acho interessante fazer uma
pesquisa epidemiologica no Brasil).
o Colocar fotinhas dos medicamentos!

OBJETIVOS
o Descobrir novos compostos ativos contra p.brasiliensis a partir de extrato bruto
isolado UFMGCB 551 isolado das folhas de Piptadenia adiantides.
o Identificao taxonomica do UFMGCB 551 e a identificao de trs compostos
com potente atividade fungica.

MATERIAS E METODOS
o Fungo cultivado em 5 meio de cultura diferentes para 7 e 14 dias -> Micelo
esporativo visualizado -> DNA extraido -> Gene de RNA amplificado ->
sequencias foram para um software para encontrar a sequencia de consenso ->
Comparao com o GENBANK -> identificao do isolado at o nvel de
genero
o Fracionamento cromotogrfico: Cromotografia contracorrente de alta
velocidade -> 134 fraes agrupadas em 25 grupos com base na sua
similariedade conforme analisado no cromatografia de camada liquida.
fig. S1
o Elucidao da estrutura de compostos: Ressonancia magnetica nuclear
o Ensaio com o fungo Cladosporium sphaerospermum
tabela 1
o Determinao das concentraes inibitrias mnimas

RESULTADOS
o Identificao taxonmica
aspectos morfologicos das colonias
dados de sequencia foram usados para investigar a fitogenetica
especie correspondente mais proxima o Fusarium sp. (falar sobre ele
nem que seja uma fotinha)
95% de identidade
2,1% de direfena de nnucleotideos
o Intervalo de 2,7-4% com vrias espcies de Fusarium
(F. tumidum e F. sambucinum) FIG 2
2,9% de lacunas (que que LACUNA, GEZZ!!)
Extrato fungico
Ativo contra o fungo filamentoso C. sphaerosperum -> valores
de IMC 0,39-1,1 lg/ml.
Aliquota fracionada -> 25 grupos de fraes FIG 3
o 13, 17 e 18 eram ativos: marcar na figura
o grupo 18: MIC -> foi fracionada em HPLC -> 1
composto e mistura de 2 e 3. -> atividades atinfungicas
na TAB 1;
COMPOSTOS PERTENCENTES A SERIE
DE TRICOTECENOS (TAB S1 S2 E S3);
COLOCAR PESOS MOLECULARES!!!! ->
compostos relacionados com a Toxina T2

DISCUSSO
o UFMGCB 551 distinta macro e micro carascteristiccas morfologicas, incluindo
estruturas assexuadas que so exclusivas do genero Fusarium,
o No permitiu a identificao do fungo a nvel de especie - > comum porque o
Fusarium tem variavel registro taxonomico.
o Analise fitogenica molecular desta a importancia de investigar as especies de
Fusarium toxigenicas vivendo no ecossistema
o Algumas especies so descritas como fitopatogenicos e outros conseguem viver
em plantas e crescer em restos de plantas
o Isolamento e identificao dos compostos ativos presentes no extrato de sua
cultura.
So conhecidas fontes de biotivas e o extarto foi ativo contro o fungo
filamentoso C. sphaerosperium e p.brasiliensis.
Ensaio com c. sphaerosperium (mais simples, mais seguro e de rotina)
x ensaios com p.brasiliensis (usado em pontos chaves durante o
fracionamento para ver os compostos toxicos)
Duas fraes com alta atividade no ensaio de p.brasilienses ->
potencia antifungica (anfotericina B) ao menos contra dois
isolados
Grupo 18 mostrou MIC e MFC 100 vezes maiores para c.
albicans, sugerindo seletivaddade
Fraes com T2 toxinas e outros compostos (FIG 4) de acordo
que esse genero produz tricotecenos
o Efeitos citotoxicos em celulas de rim de hamster e
valor de LC100 14ng/ml
o Mistura dos demais compostos inibiu 11 cepas de
p.brasilienses (tab 1) com valores de MIC 75 nmol
Toxina T2 isolada pela primeira vez nesse fungo
Fusarium exibe atividades nefrotoxicas, imunosupressoras,
teratrogenicos e cancerigenas; ativo contra Penicilium
digitatum e outros.
Mecanismo de ao dos tricotecenos: inibio da sintese de
proteinas, inibio da sintese do DNA ou inibio do sistema
de transporte de eletrons mitocondrial.
o Estruturas com compostos de chumbo reduz a sua
toxicidade por abrir seu anel epoxido ou mudana do
grupo hidroxila no nucleo tricotecenos -> testar essas
modificaes para ver se ainda tem efeito sobre o
p.brasilienses
Micotoxinas tricotecenos tem atividade como antiviral (Herpes
Simplex tipo 1 e 2), antibiotico, antimalarico e antileucemico e
contra o p.brasilienses;

CONCLUSO
o Produtos naturais so uteies como pistas de droga ou como ferramenta
bioquimica para investigzr os processos da doensa
o Os compostos isolados nesse trabalho foram testados pela primeira vez contra o
fungo p.brasilienses mostrando que esses compostos so altamente ativos contra
varias cepas clinicas desse fungo e podem servir como um ponto de partida de
desenvolvimento de novas drogas.