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A INFLUNCIA DO CONSUMO DE LCOOL DURANTE A GESTAO E

LACTAO NA APRENDIZAGEM DE FILHOTES



A INFLUNCIA DO CONSUMO DE LCOOL DURANTE A GESTAO E
LACTAO NA APRENDIZAGEM DE FILHOTES.

Liliane Maria da Silva
Graduanda em Psicologia, FAI Adamantina- SP.
*Bolsista FAI/CNPq
Agostinha Mariana Costa de Almeida
Professora Doutora Faculdades Adamantinenses Integradas - FAI
RESUMO
O presente trabalho tem como objetivo comparar o desempenho de filhotes de gestantes
submetidas ao uso de lcool com o de filhotes de mes sem uso de lcool, em tarefas de
aprendizagem em discriminao complexa utilizando estmulos luz e som. O mtodo
utilizado o experimental, sendo que na 1 fase do experimento foram utilizados 8 ratos
Wistar fmeas, primparas e adultas pesando em mdia 250 gramas. Os grupos foram
divididos em experimental que recebeu soluo com lcool e o controle que recebeu
gua, nesta fase h a dependncia do lcool, ocorrendo a ingesto da soluo alcolica
at a fase de lactao dos filhotes. Na segunda fase do experimento faremos os testes de
aprendizagem onde comparamos os desempenhos dos grupos controle e experimental
sendo retirados oito filhotes de cada grupo para tarefa de aprendizagem de
discriminao complexa que ser realizada nas Caixas de Skinner, quando os filhotes
estiverem com 90 dias de nascidos. Consistindo na tarefa de discriminar estmulos,
sendo o estmulo x (luz) e o Y (som) quando apresentados juntos sero seguidos de
reforo, quando um nico estmulo for apresentado, o animal no ser reforado. A
influncia que o lcool sobre filhotes de ratas Wistar submetidas ao uso de lcool
durante o processo de gestao e amamentao pode se refletir na diferena de
desempenho, na maior ou menor habilidade em discriminar estmulos em
procedimentos que envolvam aprendizagem em discriminao complexa. O presente
estudo faz-se necessrio em modelos animais para obter dados que possam ser
aprofundados sobre os malefcios causados pelo lcool em gestantes, na aprendizagem
em discriminao mais complexa que envolva memria retrospectiva para executar
tarefas.
Palavras-chave: aprendizagem; discriminao, ratas Wistar, filhotes e lcool.

ABSTRACT

This paper aims to compare the performance of pups of pregnant women who use
alcohol with the offspring of mothers without alcohol, in discrimination learning tasks
in complex stimuli using light and sound. The method is experimental, and the 1st phase
of the experiment was used 8 female Wistar rats were primiparous and adult weighing
on average 250 grams. The groups were divided into experimental receiving solution
with alcohol and control that received water at this stage there is alcohol dependence,
occurring intake of alcoholic solution to the lactation of the pups. In the second phase of
the experiment will make the learning tests where we compared the performances of the
control and experimental groups being removed eight pups from each group to
discrimination learning task complex which will be held in Skinner boxes, when the
puppies are born with 90 days of. Consisting in the task of discriminating stimuli, and
the stimulus x (light) and Y (sound) when presented together will be followed by
reinforcement, when a single stimulus is presented, the animal will not be enhanced.
The influence of alcohol on the offspring of female rats subjected to alcohol use during
pregnancy and breastfeeding may be reflected in the difference in performance, in
greater or lesser ability to discriminate stimuli in procedures involving complex
discrimination learning. This study is necessary in animal models to obtain data that can
be deepened about the harm caused by alcohol in pregnancy, in discrimination learning
involving more complex to perform retrospective memory tasks.
Key-words: learning, discrimination, female Wistar rats, chicks and alcohol.

INTRODUO

O consumo abusivo de bebidas alcolicas - um problema de sade pblica, uma
vez que, de acordo com estimativas, cerca de 14% da populao preenchem os critrios
para dependncia ou abuso de lcool. O hbito de beber um dos costumes mais
antigos da humanidade, datando desde 6.000 A.C. e que continua atual no mbito
social.
Segundo Surkan et al. (2012) o consumo de lcool um importante fator de
risco para a doena nos pases desenvolvidos. Alm de suscetibilidade gentica, o
consumo de lcool moldado pelo ambiente social e familiar. A qualidade das relaes
parentais pode ser um dado importante para o abuso de lcool.
De acordo com Santos et al. (2010), o alcoolismo definido como uma sndrome
multifatorial com comprometimento fsico, mental e social. Estima-se que mais de dois
teros das pessoas em pases ocidentais bebem alm do que apenas ocasionalmente.
Estudos apontam que nos Estados Unidos aproximadamente 10% das mulheres e 20%
dos homens preenchem critrios diagnsticos para abuso do lcool, e 3% a 5% das
mulheres e 10% dos homens preenchem critrios para dependncia ao longo da vida.
Segundo Santos et al. (2010), o alcoolismo um problema que afeta de 1 a 2%
das mulheres em idade frtil. O consumo de lcool, tanto moderado como alto, durante
o incio da gravidez, pode ocasionar alteraes do crescimento e do desenvolvimento
morfolgico do feto, sendo considerado, atualmente, como um problema de sade
pblica. Apesar de gerar um grande custo social, ainda h carncia de estudos
epidemiolgicos sobre efeitos do lcool sobre o feto no Brasil. A metabolizao do
etanol feita principalmente no fgado e se inicia imediatamente aps a ingesto.
O consumo de lcool por mulheres no perodo de gestao e lactao pode afetar de
modo varivel de gravidade, o desenvolvimento embrionrio e fetal, como por exemplo,
a prematuridade e natimortalidade. Sabe-se que o etanol causa danos nos rgos em
geral e nos neurnios adultos ou em desenvolvimento e induz importantes efeitos
neurotxicos no desenvolvimento do crebro (Ferreira & Silva, 2005).
Gestao com lcool
Santos et al. (2010) afirmam que devido a seu pequeno tamanho e suas
propriedades de dissociao e polarizao, o lcool solvel em gua e relativamente
solvel em solventes no polares. Por esta razo, pode atravessar as membranas
celulares e se difundir por todos os lquidos e tecidos do organismo. Dessa forma,
atravessa livremente a barreira placentria e se distribui pelo lquido amnitico,
atingindo os tecidos do feto. Os nveis sanguneos materno e fetal so aproximadamente
iguais aps a ingesto materna de lcool. A difuso passiva do lcool ocorre por
gradiente de concentrao de tal maneira que os nveis materno e fetal so similares at
que todo o etanol seja metabolizado.
De acordo com o autor, h possveis efeitos teratognicos do lcool que se
expressam em aumento da incidncia de abortos, natimortos e malformaes congnitas
em recm-nascidos de mes alcoolistas. H uma associao bem documentada entre a
ingesto materna de lcool e o desenvolvimento da Sndrome Alcolica Fetal (SAF),
que caracterizada por dficit de crescimento, dismorfismo facial e evidncia de
anormalidades do sistema nervoso central. H poucos dados sobre efeitos teratognicos
do lcool. Estima-se a incidncia de alcoolismo materno em 6/1.000 gestantes e a
incidncia de SAF em 1/1.000 recm-nascidos (RNs). No entanto, calcula-se que um
quarto das grvidas deste pas faa uso espordico de bebida alcolica. H diversos
estudos mostrando os efeitos do etanol em descendentes de ratas nas quais foi
administrado lcool durante a gestao, claramente demonstrando a associao entre
alcoolismo na gravidez e defeitos teratognicos encontrados nos fetos. A comparao
entre os achados em descendentes humanos expostos ao etanol durante a vida uterina
bastante consistente e justifica a escolha de roedores para os estudos animais.
Ainda de acordo com o autor o estudo dos efeitos do lcool em condies
controladas torna-se importante para se reconhecer os diferentes efeitos dessa substncia
sobre o organismo. No entanto, sabe-se que a suscetibilidade fetal ao lcool modulada
por quantidade ingerida, poca da exposio, estado nutricional e capacidade de
metabolizao materna e fetal.
Segundo Guerri e Sanchis (1985) o etanol atravessa livremente a barreira da
placenta, mas existe um gradiente de concentrao de acetaldedo entre me e feto que
varia com a idade de gestao.
De acordo com Travis et al. (1995) o consumo crnico de lcool em ratas
grvidas produziu um acmulo de etanol elevado em fluidos fetais e alteraes na
atividade do fgado, (ADH, enzima lcool-desidrogenase), dependendo da situao
fisiolgica (gravidez, desenvolvimento, estado virgem).
Discriminao Complexa
Segundo Bueno et al. (2007), vrios estudos envolvendo condicionamento
Pavloviano e operante, em procedimentos de discriminao condicional, tm sido
utilizados com o objetivo de melhor entender os processos envolvidos no
estabelecimento das associaes entre seus elementos primrios: estmulo, resposta e
reforo. Em outras palavras, Pavlov descobriu que estmulos podem controlar respostas
reflexas quando h pareamento e associaes entre um estmulo neutro e o estmulo
incondicionado (US), e com isso, o estmulo neutro adquire a propriedade de estmulo
condicionado (CS). O estmulo CS capaz de ativar a representao do US.
Ainda segundo o autor, as respostas dadas durante as prticas, sugerem que o
repertrio comportamental do animal modulado pelo procedimento na distribuio do
tempo pelos estmulos presentes no decorrer da prtica: respostas condicionadas em
prticas de discriminao condicional positiva/negativa. Em outras palavras, a
apresentao de estmulos compostos, nos procedimentos de discriminao condicional,
envolve um arranjo temporal entre os estmulos, cujo arranjo ir interferir na forma
como o animal responde aos estmulos. Este processo considerado de especial
importncia para o estudo da aprendizagem complexa.
Segundo Skinner apud Feliciano (2006) diferentemente de uma situao de
discriminao simples definida como aprendizagens que derivam de processos de
controle de estmulos mais simples, em que se estabelece uma relao constante entre
um estmulo antecedente e uma resposta, nas discriminaes condicionais essa relao
muda de acordo com o contexto, isto , o papel de um estmulo depende de outros que
forneam o contexto para ele (CATANIA, 1999, p. 163). Em uma discriminao
condicional deve-se reforar uma resposta a um determinado estmulo especfico apenas
na presena de outro estmulo.
Ainda segundo o autor, outros autores descrevem esses tipos mais complexos de
discriminao como se um estmulo (o condicional) funcionasse como um seletor de
discriminaes, mais do que seletor de respostas individuais. Respostas a um estmulo
discriminativo especfico (SD1) e no outro (SD2) seria seguido de reforo apenas se
estiver presente um estmulo condicional especfico (SC1). Alm disso, para Cumming
e Berryman (1965), o estmulo condicional teria uma funo seletiva que
momentaneamente fortalece uma discriminao especfica.
Segundo Bueno (1997), o fator temporal pode afetar os processos associativos
subjacentes ao comportamento do animal, dependendo das variaes com que ele
ocorre, ou seja, o animal parece ser capaz de armazenar em sua memria uma
representao temporal dos estmulos, e utiliz-la como estratgia de soluo para os
problemas que seu meio coloca. Esta possibilidade se estende a procedimentos de
aprendizagem complexa, incluindo a representao da durao do tempo no imaginrio
animal.
O presente trabalho foi delineado a partir de um piloto para dar direo para a
futura pesquisa a ser desenvolvida.
Objetivo:
Comparar o desempenho de filhotes de mes submetidas ao uso de lcool, durante
o perodo de gestao e lactao com o de filhotes de mes sem uso de lcool, em
tarefas de aprendizagem em discriminao complexa utilizando estmulos compostos,
luz e som.
MATERIAIS E MTODOS
1 fase
Materiais e mtodos
Sujeitos:
Os sujeitos utilizados nesta fase do experimento foram 8 ratos Wistar fmeas,
mantidos no Biotrio Central, das Faculdades Adamantinenses Integradas, em uma
temperatura ambiente de 21 C, com idade de 90 dias e peso aproximado de 250 Kg.
Mtodo
O mtodo utilizado o experimental, com diviso dos sujeitos em grupo
experimental, com ingesto de soluo alcolica e o grupo controle, com ingesto de
gua.
Materiais necessrios:
lcool (etanol) - A soluo alcolica composta inicialmente de 10 ml de lcool e 490
ml de gua por 2 dias, aumentando para 20 ml de lcool e 480 ml de gua por 6 dias,
depois para 40 ml de lcool e 420 ml de gua por 7 dias e estabilizando em 50 ml de
lcool e 450 ml de gua no restante da pesquisa.
gua
Procedimento
Os sujeitos foram divididos em dois grupos, controle e experimental, ambos com
quatro fmeas cada, mantidas em dupla por caixa, a troca da maravalha foi feita trs
vezes por semana, e em cada troca foi feito a pesagem dos sujeitos (sendo que a
manipulao dos sujeitos teve durao de 10 minutos). Os sujeitos foram identificados
por C1 e C2 do grupo controle e E1 e E2 do grupo experimental. Esses sujeitos foram
submetidos a uma dieta diferenciada, onde o grupo controle recebeu gua e rao,
disponibilizando 500 ml de gua todos os dias para cada dupla de ratas durante todo o
experimento e o grupo experimental recebeu rao e soluo de gua e lcool 70%,
disponibilizando 500 ml de soluo para cada caixa, sendo que a proporo de lcool
em soluo com gua foi aumentada gradativamente de 2% a 10% nos 15 primeiros
dias, onde foi estabilizada a proporo de lcool em 10% at o fim do experimento. De
acordo com tabela abaixo:
Protocolo de Pesquisa lcool 2012
Qtde de dias Protocolo Dia
2 dias Experimental = incio etanol 2% (v/v)
Controle = gua
1 ao 2
6 dias Experimental = incio etanol 4% (v/v)
Controle = gua
3 ao 8
7 dias Experimental = incio etanol 8% (v/v)
Controle = gua
9 ao 15
At o final da 1 fase Experimental = incio etanol 10% (v/v)
Controle = gua
16 at o final

A soluo com lcool foi preparada diariamente e oferecida aos animais no
mesmo horrio. Sendo anotada a quantidade ingerida e calculado a ingesto mdia
diria.
Aps 30 dias do incio do experimento, onde as fmeas do grupo experimental j
se encontram alcoolistas, foram postas pra cruzar, com um macho para cada duas
fmeas. Uma semana aps o incio do cruzamento as fmeas foram separadas, sendo
colocada uma em cada caixa. Lembrando que durante o cruzamento, a gestao e a
amamentao, as fmeas continuaram recebendo a soluo com lcool.
O desmame foi feito 21 dias aps o nascimento, onde as fmeas mes e as fmeas
que nasceram foram sacrificadas com dixido de carbono. Assim restando 8 ratos
Wistar machos.
2 fase
Materiais e Mtodos
Sujeitos
Os sujeitos utilizados nesta fase foram 8 ratos Wistar machos remanescentes da
prole das fmeas da primeira fase, com idade de 90 dias e uma mdia de peso de 250
gramas.
Materiais
O material utilizado foi uma Caixa de Skinner, contendo uma barra e um
bebedouro, sendo esta uma caixa de madeira com sistema de ventilao contendo uma
cmara de acrlico internamente onde se encontram a barra e o bebedouro: gua como
estmulo reforador e luz 25% e som como estmulos condicionados.
Procedimentos
Os sujeitos foram divididos em grupos experimentais e controle e mantidos em
duplas por caixa, no Biotrio Central, das Faculdades Adamantinenses Integradas, em
uma temperatura ambiente de 21 C com uma dieta padro de gua e rao.
Inicialmente, os sujeitos foram submetidos s sees de manipulao at que
chegassem idade de 90 dias e ao peso ideal.
Com a idade de 90 dias, os sujeitos foram levados para o biotrio do Laboratrio
de Psicologia Experimental, onde se iniciou o processo de modelagem, treino ao
bebedouro, onde o sujeito foi retirado do biotrio com privao de 48 horas, que foi
realizado em 7 sesses de 40 minutos, com todos os sujeitos, depois de modelados os
sujeitos foram submetidos a uma tarefa de discriminao condicional complexa, com
dois estmulos discriminativos, luz sendo x e som sendo y, esta tarefa foi realizada em
16 sesses. Antes de iniciar o procedimento de discriminao com o animal, o mesmo
foi retirado do biotrio do Laboratrio de Psicologia Experimental, das Faculdades
Adamantinenses Integradas com privao de 48 horas. Verificado o funcionamento da
caixa de Skinner e colocado o animal na mesma. Ento iniciamos o procedimento de
discriminao condicional complexa, o bebedouro ficou na posio manual e o sujeito,
ainda sem estmulo, ficou sem reforo, logo depois foram apresentados dois estmulos
para ele (xy) e a chave do bebedouro colocada em posio automtica, reforando as
suas respostas, depois retiramos um dos estmulos e colocamos novamente a chave em
posio manual e assim sucessivamente.
Tarefa
Na tarefa de discriminao condicional complexa, o sujeito teve que discriminar
entre dois estmulos luz (x) e som (y), sendo que ele receber o estmulo reforador
gua - somente quando os dois estmulos (xy) forem apresentados juntos, quando
apenas um estmulo discriminativo for apresentado (x) ele no receber o reforo. A
resposta esperada do animal a presso barra da Caixa de Skinner, apenas quando os
estmulos forem apresentados juntos.
RESULTADOS

Segue- se abaixo grfico com a modelagem dos grupos controle e experimental:



Grfico 1 Modelagem dos grupos Treino de ida ao bebedouro

Conforme podemos verificar no grfico o desempenho dos grupos na
modelagem de treino de ida ao bebedouro e depois de presso barra os grupos
tiveram desempenhos nivelados. Foram realizados 7 sesses de treino com uma
durao de 40 minutos, onde o animal era colocado na Caixa de Skinner privado
de gua (48 horas) para realizao dos treinos, que num primeiro momento a
descoberta do bebedouro e depois focado em que o animal desempenhe a tarefa
de pressionar a barra para receber o estmulo reforador que a gua.
0
500
1000
1500
2000
2500
1 2 3 4
753
126
879
2259
145
1723
1868
613
CONTROLE
EXPERIMENTAL
Aps a realizao da modelagem, iniciamos o treino da discriminao
complexa, que consistiu em 16 sesses de treino de 40 minutos com cada
animal. Segue abaixo, grfico com o desempenho dos grupos controle e
experimental:


Grafico 2 Discriminao Quantidade de presses a barra nos estmulos
xy em 16 sesses de treino



De acordo com os grficos possvel observar a maior a frequncia de presso
barra, no grupo controle quando a condio era pressionar no momento de apresentao
dos dois estmulos XY comparado com a do grupo experimental. Estes dados mostram
um desempenho inferior do GE em relao ao GC. Os dados sugerem, assim que pode
haver uma relao entre a ingesto de lcool durante a gestao e lactao e prejuzos
na aprendizagem, principalmente em processo que envolva discriminar entre estmulos
compostos em procedimentos em que se requeira uma memria retrospectiva. O animal
no s deve pressionar a barra, mas sim no momento da apresentao dos dois estmulos
(xy luz e som), para obteno de gua, quando privado dela. O grupo controle
apresentou uma mdia de 729 contra uma mdia de 585 do grupo experimental, o
desvio do grupo controle foi de 1309 contra um desvio de 922 do grupo experimental.
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
1 2 3 4
CONTROLE 1724 1926 2687 5329
EXPERIMENTAL 1546 2379 2295 3140
DISCRIMINAO
A diferena dos desvios de 387, portanto significativa demonstrando que o
grupo experimental apresentou um menor ndice de aprendizagem da tarefa comparado
com o grupo controle.
Os coeficientes de varincia so de 17,9% do grupo controle para 15,8% do grupo
experimental, revelando que os dados do grupo controle apresentam mais disperso
comparada mdia que o grupo experimental, isso indica a variao dos dados durante
os treinos.
Discusso

A diferena de desempenho encontrada nos grupos indica que o grupo
experimental apresenta um dficit na aprendizagem se comparada com o grupo controle,
demonstrando desempenho inferior em realizar a tarefa de forma adequada.
Verificou-se no experimento que os animais do grupo experimental tiveram
dificuldade de associao de estmulos, por vezes no reconhecendo o momento de
realizar a tarefa para receber o reforo (gua).
De acordo com Holland apud Moreira & Bueno (1994) se sugere que predomina a
utilizao de estratgias mais simples de associao primria entre X(estmulo) e o US
(estmulo incondicionado), o estmulo caracterstica X transfere as suas propriedades
de modulao do desempenho do animal para um estmulo novo.
No decorrer do experimento observou-se que os animais experimentais
apresentaram pouca memria da tarefa, sendo que em alguns treinos demoravam a
comear a desempenhar a tarefa.
Moreira & Bueno (1994) apontam que foi a partir de estudos que se levantou a
hiptese de que o hipocampo uma estrutura cerebral com papel importante na
mediao de processos de aquisio de discriminao condicional.
Ainda segundo os autores o hipocampo essencial para a recuperao
condicional, o que envolve o uso de uma dica de categoria para definir uma srie de
memrias potencialmente relevantes, da qual uma segunda dica local ativa uma
memria particular.
Segundo Feliciano (2006) h dificuldades de estabelecer discriminaes
condicionais em ratos, sendo necessrio o desenvolvimento de equipamentos que
consigam estudar discriminaes simples e condicionais como uma tentativa para
avaliar processos mais complexos de aprendizagem.
No estudo realizado constatou-se que animais cujas mes apresentaram
dependncia de lcool, houve dano na memria retrospectiva que mediada pelo
hipocampo, ocasionando falhas no desempenho do animal gerando erros para
desempenhar a discriminao de estmulos ou a no execuo da tarefa. A memria
retrospectiva importante no desempenho de tarefas que tenham associaes, pois
fazendo uso dela que o animal aprende a discriminar o momento em que deve realizar a
tarefa Nos ltimos treinos o grupo experimental apresentou um baixo ndice de acertos
na tarefa.

CONCLUSES

Conclui-se com base no experimento que h influncia do consumo de lcool na
aprendizagem de descendentes, quando estes so expostos intra- tero e durante a
lactao.
Os animais do grupo experimental apresentaram baixo desempenho na tarefa de
discriminao sendo observado que estes no conseguiam discernir os estmulos (que
eram X= Luz e Y = Som) no pressionando a barra ou a pressionando quando s havia o
estimulo da luz.
Tambm tivemos uma amostra pequena (somente 8 animais), mas estudos no projeto
piloto (que continham 16 animais) tambm apresentaram diferenas de aprendizagem
dos grupos, corroborando para confirmar a hiptese levantada no objetivo desta
pesquisa.
As amostras foram compostas de oito animais, sendo 4 animais para cada grupo. Por
esta razo h necessidade de replicar o experimento com maior nmero de sujeitos para
um exame mais detalhado dos resultados.

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