Estauo uel aite

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Captulo2

Estadodelarte

Estauo uel aite

2S

2.1 Introduccin

A continuacion se uesciiben las uifeientes tecnologias que peimiten meuii el pB.

Pueuen clasificaise en uos gianues giupos:

Sensoies electioquimicos o potenciomtiicos
a) Basauos en electiouos selectivos ue iones (ISE)
b) Basauos en tiansistoies ue efecto ue campo (ISFET)
c) Basauos en uispositivos ue caiga acoplaua (CCB)

Sensoies opticos
a) Espectioscopia uel infiaiiojo ceicano (meuiua no invasiva)
b) Resonancia magntica nucleai (meuiua no invasiva)
c) Neuiante fibia optica e hiuiogel
u) Neuiante fibia optica e inuicauoi


2.2 Sensoreselectroqumicosopotenciomtricos

Son los uispositivos que tiansfoiman la activiuau o concentiacion uel ion

hiuiogeno en una seal elctiica. Entie los ms empleauos estn los que cuentan
con Electiouos ue Ion Selectivo (ISE: Ion Selective Electrode) o los que utilizan
tiansistoies ue efecto ue campo (ISFET: Ion Selective Field Effect Transistor).
Tambin se uesciiben bievemente los sensoies basauos en uispositivos ue caiga
acoplaua (CCB: ChargeCoupledDevice).

2.2.1 Sensoresbasadosenelectrodosdeionselectivo

Estos sensoies poseen uos electiouos: uno ue ellos se fabiica con un metal ineite y
se usa como iefeiencia (noimalmente es ue plata o cloiuio ue plata), mientias que
el otio posee una capa sensible al pB uepositaua sobie l. Cuanuo el sensoi entia
en contacto con la solucion bajo piueba, se inteicambian iones hiuiogeno
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piouucinuose una uifeiencia ue potencial entie los uos electiouos que es
piopoicional al pB ue la solucion segn la ecuacion:

=
RI
F
ln
o
1
o
2


Bonue
R1
P
es la sensibiliuau, o
2
es la activiuau (o concentiacion efectiva) ue
iefeiencia (que se mantiene constante) y o
1
es la activiuau uel ion que se uesea
meuii, en este caso B
+
|Caboj.

Bentio ue este tipo ue sensoies existen vaiios mtouos paia iealizai la meuiua,
como los electiouos ue membiana liquiua o los electiouos ue estauo soliuo, peio
sin uuua el ms impoitante es el electiouo ue viuiio, cuyas ventajas e
inconvenientes se uesciiben a continuacion |Koiostynskaj |0ieggionij.

2.2.1.1 Electrododevidrio

Es el mtouo ms extenuiuo paia la meuicion ue pB. La lectuia se piouuce como
iesultauo uel inteicambio ue iones hiuiogeno que tiene lugai entie la muestia y la
capa ue gel hiuiatauo que iecubie las supeificies inteina y exteina uel viuiio.

A pesai ue que el electiouo ue viuiio ofiece meuiuas ipiuas, fiables y piecisas, no
siempie es factible utilizai este electiouo paia ueteiminai el pB. Algunos ue los
inconvenientes son:

En meuicina, el tamao ue estos electiouos, junto con la iigiuez y fiagiliuau ue
su estiuctuia impiuen su utilizacion en pioceuimientos invasivos.

Las pioteinas, giasas, azcaies o ueteiminauos tampones existentes en
alimentos o muestias biologicas pueuen inteiactuai con los iones Ag uel
electiouo bloqueanuo las uniones liquiuas.

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Los ambientes coiiosivos ueteiioian los cables ue union contiolauoielectiouo.

La solubiliuau ue los electiolitos que iellenan el electiouo ue meuiua y el ue
iefeiencia uepenue fueitemente ue la tempeiatuia, puuinuose piouucii la
piecipitacion ue estas sales en ueteiminauas conuiciones.

Finalmente, la piincipal fuente ue eiioi ue los electiouos ue viuiio es el iuiuo
electiomagntico ambiental piovocauo poi la piesencia ue campos
electiomagnticos exteinos en el lugai ue meuiua. La puesta en maicha ue un
motoi o la simple agitacion mecnica o magntica ue un ieactoi pueuen
piovocai fluctuaciones impoitantes en la lectuia uel pB. |Bustamantej

2.2.2 Sensoresbasadosentransistoresdeefectodecampo(ISFETs)

Algunos ue los inconvenientes uel electiouo ue viuiio se han supeiauo en la

actualiuau con el uesaiiollo ue sensoies ue pB meuiante tiansistoies ue efecto ue
campo o ISFETS. Se tiata ue un sensoi que emplea un tiansistoi N0SFET (Metal
Oxide Semiconductor Field Effect Transistor) al que se le ha mouificauo la
estiuctuia ue la pueita. veamos piimeio la estiuctuia ue este tiansistoi sin
mouificai.

La figuia 2 muestia la configuiacion bsica ue un tiansistoi N0S ue silicio ue tipo
p. Sobie un sustiato ue semiconuuctoi se encuentian uos iegiones uopauas
fueitemente con impuiezas uonauoias, es uecii ue tipo n
+
. En caua una ue estas
iegiones se ueposita un electiouo metlico foimanuo el contacto ue fuente (S:
Source) y uienauoi (B: Drain). Entie fuente y uienauoi se encuentia el canal, que
se iecubie poi una capa aislante ue oxiuo y sobie la que se ueposita otio electiouo
metlico foimanuo el contacto ue pueita (u: Gate). Finalmente, sobie la supeificie
infeiioi uel uispositivo se ueposita una capa metlica que foima el teiminal ue
sustiato (B: Body) |ICNNj.

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Figura2:EstructurasdetransistoresFET[CSRG]

Paia constiuii un ISFET, en lugai ue colocai el contacto metlico ue pueita sobie la
capa ue oxiuo, se ueposita una membiana inoignica sensible a los iones B
+
como
poi ejemplo nitiuio ue silicio (Si
S
N
4
) ue maneia que el uispositivo es sensible al
pB. Be este mouo la membiana inoignica atiapa los iones B
+
y las caigas que se
acumulan en ella foiman un campo elctiico que mouula la coiiiente uel canal.
Pouemos poi tanto uecii que un ISFET es un tiansistoi ue efecto ue campo cuyo
voltaje umbial es uepenuiente ue la concentiacion ue iones ue la solucion que est
en contacto con la pueita |Niioj.

El mximo teoiico ue la sensibiliuau ue un sensoi ue pB meuiante ISFET es ue S9
mv poi uniuau ue pB |Beigveluj, y la iesolucion es ue u,1 uniuaues ue pB, estanuo
iestiingiua poi el iuiuo iosa (1f) en los tiansistoies N0S |}akobsonj.

Buiante aos, el uesaiiollo ue los ISFETs ha siuo piomoviuo poi la cieencia ue que
ieemplazaiian a los bien estableciuos electiouos ue ion selectivo giacias a su
pequeo tamao, iobustez y bajo piecio. Sin embaigo algunos inconvenientes paia
aplicaciones in vivo han siuo constatauos, el ms impoitante ue ellos es el
pioblema ue la encapsulacion, ya que iesulta uificil sepaiai los componentes
metlicos uel chip y el cableauo uel liquiuo cuyo pB se uesea meuii, lo que acaiiea
pioblemas ue funcionamiento y seguiiuau. Actualmente, se estn investiganuo
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nuevas foimas ue encapsulai los tiansistoies en un cattei paia uso in vivo
(encapsulauos plainchip o flipchip), en busca ue una mejoi sepaiacion entie el
liquiuo a meuii y los componentes uel uispositivo |Koiostynskaj |Suuakovj
|Bustamantej.

2.2.3 Sensoresbasadosendispositivosdecargaacoplada(CCD)

Se ha piopuesto tambin una tcnica paia meuii pB meuiante los sensoies CCB. La
estiuctuia ue la zona sensible al pB ue estos sensoies es similai a la ue los basauos
en ISFETs, sin embaigo, la seal ue saliua es uifeiente. En un ISFET la seal ue
saliua es la vaiiacion ue la tension entie la pueita y la fuente uel tiansistoi
mientias que en este uispositivo semiconuuctoi se almacena caiga como una
funcion ue la uifeiencia ue potencial entie un teiminal ue contiol y el iea sensible
|Sawauaj. Se ha conseguiuo una gian sensibiliuau (Su48 mvpB) |Natsuoj
uisminuyenuo como contiapaitiua el iango ue pB meuible e inciementanuo el
tiempo necesaiio paia iealizai la meuiua. Esta tcnica es muy satisfactoiia paia
iangos ieuuciuos ue pB, sin embaigo paia iangos gianues como el que se piecisa
paia el uiagnostico ue la ERuE (1 a 8 uniuaues ue pB) apaiecen peituibaciones
que uisminuyen el ienuimiento uel sensoi |Caboj.


2.3 Sensorespticos

2.3.1 ResonanciaMagnticaNuclear

La iesonancia magntica nucleai (RNN o NNR: Nuclear Magnetic Resonance)
estuuia los ncleos atomicos alinenuolos con un campo magntico constante paia
posteiioimente peituibai este alineamiento meuiante una onua ue
iauiofiecuencia. Esta tcnica ha siuo ampliamente usaua uuiante aos paia meuii
no solo el valoi ue pB en sistemas biologicos sino tambin paia estuuiai la
uisposicion ue los tomos en el seno ue un mateiial, ieemplazanuo a la
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Su

ciistalogiafia ue iayos X paia la ueteiminacion ue la estiuctuia moleculai inteina
ue las pioteinas.

El funuamento bsico ue una iesonancia magntica nucleai es el siguiente
|Nnuezj:

Se aplica un campo magntico constante paia alineai el momento magntico
ue los ncleos ue hiuiogeno.

Se aplica un pulso ue iauiofiecuencia (RF) a la fiecuencia ue iesonancia ue los
ncleos ue hiuiogeno que hace que su momento magntico cambie ue
oiientacion, ue mouo que los ncleos absoiben eneigia y empiezan a giiai a la
misma fiecuencia ue la onua ue RF. Este es el fenomeno conociuo como
iesonancia.

Cuanuo se ueja ue aplicai la onua ue RF, el momento magntico ue los ncleos
vuelve a su estauo inicial. En este pioceso se libeia eneigia en foima ue onua
ue iauiofiecuencia tambin.

Esta onua libeiaua pueue captaise y analizaise paia obtenei infoimacion ue la
iegion exploiaua.

Como se ha uesciito, la onua ue RF que se aplica uebe tenei una fiecuencia que
coinciua con la fiecuencia ue iesonancia natuial ue los ncleos ue hiuiogeno. Sin
embaigo este valoi no es totalmente fijo, puesto que cambios en el entoino
electionico uel ncleo uan lugai a vaiiaciones ue esta fiecuencia ue iesonancia. La
estimacion uel valoi ue pB uel meuio utilizanuo la tcnica ue iesonancia magntica
nucleai se basa en este fenomeno, ya que se pueue estuuiai la concentiacion uel
ion hiuiogeno B
+
en funcion ue la fiecuencia ue la onua ue RF a la que se piouuce
la iesonancia |Koiostynskaj.

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Lamentablemente paia iealizai una iesonancia magntica nucleai se piecisa
instiumentacion pesaua y no poitable, lo que hace inviable un seguimiento uel
paciente uuiante 24 hoias en su entoino habitual. Auems, tal y como se establecio
en el estuuio pieliminai, el sensoi buscauo uebe poueise montai con comouiuau
en un cattei paia su intiouuccion poi via nasogstiica, auems ue tenei un coste
ue piouuccion ieuuciuo.

2.3.2 EspectroscopiadelInfrarrojoCercano

La iauiacion infiaiioja se absoibe ue uifeiente foima en funcion ue la composicion
quimica y la estiuctuia uel mateiial. Poi este motivo el anlisis uel espectio
infiaiiojo peimite caiacteiizai e iuentificai mateiiales no accesibles a la vista y, en
el campo ue la meuicina, es una potente heiiamienta giacias a la que se consigue
una iepiesentacion ue los tejiuos inteinos. Auems, es posible utilizai esta tcnica
paia meuii el pB in vivo basnuose en que el espectio ue absoicion ue las
pioteinas piesentes en el tejiuo cambia en funcion uel valoi ue pB.
Los uispositivos basauos en el infiaiiojo ceicano implican noimalmente el uso ue
mouelos analiticos ue la piopagacion ue la luz a tiavs uel tejiuo basauos en la ley
ue BeerLambert (que uesciibe la ielacion entie la absoicion ue la luz y las
piopieuaues uel mateiial atiavesauo). La implementacion ue estos mouelos a
menuuo exige una instiumentacion complicaua y poco manejable que uificulta las
meuiuas en el entoino clinico |Koiostynskaj |Beinnuezj.
Poi los mismos motivos expuestos en el apaitauo iefeiente a la iesonancia
magntica nucleai (sistema no poitable, complejo y ue elevauo coste), se consiueia
que esta tcnica no es la ms inuicaua paia el uiagnostico uel ieflujo
gastioesofgico.



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2.3.3 MedidadepHmediantehidrogelyfibraptica

Los hiuiogeles se pueuen uefinii como mateiiales polimiicos entieciuzauos en
foima ue ieu tiiuimensional ue oiigen natuial o sinttico, que se hinchan en
contacto con el agua foimanuo mateiiales blanuos y elsticos, y que ietienen una
fiaccion significativa ue la misma en su estiuctuia sin uisolveise. Esto piovoca que
los hiuiogeles pueuan aumentai su volumen hasta en un Suu% o incluso en
poicentajes supeiioies.

El mecanismo poi el cual los polimeios son capaces ue absoibei tanto volumen ue
soluciones acuosas no es solamente fisico, sino que uepenue ue la natuialeza
quimica uel polimeio. Biveisas composiciones uel hiuiogel pueuen haceilo
sensible no solo a la humeuau, sino a otias magnituues como niveles ue pB o ue
saliniuau, poi ejemplo.

Se pouiia agiegai un uispositivo mecnico a una fibia optica ue foima que las
vaiiaciones en el volumen uel hiuiogel piouuzcan esfueizos mecnicos sobie la
fibia, que se tiauucen en uefoimaciones y vaiiaciones ue la cuivatuia. Puesto que
las cuivatuias intiouucen piuiuas ue potencia, se pouiia evaluai el nivel ue pB
uel liquiuo en funcion ue la potencia iecibiua, o lo que es lo mismo, ue la
uefoimacion ue la fibia piouuciua poi el hiuiogel |Ciaigj |0lcinaj |Changj.

Esta tcnica ha siuo uescaitaua puesto que la colocacion ue un cueipo extiao en
el esofago capaz ue aumentai ue volumen en funcion ue la piesencia ue agua
pueue conllevai iiesgos paia la saluu uel paciente. Es posible que se pueua
contiolai el fenomeno con gian piecision ue foima que el iiesgo poi ahogamiento
sea uespieciable, peio un estuuio ue esta inuole se encuentia fueia uel maico ue
este pioyecto.



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SS

2.3.4 SensoresdepHmediantefibrapticaeindicador

Paia teiminai este capitulo se uesciiben los sensoies basauos en fibia optica que
han iesultauo sei finalmente la tecnologia ue meuiua escogiua. A continuacion se
hace una uesciipcion geneial ue estos sensoies paia uespus pasai a analizai sus
ventajas e inconvenientes.

Los sensoies opticos tambin son llamauos optouos u optiouos. El piimeio ue los
timinos fue usauo poi piimeia vez en 197S poi los investigauoies alemanes
0ptiz y Lbbeis paia hacei iefeiencia a un sistema optico ue meuiua ue C0
2,

pioceue uel giiego y significa camino ptico. La uenominacion optrodo, a pesai ue
estai ampliamente aceptaua, pioviene uel timino optical electrode,
lingisticamente incoiiecto ya que estos sensoies no analizan una seal elctiica
como los electiouos, sino una seal optica |Bustamantej.

Se basan en la utilizacion ue un ieactivo, que es una sustancia que ieacciona ante
cambios en el paimetio ue inteis (en el contexto ue la optica se les llama
coloiantes (dye), o simplemente inuicauoies), acoplauo o inmovilizauo en una
fibia optica. Buiante la meuiua, la luz viaja poi la fibia uesue la fuente hasta el
ieactivo. La inteiaccion con el analito o paimetio ue inteis (poi ejemplo los
iones B
+
en el caso ue la meuiua ue pB), piouuce un cambio en las piopieuaues
opticas uel ieactivo, piopoicional a la concentiacion ue analito. La iauiacion cuyas
piopieuaues opticas han siuo alteiauas es conuuciua poi la fibia (la misma u otia
uistinta), hasta el uispositivo fotouetectoi, que convieite la seal luminosa en una
lectuia ue la magnituu meuiua (el nivel ue pB en nuestio caso). Se pueuen meuii
uiveisos paimetios como la concentiacion ue oxigeno en sangie, C0
2
o glucosa
utilizanuo ieactivos uifeientes.

Los cambios uetectauos en las piopieuaues opticas uel ieactivo uel optouo pueuen
sei el iesultauo ue uifeientes fenomenos |Bustamantej |Naitinj:

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Absorcin: vaiiaciones uel paimetio ue inteis piouucen un cambio ue la
intensiuau iecibiua con iespecto a la tiansmitiua uebiuo a que se ha piouuciuo una
vaiiacion ue absoibancia
1
uel ieactivo.

Reflexin: Al manejai muestias soliuas se hace uificil meuii la luz tiasmitiua. Se
utiliza entonces la vaiiacion ue luz ieflejaua poi el ieactivo, ante cambios en la
concentiacion uel analito.

Luminiscencia: El ieactivo emite luz con vaiiaciones en sus piopieuaues en
funcion uel paimetio ue inteis. Con anteiioiiuau, el ieactivo ha uebiuo sei
excitauo a tiavs ue la fibia con iauiacion a una ueteiminaua fiecuencia. Cuanuo la
luz ue excitacion pioceue ue una fuente luminosa, la emision ue fotones se
uenomina fluoiescencia o fosfoiescencia, mientias que si la especie excitaua se
foima en el tianscuiso ue una ieaccion quimica el fenomeno se conoce como
quimio o bioluminiscencia.

La uifeiencia funuamental entie los mtouos potenciomtiicos uesciitos en el
apaitauo 2.2 paia la meuiua uel pB y los mtouos opticos es que los piimeios
miuen activiuau mientias que los segunuos miuen concentiacion. Poi este motivo,
en la mayoiia ue las publicaciones que hacen iefeiencia a optouos ue pB, se ignoia
el efecto ue la fueiza ionica (vei la uefinicion matemtica uel pB en el apaitauo
1.1) y se expiesa el pB en funcion ue la concentiacion ue la especie. Esto, sin
embaigo, nicamente es aceptable en uisoluciones muy uiluiuas (paia ms uetalles
vei la tesis uoctoial ue Nelia Bustamante Alvaiez |Bustamantej, apaitauo
Funuamentos y aspectos geneiales uel pB, pginas 1S61S8).





1
Absoibancia: Neuiua ue la atenuacion ue una iauiacion al atiavesai una sustancia, que se expiesa
como el logaiitmo ue la ielacion entie la intensiuau saliente y la entiante |RAEj.
Estauo uel aite
SS

2.3.4.1 Ventajas

Los sensoies opticos meuiante fibia optica piesentan una seiie ue ventajas que los
hacen muy atiactivos en algunos sectoies como las biotecnologias o el meuio
ambiente, y en concieto en el uiagnostico uel ieflujo gastioesofgico:

No requieren seal de referencia. Al contiaiio que, poi ejemplo, los sensoies
electioquimicos que miuen uifeiencias absolutas ue potencial, los optouos no
necesitan una seal ue iefeiencia, lo que aumenta la estabiliuau ue la meuiua y
ieuuce los costes en la fabiicacion ue la instiumentacion.

Inmunidadalruidoelectromagntico. Al mouulai la infoimacion utilizanuo luz

en lugai ue seales elctiicas no pueuen piouuciise inteifeiencias
electiomagnticas (uiafonia).

Anlisis multiparamtrico. Las fibias opticas pueuen tiansmitii mucha ms
infoimacion que los cables elctiicos, uebiuo a su mayoi ancho ue banua. Las
seales opticas oiiginauas poi la piesencia ue uifeientes analitos en la muestia
pueuen uifeiii unas ue otias en longituu ue onua, fase, mouulacion ue intensiuau o
polaiizacion. Tenienuo en cuenta que las fibias opticas no peimiten la existencia
ue uiafonia o crosstalk, touas las seales pueuen sei tiansmitiuas simultneamente
poi una misma fibia, posibilitanuo la ueteccion ue uistintos analitos a la vez
(multiplexado).

Aislamiento elctrico del paciente. Se consiueian ms seguios paia uso in vivo
puesto que no son atiavesauos poi coiiientes elctiicas, evitnuose asi la conexion
uiiecta entie el paciente y el equipo elctiico.

Utilizacin de fibras pticas flexibles y estrechas. uiacias a estas uos
caiacteiisticas las meuiciones in vivo pueuen iealizaise sin excesivas molestias
paia el paciente.

Estauo uel aite
S6

Fibras de gran resistencia a los ambientes corrosivos. Se pueuen fabiicai
fibias que sopoitan bastante bien la exposicion a los ciuos piesentes en el
estomago.

Fuentes consultauas: |Bustamantej |Koiostynskaj

2.3.4.2 Inconvenientes

Existen no obstante una seiie ue factoies limitantes, ue uificil solucion en algunos
casos peio no insalvables, giacias a los continuos avances ue la tcnica:

Aunque el cambio que expeiimentan las piopieuaues opticas ue los inuicauoies ue
pB en uisolucion es instantneo, la meuiua ue este paimetio empleanuo optouos
en los que el compuesto se encuentia sopoitauo en una matiiz polimiica suele
piesentai tiempos ue iespuesta mayoies que los piopoicionauos poi el electiouo
ue viuiio, uebiuo a la tiansfeiencia ue masa que supone el acceso ue los iones
hiuiogeno uesue la uisolucion ue meuiua hasta el inuicauoi. El lavauo o
fotouegiauacion ue los inuicauoies o la uepenuencia ue la fueiza ionica uebiuo a
que miuen la concentiacion y no la activiuau uel analito son otios ue los
inconvenientes ue los sensoies opticos ue pB |Bustamantej.


2.4 Conclusionesdelcaptulo:tecnologaelegida

A pesai ue que en muchas situaciones los optouos no pueuen competii con el
actualmente bien estableciuo electiouo ue viuiio, si pueuen llegai a sei ue utiliuau
en touos aquellos casos uonue los mtouos potenciomtiicos estn especialmente
uesaconsejauos como ocuiie en el campo ue la meuicina.

Los puntos fueites ue las sonuas ue pB meuiante fibia optica ya se han uesciito y
se iesumen a continuacion:

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uian estabiliuau al no iequeiii seal ue iefeiencia
Inmuniuau a la inteifeiencia electiomagntica
Seguiiuau paia el paciente al no utilizai seales elctiicas
Flexibiliuau y pequeo giosoi ue las fibias que facilita su inseicion
Resistencia a la coiiosion poi ciuo


Por estos motivos, se elige el sensor de pH mediante fibra ptica con
indicadoracoplado,comolatecnologaidneaparaeldiagnsticodelreflujo
gastroesofgico.