UNDAMENTO CIENTFICO

Demanda Bioltica de Oxgeno (DBO)

El agua residual contiene una cierta flora bacteriana, que tras un tiempo
de incubacin, acta degradando la materia orgnica contenida en el
agua residual. Si cierta cantidad del agua a analizar se introduce en un
recipiente, y ste se cierra hermticamente, se crea un sistema que
contiene el agua a analizar, con su flora bacteriana y aire, el cual
contiene un 21% de oxgeno. En un tiempo determinado, los
microorganismos consumen todo o parte del oxgeno contenido en el
sistema al degradar la materia orgnica, liberando una cierta cantidad
de anhdrido carbnico gaseoso (CO2). Suponiendo que se inhibe la
nitrificacin y que se retira del sistema el CO2 gaseoso producido, la
depresin que se registra en el sistema se deber exclusivamente al
descenso de la presin parcial del oxgeno, como consecuencia del
consumo de oxgeno en la oxidacin biolgica de la materia orgnica.
1 Introduccin

Esta prueba determina los requerimientos relativos de oxgeno de cierto volumen
de agua, para la degradacin biolgica de la materia orgnica contenida;
expresando una medida indirecta de la contaminacin por materia orgnica.
A continuacin se describe la determinacin de DBO con un periodo de incubacin
de cinco das (DBO5) en bimetros diseados a tal efecto (Oxitop). Estos
bimetros estn dotados de tapones con dispositivos de lectura de la presin
parcial de los frascos. La captacin del CO2 gaseoso producido se efecta por
reaccin con NaOH, que ha de disponerse al comienzo del ensayo en una cpsula
diseada a tal efecto, en el sistema.

2 Reactivos y disoluciones
Agua destilada
Hidrxido de sodio (NaOH) en perlas
Disolucin de allitiourea Inhibidor de la nitrificacin (5g/L C4H8N2S)
Cloruro sdico (NaCl)
Cloruro potsico (KCl)
Cloruro de calcio dihidrato (CaCl2.2H2O)
3. Materiales y equipos
Marcadores
Probetas de 50 y 100 mL
Viales de polipropileno de 50 y 100 mL
Pipeta Pasteur
Papel indicador de pH
Bimetro: botella de vidrio mbar, cpsula de goma y tapn-registrador.
Cmara incubadora
Bases de agitacin magntica
Barillas agitadoras (imanes)
4. Procedimiento
1. Preparar diluciones para las muestras que as lo requieran (ver apartado
2.6. Observaciones).
2. Se introduce una varilla agitadora (imn) en el interior del bimetro.
3. Se aade el inhibidor de la nitrificacin en una proporcin equivalente a 20
gotas de la disolucin de alliltiourea por litro de muestra.
4. Se ponen dos perlitas de NaOH en la cpsula diseada a tal efecto.
5. Se aade un volumen de muestra determinado en el bimetro. El volumen a
utilizar depende del rango de DBO esperado, y est especificado en las
instrucciones de uso del bimetro.
6. Se coloca la cpsula conteniendo NaOH sobre la parte superior del
bimetro, una vez que la muestra est estable y no se observen burbujas
de aire.
7. Se cierra el bimetro con el correspondiente tapn-registrador, y se pone la
lectura a cero.
8. Se introduce el bimetro en la cmara incubadora a 25C y se enciende la
base de agitacin magntica. Se mantiene agitacin suave constante
durante todo el ensayo.
9. Se realiza la lectura a los cinco das, siguiendo el procedimiento de lectura
de la casa fabricante del bimetro.
5. Clculos

La DBO5 final del agua analizada, expresada en mg de O2 por litro de muestra,
ser la lectura obtenida en el bimetro (Display) multiplicada por el factor de
conversin (Fc) y el factor de dilucin (Fd). La correspondencia factor de
conversin a volumen de muestra introducido en el bimetro se indica en las
instrucciones de uso del bimetro.

DBO5 (mg O2/L) = Display (0-50) x Fc x Fd

A continuacin se adjunta la tabla con los factores de conversin y volmenes de
medida en funcin del rango esperado de DBO5.
Volumen de muestra
(mL)
Factor
Rango esperado (mg O2 L-
1)
22,7 100 0-4000
43,5 50 0-2000
97 20 0-800
164 10 0-400
250 5 0-200
365 2 0-80
432 1 0-40

6. Observaciones

Hay que tener en cuenta que las muestras que tengan un pH inadecuado y/o una
concentracin excesiva de materia orgnica, debern ser diluidas con Suero
Ringer (agua de siembra). El Suero Ringer (SR) es una solucin electroltica,
isotnica con respecto a la flora bacteriana, lo cual permite diluir las muestras sin
afectar al metabolismo de los microorganismos contenidos en la misma. Si para
diluir las muestras se utilizase un solvente demasiado concentrado inicamente
(hipertnico), agua del grifo por ejemplo, parte de los microorganismos podran ver
afectada su actividad, sufriendo un desecamiento (crenacin-plasmlisis). Por
otro lado, si diluyramos con agua destilada (hipotnica) los microorganismos
sufriran un proceso de hinchamiento (cistlisis-turgencia).

Preparacin del SR: 8,5 g de NaCl + 0,4 g de KCl + 0,34 g de CaCl2.2H2O en 1L
de agua destilada.

Los supuestos de dilucin son:

pH inadecuado: el pH de las muestras debe estar entre 5 y 10,
lo cual puede comprobarse rpidamente con papel indicador.
Concentracin excesiva de materia orgnica: existen aguas
residuales con una carga orgnica extraordinaria, lo que se
traduce en un elevado consumo de oxgeno necesario para las
oxidaciones metablicas, por lo que an utilizando el volumen
mnimo (22,7 mL) se consume todo el oxgeno contenido en los
bimetros. Si esto ocurre, no podremos saber cuanto oxgeno se
consume exactamente en 5 das. Ocurre por ejemplo con aguas
residuales de ganadera (purn).
7. Interpretacin de resultados
A continuacin, para comprender mejor los resultados, se incluyen
valores representativos (mg O2 L-1):
Agua residual domstica:
250-350
VLV al cauce pblico CHS:
<15
Purn: 3000-8000
Ro no cont / contaminado: 3
/ 10
VLV en terrenos
susceptibles: <60
Purn depurado*: 300-500