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UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPRITO SANTO

CENTRO UNIVERSITRIO NORTE DO ESPRITO SANTO
DEPARTAMENTO DE CINCIAS NATURAIS








PRTICA 1: PROPRIEDADES CIDO-BASE DE AMINOCIDOS





Trabalho apresentado pela aluna Mrjory
Santiago Fonseca como requisito de
avaliao disciplina de Instrumentao
para o Ensino de Qumica Biolgica
Experimental do Curso de Licenciatura em
Qumica do Centro Universitrio Norte do
Esprito Santo. Professora: Carolina Fortes
Rigos.







So Mateus ES
25 de abril de 2014

2

1. RESUMO
A glicina o aminocido de estrutura mais simples, com apenas dois grupos
ionizveis (COOH e NH
3
). Quando a glicina dissolvida em gua a pH neutro, ela
passa a existir como um on dipolar ou zwitterion, o qual pode atuar tanto como um
cido como uma base. As experincias descritas no presente relatrio tiveram por
objetivo verificar as propriedades cido-base da glicina atravs da titulao
potenciomtrica, utilizando como titulantes solues de hidrxido de sdio (NaOH) e
cido clordrico (HCl). Foram obtidos valores de pH entre 2,2 e 11,3 e valores de
concentrao de OH
-
entre 1,6x10
-12
e 2,0x10
-3
. Com a variao de pH em funo da
concentrao de OH
-
, obteve-se a curva de titulao da glicina 0,1 mol/L, assim como
seus pontos principais (pK
1
= 2,8, pK
2
= 9,2 e pI = 6,0) e as faixas tamponantes.


2. INTRODUO
Os aminocidos representam a menor unidade elementar na constituio de uma
protena. Estruturalmente so formados por um grupamento carboxil (COO
-
), um
grupamento amino (NH
3
+
), um tomo de hidrognio (H) e um radical (R), todos ligados
a um tomo de carbono (carbono )
2
. Esse radical R determina um dos vinte tipos de
aminocidos comuns
1
, chamados de -aminocidos
2
, e diferem uns dos outros em
estrutura, tamanho e carga eltrica
2
.


Figura 1 Estrutura geral de um aminocido
(livro)

Os grupos amino e carboxil, juntamente com os grupos R ionizveis de alguns
aminocidos, funcionam como bases e cidos fracos. Substncias possuindo essa
natureza dual (cido-base) so anfteras
2
, e podem sofrer protonaes e desprotonaes
reversveis
3
. Os grupos ionizveis conferem aos aminocidos e, consequentemente, s
protenas, a capacidade de atuarem como tampo
3
.

3


Figura 2 Protonao e desprotonao reversvel de um aminocido
(http://www.ceunes.ufes.br/downloads/2/carolinarigos-aula%201%20aminoacidos.pdf)

Os aminocidos podem ser titulados potenciometricamente, apresentando curvas
de titulao caractersticas, de acordo com os grupos ionizveis presentes em sua
estrutura. Os mtodos de anlise potenciomtrica so baseados nas medidas das
variaes de potencial que ocorrem durante a titulao de uma soluo de concentrao
desconhecida
3
.
A titulao potenciomtrica feita a partir da adio de uma base ou de um cido
numa soluo, a partir da qual ser medida a variao de pH, causada pela mudana da
concentrao de ons H
+
e OH
-
. A partir dos volumes de base ou cido adicionados e
dos valores de pH obtidos, obtm-se dados suficientes para compor uma curva de
titulao. Essas informaes permitiro estimar os valores de pk
a
a partir do grfico,
possibilitando o clculo do ponto isoeltrico, ou seja, o pH no qual a carga lquida de
todas as substncias zero
2
.


3. MATERIAIS E MTODOS
3.1 MATERIAIS E REAGENTES
Bureta de 25 mL, pipeta volumtrica de 10 mL, erlenmeyers de 50 mL, bqueres
de 100 mL, peagmetro, chapa agitadora, agitador magntico, suporte universal, garra,
mufa, pra de suco, soluo de glicina (C
2
H
5
NO
2
) 0,1 mol/L, soluo padro de
hidrxido de sdio (NaOH) 0,1 mol/L, soluo padro de cido clordrico (HCl) 0,1
mol/L, gua destilada.

3.2 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Uma amostra de 10 mL da soluo de glicina foi pipetada para dentro de um
erlenmeyer e foi adicionada gua destilada em quantidade suficiente para cobrir o bulbo
do eletrodo de vidro do peagmetro. Mediu-se o pH da soluo. Uma bureta de 25 mL
4

foi preenchida com a soluo de NaOH. Foram adicionados pequenos incrementos da
soluo bsica ao erlenmeyer, sob agitao, e o pH foi medido aps cada adio. O
agitador foi desligado antes de cada medio de pH. O mesmo procedimento foi
realizado empregando como titulante a soluo de HCl. A aparelhagem foi montada de
forma semelhante ao esquema da figura 1.

Figura 3 Esquema de montagem da aparelhagem para titulao potenciomtrica
(http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfRRsAK/titulacao-aminoacidos-roteiro-praticas)


4. RESULTADOS E DISCUSSO
Com os dados de pH em funo da concentrao de OH
-
, obteve-se a curva de
titulao da forma diprtica da glicina 0,1 mol/L a temperatura ambiente.


Figura 4 Estrutura diprtica da glicina
(http://desenvolvimentovirtual.com/bioq/InfOnline1/3%20-
%20aminoacido_proteina/conteudo.html)

5



O grfico possui dois estgios distintos (separados pela linha vermelha)
correspondendo desprotonao dos dois grupos diferentes da glicina.
No ponto mdio do primeiro estgio da titulao, no qual o grupo COOH da
glicina perde seu prton, esto presentes concentraes equimolares da espcie doadora
de prton (
+
H
3
NCH
2
COOH) e da aceptora de prton (
+
H
3
NCH
2
COO
-
). Esse ponto
alcanado quando o pH igual ao pK
a
do grupo protonado que est sendo titulado. O
pH encontrado no ponto mdio do primeiro estgio foi 2,8, valor muito prximo ao
valor de pKa tabelado para o grupo COOH da glicina (pK
1
= 2,34).
O segundo estgio da titulao corresponde remoo de um prton do grupo
NH
3
da glicina. O pH encontrado no ponto mdio desse estgio foi 9,2, valor muito
prximo ao valor de pKa tabelado para o grupo NH
3
da glicina (pK
2
= 9,60).
O pKa a medida da tendncia de um grupo em fornecer um prton, e essa
tendncia se reduz em 10 vezes quando o pKa aumenta em uma unidade.
O ponto de inflexo (ponto verde na curva) foi alcanado no pH = 6,0, com a
completa remoo primeiro prton e incio da remoo do segundo prton. Neste ponto,
a glicina estava presente completamente como on dipolar (
+
H
3
NCH
2
COO
-
). Esse
ponto, chamado de ponto isoeltrico (pI) ou pH isoeltrico, mostra a relao entre a
carga lquida e o pH da soluo. A glicina encontra-se predominantemente na sua forma
dipolar, completamente ionizada, mas sem carga eltrica lquida. O valor de pI para a
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
1
.
6
0
E
-
1
2
2
.
0
0
E
-
1
2
3
.
2
0
E
-
1
2
6
.
3
0
E
-
1
2
1
.
0
0
E
-
1
1
1
.
6
0
E
-
1
1
5
.
0
0
E
-
1
1
2
.
0
0
E
-
0
7
5
.
0
0
E
-
0
7
7
.
9
0
E
-
0
7
1
.
2
0
E
-
0
6
1
.
6
0
E
-
0
6
2
.
5
0
E
-
0
6
3
.
2
0
E
-
0
6
5
.
0
0
E
-
0
6
7
.
9
0
E
-
0
6
1
.
2
0
E
-
0
5
2
.
5
0
E
-
0
5
6
.
3
0
E
-
0
5
2
.
0
0
E
-
0
4
5
.
0
0
E
-
0
4
7
.
9
0
E
-
0
4
1
.
0
0
E
-
0
3
1
.
2
0
E
-
0
3
2
.
0
0
E
-
0
3
pH
[OH
-
] mol/L
Curva de titulao da Glicina
pK
1
= 2,8 pK
2
= 9,2 pI = 6,0
6

glicina foi calculado como a mdia aritmtica dos dois valores de pKa, e foi encontrado
um valor bem prximo ao valor tabelado (pI = 5,97).

( ) ( )

A titulao se completou em pH = 11,3, ponto no qual a forma predominte da
glicina (H
2
NCH
2
COO
-
).
Na curva de titulao da glicina observa-se tambm duas regies de poder
tamponante, demarcadas pelos retngulos, chamadas de faixas tamponantes. Cada faixa
apresenta uma variao lenta de pH, o que indica que a glicina um bom tampo nas
regies prximas a pK
1
e pK
2
. Na primeira faixa, prximo a pK
1
, o efeito tamponante
estabelecido em decorrncia do seguinte equilbrio:

( )

Na segunda faixa, prximo a pK
2
, o efeito tamponante estabelecido em
decorrncia do seguinte equilbrio:

( )

A dissociao da glicina pode ser visualizada na figura 5:

Figura 5 Equao de dissociao da glicina
(http://desenvolvimentovirtual.com/bioq/InfOnline1/3%20-
%20aminoacido_proteina/conteudo.html)




7

5. CONCLUSO
Com os valores de pH em funo da concentrao de OH
-
foi possvel traar a
curva de titulao da glicina 0,1 mol/L. Com base na curva, calculou-se os valores de
pK
1
e pK
2
correspondentes s perdas de prton dos grupos COOH e NH
3
+
,
respectivamente, e o valor de pI. Os trs valores encontrados experimentalmente
estavam de acordo com os valores tericos tabelados, comprovando a eficincia do
mtodo empregado. A curva apresentou duas regies de efeito tamponante demarcadas
pelo aumento lento de pH em funo da concentrao de OH
-
, e uma regio de inflexo
das curvas, conforme esperado. As pequenas variaes da curva obtida
experimentalmente em relao curva de titulao terica foram observadas em
decorrncia de possveis erros na calibrao do peagmetro, na padronizao dos
reagentes e na contagem das gotas das solues de NaOH e HCl.


6. BIBLIOGRAFIA

(1) BRASIL ESCOLA. Aminocidos. Disponvel em:
<http://www.brasilescola.com/biologia/aminoacidos.htm>. Acesso em: 24 de
abril 2014.

(2) NELSON, D. L. COX, M. M. Princpios de Bioqumica de Lehninger, 5 edio,
Porto Alegre, Artmed, 2011. p. 71-103.

(3) CEUNES. Prtica 1: Propriedades cido-base de aminocidos. Disponvel em:
<http://www.ceunes.ufes.br/downloads/2/carolinarigos-
aula%201%20aminoacidos.pdf>. Acesso em: 24 de abril 2014.