Assimilacaodenutrientes Cap12

AS PLANTAS SUPERIORES SO ORGANISMOS AUTOTRFICOS que po-
dem sintetizar seus componentes orgnicos a partir de nutrientes inorgnicos

obtidos do ambiente. Para muitos nutrientes minerais, o processo envolve a
absoro de compostos do solo pelas razes (ver Captulo 5) e a incorporao
em compostos orgnicos, essenciais ao crescimento e ao desenvolvimento.
Essa incorporao dos nutrientes minerais em substncias orgnicas como
os pigmentos, os co-fatores enzimticos, os lipdios, os cidos nuclicos e os
aminocidos, denominada assimilao de nutrientes.
A assimilao de alguns nutrientes em particular nitrognio e enxofre
requer uma srie complexa de reaes bioqumicas, que esto entre as
reaes de maior demanda energtica dos organismos vivos:
Na assimilao do nitrato (NO
3
), o nitrognio do NO
3
convertido
em uma forma mais energtica, o nitrito (NO
2
) e, ento, em uma
forma ainda mais energtica, o amnio (NH
4
+
), e finalmente em nitro-
gnio-amida da glutamina. Este processo consome o equivalente a 12
ATPs para cada nitrognio (Bloom e cols., 1992).
Plantas como as leguminosas, por exemplo, estabelecem uma relao
simbionte com bactrias fixadoras de nitrognio, para converter o ni-
trognio molecular (N
2
) em amnia (NH
3
), que o primeiro produto
estvel no processo natural de fixao; entretanto, em pH fisiolgico, a
amnia protonada para formar o on amnio (NH
4
+
). O processo de
fixao biolgica do nitrognio, junto com a subseqente assimilao
de NH
3
em um aminocido, consome cerca de 16 ATPs por nitrognio
(Pat e Lauzell, 1990; Vande Broek e Vanderleyden, 1995).
A assimilao de sulfato (SO
4
2
) no aminocido cistena, por meio de duas

rotas encontradas nas plantas, consome cerca de 14 ATPs (Hell, 1997).
Para ter-se uma idia da enorme quantidade de energia envolvida, deve-se
considerar que, se essas reaes ocorressem rapidamente em reverso por
exemplo, de NH
4
NO
3
(nitrato de amnio) para N
2
elas se tornariam ex-
plosivas, liberando grandes quantidades de energia como movimento, calor
e luz. Praticamente todos os explosivos so baseados na rpida oxidao de
compostos de nitrognio ou de enxofre.
Captulo
12
Assimilao de
nutrientes minerais
2 Captulo 12
A assimilao de outros nutrientes, especialmente os macro
e os micronutrientes catinicos (ver Captulo 5), envolve a for-
mao de complexos com compostos orgnicos. Por exemplo,
o Mg
2
+
associa-se ao pigmento clorofia, o Ca
2
+
associa-se a
pectatos na parede celular e o Mo
6
+
com enzimas como a ni-
trato redutase e a nitrogenase. Tais complexos so altamente
estveis, sendo que a remoo do nutriente do complexo pode
resultar na perda total de funo.
Este captulo resume as reaes primrias pelas quais os
principais nutrientes (nitrognio, enxofre, fosfato, ctions e
oxignio) so assimilados. Sero enfatizadas as implicaes fisi-
olgicas do gasto energtico requerido e introduzido o tpico da
fixao simbitica do nitrognio.
NI TROGNI O NO AMBI ENTE
Muitos compostos bioqumicos presentes nas clulas vegetais
possuem nitrognio (ver Captulo 5). Por exemplo, o nitrognio
encontrado nos nucleosdeos fosfato e nos aminocidos que
formam a estrutura dos cidos nuclicos e das protnas, respec-
tivamente. Apenas elementos como o oxignio, o carbono e o
hidrognio so mais abundantes nas plantas que o nitrognio. A
maioria dos ecossistemas naturais e agrrios apresneta um ex-
pressivo ganho na produtividade aps serem fertilizados com ni-
trognio inorgnico, atestando a importncia desse elemento.
Nesta seo, tanto o ciclo biogeoqumico do netrognio.
O papel crucial da fixao de nitrognio na converso do ni-
trognio molecular em amnio e em nitrato, quanto o destino
do nitrato e do amnio nos tecidos vegetais sero discutidos.
O nitrognio transformado em diferentes formas no
ciclo biogeoqumico
O nitrognio est presente em diversas formas na biosfera. A
atmosfera contm uma vasta quantidade (cerca de 78% por vol-
ume) de nitrognio molecular (N
2
) (ver Captulo 9). Porm, esse
grande reservatrio de nitrognio no est diretamente disponvel
para os organismos vivos. A obteno de nitrognio da atamos-
fera requer a quebra de uma ligao tripla covalente de excepcio-
nal estabilidade, entre os dois tomos de nitrognio (NN) para
produzir amnia (NH
3
) ou nitrato (NO
3
). Tais reaes, conhecidas

como fixao do nitrognio, podem ser obtidas por processo
industrial e por processo natural.
Sob elevadas temperaturas (cerca de 200 C) e alta presso
(cerca de 200 atmosferas), o N
2
combina-se com hidrognio
formando amnia. As condies extremas so necessrias para
superar a alta energia de ativao da reao. Essa reao de
fixao de nitrognio, conhecida como processo Haber-Bosch,
o ponto de partida para a fabricao de muitos produtos para
a indstria e agricultura. Indstrias em todo o mundo produzem
mais de 80 x 10
12
g ano
-1
de fertilizantes nitrogenados (FAO-
STAT, 2001).
Os processos naturais fixam cerca de 190 x 10
12
g ano
-1

de nitrognio (Tabela 12.1) por meio dos seguintes processos
(Schlesinger, 1997):
TABELA 12.1
Principais processos do ciclo biogeoqumico do nitrognio
Processo Denio
Taxa
(10
12
g ano
-1
)
a
Fixao industrial Converso industrial do nitrognio molecular em amnia 80
Fixao atmosfrica Converso fotoqumica e plos relmpagos do nitrognio molecular em nitrato 19
Fixao biolgica Converso do nitrognio molecular em amnia pelos procariontes 170
Aquisio pelos vegetais Absoro e assimilao do amnio ou nitrato pelos vegetais 1200
Imobilizao Absoro e assimilao do amnio ou nitrato por microrganismos N/C
Amonicao Ao de bactrias e fungos no catabolismo da matria orgnica do solo em amnio N/C
Nitricao Oxidao bacteriana (Nitrosomonas sp.) do amnio em nitrito e a posterior
oxidao pelas bactrias (Nitrobacter sp.) do nitrito em nitrato
N/C
Mineralizao Ao das bactrias e fungos no catabolismo da matria orgnica do solo em
nitrognio mineral, por meio da amonicao ou nitricao
N/C
Volatilizao Perda fsica do gs amnia para a atmosfera 100
Fixao do amnio Ligao fsica do amnio nas partculas do solo 10
Desnitricao Converso bacteriana do nitrato em xido nitroso e nitrognio molecular 210
Lixiviao do nitrato Escoamento fsico do nitrato dissolvido no lenol de gua das camadas superi-
ores do solo e eventualmente para os oceanos
36
Nota: Organismos terrestres, do solo e dos oceanos contm cerca de 5,2x10
15
g e 95x10
15
g e 6,5x10
15
g, respectivamente, de nitrognio orgnico que
ativo no ciclo. Admitindo que a quantidade de N
2
na atmosfera permanece constante (entrada=sada), o tempo mdio de residncia (o tempo mdio que
a molcula de nitrognio permanece na forma orgnica) cerca de 370 anos [(tamanho do pool)/(fixao input)=(5,210
15
g + 95x10
15
g)/(80x10
12
g
ano
-1
+19x10
12
g ano
-1
+ 170x10
12
g ano
-1
)] (Schlesinger, 1997).
a
N/C no-calculado.
3 Assimilao de nutrientes minerais
Relmpagos. Os relmpagos so responsveis por aproxi-
madamente 8% do nitrognio fixado. Convertem o vapor
de gua e oxignio em radicais hidroxilas livres altamen-
te reativos, em tomos de hidrognio livre e em tomos
de oxignio livre, que atacam o nitrognio molecular (N
2
)
para formar o cido ntrico (HNO
3
). Posteriormente, esse
cido ntrico precipita sobre a Terra junto com a chuva.
Reaes fotoqumicas. Cerca de 2% do nitrognio fixado
derivado de reaes fotoqumicas entre o xido ntrico
gasoso (NO) e o oznio (O
3
), produzindo o cido ntrico
(HNO
3
).
Fixao biolgica do nitrognio. Noventa por cento
(90%) do nitrognio restante resultam da fixao biolgi-
ca, nos quais as bactrias ou algas azuis (cianobactrias)
fixam o N
2
em amnio (NH
4
+
).
Do ponto de vista agrcola, a fixao biolgica do nitrognio
crtica, pois, raramente, a produo industrial de fertilizantes
base de nitrognio supre a demanda agrcola (FAOSTAT, 2001).
Uma vez fixado em amnio ou nitrato, o nitrognio entra
no ciclo biogeoqumico, passando por vrias formas orgnica
ou inorgnicas antes de eventualmente retornar forma de ni-
trognio molecular (Figura 12.1; Tabela 12.1). Os ons amnio
(NH
4
+
) e nitrato (NO
3
) gerados pela fixao ou liberados por de-

composio da matria orgnica do solo, tornam-se objetos de
intensa competio entre plantas e microrganismos. Para per-
manecerem competitivos, os vegetais desenvolveram mecanis-
mos para capturar esses ons, a partir da soluo do solo, to
rpido quanto possvel (ver Captulo 5). Sob as concentraes
elevadas no solo, que ocorrem aps a fertilizao, a absoro do
amnio e do nitrato pelas razes pode exceder a capacidade de
uma planta em assimilar esses ons, levando ao seu acmulo nos
tecidos vegetais.
O amnio ou o nitrato armazenados podem ser txicos
As plantas podem acumular altos nveis de nitrato ou po-
dem transloc-lo atravs dos tecidos sem efeitos prejudiciais.
Entretanto, se os animais e os homens consumirem material
vegetal com altos nveis de nitrato, eles podem sofrer de me-
temoglobinemia, uma doena na qual o fgado reduz o nitrato
a nitrito, o que se combina coma hemoglobina, resultando em
uma hemoglobina incapaz de se combinar com o oxignio. O
homem e os outros animais so capazes tambm de converter
nitrato em nitrosaminas, as quais so potentes carcinognicos.
Nesse sentido, alguns pases impem limites nos nveis de ni-
trato nos vegetais que so consumidos pelo homem.
Em comparao com o nitrato, altos nveis de amnio so
txicos tanto para as plantas quanto para os animais. O amnio
capaz de dissipar os gradientes de prtons transmembrana
(Figura 12.2) necessrios ao transporte de eltrons na fotossn-
tese e na respirao (ver Captulos 7 e 11), assim como para a
FIGURA 12.1 Ciclo do nitrognio. O nitrognio da atimosfera varia desde a forma gasosa de ons reduzidos, antes de ser incorporado a com-
postos orgnicos nos organismos vivos. Algumas etapas envolvidas no ciclo do nitrognio esto representadas.
4 Captulo 12
captura de metablitos nos vacolos (ver Captulo 6). Devido ao
perigo que representam os altos nveis de amnio, os animais
desenvolveram uma forte averso ao seu odor. Como exem-
plo, pode-se citar os sais-de-cheiro, composto por carbonato de
amnio, um vapor medicinal liberado sob o nariz para animar
pessoas desfalecidas. As plantas assimilam o amnio prximo
da regio de absoro ou produo e rapidamente armazenam
qualquer excesso nos vacolos para evitar efeitos txicos nas
membranas e no citosol.
Na prxima seo, ser discutido o processo pelo qual o
nitrato, absorvido pelas razes por meio de um transportador de
H
+
-NO
3
do tipo simporte (ver o Captulo 6 para a discusso

sobre simprote), assimilado em compostos orgnicos e os pro-
cessos enzimticos responsveis pela reduo do nitrato primei-
ramente em nitrito e depois em amnio.
ASSI MI LAO DO NI TRATO
As plantas assimilam a maioria do nitrato absorvido por suas
razes em compostos orgncios nitrogenados. A primeira etapa
do processo a reduo do nitrato em nitrito no citoplasma
(Oaks, 1994). A enzima nitrato redutase catalisa esta reao:
NO
3
+ NAD(P)H + H
+
+ 2e

NO
2
+ NAD(P)
+
+ H
2
O (12,1)
Onde NAD(P)H indica NADH ou NADPH. A forma mais co-
mum da enzima nitrato redutase utiliza somente o NADH como
doador de eltrons; outra forma da enzima, encontrada predomi-
nantemente em tecidos no-clorofilados, como razes, pode usar
tanto o NADH quanto o NADPH (Warner e Kleinhofs, 1992).
As nitrato reduases das plantas superiores so formadas por
duas subunidades idnticas com trs grupos prostticos cada:
FAD (flavina andenina dinucleotdeo), heme e um complexo for-
mado entre o molibdnio e uma molcula orgnica denominada
pterina (Mendel e Stallmeyer, 1995; Campbell, 1999).
FIGURA 12.2 A toxicidade do NH
4
+
pode dissipar os gradientes de
pH. O lado esquerdo representa o estroma, a matriz mitocondrial ou
o citoplasma, onde o pH mais elevado. O lado direito representa o
lume, o espao intermembrana ou o vacolo, onde o pH mais baixo;
a membrana representa o tilacide do cloroplasto, a membrana interna
mitocondrial ou o tonoplasto do vacolo de uma clula de raiz. O re-
sultado lquido da reao mostra que as concentraes de OH
do lado
esquerdo e de H
+
do lado direito diminuram, isto , o gradiente de pH
foi dissipado (segundo Bloom, 1997).
FIGURA 12.3 Modelo do dmero da nitrato redutase indicando os trs
domnios de ligao, dos quais as seqncias de polipeptdeos so simil-
ares nos eucariontes: complexo molibdnio (CoMo), grupo heme e FAD;
O NADH liga-se ao domnio de ligao do FAD de cada subunidade e
inicia a transferncia de dois eltrons a partir do grupo carboxila ter-
minal (C), atravs de cada elemento de transferncia de eltrons, at o
grupo amino terminal (N). O nitrato reduzido no complexo molibdnio
prximo regio amino terminal. As seqncias dos polipeptdeos nas
regies hinge so altamente variveis entrea as espcies.
Nitrato redutase a principal protena contendo molibdnio
encontrada nos tecidos vegetativos e um dos sintomas da defi-
cincia do molibdnio o acmulo de nitrato, devido diminu-
io da atividade da nitrato redutase.
A comparao entre as seqncias de aminocidos da ni-
trato redutase de diversas espcies com aquelas de outras pro-
tenas j caracterizadas que se ligam ao FAD, heme ou ao molib-
dnio, resultou em um modelo para a nitrato redutase com trs
domnios apresentados na Figuar 12.3. O domnio de ligao
do FAD aceita dois eltrons do NADH ou do NADPH. Os el-
trons so deslocados pelo domnio heme para o complexo mo-
libdnio, onde so transferidos para o nitrato.
O nitrato, a luz e os carboidratos regulam a nitrato
redutase
O nitrato, a luz e os carboidratos interferem na nitrato redutase
em nvel de transcrio e traduo (Sivasankar e Oaks, 1996). Em
plntulas de cevada, o mRNA da nitrato redutase foi detectado
aproximadamente 40 minutos aps a adio do nitrato, sendo os
nveis mximos obtidos em trs horas (Figura 12.4). Ao contr rio
Alto pH Membrana
Estroma, matriz
ou citoplasma
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
H
+
H
+
H
+
H
+
H
+
H
+
H
+
H
+
H
+
NH
3
+
H
2
O
NH
4
+
NH
3
NH
4
+
+
Baixo pH
Lume, espao
intermembrana ou vaclo
Em pH alto, o NH
4
+
reage com o OH

para formar NH
3
.
NH
3
permevel

membrana e se
difunde por
intermdio dessa, de
acordo com o seu
gradiente de
concentrao.
NH
3
reage com o H
+
para formar NH
4
+
.
O
HN
N
N N H
2
N
Uma pterina (completamente oxidada)
Nitrato redutase
N Terminal Regies hinge C Terminal
2
2
NO
3
NO
3
MoCo
MoCo
Heme
Heme
FAD
FAD
NADH
NADH
e

do rpido acmulo do do mRNA, houve um incremento gradual
linear na atividade da nitrato redutase, refletindo a sntese mais
lenta da protena.
Alm disso, a protena sofre tambm uma modulao ps-
traduo (envolvendo um fosforilao reversvel) anloga regula-
o da sacarose fosfato sintase (ver Captulos 8 e 10). A luz e os
nveis de carboidratos, alm de outros fatores ambientais, estimu-
lam a protena fosfatase, que desfosforila vrios resduos de serina
na protena nitrato redutase, promovendo a ativao da enzima.
Agindo na direo inversa, o escuro e o Mg
+
estimulam a
protena quinase, a qual fosforila os mesmo resduos de serina,
interagindo com a protena inibidora 14-3-3 e inativando a nitra-
to redutase (Kaiser e cols., 1999). A regulao da atividade da
nitrato redutase atravs da fosforilao e da desfosforilao
possibilita um controle mais rpido do que o obtido atravs
da sntese ou degradao da enzima (minutos versus horas).
A nitrito redutase converte o nitrito em amnio
O nitrito (NO
2
) um on altamente reativo e potencialmente

txico. As clulas vegetais transportam rapidamente o nitrito
originado pela reduo do nitrato (ver Equao 12.1) do citosol
para o interior dos cloroplastos nas folhas e nos plastdeos nas
razes. Nessas organelas, a enzima nitrito redutase reduz o ni-
trito a amnio de acordo com a seguinte reao geral:
sistem de um nico poliperptdeo com dois grupos prostticos:
um grupo ferro-enxofre, Fe
4
S
4
, e um grupo heme especializado
(Siegel e Wilkerson, 1989). Tais grupos agem conjuntamente
ligando-se ao nitrito e o reduzindo-o diretamente a amnio, sem
aculular compostos nitrogenados em estado redox intermedir
ios. O fluxo de eltrons pela ferredoxina, Fe
4
S
4
, e heme oodem
ser representados, conforme a Figura 12.5.
A nitrito redutase codifica no ncleo e sintetizada no cito-
plasma, apresentando um peptdeo de trnsito N-terminal que
direciona o seu deslocamento para os plastdeos (Wray, 1993).
Enquanto o NO
3
e a luz induzem a transcrio do mRNA da

nitrito redutase, os produtos finais do processo asparagina e
glutamina reprimem essa induo.
As plantas podem assimilar nitrato tanto nas razes
quanto nas partes areas
Em muitas plantas, quando as razes recebem pequenas
quantidade de nitrato, o mesmo reduzido principalmente nes-
ses rgos. medida que o suprimento de nitrato aumenta,
uma proporo maior do nitrato absorvido translocado para
as partes areas onde ser assimilado (Marschner, 1995). Mesmo
sob condies similares de disponibilidade do nitrato, o balano do
metabolismo do nitrato entre razes e a parte area conforme
FIGURA 12.4 O aumento da atividade da nitrato
redutase resulta da induo da sntese do mRNA da
enzima em partes areas e razes de cevada; gmf,
grama de massa fresca (Kleinhofs e cols., 1989).
NO
2
+ 6 Fdred + 8 H
+
+ 6 e

NH
4
+
+ 6 Fd
ox
+ 2 H
2
O (12.2)
Onde o Fd representa a ferredoxina e os
smbolos subscritos red e ox, forma reduz-
ida e oxidade, respectivamente. A ferredo-
xina reduzida deriva do transporte de el-
trons da fotossntese nos cloroplastos (ver
Captulo 7) e do NADPH gerado pela via
da oxidao da pentose fosfato nos tecidos
no-clorofilados (ver Captulo 11).
Tanto os cloroplastos quanto os plas-
tdeos das razes possuem diferentes formas
da enzima, contudo ambas as formas con-
FIGURA 12.5 Modelo do acoplamento do fluxo de eltrons da fotossntese, via ferredoxina,
com a reduo do nitrito pela nitrito redutase. A enzima nitrito redutase possui dois grupos
prostticos, Fe
4
S
4
e heme, os quais participam na reduo do nitrito a amnio.
Luz
Ferredoxina
(reduzida)
(Fe
4
S
4
)
Heme
Nitrito redutase
e
H
+
NO
2
Nitrito
NH
4
+
Amnio
Ferredoxina
e
(oxidada)
Reao luminosa
da fotossntese
100
80
60
40
20
0 4 8 12 16 20 24
5
10
15
20
mRA
nas razes
mRA nas
partes areas
Nitrato redutase nas razes
Tempo Aps a induo (horas)
Nitrato
redutase
nas partes
areas
N
v
e
s

R
e
l
a
t
i
v
o
s

d
o

m
R
N
A

d
a
n
i
t
r
a
t
o

r
e
d
u
t
a
s
e

(
%
)
A
t
i
v
i
d
a
d
e

d
a

n
i
t
r
a
t
o

r
e
d
u
t
a
s
e
(
m
o
l

g
m
f
1

h
1
)
6 Captulo 12
indicado pela proporo da atividade da nitrato redutase em
cada um dos dois rgos ou pelas concentraes relativas do
nitrato e do nitrognio reduzido na seiva do xilema varia de
espcie para espcie.
Nas plantas como o cardo (Xanthium strumarium), o me-
tabolismo dos nitratos restrito s partes areas; em outras
plantas, como o tremoo branco (Lupinus albus), a maior parte
do nitrato metabolizado nas razes (Figura 12.6); Em geral, as
espcies nativas de regies de clima temperado dependem mais
intensamente da assimilao do nitrato pelas razes do que as
espcies das regies tropicais e subtropicais.
ASSI MI LAO DO AMNI O
As clulas vegetais evitam a toxicidade do amnio pela rpida
converso do amnio gerado a partir da assimilao do nitrato ou
da fotorrespirao (ver Captulo 8) em aminocidos. A principal via
para esta converso envolve a ao seqencial da glutamina sin-
tetase e da glutamato sintase (Lea e cols., 1992). Nesta seo sero
discutidos os processos enzimticos responsveis pela assimilao
do amnio em aminocidos essenciais, alm do papel das amidas
na regulao do metabolismo do nitrognio e do carbono.
A converso do amnio em aminocidos requer duas
enzimas
A glutamina sintetase (GS) combina o amnio com o gluta-
mato para formar a glutamina (Figura 12.7A):
Glutamato + NH
4
+

+ ATP
Glutamina + ADP +Pi (12.3)
Esta reao necessita a hidrlise de uma molcula de ATP e
envolve um ction bivalente, como o Mg
2
+
, Mn
2
+
ou Co
2
+
como
co-fator. As plantas possuem duas classe de GS, uma no citosol
e a outra nos plastdeos das razes ou nos cloroplastos das partes
areas. As formas citoslicas so expressas durante a germinao
de sementes ou no feixe vascular das razes e partes areas, pro-
duzindo glutamina para o transporte do nitrognio intracelular.
A GS nos plastdeos das razes forma o nitrognio amida que
consumido localmente, enquanto que a GS dos cloroplastos das
partes areas reassimila o NH
4
+
da fotorrespirao (Lam e cols.,
1996). Tanto os nveis de carboidratos quanto os de luz alteram a
expresso das formas dessa enzima presentes nos plastdeos, mas
apresentam pouco efeito nas formas citoslicas.
Os nveis elevados de glutamina nos plastdeos estimulam
a atividade da glutamoto sintase (conhecido como glutaminas:
2-oxoglutarato aminostransferase, ou GOGAT). Essa enzima
transfere o grupo amida da glutamina para o 2-xooglutarato,
produzindo duas molculas de glutamto (ver Figura 12.7A). As
plantas possuem dosi tipos de GOGAT: um recebe eltrons do
NADH, e o outro eltrons da ferredoxina (Fd):
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Nitrognio nos exsudados do xilema (%)
Nitrato Amidas
Uredas Aminocidos
Cardo
Stellaria media
Trevo branco
Aveia
Milho
Impatiens
Girassol
Cevada
Feijo
Fava
Ervilha
Rabanete
Tremoo branco
Perilla fruticosa
FIGURA 12.6 Quantidade relativas de nitrato e outros compostos nitro-
genados do exsudados do xilema de vrias espcies vegetais. As plantas
foram cultivadas com as suas razes expostas a solues de nitrato e a
seiva do xilema foi coletada por rompimento do caule.
Observe a presena de uredas, compostos nitrogenados especializados, em
feijo e ervilha (que ser discutido posteriormente no texto) (Pate, 1983).
A enzima do tipo NADH (NADH-GOGAT) est localizada
nos plastdeos de tecidos no-fotossintticos como razes ou
feixes vasculares de folhas em desenvolvimento. Nas razes a
NADH-GOGAT est envolvida na assimilao do NH
4
+
absor-
vido da rizosfera (poro do solo localizado prximo a superfcie
das razes), enquanto que, nos feixes vasculares de folhas em
desenvolvimento, a NADH-GOGAT assimila a glutamina trans-
locada das razes ou das folhas senescentes.
A glutamato sintase do tipo ferredoxina-dependente (Fd-GO-
GAT) encontrada nos cloroplastos e age no metabolismo fotor-
respiratrio do nitrognio. Tanto a quantidade da protena quanto
a sua atividade aumentam com os nveis de luz. As razes, em
particular naquelas sob nutrio com nitrato, tm Fd-GOGAT nos
plastdeos. Provavelmente, a finalidade da Fd-GOGAT das razes seja
incorporar a glutamina gerada durante a assimilao do nitrato.
O amnio pode ser assimilado atravs de uma rota alternativa
A glutamato desidrogenase (GDH) catalisa uma reao re-
versvel que sintetiza ou desamina o glutamato (Figura 12.7B):
2-Oxoglutarate + NH
4
+
+ NAD(P)H
gluatamato + H
2
O + NAD(P)
+
(12.6)
Uma forma NADH-dependente do GDH encontrada nas
mitocndrias e uma forma NADPH-dependente ocorre nos clo-
roplastos de rgos fotossintticos. Embora ambas as formas
sejam relativamente abundantes, elas no podem substituir a
rota da GS-GOGAT para a assimilao do omnio, tendo como
funo principal desanimar o glutamato (ver figura 12.7B).
Glutamina + 2-oxoglutarato + NADH + H
+

2 glutamato + NAD
+
(12.4)
Glutamina + 2-oxoglutarato + Fd
red

2 glutamato + Fd
ox
(12.5)
Figura 12.7 Estrutura e rotas de sntese de compostos envolvidos no metabolismo do amnio. O amnio pode ser assimilado por um dos vrios pro-
cessos. (A) A rota da GS-GOGAT que forma a glutamina e glutamato. necessrio um co-fator reduzido para a reao: ferrodoxina nas folhas verdes
e o NADH nos tecidos no-fotossintticos. (B) A rota do GDH que forma o glutamato, utilizando o NADH ou o NADPH como um reagente redutor.
(C) Transferncia do grupo amino do glutamato para o oxalacetato para formar o aspartato (catalisado pela enzima aspartato aminotransferase) . (D)
Sntese da asparagina pela transferncia de um grupo aminocido da glutamina para o aspartato (catalisada pela enzima asparagina sintetase).
(A)
(B)
(C)
(D)
Glutamina
sintetase
COOH
HC NH
2
CH
2
CH
2
C
O
O
+
Amnio
NH
4
+
Glutamato
(GS)
ATP
ADP
+
P
i
Glutamina 2-Oxoglutarato
COOH
HC NH
2
CH
2
CH
2
C
O
NH
2
+
COOH
O
C
CH
2
CH
2
C O
O
Glutamato
sintase
(GOGAT)
COOH
CH
2
C
O
CH
2
HC NH
2
COOH
HC NH
2
CH
2
CH
2
O
C
O
NADH + H
+
+
ou
Fd
red
Fd
ox
2 Glutamatos
O
NAD
+
ou
COOH
C O
CH
2
CH
2
C O
O
+
Amnio
NH
4
+
Glutamato
desidrogenase
(GDH)
COOH
HC NH
2
+ H2O
O
CH
2
CH
2
C O
2-Oxoglutarato Glutamatos
NAD(P)H NAD(P)
+
COOH
HC NH
2
+
CH
2
CH
2
C O
O
Glutamato Oxalacetato Aspartato 2-Oxoglutarato
COOH
C O
CH
2
C O
O
Aspartato
aminotransferase
Asp-AT
NH
2
C
CH
2
C O
COOH
O
COOH
CH
2
CH
2
C O
O
C O
Asparagina
sintetase
(AS)
NH
2
COOH
HC NH
2
+
CH
2
CH
2
C
O
COOH
C NH
2
CH
2
C O
Glutamina Aspartato Asparagina Glutamato

ATP
ADP
+
PP
i
COOH
HC NH
2
+
CH
2
NH
2
C
O O
COOH
HC NH
2
CH
2
CH
2
C O
O
8 Captulo 12
As reaes de transaminao transferem o nitrognio
Uma vez assimilado em glutamina e glutamato, o nitrognio
incorporado em outros aminocidos por meio de reaes de trans-
aminao. As enzimas que catalisam tais reaes so conhecidas
como aminotransferases. Um exemplo o aspartato aminotrans-
ferase (Asp-AT), que catalisa a seguinte reao (Figura 12.7C):
Glutamato + oxalacetato
aspartato + 2-oxoglutarato (12.7)
no qual o grupo amino do glutamato transferido para o tomo
carboxil do aspartato. O aspartato um aminocido que participa
do transporte malato-aspartato, no processo de transferncia de
equivalentes redutores das mitocndrias e cloroplastos para o cito-
sol (ver Captulo 11) e no transporte do carbono a partir das clulas
do mesofilo at a bainha do feixe vascular no processo de fixao
C4 do carbono (ver Captulo 8). Todas as reaes de transamina-
o requerem o piridoxal fosfato (vitamina B
6
) como co-fator.
As aminotransferases so encontradas no citoplasma, nos
cloroplastos, nas mitocrndrias, nos glioxissomos e nos peroxis-
somos. As aminotransferases localizadas nos cloroplastos podem
desempenhar um importante papel na biossntese dos amino-
cidos, pois folhas ou cloroplastos isolados expostos ao dixido
de carbono marcado radiotivamente, incorporam com rapidez a
marca em glutamato, aspartato, alanina, serina e glicina.
A asparagina e a glutamina unem o metabolismo do
carbono e do nitrognio
A asparagina, isolada pela primeira vez do aspargo em
1806, foi a primeira amida a ser identificada (lam e cols. 1996).
Esse aminocido no atua apenas como um precursor de prote-
na, mas como um elemento-chave no transporte e no armaze-
namento do nitrognio, devido sua estabilidade a alta razo
nitrognio:carbono (2N para 4C da asparagina, contra 2N para
5C da glutamina e 1N para 5C do glutamato).
A principal rota para a sntese da asparagina envolve a tran-
ferncia do nitrognio amida da glutamina para a asparagina
(Figura 12.7D):
Glutamina + aspartato + ATP
asparagina + glutamato + AMP + PP
i
(12.8)
A asparagina sintetase (AS), a enzima que catalisa esta
reao, encontrada no citosol das clulas das folhas e razes e
nos ndulos que fixam o nitrognio (ver a aproxima seo). Em
razes de milho, , sobretudo aquelas sob nveis potencialmente
txicos de amnia, o amnio pode substituir a glutamina como
fonte do grupo amina (Sivankar e Oaks, 1996).
Altos nveis de luz e carboidratos condies que estimulam
a GS e a Fd-GOGAT dos plastdeos inibem a expresso dos
genes que codoficam AS e a atividade da enzima. A regulao
antagnica dessas rotas competitivas auxilia no balano do me-
tabolismo do carbono e do nitrognio nos vegetais (Lam e cols.,
1996). As condies de ampla energia (i. , com altos nveis de
luz e de carboidratos) estimulam a GS e a GOGAT, inibem a AS
e assim favorecem a assimilao do nitrognio em glutamina e
em glutamato, compostos ricos em carbono e que participam na
sntese de novos compostos nos vegetais.
Por comparao, em condies limitadas de energia ocorre a
inibio da GS e da GOGAT e a estimulao da AS, resultando na
assimilao favorvel do nitrognio em asparagina, um composto
rico em nitrognio e suficientemente estvel para ser transporta-
do em longas distncias e armazenado por muito tempo.
FI XAO BI OLGI CA DO NI TROGNI O
A fixao biolgica representa a forma mais importante de
fixar o nitrognio atmosfrico N2 em amnio, representando,
assim, o ponto-chave do ingresso do nitrognio molecular no ci-
clo biogeoqumico do nitrognio (ver Figura 12.1). Nesta seo,
sero abordadas as propriedades das enzimas nitrogenases,
responsveis pela fixao do nitrognio, as reaes simbiontes
entre organismos fixadores do nitrognio e plantas superiores, a
formao de estruturas especializadas nas razes infectadas por
bactrias fixadores de nitrognio pelos procariontes simbiontes
e seus hospedeiros.
Bactrias xadoras de nitrognio de vida livre e
simbiontes
Conforme j mencionado, certas bactrias podem converter o
nitrognio atmosfrico em amnio (Tabela 12.2). A maior parte
desses organismos procariontes fixadores de nitrognio tem vida
livre no solo. Poucos formam associaes simbiontes com plantas
superiores, nas quais o procarionte fornece diretamente planta
hospedeira o nitrognio fixado em troca de outros nutrientes e
carboidratos (Tabela 12.2). Tais simbioses ocorrem nos ndulos
formados nas razes dos vegetais contendo bactrias fixadoras.
O tipo mais comum de simbiose ocorre entre as espcies da
famlia Leguminosae e as bactrias de solo dos gneros Azorhi-
zobium, Bradyrhizobium, Photorhizobium, Rhizobium e Sino-
rhizobium (coletivamente chamados rizbios; Tabela 12.3 e
Figura 12.8). Outro tipo comum de simbiose ocorre entre vrias
espcies de plantas lenhosas, como rvores do gnero Alnus, e
bactrias do solo do gnero Frankia. Podem ser encontrados,
ainda, outros tipos de associaes entre herbceas da Amrica
do Sul do gnero Gunnera e pteridfitas do gnero Azolla, as
quais formam associaes com cianobactrias Nostoc e Ana-
baena, respectivamente (ver Tabela 12.2 e Figura 12.9).
A xao do nitrognio requer condies anaerbicas
Em decorrncia da irreversvel inativao que o oxignio provo-
ca na enzima nitrogenase, envolvida na fixao do nitrognio, este
deve ser fixado sob condies anaerbicas. Assim, cada organis-
mo fixador de nitrognio listado na Tabela 12.2 funciona em condi-
es naturais de ausncia de oxignio ou desenvolve condies
internas de anaerobiose, mesmo na presena do oxignio.
Nas cianobactrias, as condies de anaerobiose so criadas
em clulas especializadas denominadas heterocistos (ver Figura
12.9). Os heterocistos so clulas com paredes espessadas,
que se diferenciam quando as cianobactrias filamentosas so
privadas do NH4+. Tais clulas no apresentam o fotossistema
II, o qual produz o oxignio nos cloroplastos (ver Captulo 7); as-
sim, elas no produzem oxignio (Burris, 1976). Os heterocistos
parecem representar uma adaptao para que ocorra a fixao
do nitrognio, sendo largamente encontrados entre as cianobac-
trias aerbicas fixadoras do nitrognio.
TABELA 12.3
Associaes entre plantas hospedeiras e rizbios
Planta hospedeira Rizbios simbiontes
Parasponia (no-leguminosa, antigamente
chamada de Trema)
Bradyrhyzobium spp.
Soja (Glycine max) Bradyrhyzobium japonicum (tipo com crescimento lento)
Sinorhizobium fredii (tipo com crescimento rpido)
Alfafa (Medicago sativa) Sinorhizobium meliloti
Sesbania (aqutica) Azorhizobium (forma ndulos nas razes e no caule; no caule se desenvolvem
razes adventcias)
Feijo (Phaseolus) Rhizobium leguminosarum bv. phaseoli; Rhizobium tropicii; Rhizobium etli
Trevo (Trifolium) Rhizobium leguminosarum bv. trifolii
Ervilha (Pisum sativum) Rhizobium leguminosarum bv. viciae
Aeschenomene (aqutica) Photorhizobium (rizbios fotossinteticamente ativos, que formam ndulos no caule,
provavelmente associados a razes adventcias)
TABELA 12.2
Exemplos de organismos que podem realizar a xao do nitrognio
Fixao simbionte do nitrognio
Planta hospedeira Fixao simbionte de N
Legumes: leguminosas e Parasponia Azorhizobium, Bradyrhizobium, Photorhizobium, Rhizobium,
Sinorhizobium
Actinorrzicas: Alnus (rvore), Ceanothus (arbusto), Ca-
suarina (rvore), Datisca (arbusto)
Frankia
Gunnera Nostoc
Azolla (pteridta aqutica) Anabaena
Cana-de-acar Acetobacter
Fixadores de nitrognio de vida livre
Tipo Gneros xadores de N
Cianobactrias (algas azuis-esverdeadas) Anabaena, Calothrix, Nostoc
Outras bactrias
Aerbicas Azospirillum, Azotobacter, Beijerinckia, Derxia Bacillus Klesbsiella
Facultativas Bacillus Klebsiella
Anaerbicas
No-tossintetizantes Clostridium, Methanococcus (Archaebacteria)
Fotossintetizantes Chromatium, Rhodospirillum
As cianobactrias podem fixar o nitrognio em condies de
anaerobiose, como aquelas encontradas em campos alagados. Nos
pases asiticos, ambos os tipos de cianobactrias fixadoras do ni-
trognio, com ou sem os heterocistos, representam o princ ipal
modo de manuteno de um suprimento adequado de nitrognio
no solo das plantaes de arroz. Esses microrganismos fixam o
nitrognio quando os campos esto alagados e morrem quando
secam, liberando o nitrognio fixado para o solo. Uma outra fonte
importante de nitrognio em campos alagados cultivador com ar-
roz a pteridfita aqutica Azolla, a qual se associa com a ciano-
bactria Anabaena. A associao Azolla-Anabaena pode fixar 0,5
Kg de nitrognio atmosfrico por hectare/dia, uma taxa de fertil-
izao suficiente para manter uma lavoura de arroz.
As bactrias de vida livre, capazes de fixar nitrognio, podem
ser aerbicas, facultativas ou anaerbicas (ver Tabela 12.2)
Bactrias aerbicas fixadoras de nitrognio, como a Azoto-
bacter, mantm condies reduzidas de oxignio (condies
10 Captulo 12
microaerbicas) por meio das suas altas taxas de respirao
(Burris, 1976). Outras, como a Gloeothece, liberam o O2 fo-
tossinttico durante o dia e fixam o nitrognio durante a noite.
Organismos facultativos capazes de crescer sob condi-
es aerbicas e anaerbicas, geralmente fixando o nitro-
gnio somente sob condies anaerbicas.
Para as bactrias anaerbicas fixadoras de nitrognio, o
oxignio no representa um problema, pois est ausente
no ambiente. Tais organismos podem ser tanto fotossin-
tetizantes (como Rhodospirillum) quanto no-fotossinte-
tizantes (como Clostridium).
A xao simbionte do nitrognio ocorre em estrututas
especializadas
Os organismos procariontes simbiontes fixadores de nitrognio
ocorrem no interior de ndulos, rgos especiais da planta hospe-
deira que contm as bactrias fixadoras (ver Figura 12.8). No caso
do gnero Gunnera, esses rgos ocorrem em glndulas do caule,
que se desenvolvem independentemente do organismo simbionte.
No caso das leguminosas e das plantas actinorrzicas, as bactrias
fixadoras de nitrognio induzem a formao de ndulos nas razes.
As gramneas tambm podem desenvolver relaes simbi-
ontes com organismos fixadores de nitrognio, mas nessas as-
sociaes os ndulos no so produzidos. No caso, a bactria
fixadora de nitrognio coloniza os tecidos do vegetal ou se an-
cora na superfcie da raiz, principalmente prximas da zona de
alongamento e dos plos radiculares (ver Glossrio) (Reis e cols.,
2000). Por exemplo, a bactria fixadora de nitrognio Aceto-
bacter diazotrophicus vive no apoplasto dos tecidos do caule de
cana-de-acar e pode suprir o seu hospedeiro com nitrognio
suficiente para garantir a sua independncia de fertilizantes ni-
trogenados. (Dong e cols., 1994). O potencial para aplicao de
Azospirillum em milho e em outros gros tem sido explorado,
porm esse organismo parece fixar pouco nitrognio quando
associado a plantas (Vande Broek e Vanderleyden, 1995).
As plantas leguminosas e actinorrzicas regulam a permea-
bilidade dos gases nos seus ndulos, mantendo ali um nvel de
oxignio que pode sustentar a respirao, mas suficientemente
baixo para evitar a inativao da nitrogenase (Kuzma e cols.,
1993). A permeabilidade gasosa aumenta na luz e decresce sob
condies de seca ou exposio ao nitrato. O mecanismo de
regulao da permeabilidade gasosa ainda no conhecido.
Os ndulos possuem uma heme protena que se liga ao
oxignio chamada de leg-hemoglobina, a qual est presente
em altas concentraes (700 M nos ndulos de soja) no ci-
toplasma das clulas infectadas do ndulo, conferindo a esses
ndulos uma cor rosada. A planta hospedeira produz a poro
globina da leg-hemoglobina em resposta infeco pela bactria
(Marschner, 1995); a bactria simbionte produz a poro heme.
A leg-hemoglobina apresenta uma alta afinidade pelo oxignio
(K
m
de aproximadamente 0,01 M), cerca de 10 vezes mais alta
do que a cadeia da hemoglobina humana.
Embora se acreditasse que a leg-hemoglobina agisse como
um tampo para o oxignio do ndulo, estudos recentes indi-
cam que ela armazena uma quantidade suficiente de oxignio
para a manuteno da respirao nodular por poucos segundos
(Denison e Harter, 1995). Sua funo auxiliar o transporte do
oxignio para a respirao das clulas bacterianas simbiticas,
de maneira anloga ao transporte de oxignio realizado pela he-
moglobina nos tecidos dos animais (Ludwig e de Vries, 1986).
O estabelecimento da simbiose requer uma troca de
sinais
A simbiose entre as leguminosas e os rizbios no ob-
rigatria. As plntulas de leguminosas desenvolvem-se sem
qualquer associao com rizbios e podem permanecer em tal
condio durante todo seu ciclo de vida. Os rizbios tambm
ocorrem como organismos de vida livre no solo. Entretanto, sob
condies limitantes de nitrognio, os simbiontes procuram uns
aos outros, por meio de uma elaborada troca de sinais. A sina-
lizao, o processo de infeco e o desenvolvimento de ndu-
los fixadores de nitrognio envolvem genes especficos tanto da
planta hospedeira quanto dos simbiontes.
Os genes vegetais especficos de ndulos so denominados
genes nodulinos (Nod), enquanto que os genes dos rizbios
participan tes da formao dos ndulos so chamados de genes de
nodulao (nod) (Heidstra e Bisseling, 1996). Os genes nod so
classificados de nod gerais e genes nod hospedeiro-especfico. Os
genes nod gerais nodA, nodB e nodC so encontrados em
todas as cepas de rizbios, enquanto os genes nod hospedeiro-es-
pecfico Como nodP, nodQ e nodH, ou os nodF, nodE e nodL ,
diferem entre as espcies de rizbios e determinam o tipo de hospe-
deiros. Somente um dos genes nod, o gene regulador nodD, con-
stitutivamente expresso e, como ser explicado em detalhe, o seu
produto proteco (NodD) regula a transcrio de outros genes nod.
O primeiro estdio no estabelecimento da relao simbionte
entre a bactria fixadora de nitrognio e seu hospedeiro a mig-
rao da bactria em direo as razes da planta hospedeira. Esta
migrao uma resposta quimiottica, mediada por atrativos
qumicos, em especial (isso)flavonides e betanas, secretados
pelas razes. Tais atrativos ativam a protena do rizbio NodD, a
qual induz a transcrio de outros neges nod (Phillips e Kapulnik,
1995). A regio promotora de todos os operons nod, exceto a
do nodD, possui seqncias altamente conservadas chamadas
de nod box. A ligao da NodD ao nod box induz a transcrio
de outros neges nod.
Os fatores Nod produzidos pela bactria atuam como
sinalizadores para a simbiose
Os genes nod ativados pelo NodD codificam as protenas de
nodulao, cuja maioria est envolvida na biossntese dos fatores
Nod, os quais so molculas sinalizadoras oligossa car deos de
lipoquitina, que apresentam uma quitina -14 ligada a um es-
queleto N-acetil-D-glicosamina (variando em comprimento de
trs a seis unidades de acar), alm de uma cadeia acil lipdica na
posio C-2 do acar no-redutor (Figura 12.10).
Trs dos genes nod (nodD e nodC) codificam as enzimas
(NodA, NodB e NodC, respectivamente) necessrias sntese
dessa estrutura (Stokkermans e cols., 1995):
1. A NodA uma N-aciltransferase que catalisa a adio da
cadeia acil lipdica.
2. A NodB uma desacetilase quitina-oligossacardeo que re-
move o grupo acetil de um acar terminal no-redutor.
3. A NodC uma sintase quitina-oligossacardeo que liga os
monmeros de N-acetil-D-glicosamina.
Os genes nod hospedeiro-especficos que variam entre as
espcies de rizbios esto envolvidos na modificao das cadeia
acil lipdica ou na adio de grupos importantes na determina-
o da especificidade do hospedeiro (Carlson e cols., 1995):
NodE e NodF determinam o comprimento e o grau de satu-
rao da cadeia acil lipdica; aquelas de Rhizobium legumino-
sarum bv. Viciae e R. meliloti resultam na sntese de grupos
acil lipdicos de 18:4 e 16:2, respectivamente (rever o Cap-
tulo 11, onde o numero que antecede os dois pontos indica o
nmero total de carbonos na cadeia acil lipdica, enquanto o
nmero posterior indica o nmero de ligaes duplas).
Outras enzimas, como NodL, influenciam a especificida-
de do hospedeiro aos fatores Nod pela adio de substi-
tuies especficas nas pores dos acares redutores e
no redutores do esqueleto de quitina.
FIGURA 12.9 Um filamento de cianobactria fi-
xa dora de nitrognio (Anabaena) com um herero-
cisto. O heterocisto com paredes espessas, inter-
calado entre as cluloas vegetativas, possui um
ambiente interno anaerbico que permite ciano-
bactria fixar nitrogncio em condies aerbicas
(Paul W. Johnson/Biological Photo Service)
FIGURA 12.10 Os fatores Nod so oligossacardeos de lipoquitina. A
cadeia de cido graxo apresenta normalmente de 16 a 18 carbonos. O
nmero de sesses intermedirias repetidas (n) geralmente dois a trs
(segundo Stokkermans e cols., 1995)
CH
2
OH
Hidrognio, Sulfato,
fucose ou 2-O-metil
fucose
Hidrognio
ou glicerol
cido graxo
CH
2
OH CH
2
HO
HO NH HO
O
O
O
O
N
C
CH
3
O
O
O
O
HO N
CH
3
C
n
O
12 Captulo 12
Uma elguminosa hospedeira em particular responde a um
fator Nod especfico. Os receptores da leguminosa para os fa-
tores Nod parecem ser lectinas especiais (protena de ligao
a acar), produzidas nos plos radiculares (van Rhijn e cols.,
1998; Etzler e cols., 1999). Os fatores Nod ativam estas lec-
tinas, aumentando a hidrlise de ligaos fosfoanididrida dos
nucleosideos de e trifosfato. Tal ativao da lectina direciona
os rizbios especficos aos hospedeiros apropriados e facilita a
ligao dos rizbios parede celular do plo radicular.
A formao do ndulo envolve vrios tormnios
Os dois processos infeco e organognese do ndulo ocor-
rem simultaneamente durante a formao do ndulo da raiz. Du-
rante o processo de infeco, os rizbios que esto ligados aos plos
radiculares liberam os fatores Nod, que induzem um pronunciado e
enrolamento das clulas do plo (Figura 12.11 A e B). Os rizbios
tornam-se envolvidos por um pequeno compartimento, formando
pelo enrolamento. A parede celular do plo radicular tambm
degradada nessas regies em resposta aos fatores Nod, permitindo
que as clulas bacterians acessam diretamente superfcie externa
da membrana plasmtica (Lazarowitz e Bisseling, 1997).
A prxima etapa a formao de um canal de infeco
(Figura 12.11 C), uma extenso interna tubular da membrana
plasmtica, que produzida pela fuso de vesculas derivadas
do Gogi no local da infeco. O canal cresce no seu pice pela
fuso de vesculas secretoras na extremidade do tubo. Na regio
mais profunda do crtex, prximo ao xilema, as clulas cortic-
ais desdiferenciam-se e iniciam a diviso, formando uma rea
distinta no crtex, denominada primrdio nodular, a partir do
qual o ndulo ir se desenvolver. Os primrdios nodulares so
formados opostos aos plos do protoxilema do feixe vascular da
raiz (Timmers e cols., 1999) (ver Tpico 12.1 na Internet).
Diferentes compostos de sinalizao, atuando positiva ou
negativamente, controlam a posio do primrdio nodular. O
nucleosdeo uridina difunde-se do estelo para o crtex, na zona
do protoxilema da raiz e estimula a diviso celular (Lazarowitz e
Bisseling, 1997). O etileno sintetizado na regio do periciclo,
difunde-se para o crtex e bloqueia a diviso celular no plo
oposto ao floema da raiz.
O canal de infeco, preenchido pelos rizbios em prolif-
erao, alonga-se atravs do plo radicular e das camadas de
clulas corticais, em direo ao primrdio nodular. Quando o
canal de infeco atinge as clulas especializadas no ndulo,
sua extremidade fusiona-se com a membrana plasmtica da c-
lula hospedeira, liberando clulas bacterianas envoltas por uma
membrana derivada da membrana plasmtica da clula hospe-
deira (ver figura 12.11D). A ramificao do canal de infeco
dentro dos ndulos permite a bactria infectar muitas clulas
(ver figura 12.11E e F)(Maylona e cols., 1995).
Inicialmente, as bactrias continuam a se dividir e a mem-
brana que as envolve aumenta em superfcie para acomodar
esse crescimento pela fuso com vesculas menores. Logo aps,
a partir de um sinal da planta, as bactrias param de se dividir
e comeam a aumentar em tamanho e a se diferenciarem em
organelas endossimbiticas fixadoras de nitrognio denomina-
das bactereriides. A membrana que envolve os bacteriides
chamada de membrana peribacteriide.
O ndulo como um todo desenvolve caractersticas semel-
hantes a um sistema vascular (o qual facilita a troca de nitrognio
fixado produzido pelos bacteriides por nutrientes disponibilizados
pela planta) e uma camada de clulas para excluir o O
2
do interior
do ndulo da raiz. Em algumas leguminosas de clima temperado
(p. ex., ervilhas), os ndulos so alongados e cilndricos, devido
presena de um meristema nodular. Os ndulos de leguminosas
tropicais, como soja e amendoim, no apresentam um meristema
persistente, alm de serem esfricos (Rolfe e Gresshoff, 1988).
O complexo da enzima nitrogenase xa o N2
A fixao biolgica do nitrognio, semelhante fixao in-
dustrial do nitrognio, produz amnia a partir do nitrognio mo-
lecular. A reao geral :
N2 + 8 e- + 8 H+ +16 ATP
2 NH
3
+ H
2
+ 16 ADP + 16 P
i
(12.9)
Observe que a reduo do N
2
a 2NH
3
, uma transferncia de
seis eltrons, est associada reduo de dois prtons para formar
H
2
. O complexo da enzima nitrogenase catalisa essa reao.
O complexo da enzima nitrogenase pode ser separado em
dois componentes a Fe-protena e a MoFe-protena , nen-
huma delas com atividade cataltica prpria (Figura 12.12):
A Fe-protena a menor dos dois componentes e apre-
senta duas subnidades idnticas de 30 a 72 kDa cada,
dependendo do organismo. Cada subunidade contm
um grupo ferro-enxofre (4 Fe e 4 S
2
), que participa nas

reaes redox envolvidas na converso de N
2
em NH
3
.
A Fe-protena irreversivelmente inativada por O
2
com
uma meia-vida caractersitca de 30 a 45 segundos (Dixon
e Wheeler, 1986).
MoFe-protena apresenta quatro subunidades, com massa
molecular total de 180 a 235 kDa, dependendo da esp-
cie. Cada subunidade apresenta dois grupos Mo-Fe-S. A
MoFe-protena tambm inativada pelo oxignio, com a
meia-vida de 10 minutos no ar.
Na reao geral de reduo do nitrognio (ver Figura 12.12),
a ferredoxina atua como um doador de eltrons para Fe-prote-
na, a qual, por sua vez, hidrolisa ATP e reduz a MoFe-protena.
A MoFe-protena pode, ento, reduzir inmeros substratos (Ta-
FIGURA 12.11 O processo de infeco durante a organognse do
ndulo. (A) Os rizbios ligam-se a um plo radicular em formao,
em resposta a atrativos qumicos liberados pela planta. (B) Em res-
posta aos fatores produzidos pela bactria, o plo radicular apresen-
ta um enrolamento anormal e as clulas dos rizbios crescem dentro
dos enrolamentos. (C) A degradao localizada da parede celular do
plo radicular leva infeco e formao do canal de infeco a
partir das vesculas secretoras do Golgi das clulas da raiz. (D) O
canal de infeco atinge a extremidade da clula e sua membrana
fusiona-se com a membranaplasmtica da clula do plo radicular.
(E_ Os rizbios so liberados no apoplasto e penetram no complexo
da lamela mdia da membrana plasmtica da clula suepidrmica,
iniciando um novo canal de infeco, o qual forma um canal aberto
com o primeiro. (F_ O canal de infeco estende-se e se ramifica at
atingir as clulas-alvo, onde as vesculas constitudas por membranas
do vegetal, contendo bactrias, so liberadas no citosol.

bela 12.4), embora, sob condies naturais, ela reaja somente
com N
2
e H
+
. Uma das reaes catalisadas pela nitrogenase, a
reduo do acetileno a etileno, usada para estimar a atividade
da nitrogenase (ver Tpico 12.2 na Internet).
O balano energtico da fixao do nitrognio complexo.
A produo de NH
3
a partir de N
2
e H
2
uma reao exergni-
ca (ver Captulo 2 na Internet) para uma discusso de reaes
exergnicas), com um G (mudana na energia livre) de 27
kJ mol
1
. Entretanto, a produo industrial de NH
3
a partir de
N
2
e H
2
endergnica, necessitando-se um grande input de
energia, devido energia de ativao necessria para quebrar
a ligao tripla do N
2
Pela mesma razo, a reduo enzimtica
do N
2
pela nitrogenase tambm requer um grande investimento
de energia (ver Equao 12.9), embora as mudanas exatas na
energia livre ainda sejam desconhecidas.
Clculos baseados no metabolismo de carboidrato de legumi-
nosas indicam que a planta consome 12 g de carbono orgnico
por grama de N
2
fixado (Heytler e cols., 1984). Com base na
Equao 12.9, o G para a reao geral da fixao biolgica
do nitrognio cerca de 200 kJ mol
1
. Visto que a reao total
altamente exergnica, a produo de amnio limitada pela
ao lenta (nmero de molculas de N
2
reduzida por unidade de
tempo) do complexo nitrogenase (Ludwig e de Vries, 1986).
Sob condies naturais, quantidades substanciais de H
+
so re-
duzidas ao gs H
2
. Este processo pode competir com a reduo do
N
2
pelos eltrons da nitrogenase. Nos rizbios, 30 a 60% da en-
14 Captulo 12
ergia fornecida para a nitrogenase podem ser perdidos como H
2
,
diminuindo a eficincia da fixao do nitrognio. Alguns rizbios,
entretanto, contm hidrogenase, uma enzina que pode clivar o H
2

formado e gerar eltrons para a reduo do N
2
, aumentando, as-
sim, a eficincia da fixao do nitrognio (Marschner, 1995).
Amidas e uredas so formas transportadas de nitrognio
Os organismos procariontes simbiticos fixadores de ni-
trognio liberam amnia que, para evitar a toxidade, deve ser
rapidamente convertida em formas orgnicas nos ndulos da raiz,
antes de serem transportadas pelo xilema para a parte area.
As leguminosas fixadoras de nitrognio podem ser divididas em
exportadoras de amidas ou exportadoras de uredas, com base
na composio da seiva do xilema. As amidas (principalmente os
aminocidos asparagina e glutamina) so exportadas por legu-
minosas de regies temperadas, tais como ervilha (Pisum), trevo
(Trifolium), fava (Vicia) e lentilha (Lens).
As uredas so exportadas por leguminosas de origem tropi-
cal, tais como a soja (Glycine), o feijo (Phaseolus), o amendoim
(Arachis) e a Vigna. As trs uredas principais so alantona, cido
alantico e citrulina (Figura 12.13). A alantona sintetizada nos
peroxissomos a partir do cido rico, enquanto o cido alantico
sintetizado a partir da alantona no retculo endoplasmtico. O local
de sntese da citrulina a partir do aminocido ornitina no foi ainda
determinado. Os trs compostos so liberados no xilema e trans-
portados para a parte area, onde so rapidamente catabolizados a
amnio. Esse amnio entra na rota de assimilao j descrita.
ASSI MI LAO DE ENXOFRE
O enxofre est entre os elementos mais versteis dos or-
ganismos vivos (Hell, 1997). As pontes dissulfdicas em pro-
tenas exercem funes estruturais e reguladoras (ver Captulo
8). O enxofre participa no transporte de eltrons por meio dos
grupos ferro-enxofre (ver Captulos 7 e 11). Os stios catalticos
de vrias enzimas e co-enzimas, tais como urease e coenzima
A, contm enxofre. Os metablitos secundrios (compostos
que no esto envolvidos nas vias primrias de crescimento
e de desenvolvimento) que contm enxofre variam desde os
fatores Nod rizobiais, discutidos na seo anterior, ao anti-sp-
tico alina encontrado no alho e ao anticarcinognico sulfora-
fano, presente no broclis.
A versatilidade do enxofre deriva, em parte, da propriedade
que apresenta em comum com o nitrognio: mltiplos estados
estveis de oxidao. Nesta seo, sero discutidas as etapas
enzimticas que participam da assimilao do enxofre e as rea-
es bioqumicas que catalisam a reduo do sulfato em dois
aminocidos contendo enxofre, cistena e metionina.
O sulfato a forma de absoro de enxofre nos vegetais
A maioria do enxofre nas clulas de vegetais superiores de-
riva do sulfato (SO
4
2
) absorvido via um transportador H
+
SO
4
2

do tipo simporte (ver Captulo 6), a partir da soluo do solo.
O sulfato no solo proveniente sobremaneira do desgaste das
rochas. No entanto, a industrializao acrescenta uma fonte
adicional de sulfato: a poluio atmosfrica. A queima e com-
bustveis fsseis libera vrias formas de enxofre gasoso, inclu-
indo dixido de enxofre (SO
2
) e sulfeto de hidrognio (H
2
S), os
quais so levados para o solo pela chuva.
Quando dissolvido em gua, o SO
2
hidrolisado e trans-
forma-se em cido sulfrico (H
2
SO
4
), um cido forte, que a
principal fonte de chuva cida. As plantas podem, tambm, me-
tabolizar o dixido de enxofre, que absorvido na forma gasosa
atravs dos estmatos. Entretanto, exposies prolongadas
(mais de oito horas) s altas concentraes atmosfricas do SO
2

(maiores do que 0,3 ppm) causam extensos danos nos tecidos,
devido formao do cido sulfrico.
Figura 12.12 A reao catalisada pela ni-
trogenase. A ferrodoxina reduz a Fe-prote-
na. Acredita-se que a ligao e a hidrlise do
ATP Fe-protena provoca uma mudana na
conformao dessa protena, o que facilita as
reaes redox. A Fe-protena reduz a MoFe-
protena e esta ltima reduz o N
2
(Dixon e
Wheeler, 1986 e Buchanan e cols., 2000).
TABELA 12.4
Reaes catalisadas pela nitrogenase
N
2
NH
3
Fixao do intrognio molecular
N
2
O N
2
+ H
2
O Reduo do xido nitroso
N
3
N
2
+ NH
3
Reduo de azida
C
2
H
2
C
2
H
4
Reduo de acetileno
2H
+
H
2
Produo de H
2
ATP ADP + P
i
Atividade hidroltica do ATP
Complexo da enzima nitrogenase
Fe-protena MoFe-protena
MoFe
ox
Produtos
2 NH
3
, H
2
Substrato
N
2
, 8 H
+
MoFe
red
MoFe
ox
Fe
red
Fe
ox
Fe
red
16 ATP 16 ADP
16 P
i
Ferredoxina
ox
Ferredoxina
red
+
A assimilao do sulfato necessita da reduo do sulfato
a cistena
A primeira etapa na sntese de compostos orgnicos conten-
do enxofre a reduo do sulfato ao aminocido cistena (Figura
12.14). O sulfato muito estvel e necessita ser ativado antes que
alguma reao subseqente possa ocorrer. A ativao inicia com
a reao entre o sulfato e o ATP, para formar 5-adenililsulfato (o
qual , algumas vezes, referido como adenosina-5-fosfosulfato e
abreviado como APS) e pirofosfato (PPi) (ver Figura 12.14):
SO
4
2
+ Mg-ATP APS + PP
i
(12.10)
A enzima que catalisa essa reao, ATP sulfurilase, apresen-
ta duas formas: a maior encontrada nos plastdeos e amenor,
no citoplasma (Leustek e cols. 2000). A reao de ativao en-
ergeticamente desfavorvel. Para levar essa reao adiante, os
produtos APS e PP
i
devem ser convertidos de imediato em out-
ros compostos. O PP
i
hidrolisado a fosfato inorgnico (P
i
) pela
pirofosfatase inorgnica, de acordo com a seguinte reao:
PP
i
+ H
2
O 2 P
i
(12.11)
O outro produto, APS, rapidamente reduzido ou sulfatado,
sendo predominante a via de reduo (Leustek e cols., 2000).
A reduo do APS um processo de mltiplas etapas,
que ocorre exclusivamente nos plastdeos. De incio, A APS
redutase, aparentemente, transfere dois eltrons da glutationa
reduzida (GSH) para produzir sulfito (SO
3
2
):
APS + 2 GSH SO
3
2
+ 2 H
+
+ GSSG + AMP (12.12)
Onde GSSG representa a glutationa oxidada. (o SH em GSH e o
SS em GSSg representam as pontes S-H e S-S, respectivamente).
A seguir, a sulfito redutase transfere seis eltrons da ferredo-
xina (Fd
red
) para produzir sulfeto (S
2
):
SO
3
2
+ 6 Fd
red
S
2
+ 6 Fd
ox
(12.13)
O sulfeto resultante reage com 0-acetilserina (OAS) para for-
mar cistena e acetato. A 0-acetilserina, que reage com o S
2
,
formada na reao catalisada pela serina acetiltransferase:
Serina + Acetil-CoA OAS + CoA (12.14)
A reao que produz cistena e acetato catalisada pela
OAS tiol-liase:
OAS + S
2
cistena + acetato (12.15)
A sulfatao do APS, localizada no citosol, a via alterna-
tiva. Inicialmente, a APS quinase catalisa a reao da APS com
ATP, para formar 3-fosfoadenosina-5 fosfossulfato (PAPS).
APS + ATP PAPS + ADP (12.16)
As sulfotransferases, ento, podem transferir o grupo sulfato
do PAPS para vrios compostos, incluindo colina, brassino-
sterides, flavonol, cido glico glicosdeo, glucosinolatos, pep-
tdeos e polissacardeos (Leustek e Saito, 1999).
A assimilao do sulfato ocorre principalmente nas folhas
A reduo do sulfato cistena altera o nmero de oxidao
do enxofre de +6 para 4, assim necessitando da transferncia
de 10 eltrons. A glutationa, a ferredoxina, o NAD(P)H ou a 0-
acetilserina podem atuar como doadores de eltrons em vrios
passos da rota metablica (ver Figua 12.14).
Na assimilao do enxofre, as folhas so em geral mais ativas
do que as razes, provavelmente devido ao fato da fotossntese dis-
ponibilizar a ferredoxina reduzida e a fotorrespirao gerar a serina,
que pode estimular a produo da 0-acetilserina (ver Captulo 8). O
enxofre assimilado nas folhas exportado pelo floema para os lo-
cais de sntese proteca (frutos e pices caulinares e radiculares), so-
bretudo na forma de glutationa (Bergmann e Rennenberg, 1993):
Figura 12.13 As principais
uredas utilizadas para trans-
portar nitrognio a partir dos
locais onde sero desamina-
dos para fornecer nitrognio
para a sntese de aminoci-
dos e nucleosdeos.
A glutationa tambm atua como um sinal que coordena a absoro
do sulfato pelas razes e assimilao do sulfato pela parte area.
cido alantico Alantona Citrulina
H
2
N
H
2
N
H
H
H
C
C C
C N
N
O
O
O
OH
O C
HN
NH H
C
C
O
H
N
O
C NH
2
H
2
N C N
H
O
CH
2
CH
2
CH
2
C
H
NH
2
COOH
Glicina
Cistena
Glutamato
Glutationa reduzida
O O
C
O
C
C
H H
H N
C H
N H
CH
2
SH
O C
CH
2
CH
2
C
C
O O
H H
3
N
+
16 Captulo 12
A metionina sintetizada a partir da cistena
A metionina, um outro aminocido contendo enxofre en-
contrado nas protenas, sintetizada nos plstideos a partir da
cistena (para maiores detalhes ver Tpico 12.3 na Internet).
Aps as snteses da cistena e da metionina, o enxofre pode ser
incorporado nas protenas e em diversos outros compostos, tais
como a acetil CoA e o S-adenosilmetionina, sendo este ltimo
um composto muito importante para a sntese do etileno (ver
Captulo 22), e em reaes envolvendo a transferncias de gru-
pos metil, como na sntese da lignina (ver Captulo 13).
ASSI MI LAO DO FOSFATO
O fosfato (HPO
4
2
) na soluo do solo rapidamente absor-
vido pelas razes das plantas por intermdio de um transportador
de H
+
HPO
4
2
do tipo simporte (ver Captulo 6) e incorporado
em uma variedade de compostos orgnicos, incluindo acares
fosfatos, fosfolipdeos e nucleotdeos. O principal ponto de en-
trada do fosfato na via de assimilao ocorre durante a formao
do ATP, a molcula de energia da clula. Nessa reao, o fosfato
inorgnico adicionado ao segundo grupo fosfato da adenosina
difosfato para formar a ligao ster fosfato.
Na mitocndria, a energia para a sntese do ATP proveniente
da oxidao do NADH pela fosforilao oxidativa (ver Captulo 11).
O ATP tambm sintetizado segundo reaes da fosforilao de-
pendente da luz que ocorrem no cloroplasto (ver Captulo 7). Alm
destas reaes que ocorrem nas mitocndrias e nos cloroplastos,
aquelas que ocontecem no citosol tambm assimilam fosfato.
A gliclise incorpora o fosfato inorgnico no cido 1-3-difos-
foglicrico, formando um grupo acil fosfato de alta energia. Este
fosfato pode ser doado par ao ADP para formar o ATP, em
uma reao de fosforilao em nvel de substrato (ver Captulo
11). Uma vez o fosfato incorporado ao ATP, o grupo fosfato
pode ser transferido por intermdio de muitas reaes diferen-
Figura 12.14 Estrutura e rotas metablica dos compostos envolvidos na assimilao do enxofre. A enzima ATP sulforilase
cliva o pirofosfato do ATP e o substitui com o sulfato. O sulfeto produzido a partir do APS por reaes que envolvem a
reduo pela glutationa e ferredoxina. O sulfeto ou tiossuleto reagem com a 0-acetilserina para formar cistena. Fd, ferre-
doxina; GSH, glutationa reduzida; GSSG, glutationa oxidada.
Adenina
O
O
O
O
O O
O O
O O
OH
H
H H
H
P
P S CH
2
Sulfotransferase
R-OH 3-Fosfoadenilato
3-Fosfoadenosina-5-fosfossulfato (PAPS) Metablito O-sulfatado
O
O
O O
R S
ATP
ADP
H H
ATP
SO
4
2
APS quinase
ATP
sulforilase
Adenina
Sulfato
PP
i
Pirofosfatase
inorgnica
2 P
i
H
2
O
O
H H
OH OH
O
O
O
O
O
CH
2
P S O
APS sulfo-
transferase
GSH 5-AMP
COO
CH
2
NH
C O
O
C H CH
2
S S
O
O
O
NH
C
CH
2
CH
2
C H
COO
H
3
N
+
No-
enzimtico
O
O S
O
GSH GSSG
Sulto Sulfeto
redutase
Sulto
S
2
S-Sulfoglutationa
SH
S
2
Acetato
O-Acetilserina
tioliase
CH
2
CH COOH
NH
2
Cistena O-Acetilserina Serina
HO CH
2
CH
NH
2
COOH
Serina
acetiltransferase
Acetil-CoA CoA
CH
3
C
O
O CH
2
CH COOH
NH
2
Adenosina-5-fosfossulfato (APS)
6Fd
red
6Fd
ox
tes, para formar vrios compostos fosforilados encontrados nas
clulas dos vegetais superiores.
ASSI MI LAO DE CTI ONS
Os ctions absorvidos pelas clulas vegetais formam com-
plexos com compostos orgnicos, nos quais o ction se torna
ligado ao complexo por ligaes no-covalentes (para discusso
de ligaes no-covalentes, ver Captulo 2 na Internet). As
plantas assimilam macronutrientes catinicos como potssio,
magnsio e clcio, assim como micronutrientes catinicos co-
bre, ferro, mangans, cobalto, sdio e zinco.
Nesta seo, sero descritas as ligaes eletrostticas e de
valncia coordenada, as quais fazem parte da assimilao de
vrios ctions que as plantas utilizam como nutrientes e as ex-
igncias especiais para a absoro do ferro pelas razes e sua
subseqente assimilao nas plantas.
Os ctions formam ligaes no-covalentes com
compostos de carbono
As ligaes no-covalentes so de dois tipos: ligaes de
valncia coordenada e ligaes eletrostticas. Na formao
de um complexo de valncia coordenada, vrios tomos de
oxignio ou nitrognio de um composto de carbono doam el-
trons no-compartilhados para formar uma ligao com o nu-
triente catinico. Como resultado, a carga positiva do ction
neutralizada.
As ligaes de valncia coordenada formam-se tipicamente
entre ctions polivalentes e molculas de carbono por exem-
plo, complexos entre o cobre e o cido tartrico (Figura 12.15

A) ou entre o magnsio ea clorofila (Figura 12.15B). Os nutrien-
tes que so assimilados como exemplo de valncia coordenada
incluem o cobre, o zinco, o ferro e o magnsio. O clcio tam-
bm pode formar um complexo de valncia coordenada com o
cido poligaracturnico das paredes celulares (Figura 12.15C).
Figura 12.15 Exemplos de complexos de valncia coordenada. Os complexos de valncia coordenada so formados quando
os tomos de oxignio ou nitrognio, do composto do carbono, doam pares de eltrons no-compartilhados (representados por
pontos) para formar uma ligao com o ction. (A) ons cobre compartilham eltrons com os oxignios das hidroxilas do cido tar-
trico). (B) ons magnsio compartilham eltrons com os tomos de nitrognios da clorofila a. As linhas tracejadas representam as
ligaes de valncia coordenada entre eltrons no-compartilhados dos tomos de nitrognio e do ction magnsio. (C) O modelo
de caixa de ovos da interao do cido poligalacturnico, o principal constituinte das pectinas nas paredes celulares, e os ons
clcio. Na direita est representado, de forma aumentada, a formao de um complexo de valncia coordenada entre um nico on
clcio com os oxignios das hidroxilas dos resduos do cido galacturnico. (Rees, 1977).
(A)
COOH
HC
COOH
HC
H
cido tartrico
+ Cu
2+
COOH
H
COOH
HC
HC
Cu
Complexo cobre-cido tartrico
(B)
H
2
C CH
CH
3
CH
3
C
2
H
5
N N
N N
CH
3
Mg
CH
3
CH
2
CH
2
OCH
3
H
39
C
20
OOC
O C O
Clorola a
(C)
cido poligalacturnico
HO
H
H
HO
H
H
H
H
H
H
H
H
O O
Ca
: :
:
O
:
:
O
: O
: O
:
O
O
O
: :
: :
:
:
:
CO
2
H
Cadeia do cido poligalacturnico
Os ons clcio so
mantidos nos espaos
entre duas cadeias de
cido poligalacturnico.
Considera-se que a maior
parte do clcio da parede
celular deve estar ligado
desta forma.
18 Captulo 12
As ligaes eletrostticas so formadas devido atrao
de um ction carregado positivamente por um grupo carregado
negativamente, como o carboxilato (COO-) em um composto
de carbono. Ao contrrio da situao das ligaes coordenadas,
o ction em uma ligao eletrosttica mantm a sua carga positi-
va. Os ctions monovalentes, como o potssio (K
+
), podem for-
mar ligaes eletrostticas com os grupos carboxlicos de muitos
cidos orgnicos (Figura 12.16A). Entretanto, grande parte do
potssio que acumulado pelas clulas vegetais e que atua na
regulao osmtica e na ativao enzimtica permanece no ci-
tosol e nos vacolos como on livre. Os ons divalentes, como
o clcio, formam ligaes eletrostticas com os pectatos (Figura
12.16B) e os grupos carboxlicos dos cidos poligalacturnicos
(ver Captulo 15).
Em geral, ctions como magnsio(Mg
2+
) e o Clcio (Ca
2+
)
so assimilados pela formao de complexos de valncia coor-
denada e ligaes eletrostticas com aminocidos, fosfolipdeos
e outras molculas carregadas negativamente.
As razes modicam a rizosfera para absorver o ferro
O ferro importante nas protenas ferro-enxofre (ver Cap-
tulo 7) e como catalisador de enzimas que participam nas reaes
de redox (ver Captulo 5), como aquelas do metabolismo do ni-
trognuio aqui discutidas. As plantas obtm o ferro do solo, onde
ele est presente primariamente como ferro frrico (Fe
3+
) em xi-
dos como o Fe(OH)
2+
, Fe(OH)
3
e Fe(OH)
4
. Em pH neutro, o fer-
ro frrico altamente insolvel. Para que quantidades suficientes
do ferro sejam absorvidas da soluo do solo, as razes necessitam
desenvolver vrios mecanismos para aumentar a solubilidade e a
disponibilidade do ferro. Tais mecanismo incluem:
Aumento da solubilidade do ferro frrico pela acidificao
do solo.
Reduo do ferro frrico a forma ferrosa (Fe
2+
) mais solvel.
Liberao de compostos que formam complexos estveis
e solveis com o ferro (Marschner, 1995). Rever o Cap-
tulo 5, no qual esses compostos so chamados de quelan-
tes do ferro (ver Figura 5.2).
Em geral, as razes acidificam o solo ao seu redor. Elas ex-
sudam prtons durante a absoro e a assimilao dos ctions,
em especial amnio, e liberam compostos orgnicos, como os
cidos mlico e ctrico, que aumentam a disponibilidade do ferro
e do fosfato (ver Figura 5.4). A deficincia do ferro estimula a
exsudao de prtons pelas razes. Alm disso, as membranas
plasmticas da raiz possuem uma enzima, a redutase ferro-
quelante, que reduz o ferro frrico forma ferro ferroso, onde
o NADH ou o NADPH servem como doadores de eltrons. A
atividade dessa enzima aumenta sob condies de deficincia
de ferro.
Vrios compostos secretados pelas razes formam quelados
estveis com o ferro. Os exemplos incluem o cido malico, o
cido ctrico, os fenlicos e o cido piscdico. As gramneas pro-
duzem uma classe especial de quelantes do ferro denominadas
de fitosiderforos. Os fitosiderforos so constitudos por ami-
nocidos que no so encontrados nas protenas, como cido
muginico, por exemplo, e formam complexos estveis com o
Fe
3+
. As clulas das razes das gramneas possuem um sistema
de transporte de fitosiderforo-Fe
3+
, que carrega o quelado para
o interior do citoplasmas. Sob deficincia de ferro, as razes das
gramneas liberam mais fitosiderforos no solo e aumentam a
capacidade do sistema de transporte do fitosiderforo-Fe
3+
.
O ferro forma complexos com o carbono e com o fosfato
Uma vez que as razes tenham absorvido ferro ou um ferro
quelado, eles so oxidados nas razes forma frrica e transloca-
dos, em sua maior parte, para as folhas, na forma de complexos
eletrostticos com o citrato.
A maior parte do ferro nos vegetais encontrada na molcu-
la heme do citocromo, nos cloroplastos e nas mitocndrias (ver
Captulo 7). Uma importante reao de assimilao do ferro a
sua insero na porfirina, a qual precursora do grupo heme.
Essa reao catalisada pela enzima ferroquelatase (Figura
12.17) (Jones, 1983). Alm disso, as protenas ferro-enxofre da
cadeia transportadora de eltrons (ver Captulo 7) contm ferro
no-heme covalentemente ligado aos tomos de enxofre dos
resduos de cistena na apoprotena. O ferro encontrado tam-
Figura 12.16 Exemplos de complexos eletrostticos (inicos). (A) O ction K
+
monovalente e o malato formam o com-
plexo potssio malato. (B) O ction divalente Ca
2+
e o pectato formam o complexo clcio pectato. Os ctions divalentes
podem formar ligaes cruzadas entre as bordas paralelas que possuem grupos carboxila negativamente carregados. As
ligaes do clcio exercem um papel estrutural nas paredes celulares.
(A) Ction monovalente
COOH
HCOH
CH
2
COOH
Dissociao do H
+
2 H
+
cido mlico Malato Potssio malato
Formao do complexo
HCOH
CH
2 2 K
+
COO
COO
COO
K
+
HCOH
CH
2
COO
K
+
(B) Ction divalente
C
O O
C
O

O
Ca
2+
C
O O
C
O

O
Ca
2+
Clcio pectato
bm nos centros Fe
2
S
2
, os quais possuem dois ferros (cada um
complexado com os tomos de enxofre dos resduos de cistena)
e dois sulfetos inorgnicos.
O ferro livre (ferro que no est complexado com compostos
de carbono) pode interagir com o oxignio para formar nions
superxidos (O
2
), os quais podem danificar membranas pela de-

gradao dos componentes lipdicos insaturados. As clulas veg-
etais podem limitar os danos armazenando o excesso de ferro em
complexos de ferro-protena chamados de fitoferritina (Bienfait
e Van der Mark, 1983). A fotoferritina consiste de uma estrutura
protica com 24 subunidades idnticas formando uma esfera oca
que possui uma massa molecular de cerca de 480 kDa. No in-
terior dessa esfera, h um ncleo de 5.400 a 6.200 tomos de
ferro presentes como um complexo fosfato-xido frrico.
A forma pela qual o ferro liberado da fitoferritina no
conhecida, porm a quebra da estrutura protica parece estar
envolvida neste processo. O nvel de ferro livre nas clulas veg-
etais regula a biossntese de novo da fitoferritina (Lobreaux e
cols., 1992).
ASSI MI LAO DO OXI GNI O
A respirao responde por aproximadamente de 90% do
volume de oxignio (O
2
) assimilado pelas clulas vegetais (ver
Captulo 11). Uma outra rota importante para a assimilao do
O
2
em compostos orgnicos envolve a incorporao do O
2
a
partir da gua (ver reao 1 da Tabela 8.1). Uma pequena pro-
poro do oxignio pode ser diretamente assimilada em com-
postos orgnicos no processo de fixao de oxignio.
Na fixao de oxignio, o oxignio molecular adicionado
diretamente a um composto orgnico em reaes realizadas por
enzimas conhecidas como oxigenases. Lembre-se do Captulo
8, no qual o oxignio diretamente incorporado em um com-
posto orgnico durante a fotorrespirao, em uma reao que
envolve a atividade oxigenase da ribulose-1,5-bifosfato carboxi-
lase/oxigenase (rubisco), a enzima de fixao do CO
2
(Ogren,
1984). O primeiro produto estvel que contm oxignio a partir
da forma molecular o 2-fosfoglicolato.
Em geral, as oxigenases so classificadas como dioxige-
nases ou monoxigenases, conforme o nmero de tomos de
oxignio que so transferidos a um composto de carbono na
reao catalisada. Nas reaes de dioxigenases, ambos os
tomos de oxignio so incorporados em um ou dois compos-
tos de carbono (Figura 12.18A e B). Os exemplos de dioxige-
nases nas clulas vegetais so as lipoxigenases, que catalisam
a adio de dois tomos de oxignio aos cidos graxos insatu-
rados (ver Figura 12.18A) e a prolil hidroxilase, a enzima que
converte prolina ao aminocido pouco comum hidroxiprolina
(ver Figura 12.18B).
A hidroxiprolina um importante componente da extensina,
uma protena da parede celular (ver Captulo 15). A sntese de
todos os outros aminocidos, pois a reao ocorre aps a prolina
ter sido incorporada na protena e , portanto, uma reao de
modificao ps-traducional. A prolil hidroxilase esta localizada
no retculo endoplasmtico, sugerindo que a maior parte das pro-
tenas contendo hidroxiprolina encontrada na via secretora.
As monoxigenases adicionam um dos tomos do oxignio
molecular a um composto de carbono; o outro tomo de oxignio
convertido em gua. As monoxigenases so algumas vezes refe-
ridas como oxidases de funo mista devido sua capacidade de
catalisar simultaneamente a reao de oxigenao e a reao oxi-
dase (reduo do oxignio a gua). A reao monoxigenase tam-
bm necessita de um substrato reduzido (NADH ou NADPH) como
um doador de eltrons, de acordo com a seguinte equao:
A + O
2
+ BH
2
AO + H
2
O + B
onde A representa o composto orgnico e B representa o doa-
dor de eltrons.
Uma importante monoxigenase vegetal a famlia das
heme-protenas, coletivamente chamadas de citocromo P450,
as quais catalisam a hidroxilao do cido cinmico em cido
p-cumrio (Figura 12.18C). Nas monoxigenases, o oxignio
primeiramente ativado por ser combinado com o tomo de ferro
do grupo heme; o NADPH serve como um doador de eltrons.
O sistema oxidase de funo mista est localizado no retculo
endoplasmtico e capaz de oxidar vrios substratos, incluindo
mono e diterpenos e cidos graxos.
O BALANO ENERGTI CO DA ASSI MI LAO DE
NUTRI ENTES
A assimilao de nutrientes geralmente necessita de grandes
quantidades de energia para converter compostos inorgnicos
estveis de baixa energia em compostos inorgnicos de alta en-
ergia. Por exemplo, a reduo do nitrato a nitrito e este em
amnio requer a transferncia de cerca de 10 eltrons e re-
sponde por cerca de 25% do total de energia consumida pelas
razes e partes areas (Bloom, 1997). Conseqentemente, o
vegetal pode utilizar um quarto da sua energia para assimilar
o nitrognio, um constituinte que representa menos de 2% do
peso seco total da planta.
Muitas das reaes de assimilao ocorrem no estroma do
cloroplasto, onde elas tm acesso imediato a poderosos agentes
Figura 12.17 Reao da ferroquelatase. A enzima
ferroquelatase catalisa a insero do ferro no anel da
porfirina para formar o complexo de valncia coorde-
nada. Ver a Figura 7.37 para ilustrao da biossntese
do anel da porfirina.
N N
N N
Ferroquelatase
+ Fe
2+
N N
N N
Fe
Anel porrnico
20 Captulo 12
redutores como o NADPH, a tieredoxina e a ferredoxina forma-
dos durante o transporte de eltrons da fotossntese. Esse processo
combinando assimilao de nutrientes ao transporte de eltrons
da fotossntese denominado fotoassimilao (Figura 12.19).
A fotoassimilao e o ciclo de Calvin ocorrem no mesmo
compartimento, mas a fotoassimilao s ocorre quando a cade-
ia fotossinttica de transporte de eltrons produz agentes redu-
tores alm do que necessrio para o ciclo de Calvin (p. ex., sob
condies de alta luminosidade e baixo CO
2
) (Robinson, 1988).
Altos nveis de CO
2
inibem a fotoassimilao (Figura 12.20, ver
Ensaio 12.1 na Internet). Como resultado, as plantas C
4
(ver
Captulo 8) direcionam a maior parte da sua fotoassimilao nas
clulas do mesofilo, onde as concentraes do CO
2
so baixas
(Becker e cols., 1993).
Os mecanismos que regulam a partio dos agentes redutores
entre o ciclo de Calvin e a fotoassimilao demandam maiores in-
vestigaes, pois esperado que os nveis atmosfricos de CO
2
se-
jam duplicados durante o prximo sculo (ver Captulo 9), de for-
ma que este fenmeno pode afetar as relaes planta-nutriente.
RESUMO
A assimilao de nutrientes o processo pelo qual os nu-
trientes obtidos pelas plantas so incorporadas em compostos
de carbono necessrios ao crescimento e ao desenvolvimento.
Com freqncia, esses processos envolvem reaes qumicas al-
tamente energticas e, assim, podem depender diretamente dos
agentes redutores produzidos pela fotossntese.
A assimilao do nitrognio uma das vrias etapas que
constituem o ciclo nitrognio, o qual engloba vrias formas do
nitrognio da biosfera e suas interconverses. As principais fon-
tes de nitrognio disponveis para as plantas so o nitrato (NO
3
)
e o amnio (NH
4
).
O nitrato absorvido pelas razes assimilado nas razes ou
nas partes areas, dependendo da sua disponibilidade e da esp-
cie vegetal. No processo de assimilao, o nitrato reduzido a
nitrito (NO
2
) no citosol pela enzima nitrato redutase; posterior-

mente, o nitrito reduzido a amnio nos plastdeos da raiz ou
nos cloroplastos pela enzima nitrito redutase.
Figura 12.18 Exemplos de dois tipos de reaes da oxigenase em clulas de vegetais superiores.
A Dioxigenase lipoxigenase catalisa
a adio de dois tomos de
oxignio ao cido graxo conjugado
para formar um hidroperxido
com um par de ligaes duplas
conjugadas cis-trans. O cido
graxo hidrxi-perxi pode ento
ser enzimaticamente convertido
a cidos graxos hidrxi e outros
metablitos.
A Dioxigenase prolil hidroxilase
catalisa a adio de um oxignio
do O
2
na prolina da cadeia
polipeptdica para produzir
hidroxiprolina, e a adio de um
oxignio ao -cetroglutarato para
produzir succinato e CO
2
.
A monoxigenase citocromo
P450 utiliza um oxignio do O
2

para hidroxilar o cido cinmico
(e outros substratos) e o outro
oxignio para produzir gua. O
NAD(P)H atua como um doador
de eltrons para as reaes de
monoxigenase.
Prolina
(no polipeptdeo
-Cetoglutarato
4-trans-L-Hidroxiprolina
(no polipeptdeo
Sucinato
cido p-cumrico
cido cinmico
cido graxo
Lipoxigenase
(A) Reao da dioxigenase
(B) Reao da dioxigenase
(C) Reao da monoxigenase
Prolil hidroxilase
H
H H H
H
H
C C C C C
R
2
R
1
O
2
R
2
R
1
H
H H
C C
C C
CH
H
O
O
trans
cis
H
H
H
H H
H H
O
C C R
1
N R
2
4
+
+ O
2
COOH
C O
CH
2
CH
2
COOH
Fe
2+
, ascorbato
R
2
R
1
C C H
H
H
H
H H
OH
O
N
+
4
COOH
CH
2
CH
2
COOH
+
CO
2
COOH
CH
CH + + O
2
NADPH + H
+
Citocromo P450
COOH
CH
CH
+ +
H
2
O NADP
+
OH
O amnio, derivado da absoro da raiz ou produzido por
assimilao do nitrato ou da fotorrespirao, convertido a
glutamina e glutamato pelas aes seqnciais da glutamina
sintetase e da glutamato sintase, as quais esto localizadas no
citosol e nos plastdeos das razes ou dos clorolastos.
Uma vez assimilado em glutamina ou glutamato, o nitrognio
pode ser transferido para muitos outros compostos orgnicos
atravs de diversas reaes, incluindo as de transaminao. A
interconverso entre a glutamina e a asparagina pela asparagina
sintetase equilibra o metabolismo do carbono e do nitrognio
em uma planta.
Muitas plantas formam uma relao simbitica com bact-
rias fixadoras de nitrognio que contm um complexo enzimti-
co, a nitrogenase, que pode reduzir o nitrognio atmosfrico em
Figura 12.19 Resumo dos processos envolvidos na assimilao do nitrognio mineral na folha. O nitrato translocado das
razes pelo xilema absorvido por uma clula do mesofilo atravs de um dos simportes nitrato-prton (NRT) para o citoplasma.
O nitrato , ento, reduzido a nitrito via nitrato redutase (NR). O nitrito translocado para o estroma do cloroplasto junto com
um prton. No estroma, o nitrito reduzido amnio, via nitrito redutase (NiR) e esse amnio convertido em glutamato pela
ao seqencial da glutamina sintetase (GS) e da glutamato sintase (GOGAT). Novamente no citoplasma, o glutamato trans-
aminado a aspartato, via aspartato aminotransferase (Asp-AT). Finalmente, a asparagina sintetase (AS) converte o aspartato em
asparagina. As quantidades aproximadas de ATP equivalente para cada reao esto indicadas acima.
Figura 12.20 Quociente de assimilao (QA = CO
2
assimilado/O
2

liberado) de plntulas de trigo como uma funo da quantidade de luz
(radiao fotossinteticamente ativa). A fotoassimilao do nitrato est
diretamente relacionada com o quociente de assimilao, pois a trans-
ferncia de eltrons para o nitrato e nitrito durante a fotoassimilao
aumenta a liberao de O
2
a partir das reaes fotossintticas depen-
dentes de luz, enquanto a assimilao de CO
2
pelas reaes indepen-
dentes da luz continua em taxas similares. Entretanto, plantas que
esto fotoassimilando o nitrato exibem um QA menor. Nas medidas
realizadas no ambiente, em concentraes de 360 mol mol
1
CO
2

(linha vermelha), QA diminui como uma funo da radiao incidente,
indicando que as taxas de fotoassimilao aumentaram. Em concen-
traes elevadas (700 mol mol
1
CO

, linha azul), o QA permanece
constante em todos os nveis de luz utilizados, indicando que as rea-
es de fixao do CO
2
esto competindo por agentes redutores,
inibindo a fotoassimilao (Bloom e cols., 2002).
ATP 3 ATP 7 ATP 2 ATP
ATP
2 ATP
ATP NADH
NO
3
NRT
NO
3
NO
2
NR
H
+
H
+
NO
2
NiR
NH
4
+
Glutamato Glutamato
Asp-AT
Aspartato
AS
Asparagina
CLOROPLASTO
GS/
GOGAT
CLULA DO MESOFILO
Fd
red
Fd
red
Protenas,
cidos nuclicos
Outros
aminocidos
1,0
C
O
2

a
s
s
i
m
i
l
a
d
o
/
O
2

l
i
b
e
r
a
d
o
0,8
0,6
0,4
0 400 800 1.200 1.600 2.000
Radiao fotossinteticamente ativa (mol m
2
s
1
)
Condies de medio
700 mol m
1
CO
2
)
360 mol m
1
CO
2
)
22 Captulo 12
amnia. Plantas leguminosas e actinorrzicas formam associa-
es com rizbios e Frankia, respectivamente. Tais associaes
so o resultado de uma excelente sintonia na interao entre o
simbionte e a planta hospedeira, envolvendo o reconhecimento
de sinais especficos, a induo de um programa de desenvolvi-
mento especializado na planta, a absoro de bactrias pela
planta e o desenvolvimento de ndulos, os nicos rgos que
abrigam bactrias nas clulas vegetais. Alguns microorganismos
procariontes fixadores de nitrognio no formam relaes sim-
biontes com plantas superiores, porm beneficiam as plantas
pelo aumento dos nveis de nitrognio do solo.
Semelhante ao nitrato, o sulfato (SO
4
2
) deve ser reduzido
pela assimilao. Na reduo do sulfato, produzida uma forma
ativada do sulfato, denominada 5-adenililsulfato (APS). O sulfe-
to (S
2
), produto final da reduo do sulfato, no acumulado
nas clulas, mas, ao contrrio, rapidamente incorporado nos
aminocidos cistena e metionina.
O fosfato (HPO
4
2
) est presente em uma variedade de com-
postos encontrados nas clulas vegetais, incluindo acares fosf-
atos, lipdeos, cidos nuclicos e nucleotdeos livres. O produto
inicial da sua assimilao o ATP, o qual produzido por fosfo-
rilaes em nvel de substrato no citosol, na fosforilao oxida-
tiva nas mitocndrias e na fosforilao nos cloroplastos.
Enquanto a assimilao do nitrognio, do enxofre e do fsfo-
ro necessita da formao de ligaes covalentes com compostos
de carbono, muitos macro e micronutrientes catinicos (p. ex.
K
+
, Mg
2+
, Ca
2+
, Cu
2+
, Fe
3+
, Mn
2+
, Co
2+
, Na
2+
, Zn
2+
) simplesmente
formam complexos. Esses complexos podem ser mantidos por
ligaes eletrostticas ou por ligaes de valncia coordenada.
A assimilao do ferro pode envolver a quelao, as reaes
de oxidorreduo e a formao de complexos. A fim de arma-
zenar grandes quantidades de ferro, as clulas vegetais sintetizam
fitoferritina, uma protena que armazena o ferro. Uma importante
funo do ferro nas clulas vegetais agir como um componente
redox no stio ativo de enzimas, freqentemente como um com-
plexo ferro-porfirina. O ferro inserido em um grupo porfirnico
na reao da ferroquelatase.
Alm de ser utilizado na respirao, o oxignio molecular
pode ser assimilado no processo de fixao de oxignio, no qual
ocorre a adio direta de oxignio aos compostos orgnicos. Tal
processo catalisado por enzimas conhecidas como oxigenases,
classificadas como monoxigenases ou dioxegenases.
A assimilao de nutrientes necessita de grandes quantidades
de energia para converter compostos inorgnicos estveis de
baixa energia em compostos orgnicos com alta energia. Uma
planta pode utilizar a energia da fotossntese para assimilar com-
postos inorgnicos no processo denominado fotoassimilao.
Material da Internet
Referncias bibliogrcas
Becker, T W., Perrot-Rechenmann, C., Suzuki, A ., and Hirel, B. (1993)
Subcellular and immunocytochemical localization of the enzymes
involved in ammonia assimilation in mesophyll and bundle-sheath
cells of maize leaves. Planta 191: 129-136.
Bergmann, L., and Rennenberg, H. (1993) Glutathione metabolism in
plants. In Sufiir Nutrition and Assimilation in Higher Plants.
Regulatory, Agricultural and Environmental Aspects, L. J. De
Kok, 1. Stulen, H. Rennenberg, C. Brunold, and W E. Rauser, eds.,
SPB Acad. Pub., The Hague, Netherlands, pp. 109-123.
Bienfait, H. E, and Van der Mark, E. (1983) Phytoferritin and its role in
iron metabolism. In Metals and Micronutrients: Uptake and Uti-
lization by Plants, D. A Robb and W S. Pierpoint, eds., Academic
Press, New York, pp. 111-123.
Bloom, A J. (1997) Nitrogen as a limiting factor: Crop acquisition of
ammonium and nitrate. In Ecology in Agriculture, L. E. Jackson,
ed., Academic Press, San Diego, CA, pp.145-172.
Bloom, A J., Smart, D. R., Nguyen, D. T., and Searles, P S. (2002)
Nitrogen assimilation and growth of wheat under elevated carbon
dioxide. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:1730-1735.
Bloom, A J., Sukrapanna, S. S., and Warner, R. L. (1992) Root respira-
tion associated with ammonium and nitrate absorption and assimi-
lation by barley. Plant Physiol. 99:1294-1301.
Buichanan, B., Gruissem, W., and Jones, R., eds. (2000) Biochemis-
try and Molecular Biology of Plants. American Society of Plant
Physiologists. Rockville, MD.
Burris, R. H. (1976) Nitrogen fixation. In Plant Biochemistry, 3rd ed.,
J. Bonner and. J. Varner, eds., Academic Press New York, pp.
887-908.
Campbell, W. H. (1999) Nitrate reductase structure, function and re-
gulation: Bridging the gap between biochemistry and physiology.
Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 50:277-303.
Carlson, R. W., Forsberg, L. S., Price, N. P. J., Bhat, U. R., Kelly, T.
M., and Raetz, C. R. H. (1995) The structure and biosynthesis of
Rhizobium leguminosarum lipid A . In Progress in Clinical and
Biological Research, Vol. 392: Bacterial Endotoxins: Lipopoly-
sacharides from Genes to Therapy: Proceedings of the Third
Conference of the International Endotoxin Society, held in Hel-
sinki, Finland, on August 15-18, 1994, J. Levin et al., John Wiley
and Sons, New York, pp. 2-31.
Denison, R. F., and Harter, B. L. (1995) Nitrate effects on nodule oxy-
gen permeability and leghemoglobin. Plant Physiol. 107: 1355-
1364.
Dixon, R. O D., and Wheeler, C. T. (1986) Nitrogen Fixation in Plants.
Chapman and Hall, New York.
Dong, Z., Canny M. J., McCully, M. E., Roboredo, M. R., Cabadilla, C.
F., Ortega, E., and Rodes, R. (1994) A nitrogen-fixing endophyte
of sugarcane stems: A new role for the apoplast. Plant Physiol.
105: 1139-1147.
Etzler, M. E., Kalsi, G., Ewing, N. N., Roberts, N. J., Day, R. B., and
Murphy, J. B. (1999) A nod factor binding lectin with apyrase activ-
ity from legume roots. Proc. Natl. Acd. Sci. USA 96: 58565861.
Tpicos da Internet
12.1 Desenvolvimento de ndulos na raiz
Os primrdios dos ndulos so formados na regio
oposta aos plos do protoxilema do feixe vascular
da raiz.
12.2 Medio da xao de nitrognio
A reduo do acetileno utilizada como uma medida
indireta da reduo do nitrognio.
12.3 A sntese da metionina
A metionina sintetizada nos platdeos a partir da
cistena.
Ensaio da Internet
12.1 O CO2 elevado e a fotoassimilao do nitrog-
nio
Nas folhas que se desenvolvem sob altas concen-
traes de CO2, o gs carbnico inibe a fotoassi-
milao do nitrognio, pois compete pelos agentes
redutores.
FAOSTAT. (2001) Agricultural Data. Food and Agricultural Organiza-
tion of the United Nations, Rome.
Heidstra, R., and Bisseling, T. (1996) Nod factor-induced host responses and
mechanisms of Nod factor perception. New Phytol. 133: 25-13.
Hell, R. (1997) Molecular phisiology of plants sulfur metabolism. Planta
202: 138-148.
Heyder, P. G., Reddy, G. S., and Hardy, R. W F. (1984) In vivo energet-
ics of symbiotic nitrogen fixation in soybeans. In Nitrogen Fixation
and COZ Metabolism, P. W. Ludden and I. E. Burris, eds., Elsevier,
New York, pp. 283-292.
Jones, O. T. G. (1983) Ferrochelatase. In Metals and Micronutrients:
Uptake and Utilization by plants, D. A . Robb and W. S. Pier-
point, eds., Academic Press, New York, pp. 125-144.
Kaiser, W. M., Weiner, H., and Huber, S. C. (1999) Nitrate reductase in
higher plants: A case study for transduction of environmental stim-
uli into control of catalytic activity. Physiol. Plant. 105: 385-390.
Kleinhofs, A ., Warner, R. L., Lawrence, J. M., Melzer, J. M., Jeter, J.
M., and Kudrna, D. A . (1989) Molecular genetics of nitrate reduc-
tase in barley. In Molecular and Genetic Aspects of Nitrate As-
similation, J. L. Wray and J. R. Kinghorn, eds., Oxford Science,
New York, pp. 197-211.
Kuzna, M. M., Hunt, S., and Layzell, D. B. (1993) Role of oxigen in the
limitation and inhibition of nitrogenase activity and respiration rate
in individual soybean nodules. Plant Physiol. 101: 161-169.
Lam, H.-M., Coschigano, K. T., Oliveira, I. C., Melo-Oliveira, R., and
Coruzzi, G. M. (1996) The molecular-genetics of nitrogen assimila-
tion into amino acids in higher plants. Annu. Rev. Plant Physiol-
ogy Plant Mol. Biol. 47: 569-593.
Lazarowitz, S. G., and Bisseling, T. (1997) Plant development from
the cellular perspective: Integrating the signal (Cellular Integra-
tion of Signaling Pathways in Plant Development, Acquafredda de
Maratea, Italy, May 20-30, 1997). Plant Cell 9: 1884-1900.
Lea, P. J., Blackwell, R. D., and Joy, K. W. (1992) Ammonia assimila-
tion in higher plants. In Nitrogen Metabolism of Plants (Proceed-
ings of the Phytochemical Society of Europe 33), K. Mengel and D.
J. Pilbeam, eds., Clarendon, Oxford, pp. 153-186.
Leustek, T., and Saito, K. (1999) Sulfate transport and assimilation in
plants. Plant Physiol. 120: 637-643.
Leustek, T., Martin, M. N., Bick, J.-A ., and Davies, J. P. (2000) Patways and
regulation of sulfur metabolism revealed through molecular and genetic
studies. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 51: 141-165.
Lobreaux, S., Massenet, O ., and Briat, J.-F. (1992) Iron induces ferritin
synthesis in maize plantlets. Plant Mol. Biol. 19: 563-575.
Ludwig, R. A ., and Vries, G. E. (1986) Biochemical physiology of
Rhizobium dinitrogen fixation. In Nitrogen Fixation, Vol. 4: Mo-
lecular Biology, W. I. Broughton and S. Puhler, eds., Clarendon,
Oxford, pp. 50-69.
Marschner, H. (1995) Mineral Nutrition of Higher Plants, 2nd ed.
Academic Press, London.
Mendel, R. R., and Stallmeyer, B. (1995) Molybdenum cofactor (nitrate
reductase) biosynthesis in plants: First molecular analysis. In Current
Plant Science and Biotechnology in Agriculture, Vol. 22: Current
Issues in Plant Molecular and Cellular Biology: Proceedings of
the VIIIth Internacional Congress on Plant Tissue and Cell Cul-
ture, Florence, Italy, 12-17 June, 1994, M. Terzi, R. Cella and A.
Falavigna, eds. Kluwer, Dordrecht, Netherlands, pp. 577-582.
Mylona, P, Pawlowski, K., and Biseling, T. (1995) Symbiotic nitrogen
fixation. Plant Cell 7: 869-885.
Oaks, A . (1994) Primary nitrogen assimilation in higher plants and its
regulation. Can J. Bot. 72: 739-750.
Ogren, W. L. (1984) Photorespiration: Pathways, regulation, and modi-
fication. Annu. Rev. Plant Physiol. 35: 415-142
Pate, J. S. (1983) Patterns of nitrogen metabolism in higher plants and
their ecological significance. In Nitrogen as na Ecological Factor:
The 22nd Symposium of the British Ecological Society, Oxford
1981, J. A . Lee, S. McNeill, and I. H. Rorison, eds., Blackwell,
Boston, pp. 225-255.
Pate, J. S., and Layzell, D. B. (1990) Energetics and biological costs
of nitrogen assimilation. In The Biochemistry of Plants, Vol. 16:
Intermediary Nitrogen Metabolism, B. J. Miflin and P J. Lea, eds.
Academic Press, San Diego, CA, pp. 1-12.
Phillips, D. A ., and Kapulnik, Y (1995) Plant isoflavonoids, pathogens
and symbionts. Trends Microbiol. 3: 58-64.
Rees, D. A . (1977) Polysaccharide Shapes. Chapman and Hall, London.
Reis, V. M., Baldani, J. I, Baldani, V L. D., and Dobereiner, J. (2000)
Biological dinitrogen fixation in Gramineae and palm trees. Crit.
Rev. Plant Sci. 19: 227-247.
Robinson, J. M. (1988) Spinach leaf chloroplast carbon dioxide and
nitrite photoassimilations do not compete for photogenerated re-
ductant: Manipulation of reductant levels by quantum flux density
titrations. Plant Physiol. 88: 1373-1380.
Rolfe, B. G., and Gresshoff, P. M. (1988) Genetic analysis of legume
nodule initiation. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 39:
297-320.
Schlesinger, W. H. (1997) Biogeochemistry: An Analysis of Global
Change, 2nd ed. Academic Press, San Diego, CA.
Siegel, L. M., and Wilkerson, J. Q. (1989) Structure and function of
spinach ferredoxin-nitrite reductase. In Molecular and Genetic
Aspects of Nitrate Assimilation, J. L. Wray and J. R. Kinghorn,
eds., Oxford Science, Oxford, pp. 263-283.
Sivasankar, S., and Oaks, A . (1996) Nitrate assimilation in higher
plants-The effect of metabolites and light. Plant Physiol. Biochem.
34: 609-620.
Stokkermans, T. J. W., Ikeshita, S., Cohn, J., Carlson, R. W, Stacey,
G., Ogawa, T., and Peters. N. K. (1995) Structural requirements
of synthetic and natural product lipo-chitin oligosaccharides for in-
duction of nodule primordia on Glycine soja. Plant Physiol. 108:
1587-1595.
Timmers, A . C. J., Auriac, M.-C., and Truchet, G. (1999) Refined
analysis of early symbiotic steps of the Rhizobium-Medicago: Inter-
action in relation with microtubular cytoskeleton rearrangements.
Development 126: 3617-3628.
Vande Broek, A ., and Vanderleyden, J. (1995) Review: Genetics othe Azo-
spirillum-plant root association. Crit. Rev. Plant Sci. 14: 445-466.
Van Rhijn, P, Goldberg, R. B., and Hirsch, A . M. (1998) Lotus cornicu-
latus nodulation specificity is changed by the presence of a soybean
lectin gene. Plant Cell 10: 1233-1249.
Warner, R. L., and Kleinhofs, A . (1992) Genetics and molecular bi-
ology of nitrate metabolism in higher plants. Physiol. Plant 85:
245-252.
Wray, J. L. (1993) Molecular biology, genetics and regulation of nitrite
reduction in higher plants. Physiol. Plants. 89: 607-612.

Assimilacaodenutrientes Cap12

Enviado por

Dados do documento

Título original

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Assimilacaodenutrientes Cap12

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

AS PLANTAS SUPERIORES SO ORGANISMOS AUTOTRFICOS que po-

dem sintetizar seus componentes orgnicos a partir de nutrientes inorgnicos

) no aminocido cistena, por meio de duas

). Tais reaes, conhecidas

) gerados pela fixao ou liberados por de-

do tipo simporte (ver o Captulo 6 para a discusso

5 Assimilao de nutrientes minerais

) um on altamente reativo e potencialmente

e a luz induzem a transcrio do mRNA da

Glutamina Aspartato Asparagina Glutamato

), que participa nas

13 Assimilao de nutrientes minerais

), os quais podem danificar membranas pela de-

) no citosol pela enzima nitrato redutase; posterior-

Você também pode gostar