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Universidad autnoma de guerrero

Unidad Acadmica de Ciencias


qumico Biolgicas
Programa educativo de Qumico Bilogo
Parasitlogo

Materia: Qumica Clnica
Profesor: QFB. Benjamn Maldonado del Moral
Prctica no. 4
DETERMINACION DE CLESTEROL TOTAL, COLESTEROL HDL,
COLESTEROL LDL, TRIGLICERIDOS, ESTERES DE COLESTEROL Y LIPIDOS
TOTALES.

Integrantes:
1. Matilde Garrido Nava
2. Mayra Tapia Antao
3. Heidi Arislendy Navarrete Garca
4. Nadia Sharon Gaspar Martnez
5. Jos Mndez Valente
6. Esmeralda Casarrubias Chann
7. Cinthya Balbuena Corona
Grupo: 402
Turno: Matutino

Chilpancingo, Gro., 03 OCTUBRE del 2012
OBJETIVOS
Determinar la concentracin de colesterol total srico y el de HDL, y su influencia en
implicaciones clnicas.
Determinar las concentraciones de los triglicridos para su valoracin y la importancia
clnica que tiene.

INTRODUCCIN
El perfil de lpidos es un grupo de pruebas que determinan el riesgo de
enfermedad coronaria cardaca. La prueba incluye un control de su colesterol total,
niveles de lipoprotena de alta densidad (HDL o colesterol bueno), de lipoprotena
de baja densidad (LDL o colesterol malo) y de triglicridos.
La cuantificacin de colesterol y triglicridos en suero es un procedimiento
analtico bsico en el diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas,
primarias o secundarias. Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de
padecer enfermedades cardiovasculares. En esta prctica se realizar la
determinacin en suero de colesterol total, colesterol-HDL y triglicridos.
El perfil lipdico lo constituye la cuantificacin analtica de una serie de lpidos que
son transportados en la sangre por los diferentes tipos de lipoprotenas
plasmticas. La determinacin de estos parmetros es un procedimiento analtico
bsico para el diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas, primarias
o secundarias. Entre estos parmetros analticos que se pueden determinar estn:
el colesterol total, el colesterol transportado por las LDL, el colesterol transportado
por las HDL, los triglicridos totales, ciertas apoprotenas particulares etc.
Altos niveles de colesterol se asocian a riesgo de padecer enfermedades
cardiovasculares, en especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El colesterol
de las HDL (colesterol bueno), puesto que representa aquella fraccin de
colesterol que se transporta al hgado para su metabolizacin y excrecin por va
biliar, no se asocia con riesgo de enfermedad.
Los objetivos de la prctica son la determinacin en suero de colesterol total,
HDL-Colesterol y triglicridos, para lo que se utilizarn kits comerciales.


LISTADO DE MATERIAL NECESARIO Y
PROCEDIMIENTO
Tubos de ensayo
Pipetas automticas
Espectrofotmetro
Suero
Estndar de colesterol (200 mg/dl)
Reactivo de trabajo para el colesterol
Reactivo precipitante
Estndar de triglicridos (200 mg/dl)
Reactivo de trabajo para triglicridos

Determinacin de triglicridos
Disponer de tubos de ensayo rotulados como blanco, estandar y muestra. La
muestra se refiere al suero a valorar y se colocan tantos tubos muestras como
sueros se quieran valorar.
Pipetear los componentes indicados:
Blanco Standard Muestra
Standard --- 10l ---
Muestra --- --- 10l
Reactivo 1.0mL 1.0mL 1.0Ml

Mezclar e Incubar a 37C 4 min ( 10 min a temperatura ambiente). Leer la
Absorbancia a 505 nm.






Determinacin de HDL-colesterol
Reactivos:
Reactivo precipitante
cido fosfotungstico 14mmol/L
Cloruro magnsico 2mmol/L
Opcional
Colesterol Ref. 1001092
Ref. 1001093

Precipitacin
1. Dosificar en tubos de centrifuga:





2. Mezclar y dejar reposar 10min a temperatura ambiente
3. Centrifugar 20minutos a 400 r.p.m. o 2 minutos a 12000 r.p.m.
4. Recoger el sobrenadante y determinar el HDL colesterol.

LDL-colesterol
Se calcula mediante la formula de Friedewald la cual nos permite averiguar la
fraccin LDLcolesterol (LDLc) si conocemos el colesterol total (CT), la fraccin
HDLcolesterol (HDLc) y los triglicridos (TG). Su clculo se realiza del siguiente
modo:






RT (mL) 1.0
MUESTRA (l 100
RESULTADOS
COLESTEROL TOTAL






Blanco= 0
Estndar= 0.282
Muestra= 0.307
Clculo







Colesterol total= 217.7 mg/dL
El colesterol total en la prueba realizada fue de: 217.7 mg/dL esto indica que el
paciente est a punto de llegar al valor sospechoso del colesterol que es de 220
mg/dL.


BLANCO STANDAR MUESTRA
BLANCO - - -
ESTANDAR - 10 -
MUESTRA - - 10 L
REACTIVO 1000 L 1000 L 1000 L
VALORES NORMALES:

Valores sospechosos a partir de: 220 mg/dL

Elevados a partir de: 240 mg/dL
SIGNIFCADO CLNICO
Triglicridos= 83 mg/dL
Colesterol HDL= 91 mg/dL
Colesterol Total= 372.8 mg/dL
HDL-Colesterol
HOMBRES MUJERES
Riesgo menor
Riesgo normal
Riesgo elevado

El colesterol total se encontr elevado porque fue de 372.8 mg/dL ya que este se
encuentra elevado a partir de 240 mg/dL.
El colesterol HDL se encuentra el riesgo menor porque nos dio de 91 mg/dL y el
valor de referencia de riesgo menor es de porque la muestra se le
tom a una mujer.
Los triglicridos se encontraron normales ya que el resultado fue de 83 mg/dL y el
rango normal en mujeres es de menos 150 mg/dL.

Clculo LDL colesterol



LDL Colesterol= 265.2 mg/dL




El colesterol LDL fue de 265.2 mg/dL esto quiere decir que se encontr elevado ya
que este parmetro es a partir de 190 mg/dL.

TRIGLICRIDOS
Bco. St. Muestra
Bco. - - -
St. - 10 L -
Muestra - - 10 L
Reactivo 1000 L 1000 L 1000 L

VALORES NORMALES
Valores sospechosos a partir de 150 mg/dL
Hombres 170 mg/dL
Mujeres 150 mg/dL
Valores elevados a partir de 200 mg/dL

Triglicridos muestra= 2469 mg/dL
En esta prueba el resultado de triglicridos fue de 2469 mg/dL, lo cual nos indica
que el paciente tiene un nivel de triglicridos demasiado elevado, esto se podra
deber a el exceso de peso, la edad a enfermedades como la diabetes, el
hipotiroidismo y enfermedades hepticas pero tambin cabe destacar los
factores hereditarios.



LDL-Colesterol
Valores sospechosos a partir de 150 mg/dL
Valores elevados a partir de 190 mg/dL


DISCUSIN
Una ingesta elevada de colesterol en la dieta produce hipercolesterolemia, o
colesterol alto, y enfermedades cardiovasculares, como la ateroesclerosis. La
absorcin intestinal de colesterol es de alrededor de un 40%. Existen unos lmites
en la cantidad de colesterol diettico para que se produzcan variaciones en la cifra
de colesterolemia. Cifras inferiores a 100 mg/da no producen elevaciones,
existiendo a partir de esta cifra una relacin lineal entre el colesterol de la dieta y
sus niveles en sangre. El lmite superior se situara entre los 500-700 mg/da de
colesterol, por encima del cual los aumentos de la ingesta de colesterol no
produciran modificaciones en los niveles de colesterolemia. El exceso de
colesterol en la sangre es un riesgo importante de enfermedad coronaria y de
ataque cerebral, porque tiende a acumularse en las paredes de las arterias con el
paso de los aos. Para trata de evitar esto se hace una seria de estudia serolgica
para determinar los valores que tiene un individuo y si este es peligroso para su
salud. La concentracin de colesterol total en todas las personas varia
considerablemente dependiendo del tipo de vida que lleve dicha persona, ya que
uno de los ms grandes problemas que tienen ciertas personas son el
sedentarismo, la mala alimentacin, y otros malo hbitos.
En la determinacin de colesterol total se estimo un valor normal al
correspondiente de la persona ya que esta persona fue mujer, al analizar el
colesterol total encontramos el valor normal, esto nos lleva a predecir que la
paciente esta muy cerca de los valores elevados. En cuanto a la determinacin de
HDL (lipoprotenas de alta densidad) los niveles de esta prueba salieron normales
lo que nos dice que la paciente no es tan sedentaria, y por ultimo en la
determinacin de LDL (lipoprotenas de baja densidad) esta por arriba de los
noveles normales lo que quiere decir que tal ves la paciente no come
correctamente y le gusta la comida grasosa y es el porqu de que sus noveles de
LDL estn muy elevados.
En cuanto a los triglicridos elevados se presentan debido a un mal consumo de
alimentos al igual que el colesterol, para disminuir esto se debe emplear dietas
adecuadas a la persona ya que Numerosos estudios han demostrado que la dieta
o la alimentacin afecta de manera significativa la utilizacin de las grasas por el
organismo, y que la cantidad de stas en la sangre se relaciona directamente con
el riesgo de sufrir un infarto al corazn por falta de irrigacin sangunea.

Dentro de la poblacin existen muchas personas con mayor probabilidad de tener
niveles de triglicridos altos, ya sea por presentar alteraciones genticas del
metabolismo de los lpidos o por la coexistencia de otros factores de riesgo como
hipertensin arterial, tabaquismo, diabetes mellitus o por haber padecido
previamente un episodio coronario.

CONCLUSIN
Las pruebas analizadas en esta prctica se refieren a la determinacin de
colesterol total, colesterol HDL y triglicridos. Cada una de estas pruebas es de
suma importancia para la determinacin de algunas enfermedades
cardiovasculares.
El examen de HDL se puede hacer como parte de un lipograma general, donde
tambin se mide el colesterol "malo" (LDL) y los triglicridos. La informacin
combinada reunida de todos estos exmenes puede ayudar a determinar el riesgo
de padecer un ataque cardaco, un accidente cerebrovascular y una enfermedad
vascular perifrica.
Si se encuentra que el riesgo es alto, el mdico puede recomendar terapia. Es
recomendable el ejercicio regular, una dieta saludable que ayude tanto
incrementar los niveles de HDL en varios puntos, o en otros casos a estabilizar
para tener los avalores adecuados y as evitar complicaciones como las ya
mencionadas.










INVESTIGACIN COMPLEMENTARIA
1.-Describe el fundamento de la reaccin del colesterol
El Colesterol es oxidado enzimticamente por la colesterol oxidasa (CHOD),
previa hidrlisis enzimtica de los steres mediante una lipasa de origen fungal. El
Agua oxigenada (H2O2) generada en la oxidacin permite la union oxidativa del
fenol con la 4-aminoantipirina mediante una reaccin catalizada por la peroxidasa
(POD). El indicador final es la quinoneimina.
Reaccin
CE
Colesterol-esterificado Colesterol + Ac. Grasos libres
CHO
Colesterol + O2 Colesten-3-ona + H2O2
POD
H2O2 + 4-aminoamtipirina + fenol Complejo coloreado

2.- Escribe las funciones fisiolgicas en las cuales se utiliza el colesterol
El colesterol es imprescindible para la vida animal por sus numerosas funciones:
Estructural: el colesterol es un componente muy importante de las membranas
plasmticas de los animales (en general, no existe en los vegetales). Aunque el
colesterol se encuentra en pequea cantidad en las membranas celulares, en la
membrana citoplasmtica lo hallamos en una proporcin molar 1:1 con relacin a
los fosfolpidos, regulando sus propiedades fsico-qumicas, en particular la fluidez.
Sin embargo, el colesterol se encuentra en muy baja proporcin o est
prcticamente ausente en las membranas subcelulares.
Precursor de la vitamina D: esencial en el metabolismo del calcio.
Precursor de las hormonas sexuales: progesterona, estrgenos y testosterona.
Precursor de las hormonas corticoesteroidales: cortisol y aldosterona.
Precursor de las sales biliares: esenciales en la absorcin de algunos nutrientes
lipdicos y va principal para la excrecin de colesterol corporal. Precursor de
las balsas de lpidos.
3.- Describe cual es la funcin del colesterol a nivel de la membrana celular
El colesterol proporciona estabilidad a la membrana plasmtica y disminuye su
fluidez.
Las molculas de colesterol se intercala con los fosfolpidos, ambos lpidos de
membrana que poseen carcter anfiptico.
Las molculas de colesterol establecen interacciones hidrofbicas, mediante su
anillo esteroide de naturaleza apolar, con las cadenas apolares de los cidos
grasos de las molculas de fosfolpidos, sujetando las colas por la regin proximal,
mientras que los extremos se encuentran libres
4.- Cmo se absorbe, en donde se metaboliza, se sintetiza y se secreta el
colesterol?
El colesterol se sintetiza a partir del acetil coenzima A en tres etapas. La primera
etapa se lleva a cabo la sntesis de mevalonato, que se activa a
isopentilpirofosfato, indica la sntesis del colesterol.La segunda etapa, el
escualeno ( C30) se sintetiza a partir de seis molculas de isopentilfosfato. La
tercera es cuando el escualeno (C30) se sintetiza a partir de seis molculas de
isopentilfosfato (C5).
5.- Cul es la finalidad de realizar la determinacin de colesterol?
Determinar el grado de colesterol que puede tener el organismo de una persona
y asi evitar enfermedades o contrarrestarlas. Este es un factor contribuyente en la
formacin de ateromas (Placa dura), y adems que el riesgo de contraer
enfermedades cardiacas coronarias en individuos que presentan colesterinemia
<= 2,10 g/l es 3 veces menor que aquellos individuos con ms de 2,30 g/l y 6
veces menor que individuos con ms de 2,60 g/l.
6.- Explica en que consiste la Hipercolesterolemia
Es un trastorno de altos niveles de colesterol LDL ("malo") que se transmite de
padres a hijos, es decir, es hereditario. La afeccin empieza al nacer y puede
causar ataques cardacos a temprana edad. Es un trastorno gentico causado por
un defecto en el cromosoma 19. El defecto hace que el
cuerpo sea incapaz de eliminar la lipoprotena de baja densidad (colesterol LDL o
"malo") de la sangre. Esto provoca niveles altos de colesterol LDL en la sangre, lo
cual hace que uno sea ms propenso a presentar estrechamiento de las arterias a
raz de ateroesclerosis a temprana edad
La afeccin se transmite de manera caracterstica de padres a hijos en
forma autosmica dominante, lo cual significa que slo se necesita recibir el gen
anormal de uno de los padres para heredar la enfermedad.
7.- Describe que factores interfieren en los resultados al medir los niveles de
colesterol
El uso incorrecto de los materiales de laboratorio (pipeta automtica,
espectrofotmetro no calibrado) etc. as como tambin la mala toma de las
muestras sanguneas y mala lectura de los resultados
8.- Escribe el rango de preferencia normal de colesterol
Valores sospechosos apartar de: 220 mg/ dL
Elevados a partir de: 240 mg/dL
9.- En que patologas encontramos niveles aumentados de colesterol
El alto colesterol en sangre puede sufrir distintas patologas.
Accidente cerebro vascular, taponamiento de arterias, problemas renales y
coronarios
10.- Menciona en que patologas encuentras niveles bajos de colesterol
Riesgo de enfermedades cardiovasculares, dislipidemia, inflamacin y trombosis

INVESTIGACION COMPLEMENTARIA
1.- Cmo se describe una lipoprotena?
Las lipoprotenas son complejos macromoleculares compuestos por protenas y
lpidos que transportan masivamente las grasas por todo el organismo.
Son esfricas, hidrosoluble, formados por un nucleo de lpidos apolares (colesterol
esferificado y triglicridos) cubiertos con una capa extrema polar de 2 nm formada
por apoproteinas, fosfolpidos y colesterol libre. Muchas enzimas, antgenos y
toxinas son lipoprotenas.
2.- Cul es el papel de las Apoproteinas?
Las apoproteinas sirven como cofactores y activadores de sistemas enzimticos
tal es el caso, de la APO CU que acta como cofactor de la lipoproteinlipasa
(LPL), la APO H, que sera un modulador de la misma enzima, la APO Al que
encuentra en las HDL y activa la enzima Lecitin Colesterol Acil Transferasa
(LCAT). Esta enzima esterifica al colesterol libre favoreciendo el intercambio del
colesterol de los tejidos a las HDL, garantizando asi el transporte centrpeto del
colesterol.

Otra funcin importante de las Apoprotenas es su especificidad como marcador
en la unin con receptores especficos, para su metabolizacin e internalizacin y
degradacin esto est determinado por la fijacin de ciertas Apolipoprotenas
(APO B y APO E) a receptores especficos APO B y APO B-E hepticos, como
ejemplo tenemos la APO B-100 como la Apoprotena estructural de las
lipoprotenas responsables del metabolismo de los lpidos endgenos (VLDL, IDL
Y LDL), y es la encargada de la fijacin a los receptores LDL especficos.

3.- Define que son los quilomicrones
Son grandes partculas esfricas que recogen desde el intestino delgado los
triglicridos, los fosfolpidos y el colesterol ingeridos en la dieta llevndolos hacia
los tejidos a travs del sistema linftico. Estn compuestos en un 90% por
triglicridos, 7% de fosfolpidos, 1% colesterol, y un 2% de protenas
especializadas, llamadas apoprotenas.
4.- que es una lipoprotena de muy baja densidad (VLDL)
Son un tipo de protenas producidas por el hgado. Las VLDL son uno de los cinco
grupos principales de lipoprotenas (quilomicrones, VLDL, lipoprotenas de
densidad intermedia, lipoprotenas de baja densidad, y lipoprotenas de alta
densidad) que permiten a las grasas y al colesterol moverse dentro de la solucin
acuosa del torrente sanguneo. Las VLDL se forman en el hgado a partir de
los triglicridos, el colesterol y apolipoprotenas
5.-Cual es el papel de las lipoprotenas de baja densidad (LDL).
La principal funcin del LDL parece ser la de transportar el colesterol a varios
tejidos en todo el cuerpo. Tienen unos receptores que captan los lipidos libres y
los transportan hacia las arterias y ah se depositan, formando una placa, lo cual
se llama ateroesclerosis, esto es un deposito lpido abajo de una de las capas de
las arterias reduciendo su luz.
6.-que papel desempean las lipoprotenas de alta densidad (HDL)
La principal funcin del HDL es ayudar a absorber el exceso de colesterol de las
paredes de los vasos sanguneos y llevarlo al hgado, donde es descompuesto y
eliminado del cuerpo a travs de la bilis.
7. Cul es la importancia clnica de las Lipoprotenas?
Su importancia radica en el conocimiento de la homeostasis del colesterol que
puede comprenderse revisando las consecuencias que tienen las concentraciones
plasmticas elevadas de colesterol cuando se mantiene de forma prolongada. El
colesterol es muy insoluble y se acumula en los leucocitos que se depositan en
las zonas de lesin sobre las paredes internas de las arterias.
Si las concentraciones de colesterol son demasiado altas para su posterior
eliminacin hacia el torrente sanguneo, estas clulas quedan repletas de
depsitos grasos, que luego se endurecen formando una placa, y finalmente
obstruyen vasos sanguneos causando infartos, o sea, ataques cardiacos.
8.-Cul es la finalidad de estudiar la hipertrigliceridemia?
Es un factor de riesgo cardiovascular independiente y pancreatitis aguda, adems
est incluido junto con los niveles de HDL colesterol, en los criterios de sndrome
metablico de la ATP III. Tambin existe evidencia de que el tratamiento
hipolipemiante de aquellos pacientes con dislipidemia aterognica (elevacin de
triglicridos y apolipoprotena B, bajo HDL colesterol, y lipoprotenas pequeas y
densas) presenta una reduccin significativa de los eventos cardiovasculares.
Las estatinas, los fibratos, la niacina y el aceite de pescado (omega 3) son los
principales agentes farmacolgicos para el tratamiento de la hipertrigliceridemia.

9.- Cules son los valores de referencia de triglicrido para hombres y mujeres?
36-165 mg/dl
10.- Factores que intervienen en la determinacin de triglicridos
El alcohol interfiere en los resultados de los exmenes de sangre para
triglicridos, colesterol y Gama GT. Evite bebida alcohlica por lo menos tres das
antes de hacerse los exmenes de sangre.
11.- Explica a que se debe la presencia del suero hiperlipemico.
En la sangre, la grasa la vuelve ms espesa, pero los capilares siguen con el
mismo grosor y el corazn tiene que bombear con ms fuerza para hacer llegar el
oxigeno a todos los tejidos, por lo que a veces se hipertrofia, o sea aumenta su
tamao. Es parecido a la densidad de la leche de litro y la condensada, a mayor
viscosidad, menos nutricin celular y mas afectaciones de todo tipo entindanse
sexuales o cerebrales.
Los laboratoristas experimentados con solo ver la sangre a simple vista durante la
extraccin ya nos dicen que tiene suero hiperlipmico.
12.- Menciona cuales son las funciones de las enzimas responsables de la
degradacin de los quilomicrones.
En el torrente sanguneo, los quilomicrones adquieren apoC-II y apoE de las HDL
en plasma. En los capilares del tejido adiposo y el msculo, los cidos grasos de
los quilomicrones son eliminados a partir de los triglicridos por la accin de la
lipoprotena lipasa (LPL), que se encuentra en el superficie de las clulas
endoteliales de los capilares.
La lipoproteinlipasa o LPL es una enzima que hidroliza a los triglicridos de los
quilomicrones y lipoprotenas de muy baja densidad, y los descompone a cidos
grasos libres y glicerol, liberndolos en msculo y tejido adiposo
13.- Cual es la funcin de los triglicridos en el organismo
Los triglicridos son el tipo ms comn de grasas o lpidos transportados en
nuestra sangre, depositados en nuestras clulas o presentes en los alimentos. El
90% de las grasas contenidas en los alimentos y de las grasas depositadas en
nuestro cuerpo se encuentran en forma de triglicridos. Las caloras que
consumimos y no son utilizadas por nuestro organismo se depositan en nuestro
cuerpo en forma de triglicridos.
Los triglicridos presentes en plasma derivan de dos fuentes diferentes: de los
alimentos grasos ingeridos, o de la sntesis en nuestro hgado a partir de otros
nutrientes. El hgado transforma el exceso de caloras, grasas o hidratos de
carbono consumidos en triglicridos.
Una vez en sangre, los triglicridos pueden ser depositados en las clulas o
utilizados como fuente energtica.







14.- Describe el fundamento de la reaccin de esta determinacin
FUNDAMENTO DEL METODO:
Los triglicridos han sido comnmente determinados por mtodos que liberan y
miden glicerol. sta liberacin se ha desarrollado ya sea por hidrlisis enzimtica o
con el uso de un lcali. El primer mtodo completamente enzimtico fue descrito
por Bucolo y David en 1973. Este mtodo fue modificado a una prueba
colorimtrica por MEGRAW 1979. El presente mtodo usa una modificacin del
mtodo Trinder que es una reaccin rpida de color de punto final y lineal.
15.- Menciona cual es la importancia de los resultados de la hipertrigliceridemia y
en que patologas se presenta
Cuando los triglicridos aumentan en sangre por arriba de los valores normales,
este trastorno se denomina hipertrigliceridemia.

Entre los factores que contribuyen a elevar los triglicridos tenemos: obesidad,
sobrepeso, sedentarismo, tabaquismo, exceso en el consumo de alcohol, dietas
con excesivo consumo de carbohidratos, ciertas enfermedades, medicamentos y
desrdenes genticos.

La hipertrigliceridemia est asociada con el sndrome metablico y con la diabetes,
as como el riesgo de enfermedades cardiovasculares, independientemente de los
niveles de triglicridos. La hipertrigliceridemia puede ser un marcador importante
en la deteccin de estas graves anormalidades metablicas y vasculares.

BIBLIOGRAFA
Dharan, Murali. Control de Calidad en Los Laboratorios Clinicos, Editorial
REVERT, Pg. 17-20, Espaa 2002.
Daz Portillo, Maria Teresa. Aspectos Bsicos de Bioqumica Clnica.
Editorial REVERT. Pg. 254-289. Madrid 2001.

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