Universidad Andrs Bello

Facultad de Ciencias Biolgicas

Laboratorio de Biologa Molecular y Gentica
Profesores: Valentina Muos
Vernica Noches





TRABAJO PRCTICO N4:

COMPONENTES QUIMICOS DE LA
CELULA
BIO-131-8







AUTORES:
Sebastin Cerda
Carolina Donoso
Darling Herra
Alexandra Neumann



INTRODUCCION
Todo ser humano est compuesto por molculas, los cuales est agrupados en dos grupos
diferentes: molculas orgnicas y molculas inorgnicas
Las primeras son molculas que estn conformadas principalmente por hidrgeno, oxgeno
y carbono aunque algunas tambin pueden presentar nitrgeno, fsforo, azufre y hierro. La
gran mayora de estas molculas est formada por la unin de monmeros y estos, a su vez,
conforman los polmeros. Entre las distintas molculas orgnicas podemos encontrar:

Hidratos de Carbono.
Lpidos.
Protenas.
cidos Nucleicos.

Las segundas, las molculas inorgnicas son aquellas molculas compuestas por distintos
elementos pero no que no poseen carbono en su estructura. Pueden dividirse en simples o
compuestas. Las simples son aquellas que estn conformadas por un mismo elemento y, por
lo tanto, las compuestas son aquellas que estn conformados por dos o ms elementos
distintos. Entre este tipo de molculas podemos encontrar:

Agua.
Sales Minerales.

En conjunto, estas molculas son esenciales para la vida de las personas debido a que estn
Organizadas en unidades superiores denominadas clulas. Y es en el interior de estas en
donde se realiza todo tipo de reacciones qumicas necesarias para la regularizacin de
nuestro organismo.
Nuestra Hiptesis ser que las reacciones sern propicias si utilizamos correctamente los
reactivos y reactantes.

OBJETIVOS
Identificar los distintos componentes de la celular mediante los mtodos de tincin y
Conocer los distintos mtodos de tincin, como lo son las reacciones de Fehling:
Lugol, biuret.
Observar cmo puede variar una reaccin dependiendo a la temperatura que se encuentre
esta, y qu diferencias hay entre una reaccin a temperatura ambiente y una reaccin a
mayor temperatura











Materiales y Mtodos


Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de reaccin de Fehling:
Se utilizaron 5 tubos de ensayo. En cada uno de ellos se agreg 1ml de sustancia o muestra
ya sea de: H2O, Glucosa (1%), Almidn (1%), Leche y NaCl y luego se le aplic 1ml de
Fehling A Y un ml de Fehling B a cada tubo de ensayo. Se agita, se lleva a bao
termorregulador por unos minutos y comparamos los resultados.

Identificacin de polisacridos mediante la prueba del Lugol:
Utilizando 5 tubos de ensayo, colocamos 1ml de: h2O, glucosa, almidn, leche y NaCl. En
cada uno, luego a cada muestra le agregamos 1 gota de solucin de lugol y agitamos. Por
ultimo observamos y comparamos los resultados de cada tubo.

Reaccin de Biuret para la identificacin de protenas:
Utilizando 5 tubos de ensayo, colocamos 1ml de: h2O, glicina 1%, clara de huevo, leche y
Nacl 1%, luego a cada muestra le agregamos 1 ml de Biuret y agitamos. Por ultimo
Observamos y comparamos los resultados de cada tubo.

Reconocimiento de solubilidad de lpidos:
Utilizando 2 tubos de ensayo, colocamos en uno, 1 ml de agua + 1 ml de aceite y en el otro
1 ml de ter + 1 ml de aceite, agitamos y observamos los resultados de cada tubo.

Reconocimiento de Sales Minerales:
Esta actividad se bas en la preparacin de una gradilla con dos tubos de ensayo, teniendo
un objetivo para cada uno: la identificacin de cloruros el n 1 y la identificacin de calcio
el n2. A los dos tubos de ensayo se les aadi 1 ml de cloruro de calcio, luego los
procedimientos fueron diferentes para cada uno:
Tubo N1: identificacin de cloruros: Despus de lo previamente dicho, se aadi 1ml de
Solucin de nitrato de plata al 1%.
Tubo N2: identificacin de calcio: Despus de lo previamente dicho, se aadi 1ml de
solucin de oxalato de amonio al 1%

Reconocimiento de Enzimas: Determinacin de la Catalasa.
En dos tubos de ensayo se colocaron trozos de hgado, luego al tubo de ensayo 1 se le
aadi 1ml de agua oxigenada, mientras que al tubo de ensayo 2 primero lo
colocamos a bao termorregulador por varios minutos, a una temperatura aproximada a
los 90 C para cocer el hgado, despus de esto se le aadi 1 ml de agua oxigenada, luego
de esto comparamos ambos resultados.







Resultados

ACTIVIDAD 1: RECONOCIMIENTO DE HIDRATOS DE CARBONO

A) Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Fehling:


Muestra Reaccin Observaciones
1. Agua
destilada

-
Se observa un cambio en la tincin del agua destilada
de transparente a un color azul
2. Solucin
glucosa 1%

+
Se observa una reaccin diferente, un cambio de
coloracin a marrn.

3. Solucin
almidn 1%
-
Se observa un reaccin con el cambio de color al azul
4. Leche
+
Se observa un cambio al color marrn
5. Solucin
NaCl 1%
-
Se observa un cambio al color azul


B) Identificacin de polisacridos mediante la prueba del Lugol:






Muestra Reaccin Observacin
1. Agua destilada
-
El color cambia a un
amarillo fuerte
2. Solucin glucosa 1%
-
El color cambia a un
amarillo fuerte
3.Solucin almidn 1%
+
El color cambio a un azul
fuerte
4. Leche
-
El color cambio a un
amarillo plido.
5. Solucin NaCl 1%
-
El color cambio a un
amarillo fuerte.




ACTIVIDAD 2

RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
Reaccin con Biuret
Muestra Reaccin con Biuret Observaciones
H2O



-
Cambio de color a un azul
claro casi transparente.
Glicina
-
Cambio de color a un azul
claro casi transparente.
Clara de huevo
+

Cambio de color a un violeta
oscuro
Leche

+
Cambio de color a un
violeta claro.
Nacl

-
Cambio de color a un azul
claro casi transparente.


Cmo explica la diferencia de intensidades en los tubos que presentaron una reaccin
positiva?
La intensidad de color depende de la cantidad de enlaces peptdicos que estn presentes,
como la clara de huevo es protena puro contiene ms enlaces peptdicos y por ende su
color fue violeta intenso, y la leche solo alcanzo hacer un violeta claro por su baja
concentracin proteica.



ACTIVIDAD N 3

Solubilidad de lpidos

Tubo Muestra Observaciones
1 Aceite + agua Se observa un mescla heterogenia de dos faces
2 Aceite + ter Se observa una mescla homognea.





ACTIVIDAD N 4


Tubo Contenido Reacion

Observacin
1 cloruro de calcio y
nitrato de plata al 1%

+
reaccin inmediata y
ms precipitada que
el tubo n2

2 cloruro de calcio y
oxalato de amonio al
1%

+

reaccin inmediata y
menos precipitada en
comparacin al tubo








ACTIVIDAD N5
RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS

Determinacin de la presencia de Catalasa:

Tubo Contenido Temperatura Reaccin Observacin
1 Trozos de
hgado y
Agua
oxigenada

Sin ser sometido a
altas temperatura
+
Reaccin
inmediata y
burbujeante
2 Trozos de
hgado cosido
y agua
oxigenada



Aproximadamente
90
-
Sin reaccin






Discusin

En base a los resultados y observaciones obtenidos en el desarrollo antes planteado.
En la actividad 1. Identificacin del monosacrido mediante la reaccin de Fehling. En la
reaccin se espera que los reactivos de Fehling A y B al interactuar con monosacridos, que
son agentes reductores, reduzcan al ion cprico en ion cuproso formando un precipitado de
color rojo ladrillo correspondiente al oxido cuproso en un medio alcalino y caliente.8 En
esta actividad preparamos 5 soluciones en tubos de ensayo. Observamos que la solucin de
Fehling con glucosa cambio de color tomando un color rojo ladrillo apareciendo un
precipitado que segn la reaccin correspondera a oxido cuproso. La reaccin de Fehling
solo identifica monosacridos por lo que la tincin de la solucin con almidn sera
incorrecta.9 En una segunda reaccin con Lugol y los mismos reactantes anteriores
obtuvimos una tincin de color azul-violeta oscuro en la solucin de Lugol con una
coloracin azul-violeta caracterstica.10

Actividad N2. Reconocimiento de protenas mediante la reaccin de Biuret. El reactivo
est formado por sulfato de cobre y tartrato doble de sodio di potasio en medio alcalino, el
ion cobre 2+ reacciona con los grupos aminos de los enlaces peptdicos de las protenas
formando un enlace coordinado con cuatro tomos de nitrgenos. Este enlace coordinado es
el responsable de la coloracin violeta intensa caracterstica.11
Observamos que tres de los compuestos utilizados no reaccionaron con el Reactivo de
Biuret. Esto ocurri debido a que dos de las muestras, la mezcla de Biuret con agua
destilada y Biuret con Cloruro de sodio, contenan un compuesto de origen no proteico por
lo que no reaccionan en presencia de Biuret. Sin embargo, en el tubo con glicina
(aminocido no esencial) que tiene una estrecha relacin en la formacin de pptidos
tampoco reacciona ya que el Reactivo de Biuret acta solo en polisacridos. En cambio, en
las muestras de clara de huevo u Ovoalbmina de huevo y la leche el reactivo de Biuret
reacciona formando una solucin que toma un color violeta intenso, ms claro en la leche
por su coloracin inicial blanca, las tonalidades obtenidas varan tambin segn las
concentraciones de las protenas. Esto es debido a que ambas sustancias tienen un origen
proteico y el reactivo acta en cada una frente a su composicin qumica.
Actividad N3. Reconocimiento de solubilidad de lpidos. En la mezcla de la reaccin de
agua y aceite, el aceite queda sobre el agua. Esto se da gracias a las composiciones
qumicas y las distintas naturalezas de cada compuesto, el agua es polar y el aceite es
apolar, por lo que siempre se van a repeler entre estos y uno siempre flotara sobre el
otro, lo que explicara que no se logren juntar y adems las diferencias de densidad.12
Luego, al agitar el tubo de ensayo, se logra la emulsin entre ambos compuestos
formndose en la solucin donde en el agua quedan gotas en suspensin las cuales son
llamadas micelas. Posteriormente, luego de un tiempo en reposo vuelven a su estado inicial,
y esto se explica por reorganizacin de los lpidos en una capa superficial.
En la mezcla de aceite y el ter ocurre todo lo contrario ya que, ambos son lpidos, apolares
y altamente solubles entre s por lo que resultan mezclndose homogneamente.

Actividad N4. Reconocimientos de sales minerales. La precipitacin ocurre cuando se
forma una sustancia que no se diluye en la solucin debido a una reaccin qumica, o
porque la solucin ha sido sobresaturada es decir cuando no acepta ms soluto. Este, como
no puede ser disuelto, forma el precipitado que dependiendo de la densidad de este slido
formado, puede irse al fondo o puede flotar en la superficie dependiendo de la densidad.
En esta actividad en ambos tubos, el de Cloruro de Calcio con Oxalato de amonio y el
Cloruro de Calcio y Nitrato de Plata, se produjeron reacciones qumicas con precipitaciones
de las sales minerales. En los tubos con agua destilada, no hubo precipitado, ya que el agua
disolvi las sales.
Respecto al proceso de precipitacin presente en ambos tubos podemos decir que en el tubo
que contena Cloruro de Calcio con Oxalato de amonio, dicha solucin se saturo de manera
rpida, por lo que no pudo ser completamente disuelto el soluto formndose un precipitado.
En el tubo que contena Cloruro de calcio y nitrato de Plata se observ una leve
concentracin de soluto que se empez a precipitar pero ms lentamente. 13
Actividad N5. Reconocimientos de Enzimas. Determinacin de la presencia de Catalasa,
una enzima muy importante.
La catalasa es una enzima presente en las clulas de los tejidos animales y vegetales que
acta como descomponedor del agua oxigenada (H2O2), que es una sustancia toxica para el
metabolismo celular, en agua y en oxgeno. 14
La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:
2H2O2 ======> 2H2O + O2

Esta enzima al ser sometida a altas temperaturas, se desnaturaliza, y pierde su estructura y
funcin, es decir, no descompondr el perxido de hidrogeno en agua y oxgeno.15
En el tubo 1 al someterlo a una elevada temperatura (90C) logramos desnaturalizar a la
catalasa y como resultado, no se dio la descomposicin del perxido de hidrogeno en agua
y oxgeno, y como no se liberaron partculas de oxigeno no logramos observar burbujas.
Pero al mismo tiempo, aunque no vimos cambio fsico alguno, quizs si hubo algn cambio
qumico imperceptible a simple vista, ya que al no funcionar la catalasa es muy probable
que las clulas del hgado hayan sido afectadas por el perxido de hidrogeno, que es una
sustancia toxica para las clulas de los tejidos animales, como lo es el hgado observado.
En el tubo 2 al poner en contacto tejidos animales (hgado) con agua oxigenada, se activ la
enzima catalasa del hgado y empez a descomponer el perxido de hidrogeno en agua y
oxigeno; lo que nosotros observbamos como burbujas en la solucin acuosa del tubo 2, en
realidad eran los oxgenos liberados por la accin de la catalasa.













Conclusin




La clula es y ha sido material de estudio desde tiempos remotos, por la razn de
descubrirnos y saber nuestro funcionamiento, es as que sabemos de qu est compuesta:
agua, iones inorgnicos (sales minerales) y molculas orgnicas que contienen carbono.
Para esto en este
Informe hemos realizado y analizado diferentes tipos de tcnicas o pruebas para el
Reconocimiento de ellas: reconocimiento de hidratos de carbono, reconocimiento de
protenas, reconocimiento de lpidos, reconocimiento de sales minerales y reconocimiento
de enzimas.
Sabemos ahora, que a travs de estas tcnicas se puede saber dnde se encuentran cada una
de stas.


































Bibliografa.



1. http://bvs.sld.cu/revistas/ang/vol2_2_01/ang10201.pdf
2. http://www.sediabetes.org/resources/revista/00011304archivoarticulo.pdf
3.http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practica1.htm
4.http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practica1.htm
*F. Burriel Mart, F. Lucena Conde, S. Arribas Jimeno, J. Hernndez Mndez, Qumica
Analtica
Cualitativa, 18 edicin, 2008, pg. 138
5. Jos M. Macarulla, Flix M. Goi, Biomolculas. 3.ed. Barcelona; Espaa; Editorial
Reverte S.A., 1984. Pag. 83, 84,85.
6. Jos M. Teijn R., Bioqumica Estructural, Editorial TbarR de casa de Editorial Mares,
S.L. Pag. 109-110.
7. Enrique Battaner Arias, Biomolculas, 1 ed. Espaa; Enrique Battaner Arias, 1993. Pag.
264.
8. Alberts, Bruce, Introduccin a la biologa celular. Barcelona: Omega, c1999.