Protocolo Efluentes

Pg.
215563 NORMAS LEGALES

Lima, domingo 13 de enero de 2002
DIARIO OFICIAL
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Director: Hugo Garavito Amzaga Lima, domingo 13 de enero de 2002
SEPA R ATA ESPECIAL
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NORMAS LEGALES
Ministerio de Pesquera
INDUSTRIA PESQUERA DE CONSUMO
HUMANO INDIRECTO
PROTOCOLO PARA
EL MONITOREO
DE EFLUENTES Y
CUERPO MARINO
RECEPTOR
Diciembre de 2001
Pg. 215564 NORMAS LEGALES
RESOLUCION MINISTERIAL
N 003-2002-PE
Lima, 10 de enero del 2002
CONSIDERANDO:
Que el Artculo 6 de la Ley General de Pesca, aprobada por Decreto Ley N 25977, establece que el
Estado, dentro del marco regulador de las actividades pesqueras, vela por la proteccin y preservacin del
medio ambiente, exigiendo que se adopten las medidas necesarias para prevenir, reducir y controlar los
daos o riesgos de contaminacin o deterioro en el entorno martimo, terrestre y atmosfrico;
Que los Artculos 85 y 86 del Reglamento de la Ley General de Pesca, aprobado por D.S. N 012-2001-
PE, establece que los titulares de las actividades pesqueras estn obligadas a realizar programas de moni-
toreo peridicos y permanentes para evaluar la descarga contaminante de sus efluentes y emisiones en el
cuerpo receptor y en el rea de su influencia, conforme a los protocolos aprobados por el Ministerio de
Pesquera, presentando los resultados a la Direccin Nacional de Medio Ambiente para su evaluacin y
verificacin;
Que por Resolucin Ministerial N 721-97-PE del 14 de noviembre de 1997, se aprob el Monitoreo de
Efluentes de la Industria Pesquera de Consumo Humano Indirecto;
Que es necesario aprobar un nuevo Protocolo de Monitoreo de Efluentes para la Industria Pesquera de
Consumo Humano Indirecto y del Cuerpo Marino Receptor actualizado de acuerdo a la normatividad pes-
quera vigente, debiendo procederse a dejar sin efecto la Resolucin Ministerial N 721-97-PE;
De conformidad con lo establecido en los Artculos 85 y 86 del Reglamento de la Ley General de
Pesca, aprobado por Decreto Supremo N 012-2001-PE;
Con la opinin favorable del Viceministro;
SE RESUELVE:
Artculo 1.- Aprobar el Protocolo de Monitoreo de Efluentes para la Actividad Pesquera de Consumo
Humano Indirecto y del Cuerpo Marino Receptor, el mismo que consta de siete captulos y cuatro anexos
que forman parte integrante de la presente Resolucin.
Artculo 2.- Los titulares de establecimientos industriales pesqueros que cuentan con licencia de ope-
racin para el procesamiento de productos destinados al consumo humano indirecto, debern presentar los
resultados de los protocolos referidos en el artculo anterior a la Direccin Nacional de Medio Ambiente en
forma mensual, a los quince das posteriores del mes vencido y conforme a lo especificado en el protocolo
y en el Formato de Reporte anexo IV de dicho protocolo que forma parte de la presente Resolucin Minis-
terial.
Artculo 3.- El incumplimiento de lo dispuesto en el artculo precedente por tres veces consecutivas o
cinco alternadas, dar lugar a la suspensin de la licencia de operacin hasta que subsane la omisin.
Artculo 4.- Aquellas empresas que cuentan con licencia de operacin vigente para consumo humano
indirecto, cuya actividad genera agua de bombeo que no hayan cumplido con instalar equipos para la
recuperacin de slidos suspendidos, as como equipos para la recuperacin de grasas y aceites del agua
de bombeo o tenindolos stos no se encuentren en funcionamiento, sern sancionados con la suspensin
de su licencia de operacin hasta que cumplan con instalar dichos equipos.
Artculo 5.- Dejar sin efecto la Resolucin Ministerial 721-97-PE del 14 de noviembre de 1997
Regstrese, comunquese y publquese.
JAVIER REATEGUI ROSSELLO
Ministro de Pesquera
1. CONTENIDO
Este documento contiene las pautas bsicas para la
ejecucin del monitoreo, procedimiento analtico, pro-
cesamiento de los datos y elaboracin de informes.
Comprende los siguientes captulos: Introduccin,
Contenido de la Gua, Relacin con otros documen-
tos, Base Legal, Programa de Monitoreo Ambiental y
Anexos.
2. INTRODUCCION
La industria pesquera de Consumo Humano Indirecto
en la ltima dcada ha incrementado sus niveles de
produccin utilizando tecnologas de punta, lo cual
le ha permitido obtener productos de mayor calidad
y competitividad en el mercado internacional. A pe-
sar del esfuerzo tcnico econmico que el sector
industrial productivo viene desarrollando, subsisten
las implicancias ambientales que el desarrollo de
dicha actividad ejerce sobre la calidad del medio
ambiente.
Debido a los grandes volmenes de desembarque, el
agua de bombeo es el efluente que ejerce mayor im-
pacto alterando la calidad acutica del cuerpo recep-
tor, por lo que requiere mayores esfuerzos en su tra-
tamiento y monitoreos para su control y vigilancia;
mientras que la sanguaza, el agua de cola, agua de
lavado y limpieza de maquinarias y equipos, y los re-
siduos domsticos provenientes de las plantas pes-
queras tienen un impacto mucho menor por sus bajos
volmenes de vertido. Entre los factores de la activi-
dad productiva causantes de estos problemas se pue-
den enunciar los siguientes:
Carencia de una tecnologa ptima para el trata-
miento y disposicin del agua de bombeo.
Variabilidad en la calidad de la materia prima.
Otros aspectos que influyen en el efecto que tiene la
descarga de los efluentes producidos por la industria
pesquera al medio marino son:
Caractersticas geomorfolgicas del litoral perua-
no.
Rgimen de vientos.
Sistema complejo de corrientes marinas.
Capacidad asimilativa o ambiental.
Estas condiciones han generado que existan reas
de mayor impacto que otras. Tal es el caso de Chim-
bote, Paracas y Chancay. Entre las de menor impacto
se encuentran las reas de Tambo de Mora, Ilo, Sa-
manco y Sechura, entre otras.
De acuerdo al Reglamento de la Ley General de Pes-
ca (Decreto Supremo 012-2001-PE), "los titulares de
las actividades pesqueras estn obligados a realizar
programas de monitoreo peridicos y permanentes
para evaluar la carga contaminante de sus efluentes
y emisiones en el cuerpo receptor y en el rea de
influencia de su actividad, con el objeto de:
a) Determinar la eficiencia de las medidas de pre-
vencin y control de la contaminacin;
b) Evaluar la calidad de los cuerpos receptores y las
variaciones de sus cargas contaminantes;
c) Evaluar el cumplimiento de metas referentes a la
reduccin de emisiones y vertimientos propuestos
y de regulaciones legales".
Este Protocolo ha sido elaborado con la participacin
de: Ministerio de Pesquera, Instituto del Mar del Per,
USAID/PERU, CONAM y DICAPI; con el fin de orien-
tar a los entes gubernamentales, empresas pesque-
ras y empresas consultoras ambientales, en el dise-
o e implementacin de Programas de Monitoreo
Ambiental destinados a cumplir con los objetivos arri-
ba mencionados. Describe los procedimientos de mues-
treo, las tcnicas para la toma de muestras, el trabajo
analtico en el campo y en el laboratorio, y proporciona
los criterios para el procesamiento y reporte de los re-
sultados.
3. OBJETIVO
El objetivo es estandarizar los procedimientos, los m-
todos de muestreo y anlisis, de efluentes y del cuer-
po receptor asegurando la calidad de los datos y su
compatibilidad.
Los Programas de Monitoreo Ambiental que forman
parte de los estudios ambientales aprobados por el
Ministerio de Pesquera (MIPE), contribuyen en for-
ma paralela a mejorar su eficiencia productiva y des-
empeo ambiental. En este sentido, a travs de los
Programas de Monitoreo los gerentes de planta pue-
den obtener informacin valiosa para la optimizacin
del uso de materias primas y energa durante la pro-
duccin, lo cual a su vez conlleva a generar menor
cantidad de efluentes, emisiones y residuos.
Los Programas de Monitoreo Ambiental sirven ade-
ms a la Autoridad Ambiental para controlar en forma
regular y sistemtica, los efluentes lquidos y residuos
slidos de las industrias, as como su impacto en el
medio ambiente. Asimismo contribuyen a la revisin y
modificacin de los Lmites Mximos Permisibles
(LMP) y Estndares de Calidad Ambiental (ECA) y en
el establecimiento de requerimientos de monitoreo
para determinadas empresas, cuando el caso lo re-
quiera, a fin de lograr el cumplimiento gradual de los
ECA.
4. RELACION CON OTROS DOCUMENTOS
Uno de los propsitos de este documento es el de
brindar un apoyo a los responsables del desarrollo de
Estudios de Impacto Ambiental (EIA) o de Programas
de Adecuacin y Manejo Ambiental (PAMA). Por lo
tanto, el lector deber tener en cuenta, segn sea el
caso, las normas sobre EIA y PAMA.
5. BASE LEGAL
Los programas de monitoreo se sustentan en las nor-
mas ambientales vigentes aplicables a las activida-
des pesqueras y acucolas, las cuales facultan al MIPE
a incorporar normas y patrones ambientales de refe-
rencia con el mismo fin. Entre estas normas se en-
cuentran:
Constitucin Poltica del Estado (Ley de 1993).
Cdigo del Medio Ambiente y los Recursos Natu-
rales (Decreto Legislativo N 613).
Ley Marco para el Crecimiento de la Inversin Pri-
vada (Decreto Legislativo N 757) modificada por
la Ley N 26734.
Ley General de Aguas (Decreto Ley N 17752 y
sus Reglamentos).
Ley General de Pesca (Decreto Ley N 25977).
Reglamento de la Ley General de Pesca (Decreto
Supremo N 012-2001-PE a partir de ahora referi-
do como "El Reglamento").
Reglamento Nacional para la Aprobacin de Es-
tndares de Calidad Ambiental y Lmites Mxi-
mos Permisibles (Decreto Supremo N 044-98-
PCM).
Declaran inicio de actividades del Programa Anual
2001 para la aprobacin de estndares de calidad
ambiental y lmites mximos permisibles (R.P. 054-
2001-CONAM/PCD).
Resolucin Directoral N 283-96-DCG. Lineamien-
tos para el Desarrollo de estudios de Impacto
Ambiental relacionados con Proyectos de Cons-
truccin de muelles, embarcaderos y otros simila-
res.
Resolucin Directoral N 018-2001-PE (Suspenden
la recepcin de solicitudes de autorizacin para el
PROTOCOLO PARA EL MONITOREO DE
EFLUENTES Y CUERPO MARINO RECEPTOR
traslado de establecimientos industriales a las reas
de influencia de los puertos de Paita, Chimbote,
Huacho, Chancay, Callao y Pisco).
6. PROGRAMA DE MONITOREO AMBIENTAL
6.1. DEFINICION
Se entiende por Programa de Monitoreo Ambiental las
acciones de observacin, muestreo, medicin y an-
lisis de datos tcnicos y ambientales, que se realizan
para definir las caractersticas del medio o entorno,
identificar los impactos ambientales de las activida-
des del sector, y conocer su variacin o cambio du-
rante el tiempo.
6.2. DISEO
Cada Programa de Monitoreo Ambiental debe ela-
borarse para cada situacin en particular. Cabe re-
cordar que el monitoreo es un instrumento para
mantener un diagnstico actualizado de una situa-
cin ambiental especfica. En este sentido, es su-
mamente importante asegurar el resultado de las
muestras representativas seleccionando adecuada-
mente las estaciones o puntos de muestreo, tanto
como el tipo de muestras y la frecuencia de reco-
leccin.
Es importante mencionar que el muestreo es una parte
esencial de la evaluacin ambiental global. Los resul-
tados analticos del muestreo pueden ser sumamen-
te exactos y precisos, pero carecern de validez si
este no se efectu adecuadamente. Por lo tanto, la
persona encargada del diseo y ejecucin del mues-
treo debe ser un profesional calificado y capacitado,
que coordine sus acciones con el Laboratorio de An-
lisis.
En el diseo del Programa de Monitoreo Ambiental se
deben considerar las siguientes preguntas:
Cules son las etapas del proceso?
Cules son los objetivos del Programa de Monitoreo
Ambiental?
Qu parmetros se deben medir?
Qu equipos se deben seleccionar?
Cundo y con qu frecuencia se deben efectuar las
mediciones?
Dnde tomar las muestras?
Qu mediciones in situ se deben hacer?
Qu mtodos analticos se deben seleccionar?
Cmo y dnde se deben realizar los anlisis de las
muestras?
Cmo evaluar los posibles errores?
Cul es el tiempo requerido?
Cmo interpretar y reportar los resultados?
6.3. OBJETIVOS
El Programa de Monitoreo Ambiental ser realizado
para cumplir diversos objetivos generales, como: for-
mar parte de un EIA o un PAMA, verificar el cumpli-
miento de las regulaciones, u obtener informacin
que pueda ser utilizada para optimizar un proceso,
con el fin de maximizar la produccin de un deter-
minado producto, mejorar o mantener su calidad y
minimizar las emisiones de residuos al ambiente. Los
objetivos especficos del Programa de Monitoreo
Ambiental se establecern en funcin de la activi-
dad a realizar.
Si el muestreo se lleva a cabo como parte de un EIA o
un PAMA, los objetivos del Programa de Monitoreo
Ambiental son:
Obtener informacin ambiental bsica referencial o
determinar el impacto de los efluentes sobre el cuer-
po receptor, mediante:
La determinacin de la calidad del agua y el
sedimento en el ambiente (lnea base y carac-
terizacin ambiental).
La determinacin de las caractersticas del
efluente.
Si el monitoreo se realiza para determinar si una planta
est cumpliendo con los LMPs exigidos por la legisla-
cin, los objetivos especficos del Programa de Monito-
reo Ambiental son:
Cuantificar y verificar si los efluentes cumplen con
los LMP establecidos por el sector.
6.4. SELECCIN DE LOS PARAMETROS
La seleccin de los parmetros depender de los ob-
jetivos del Programa de Monitoreo Ambiental. En ge-
neral, para las actividades pesqueras se consideran
los parmetros que se indican en la Tabla 1. Otros
parmetros pueden ser requeridos en el futuro, se-
gn lo disponga la Autoridad Competentes.
Tabla 1. Parmetros a ser monitoreados en el cuerpo receptor
y efluentes de la industria pesquera de consumo hu-
mano indirecto
EN EL CUERPO RECEPTOR EN LOS EFLUENTES DE LA PLANTA
AGUA
Temperatura Caudal
Oxgeno Disuelto Temperatura
Demanda Bioqumica de Oxigeno (DBO
5
) pH
Aceites y Grasa Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO
5
)
Slidos Suspendidos Totales Aceites y Grasas
Sulfuros Slidos Suspendidos Totales
Fosfatos
Nitratos
SEDIMENTO
Granulometra del sedimento
Materia orgnica del sedimento
Macrobentos de fondo blando
6.5. ACTIVIDADES DE PRE-MUESTREO
Previamente a la recoleccin de las muestras se ha
de definir:
Equipos e Instrumentos
Los equipos e instrumentos de medicin in situ
deben estar limpios y calibrados antes de ir al cam-
po, dejndolos en el mismo estado al finalizar el
muestreo.
Limpieza y calibracin de los equipos e instru-
mentos
Para garantizar la calidad del anlisis se debe limpiar y
calibrar el equipo como parte de los preparativos del
trabajo de campo. Tambin debe limpiarse el equipo al
finalizar el trabajo de campo y mantenerse en ptimo
estado de limpieza y en buenas condiciones de funcio-
namiento. Los equipos e instrumentos deben contar con
un plan de mantenimiento preventivo, as como llevar
un registro de calibracin, mantenimiento, cambio de
partes o accesorios, reemplazo de instrumentos y cual-
quier problema de fallas o mal funcionamiento. Se debe
verificar que cada instrumento cumpla con los estnda-
res de calibracin antes de ir al campo.
Recipientes de muestreo
Se puede utilizar botellas de polietileno, vidrio o
de material especial, segn el parmetro que se
vaya a determinar (Tabla 3 y 4).
El personal de muestro y de laboratorio debern to-
mar precauciones para evitar la contaminacin de
muestras, seleccionando los recipientes apropiados,
lavndolos y manipulndolos adecuadamente. Los
recipientes de muestras de agua y de efluentes,
pueden volverse a usar slo si se lavan adecua-
damente. Generalmente se recomienda un lavado
inicial con detergente, seguido de 3 enjuagues con
agua corriente limpia, filtrada o agua destilada, 1 vez
con mezcla sulfocrmica, 3 veces con agua, 1 vez
con cido ntrico y 3 veces con agua destilada y
enjuague final con agua bidestilada; finalmente se-
car en la estufa. El lavado de los recipientes para
efluentes debe ser estricto. No es recomendable
volver a usar botellas donde hayan estado almace-
nados qumicos o reactivos concentrados debido al
riesgo de contaminacin.
Preparacin de muestras "blanco"
Antes de salir al campo se debe seleccionar el
10 % de cada tipo de botella. Esta seleccin ser
utilizada como "blancos de botella". Estas bote-
llas deben llenarse con agua destilada y preser-
varse de manera similar a las muestras de cam-
po, almacenndose hasta que sean entregadas
al laboratorio, junto con las otras muestras, para
anlisis. No deben existir restos orgnicos o in-
orgnicos detectables. Los resultados indicarn
si existe contaminacin dentro de las botellas. El
pH y oxgeno disuelto, deben mantenerse en ni-
veles propios del agua destilada.
Lista de requerimientos
Se recomienda confeccionar una lista de equipos,
materiales, reactivos, hojas de datos de campo, for-
mularios, etc., los que sern llevados al campo. En
dicha lista se puede incluir:
- Envases para las muestras
- Envases para el blanco
- Algunos envases adicionales en caso de ruptu-
ra o muestras duplicadas
- Preservantes
- Etiquetas y plumones indelebles
- Formatos de registro de muestreo
- Termmetro
- Caudalmetro
- Muestreadores (de agua y sedimento)
- Sistema de refrigeracin (caja trmica con hie-
lo)
- Medidores de campo de pH, oxgeno disuelto
- Cronmetro
- Sistema de Posicin Geogrfica (GPS)
- Accesorios, tales como: toalla, papel absorben-
te, gancho para levantar tapas de registro, marti-
llo, soga y soguilla, lastres, bolsas de plstico,
linterna, bateras, cinta engomada, etc.
- Ropa de proteccin, como: mandiles, guantes,
botas, mascarilla, lentes, correas y cascos.
- Cronograma de muestreo.
6.6. METODOS DE MUESTREO
6.6.1. Frecuencia
La frecuencia de monitoreo de los parmetros de efluen-
tes (agua de bombeo) y cuerpo receptor se presenta
en la Tabla 2. Se realizar un mnimo de 10 muestreos:
8 en temporada de pesca (tanto en efluente como en
agua receptora) y 2 en temporada de veda (agua re-
ceptora).
Tabla 2. Frecuencia de muestreo de parmetros de efluentes y
del cuerpo receptor de la industria pesquera de consu-
mo humano indirecto.
MEDIO MATRIZ CARACTERIZACION MONITOREO MIPE
AMBIENTAL
VEDA PESCA
DESCARGA EFLUENTES 1 al ao 8 al ao *
CUERPO AGUA 1 al ao 2 al ao 8 al ao *
RECEPTOR
SEDIMENTO 1 al ao 1 cada 2 aos 1 cada 2 aos *
* El MIPE podr realizar muestreos adicionales cuando lo considere pertinente.
6.6.2. Seleccin de estaciones
A. Efluentes
Se colectarn las muestras de efluente (agua de
bombeo) a la salida del ltimo sistema de trata-
miento. Para el caso de plantas que cuenten con
lnea de emisor submarino, el efluente se tomar
en la caja de registro.
Para el caso de los dems efluentes (agua de lim-
pieza, desage general, etc.) la muestra se toma-
r en la caja de registro o punto de vertido antes
de descargar al mar.
B. Cuerpo receptor
Para los estudios de lnea base, caracterizacin am-
biental y Programas de Monitoreo Ambiental de los
EIAs y PAMAs, el muestreo del cuerpo receptor de-
ber realizarse como mnimo en 5 puntos:
1) En la chata: a 5 m de la misma siguiendo la
direccin de la corriente prevaleciente. En caso
de existencia de manchas en superficie se de-
ber registrar en el cuaderno de campo.
2) En la playa: a 5 m mar adentro de la lnea de
orilla, frente al conducto emisor de efluentes.
Se deber evitar introducir sedimento suspen-
dido en la muestra.
3) Al final del emisor, el cual deber contar con
una boya de sealizacin.
4) A 200 metros del final del emisor siguiendo la
direccin de la corriente prevaleciente.
5) Aguas fuera de la zona de impacto de las des-
cargas. Esta muestra servir de muestra con-
trol.
Alternativamente, se podra realizar un Programa
de Monitoreo Ambiental integrado entre varias plan-
tas, con el fin de cubrir toda la extensin de una
baha, incluyendo la zona de impacto de las plan-
tas presentes. En este caso los puntos de mues-
treo debern ser aprobados por el MIPE.
6.6.3. Procedimiento de toma de muestras
A. Efluentes
En el caso del agua de bombeo, la coleccin y
preservacin de muestras es de suma importan-
cia en el monitoreo, a fin de garantizar resultados
satisfactorios de los anlisis correspondientes.
Para el agua de bombeo el MIPE considera reali-
zar dos tipos de muestreo:
1. Muestreo Exploratorio: Se utilizar a criterio del
MIPE para tener un estimado inicial del estado
del agua de bombeo.
2. Muestreo de Verificacin: Se utilizar para ve-
rificar el cumplimiento de los LMP y para el re-
porte de monitoreo de los efluentes (Anexo 4).
En el Muestreo Exploratorio se tomar 1 muestra
compuesta, tomada a mitad de la descarga decla-
rada. La muestra compuesta consistir en la co-
leccin de 3 submuestras, de 3 L cada una, colec-
tadas a intervalos de 5 minutos. Inmediatamente
colectadas las submuestras, se registrar la tem-
peratura respectiva. Las tres submuestras se ho-
mogenizarn en un balde plstico de 10 L de ca-
pacidad.
En el Muestreo Verificatorio se tomarn 3 mues-
tras compuestas en diferentes momentos de una
jornada diaria, siguiendo el mismo procedimien-
to del muestreo exploratorio. La verificacin del
cumplimiento de los LMP se har con respecto
al valor promedio de las 3 muestras compues-
tas.
Con el fin de obtener muestras representativas, el
muestreo de efluentes deber provenir de embar-
caciones con una duracin de descarga mayor a
50 minutos.
La muestra compuesta de agua de bombeo se
deber homogenizar mediante una agitacin vigo-
rosa, inmediatamente antes de llenar los frascos
para los anlisis de Slidos Suspendidos Totales y
Aceites y Grasas; en el caso de la Demanda Bio-
qumica de Oxgeno la agitacin deber ser suave y
colectada en otro recipiente (Tabla 3), debidamente
rotulados con la fecha y hora de la colecta (Seccin
6.6.5). Los frascos sern inmediatamente manteni-
dos en refrigeracin hasta su anlisis.
Para el caso de otros efluentes, las muestras
se tomarn en el momento de la limpieza de la
planta.
Tabla 3. Requerimientos para el muestreo de agua de bombeo.
PARAMETRO VOLUMEN ENVASE PRESERVACION TIEMPO MAXIMO
REQUERIDO TIPO DE
CONSERVACION
Temperatura A/B Analisis in situ
DBO5 250-500 mL A / B Refrigerado 24 horas
a 4 C
pH 120 mL A Refrigerado a Anlisis in situ
4 C (1)
Slidos 500 mL A Refrigerado a 72 horas
suspendidos 4 C
totales
Aceites y 500 mL C HCl (1:1) pH < 2 72 horas
grasas 2,5 mL/0,5L
muestra Refrigerado
a 4 C (2)
A: Frascos de plstico con boca ancha.
B: Frascos de vidrio con boca ancha.
C: Frasco de vidrio mbar con boca ancha
(1): Cuando no se ha podido hacer la determinacin in situ.
(2): Se puede usar el H
2
SO
4
en la misma concentracin de HCl.
B. Cuerpo receptor
Las muestras de agua debern tomarse a varias
profundidades en los puntos de muestreo del cuer-
po receptor (seccin 6.6.2.B), segn se indica en
la Tabla 4. La muestra de superficie debe ser co-
lectada con un balde de plstico introducido bajo
la interfase aire - agua. La muestra de media agua
se podr tomar con una botella Niskin de 5 L de
capacidad. La muestra de agua de fondo se toma-
r a 50 cm del sustrato. Los procedimientos espe-
cficos para la coleccin y preservacin de mues-
tras del cuerpo receptor se presentan en la siguien-
te seccin y en el Anexo 3.
PARAMETRO VOLUMEN ENVASE PRESERVACION TIEMPO MAXIMO
REQUERIDO TIPO DE
CONSERVACION
Temperatura A/B - Anlisis in situ
pH 120 ml A Refrigerados a Anlisis in situ
4C (1)
Oxigeno 115 ml C Reactivos I y II Anlisis in situ
Disuelto de fijacin o mximo
24 horas
DBO
5
1000 ml A/B Refrigerados a Mximo
4C. 24 horas
Slidos 500 ml A Refrigerados a Mximo
suspendidos 4 C. 7 das
totales
Aceites y 1000 ml B H2SO4 o HCl (1:1) Mximos
Grasas pH < 2 y 28 das
Refrigerado a 4 C
Fosfatos 100 ml A Filtrar (0,45 um) y 24 horas
refrigerar a 4C
Filtrar (0,45 um) y
congelar a -20C 72 horas
Nitratos 100 ml A Filtrar (0,45 um) y 24 horas
refrigerar a 4C
Filtrar (0,45 um) y
congelar a -20C 72 horas
Sulfuros de 115 ml C Zn Acetato y 7 das
Hidrogeno Tambiente
A: Frascos de plstico con boca ancha.
B: Frascos de vidrio de color mbar con boca ancha.
C: Botella Winkler.
(1):Cuando no se ha podido hacer la determinacin in situ.
Para la determinacin de macrobentos y contenido
de materia orgnica, las muestras de sedimento
sern colectadas mediante una Draga tipo Van Veen,
que se lanza desde la embarcacin. Los procedi-
mientos especficos de coleccin y manipulacin de
muestras para cada parmetro se presentan en la
siguiente seccin y en el Anexo 3.
Tabla 5. Profundidad en la toma de muestras de agua
MUESTREO SUPERFICIE MEDIA AGUA * FONDO
Temperatura (C) X X X
Oxgeno disuelto (mg.L
-1
) X X X
DBO5 (mg.L
-1
) X X
Fosfatos (mg.L
-1
P-PO
4
) X X X
Nitratos (mg.L
-1
N-NO
3
) X X X
Sulfuros (mg.L
-1
S-SH
2
) X
Aceites y grasas (mg.L
-1
) X
Slidos Suspendidos Totales (mg.L
-1
) X X
* En estaciones con ms de 10 metros de profundidad, se tomar una muestra a la mitad de
la columna de agua.
6.6.4. Manipulacin y preservacin de muestras
A. Efluentes
Demanda Bioqumica de Oxgeno al quinto da (DBO
5
)
Por razones tcnicas la primera submuestra obteni-
da, de cada muestra compuesta ser para el anlisis
de DBO
5
, para lo cual se utilizar un frasco de plsti-
co o de vidrio esterilizado. El volumen de la muestra
estar en funcin de la concentracin del efluente, el
cual puede variar de 250 a 500 mL segn sea el caso.
La muestra ser refrigerada (4C) hasta su anlisis
(Tabla 3).
Slidos Suspendidos Totales (SST)
La muestra compuesta, colectada del efluente, se
recepcionar en frascos de plstico de 500ml y se
preservar segn lo indicado en la Tabla 3 hasta su
anlisis.
Aceites y Grasas
La muestra compuesta, colectada se recepcionar
en frascos de vidrio de 500 ml, agregndole inme-
diatamente 2,5 ml mL de cido clorhdrico (HCl, 1:1)
o tambin cido sulfrico (H
2
SO
4
, 1:1) por 0,5 L de
muestra colectada. Se homogenizar bien la mues-
tra y se mantendr en refrigeracin hasta su anli-
sis (Tabla 3).
Temperatura
Estas determinaciones se realizarn in situ en el mo-
mento del muestreo. De preferencia debe utilizarse un
termmetro calibrado .
pH
Estas determinaciones se realizarn de preferencia in
situ mediante la utilizacin de un potencimetro cali-
brado y que cuente con compensacin automtica de
temperatura.
B. Cuerpo receptor
Oxgeno disuelto
La muestra se recepciona en un frasco de vidrio de
aproximadamente 115 mL de capacidad con boca
esmerilada para recepcionar la muestra. La mues-
tra superficial se colectar sumergiendo la botella
de oxigeno en el balde en forma inclinada y suave
evitando la formacin de burbujas de aire. La mues-
tra de media agua se colectar de la botella Niskin
por gravedad. En ambos casos se debe evitar la for-
macin de burbujas y luego preservar aadiendo 1
mL de Reactivo I y 1 mL de Reactivo II (ver Anexo 3
para definicin de reactivos de preservacin), agi-
tar; guardar en un ambiente fresco y oscuro hasta
su anlisis en laboratorio. El tiempo mximo de
almacenamiento de la muestra preservada es de
24 h.
Sulfuro de Hidrgeno
La muestra se recepciona en un frasco de vidrio os-
curo de aproximadamente 115 mL de capacidad con
boca esmerilada, evitando la formacin de burbujas
de aire, se preserva con 1 mL de acetato de zinc
(Anexo 3.B) y almacenar en un lugar fresco y oscuro.
Se recomienda como tiempo mximo de almacena-
miento de 7 das.
Slidos Suspendidos Totales (SST)
La muestra previamente homogenizada se recepciona
en un frasco de 500 mL, evitando el ingreso de arena o
material grueso. Llenar hasta el hombro de la botella y
tapar. La muestra debe guardarse en refrigeracin a 4C
por un tiempo mximo de 7 das. Lo recomendable es
realizar inmediatamente el anlisis.
Aceites y grasas
La muestra se recepciona en un frasco de vidrio de
1 L, y se le agrega inmediatamente HCl o H
2
SO
4
(1:1) hasta pH < 2, homogenizar bien la muestra y
mantener en refrigeracin (4 C) hasta su anlisis.
Se considera un periodo mximo de almacenamien-
to de 28 das.
Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO
5
)
La muestra se recepciona en un frasco de vidrio o pls-
tico limpio de 1 L, llenndola completamente. Para evi-
tar la descomposicin de la muestra por accin micro-
biana, se deben mantener las muestras a 4C por un
perodo mximo de 24 horas desde su colecta.
Nitratos
La muestra se recepciona en una botella de polietile-
no de 100 mL, previamente enjuagadas con el agua
de mar a ser analizada. Si la muestra tiene mucho
material particulado en suspensin se recomienda
filtrarla y refrigerar inmediatamente, si el anlisis se
realiza dentro de las 24 horas. En caso contrario,
congelar la muestra por un tiempo mximo de 72 ho-
ras hasta su anlisis
Fosfatos
La muestra se recepciona en una botella de polietile-
no de 100 mL, previamente enjuagadas con el agua
de mar a ser analizada. Si la muestra tiene mucho
material particulado en suspensin se recomienda
filtrar y refrigerar inmediatamente, si el anlisis se
realiza dentro de las 24 horas. En caso contrario,
congelar la muestra por un tiempo mximo de 72 ho-
ras hasta su anlisis
Macrobentos
Para la coleccin y manipulacin de las muestras de
fondo blando se deben seguir los siguientes pasos es-
pecficos:
A. La muestra es colectada mediante una draga tipo Van
Veen de 0,05 m
2
de rea de mordida, la cual es lanzada
desde la embarcacin. En cada estacin de muestreo
se debe tomar la muestra por triplicado.
B. Tras la recoleccin de la muestra del fondo, se vier-
te todo el contenido de la draga a las bolsas tamiz
de 500 m de abertura de malla y se lava con agua
de mar cuidadosamente eliminando todo el fango.
C. Luego el material retenido es trasladado con cuida-
do a los frascos de plstico de 0,5 L previamente
rotul ados. Ensegui da l as muestras deben ser
fijadas con una solucin de formalina al 10 %
neutralizada con brax. Los frascos deben ser lle-
nados con la solucin de formalina hasta el hombro
del frasco.
D. Los frascos de muestreo deben ser etiquetados o rotu-
lados anotando lo siguiente: nmero de estacin y n-
mero de rplica, lugar de muestreo, fecha, hora, volu-
men de muestra (porcentaje de llenura de la draga), res-
ponsable de la colecta.
Materia orgnica en sedimentos
La colecta se realiza empleando para tal efecto una dra-
ga tipo Van Veen, de 0,05 m
2
, separando slo los pri-
meros 3 cm del sedimento superficial.
Una vez colectada la muestra en una bolsa de plstico
debe mantenerse congelada hasta su respectivo anli-
sis, con el fin de minimizar la descomposicin micro-
biolgica.
6.6.5. Rotulado de las muestras
Es importante que cada muestra llegue al laboratorio
con una identificacin o etiqueta numerada. Los fras-
cos y contenedores debern ser rotulados correctamen-
te, deber rotularse el frasco y no la tapa. Al nmero o
cdigo de la muestra debe corresponder un registro
(hoja de muestreo) que contenga los siguientes datos:
A. Nmero o cdigo de la muestra
B. Tipo de anlisis
C. Ubicacin geogrfica (Latitud, Longitud), y nombre
del punto de muestreo
D. Fecha y hora de recoleccin
E. Nombre del responsable y compaa que toma la
muestra
F. Observaciones complementarias.
Adems del rotulado, es importante anotar en una li-
breta de campo cualquier observacin adicional que
ocurra durante el muestreo. Por ejemplo: color, olor, tem-
peratura, presencia de partculas, manchas, condicio-
nes meteorolgicas (antes y durante la toma de la mues-
tra, sean: lluvia, sol, direccin del viento, temperatura
ambiental).
Cada contenedor, deber contener una lista de embar-
que en la que debe figurar los nmeros de las mues-
tras, parmetros por analizar, tipo de muestras, tcnica
de preservacin, la fecha de embarque y nombre del
laboratorio o compaa que se encargar del anlisis.
El personal adems usar formatos de entrega y re-
cepcin de muestras.
6.6.6. Precauciones durante el muestreo
Durante el manejo de las muestras, se deber tener
cuidado con el manejo de los reactivos utilizados
como preservantes. La preservacin de las mues-
tras se debe realizar en lugares ventilados, evitan-
do todo derrame, inhalacin o contacto con las mues-
tras.
6.7. ACTIVIDADES DE POSTMUESTREO
6.7.1. Transporte y almacenamiento
El transporte de los envases puede hacerse en cajas
trmicas aislantes, refrigeradoras elctricas o en cajas
de madera cubiertas internamente por material aislan-
te, conteniendo hielo o material refrigerante. Cabe men-
cionar, que el uso de material esponjoso entre los fras-
cos ayudar en la prevencin de rupturas. Los frascos
debern mantenerse en posicin vertical dentro del con-
tenedor.
Las muestras debern ser remitidas al Laboratorio lo
ms pronto posible. La recepcin de las muestras por
el laboratorio deber ser chequeada con la lista de em-
barque.
6.7.2. Garanta de calidad y seleccin de laborato-
rios
La garanta de calidad significa garantizar la precisin
y exactitud de los mtodos analticos, mientras que el
control de calidad se refiere al proceso a travs del cual
el laboratorio mide su desempeo, compara sus resul-
tados de la aplicacin rutinaria de los procedimientos
analticos.
La seleccin de un laboratorio que ofrezca garanta en
los resultados es de vital importancia en todo programa
de muestreo. Por tal motivo, se recomienda trabajar con
un laboratorio que cuente con personal profesional con
experiencia en servicios analticos, tcnicas analticas
desarrolladas y sistema de control de calidad, as como
infraestructura y equipos instrumentales que aseguren
garanta de calidad. Tambin es til que las plantas pes-
queras enven peridicamente algunas muestras dupli-
cadas a uno o ms laboratorios adicionales para com-
paracin de los resultados.
El MIPE mantendr un registro de Laboratorios aptos
para realizar anlisis de muestras. Estos laboratorios
habrn demostrado su competencia tcnica o conta-
rn con una certificacin de calidad otorgada por una
organizacin oficial, que garantice la precisin y exac-
titud de los anlisis.
6.7.3. Anlisis de las muestras
La descripcin de los mtodos analticos se presenta
en el Anexo 2 (mtodos para efluentes) y en el Anexo
3 (mtodos para cuerpo receptor). Sin embargo, es
importante notar que los mtodos constantemente se
actualizan, por lo que el MIPE tendr en cuenta los
cambios en los procedimientos estndar, como por
ejemplo de la NOAA, USEPA o de la APHA, para futu-
ras modificaciones.
6.7.4. Procesamiento y archivo de los datos
La informacin registrada en los formatos de campo y la-
boratorio deber ser revisada e incorporada a una base
de datos en formato electrnico (hoja de clculo).
6.7.5. Elaboracin de Reportes e Informes
Los informes sern de dos tipos, los reportes de mo-
nitoreo mensuales y los informes de anlisis compa-
rativo anual.
A. Reporte Mensual
El reporte del monitoreo mensual correspondiente
a las pocas de produccin o veda, se ajustar al
Formato que se indica en el Anexo 4. Este deber
ir acompaado del reporte de resultados analti-
cos respectivos emitido por el laboratorio respon-
sable.
B. Informe Anual
Este informe deber presentarse de manera clara,
concisa y debe contener como mnimo:
Objetivos del informe
Materiales y Mtodos
Resultados y Discusin
Tabla comparativa de los parmetros medidos
en el efluente con respecto a los LMP.
Tabla comparativa de los parmetros medidos
en el cuerpo receptor con respecto a los ECA.
Variacin de la calidad del agua y sedimento
(cuerpo receptor) y su impacto en funcin del
tiempo.
Comparacin de la calidad del cuerpo receptor
con la lnea base o caracterizacin ambiental.
Comparacin de los impactos observados con
los impactos previstos en el EIA y PAMA.
Evaluacin de la efectividad de las medidas de
prevencin y mitigacin comprometidas en el
PAMA o EIA.
Interrelacin entre la calidad de la materia pri-
ma y la composicin de los efluentes.
Conclusiones y Recomendaciones
Bibliografa
Anexos
Figuras mostrando la variacin espacial y tem-
poral de los parmetros de efluentes y cuerpo
receptor.
Mapa del rea de emplazamiento, sealando
las coordenadas geogrficas de la planta, punto
final del emisor, chatas y las estaciones de mo-
nitoreo.
Lista de equipos e instrumentos, periodicidad de
calibracin y ltima fecha de la misma.
La Autoridad Competente se reserva el derecho de
comprobar y corroborar la validez y veracidad de la
informacin presentada en los Informes correspon-
dientes. En caso de no haber conformidad, el MIPE
podr tomar medidas que considere pertinentes.
7. GLOSARIO
Agua de bombeo.- Es el agua de mar empleada en el
trasvase de materia prima desde la "chata" a la planta de
procesamiento.
Agua de cola.- Fraccin liquida obtenida a partir del licor
de prensa despus de haber eliminado gran parte de los
slidos en suspensin y de la materia grasa.
Alcuota.- Es una fraccin en volumen de una solucin
determinada.
Calibracin.- Comparacin de la lectura de un instru-
mento generado por un patrn o estndar conocido con
el objetivo de realizar los ajustes que eliminen desviacio-
nes o desajustes instrumentales.
Caja de registro.- Espacio incluido en el tramo del emi-
sor por donde pasan uno o ms efluentes a su destino
final.
Caracterizacin ambiental.- Es la descripcin del am-
biente en los aspectos fsicos, qumicos, biolgicos, en-
tre otros.
Cuerpo receptor.- Medio acutico, terrestre, atmosfri-
co que recepciona efluentes lquidos, slidos o gaseo-
sos.
Desage general.- Es el conducto que lleva residuos l-
quidos provenientes del procesamiento y/o limpieza de
la planta y servicios higinicos.
Estndar de calidad ambiental (ECA).- Niveles de con-
centracin mxima de contaminantes en el cuerpo re-
ceptor, que es recomendable no exceder para evitar ries-
go a la salud humana y a la vida acutica.
Efluente.- Descarga lquida de materiales de desecho
en el ambiente, el cual puede estar tratado o sin tratar.
Generalmente se refiere a aguas contaminadas.
Emisario submarino.- Conducto que lleva los efluentes
a su disposicin final en el mar.
USEPA.- Agencia de Proteccin Ambiental de Estados
Unidos (United States Environmental Protection Agency)
Estudio de Impacto Ambiental (EIA).- Estudio que eva-
la y describe las caractersticas fsicas, qumicas y bio-
lgicas y socioeconmicas existentes en rea de influen-
cia del proyecto previas a la ejecucin de la actividad
pesquera; identificando los impactos y las medidas de
mitigacin a aplicar una vez iniciadas las actividades de
produccin. A fin de lograr el desarrollo sostenible de la
actividad pesquera en armona con la proteccin del
ambiente.
Lmite Mximo Permisible (LMP).- Niveles de concen-
tracin mxima de contaminantes en los efluentes, que
es recomendable no exceder para evitar riesgo a la salud
humana y a la vida acutica.
Lnea de base.- Caracterizacin del ambiente antes de
la implementacin del proyecto o actividad.
Muestra.- Porcin del efluente o cuerpo receptor que es
colectada a fin de conocer sus caractersticas fsicas,
qumicas y biolgicas.
Programa de Adecuacin y Manejo Ambiental
(PAMA).- Es un conjunto de mtodos, medidas, procedi-
mientos, acciones e inversiones que son necesarios para
la incorporacin de adelantos tecnolgicos y cientficos, a
APHA-AWWA-WPCF. 1992. Standard Methods for Exami-
nation of Water and Wastewater.18
th
ed. Part 5210B. Was-
hington. 1134 p.
International Organization for Standardization. 1983.
Water Quality Determination of Biochemical Oxygen De-
mand after n days (BODn). Dilution and Seeding Method.
First Edition. ISO5815. 1983-10-01D.
IMARPE. 1995. Procedimiento Estndar de Operacin:
Metodologa para la Determinacin de Demanda Bioqu-
mica de Oxigeno (DBO) en Efluentes. DMPAM.PEO-
DBO
5
/DD-001.
COLECTA Y PRESERVACION
Las muestras se recepcionan en frascos de vidrio o pls-
tico limpio de 250 - 500 ml llenndola completamente.
Para evitar la descomposicin de la muestra por accin
microbiana, mantener la muestra a 4C hasta un perodo
mximo de 24 horas desde su colecta.
INTERFERENCIAS
Las que se indican para la determinacin de oxgeno di-
suelto por el mtodo de Winkler-Azida (ISO 1983) causa-
das por sustancias oxidantes, reductoras y material sus-
pendido.
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Equipos
- Incubador DBO 20 1C
- Estufa de 50 a 150C
- Potencimetro
- Destilador
- Difusor de aire (blower)
- Refrigeradora
- Oxmetro polarogrfico y sensor con accesorios
Materiales
- Frascos de DBO de 250 a 300 mL con tapa esmerila-
da y con tapa de plstico de seguridad
- Fiolas de 100 mL, 500 mL
- Pipetas graduadas de 1, 5 y 10 mL
- Bureta automtica de 10 mL
-Probetas de 100 mL y otros materiales para la deter-
minacin de oxigeno disuelto.
Reactivos
a) Sales de dilucin:
- Solucin Buffer Fosfato: KH
2
PO
4
, 8,5 g; K
2
HPO
4
, 21,75 g; Na
2
HPO
4
. 7H
2
O,
33,4 g y NH
4
Cl, 1,7 g enrase a 1 litro
- Solucin de nutrientes:
Sulfato de Magnesio Heptahidratado: 22,5 g.L
-1
Cloruro de Calcio: 27,5 g.L
-1
Cloruro frrico Hexahidratado: 0,25 g.L
-1
b) Solucin estndar de control: 150 g de glucosa en 1 L
150 g de cido glutmico en 1 L
Mezclar ambas soluciones en proporcin 1:1
c) Reactivos para determinacin de oxgeno disuelto (Anexo 3.A)
PROCEDIMIENTO ANALITICO
a) Preparacin del agua de dilucin
1. A partir del agua destilada se prepara el agua de di-
lucin, agregar 1 mL de cada una de las soluciones
nutrientes y de la solucin buffer por litro de agua
destilada.
2. Airear (empleando blower) hasta la saturacin de ox-
geno (~10 mL.L
-1
) por una hora. Emplear la solucin
inmediatamente de ser preparada o a ms tardar
dentro de las 8 horas. Estos dos pasos son sufi-
cientes (en la preparacin del agua de dilucin) an-
tes de iniciar los anlisis de muestras de agua de
bombeo.
b) Preparacin de blancos de control
1. Colectar el agua de dilucin en dos frascos de vidrio
DBO
5
de 300 mL.
fin de evitar o mitigar a niveles tolerables el impacto nega-
tivo al ambiente, que producen las actividades pesqueras
instaladas.
Tamizadores.- Filtros de tipo rotativos o rotatorios con
poros de 1,0 mm de abertura de malla para retener y
recuperar slidos de pescado del agua de bombeo.
Sanguaza.- Efluente generado durante el almacenamien-
to de la materia prima en las pozas de recepcin.
Sistemas de flotacin inducida.- Mecanismo para flo-
tacin de grasas por induccin de aire (micro o macro-
burbujas).
Vertimiento.- Evacuacin deliberada de desechos u otras
sustancias al ambiente.
ANEXO N 1
FLUJOGRAMA DE MONITOREO DE EFLUENTES DE
LA INDUSTRIA PESQUERA PARA LA ACTIVIDAD
DE CONSUMO HUMANO INDIRECTO
EFLUENTE
(Agua de bombeo)
v
COLECTA CON BALDE
(10 L)
v
REGISTRO DE pH y T C
v v v
DBO5 SST ACEITES Y GRASAS
Botella de vidrio Botella de Botella de vidrio
o plstico plstico mbar
250-500 mL 250 mL 500 mL
v
Fijar con 5 mL/L HCl
v v v
Refrigeracin a 4C
v
ANALISIS EN LABORATORIO (Duplicado)
v
DBO5 SST ACEITES Y GRASAS
v
PROCESAMIENTO DE DATOS
v
REPORTE DE MONITOREO
ANEXO 2
METODOLOGAS ANALITICAS PARA
DETERMINACIN DE PARMETROS DE
CALIDAD DE EFLUENTES
A. DETERMINACION DE LA DEMANDA BIOQUIMICA
DE OXIGENO (DBO
5
)
METODO: Determinacin de la Demanda Bioqumica de
Oxgeno (DBO
5
) en efluentes pesqueros por dilucin.
REFERENCIAS
2. Determinar el oxgeno disuelto inicial (OD
i
) en el primer
frasco mediante el mtodo de Winkler azida o el oxme-
tro polarogrfico.
3. Incubar el segundo blanco a 20C +/- 1C por 5 das. Al
cabo del quinto da determinar el oxgeno disuelto final
(OD
f
).
4. El consumo de oxgeno en el blanco no debe exceder
0,2 mg.L
-1
para considerar vlido el anlisis de mues-
tras.
c) Tratamiento de muestras
1. Medir el pH de la muestra, sta debe estar entre 6
y 8. En caso contrario neutralizar con NaOH 20 g.L
-
1
o HCl 0,5 mol.L
-1
(evitar una dilucin mayor al
0,5%).
2. Efectuar una primera dilucin (D-I) de la muestra origi-
nal y determinar el factor de dilucin fd
1
, de manera que
fd
1
es la razn entre el volumen vertido de la muestra
(V
M
) y el volumen total de la dilucin (V
T
). Se recomien-
da efectuar el enrasado por sifoneo del agua de dilu-
cin para evitar burbujas de aire.
3. A partir de la dilucin preparada (D-I) preparar solu-
ciones con diferentes porcentajes de dilucin a incu-
bar (D-II) con sus respectivas rplicas. En la Tabla
A.1 aparece un rango de alcuotas (A) recomendadas
para preparar los diferentes porcentajes a incubar (D-
II).
4. Por cada dilucin se toma 3 rplicas, 1 para determi-
nar el Oxgeno disuelto inicial y 2 para determinar el
Oxgeno disuelto final.
5. Determinar el Oxgeno disuelto inicial (OD
i
) de las
soluciones con diferentes porcentajes de dilucin a
incubar (D-II), mediante el mtodo Winkler azida o el
oxmetro polarogrfico.
6. Incubar las rplicas a 20C 1C durante un perodo
de cinco das.
7. Determinar el Oxgeno disuelto final (OD
F
) al quinto
da de incubacin.
8. La frmula para determinar el oxgeno disuelto se in-
dica en el Anexo 3.A.
Tabla A.1. Diluciones recomendadas en la
determinacin de DBO
5
.
Tipo de muestra D-I D-II Observaciones
(fd
1
= V
M
/ V
T
) (fd
2
= A / V
T
)

Agua de bombeo 10mL/1000mL 30,0 - 50,0 - 100,0 (mL) Menor carga contaminante
10mL/1000mL 5,0 - 10,0 - 30,0 (mL.) Mayor carga contaminante
Nota: completar con
agua de dilucin
hasta enrasar a 1000 mL (V
T
)
d) Prueba de control

Para el control de la prueba se realiza un ensayo
con una solucin estandarizada de glucosa/cido
glutmico (15 a 20 mL en 1000 mL de agua de dilu-
cin). Continuar con el procedimiento descrito, tra-
bajar con duplicado y realizar un blanco con el agua
de dilucin, incubar x 5 das. La DBO5 de la solu-
cin control estar en un rango de 180 a 230 mg.L
-1
,
con lo cual se verifica la calidad de la prueba del
DBO5.
e) Criterio de seleccin de diluciones a emplear en
los clculos
Esta seleccin se realiza luego de la determinacin
del oxgeno inicial y final expresado en mg.L
-1
mediante
el criterio siguiente:
3
2
) (
3
i
F I
i
OD
OD OD
OD
< <
Esto significa que slo se considerarn para efec-
tos de clculo de DBO5 para una muestra determi-
nada, aquellas diluciones cuyo oxgeno consumido
(OD
i
-OD
f
) se encuentre en el rango de OD
i
/3 a 2OD
i
/3.
En caso de que ms de una dilucin cumpliera con
este requisito, entonces calcular los respectivos
DBO
5
de cada dilucin. El valor final de DBO
5
de la
muestra problema se determina al promediar los re-
sultados obtenidos.
f) Clculos:
La DBO
5
en agua de bombeo por dilucin se calcula
con la siguiente frmula:
2 1
1
5
.
) (
) . (
fd fd
OD OD
L mg DBO
F I

=
Donde:
DBO
5
= Demanda bioqumica de oxgeno a 5 das (mg.L
-1
)
OD
i
= Concentracin de oxgeno disuelto inicial (mg.L
-1
) en la muestra
diluida.
OD
f
= Concentracin de oxgeno disuelto final (mg.L
-1
) en la muestra r-
plica incubada hasta el 5
to
da.
fd
1
= V
M
/V
T
= Razn entre el volumen de la muestra empleada (10 mL)
y el volumen total de dilucin (1000mL)
fd
2
= A / V
T
= Razn entre la Alcuota (mL) tomada de la dilucin (D-I)
y el volumen total de dilucin (1000 mL).
B. DETERMINACION DE SOLIDOS SUSPENDIDOS
TOTALES (SST).
METODO: Gravimtrico.
REFERENCIA:
APHA-AWWA-WPCF. 1999. Standard Methods for Exa-
mination of Water and Wastewater.20th ed. Part. 2540D.
Washington.
Metodologa para la Determinacin de Slidos Suspen-
didos Totales (SST) en Efluentes. DMPAM. PEO-SST/MG-
001.
PRESERVACION:
Lo recomendable es realizar inmediatamente el anlisis.
Para minimizar la descomposicin microbiolgica se re-
comienda refrigerar a 4C no ms de 72 horas.
INTEFERENCIAS:
Afectan los resultados, el equipo de filtracin, el material
del filtro, el prelavado, el postlavado del filtrado, la tempe-
ratura del secado. Excluir partculas flotantes grandes.
- Desecador, con indicador de humedad.
- Equipo de filtracin
- Bomba de vaco
- Estufa
- Balanza analtica con sensibilidad de 0,1 mg
- Probetas de 5 y 10 mL
- Placas Petri de 60 x10 mm o lunas de reloj
- Papel filtro de fibra de vidrio con tamao de poro no-
minal de 1,5 m y 47 mm de dimetro
- Botellas de plstico de boca ancha de 250 mL
- Agua bidestilada
a) Lavar el filtro sucesivamente con tres porciones de 20
mL de agua bidestilada o equivalente, utilizando la
bomba de vaco.
b) Retirar el papel de filtro y llevarlo a sequedad en la
estufa a una temperatura de 103-105C por una hora;
(enfriar en el desecador. Registrar peso (B).
c) Tomar volmenes de muestra en una probeta, cuyos
rangos pueden variar de acuerdo a su concentracin
y facilidades de filtracin. Se recomienda de 5-20 mL
para agua de bombeo. Para otros efluentes, filtrar vo-
lumen mayor a 25 mL.
d) Homogenizar la solucin y vaciarla en el embudo que
contiene el filtro previamente preparado, y filtrar con
la ayuda de la bomba de vaco (8-10 pulg. Hg).
e) Debe tratarse de distribuir la muestra en todo el filtro,
esto se puede conseguir usando una bagueta para
discurrir por ella la muestra.
f) La probeta usada debe ser enjuagada con agua bi-
destilada o similar para asegurarse de arrastrar todos
los slidos.
g) Retirar el papel filtro conteniendo la muestra filtrada y
llevarlo a sequedad en la estufa a una temperatura de
103-105C hasta peso constante. Enfriar en el deseca-
dor. Registrar peso (A).
h) Clculos:
La concentracin de slidos suspendidos totales se
calcula con la siguiente frmula:
SST = (A-B) x 10
6
/ V
Donde:
SST = Slidos suspendidos totales (mg.L-1).
A = Peso de placa Petri + papel filtro + residuo
(g).
B = Peso de placa Petri + papel filtro (g).
V = Volumen de la alcuota agua de bombeo (mL).
C. DETERMINACION DE ACEITES Y GRASAS (AG).
METODO:
Extraccin Soxhlet.
REFERENCIAS
mination of Water and Wastewater.20
th
ed. Method 5520D.
Washington.
Environmental Laboratory. 1976. Water Resources Ser-
vice Department of Environment.
Metodologa para la Determinacin de Aceites y Grasas
(AG) en Efluentes. DMPAM. PEO-AG/ES-002.
COLECTA Y PRESERVACIN
La muestra se recepcionar en un frasco de vidrio de
500 ml, agregndole inmediatamente 2,5 ml mL de cido
clorhdrico (HCl, 1:1) o tambin cido sulfrico (H
2
SO
4
,
1:1) por 0,5 L de muestra colectada, tapar y agitar. Pre-
servar en refrigeracin (4
o
C) hasta su anlisis. El tiempo
mximo de almacenamiento es de 72 horas.
Equipos
- Sistema de extraccin Soxhlet (cartucho de extrac-
cin, condensador Allin y baln de base plana de 250
mL).
- Balanza analtica, 0,1 mg de precisin
- Estufa: 103-105C
- Rotavapor
- Set de cocinillas para Soxhlet
- Equipo Bao Mara
Materiales
- Desecador con indicador de humedad
- Papel filtro Whatman 42
- Papel aluminio
- Placas Petri
- Balones de boca esmerilada 29/32 de 250 mL
- Pipeta de vidrio de 25 mL
- Pipeta Pasteur de vidrio
- Pinzas, esptulas, baguetas, vasos de 1 y 0,5 L
Reactivos
- Hexano p.a.
- Acido clorhdrico p.a. 1:1
a) Atemperar la muestra en Bao Mara a < 40 C y
homogenizarla; verter un volumen de 20 a 25 mL
(V) en placas Petri revestida desde el interior con
papel de aluminio y someterlo a sequedad (40 C)
hasta la formacin de una capa seca para evaporar
el agua.
b) Luego del secado, separar el papel metlico que con-
tiene la muestra y envolver con suficiente papel What-
man 42 formando un cartucho, para posteriormente ser
introducido en la cmara de extraccin.
c) Pesar el baln (P
1
= Peso inicial) que corresponde al
baln vaco con perlitas. Codificar y unir a la cmara
de extraccin sellando el sistema Soxhlet.
d) Preparar un blanco solvente (B). Emplear slo el car-
tucho (con papel de aluminio y filtro Whatman 42) y
colocarlo como las dems muestras en la cmara de
extraccin correspondiente.
e) En el caso del blanco el peso inicial del baln seco
con perlitas ser A
1
(en gramos).
f) Reciclar las muestras y el blanco por lo menos 25
ciclos en 4 horas con 200 mL de hexano.
g) Concentrar la muestra separando el solvente del ex-
tracto orgnico por destilacin al vaco en equipo ro-
tavapor hasta la formacin de una pelcula de grasa y
secar en la estufa a 105 C a peso constante (1h
aproximadamente).
h) Enfriar en el desecador antes de cada pesada. Re-
gistrar peso final en la muestra = P
2
= P
1
+ residuo de
grasa, en gramos).
i) Clculos:
La concentracin de aceites y grasas se calcula con
la siguiente frmula:
AG (mg.L
-1
). = [(P
2
- P
1
) B] x 1000/V
Donde:
AG = Aceites y grasas (mg.L
-1
).
P
1
= Peso del baln (g) + perlitas.
P
2
= P
1
+ residuo de grasa (g). Corresponde a la
muestra.
A
1
= Peso inicial del blanco: Peso del baln (g) +
perlitas.
A
2
= A
1
+ residuo del solvente (g).
B = Blanco del solvente (A
2
-A
1
), (g).
V = Volumen de muestra (L).
1000 = Factor de conversin de g a mg.
ANEXO 3
METODOLOGAS ANALITICAS PARA LA
DETERMINACION DE PARAMETROS DE
CALIDAD DEL CUERPO RECEPTOR
A. DETERMINACION DE OXIGENO DISUELTO
METODO: Titulomtrico.
REFERENCIAS
EL PERUANO. 1969. LEY GENERAL DE AGUAS. Decreto Ley N
17752.
GRASSHOFF, KREMLING AND EHRHARDT. 1999. Methods of
Seawater Analysis. Edit. Pp 75:89. Wiley-VCH.
IMARPE, 2000. Procedimiento Estndar de Operacin.
PEO-OD-001: Metodologa para la determinacin de ox-
geno disuelto en agua de mar por valoracin. Area de
Evaluacin de la Contaminacin Marina.
PERRY, R. 1982. Manual del Ingeniero Qumico. 5ta. Edi-
cin. Vol. I. Edit. Mc Graw Hill.
A nivel superficial colectar la muestra en un balde de pls-
tico, mientras que a nivel de fondo o media agua emplear
una botella Niskin de 5 L de capacidad, en este caso
este depsito contiene una manguera de salida.
Para la colecta de muestra se emplear un frasco de vi-
drio de aproximadamente 115 mL de capacidad con boca
esmerilada para recepcionar la muestra. La muestra su-
perficial se colectar sumergiendo la botella de oxgeno
en el balde en forma inclinada y suave, evitando la for-
macin de burbujas de aire. La muestra de media agua se
colectar de la botella Niskin por gravedad. En ambos ca-
sos se debe evitar la formacin de burbujas y luego preser-
var aadiendo 1 mL de Reactivo I y 1 mL de Reactivo II
(ver Anexo 3 para definicin de reactivos de preservacin),
agitar; guardar en un ambiente fresco y oscuro hasta su
anlisis en laboratorio. El tiempo mximo de almacenamien-
to de la muestra es de 24 h.
- Microbureta automtica de 10 mL graduada (escala de
0,05 mL)
- RI (Reactivo I): Solucin preparada al disolver 36,6653
g de Mn Cl
2
.4H
2
O y/o 31,3184 g de MnSO
4
.H
2
O enra-
sado a 100 mL con agua destilada.
- RII (Reactivo II): Solucin preparada al combinar 60 g
de KI y 30 g de KOH disueltos separadamente en una
mnima cantidad de agua destilada y enrasados hasta
100 mL.
- RIII (Reactivo III): Solucin de cido sulfrico (1:1)
- Solucin de tiosulfato de sodio 0,02 M
- 01 Erlenmeyer de 250 300 mL
- 01 gotero con almidn
- Botella de vidrio mbar y/o transparente de boca an-
gosta esmerilada con tapa de aproximadamente 115
mL de capacidad, previamente calibrado.
a) Clculo del factor de botella f
b
Una botella de vidrio con su tapa respectiva se pesa va-
ca, luego se llena con agua destilada y se pesa. La dife-
rencia de pesos es equivalente al volumen (B, mL) que
ocupa el agua destilada en la botella (consideracin: den-
sidad a temperatura ambiente es de 1g.mL
-1
). El clculo
del f
b
se realiza con la siguiente frmula:
f
b
= 112/B - 2
b) Estandarizacin de la solucin de tiosulfato
- Preparacin del tiosulfato de sodio 0,02 M
Pesar 4,95 g de Na
2
S
2
O
3
.5H
2
O y disolver con agua
destilada enrasndolo a 1 L.
- Preparacin del yodato estndar 0,01N
Pesar 0,3567 g de KIO
3
y disolver con agua destilada
enrasndolo a 1 L.
- Clculo del f
t
(factor del tiosulfato de sodio):
Medir 50 mL de agua destilada en un erlenmeyer y adi-
cionar 1 mL de RIII, 1mL de RII y 1 mL de RI (entre cada
reactivo adicionado hay que agitar) y aadir 10 mL de
yodato estndar 0,01 N. El yodo liberado es titulado con
la solucin de tiosulfato de sodio 0,02 M hasta color ama-
rillo plido, se adiciona 2 a 3 gotas de almidn soluble y
la solucin cambia a un color morado o azul intenso (in-
tensidad vara segn su concentracin). El viraje a inco-
loro indicar el punto final:
f
t =
5/V
donde: V = Volumen de gasto del tiosulfato, mL.
c) Anlisis
Disolver el precipitado formado en la preservacin de la
muestra agregando 1mL de R-III, agitar, esperar 10 mi-
nutos antes de iniciar la titulacin.
Transvasar la muestra del frasco en un erlenmeyer e ini-
ciar la titulacin con tiosulfato, agitando constantemente
hasta que la solucin adquiera un tono amarillo plido.
Adicionar 3 gotas de indicador almidn con lo cual la so-
lucin se colorear de morado. Seguir titulando con tio-
sulfato agitando cuidadosamente hasta que la solucin
vire a incoloro. Anotar el gasto "a" del tiosulfato para los
clculos respectivos.
d) Clculos
La concentracin del oxgeno disuelto en agua de mar, se
calcula con la siguiente frmula:
C (mL/L) = f
t
* f
b
* a
C (mg.L
-1
) = 1,4289 * f
t
* f
b
* a
Donde:
C : Concentracin de oxgeno disuelto
f
t
: Factor de tiosulfato
f
b
: Factor de botella
a : gasto de tiosulfato en mL
B. DETERMINACION DE SULFURO DE HIDROGENO
METODO:
Colorimtrico - Azul de metileno.
REFERENCIAS
17752.
GRASSHOFF, K.,K. Kremling, y M. Ehrhardt 1999. Methods
of Seawater Analysis. Determination of hydrogen sulphi-
de. Pp 91:97. Edit. WILEY- VCH.
IMARPE, 2000. Procedimiento Estndar de Operacin.
PEO-S
=
-001: Determinacin de sulfuro de hidrgeno en
agua de mar por colorimetra. Area de Evaluacin de la
Contaminacin Marina. DMPAM. PEO-S/MC-001
tico, mientras que a nivel de fondo o a media agua em-
plear una botella Niskin de 5 L de capacidad con una
manguera de salida.
La muestra se colecta en un frasco de vidrio oscuro de
115 mL de capacidad con boca esmerilada, evitando la
formacin de burbujas de aire, es preservada con 1 mL
de acetato de zinc y almacenada a temperatura ambien-
te. La muestra preservada de esta manera puede ser al-
macenada por un perodo 7 das mientras se guarde en
un lugar oscuro y fresco.
- Equipo espectrofotmetro UV Visible
- Celdas de 1 y 5 cm
- Frascos de vidrio mbar de boca angosta esmerilada
de aproximadamente 115 mL
- Pipetas
- R- I = Solucin preparada al disolver 1,00 g de N,N-
dimetil-p-fenileno diamino dihidrocloruro (CH
3
)
2
N.C
6
H
4
.NH
2
.2HCl (1,4) en 500 mL de cido clorhdri-
co 6M. El reactivo es estable por varios meses. Alma-
cenar en frasco de vidrio mbar y en oscuridad.
- R- II =Solucin preparada al disolver 8 g de FeCl
3
en
500 mL de cido clorhdrico 6M. El reactivo es esta-
ble indefinidamente. Almacenar en frasco de vidrio
mbar y en oscuridad.
- Preservante. Disolver 5,22 g de acetato de cinc dihi-
dratado en 500 mL de agua destilada libre de oxgeno
conteniendo 1 g de gelatina.
- Agua libre de oxgeno. Es preparada a partir de la
ebullicin del agua destilada en un volumen de 2-5 L
por 30 a 60 minutos, durante el cual se burbujea una
corriente de gas nitrgeno hasta su enfriamiento a
temperatura ambiente. Esta agua no se puede alma-
cenar y debe ser preparada antes de su uso.
a) Estandarizacin
1. Preparacin del tiosulfato de sodio 0,02 M
Pesar 4,95 g de Na
2
S
2
O
3
.5H
2
O y disolver con agua destila-
da enrasndolo a 1 L.
2. Estandarizacin de la solucin de trabajo de sulfu-
ros
- Solucin stock de sulfuros
Lavar unos cuantos cristales de sulfuro de sodio nonahi-
dratado (Na
2
S.9H
2
O) con agua destilada. Secar inmedia-
tamente con papel filtro. Pesar 0,75 g de la sal disolver
con agua libre de oxgeno en una fiola y enrasar a un
litro. La solucin no es estable y debe ser usada al mo-
mento.
- Solucin de trabajo de sulfuros
Pipetear 25 mL de la solucin stock de sulfuros en una
fiola de 500 mL que contiene agua libre de oxgeno y 5
mL de solucin de gelatina con acetato de cinc. Enrasar
con agua libre de oxgeno. Esta solucin es estable por
varias horas y antes de usarse debe agitarse vigorosa-
mente, la solucin contiene aproximadamente 5 g de
sulfuros por centmetro cbico (aproximadamente 0,16 mi-
crogramos tomo g-at H
2
S-S.cm
-3
). Debido a la ines-
tabilidad de la solucin se recomienda su estandariza-
cin.
- Estandarizacin
En 6 erlenmeyers de 300 mL de capacidad se adicio-
nan 10 mL de agua bidestilada y de 1 a 2 g de KI, se-
guidamente en cada erlenmeyer se adicionan 10 mL de
solucin de KIO
3
0,01 N y 1 mL de cido sulfrico (1:1).
Posteriormente en tres de los erlenmeyers se adicio-
nan 50 mL de solucin de trabajo y en los otros tres 50
mL de agua bidestilada, todos los matraces se agitan y
se deja reposar por 10 minutos luego se titula con tio-
sulfato usando almidn como indicador. La concentra-
cin corregida "C" de sulfuros se calcula por la frmu-
la:
C (g at H
2
S-S . mL
-1
) = 10 * f
t
* (A - B)/50
C (g H
2
S . mL
-1
) = [10 * f
t
* (A - B)/50]*32
Donde: A = Volumen promedio del gasto de tres solucio-
nes sin sulfuros (mL).
B = Volumen promedio del gasto de tres solucio-
nes conteniendo sulfuros (mL).
f
t
= factor de la solucin de tiosulfato.
b) Preparacin de la curva de calibracin
La curva de calibracin se basa en la preparacin de
soluciones patrn a partir de la solucin de trabajo de
concentracin corregida "C". En la Tabla A.2 se indican
los volmenes de la solucin de trabajo, a los cuales se
les aade 1 mL de los reactivos I y II y se enrasa con
agua destilada libre de oxgeno en fiolas de 50 mL evi-
tando la formacin de burbujas (por sifoneo). Dejar repo-
sar 1 hora y leer con un blanco (agua libre de oxgeno) a
una longitud de onda de 670 nm en celdas de 1 cm y/o
celda de 5 cm segn sea el caso.
Tabla A.2. Volmenes de solucin de
trabajo para anlisis de sulfuros.
Celda: 1 cm Celda: 5 cm
Patrn Sol.Trabajo Concentracin Absorbancia Sol.Trabajo Concentracin Absorbancia
(mL) (g H
2
S.mL
-1
) neta (mL) (g H
2
S.L
-1
) neta
1 2,0 0,2
2 4,0 0,4
3 6,0 0,6
4 8,0 0,8
Estas concentraciones tericas se expresan en g
H
2
S.mL
-1
(para celda de 1 cm) o g H
2
S.L
-1
(para celda de
5 cm). Las lecturas de estas soluciones expresadas en
unidades de absorbancia conjuntamente con las concen-
traciones determinarn la curva de calibracin respecti-
va.
Nota : Absorbancia neta = Absorbancia de la muestra - Absorbancia del blanco
c) Curva de calibracin en celda de 1 cm
La curva de calibracin es obtenida a travs de la regre-
sin lineal entre la absorbancia vs. concentracin (g
H
2
S.mL
-1
).
Abs. = m C (g H
2
S.mL
-1
) + b
Donde:
Abs. = Absorbancia neta
C = Concentracin (g H
2
S.mL
-1
)
m = Pendiente de la recta
b = Interseccin con el eje de absorbancia.
d) Curva de calibracin en celda de 5 cm
La curva de calibracin es obtenida a travs de la regre-
sin lineal entre la absorbancia vs. concentracin (g
H
2
S.L
-1
).
Abs. = m
1
C (g H
2
S.L
-1
) + b
1
Donde:
Abs. = Absorbancia neta
C = Concentracin (g H
2
S.L
-1
)
m
1
= Pendiente de la recta
b
1
= Interseccin con el eje de absorbancia.
e) Lectura de muestras
A la muestra previamente preservada, adicionar 1 mL de
RI y 1 mL de RII. Dejar reposar por una hora a tempera-
tura ambiente en un lugar oscuro y fresco, a fin de que
desarrolle la coloracin respectiva y dar inicio a la lectu-
ra.
La lectura en el espectrofotmetro se realiza a una longi-
tud de onda de 670 nm. Se deber considerar que la cel-
da de 1cm es empleada en la lectura de muestras de
mayor concentracin, esto es para muestras que desa-
rrollen una tonalidad azul intensa a translucidas segn la
concentracin.
f) Clculos
La absorbancia obtenida en la lectura de cada muestra
es reemplazada en la ecuacin de curva respectiva (de 1
cm de 5 cm) segn sea el caso.
La concentracin de sulfuros se calcula con las siguien-
tes frmulas:
-Celda de 1 cm
C (g H
2
S.L
-1
) = [(Abs. - b)/m]*1000
C (g-at H
2
S-S.L
-1
) = [(Abs. - b)/m]*1000* (1/32)
C(mg H
2
S.L
-1
)= C(g-at H
2
S-S.L
-1
)*(0.032)
-Celda de 5 cm
C (g H
2
S.L
-1
) = [(Abs. - b
1
)/m
1
]
C (g-at H
2
S-S.L
-1
) = [(Abs. - b
1
)/m
1
]* (1/32)
C (mg H
2
S.L
-1
) = C (g-at H
2
S-S.L
-1
) * (0,032)
C. DETERMINACION DE SLIDOS SUSPENDIDOS
TOTALES (SST).
METODO: Por filtracin.
REFERENCIAS
mination of Water and Wastewater. 20
th
ed. Part. 2540D.
Washington.
IMARPE, 1995. Procedimiento Estandar de Operacin-PEO-
SST-001: Metodologa para la determinacin de slidos
suspendidos totales en agua de mar, aguas superficia-
les, continentales y potables por gravimetra. Area de
Evaluacin de la Contaminacin Marina. DMPAM. PEO-
SST/MF-001.
tico, mientras que a nivel de fondo (o a diversas profundi-
dades) emplear una botella Niskin de 5 L de capacidad.
La muestra previamente homogenizada se colecta en un
frasco de 500 mL, evitando el ingreso de arena o mate-
rial grueso que sedimente. Llenar hasta el hombro de la
botella y tapar. Guardar en un cooler conteniendo hielo
para su preservacin hasta su llegada al laboratorio.
Las muestras se pueden almacenar por un tiempo mxi-
mo de 7 das debidamente refrigeradas a 4C. Lo reco-
mendable es realizar inmediatamente el anlisis, para
minimizar la degradacin de la muestra.
INTERFERENCIAS
Afectan los resultados, el equipo de filtracin, el material
del filtro, el prelavado, el postlavado del filtrado, la tempe-
ratura del secado. Material flotante que pueda obstruir el
filtro debe ser eliminado manualmente.
- Desecador, con indicador de concentracin de hume-
dad.
- Equipo de filtracin
- Bomba de vaco
- Estufa
- Balanza analtica con sensibilidad de 0,1 mg
- Probeta de 250 mL
- Probeta de 25 mL
- Placas Petri de 60 x10 mm o lunas de reloj
- Papel filtro de fibra de vidrio con tamao de poro no-
minal de 1-1,5 m
- Botellas de plstico de boca ancha
a) Preparacin del papel de filtro de fibra de vidrio. Lavar
el filtro sucesivamente con tres porciones de 20 mL
de agua destilada, utilizando la bomba de vaco.
b) Retirar el papel de filtro y llevarlo a sequedad en la
estufa a una temperatura de 103-105C por una hora.
Enfriar en el desecador y pesar (P
1
).
c) Filtracin de la muestra:
Previo al anlisis se debe agitar la botella para homo-
genizar la muestra y filtrar al vaco un volumen de 150
a 250 mL (V; mL). En muestras ms concentradas
filtrar un menor volumen considerando siempre que
no se pierda representatividad.
d) Retirar con una pinza el papel con los slidos colo-
carlo sobre el Petri correspondiente y llevarlo a estufa
por 1 h mnimo hasta peso constante. P
2
.
e) Clculos
La concentracin de los slidos suspendidos se ex-
presa en mg de residuos no filtrables por litro de agua
de mar y se calcula con la siguiente frmula:
SST (mg.L
-1
) = [(P
2
P
1
)/V]*10
6
Donde:
SST = Slidos suspendidos totales (mg.L
-1
)
P
2
= Peso de Petri + papel de filtro + residuo seco en
gramos
P
1
= Peso de Petri + papel de filtro en gramos
V = Volumen de muestra en mL.
D. DETERMINACION DE ACEITES Y GRASAS
METODO:
Extraccin directa.
REFERENCIAS
APHA-AWWA-WPCF. 1999. Standard Methods for Examina-
tion of Water and Wastewater.20
th
ed. Method 5520B.
Washington.
17752.
ENVIRONMENTAL LABORATORY, 1976. Water resources Service
Department of Environment.
IMARPE, 2000. Procedimiento Estandar de Operacin. PEO-
AG-001: Metodologa para la determinacin de aceites y
grasas en agua de mar, aguas superficiales, continentales
y potables por gravimetra. Area de Evaluacin de la Con-
taminacin Marina. PEO-AG/ED-001.
tico.
La muestra se recepciona en un frasco de vidrio de 1 L, y
se le agrega inmediatamente HCl o H
2
SO
4
(1:1) hasta pH
< 2, homogenizar bien la muestra y mantener en refrige-
racin hasta su anlisis. Se considera un perodo mximo
de preservacin de 28 das, sin embargo se recomienda
realizar el anlisis en el ms breve plazo cuando se trate
de muestras que son colectadas durante la etapa de pro-
duccin y correspondan a estaciones prximas al punto
de descarga, con una mayor cantidad de materia orgnica
en suspensin.
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:
Equipos
- Balanza analtica digital 0,1mg de precisin.
- Estufas: Heraeous, Thelco
- Sistema rotaevaporador Buchi.
- Bomba de vaco Gast. Presin de trabajo: 10 pulg Hg.
Material de muestreo
- Botellas de vidrio de 1,0 L de capacidad de boca an-
cha,
- Cooler
- Hielo
- Balde de plstico
Materiales para el anlisis
- Embudo de separacin de 1 L
- Desecador
- Papel filtro Whatman 42
- Balones de boca esmerilada 29/32 de 250 mL
- Sistema de refrigeracin
- Pipeta de vidrio de 25 mL
- Pipeta Pasteur de vidrio.
Reactivos
- Hexano o triclorotrifluoroetano (1,1,2 tricloro-1,2,2-tri-
fluoroetano)
(1)
p.a.
- Sulfato de sodio anhidro (granular fino)
- Metanol p.a.
- Acido clorhdrico o acido sulfrico (1:1). Solucin pre-
servante.
(1)
Los solventes tienen diferente grado de afinidad con
los compuestos orgnicos, dependiendo de su polari-
dad.
Las muestras seleccionadas deben ser atemperadas a
medio ambiente para su anlisis.
Se correr un blanco (B) empleando agua destilada con
el grupo de muestras.
a) Homogenizar la muestra a temperatura ambiente y
medir 1 L o un volumen aproximado. Trasvasar a una
pera de separacin y extraer 3 veces con porciones
de 30 mL de hexano. En cada extraccin, agitar por
5 minutos. Dejar separar la fase acuosa del solven-
te.
b) Separar la fase acuosa regresando al frasco de ori-
gen. Si se presentan emulsiones , romperlas con unas
gotas de metanol p.a.
c) La fase orgnica se recibe en un baln pre-pesado
(Peso inicial del baln = P
1
en gramos) el cual contie-
ne un embudo con papel filtro Whatman N 42 con
sulfato de sodio anhidro suficiente (1- 2 g) para captar
el agua o emulsiones en la interfase.
d) En el caso del blanco el peso inicial del baln seco ser
A
1
(en gramos).
e) Para la 2 y 3 extracciones se procede como en el punto
c.
f) Enjuagar la pera de separacin con 5 mL de hexano, el
cual se recibe en el baln que contiene la muestra (pre-
via filtracin con sulfato, punto c).
g) Concentrar la muestra separando el solvente por des-
tilacin al vaco con un rotavapor hasta aproximada-
mente 1 mL y secar en la estufa a 105 C a peso
constante (Peso final: P
2
). Condiciones del rotavapor:
68 C (bao mara) y 10 pulg Hg (vaco).
h) Para el blanco se procede de la misma manera. Una
vez separado el solvente, registrar peso constante A
2
(g).
i) Clculos:
La concentracin de los aceites y grasas se calcula
con la siguiente frmula :
AG (mg.L
-1
) = [(P
2
-P
1
) - B] x 1000/V
Donde:
AG = Aceites y grasas (mg.L
-1
).
P
2
= Peso del baln + residuo (g) .Corresponde a la
muestra.
P
1
. = Peso inicial del baln (g) .
A
2
= Peso final del blanco : Peso del baln + residuo
del solvente (g)
A
1
= Peso inicial del blanco: Peso del baln (g).
B = Blanco del solvente (A
2
-A
1
) en el baln g.
V = Volumen de muestra (L).
E. DETERMINACION DE LA DEMANDA BIOQUIMICA
DE OXIGENO (DBO
5
)
METODO
Determinacin de la Demanda Bioqumica de Oxgeno
(DBO
5
) en agua de mar, aguas superficiales y zona de
mezcla por dilucin simple.
REFERENCIAS
mination of Water and Wastewater.18
th
ed. Part 5210B.
Washington. 1134 p.
IMARPE, 1995. Procedimiento Estndar de Operacin:
Metodologa para la determinacin de Demanda Bioqu-
mica de Oxigeno (DBO
5
) en agua de mar, aguas superfi-
ciales y zona de mezcla. rea de Evaluacin de Impacto
Ecolgico. DMPAM. PEO-DBO
5
/DS-001.
International Organization for Standarization. 1983. Water
Quality Determination of Biochemical Oxygen Demand
after n days (BODn). Dilution and Seeding Method. First
Edition. ISO5815. 1983-10-01D.
Las muestras superficiales o de fondo colectadas a tra-
vs de un balde o botellas Niskin respectivamente, se
recepcionan en frascos de vidrio o plstico limpio de 1 L.
Para evitar la descomposicin de la muestra por accin
microbiana, mantener la muestra entre 0 a 4C hasta un
perodo mximo de 24 horas desde su colecta.
INTERFERENCIAS
Las que se indican para la determinacin de oxgeno di-
suelto por el mtodo de Winkler-Azida (ISO 1983) causa-
das por sustancias oxidantes, reductoras y material sus-
pendido.
Equipos
- Incubador DBO 20 1C
- Estufa de 50 a 150 C
- Potencimetro
- Destilador
- Oxmetro polarogrfico y sensor con accesorios
- Bureta automtica de 10 mL
- Difusor de aire (blower)
- Refrigeradora
Materiales
- Frascos de DBO de 250 a 300 mL con tapa esmerila-
da y con tapa de plstico de seguridad
- Fiolas de 100 mL, 500 mL
- Pipetas graduadas de 1, 5 y 10 mL
- Probetas de 100 mL y otros materiales para la deter-
minacin de oxgeno disuelto.
Reactivos
a) Sales de dilucin:
- Solucin Buffer Fosfato: KH
2
PO
4
, 8,5 g; K
2
HPO
4
, 21,75 g; Na
2
HPO
4
. 7H
2
O,
33,4 g y NH
4
Cl, 1,7 g enrase a 1 litro
- Solucin de nutrientes:
Sulfato de Magnesio Heptahidratado: 22,5 g/L
Cloruro de Calcio: 27,5 g.L
-1
Cloruro frrico Hexahidratado: 0,25 g/L
b) Solucin estndar de control:
150 g de glucosa en 1 L
150 g de cido glutmico en 1 L
Mezclar ambas soluciones en proporcin 1:1
c) Reactivos para determinacin de oxgeno disuelto (Anexo 3.A)
a) Preparacin del agua de dilucin
- A partir del agua destilada se prepara el agua de dilucin,
agregar 1 mL de cada una de las soluciones nutrientes y de
la solucin buffer por litro de agua destilada.
- Airear (empleando blower) hasta la saturacin de ox-
geno (~10 mL.L
-1
) por una hora. Emplear la solucin
inmediatamente de ser preparada o a ms tardar den-
tro de las 8 horas. Estos dos pasos son suficientes
(en la preparacin del agua de dilucin) antes de ini-
ciar los anlisis de muestras de agua de bombeo.
b) Preparacin de blancos de control
- Colectar el agua de dilucin en dos frascos de vidrio
DBO
5
de 300 mL.
- Determinar el oxgeno disuelto inicial (OD
i
) en el pri-
mer frasco mediante el mtodo de Winkler azida o el
oxmetro polarogrfico.
- Incubar el segundo blanco a 20 C +/- 1C por 5 das.
Al cabo del quinto da determinar el oxgeno disuelto
final (OD
f
).
- El consumo de oxgeno en el blanco no debe exceder
0,2 mg.L
-1
para considerar vlido el anlisis de mues-
tras.
c) Tratamiento de muestras
1. Medir el pH de la muestra, que debe estar entre 6-8.
En caso contrario neutralizar con NaOH 20 g.L
-1
o HCl
0,5 mol.L
-1
(evitar una dilucin mayor al 0,5 %).
2. Las muestras de agua de mar distantes a zonas con
influencia de descargas, no necesitan diluirse. La
muestra se incuba directamente en frasco de 300 mL.
Trabajar con muestras rplicas.
3. Para las muestras provenientes de zona de mezcla
se realiza una dilucin simple utilizando un factor de
dilucin (fd) de acuerdo a la Tabla A.3. Trabajar con
muestras rplicas.
4. Determinar el oxgeno disuelto inicial (0 das) del pri-
mer grupo de muestras rplicas, mediante el mtodo
Winkler azida o el oxmetro polarogrfico.
5. Incubar el segundo grupo de muestras rplicas a 20C
1C, y proceder a evaluar el oxgeno disuelto final al
quinto da de incubacin con el mtodo respectivo.
Tabla A.3. Diluciones recomendadas para la determinacin de DBOn
CLASIFICACION FACTOR DE RANGO DE OBSERVACIONES
DILUCION (fd=A/V
T
) ALICUOTAS (A, mL)
Agua de mar 5 x 10
-1
- 1 150-300 Zona distante y sin
influencia de descargas
Zona de mezcla o 3 x 10
-2
1 10-300 Zona con influencia
influencia 3 x 10
-2
5x10
-1
10-150 de descargas
d) Clculos
- Sin dilucin:
DBO
5
(mg.L
-1
) = [ (C
1
C
2
)]
Donde:
DBO
5
-
1
)
C
1
= Concentracin de oxgeno disuelto de la mues-
tra, tiempo inicial, en mg.L
-1
C
2
tra, tiempo = 5 das en mg.L
-1
.
- Con dilucin simple:
DBO
5
(mg.L
-1
) = [ (C
1
C
2
)] / fd
Donde:
DBO
5
-
1
).
C
1
tra diluida, tiempo inicial.
C
2
tra diluida, tiempo = 5 das.
fd = (A/V
T
) = Fraccin volumtrica decimal de la mues-
tra empleada en la dilucin.
A = Alcuota de la muestra empleada para preparar
la dilucin (mL).
V
T
= Volumen final en el frasco de dilucin (300 mL).
F. DETERMINACION DE NITRATOS
METODO:
Espectrofotomtrico
REFERENCIAS
STRICKLAND, J. D. and T.R. PARSONS 1968. A manual
of seawater analysis. Research Board of Canada. Bull.
N125.
GRASSHOFF K., K. KREMLING and M. EHRHARDT
1999. Methods of seawater Analysis.
La colecta de agua de mar para muestras de superficie se
realiza mediante un recipiente plstico (balde), y para las de
profundidad se utilizan las botellas Niskin. El agua es colecta-
da en botellas de polietileno de 100 mL, previamente enjua-
gadas con el agua de mar a ser analizada. Si la muestra tiene
mucho material particulado en suspensin se recomienda fil-
trar (filtro de 0,45 um y de acetato de celulosa) y refrigerar
inmediatamente, si el anlisis se realiza dentro de las 24 ho-
ras. En caso contrario, congelar la muestra por un tiempo
mximo de 72 horas hasta su anlisis.
INTERFERENCIAS
En aguas muy costeras, concentraciones altas de fosfa-
tos pueden interferir en su anlisis. Concentraciones de
25 mol/L de fosfato disminuyen la reduccin en un 40 %
y 2,5 mol/L de fosfato pueden inhibir la reduccin en un
10 %. En general, las concentraciones de fosfato presen-
tes normalmente en el agua de mar son bajas para no
ocasionar problemas de interferencia significativos.
Equipos
- Espectrofotmetro UV Visible
- Balanza analtica (0,1 mg)
- Bomba de vaco elctrica
- Destilador elctrico
Materiales
- Columna de reduccin de vidrio de 20-25 cm con 8 a 10
cm de dimetro interno, con llave de doble paso
- Pipetas graduadas de 5 y 10 mL
- Pipetas volumtricas de 1, 2, 5 10, 20, 25 y 50 mL tipo
A
- Fiola de 1 L tipo A
- Fiolas de 100 mL tipo A
- Probetas de 50 mL tipo A
- Embudo de vidrio
- Esptulas
- Pipeteadores de 1 a 10 mL
- Celdas de absorcin de luz de 1 cm y 5 cm
- Matraz erlenmeyer de 125 mL
- Algodn de fibra de vidrio
- Papel de filtro de acetato de celulosa de 0.45 um.
Reactivos
- Cadmio granulado (Cd)
- Cobre en lmina (Cu)
- Cloruro de Amonio concentrado 350 g.L
-1
(NH
4
Cl)
- Cl oruro de Amoni o di l udo (25 mL NH
4
Cl
concentrado.L
-1
)
- Acido clorhdrico 1% (v/v) HCl
- Acido Ntrico 1% (v//v) HNO
3
- Sulfato de Cobre pentahidratado 2% (w/v)
- Nitrato de Potasio p. a. (KNO
3
)
- Sulfanilamida 10 g.L
-1
(C
6
H
8
N
2
O
2
S)
- Dihidrocloruro de N-(1-naftil)etilendiamina 1 g.L
-1
(C
12
H
14
N
2
.2HCl)
a) Tratamiento previo de cadmio granulado
- Lavar con cido ntrico 1 % (v/v) y enjuagar con bas-
tante agua destilada.
- Lavar con cido clorhdrico 1 % (v/v) y enjuagar con
abundante agua destilada.
- Lavar con sulfato de cobre pentahidratado 2 % (w/v) y
enjuagar con agua destilada.
b) Preparacin de la columna
En los extremos de la columna de vidrio se coloca algo-
dn de vidrio y lminas de cobre, mientras que en la par-
te central, el cadmio granulado es empaquetado en for-
ma homognea, evitando la formacin de burbujas.
c) Clculo del factor de la columna de reduccin
- Secar aproximadamente 2 g de nitrato de potasio p.a.,
a una temperatura de 105C durante 2 horas.
- Preparar una solucin estndar (I), pesando 1,02 g
de KNO
3
y enrasando a 1 L.
- Preparar una solucin estndar (II) de 10 mol.L
-1
, a
partir de la solucin estndar (I), debe prepararse dia-
riamente.
- A 500 mL de esta solucin, agregar 10 mL de cloruro
de amonio concentrado y agitar.
- Verter a la columna de reduccin, la solucin antes
preparada y regular el flujo de salida entre 10 y 12
mL/minuto.
- Recoger de la columna los ltimos 25 mL de solucin
y agregarle 0,5 mL de la solucin de sulfanilamida,
agitar y esperar entre 2 y 8 minutos.
- Agregar 0,5 mL de la solucin de N-(1-naftil)-etilen-
diamina, agitar y esperar por lo menos 10 minutos.
- Leer la absorbancia en el espectrofotmetro, con una
celda de 1 cm y a una longitud de onda de 543 nm.
d) De la muestra
- A 50 mL de agua de mar agregar 1 mL de la solucin
concentrada de cloruro de amonio.
- Verter la muestra en la columna reductora.
- Recibir los primeros 20 mL de la muestra y desechar-
los
- Colectar los subsiguientes 25 mL de muestra y aadir
inmediatamente 0,5 mL del reactivo sulfanilamida,
mezclar y dejar reposar 2 a 8 minutos.
- Aadir 0,5 mL del reactivo dihidrocloruro de N-(1-naf-
til) etilendiamina, agitar y esperar 10 minutos para que
la solucin logre su mxima intensidad de color. El co-
lor es estable durante 2 horas.
- Medir la absorbancia de la muestra en el espectrofot-
metro, a una longitud de onda de 543 nm, usando una
celda de 1 cm para muestras concentradas y de 5 cm
para muestras diludas.
- Hacer un blanco de reactivos con agua destilada para
corregir la absorbancia medida por sustraccin.
e) Determinacin de la concentracin de nitritos
- Solucin estndar: a partir de una solucin estndar
de 10 mol/L de nitrito de sodio, se prepara una serie
de concentraciones para determinar su factor de cali-
bracin.
- Muestra: a 25 mL de la muestra aadir inmediatamente
0,5 mL del reactivo sulfanilamida, mezclar y dejar repo-
sar 2 a 8 minutos.
- Aadir 0,5 mL del reactivo dihidrocloruro de N-(1-naf-
til) etilendiamina, agitar y esperar 10 minutos para que
la solucin logre su mxima intensidad de color. El
color es estable durante 2 horas.
- Medir la absorbancia de la muestra en el espectrofo-
tmetro, a una longitud de onda de 543 nm, usando
una celda de 1 cm para muestras concentradas y de
5 cm para muestras diludas.
corregir la absorbancia medida por sustraccin.
- Clculo de la concentracin de nitritos:
C = (Ac x F
1
)
Donde:
C =Concentracin de nitritos en la muestra (mol
NO
2
.L
-1
)
Ac =Absorbancia corregida
F
1
=Factor de la curva de calibracin
f) Clculos
- Factor de la columna de reduccin (F
2
):
F
2
= 10 / (As-Ab)
Donde:
As =Absorbancia del estndar de columna (estn-
dar de 10 mol.L
-1
de KNO
3
)
Ab =Absorbancia del blanco
La eficiencia de la columna para una solucin estn-
dar de 10 mol.L
-1
, se determina porque su absorban-
cia no debe ser menor que 0,450. Si 20 < F
2
< 22.2,
entonces la columna de reduccin est lista para ser
utilizada.
- La concentracin de nitratos se calcula con la siguiente
frmula:
N (mol.L
-1
) = (Ac x F
2
) C
Donde:
N =Concentracin de nitratos (mol NO
3
.L
-1
)
F
2
=Factor de la columna de reduccin
C =Concentracin de nitritos en la muestra (mol
NO
2
.L
-1
)
N (mg NO
3
.L
-1
) = N (mol.L
-1
) * (0,014)
G. DETERMINACION DE FOSFATOS
METODO:
Espectrofotomtrico.
REFERENCIAS
STRICKLAND, J. D. and T.R. PARSONS 1968. A manual
of seawater analysis. Research Board of Canada. Bull.
N125.
GRASSHOFF K., K. KREMLING and M. EHRHARDT 1999.
Methods of seawater Analysis.
La colecta de agua de mar para muestras de superficie se
realiza mediante un recipiente plstico (balde), y para las
de profundidad se utilizan las botellas Niskin. El agua es
colectada en botellas de polietileno de 100 mL, previamen-
te enjuagadas con el agua de mar a ser analizada. Si la
muestra tiene mucho material particulado en suspensin
se recomienda filtrar (filtro de 0,45 um y de acetato de ce-
lulosa) y refrigerar inmediatamente si el anlisis se realiza
dentro de las 24 horas. En caso contrario, congelar la mues-
tra por un tiempo mximo de 72 horas hasta su anlisis
INTERFERENCIAS
Los iones arsenato producen un color similar al fosfato,
pero puesto que su concentracin natural en el mar es
de slo 0,01-0,03 mol.L
-1
, no interfieren seriamente en
la determinacin de fosfato.
Puesto que un alto contenido de sulfuro de hidrgeno
est generalmente asociado con un alto contenido de
fosfato, puede eliminarse el efecto del sulfuro por simple
dilucin de la muestra con agua destilada. Si acaso la
concentracin de fosfato fuera tan baja que hiciera impo-
sible diluir, debe oxidarse el sulfuro con agua de bromo al
0,9 % agregada a la muestra acidificada (0,2 mL de ci-
do 4,5 mol.L
-1
por cada 100 mL de muestra).
Equipos
- Espectrofotmetro UV-Visible
- Balanza Analtica (0,1 mg)
- Destilador Elctrico
- Bomba de vaco elctrica
Materiales
- Erlenmeyer 125 mL
- Pipeta Graduada de 10 mL
- Pipetas volmtricas de 1, 2, 5, 10, 20 mL tipo A
- Fiolas de 100 mL tipo A
- Probetas de 50 mL
- Embudo de vidrio
- Kitasato de 1 L
- Esptulas
- Bombillas Succionadoras
- Celdas de absorcin de luz de 1 y 5 cm
- Papel de filtro de acetato de celulosa de 0.45 um
Reactivos
- Acido sulfrico p.a. (140 mL/900 mL agua destilada)
- Acido ascrbico p.a. 54 g.L
-1
- Tartrato antimonil p.a. 1,36 g.L
-1
- Molibdato de Amonio p.a. 30 g.L
-1
- Fosfato dihidrgeno de potasio p.a.
- Agua destilada
- Mezcla de reactivos (Tabla A.4)
a) Curva de Calibracin
- Secar aproximadamente 2 gr de fosfato dihidrgeno
de potasio p.a., a 105C durante 2 horas.
- Pesar 0,816 g de KH
2
PO
4
y enrasar a 1 L (solucin
estndar I).
- Preparar una solucin con 60 mol.L
-1
, a partir de la
solucin anterior (solucin estndar II).
- Preparar soluciones de concentraciones: 0,6; 1,2; 1,8;
2,4; 3,0; 3,6 y 4,2 mol.L
-1
a partir de la solucin es-
tndar II.
- Tomar 25 mL de cada solucin y agregar 2,5 mL de la
mezcla de reactivos (Tabla
- A.4), agitar y esperar entre 30 minutos y 2 horas.
- Leer la absorbancia en el espectrofotmetro a una longi-
tud de onda de 885 nm, utilizando una celda de 1 cm.
- Hallar el factor F por regresin lineal.
b) De la muestra
- Preparar la mezcla de reactivos, de acuerdo a la Tabla
A.4, calculada para 25 muestras.
- A 25 mL de agua de mar agregar 2,5 mL de la mezcla
de reactivos y agitar.
- Despus de 30 minutos y dentro de 2 horas, se mide la
extincin de la muestra a 885 nm empleando un espec-
trofotmetro y usando una celda de 1 cm de paso para
muestras concentradas y celda de 5 cm para muestras
diludas.
corregir la extincin medida por substraccin.
Tabla A.4. Volumen de solucin necesario para preparar
la mezcla de reactivos.
REACTIVOS VOLUMEN (mL)
Molibdato de amonio 12,50
Acido sulfrico 31,25
Acido ascrbico 12,50
Tartrato antimonil potsico 6,25
c) Clculos
La concentracin de fosfatos se calcula con la siguiente
frmula:
P (mol.L
-1
) = Ac x F
Donde:
P =Concentracin de fosfatos (mol PO
4
.L
-1
)
F =Factor de calibracin del equipo (curva de ca-
libracin).
P (mg PO
4
.L
-1
) = P ((mol.PO
4
.L
-1
) * (0,031)
H. DETERMINACION DE MACROBENTOS DE FONDO
BLANDO
METODO
Mediante identificacin de especies, conteo de individuos
y pesado hmedo.
REFERENCIAS
CARBAJAL, W. 1998. Deteccin de los efectos ambien-
tales sobre las comunidades marinas. Manual curso de
entrenamiento. Instituto del Mar del Per.
CARRASCO, D. F. y V. GALLARDO. 1989. La contamina-
cin marina y el valor de la macroinfauna bentnica en
su evaluacin y vigilancia: casos de estudio en el litoral
de Concepcin, Chile. Biologa Pesquera, 18: 15-27.
PEARSON, T.H. and R. ROSENBERG. 1978. Macroben-
thic succession in relation to organic enrichment and po-
llution of the marine environment. Oceanography and
Marine Biology, An. Annual Review, 16: 229 311.
- La muestra es colectada mediante una Draga tipo Van
Veen de 0,05 m
2
de rea de mordida, la cual es lanza-
da desde la embarcacin. En cada estacin de mues-
treo se debe tomar la muestra por triplicado.
- Tras la recoleccin de la muestra del fondo, se vier-
te todo el contenido de la draga a las bolsas tamiz
de 500 mm de tamao de poro y se lava con agua
de mar cuidadosamente eliminando todo el fango.
- Luego el material retenido es trasladado con cuida-
do a los frascos muestreo de plstico de 0,5 L pre-
viamente rotulados. Enseguida las muestras deben
ser fijadas con una solucin de formalina al 10 %
tamponada con brax. Los frascos deben ser llena-
dos con la solucin de formalina hasta casi el tope
del frasco. No hay tiempo de caducidad de la mues-
tra.
- Los frascos de muestreo deben ser etiquetados o ro-
tulados anotando lo siguiente: Nmero de estacin y
nmero de rplica, lugar de muestreo, fecha, volumen
de muestra (porcentaje de llenura de la draga), respon-
sable de la colecta.
Equipos
- Microscopio estereoscopio y microscopio compuesto
- Balanza Analtica: rango de medida 0,0001 200 g.
Materiales
- Draga Van Veen con 0,05 m
2
de rea de mordida
- Frascos de plstico (boca ancha) con 0,5 L de capa-
cidad
- Bolsas tamizadores con 500 mm de tamao de poro
- Juego de Tamices de 300 500 m de tamao de poro
- Pinzas de punta fina
- Esptulas
- Papel Canson
- Bandejas de plstico
Reactivos
- Formalina comercial (40%)
- Brax
- Azul de Metileno
- Rosa de Bengala
- Alcohol (96)
a) Anlisis de la muestra
- Verter el contenido de los frascos en tamices de 300
m y lavar las muestras varias veces con agua corrien-
te para eliminar toda la formalina.
- Examinar las muestras con un microscopio estereos-
copio y separar los organismos por categoras taxo-
nmicas (p.e. moluscos, crustceos, poliquetos, equi-
nodermos, otros). Para facilitar la separacin de los
poliquetos se pueden teir adicionando rosa de ben-
gala (200 mg.L
-1
) en el preservante de formol durante
24 horas como mnimo. Para facilitar la identificacin
de los moluscos se puede emplear el azul de metile-
no.
- Identificar los organismos con ayuda del microsco-
pio estereoscopio o un microscopio compuesto se-
gn sea el caso hasta el mnimo nivel taxonmico
posible.
- Posteriormente se procede a contar y pesar (peso h-
medo) la cantidad de individuos por especie presen-
tes por cada rplica. Para el recuento de los indivi-
duos slo considerar aquellos especmenes que po-
sean regin ceflica.
b) Clculos:
Con los datos de densidad, biomasa y nmero de espe-
cies, se procede a la determinacin cuantitativa de los
siguientes parmetros comunitarios:
- Riqueza especfica:
d = (S 1) / log N donde: S: nmero de especies
N: nmero de individuos.
- Densidad o abundancia relativa (Nind/0,05m
2
)
A = n
i
/ N donde: n
i
: abundancia de la especie i
N: nmero total de individuos
- Biomasa relativa (g/0,05 m
2
)
B = w
i
/ W donde: w
i
: peso en g. de la especie i
W: peso total de los individuos
- Diversidad especifica de Shannon y Wiener (bits/ind.):
H = - S (P
i
log2 P
i
) donde: P
i
: = n
i
/ N
- Equidad de Pielou:
J = H / H
max
donde: H
max
= log
2
S
S : nmero de especies
H: Indice de diversidad.
c) Criterios para interpretacin de los resultados
Se considera que el incremento en los niveles de perturba-
cin ambiental producen:
- Aumento de la abundancia de algunas especies (es-
pecies oportunistas).
- Disminucin de la biomasa total de la comunidad.
- Disminucin de la diversidad (H). La magnitud del
impacto en las comunidades macrobentnicas de fon-
do blando, medida a travs de la diversidad (Shannon
y Wiener) se puede dividir en 4 niveles:
Compatible : > 3 bits/ind.
Medio : 2 - 3 bits/ind.
Severo : 1 - 2 bits/ind.
Crtico : < 1 bits/ind.
- Disminucin de la riqueza de especies (d).
- Disminucin de la equidad (J).
- Cambios en la relacin abundancia, biomasa y espe-
cies (curvas SAB de Pearson y Rosenberg, 1978).
I. DETERMINACION DE MATERIA ORGANICA EN SE-
DIMENTOS
METODO
Prdida por ignicin.
REFERENCIAS
Journal of Sedimentary Petrology. Vol. 44, N 1, p. 242-
248. March. 1974
La colecta se realiza empleando una draga tipo Van Veen,
de 0,05 m
2
, separar slo los primeros 3 cm del sedimen-
to superficial.
Una vez colectada la muestra, sta debe mantenerse
congelada hasta su respectivo anlisis, a fin de minimi-
zar la descomposicin microbiolgica.
INTERFERENCIAS
Las posibles interferencias que afectan los resultados son:
la temperatura de secado y la perdida de material pulveri-
zado durante la pesada etc.
EQUIPOS Y MATERIALES
- Balanza analtica
- Estufa
- Mufla
- Mortero con piln
- Crisoles de cermica
- Desecador
- Pinzas
- Esptula (plstica o metlica)
- Bolsas Zipper
- Frascos plsticos de 250 mL de boca ancha
a) Pulverizar la muestra de sedimento previamente se-
cado y pesar de 1 a 2 g en un crisol cermico
b) La muestra pulverizada contenida en un crisol de ce-
rmica previamente pesado es secada durante una
hora en una estufa de 90a 100C
c) Enfriar la muestra a temperatura ambiente en un de-
secador; el crisol con la muestra es pesado. Una vez
determinada el peso seco de la muestra se procede a
realizar los clculos de la perdida de peso (P
1
).
d) El crisol con la muestra son colocados en una mufla y
calentados a 550C durante una hora. Despus del en-
friamiento a la temperatura ambiente se vuelve a pesar la
muestra (P
2
). La diferencia entre este peso (P
2
) y el peso
seco es la cantidad de materia orgnica incinerada.
e) Clculos:
El porcentaje de materia orgnica total en el sedimento
se calcula con la siguiente frmula:
% MOT = (P
1
- P
2
) * 100 / P
1
Donde:
%MOT = Porcentaje de materia orgnica total
P
1
= Peso muestra seca a 100C
P
2
= Peso despus de incinerar a 550C
FORMATO PARA REPORTE DE EFLUENTES Y CUERPO MARINO RECEPTOR
DE LA INDUSTRIA PESQUERA PARA EL CONSUMO HUMANO INDIRECTO
1.- DATOS DE LA EMPRESA
Razn Social : Responsable del Muestreo
Direccin : ..............................................................................
Ubicacin de la Planta : Responsable del anlisis
Telfono de la Planta : ..............................................................................
Responsable de la Planta : Fecha ....................................................................
2.- DATOS DE MATERIA PRIMA
Embarcacin Pesquera
1
Especie Talla Promedio Zona de captura Fecha y hora de Fecha y hora de inicio de
Nombre Matrcula (cm) primera cala descarga
1
Slo de aquellas embarcaciones que se obtuvo muestras para la muestra compuesta
ANEXO 4
3.- PRODUCCION (
2
)
Materia Prima Recibida Harina Producida Tipo de Harina Rendimiento Aceite Producido Aceite recuperado del
(Tm) (Tm) (m.p./Produccin) (Tm) tratamiento de espumas (Tm)
2
Produccin referida al da de muestreo.
4.- AGUA DE BOMBEO Y TRATAMIENTO
Cdigo del Fecha y Hora de la muestra Caudal m
3
/s Relacin Tipo de tratamiento Tratamiento de
Compuesto (
3
) compuesta Agua / Pescado Nde Filtros : Espumas
NSist. de Flotac. con Micorburbujas : SI NO
Coagulantes y Floculantes :
Nde Emisores :
(
3
) Hace referencia a la muestra compuesta
5.- OTROS EFLUENTES
Cdigo de Fecha Caudal m
3
/s Tipo de efluente Tipo de tratamiento :
Muestra Hora de Muestreo descargado
Nde puntos de descarga :
6.- CONTROL DE MUESTRAS DE EFLUENTE Y AGUA RECEPTORA Fecha de Muestreo:
Puntos de Coordenadas Profundidad Oxigeno DBO
5
SST Aceites y pH Temperatura Fosfatos Nitratos Sulfuros
Muestreo Geogrficas (m) Disuelto (mg/L) (mg/L) grasa (C) (mg/L) (mg/L) (mg/L)
(mg/L) (mg/L)
LAT LONG
1
era
Muestra

2
da
Muestra

3
era
Muestra

Otros Efluentes
Orilla de Playa
Superficie
Media
agua
4
Fondo
Superficie
Media
agua
4
Fondo
Superficie
Media
agua
4
Fondo
Superficie
Media
agua
4

Fondo
(
4
) Slo para estaciones con ms de 10 metros de profundidad.
7.- CONTROL DE MUESTRAS DE SEDIMENTO (
5
) Fecha de Muestreo:
Puntos de muestreo Granulometra Materia orgnica Macrozoobentos de fondo blando
Chata
Final del emisor
A 200 m del final del emisor
Aguas abajo (muestra de referencia)
(
5
) Cuando Corresponda el muestreo ( 1 vez cada dos aos)
A
g
u
a

d
e
B
o
m
b
e
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