aplicacin de la aricultura $ la me#ora del medio ambiente. INTROD%""I&N La ingeniera gentica se define como el estudio y manipulacin de los genes de organismos vivos para mejorar la vida del hombre. Y actualmente tiene importantes aplicaciones en diversas reas. A) Explicacin del ADN El ADN recombinante' o ADN recombinado' es una mol!cula de ADN arti(icial (ormada de manera deliberada In )itro por la unin de secuencias de ADN provenientes de dos oranismos de especies di(erentes *ue normalmente no se encuentran #untos. Al introducirse este ADN recombinante en un oranismo se produce una modi(icacin en!tica *ue permite la adicin de un nuevo ADN al oranismo conllevando a la modi(icacin de rasos existentes o la expresin de nuevos rasos. +a produccin de una prote,na no presente en un oranismo determinado $ producidas a partir de ADN recombinante se llaman prote,nas recombinantes. El proceso de produccin de un ADN recombinante comien-a con la identi(icacin desde un oranismo de una secuencia de ADN de inter!s con el (in de propaarlo en otro oranismo *ue carece de la secuencia $' por ende' del producto prot!ico de esa secuencia de ADN. As, se pueden producir cantidades ilimitadas de la prote,na codi(icada por el susodic.o en . En t!rminos simples' el procedimiento consiste en/ +ocali-acin de enes $ sus (unciones. "lonacin del AD! $ su posterior almacenamiento en enotecas. Reaccin en cadena de la polimerasa 0P"R) Utilizacin de vectores de expresin. El vector que se utiliza contiene secuencias de ADN que al ser replicadas confieren resistencia a antibiticos especficos. Esta tcnica ha sido ampliamente utilizada en el campo de la medicina ha permitido el desarrollo de importantes avances teraputicos como por e!emplo la produccin de insulina recombinante. "on el uso de ADN recombinante se ha lo#rado obtener plantas trans#nicas resistentes a insectos$ hon#os$ bacterias herbicidas$ con me!ores caractersticas de calidad durante poscosecha con alto contenido. Produccin y terapia con protenas recombinantes %ara que estas protenas sean &tiles desde el punto de vista teraputico tienen que conservar su actividad. Adem's$ se debe evitar que sean inmuno#nicas para el ser humano. %ara ello es importante decidir para cada protena recombinante cual es el or#anismo de expresin m's adecuado. Produccin en bacterias Estas protenas recombinantes han intentado expresarse en bacterias como E. coli$a que son f'ciles de mantener$ crecen r'pido se conoce bien su #enoma. (in embar#o$ el maor problema que presenta la produccin en bacterias es que en ellas no existe #licosilacin proteica$ por lo que al#unas protenas producidas en bacterias pierden totalmente su funcin. A&n as se han lo#rado producir con xito al#unas protenas recombinantes en bacterias. Produccion en levaduras Al ser clulas eucariotas por lo tanto m's similares a las humanas que las bacterias ser mu f'ciles de emplear industrialmente$ las levaduras constituen otro #rupo de or#anismos susceptibles de producir protenas recombinantes para uso humano. (in embar#o$ aunque s presentan #licosilacin proteica$ al contrario que las bacterias$ esta es totalmente distinta a la humana$ por lo que estas protenas presentan problemas$ en muchos casos incluso inmuno#nicos. Produccin en clulas de insecto )'s cercanas a&n a las clulas humanas que las levaduras son las de insecto$ como las de (podoptera fru#iperda$ que se cultivan f'cilmente in *itro$ aunque el medio de cultivo es caro. Dicho medio$ adem's$ no contiene suero$ lo que hace m's f'cil el procesado de la protena. +tra de las propuestas ha sido el uso no de clulas de insecto$ sino de los insectos completos para la produccin de estas protenas. %ara ello se infectan a los insectos con baculovirus modificados para que expresen la protena recombinante. (in embar#o$ este sistema presenta exactamente el mismo problema que el de levaduras, que las clulas de insecto presentan #licosilacin$ pero esta es totalmente distinta a la de mamferos. -. /a obtencin de vacunas. /a vacuna es un preparado de ant#enos que una vez dentro del or#anismos provoca la produccin de anticuerpos con ello una respuesta de defensa ante microor#anismos pat#enos. Esta respuesta #enera$ en al#unos casos$ cierta memoria inmunitaria produciendo inmunidad transitoria frente al ataque pat#eno correspondiente. /a primera vacuna descubierta fue la usada para combatir la viruela por Ed0ards 1enner en 2345. "/A(676"A"68N, 9 *acunas vivas o atenuadas. Una vacuna atenuada consiste en utilizar uno o varios a#entes infecciosos vivos homlo#os cua virulencia haa sido atenuada$ de manera que sin producir nin#una lesin secundaria al animal$ induzca inmunidad duradera frente al a#ente homlo#o virulento. 9*acunas muertas o inactivadas. /as vacunas inactivadas est'n formadas por el o los microor#anismos completos pero inactivado por al#&n mtodo fsico o qumico. Estas vacunas$ presentan como principales venta!as$ frente a las vacunas atenuadas$ su estabilidad se#uridad$ as como su conservacin. (in embar#o$ suelen inducir una respuesta inmunitaria menor que las vacunas atenuadas. ):;+D+ DE +-;EN"68N, 1. Vacunas avirulentas preparadas a partir de formas no peligrosas del microorganismo patgeno. 2. Vacunas posificadas a partir de organismos muertos o inactivos. 3. Antgenos purificados: Teniendo en cuenta que las bacterias y virus contienen numerosos antgenos constitutivos de los cuales solo algunos est!n relacionados con los fenmenos de inmunidad adquirida es evidente que la vacuna ideal seria la preparada e"clusivamente con los antgenos inmuni#antes eliminando los dem!s antgenos y sustancias que no solo no intervienen en la inmuni#acin sino que adem!s pueden interferir y ser causa de acciones secundarias. $os avances logrados en el %ltimo decenio en el campo de la inmunoquimica &an permitido obtener los antgenos inmuni#antes de algunas especies bacterianas con un elevado grado de pure#a lo que &a &ec&o posible la preparacin de nuevas vacunas. '. Vacunas gen(ticas. Fase preparatoria de la vacunacin: normas generales !Comprobar las caractersticas del producto "ue se va a administrar# !$odo de conservacin. !%orma de administracin. !&a de administracin. !'u(ar de administracin. !%ec)a de caducidad. !Comprobar el aspecto *sico de la vacuna !Al(unos productos biol(icos lio*ili+ados tienen, tras su reconstitucin, una valide+ limitada y son vulnerables a la lu+ y al calor. !A(itar enr(icamente las vacunas )asta conse(uir la )omo(enei+acin del producto . !Ele(ir la a(u-a adecuada se(.n la va de administracin, la edad del paciente, el lu(ar anatmico y el tipo de vacuna. !/tili+ar -erin(as y a(u-as estriles de un solo uso desec)0ndolas tras su utili+acin. !No me+clar varias vacunas en las mismas -erin(as. !Para la limpie+a de la piel se utili+ar0 a(ua destilada. !En un mismo acto vacunal slo se administrar0 una inyeccin por miembro. ".DE76"68N DE +<=AN6()+( ;<AN(=:N6"+( /a obtencin de un trans#nico implica la participacin de un or#anismo que dona el #en de inters un or#anismo receptor del #en que expresar' la nueva caracterstica deseada. /A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+ 1) Corroborar "ue existe un (en "ue codi*ica para la caracterstica de inters "uando se encuentra una caracterstica en un or#anismo que resulta interesante para transferir a otro or#anismo debe verificarse que es producto de un #en. 2) Clonado del (en Una vez que se determin que el or#anismo donante posee un #en que codifica para la caracterstica de inters$ los bilo#os moleculares se lanzan a la tarea de conse#uir ese #en$ es decir, >clonar? el #en. /a tarea de clonar involucra varias tcnicas que se describen a continuacin, i) Extraccin de ADN. ii) -&squeda de un #en entre la mezcla de #enes del ADN. /a tcnica de %"< permite amplificar la cantidad de ADN esto facilita el clonado del #en de inters. iii) (ecuenciacin. iv) "onstruccin del vector recombinante /A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+ @. )odificar el #en /a venta!a de tener el #en clonado en un vector$ es que se puede transferir a una bacteria que$ al multiplicarse en el laboratorio$ tambin multiplica al vector que porta. A. ;ransferir el #en al or#anismo receptor El #en de inters se puede introducir en clulas ve#etales o animales dar lu#ar a la formacin de un or#anismo #enticamente modificado B+=). o trans#nico. En la produccin de estos cultivos ha una primera etapa en la que se introduce el #en de inters en las clulas ve#etales. Este proceso tambin se denomina transformacin. /a se#unda etapa consiste en re#enerar una planta completa a partir de la &nica clula transformada. Existen varias tcnicas para transferir #enes a clulas de mamferos con el ob!etivo de que se inte#re al #enoma. Una de ellas es la microineccin del ADN de inters directamente en un vulo fecundado. /A( E;A%A( DE/ ;<A-A1+ C. "aracterizar el or#anismo receptor transformado. Una vez obtenido el +=)$ se debe demostrar$ entre otras cosas$ si tiene una Bo m's. copias del trans#n$ cmo en qu te!idos se expresa el #en. %ara lo#rarlo se extrae el ADN del or#anismo se lo analiza. . /a tcnica de %"<$ a explicada$ permite amplificar el trans#n$ si es que est' en el #enoma del or#anismo$ es una tcnica r'pida para verificar si el or#anismo ha sido transformado o no. D) E-emplos de aplicacin de la a(ricultura y la me-ora del medio ambiente. /a biotecnolo#a ve#etal es una extensin de la tradicin de modificar las plantas$ con una diferencia mu importante, la biotecnolo#a ve#etal permite la transferencia de una maor variedad de informacin #entica de una manera m's precisa controlada. Al#unas aplicaciones de la biotecnolo#ia como la alimentacion el malteado$ se han utilizado durante milenios. +tras son m's recientes$ pero est'n i#ualmente consolidadas. %or e!emplo$ durante decenios se han utilizado microor#anismos como f'bricas vivas para la produccin de antibiticos destinados a salvar vidas humanas$ entre ellos la penicilina$ obtenida a partir del hon#o %enicillium$ la estreptomicina$ obtenida a partir de la bacteria (treptomces. /os deter#entes modernos se basan en enzimas producidas por medios biotecnol#icos$ la produccin de queso de pasta dura se basa en #ran medida en cua!o producido mediante levaduras biotecnol#icas la insulina humana para los diabticos se produce actualmente #racias a la biotecnolo#a. 'a biotecnolo(a y la me-ora del medio ambiente /a biotecnolo#a ofrece muchas posibilidades para la me!ora del medio ambiente. Una de las aplicaciones m's interesantes es la eliminacin de metales pesados en los ecosistemas. Existen microor#anismos capaces de metabolizarlos hacerlos desaparecer.De la misma forma$ la eliminacin de las mareas ne#ras se puede llevar a cabo por bacterias capaces de di#erir los hidrocarburos del petrleo$ con una #ran eficacia. Estas mismas bacterias son aplicables al tratamiento de diferentes tipos de contaminacin asociados a la industria del petrleo$ as como a las separaciones selectivas de mezclas de hidrocarburos. ;ambin en relacin con la lucha contra los contaminantes$ es posible utilizable microor#anismos para el tratamiento de la contaminacin producida por herbicidas$ pesticidas e insecticidas$ as como para el procesado de diferentes tipos de residuos urbanos e industriales. Existen microor#anismos que podran ser utilizados para ensaos sobre la toxicidad de diversos compuestos en la naturaleza$ deteccin de metales$ recuperacin de metales preciosos$ etc. %or <imo$ una aplicacin de la maor importancia es el uso de diversas especies de microor#anismos seleccionados mediante tcnicas biotecnol#icas$ para la produccin de ener#a. (e conse#uira as una fuente de ener#a barata no contaminante. /a biotecnolo#a ambiental se ocupa de la aplicacin de los procesos biotecnol#icos para prote#er mantener la calidad del medio ambiente. $icroor(anismos y medio ambiente Diversas tcnicas biotecnol#icas permiten resolver$ de diferentes novedosas maneras$ el problema de la contaminacin ambiental. (e pueden utilizar diversos microor#anismos para afrontar problemas de tratamiento control de la contaminacin qumica en los ecosistemas$ a que al#unos de ellos$ principalmente bacterias$ tienen la capacidad de eliminar del medio o de#radar con enzimas #ran n&mero de compuestos txicos peli#rosos. En la actualidad en los laboratorios se est'n creando bacterias$ levaduras enzimas especficas para conse#uir la de#radacin de los residuos mediante las si#uientes tcnicas, 3iometani+acin. Es un proceso de di#estin anaerobia Bsin ox#eno. de la materia or#'nica por microor#anismos$ que la descomponen dando lu#ar a una mezcla de #ases$ principalmente metano dixido de carbono. 'a(unas de estabili+acin. (e utilizan bacterias al#as para depurar residuos lquidos por procesos naturales. %iltros percoladores. "on filtros que contienen una poblacin de microor#anismos que de#radan la materia or#'nica que haa en el residuo. 76N 45E END