Você está na página 1de 105

2 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.

34 - janeiro/junho 2005
EM MAIO DE 1997 PLANTAMOS A PRIMEIRA SEMENTE
DE BIOTECNOLOGIA NA IMPRENSA BRASILEIRA
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 3
AGORA VOC PODE COLHER OS FRUTOS
www.biotecnologia.com.br
KL3
4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
ENTREVISTA
Meio Ambiente
Dr. Aluzio Borm Coordenador do nosso conselho
cientfico, um membro sempre presente e atuante, tem 26
livros publicados no Brasil e no exterior, fora os inmeros
artigos dedicados peridicos, como para a Revista
Biotecnologia. Prof. Borm possui doutorado em Gentica e
Melhoramento pela University of Minnesota, Ps-doutorado
em Gentica Molecular pela mesma universidade e presi-
dente da Regional Minas Gerais da Sociedade Brasileira de
Melhoramento de Plantas. Prof. Borm foi membro da CTNBio
e vice-presidente da Cmara de Biotecnologia e Agronegcio
da Federao das Indstrias de Minas Gerais - FIEMG.
Nessa entrevista para a Revista Biotecnologia, esse
tambm professor da Universidade de Viosa, nos faz um
relato dos principais questionamentos sobre aquilo que
nunca poderemos esquecer, uma vez que no podemos nem
ao menos sobreviver sem ele: o meio ambiente.
4 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.32 - janeiro/junho 2004
O maior desafio a conservao da megadiversidade existente no territrio nacional
Aluzio Borm
Eng. Agrnomo, M.S., Ph.D. e Professor da
Universidade Federal de Viosa
borem@ufv.br
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 5
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 5
BC&D - Dr Borm, foi o Senhor
quem providenciou e elaborou
essa edio especial. O que o fez
pensar nesse tema em particu-
lar, ou melhor, por que o meio
ambiente?
Aluzio Borm - A biotecnologia
disponibilizou sua primeira varieda-
de geneticamente modificada em
fevereiro de 1994, o tomate Flavr
Savr, desenvolvido pela ento
Calgene. Para a aprovao desta e
das variedades GM que chegaram ao
mercado nos anos seguintes, rgos
governamentais de diferentes pa-
ses submeteram estes produtos
rgidas e criteriosas anlises de
biossegurana. Estas anlises se ba-
seiam em experimentao e testes
realizados por vrias instituies de
pesquisa para avaliar a segurana
sob o ponto de vista alimentar e
ambiental. Nos primeiros anos dos
OGMs no mercado, vrias ONGs ques-
tionaram, especialmente, a seguran-
a alimentar destes produtos.
Mais recentemente, o foco dos
questionamentos se voltaram para a
segurana ambiental. Alis esse foi o
principal tema debatido no Biowork
VII. Considerando que crticas atuais
aos OGMs esto relacionadas a pos-
sveis efeitos adversos ao Meio Am-
biente, surgiu ento a idia de reunir
os maiores especialistas em diferen-
tes reas da interface da biotecnologia
com o meio ambiente, para aborda-
rem justamente este tema, que foi
muito debatido no Biowork VII,
evento esse realizado na Universi-
dade Federal de Viosa, agora em
Agosto e que, simultaneamente,
disponibilizou estas informaes
queles que no tiveram oportuni-
dade de participar do workshop.
BC&D - Dr. Borm, poderia nos
resumir, em poucas palavras,
sobre quais so os principais pro-
blemas que o Brasil enfrenta na
rea de meio ambiente?
Aluzio Borm - Com o avano
tecnolgico, no s o Brasil, mas a
grande maioria dos pases, enfren-
tam hoje problemas de degradao
ambiental. Nestes incluem-se polui-
o do solo, da gua e do ar, reduo
e fragmentao das florestas, redu-
o da biodiversidade etc.
BC&D - A seu ver, o que poderia
ser feito?
Aluzio Borm - O Brasil possui
legislao satisfatria para preserva-
o do meio ambiente, mas infeliz-
mente a certeza de impunibilidade
tem motivado muitos a ignorarem as
leis. A crescente conscincia pblica
sobre a necessidade de conservao
dos recursos naturais tem resultado
em maior vigilncia da populao
aes degradadoras do meio ambi-
ente. Entretanto, h necessidade de
que o governo tome medidas enr-
gicas contra as grandes agresses ao
meio ambiente, como as queimadas
por exemplo, ou contra o uso de
metais pesados na extrao do ouro,
etc.
BC&D - Do seu ponto de vista,
quais os marcos que transfor-
maram o Brasil em potncia na
rea de biotecnologia no cen-
rio mundial?
Aluzio Borm - Os investimentos
realizados pelo governo brasileiro, a
partir dos anos 80, na formao de
recursos humanos no exterior inicial-
mente e posteriormente no prprio
Brasil, resultou numa massa crtica
altamente qualificada, que tem con-
tribudo para o progresso da cincia
no cenrio mundial.
BC&D - A biossegurana est,
realmente, preservando os inte-
resses na sade humana e no
meio ambiente no Brasil?
Aluzio Borm - As variedades GM
desenvolvidas so seguras para con-
sumo humano e para plantio em
larga escala nos pases em que foram
liberadas. Estas variedades tm trazi-
do benefcios para a sade humana
de forma indireta, pois muitos destes
alimentos, como o milho Bt, possu-
em menor teor de micotoxinas
cancergenas, como a fumonisina,
bem como menor teor de resduos
de inseticidas. E em breve estar
chegando ao mercado as variedades
que esto sendo desenvolvidas para
serem mais nutritivas e saudveis
para o homem.
BC&D- Como voc v a discusso
do decreto que regulamenta a
Lei de Biossegurana aprovada
esse ano pelo congresso nacio-
nal?
Aluzio Borm - A discusso do
Projeto da Lei de Biossegurana, em-
bora tenha se arrastado demasiada-
mente, fez parte do processo demo-
crtico e permitiu que toda a socie-
dade, bem como os parlamentares,
se inteirassem de seus vrios aspec-
tos antes de aprov-la. Na nossa
anlise, o mais importante agora
que as pesquisas voltem ao seu rtmo
normal, para evitar prejuzos ainda
maiores ao Pas e comunidade ci-
entfica brasileira.
BC&D- Como pesquisador, qual
a sua opinio sobre a evoluo
das pesquisas OGMs no Brasil?
Aluzio Borm - As pesquisas esto
evoluindo, apesar do excesso de
entraves burocrticos exigidos para
a condio dos trabalhos. Os avanos
poderiam ser maiores se maior agili-
dade fosse dada s autorizaes e
licenas de pesquisa.
BC&D - Temos uma CTNBio ide-
al? Qual seria esta CTNBio?
Hoje o Brasil j o celeiro do
mundo. A perspectiva ainda
mais promissora, pois temos
tecnologia genuinamente
nacional desenvolvida para
produo em regies tropicais
O Brasil possui legislao
satisfatria para preservao
do meio ambiente, mas
infelizmente a certeza de
impunibilidade tem motivado
muitos a ignorarem as leis
6 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
6 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Aluzio Borm - A nova Lei de
Biossegurana, aprovada pelo Con-
gresso Nacional e sancionada pelo
Presidente da Repblica, em maro
deste ano, estabelece o novo forma-
to da CTNBio, com seus 54 mem-
bros, titulares e suplentes. Mais im-
portante do que ter uma CTNBio
ideal termos a CTNBio com regras
claras e exeqveis para nossos pes-
quisadores seguirem. A Comunidade
cientfica certamente desenharia uma
CTNBio diferente da estabelecida
com a nova legislao, mas nossa
expectativa a de que ser possvel
trabalhar de forma produtiva mesmo
com este novo formato.
BC&D - O Senhor acha que o
pesquisador em geral, seja nas
universidades ou nos centros de
pesquisa, se sente apoiado pela
lei de patentes? H em nossas
Universidades departamentos
que fornecem real apoio a esses
pesquisadores?
Aluzio Borm - No Brasil ainda
existe muito tabu sobre este assun-
to. Muitos de nossos colegas ainda
no enxergam os benefcios para sua
instituio e para o seu laboratrio
que as patentes podem trazer, mas
isto est mudando. Algumas institui-
es possuem bons escritrios para
darem apoio aos pesquisadores na
solicitao de patentes para seus
inventos, mas ainda h um longo
caminho a ser percorrido.
BC&D - Qual a maior ameaa ao
meio ambiente, especifica-
damente, no Brasil?
Aluzio Borm - A maioria dos pes-
quisadores brasileiros entendem que
o maior desafio a conservao da
megadiversidade existente no terri-
trio nacional. O Brasil detentor da
maior biodiversidade do planeta, mas
muito vem sendo perdido com as
queimadas e a fragmentao de nos-
sos biomas. Na Mata Atlntica a parte
residual lamentavelmente muito
pequena. Nos outros biomas brasilei-
ros, como a caatinga, o cerrado, cam-
pos sulinos e floresta amaznica, h
a necessidade de uma ao mais
forte por parte do governo brasilei-
ro. A participao da populao bra-
sileira tambm pode ter importante
papel nesta preservao.
BC&D- Muito se fala sobre o te-
mor da engenharia gentica pro-
porcionando impacto no meio
ambiente. H o que temer?
Al u zi o Borm - Embor a a
biotecnologia possua grande poten-
cial para modificar as plantas, a po-
pulao pode ficar tranqila que so-
mente variedades que so aprova-
das em todos os testes de segurana
ambiental so liberadas para plantio
em escala comercial. Estes testes so
realizados por vrios anos e por dife-
rentes instituies de pesquisa, ava-
liando possveis efeitos adversos para
a microbiota do solo, para organis-
mos no-alvo da tecnologia, para a
biodiversidade, para o lenol fretico,
etc. Qualquer evidncia de possvel
danos ao meio ambiente suficiente
para que se vete a liberao comer-
cial do produto. Estas anlises de
biossegurana foram validadas inter-
nacionalmente pela United Nations
Environment Programme (UNEP),
programa da ONU voltado para a
preservao do Meio Ambiente. Adi-
cionalmente, estas anlises vem sen-
do realizadas desde o comeo dos
anos 90, quando se iniciou a avalia-
o de segurana ambiental das pri-
meiras variedades GM. Uma evidn-
cia de que estes procedimentos so
rgidos e eficientes que nenhum
dano ao Meio Ambiente ocorreu em
decorrncia do plantio destas varie-
dades ao longo destes mais de 10
anos, e em uma rea acumulada
superior a 385 milhes de ha.
BC&D - Tambm muito se fala
que o Brasil ser o celeiro do
mundo. H um exagero nisso?
Ser que, s com o domnio das
novas tecnologias, isso seria
possvel?
Aluzio Borm - O Brasil j o
celeiro do mundo. Com o progresso
experimentado pelo Pas nestes lti-
mos anos, tornando o segundo maior
produtor de soja, maior produtor de
feijo, maior produtor de carne bovi-
na, dentre vrios outros alimentos,
hoje o Brasil j celeiro do mundo.
A perspectiva ainda mais promis-
sora, pois temos tecnologia genuina-
mente nacional desenvolvida para
produo em regies tropicais. As
universidades, a Embrapa e outras
instituies de pesquisa do Pas trans-
formaram este sonho de 20 anos
atrs em realidade nos dias atuais.
BC&D - Para finalizar, j que
somos os arquitetos de nosso
destino, teremos o destino que
construrmos baseado na dire-
o que dermos ao aproveita-
mento e explorao do meio
ambiente, principalmente agora
em que dominamos tecnologias
jamais imaginadas. Qual o reca-
do que enviaria aos pesquisado-
res que comeam a ter o dom-
nio de tais tecnologias?
Aluzio Borm - Minha palavra final
no poderia deixar de ser de estmu-
lo. Muitos no acreditavam que o
Brasil se destacasse como grande
produtor e exportador de alimentos,
e hoje nossa posio j est consoli-
dada. Portanto, gostaria que nossos
colegas continuassem sonhando alto.
Os desafios para o sucesso em qual-
quer projeto em geral so grandes,
mas somente com persistncia, mui-
to trabalho e acreditando no futuro
do Brasil poderemos dar nossa con-
tribuio e transformar o Brasil, pas-
sando de um Pas grande, para um
"Grande Pas". O sonhar antecede o
realizar!
Mais importante do que ter
uma CTNBio ideal termos a
CTNBio com regras claras e
exeqveis para nossos
pesquisadores seguirem
Nos outros biomas brasileiros,
como a caatinga, o cerrado,
campos sulinos e floresta
amaznica, h a necessidade
de uma ao mais forte por
parte do governo brasileiro
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 7
KL3 Publicaes, atravs da Revista Biotecnologia
Cincia & Desenvolvimento, recebeu, em 24 de Junho
de 2005, em Campinas, o Prmio Master de Cincia e
Tecnologia 2005, promovido pelo Instituto de Estudos e Pesquisa
da Qualidade, por sua contribuio ao desenvolvimento da
cincia e tecnologia no Brasil
A Revista Biotecnologia agradeceu, em nome de todo o
conselho cientfico e em nome de todos os pesquisadores que
contriburam todos esses anos divulgando suas pesquisas.
PRMIO MASTER
DE CINCIA E TECNOLOGIA
Prmio Master de Cincia e Tecnologia para a Revista Biotecnologia
8 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Colaboraram nesta edio
BIOTECNOLOGIA Cincia & Desenvolvimento
KL3 Publicaes Ltda
Fundador
Dr. Henrique da Silva Castro
Direo Geral e Edio
Ana Lcia de Almeida
Diagramao e design
Luiz Dourado Bezerra
E-mail
biotecnologia@biotecnologia.com.br
Home-Page
www.biotecnologia.com.br
Projeto Grfico
KL3 Publicaes Ltda
SHIN CA 02 Bloco "C"
Edifcio Garden Place salas 225/226
Lago Norte - Braslia - DF
Cep 71503-502
Tel.: (061) 3468-6099
Fax: (061) 3468-3214
Os artigos assinados so de
inteira responsabilidade
de seus autores.
ISSN 1414-6347
NOTA: Todas as edies da Revista Biotecnologia
Cincia & Desenvolvimento esto sendo indexadas
para o AGRIS (International Information System for
the Agricultural Sciences and Technology) da FAO
e para a AGROBASE (Base de Dados da Agricultura
Brasileira).
Portal Biotecnologia - www.biotecnologia.com.br
Aluzio Borm
Antnio Vargas de Oliveira Figueira
Celso Omoto
Christine Claire Gaylarde
Deise Maria Fontana Capalbo
Galdino Andrade
Gilson Paulo Manfio
Gislaine Trindade Vilas-Bas
Itamar Soares de Melo
Luciano Loureno Nass
Luiz Roberto Guimares Guilherme
Marco Antnio Nogueira
Maria C. M. D Pavani
Maria de Lourdes Bellinaso
Marise T. Suzuki
Maurcio Antnio Lopes
Olvia M. Nagy Arantes
Reginaldo Lopes Minar
Robison A. Pitelli
Samuel Martineili
Wagner Augusto Benedito
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 9
Entrevista
Meio ambiente - Aluzio Borem pg. 04
ESPECIAL - Meio Ambiente
A histria da biotecnologia pg. 10
Bioindicadores para uma anlise de risco ambiental pg. 13
Impacto da biotecnologia na biodiversidade pg. 22
Bioprospeco pg. 29
Biorremediao pg. 36
Fundamentos da anlise de risco pg. 44
Risco e segurana ambiental pg. 56
O princpio da precauo pg. 65
Resistncia de insetos a plantas geneticamente modificadas pg. 67
Bacillus thuringiensis pg. 78
Consideraes sobre o fluxo gnico pg. 86
Variedades transgnicas e meio ambiente pg. 91
Feralidade vegetal e transgenese pg. 100
Conselho Cientfico
Dr. Aluzio Borm - Gentica e Melhoramento Vegetal
Dr. Henrique da Silva Castro - Sade;
Dr. Ivan Rud de Moraes - Sade - Toxicologia;
Dr. Joo de Deus Medeiros - Embriologia Vegetal;
Dr. Naftale Katz - Sade;
Dr. Pedro Jurberg - Cincias;
Dr. Srgio Costa Oliveira - Imunologia e Vacinas;
Dr. Vasco Ariston de Carvalho Azevedo - Gentica de Microorganismos;
Dr. William Gerson Matias - Toxicologia Ambiental.
Conselho Brasileiro de Fitossanidade - Cobrafi
Dr. Lus Carlos Bhering Nasser - Fitopatologia
Fundao Dalmo Catauli Giacometti
Dr. Eugen Silvano Gander - Engenharia Gentica;
Dr. Jos Manuel Cabral de Sousa Dias - Controle Biolgico;
Dra. Marisa de Goes - Recursos Genticos
Instituto de Pesquisas Energticas e Nucleares - IPEN
Dr. Jos Roberto Rogero
Sociedade Brasileira de Biotecnologia - SBBiotec
Dr. Luiz Antonio Barreto de Castro - EMBRAPA
Dr. Digenes Santiago Santos - UFRGS
Dr. Jos Luiz Lima Filho - UFPE
Dra. Elba P. S. Bon - UFRJ
10 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
A HISTRIA DA
BIOTECNOLOGIA
Aluzio Borm
Eng. Agrnomo, M.S., Ph.D. e Professor da
Universidade Federal de Viosa
borem@ufv.br
uito antes mesmo que o
homem entendesse a bio-
logia, ele j lidava com a
biotecnologia na produo
de vinhos e pes. Aps o
acmulo de conhecimentos e experi-
ncia a respeito da biotecnologia mo-
derna, sua definio deve cobrir as
vrias tcnicas que utilizam o DNA
recombinante para gerar produtos ou
servios. No restam dvidas de que a
biotecnologia do sculo XXI muito
diferente daquela quando este termo
foi, pela primeira vez, usado no sculo
passado para descrever procedimen-
tos de produo de vinhos, pes e
derivados lcteos. No contexto atual,
essas tcnicas no se enquadrariam na
biotecnologia. De forma semelhante,
embora se adote uma definio
abrangente, a manipulao gnica por
meio de enxertia e, ou, o uso de
microrganismos para fermentao no
so tratados neste livro. O que distin-
gue essas procedi mentos da
biotecnologia moderna no so os prin-
cpios envolvidos, mas as tcnicas uti-
lizadas. Por exemplo, o melhoramen-
to gentico de plantas e o melhora-
mento molecular compartilham vrios
aspectos e tm, muitas vezes, o mes-
mo objetivo. Ambos buscam desen-
volver variedades mais teis ao ho-
mem. O melhoramento molecular di-
fere do melhoramento gentico con-
vencional ao tornar o desenvolvimen-
to varietal um procedimento com re-
sultados previsveis. Com a engenha-
ria gentica, possvel transferir genes
especficos de uma espcie doadora
para a receptora, de forma controlada.
O ser humano, as plantas e de-
mais seres vivos so constitudos por
molculas que contm carbono, hidro-
gnio, oxignio, nitrognio, fsforo e
enxofre, alm de outros elementos
em diferentes propores. Os seres
vivos so constitudos de protenas, as
quais executam a maior parte das
funes celulares e so responsveis
por vias metablicas. Estas vias geram
todos os produtos orgnicos secund-
rios, como carboidratos e lipdios, com-
ponentes dos tecidos nos animais, da
celulose nas plantas etc.
A biotecnologia opera em nvel
mol ecul ar, onde as barrei ras
estabelecidas na formao das espci-
es desaparecem; isso possvel por-
que todos os seres vivos possuem o
DNA como molcula fundamental
portadora da informao gnica e com-
partilham o mesmo cdigo gentico,
que codifica e determina as protenas
dos homens, dos animais, das plantas,
dos insetos e microrganismos. Esse
cdigo simplesmente transforma a
seqncia dos nucleotdeos no DNA
(A, C, G ou T) em seqncias de
aminocidos, que constituem as pro-
tenas. Cada protena derivada, por-
tanto, da transcrio e traduo de um
gene. O conjunto de vrios genes em
uma mesma molcula de DNA forma
o cromossomo. Finalmente, cada es-
pcie tem um genoma prprio, com-
posto de todos os seus genes organi-
zados nos cromossomos, cujo nmero
varia com as espcies.
Uma das caractersticas da
biotecnologia que tm contribudo para
o receio que muitos manifestam em
relao a ela a velocidade como esta
cincia evoluiu nos ltimos anos e
como sua aplicao em benefcio da
sociedade atingiu o mercado de forma
to inesperada.
A cincia que est surpreendendo at os mais otimistas
Quando a biotecnologia passou a
ocupar a ateno dos cientistas e dos
leigos de forma intensa, a partir dos
anos 80, a maioria das pessoas se
sentia desconfortvel com ela.
Freqentemente se escutavam deba-
tes sobre a possibilidade de a
biotecnologia resolver todos os pro-
blemas da produo de alimentos.
Lamentavelmente, a forma e a rapidez
como a biotecnologia apareceu no
meio cientfico levaram muitos dos
que estavam trabalhando h anos para
resolver os problemas da agricultura a
uma situao desconfortvel. Em de-
terminada ocasio, chegou-se a pen-
sar que a biotecnologia, uma cincia
emergente, fosse substituir o melhora-
mento gentico clssico, uma cincia
que produziu variedades de milho,
arroz, laranja, rosas etc. e novas linha-
gens de sunos, aves etc., contribuindo
para a maior oferta de produtos
agropecurios. Essa jamais seria uma
boa notcia para aqueles que j haviam
dedicado grande parte de sua vida
profissional ao desenvolvimento de
variedades melhoradas ou daqueles
que tinham concludo cursos de gradu-
ao, mestrado ou doutorado em ge-
ntica clssica. A falta de marketing da
biotecnologia em muito contribuiu para
uma postura de reserva de muitos em
relao a ela. Felizmente, hoje, deba-
tes sobre a ameaa de o melhoramen-
to molecular substituir o melhoramen-
to clssico so anacrnicos; atualmen-
te, essas duas cincias so vistas como
complementares.
A biotecnologia anterior
ao sculo XXI
Embora os microrganismos fos-
sem utilizados na produo de vinhos
desde a mais remota histria, foi a
Meio ambiente
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 11
descoberta das clulas em um pedao
de cortia por Robert Hooke, em 1665,
que desencadeou a onda de descober-
tas e invenes em biologia. Cerca de
10 anos mais tarde, Anton van
Leeuwenhoek construiu um micros-
cpio com capacidade de ampliao
de 270 vezes, o que o permitiu ver,
pela primeira vez, os microrganismos.
O microscpio descortinou um novo
mundo, anteriormente invisvel ao
homem.
Somente 170 anos mais tarde que
Matthias Schleiden e Theodore
Schwann lanaram a teoria de que
todos os organismos vivos so consti-
tudos de clulas. Novas questes su-
giram diante dos recentes conheci-
mentos, incentivando os cientistas a
questionar por que os filhos tendem a
apresentar caractersticas semelhan-
tes s dos pais. Foi somente no final do
sculo XIX que o monge Gregor
Mendel, que trabalhava em Brno, Re-
pblica Tcheca, conseguiu desvendar
os segredos da hereditariedade. Os
cruzamentos de ervilhas com diferen-
tes cores de flores realizados por
Mendel, em 1865, criaram uma nova
cincia: a gentica.
No Quadro 1 apresentam-se o
nmero tpico de cromossomos e es-
timativas do tamanho do genoma e do
nmero de genes em diferentes esp-
cies.
O ano de 1953 foi um marco para
a gentica, com a descoberta da estru-
tura helicoidal do DNA por dois cien-
tistas da Universidade de Cambridge,
Inglaterra: o americano James Watson
e o ingls Francis Crick. Os trabalhos
de ambos revolucionaram a gentica e
aceleraram as descobertas da estrutura
fina do DNA. Eles demonstraram que
a dupla hlice se constitua de duas
fitas pareadas, cada uma com sua se-
qncia de nucleotdeos, complemen-
tar a outra, isto , na posio onde
havia um A na primeira, aparecia um T
na segunda, e onde havia um G apa-
recia um C, e vice-versa.
A Era da Engenharia Gentica
comeou com a primeira transforma-
o gnica obtida com sucesso em
1973, realizada por Hebert Boyer e
Stanley Cohen na Califrnia. Estes
cientitas construram um gene com
parte do DNA bacteriano e parte do
DNA de sapo (Xenopus laevis). A
experincia destes pesquisadores abriu
as portas para uma nova forma de se
fazer o melhoramento gentico e de-
senvolvimento de variedades.
O melhoramento
gentico convencional
Nos primrdios da agricultura,
quando os agricultores iniciaram a
domesticao das espcies, selecio-
nando os tipos mais desejveis, o me-
lhoramento realizado subjetivamente
resultou nas primeiras alteraes
genotpicas direcionadas. Os resulta-
dos desses esforos primitivos contri-
buram, de forma decisiva, para o pro-
cesso evolucionrio das espcies cul-
tivadas. Com a descoberta do sexo no
reino vegetal, a hibridao de tipos
diferentes foi incorporada s tcnicas
de melhoramento. Todavia, foram os
clssicos experimentos de Gregor
Mendel que forneceram as bases para
o entendimento e a manipulao da
hereditariedade, visando ao melhora-
mento e desenvolvimento de novas
variedades. Ainda hoje, alguns
melhoristas acreditam que o melhora-
mento depende quase que exclusiva-
mente da habilidade do cientista em
detectar diferenas que possam ter
importncia econmica. Muitos dos
primeiros melhoristas eram agriculto-
res com aguado instinto de observa-
o que, ao detectarem plantas atpicas
em um campo, colhiam-nas para ob-
teno de sementes. Atualmente, com
o avano do conhecimento em gen-
tica, fisiologia, estatstica, botnica,
agronomia e outras reas, o melhora-
mento de plantas tem-se tornado mais
cincia que propriamente arte.
Quando se pensa no aumento da
produo de alimentos, isso pode ocor-
rer de trs maneiras: pela expanso da
rea cultivada, item em que o Brasil se
sobressai por ter ainda diversas fron-
teiras agricultveis. Todavia, essas re-
as so limitadas e, no futuro, no esta-
ro mais disponveis. Por absoluto im-
perativo de sobrevivncia, agriculto-
res chineses tm avanado em
ecossistemas frgeis e em reservas
biolgicas, com irreparveis danos eco-
lgicos. A expanso da rea cultivada
no deve ser considerada, em muitos
casos, a alternativa de aumento da
produo de alimentos. Uma segunda
maneira de se aumentar a produo
de alimentos por meio da melhoria
das condies do ambiente, como adu-
bao, prticas culturais corretas, con-
trole de pragas e doenas, uso de
sementes de qualidade, irrigao etc.
A terceira maneira por meio do
melhoramento gentico das plantas.
Algumas das caractersticas
freqentemente consideradas em di-
versos programas de melhoramento
so: aumento de produtividade, resis-
tncia s pragas e doenas e qualidade
nutricional dos alimentos, dentre ou-
tras.
A resistncia s pragas e doenas
tem sido um dos principais alvos do
melhoramento gentico convencio-
nal. Por exemplo, o Centro Internaci-
onal de Agricultura Tropical (CIAT)
desenvolveu, pelo melhoramento cls-
sico, variedades de feijo resistentes
aos carunchos (bruqudeos), com a
introduo do gene que codifica para
a protena arcelina, que letal a esses
insetos, porm incua ao homem e
aos demais animais.
Alguns acreditam que os alimen-
tos atualmente disponveis foram en-
contrados na natureza pelo homem da
forma que hoje so conhecidos. O
Quadro 1. Algumas caractersticas genticas de diferentes espcies
e i c p s E
e d o r e m N
s o m o s s o m o r c
o d o h n a m a T
) b M ( a m o n e g
o r e m N
s e n e g e d
m e m o H 6 4 0 0 0 . 3 0 0 0 . 4 2
o g i r T 2 4 0 0 0 . 6 1 0 0 0 . 5 7 - 0 5
o h l i M 0 2 0 0 5 . 2 0 0 0 . 0 5
a j o S 0 4 0 0 1 . 1 -
z o r r A 4 2 0 3 4 0 0 0 . 5 2
s i s p o d i b a r A 5 5 2 1 0 0 0 . 6 2
12 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
feijo que se consome, o milho que se
utiliza na alimentao humana e ani-
mal so completamente diferentes
daqueles que os antepassados utiliza-
vam. Os feijes silvestres domestica-
dos pelo homem nos ltimos 12.000
anos, e que hoje ainda existem no
Mxico e em alguns pases andinos,
so completamente diferentes dos atu-
ais. Com sementes menores que as de
mamo, de difcil coco, baixa
di gesti bi l i dade e com sabor
adstringente, o feijo silvestre foi ge-
neticamente modificado pelos agri-
cultores primitivos, de forma que hoje
se dispe de variedades com gros
grandes, de fcil coco e com boa
digestibilidade. O ancestral do milho,
o teosinto, foi tambm modificado
pelo homem ao longo dos milnios,
dando origem ao milho moderno. Foi
a engenhosidade humana, trabalhan-
do-se os princpios da gentica, de
forma inconsciente, que resultou nas
espcies agronmicas hoje utilizadas.
Com a descoberta das leis da
gentica por Mendel, publicadas em
1865, o homem passou a ter acesso a
um conhecimento que lhe permitiria
a modificao gentica das espcies
de forma mais precisa e rpida. En-
tretanto, Mendel foi ignorado por
seus contemporneos e seus escri-
tos permaneceram inutilizados por
35 anos, at que em 1900 as Leis da
Gentica foram redescobertas e a
modificao gentica das plantas
pde ser realizada de forma cientfi-
ca. Nascia ento o melhoramento
gentico das plantas, mostrando que
Mendel estava certo!
At cerca de 30 anos atrs, o
Brasil no figurava nas estatsticas da
produo mundial de soja. Hoje, o
Pas o segundo maior produtor do
mundo, com produtividade superior
a 2.400 kg/ha (comparvel dos
Estados Unidos principal produtor
mundial). Foi o melhoramento ge-
ntico que, ao desenvolver varieda-
des mais produtivas e resistentes s
pragas e doenas, permitiu que a
soja pudesse ser cultivada de norte a
sul do Pas.
A ma talvez seja um dos exem-
plos mais facilmente perceptveis da
contribuio do melhoramento de
plantas para a disponibilizao de
alimentos no Brasil. Quem no se
lembra de, ao comprar mas, encon-
trar apenas as importadas e de custo
elevado at cerca de 25 anos atrs? O
primeiro trabalho de melhoramento
em macieiras no Brasil foi feito em
1940, pelo agricultor paulista A.
Bruckner, que selecionou a primeira
variedade nacional dessa fruteira. Des-
de ento, inmeras outras variedades
foram desenvolvidas, o que vem ga-
rantindo o abastecimento do mercado
brasileiro com mas de excelente
qualidade: frutos vermelhos, suculen-
tos, firmes e de preo acessvel.
Melhoramento gentico
biotecnolgico
O conhecimento cientfico conti-
nuou evoluindo desde Mendel e a
gentica clssica passou a contar com
recursos ainda mais modernos, dando
origem gentica molecular, nova
cincia dentro da biotecnologia.
O domnio da biotecnologia tem
levado algumas pessoas a pensar que
os cientistas esto brincando de ser
Deus ao desenvolverem novas varie-
dades. A modificao gentica das
espcies, tornando-as mais teis ao
homem, no uma prtica dos tem-
pos modernos. A inteligncia humana
vem sendo utilizada para modificar
geneticamente as espcies desde a
mais remota antiguidade. Naquela
poca, o homem utilizava os conheci-
mentos pr-mendelianos. Hoje utiliza
todo o conhecimento gerado ao longo
da histria. Essa a tendncia natural
da evoluo do conhecimento cient-
fico.
No per odo em que a
biotecnologia dava seus primeiros pas-
sos, os meios de comunicao devota-
ram-lhe exagerada ateno. O interes-
se pelo assunto cresceu de forma
inacreditvel, e tanto pessoas informa-
das quanto leigas passaram a especu-
lar sobre as aplicaes da biotecnologia,
gerando expectativas que no se con-
cretizaram no tempo previsto.
Aps alguns anos de investimen-
to em pesquisas biotecnolgicas, as
variedades transgnicas tornaram-se
comercialmente disponveis. Seus be-
nefcios no aumento da produo de
alimentos e na reduo do uso de
defensivos agrcolas j podem ser ava-
liados.
Bibliografia
Alcamo, E. 1999. DNA technology: the
awesome skill. New York: Hard-
court Academic Press. 348 p.
Borm, A. 2005. Biotecnologia e meio
ambiente. Viosa, MG: UFV. 1. ed.
425 p.
Borm, A. 1999. Melhoramento de
espcies cultivadas. 1. ed. Viosa,
MG: UFV.
Borm, A. 2001. Escape gnico e trans-
gnicos. Visconde do Rio Branco,
MG: Editora Suprema. 206 p.
Borm, A. 2001. Melhoramento de
plantas. Viosa, MG: UFV. 3. ed. 500
p.
Borm, A. e Santos, F.R. 2002. Biotec-
nologia simplificada. Visconde do
Rio Branco, MG: Editora: Suprema.
249 p.
Costa, N.M.B. e Borm, A. 2003. Bio-
tecnologia e nutrio. So Paulo:
Editora Nobel. 214 p.
Canadian Food Information Council.
2002. Articles on agri-food biotech-
nology: (1) What about antibiotic
resistance marker genes? (2) What
about food safety and allergens? (3)
What about substantial equivalence?
Drlica, K. 1996. Understanding DNA
and gene cloning: a guide for the
curious. 3. ed. New York: John Wiley
& Sons. 323 p.
International Food Biotechnology
Council. 1996. Allergenicity of foods
produced by genetic modification
In: E. Clydesdale (ed.). Critical Revi-
ews in Food Science and Nutrition.
v. 36. New York: CRC Press.
International Food Information Coun-
cil. 1997. Food allergy myths and
realities. http://www.ificinfo.health.orh/
insight/novdec97/foodallergy.htm
Lewin, B. 1999. Genes VII. Oxford:
Oxford Univ Press. 847 p.
Messina, L. 2000. Biotechnology. New
York: Wilson, H.W. 186 p.
Perelman, C. 1999. tica e direito. So
Paulo: Editora Martins Fontes. 322 p.
Varella, M.D., Fontes, E. e Rocha, F.G.
1999. Biossegurana e biodiversida-
de Contexto cientfico e regula-
mentar. Belo Horizonte: Editora Del
Rey. 301 p.
Watson, J.D., Gilman, M. e Witkowski,
J. 1992. Recombinant DNA. 2. ed.
New York: W H Freeman & Co.
Press. 626 p.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 13
BIOINDICADORES PARA UMA ANLISE DE
RISCO AMBIENTAL
Pesquisa
Galdino Andrade
Bilogo, Doutor, Professor da Universidade Estadual
de Londrina, CCB, Departamento de Microbiologia
Laboratrio de Ecologia Microbiana,
Londrina, PR.
andradeg@uel.br
Marco Antonio Nogueira
Engenheiro-Agrnomo, Doutor, Professor da
Universidade Estadual de Londrina
1. Introduo
necessidade de alimentar
a populao mundial em
crescente aumento faz
com que novas tecno-
logias e tcnicas de culti-
vo sejam empregadas, muitas das
quais eram utpicas para o homem
h no mais que duas dcadas. Nesse
cenrio esto as plantas e microrga-
nismos geneticamente modificados,
ou simplesmente organismos gene-
ticamente modificados (OGMs). Se
por um lado seus defensores vislum-
bram uma forma de produo agr-
cola e defesa das culturas quanto a
pragas, doenas e plantas concor-
rentes de uma forma totalmente in-
dita, por outro, muito pouco se sabe
sobre seus efeitos em longo prazo
no ambiente. Os possveis riscos
ambientais em decorrncia de seus
(possveis?) efeitos colaterais, so-
mente as pesquisas podero respon-
der. Afirmaes calorosas pr ou
contra, sem embasamento cientfi-
co, so apenas especulaes que
no contribuem em nenhum sentido
para o desafio da produo de ali-
mentos para uma populao cada
vez maior, num planeta cada vez
mais escasso de recursos naturais
que precisam ser conservados.
O desenvolvimento e o uso
de plantas geneticamente modifica-
das (PGMs) polmico e o debate
pblico intenso. O uso de PGMs na
produo agrcola pode ter um gran-
de potencial para a melhora dos
nveis nutricionais dos alimentos ou
na proteo do solo devido produ-
o de maior quantidade de matria
orgnica, de cidos orgnicos na
rizosfera, que podem melhorar as
qualidades fsicas, qumicas e biol-
gicas do solo, bem como promover a
obteno mais eficiente de nutrien-
tes do solo pelas razes das plantas.
Neste artigo ser abordado o efeito
que as PGMs podem ter sobre as
comunidades microbianas do solo e
o meio ambiente.
2. O Solo
Quando se fala em meio ambi-
ente, impossvel dissociar os ambi-
entes terrestres do solo e dos orga-
nismos que nele habitam. Os proces-
sos pedogenticos envolvem com-
plexas interaes fsicas, qumicas e
biolgicas que dependem do mate-
rial de origem, da topografia, do
clima e da ao de organismos vivos.
Os primeiros organismos habitantes
do solo em formao so as algas,
que alm de realizarem fotossntese
tambm fixam nitrognio atmosfri-
co. Quanto associadas a determina-
dos fungos formam os liquens, os
quais constituem as primeiras fontes
de carbono orgnico e de nitrognio
no solo em formao, o que possibi-
lita o estabelecimento de outros mi-
crorganismos e plantas (Figura 1). O
estabelecimento de outros micror-
ganismos, incrementa a produo de
CO
2
, o qual convertido em cido
carbnico (H
2
CO
3
) e atua na dissolu-
o dos minerais, contribuindo ainda
mais para a formao do solo. Alm
disso, muitos microrganismos produ-
zem cidos orgnicos, que tambm
atuam nesse processo.
Alm de ser a base de sustenta-
o fsica para as plantas, o solo a
fonte dos nutrientes essenciais para
Imagens cedidas pelos autores
Organismos geneticamente modificados e grupos funcionais de microrganismos do solo
Meio ambiente
14 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
o desenvolvimento vegetal. Com o
estabelecimento dos vegetais supe-
riores nesse ambiente, surge uma
importante zona ao redor de suas
razes, a rizosfera, a qual ser aborda-
da mais detalhadamente neste arti-
go. Nessa complexa interao entre
vegetais, animais e minerais, os mi-
crorganismos desempenham um
papel essencial no funcionamento
dos ecossistemas pelo seu papel
f undament al nos ci cl os bi o-
geoqumicos, que compreendem a
ciclagem de nutrientes e do carbono.
A frao orgnica do solo, com-
posta por restos vegetais, animais e
microbianos em diversos estgios de
decomposio e sntese microbiana,
chamada hmus, a poro estvel
da matria orgnica do solo. Ele o
reservatrio de energia para micror-
ganismos e nutrientes para plantas e
microrganismos, alm de desempe-
nhar importante papel na estabilida-
de de agregados do solo e reteno
de gua. Alm disso, gua e gases
tambm ocupam a poro porosa do
solo. A interao entre esses fatores
fsicos e qumicos resulta na diversi-
dade de habitats que se formam no
solo, o que determina a composio
e a atividade da comunidade
microbiana do solo num determina-
do local e tempo.
Depois da rizosfera, os locais de
maior atividade microbiana so as
superfcies das partculas de solo e
os microporos, formando diversos
microhabitats. Mesmo um nico
microagregado de solo pode apre-
sentar diversos microambientes e,
conseqentemente, hospedar uma
gama diversificada de microrganis-
mos (Figura 2). As condies fsico-
qumicas em um microhabitat po-
dem mudar rapidamente no tempo
e no espao; a concentrao de O
2
representada na Figura 2 apenas
uma representao instantnea e
pode mudar drasticamente em fun-
o da atividade microbiana e da
umidade do solo.
Razes de plantas, microrganis-
mos e animais que compem a co-
munidade biolgica do solo produ-
zem enzimas intra e extracelulares
que tm grande participao nos
ciclos biogeoqumicos. Essas enzimas
podem continuar ativas por longo
tempo aps terem sido liberadas no
solo, desempenhando sua atividade
de acordo com sua especificidade. A
razo pela longa viabilidade no am-
biente reside no fato de que essas
enzimas interagem com as superfci-
es carregadas dos colides do solo,
orgnicos e minerais, onde perma-
necem protegidas da ao de
proteases, mas ainda mantm sua
capacidade cataltica.
2.1 OGMs e comunidade
microbiana do solo
As alteraes genticas de
plantas representam uma das reas
de mais rpido desenvolvimento
Figura 1. Liquens colonizando um afloramento de rocha, propiciando o
estabelecimento de outros (micro)organismos que aturaro nas etapas iniciais
de formao do solo
1 a l e b a T s p a s o d a c i f i d o m e t n e m a c i t e n e g s o m s i n a g r o r c i m e d o c e t e d e d s o d o t M .
. o l o s o n o a r e b i l a u s
s o v i t a r t x e s o d o t M
u t i s n i s o d o t M r a l u l e c o c e t e D
o c e t e D
a c i t n e g
a t e r i d a i p o c s o r c i M -
s a r t u o , a i c n c s e r o u l f o n u m i (
, s a c i f c e p s e s e a r o l o c
) a i c n c s e n i m u l o i b
s a c a l p m e m e g a t n o C -
s i a m o r e m n o l e p a v i t a m i t s E -
l e v v o r p
s o c i g l o n u m i s o d o t M -
o x u l f e d a i r t e m o t i C -
e d a d i n i f a e d o a r t n e c n o C -
m e s a d a e s a b s a c i n c T -
a i c n c s e n i m u l
e d o a c i f i l p m A -
R C P r o p s e n e g
o t n e m a i c n e q e S -
e d o t n e m a e p a m e
s e n e g
e d s e s i l n A -
A N R
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 15
dentro da biotecnologia. Essas alte-
raes tm vrios objetivos, tais como
o aumento da resistncia de plantas
a fungos, vrus, insetos, congelamen-
to, herbicidas e mesmo para aumen-
tar a eficincia fotossinttica das plan-
tas com conseqente aumento da
quantidade de CO
2
fixado. No
difcil concluir que qualquer modifi-
cao gentica que altere a fisiologia
da planta tambm alterar a comuni-
dade microbiana no solo em que
essa planta for cultivada, visto que,
em ltima anlise, os microrganis-
mos heterotrficos do solo tm sua
atividade dependente dos produto-
res primrios de substrato para ob-
teno de energia, as plantas. Essa
alterao dever ser mais evidente
na rizosfera, mas tambm dever ser
percebida nos demais microhabitats
do solo.
Alm das alteraes genticas
de plantas, tambm existe potencial
de uso dessa tecnologia em micror-
ganismos, principalmente simbiontes
ou promotores de crescimento de
plantas. A introduo de uma planta
geneticamente modificada no ambi-
ente pode ser menos problemtica
que a introduo de um microrganis-
mo, pois estes quando introduzidos
ao solo e sendo estranhos quele
ambiente, precisam ser hbeis em
competir com os microrganismos
nativos por nichos especficos. Por
outro lado, qualquer risco associado
a organismos geneticamente modifi-
cados no ambiente so mais previs-
veis e mais facilmente controlveis
quando se empregam plantas em
comparao com microrganismos,
porque o gene do microrganismo
engenheirado pode ser transferido
para outros grupos microbianos do
solo por meio de recombinao ge-
ntica.
No caso de microrganismos
simbiontes como os rizbios, seja
qual for o mecanismo de alterao
gentica, o objetivo final o aumen-
to dos nveis de produtividade da
cultura a se beneficiar da interao
microbiana, quer seja por meio do
aumento da eficincia do simbionte
na associao com a planta ou pelo
aumento de sua competitividade no
solo. Esse ltimo caso pode ser al-
canado pela manipulao gentica
do prprio rizbio ou ainda por uma
estratgia indireta de co-inoculao
do rizbio com bactrias produtoras
de antibiticos para aumentar a colo-
ni zao e a nodul ao das
leguminosas. No caso de introduo
de genes de resistncia a antibiti-
cos, bem como a co-inoculao com
bactrias j resistentes, possvel
que haja efeitos sobre a comunidade
microbiana do solo, j que as bact-
rias modificadas tero um mecanis-
mo a mais para competir por um
nicho com os microrganismos nati-
vos. Caso esses microrganismos nati-
vos desempenhem um papel im-
portante nos ciclos biogeoqumicos,
este poder deixar de ocorrer em
sua plenitude, comprometendo a fun-
cionalidade daquele ecossistema.
O desenvolvimento biotecno-
lgico de plantas e microrganismos
geneticamente modificados, embo-
ra possa trazer muitos benefcios para
a agricultura ou para outras aplica-
es, como a biorremediao, pode
ter efeitos ambientais adversos. To-
dos esses possveis efeitos devem
ser avaliados, de preferncia em con-
dies controladas, antes que seja
feita qualquer introduo desses or-
ganismos no ambiente.
2.2 Estratgias de
monitoramento dos efeitos
de OGMs no ambiente
Os efeitos de plantas e mi-
crorganismos geneticamente modi-
ficados no ambiente podem ser
monitorados por meio de vrias es-
tratgias, cada qual dependendo do
gene inserido e do organismo envol-
vido. A competio (persistncia e
invaso de comunidades indgenas),
patogenicidade e toxicidade a orga-
nismos no-alvo, transferncia de
genes a organismos indgenas e a
disperso para alm do ambiente
alvo, devem ser avaliados em condi-
es controladas antes que se faa o
uso desses organismos modificados
em ambiente aberto. As tcnicas ne-
cessrias para se fazer tais avaliaes
so bem definidas no caso de plantas
em comparao a microrganismos. A
avaliao de determinados grupos
microbianos que desempenham fun-
es especficas no solo, os chama-
D
i
s
t

n
c
i
a
(
m
m
)
Distncia(mm)
Figura 2. Diagrama ilustrando as concentraes (%) de O
2
ao redor de uma
partcula de solo. Em termos de exigncias de O
2
para diversos grupos
microbianos, pode-se dizer que cada regio delimitada por uma isolinha
representa um microhabitat.
16 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
dos grupos funcionais, pode ser uma
ferramenta til para avaliar o efeito
de organismos geneticamente modi-
ficados no ambiente solo, visto que
esses grupos so bastante sensveis
a alteraes ambientais, podendo ser
utilizados como indicadores. Os gru-
pos funcionais de microrganismos
do solo sero abordados com mais
detalhes neste artigo.
A deteco e monitoramento
de microrganismos geneticamente
modificados no solo podem ser fei-
tos por tcnicas que envolvem ex-
trao ou ainda in situ (Tabela 1).
As tcnicas ideais de deteco
e monitoramento de organismos
geneticamente modificados seriam
aquelas que pudessem identificar
uma nica clula in situ, avaliar sua
atividade e facilitar o rastreamento
do gene em questo. Uma estratgia
utilizada envolve a clonagem de
genes lux provenientes de vibries
marinhos em organismos carregando
algum gene estranho de interesse.
Dessa forma, poder-se- obter a ima-
gem da clula modificada, bem como
a sua atividade metablica, que ser
proporcional bioluminescncia ca-
talisada pela enzima luciferase. O
marcador envolvendo bioluminescn-
cia tem a vantagem de no trazer
consigo preocupaes ambientais
adicionais associadas aos marcadores
para resistncia a antibiticos, utili-
zados em muitas situaes.
2.3 OGMs no ambiente
A sobrevivncia e disperso de
microrganismos geneticamente mo-
di fi cados dependero da sua
interao com a biota nativa do solo
(plantas, microrganismos e animais)
bem como com as caractersticas
fsico-qumicas do solo em questo.
Microrganismos exgenos, quando
adicionados ao solo, geralmente tm
baixa sobrevivncia devido sua
incapacidade de habitar um ambien-
te distinto, ou ainda competir com os
microrganismos nativos, j adapta-
dos quele ambiente. Por exemplo,
se um microrganismo geneticamen-
te modificado introduzido num
solo mido, as clulas se localizaro
predominantemente na soluo do
solo. Nessas condies, essas clulas
sero alvo fcil para protozorios
que se alimentam de bactrias, dimi-
nuindo rapidamente o nmero de
cl ul as das bact r i as r ecm
introduzidas. No que se refere dis-
perso de microrganismos, o poten-
cial de gua no solo desempenha
importante papel, pois a maior parte
do movimento de clulas microbianas
est restrita a perodos aps ocorrn-
cia de chuvas ou irrigao, quando a
maior parte dos macroporos do solo
est cheia de gua, que se movimen-
ta por drenagem ao longo do perfil
ou mesmo por movimento lateral,
caso haja um gradiente de potencial
de gua no solo em determinado
sentido. Outro fator que pode cola-
borar na disperso de microrganis-
mos geneticamente modificados no
solo a ao de minhocas e
protozorios, ingerindo microrganis-
mos num ponto e evacuando em
outro.
Alguns autores defendem que
a liberao de microrganismos gene-
ticamente modificados no ambiente
no afetaria a integridade funcional
do solo, uma vez que as diferenas
entre os microrganismos selvagens e
os modificados so muito sutis: ape-
nas um ou dois genes so inseridos
ou deletados entre milhares, a no
ser nos casos em que a
patogenicidade do microrganismo
seja alterada. Assim como os efeitos
de pesticidas e outros qumicos so-
bre processos e integridade funcio-
nal do solo so avaliados, o mesmo
deve ser feito para os organismos
geneticamente modificados e para
isso os bioindicadores com alta sen-
sibilidade devero ser empregados.
Entre eles, podem ser citados os
grupos funcionais de microrganis-
mos do solo envolvidos nos ciclos do
carbono, nitrognio e fsforo.
Uma estratgia para minimizar
os efeitos da introduo de micror-
Figura 3. Rizosfera. Os microrganismos crescem ao
redor da raiz (Ra) formando a rizosfera (Ri).
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 17
ganismos geneticamente modifica-
dos no solo pode ser a limitao de
sua persistncia por meio da inser-
o de genes suicidas, os quais so
acionados sob determinada situao
ambiental, levando as clulas que os
contm morte. Entretanto, h que
se consi der ar a quest o da
recombinao gentica entre micror-
ganismos, os quais podem incorporar
fragmentos de DNA das clulas mor-
tas.
3. Rizosfera
A maior parte da atividade
microbiana do solo est localizada
principalmente em uma zona do solo
que est em ntimo contato com a
superfcie das razes que chamada
de rizosfera (Figura 3). Nesta zona
ocorrem inmeros processos de
interao entre os diferentes grupos
de macro e microrganismos e a
planta.
Como pode ser visto na Figura 3,
uma comunidade microbiana se es-
tabelece ao redor das razes at onde
a concentrao de nutrientes libera-
da pel os exsudatos e l i satos
radiculares suficiente para supor-
tar seu crescimento. A rizosfera
uma fronteira ainda inexplorada para
a engenharia gentica. Os processos
que ocorrem nesta zona do solo
influenciam a incidncia de doenas
das plantas e a sua nutrio, por sua
vez, as razes influenciam a dinmica
e a composio das comunidades
mi cr obi anas qual i t at i va e
quantitativamente.
Por estas razes, os microrga-
nismos rizosfricos so excelentes
bio-indicadores para avaliar qualquer
alterao benfica ou malfica que
possa ocorrer no solo. As PGMs de-
vido introduo de novos genes
podem expressar protenas ou pro-
dutos do metabolismo que segura-
ment e sero l i berados pel os
exsudatos ou lisatos radiculares; o
efeito benfico ou malfico destes
produtos no meio ambiente pode
ser avaliado pelas alteraes que
ocor r em nas comuni dades
microbianas que vivem na rizosfera
(Figura 4).
Por outro lado, as PGMs podem
tambm alterar qualitativamente mi-
crorganismos benficos da rizosfera,
resultado da composio dos seus
exsudatos. Uma PGM poderia ter
maior resistncia a fitopatgenos ou
pragas por conter nos seus exsudatos
compostos que estimulam popula-
es de microrganismos antagonis-
tas destes patgenos ou pragas. Tam-
bm poderiam ser estimulados ou-
tros grupos de microrganismos que
participam ativamente da nutrio
das plantas como as bactrias
fixadoras de nitrognio e fungos
micorrzicos arbusculares (MA)
4. Grupos funcionais
de microrganismos
A ecologia do solo tem muito
para contribuir na compreenso dos
importantes processos que ocorrem
em diferentes nveis do ecossistema
que afetam o crescimento da planta
tais como a microbiota da rizosfera, a
dinmica da matria orgnica, a
ciclagem de nutrientes e a estrutura
do solo. A proposta discutir o papel
dos grupos funcionais de microrga-
nismos que vivem na rizosfera e
participam da ciclagem de nutrien-
tes e sua importncia como bio-
indicadores da sade do solo ou de
distrbios que podem ocorrer devi-
do ao antrpica.
Muitos destes grupos atuam
diretamente na nutrio da planta,
como os rizbios e os fungos
micorrzicos que so microrganismos
simbiticos. Nas dcadas anteriores,
estes grupos foram estudados ex-
tensivamente, mas muito pouco foi
feito com relao s interaes com
outros grupos de microrganismos fun-
cionais, esquecendo-se que no siste-
ma rizosfrico existem muitas outras
interaes que possuem grande im-
portncia ecolgica para a manuten-
o da vida no planeta e conseqen-
temente no solo, j que este parte
de um todo.
Muitas etapas da ciclagem de
Figura 4. Possveis alteraes que as PGMs podem causar na comunidade
microbiana da rizosfera.
18 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
nutrientes so realizadas exclusiva-
mente por microrganismos, sendo
que alguns podem participar de um
ou mais ciclos biogeoqumicos. A
compreenso das interaes entre
diferentes populaes de acordo com
fentipos especficos pode nos dar
uma maior viso dos processos que
esto ocorrendo no solo. Agrupar as
comunidades microbianas por
fentipos mais realstico do que
determinar as espcies que esto
envolvidas nos processos. certo
que somente uma pequena porcen-
tagem da comunidade microbiana
capaz de crescer em meio de cultu-
ra, mas mesmo assim se considerar-
mos que temos uma amostra da co-
munidade microbiana, podemos ob-
ter dados de qualidade para o
monitoramento dos efeitos de pro-
dutos qumicos ou biolgicos e seu
impacto ambiental e os eventuais
efeitos na ciclagem de nutrientes e
na fertilidade do solo.
Os aspectos da funcionalida-
de so muito mais importantes do
que a biodiversidade nos sistemas
naturais e agrcolas. Algumas ques-
tes podem ser levantadas com rela-
o biodiversidade. A primeira
pergunta que devemos fazer : O
que mais importante para o
ecossistema: o nmero de espcies
que compe um grupo funcional ou
o potencial de transformao que
possui este grupo? Por outro lado,
algumas questes podem ser levan-
tadas como: Dentro da dinmica bi-
olgica o que representa uma esp-
cie no sistema? Qual a importncia
que uma espcie pode ter na
ciclagem de nutrientes? Estas per-
guntas podem nos levar a concluir
que precisamos comear a rever nos-
sa viso em relao ao microcosmo
do solo. Devemos ampliar a com-
preenso dos processos biolgicos
que ocorrem no sistema solo-planta,
assumindo estes processos como um
todo, e cada grupo funcional como
uma frao deste todo. Somente as-
Figura 5. Esquema simplificado da cadeia
alimentar e os diferentes nveis trficos que
ocorrem no solo
Figura 6. A partir de uma clula formada uma populao
Parte area da planta
Razes
Matria orgnica
Nematides
predadores de
plantas
Fungos
micorrzicos
Fungos
sapfritas
Bactria
Cupins
predadores de
fungos
Cupins
Colembola
Nematides
predadores de
fungos
Nematides
predadores de
bactria
Flagelados
Amebas
Ciliados
Nematides
predadores
Indivduo
Populao
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 19
sim, vamos poder determinar o im-
pacto ambiental ou a influncia das
PGMs sobre as comunidades de mi-
crorganismos do solo, no apenas
sobre um grupo funcional. tam-
bm necessrio fazer uma avaliao
dos diversos grupos funcionais que
participam de diferentes etapas dos
ciclos biogeoqumicos do carbono,
fsforo, enxofre e nitrognio, bus-
cando as correlaes entre eles.
Os grupos funcionais tambm
esto diretamente relacionados com
a cadeia alimentar do solo (Figura 5),
que mantida pelo equilbrio da
interaes entre a parte bitica (mi-
crorganismos, macrorganismos e plan-
ta) e abitica (solo e gua) do solo.
Estas interaes entre os diferentes
nveis trficos so responsveis em
Figura 7. Vrias populaes de microrganismos podem participar de um ou mais
ciclos biogeoqumicos
grande parte pela sustentabilidade
do ecossistema.
A cadeia alimentar pode sofrer
grandes variaes tanto positivas
como negativas sob a influncia das
PGMs. Qualquer populao que for
afetada pode desequilibrar todo o
sistema. Em relao biodiversidade
da microbiota, esta importante para
outros objetivos, como na busca de
produtos especficos com uso po-
tencial na indstria. A importncia no
meio ambiente ainda deve ser
investigada, j que as tcnicas
moleculares utilizadas atualmente
no nos permitem avaliar os meca-
nismos de interao microbiana no
microcosmo do solo.
No solo, uma nica clula d
origem a uma populao (Figura 6).
Populaes metabolicamente seme-
lhantes formam grupos chamados de
funcionais, e esses grupos funcio-
nais, desempenhando processos fisi-
olgicos complementares e intera-
gem para formar comunidades mi-
crobianas. Por sua vez, essas comu-
nidades microbianas interagem com
comunidades de macrorganismos,
para definir o ecossistema em sua
plenitude.
Podemos definir grupos funcio-
nais como um grupo de populaes
de microrganismos que participa de
um mesmo processo de transforma-
o de um dado nutriente no solo,
sendo que uma mesma populao
de microrganismo pode participar
de uma etapa de um ou mais ciclos
bigeoqumicos (Figura 7). Como
exemplo, podemos citar o grupo
f unci onal de mi crorgani smos
celulolticos. Ao inocular uma sus-
penso de solo em uma placa de
Petri com meio seletivo para micror-
ganismos celulolticos, em que a nica
fonte de carbono a celulose, sero
observadas vrias colnias formado-
ras de halo de degradao compos-
tas por vrias espcies de fungos,
actinomicetos e bactrias, geralmen-
te nessa ordem numrica decrescen-
te.
A biodiversidade dos fungos,
actinomicetos e bactrias que for-
mam este grupo funcional so
parmetros secundrios, quando o
objeto de estudo avaliar a funcio-
nalidade do ciclo biogeoqumico.
Figura 8. A partir da introduo de novos genes, as PGMs poderiam ter uma
rizosfera engenheirada capaz de mediar as interaes microrbianas que benefi-
ciariam o meio ambiente, a nutrio e a sade da planta
20 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
5. A rizosfera de uma planta
geneticamente modificada
Como foi visto at o momento,
os microrganismos tambm atuam
na ci cl agem de nut ri ent es e
consequentemente na nutrio e sa-
de das plantas. Quando a comunida-
de microbiana na rizosfera das plan-
tas est em equilbrio, os grupos de
microrganismos interagindo entre si
participam em seu potencial mxi-
mo na nutrio e proteo da planta
e na sade do solo. Entretanto, esse
equilbrio pode ser rompido, princi-
palmente nos sistemas agrcolas in-
tensivos, devido a vrios fatores que
no sero abortados aqui.
Desde que Cohen & Boyer inici-
aram a era da modificao gentica
nos anos 70, a idia do uso de orga-
nismos geneticamente modificados
cercada de expectativas e apreen-
ses. A primeira planta modificada
foi obtida h mais de 15 anos, e
desde o incio inmeras tcnicas tm
sido desenvolvidas para a introduo
de vrios genes em um grande n-
mero de plantas. A maioria das plan-
2 a l e b a T ) 3 0 0 2 , . l a t e k u h c l a w o K ( o l o s o d a n a i b o r c i m e d a d i n u m o c a n s M G P s a s r e v i d e d o t i e f E .
M G P o a c i f i d o M o t i e f E
a f a f l A
e s a n i t i u q e ) 1 u l g A ( a d i c e s a n a c u l G
) 0 1 H C R ( z o r r a e d a c i s b
i o f o n e o a l u d o n a n s o t i e f e u o t n e s e r p a o N
s o c i n g o t a p o t i f s o g n u f s o a r a p o i r t e l e d
e a f l a f l a m u i l y h p m e t S u o i i l o f i r t m u h c i r t o t o e l l o C
a f a f l A e s a l i m a - z i a r a n s a i r t c a b e d e d a d i n u m o c a u o c i f i d o M
o d o g l A
o d a n i x o t o d n e a d o u d o r P s u l l i c a B
s i s n e i g n i r u h t r a v i k a t s r u k
s o g n u f e s a i r t c a b e d o a l u p o p a u o t n e m u A
a t a t a B 4 T a m i z o s i l e d o u d o r P
e d o a l u p o p a i u n i m i D s i l i t b u s s u l l i c a B s o n
a d a t o i b o r c i m a a i c n e u l f n i o n ; s e r a l u c i d a r s o l p
s a i r t c a b m e o t i e f e o d a v r e s b o i o f o n ; a r e f s o z i r
z i a r s a d a i c o s s a
a t a t a B r a t s n r a B / e s a n r a B e n e g e s u g
a e r b o s o p m e t x o a p s e o a r e t n i a n s o t i e f E
a n a i b o r c i m e d a d i n u m o c a d o i s o p m o c
a r i e r a c u a a b a r r e t e B
o a e a n i c i m a n a k a a i c n t s i s e R
a i n m a e d o t a n i s o f i l g
s o i r v r o p o d a r t n o c n e i o f o c i n g s n a r t A N D O
o p m a c o n o l o s o n s e s e m
a l o n a C
e a i n m a e d o t a n i s o f u l g o a a i c n r e l o T
e t a s o f i l g o a
s i f r e P ; s a n a i b o r c i m s e d a d i n u m o c s a n o t i e f e o x i a B
e d g o l o i B e E M A F o l e p s o d a i l a v a s o c i p t o n e f
m a r o f s o c i r f s o z i r e s o c i t f o d n e s o m s i n a g r o r c i m
a u i u n i m i D ; M G O o n e d a d e i r a v a d s e t n e r e f i d
s e z a r s a n s a c i t f o d n e s a i r t c a b e d e d a d i s r e v i d
a l u t a c n u r t o g a c i d e M
s e n e g o z i h r m u i r e t c a b o r g A
I I t p n e A s u G o d a m r o f s n a r t
m o c o a l u d o n a o b m a r e v i t s a d a m r o f s n a r t s e z a R
i t o l i l e m m u i b o z i h r o n i S m o c o a z i n o l o c a o b e
) A M ( r a l u c s u b r a a z i r r o c i m s e c i d a r a r t n i s u m o l G
o h l i M
e d ) b A 1 y r C ( a n i x o t o d n e o u d o r P . B
s i s n e i g n i i r u h t i k a t s r u k r a v
e t n e m a d i p a r s i a m a d a d a r g e d i o f M G P a d a n i n g i L
e d s e z e f s a n s a i r t c a b e d o a l u p o p a e
r e b a c s o i l l e c r o P a r e t B o h l i m m o c o d a t n e m i l a
e d s e z e f s a n e u q o d r o n e m % 0 6 r e b a c s . P
o d a v r e s b o i o f o N ; o d i r b h o h l i m m o c o d a t n e m i l a
, a c o h n i m e d s e a l u p o p s a n o i r t e l e d o t i e f e
s o g n u f e s a i r t c a b , s o i r o z o t o r p , s e d i t a m e n
o h l i M
o a a i c n t s i s e r a r a p t a P e n e G
o t a n i s o f u l g
e d a d i s r e v i d a n o i r t e l e d o t i e f e o d a v r e s b o i o f o N
a n s a n a i b o r c i m s e d a d i n u m o c s a d o i s o p m o c u o
a r e f s o z i r
o c a b a T e s a n i t i u Q
s o c i z r r o c i m s o g n u f s o e r b o s o i r t e l e d o t i e f E
s e r a l u c s u b r a
o c a b a T s a c i g n f - i t n a s a n e t o r p e d o s s e r p x E
A M o g n u f r o p s e z a r s a d o a z i n o l o c a u o t e f a o N
e a e s s o m . G
o c a b a T a n i n g i l e d e s e t n s s o i B
s i a m a t s o p m o c e d i o f M G P e d a n i n g i l A
e t n e m a d i p a r
o c a b a T e s a n i e t o r p e d r o d i b i n I
e , e d i t a m e n e d o a l u p o p a u i u n i m i D
o a r i p s e r a n o t i e f e e v e t o n , s o d o p r t r a o r c i m
a n a i b o r c i m

Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 21


tas geneticamente produzida at o
momento produtora de alimentos
(milho, soja, batata, canola e arroz) e
de plantas no alimentcias (algo-
do, plantas ornamentais, tabaco).
No entanto, estas modificaes ge-
nticas visam diretamente a prote-
o da planta ou a melhora do pro-
cesso de cultivo. At o momento,
muitos crticos das PGMs as vem
como contaminantes em potencial
do meio ambiente devido aos novos
produtos metablicos por elas pro-
duzidos. verdade que a liberao
destas plantas deve ser feita aps
criteriosa avaliao de risco ao meio
ambiente, sade animal e humana,
mas no se pode desprezar o poten-
cial que existe nesta tecnologia para
melhorar a prtica agrcola em vrios
aspectos.
No solo, os efeitos das plantas
engenheiradas so muito pouco es-
tudados, apesar de ser grande o co-
nhecimento da importncia de vri-
os grupos de microrganismos para a
nutrio e proteo da planta e tam-
bm na ciclagem de nutrientes. Os
microrganismos so responsveis
pela maioria da biomassa, excluindo
as razes, e pela atividade metabli-
ca (respirao), alm de participa-
r em at i vament e dos ci cl os
biogeoqumicos e na ciclagem da
matria orgnica.
PGMs influenciam a micro e
macrobiota na rizosfera e certamen-
te os novos produtos metablicos
produzidos devido introduo de
novos genes vo influenciar a comu-
nidade microbiana da rizosfera. Nes-
te sentido, o importante determi-
nar se o efeito positivo ou negativo
e dimensionar quanto estes produ-
tos influenciam. Apesar de serem
poucos os experimentos realizados
at o momento, grande o impacto
dessas plantas na microbiota do solo
que consome os novos produtos
metablicos liberados pelas PGMs.
Kowalchuk et al. (2003), em uma
reviso, descreve os efeitos das PGMs
na microbiota do solo. Como pode
ser observado na Tabela 2, os estu-
dos de impacto tm resultados mui-
to variveis, cada planta e cada gene
introduzido tem diferentes efeitos
na comunidade microbiana da
rizosfera.
Uma estratgia interessante que
possa influenciar de forma positiva
os grupos funcionais de microrganis-
mos na rizosfera a produo de
PGMs com a rizosfera engenheirada
para selecionar microrganismos be-
nficos na sua rizosfera, alterando
assim sua funo para benefcio do
meio ambiente, da nutrio e sade
da planta (Figura 8). Mtodos clssi-
cos e de biologia molecular ainda
no permitem um profundo estudo
de monitoramento da rizosfera. No
entanto, vrias propostas neste sen-
tido tm surgido, aumentando o in-
teresse pelo estudo da biologia das
razes, da rizosfera e das interaes
entre rizosfera e microrganismos.
Engenheirar a rizosfera requer
novas tcnicas para introduzir e re-
gular a expresso de novos genes,
assim como compreender a expres-
so dos genes nos tecidos radiculares
e de promotores que regulam as
clulas em tecidos especficos da
raiz. A camada mais externa de clu-
las da raiz poderia ser um alvo a ser
engenheirado, pois est em contato
direto com o solo e influencia direta-
mente na rizosfera. Esta camada
bastante promissora para a modifica-
o gentica porque formada por
um tipo de tecido diferente das de-
mais partes da planta, expressa um
nico complemento de genes e se
mostra adaptada a mediar os proces-
sos da rizosfera. Tais PGMs, por
exemplo, poderiam ser alteradas para
apresentar mais stios especficos
para microrganismos simbiontes tais
como fungo MA e rizbios, ou ainda
serem mais eficientes em absorver P
e/ou fixarem N por si prprias. Tam-
bm poderiam produzir e excretar
atravs dos seus exsudatos fatores
de crescimento que estimulariam
grupos funcionais de microrganis-
mos que atuam em etapas chave dos
diferentes ciclos biogeoqumicos.
A produo e liberao de sinais
qumicos para a expresso de genes
introduzidos em microrganismos GM
a serem disseminados no solo tam-
bm poderia ser uma excelente fer-
ramenta para o controle da expres-
so desses genes, os quais poderiam
ser ativados em diferentes etapas do
crescimento da planta, conforme a
convenincia.
6. Consideraes finais
Os efeitos dos OGM no ambien-
te e mais especificamente sobre a
comunidade microbiana do solo ain-
da so pouco conhecidos, de modo
que os potenciais riscos e impactos
ambientais somente podero ser
conhecidos aps uma avaliao
criteriosa desses novos genes e seus
produtos no ambiente. Por outro lado,
o potencial desta tecnologia pode
fazer com que as plantas tenham
papel importante na revitalizao da
microbiota do solo, recuperando as-
sim a fertilidade e suas propriedades
fsico-qumicas, tornando a agricultu-
ra uma atividade menos impactante
do meio ambiente. claro que, mes-
mo tendo genes que possam bene-
ficiar o meio ambiente, estas plantas
e eventuais microrganismos devem
obrigatoriamente ser avaliados quan-
to ao impacto que possam causar
funcionalidade do ecossistema.
Referncias
Borm, A. Biotecnologia e Meio Ambi-
ente. Viosa: UFV, 2004. 325 p.
Callaway, R.M.; Thelen, G.C.; Rodri-
guez, A.; Holben, W.E. Soil biota
and exotic plant invasion. Nature,
427:731-733, 2004.
Kowalchuk, G.A.; Bruinsma, M.; van-
Veen, J.A. Assessing responses of
soil microorganisms to GM plants.
Trends in Ecology and Evolution,
18:403-410, 2003.
OConnel, K. P.; Goodman, R.M.; Han-
delsman, J. Engineering the rhizos-
phere: expressing a bias. Trends
in Biotechnology, 14:83-88, 1996.
Phillips, D.A.; Streit, W.R. Modifying
rhizosphere microbial communiti-
es to enhance nutrient availability
in cropping systems. Field Crops
Research, 56:217-221, 1998.
Rengel, Z. Genetic control of root
exudation. Plant and Soil, 245:59-
70, 2002.
Varma, A.; Abbott, L.; Werner, D.; Ham-
pp, R. (Eds.) Plant Surface Microbi-
ology. Berlin: Springer, 2004.
628 p.
22 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
IMPACTO DA BIOTECNOLOGIA NA
BIODIVERSIDADE
Pesquisa
Saiba como a biotecnologia pode contribuir para a conservao da biodiversidade
Biodiversidade
Biodiversidade pode ser defini-
da como o conjunto de todos os
seres vivos em um ecossistema, em
uma regio ou em toda a Terra.
O valor intrnseco das espcies
e dos ecossistemas vai alm de seu
valor como matria-prima para o
desenvolvimento dos produtos. A
biodiversidade possui valor econ-
mico, social, recreativo, cultural e
esttico. A biodiversidade hoje exis-
tente o resultado da evoluo du-
rante 3,5 bilhes de anos, perodo
em que as espcies surgiram, muitas
delas hoje no encontradas na face
da terra. Os dinossauros no so os
nicos seres vivos que desaparece-
ram da Terra.
Existem estimativas de que a
maioria das espcies que j existi-
ram desapareceram, evidenciando a
natureza dinmica da biodiversidade.
Em longo prazo, os ecossistemas
nunca foram estticos. Eles sempre
experimentam alteraes com es-
pcies novas surgindo e outras sen-
do extintas. Essas oscilaes so
muito lentas e graduais quando com-
paradas ao tempo de vida do ho-
mem. Certamente, hoje, com o cres-
cimento populacional e sua interfe-
rncia nos ecossistemas, as altera-
es e o desequilbrio so muitos
maiores que em quaisquer outras
pocas da existncia da Terra.
Alm da biodiversidade silves-
tre, existe a biodiversidade explora-
da nos sistemas silvo-agropastoris.
Na agricultura, cerca de 7.000 esp-
cies vegetais so utilizadas pelos
agricultores. Entretanto, 30 espcies
Aluzio Borm
Eng. Agrnomo, M.S., Ph.D. e Professor da
Universidade Federal de Viosa
borem@ufv.br
respondem por 90% da dieta do
homem (Ammann, 2003). Dentro
dessas poucas 30 espcies existem
milhares de bitipos (linhagens,
variedades crioulas, nativas, melho-
radas, estoques genticos etc.)
adaptados a diferentes condies
edafo-climticas, prticas agrcolas
etc. Entretanto, a variabilidade gen-
tica presente nas variedades cultiva-
das, em geral, relativamente
limitada, uma vez que a maioria de-
las descende de um pequeno grupo
de genitores. As trs principais
espcies agronmicas, trigo, milho e
arroz, produzem individualmente
cerca de 500 milhes de toneladas
por ano. O melhoramento gentico
dessas espcies resultou em varie-
dades aparentadas entre si. Adicio-
nalmente, a distncia gentica entre
essas variedades e a maioria dos
acessos dos bancos de germoplasma
muito grande, limitando sua
utilidade para a introgresso de nova
variabilidade. A biotecnologia possui
grande potencial para expandir a
base genti ca das vari edades
atualmente cultivadas e para a trans-
ferncia de caractersticas importan-
tes dos acessos dos bancos de
germoplasma para as modernas
variedades, sem o arraste de genes
de caractersticas indesej veis
(Borm, 2001).
Conveno sobre
biodiversidade
Por iniciativa da ONU, foi reali-
zada em 1992, no Rio de Janeiro, a
Conveno sobre Biodiversidade. A
reunio ficou conhecida como Eco-
Imagens cedidas pelos autores
Meio ambiente
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 23
92. O resultado deste encontro foi
que a maioria dos pases participan-
tes concordou em seguir as normas
ento estabelecidas para a conserva-
o da biodiversidade e o uso sus-
tentvel dos recursos genticos. Esta
conveno reconheceu a soberania
de cada pas sobre os recursos gen-
ticos em seu territrio. Os termos da
Eco-92 contemplam tanto as espci-
es silvestres quanto as cultivadas.
Os artigos 16 e 19 da Eco-92 so
dedicados biotecnologia e tm ge-
rado retornos econmicos para pa-
ses que exploram racionalmente seus
recursos genticos. Um exemplo foi
o convnio firmado entre a Merck e
a Costa Rica para a bioprospeco de
ingredientes com fins medicinais. Essa
parceria permitiu a identificao de
novos princpios ativos e um retorno
de US$ 2 milhes durante um pero-
do de cinco anos, alm de possveis
royalties, se produtos comerciais fo-
rem lanados.
A Eco-92 requer que todo pas
signatrio tome medidas para pre-
servar sua biodiversidade. Uma se-
gunda Conveno sobr e
Biodiversidade aconteceu em Joha-
nesburgo, em 2002. Essa conven-
o, conhecida como Rio +10, repre-
sentou novos progressos e compro-
missos dos pases na preservao da
biodiversidade.
Protocolo de Biossegurana de
Cartagena
O Protocolo de Cartagena, como
ficou conhecido, estabeleceu as ba-
ses para a normatizao internacio-
nal do desenvolvimento dos OGMs.
Esta reunio foi realizada em
Cartagena, Venezuela, em 2000.
Este protocolo um conjunto
de normas para a manipulao, o
transporte e o uso de OGMs que
possam trazer algum risco para a
biodiversidade. Nele mencionado
explicitamente o princpio da pre-
cauo e estabelecidas as diretrizes
para o comrcio internacional de
OGMs. Este Protocolo s foi assina-
do pelo Brasil em 2003, depois da
soluo dos conflitos de interesse
entre diferentes ministrios do go-
verno federal.
O princpio da precauo foi
elaborado para proteger o meio am-
biente. Esse princpio deve ser am-
plamente observado pelos Estados,
de acordo com suas capacidades.
Quando houver ameaa de danos
srios ou irreversveis, a ausncia de
absoluta certeza cientfica no deve
ser utilizada como razo para pos-
tergar medidas eficazes e economi-
camente viveis para prevenir a
degredao ambiental.
A aplicao do princpio da pre-
cauo significa que, se h incerteza
cientfica, devem ser adotados pro-
cedimentos para prevenir e evitar
dano ao meio ambiente. No tocante
aos riscos dos OGMs para o meio
ambiente, o Brasil adotou uma lei
moderna de biossegurana, a qual,
alm de contemplar o princpio da
precauo, estabelece outros instru-
mentos jurdicos para a pre-
servao da biodiversidade
brasileira. O que no se deve
fazer invocar o princpio da
precauo como subterfgio
para impedir que variedades
geneticamente modificadas
seguras para a sade humana
e para o meio ambiente sejam
impedidas de serem planta-
das pelos agricultores brasilei-
ros. Neste particular, existem
evidncias de que o princpio
da pr ecauo t em si do
preconceituosamente utiliza-
do no Brasil por alguns grupos
vestidos de defensores do
meio ambiente. Uma discus-
so mais profunda sobre este
tema apresentada no captulo 8
deste livro.
Eroso gentica
A perda na biodiversidade pode
ser detectada pela extino de esp-
cies ou pela reduo na variabilidade
gentica dentro das espcies.
Considerando que as florestas
tropicais so ricas em recursos gen-
ticos, o seu desmatamento particu-
larmente nocivo biodiversidade.
Pimm e Revem (2000) estimam que,
dos 16 milhes de quilmetros qua-
drados dessas florestas existentes 100
anos atrs, somente a metade perma-
nece. importante notar que a
biodiversidade no est uniforme-
mente distribuda na Terra. Existem
determinados ecossistemas especial-
mente ricos em biodiversidade, a
exemplo da Floresta Amaznica, do
Pantanal Mato-grossense e da Mata
Atlntica, no caso do Brasil.
A principal causa da reduo da
biodiversidade a fragmentao e
destruio do habitat. O contnuo
crescimento das cidades, da malha
rodoviria e a expanso da fronteira
agrcola so os maiores responsveis
pela destruio dos ecossistemas. A
populao mundial, hoje de 6,4 bi-
lhes de habitantes, dever dobrar
nos prximos 50 anos, exercendo
enorme presso sobre os habitats
remanescentes. O Brasil, pas deten-
tor de uma mega biodiversidade e
em cont nuo cr esci ment o
populacional, precisa encontrar al-
Figura 1. rea cultivada com variedades transgnicas no perodo de 1996 a 2004
24 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
ternativas para a preservao de seus
recursos genticos. Uma das vrias
alternativas incorporao de novas
reas do sistema produtivo o au-
mento da produtividade das lavou-
ras. Muitas outras medidas tcnicas,
socioeconmicas e polticas preci-
sam ser adotadas simultaneamente
para se assegurar a preservao dos
recursos genticos ainda existentes.
A moderna biotecnologia pode
contribuir para a preservao da
biodiversidade. Se adequadamente
testadas quanto aos riscos para o
meio ambiente, as variedades
transgnicas contribuem para
proteg-lo. Entretanto, cada caso
deve ser considerado separadamen-
te. Os resultados de experimentos
e as evidncias obtidas nos plantios
comerciais mostram um balano
ambiental positivo nas regies que
adotaram as variedades GM, obser-
vando-se o repovoamento com
animais e aves que haviam abando-
nado essas regies.
A segunda principal causa da
reduo da biodiversidade a inva-
so e colonizao por plantas ex-
ticas. O intercmbio de espcies
entre pases tem sido um dos mais
importantes fatores para o crescimen-
to da agricultura mundial. Em geral, as
principais espcies agronmicas culti-
vadas em uma regio so importadas
de outras. No Brasil, a introduo da
soja, do milho, do arroz, dos citros, do
caf, do feijo, do trigo e de outras
espcies viabilizou a agricultura e a
produo de alimentos no Pas. O
mesmo se verifica em pases de ou-
tros continentes. Entretanto, as esp-
cies exticas introduzidas podero
ameaar as nativas, se aquelas apre-
sentarem alta adaptao s condies
l ocai s. Em geral , as espci es
introduzidas no so ameaadas por
pragas e doenas em seu novo habitat,
o que l hes confere vant agem
adaptativa.
As anlises de biossegurana rea-
lizadas antes da liberao comercial
das variedades GM devotam especial
ateno possvel tendncia de elas
invadirem e colonizarem o meio am-
biente (Borm, 2001). Essas varieda-
des so, portanto, analisadas quanto s
alteraes morfo-fenolgicas que a
introduo do transgene possa ter cau-
sado. Alteraes que confiram maior
agressividade ou habilidade de com-
petio no meio ambiente podero
vetar sua liberao comercial. A maio-
ria das espcies agronmicas cultiva-
das pelo homem perdeu, ao longo do
processo de domesticao, a capaci-
dade de sobreviver sem a interfern-
cia humana. Com a eliminao de
caractersticas como dormncia das
sementes, maturao desuniforme,
deiscncia de vagens na maturao e
hbito de crescimento inderteminado
do tipo sarmentoso, durante a
domesticao, as espcies tornam-se
dependentes do homem para sobre-
viverem.
Embora a maioria dos cientistas
acredite que a introduo de apenas
um ou poucos genes no possa rever-
ter as espcies cultivadas aos seus
ancestrais com elevada capacidade de
invadir e habilidade de sobrevivncia
no meio ambiente, toda variedade
GM submetida anlise de
biossegurana para se avaliar seu po-
tencial efeito adverso ambiental.
Crawley (2001) conduziu um estudo
durante 10 anos, em 12 localidades,
com quatro espcies (canela, batata,
1 o r d a u Q o a z i l a i c r e m o c - r p e d e s a f m e s a c i n g s n a r t s e d a d e i r a V .
e i c p s E s a c i t s r e t c a r a C
a j o S
e d a d i v i t u d o r p r o i a M
e d a d i n i l a s a i c n r e l o T
a c e s a i c n r e l o T
a a i c n t s i s e R a i n i t o r e l c S
a c i l o o a r f a d a d a r e t l a o i s o p m o C
s a d i c i b r e h a a i c n r e l o T
s o t e s n i a a i c n t s i s e R
o h l i M
e d a d i v i t u d o r p r o i a M
o n a f o t p i r t e d r o e t r o i a M
n i s i l e d r o e t r o i a M
e d a d i n i l a s a i c n r e l o T
a c e s a i c n r e l o T
a a i c n t s i s e R a i n i t o r e l c S
a i n o t c o z i h R a a i c n t s i s e R
a c i l o o c a r f a d a d a r e t l a o i s o p m o C
s e t n e m e s s a d o a r o l o C
s a d i c i b r e h a a i c n r e l o T
s o t e s n i a a i c n t s i s e R
o d o g l A
a r b i f a d e d a d i l a u Q
a c i l o o a r f a d a d a r e t l a o i s o p m o C
a a i c n t s i s e R a i n o t c o z i h R
s a d i c i b r e h a a i c n r e l o T
s o t e s n i a a i c n t s i s e R
e t a m o T
l a n o i c i r t u n e d a d i l a u Q
a r i e l e t a r p e d o p m e T
o l a c o a a i c n r e l o T o t u r f o d e d a d i l a u Q
s a n e o d a a i c n t s i s e R r
s o t e s n i a a i c n t s i s e
z o r r A
e d a d i v i t u d o r p r o i a M
l a n o i c i r t u n e d a d i l a u Q
s a n e o d a a i c n t s i s e R
o m s i n a N
r a c a - e d - a n a C
s a d i c i b r e h a a i c n r e l o T
s a n e o d a a i c n t s i s e R
s o t e s n i a a i c n t s i s e R
f a C a n e f a c e d r o e t o x i a B
o t p i l a c u E a n i n g i l e d r o e t o x i a B
e t n o F ) / u d e . t v . p a i b n . w w w / / : p t t h ( y g o l o n h c e t o i b r o f s m e t s y s n o i t a m r o f n I :
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 25
milho e beterraba-aucareira), com o
objetivo de avaliar a agressividade e
invasivilidade das variedades GM.
Em nenhum caso as variedades GM
foram mais invasivas ou persistentes
que seus equivalentes convencio-
nais. Entretanto, apesar da expecta-
tiva de as variedades GM no serem
mais invasveis que as convencio-
nais, cada caso deve ser estudado
individualmente.
Utilizao da biotecnologia
na biodiversidade
Estudo da biodiversidade
Atualmente, a maioria das pes-
quisas biolgicas tira proveito das
ferramentas biotecnolgicas para a
soluo de problemas ou aquisio
de conhecimento. Na taxonomia, os
marcadores moleculares so utiliza-
dos para identificar ectipos de or-
ganismos ou espcies. Essas tcnicas
moleculares so importantes na ma-
nipulao das colees vivas de re-
cursos genticos, os bancos de ger-
moplasma. Informaes molecula-
res de cada acesso podem esclarecer
sua origem e o grau de parentesco
com outros acessos, evitando a ma-
nuteno de duplicatas nesses ban-
cos.
Os projetos genoma em anda-
mento em diferentes pases esto
seqenciando o DNA de vrias esp-
cies. O conhecimento da seqncia
genmi ca dessas espci es
disponibilizar uma variabilidade ge-
ntica ainda pouco explorada pelo
homem. O genoma da planta mode-
l o par a as di cot i l edneas,
Arabidopsis-thaliana, foi seqenci-
ado em 2000. Os 126 Mbp de se-
qncia dessa planta silvestre hoje
se encontram disposio do pbli-
co, para consulta, e de toda a comu-
nidade cientfica para utilizao. O
genoma do arroz, seqenciado em
2002, possui 430 Mbp. Atualmente,
existem projetos de seqenciamento
genmico em andamento para alfafa,
milho, caf, banana, eucalipto, toma-
te e outras espcies. O Brasil entrou
para o seleto grupo de pesquisa
genmica aps ter seqenciado o
genoma do primeiro fitopatgeno
no mundo, em 2002, a bactria
Xylella fastidiosa.
Transferncia
interespecfica de genes
Uma vez que o cdigo gentico
universal, isto , os genes dos
diferentes seres vivos so codifica-
dos com a mesma linguagem e o
mesmo material gentico, possvel
tomar um gene de um organismo e
transferi-lo para qualquer outro, de
forma que o indivduo receptor pos-
sa tambm apresentar a caractersti-
ca conferida pelo gene transferido
(transgene). Esta tecnologia permite
a ampliao da variabilidade genti-
ca nas espcies, gerando oportuni-
dade para os cientistas desenvolve-
rem variedades adaptadas s mais
diferentes situaes. Organismos as-
sim obtidos so denominados
transgnicos ou simplesmente ge-
neticamente modificados. A primei-
ra planta trangnica foi obtida em
1985 e, em 1994, aps os testes de
biossegurana, a primeira variedade
GM chegou s prateleiras dos super-
mercados, o tomate Flavr Savr. A
rea comutativa plantada com as
diferentes variedades GM em dife-
rentes pases, desde ento, atingiu
302 milhes de ha (Figura 1). Esta-
dos Unidos, Canad, Argentina, Chi-
na, Austrlia, frica do Sul e Brasil
possuem grandes reas plantadas
com variedades GM.
Em 2003, as variedades GM fo-
ram plantadas pelos seguintes pa-
ses: Estados Unidos, Argentina, Ca-
nad, China, Brasil, Mxico, Espanha,
Austrlia, frica do Sul, Colmbia,
ndia, Indonsia, Romnia, Uruguai,
Bulgria, Honduras e Alemanha. As
trs principais espcies agronmicas
GM cultivadas so: soja, milho e al-
godo. Embora tolerncia a herbicidas
e resistncia a insetos ainda sejam as
principais caractersticas introduzidas
nestas variedades, j se encontram
em fase final de avaliao, em dife-
rentes pases, variedades GM com as
mais diferentes caractersticas, as
quais em breve devero estar dispo-
nveis comercialmente (Quadro 1).
O principal motivo de adoo
das variedades GM pelos produtores
tem sido econmico. Como o custo
de produo destas variedades em
geral menor, elas oferecem maior
lucratividade para os produtores. Na
maioria das circunstncias, a produti-
vidade das lavouras GM semelhan-
te ou superior das convencionais.
Entretanto, o principal benefcio des-
sas vari edades no pode ser
mensurado em termos econmicos.
Nas regies onde foram plantadas
variedades GM, ocorreu substancial
reduo no uso de defensivos agr-
colas. Com o menor uso desses
agrotxicos, menor a contamina-
o do ambiente, com claros benef-
cios para a biodiversidade local. Em
muitas dessas regies, tem-se nota-
do a tendncia de repovoamento
com a fauna e flora nativas. Esses
benefcios so notrios nos casos das
variedades tolerantes a herbicidas e
das resistentes a insetos.
Como pode ser observado no
Quadro 3.1, muitas das caractersti-
cas introduzidas nas variedades ora
em fase final de avaliao traro
benefcios diretos para o meio ambi-
ente, reduzindo a dependncia dos
produtores aos agrotxicos, enquan-
to outras traro benefcios diretos
aos consumidores, como nos casos
da melhoria na qualidade nutricional,
a exemplo da alterao na frao
olica, desenvolvida para preven-
o de doenas cardiovasculares.
Biodiversidade silvestre
A biodiversidade silvestre est
sendo reduzida de forma sistemtica
na Europa h vrios milnios. Os
ecossistemas so alterados definiti-
vamente com o desmatamento para
o plantio de pastagens e lavouras. A
Amrica ainda possui parte das suas
florestas nativas, as quais tm per-
manecido intocadas com o estabele-
cimento de reservas biolgicas. Ape-
sar dos esforos de conservao da
biodiversidade, cerca de 50% das
florestas tropicais j foram destrudas.
O grande desafio dos cientistas
est abel ecer al t er nat i vas que
viabilizem a produo de alimentos
e fibras que atendam a demanda
mundial sem a necessidade de se
fragmentar ou mesmo destruir a
biodiversidade silvestre remanescen-
te. Esse desafio ainda maior para os
pases em desenvolvimento, como o
Brasil. A produtividade de muitas
26 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
espcies cresceu substancialmente
nas ltimas dcadas, mas a presso
pela expanso da fronteira agrcola,
com a incluso de novas reas ao
sistema produtivo, tem sido obser-
vada. Essas reas tm sido adiciona-
das ao sistema produtivo com o nus
principalmente de reservas nativas
com importante biodiversidade.
Segundo Conway (1999), a ma-
neira mais promissora para se redu-
zir a destruio da biodiversidade
remanescente o aumento da pro-
dutividade. Neste particular, o me-
lhoramento gentico convencional
e o biotecnolgico tm grande po-
tencial de contribuio. A introduo
de genes para maior eficincia
fotossinttica, maior eficincia na
translocao e melhor distribuio
dos fotoassimilados entre a produ-
o biolgica e a produo econmi-
ca poder viabilizar um novo salto
em produtividade das culturas. Essas
modificaes genticas, algumas j
em fase de avaliao (Quadro 1),
podero ser a melhor alternativa para
aliviar a presso de fragmentao
dos ecossistemas ainda virgens. A
biotecnologia, ainda incompreendida
por alguns grupos ambientalistas,
sua maior aliada na preservao dos
ecossistemas. Ao aliviar a presso
por novos desmatamentos, preser-
va-se a biodiversidade. Certamente
que a preocupao dos ambientalistas
correta e a avaliao da segurana
destas variedades geneticamente
modificadas para o meio ambiente
essencial. Por isso mesmo, cada nova
variedade de GM avaliada em di-
versos ambientes durante sucessi-
vos anos ant es de ser em
disponibilizadas para o plantio co-
mercial.
Biodiversidade agrcola
A biodiversidade existente no
germoplasma utilizado pelos agri-
cultores deve ser conservada. O flu-
xo gnico das variedades melhora-
das convencionais ou trangnicas
para o germoplasma crioulo tem sido
alvo da ateno dos cientistas. Por-
tanto, o fluxo gnico no uma
preocupao peculiar era da
biotecnologia. O intercmbio de
genes entre as variedades crioulas e
as melhoradas tem ocorrido desde
que os melhoristas comearam a lan-
ar suas variedades. Apesar disso, as
variedades crioulas tm permaneci-
do estveis e suas caractersticas no
tm desaparecido. Adicionalmente,
como uma precauo extra, essas
variedades tm sido preservadas nos
bancos de germoplasma.
Com o desenvolvimento de no-
vas ferramentas da biotecnologia, tem
sido mais fcil e precisa a medio
do fluxo gnico, motivo da maior
controvrsia atual sobre os OGMs. A
substituio das variedades crioulas
pelas modernas, uma prtica natural
entre os agricultores, medida que
estas se tornam disponveis, pode
resultar em perda de germoplasma.
No Brasil, muitos tipos de feijo es-
to desaparecendo dos campos dos
agricultores e, conseqentemente,
do mercado, em razo da crescente
preferncia do consumidor por ape-
nas feijo tipo carioca e preto. At
cerca de 30 anos atrs, os feijes
roxinho, bico-de-ouro, pardo,
mulatinho, dentre outros, eram am-
plamente cultivados. Para preserva-
o da grande biodiversidade dos
feijes cultivados, amostras tm sido
coletadas e armazenadas em cma-
ras frias dos bancos de germoplasma.
O fluxo gnico das variedades
GM para as espcies silvestres limi-
ta-se quele que pode ocorrer na
espcie ou entre espcies sexual-
mente compatveis. Isto , no caso
do feijo, este fluxo gnico se limita-
ria apenas aos seus ancestrais
Phaseolus vulgarais var. mexicanus
ou P. vulgaris var. aborigeneus,
ectipos da mesma espcie do fei-
jo cultivado P. vulgaris var. vulgaris.
Essas trs entidades se intercruzam
facilmente. A soja (Glycine max) s
sexualmente compatvel com seu
parente silvestre G. soja. A espcie
G. max no cruza com quaisquer
outros tipos silvestres de Glycine ou
de outras espcies. Adicionalmente,
para que uma variedade melhorada
de feijo ou de soja cruze com os
tipos silvestres com os quais ela
sexualmente compatvel, h neces-
sidade de que ambos ocorram no
mesmo habitat (proximidade espa-
cial) e floresam na mesma poca
(proximidade temporal).
Nenhum problema ecolgico
esperado aps o fluxo gnico, a no
ser que o gene transferido modifique
a adapt ao (agr essi vi dade,
invasivilidade ou capacidade de co-
lonizao) do indivduo receptor. Es-
tudos comparativos entre o milho
cultivado e seu parente silvestre
teosinto revelam que o nmero de
genes necessrios para conferir ele-
vada capacidade competitiva gran-
de (Doubley, 1999). Dessa forma, a
introduo de apenas um ou poucos
genes, via fluxo gnico, no seria
suficiente para criar uma superplanta
daninha. Maiores detalhes sobre este
assunto o leitor encontrar no cap-
tulo 13.
Acreditando na importncia de
se desenvolver seu programa em
biotecnologia, o Brasil, por meio do
CNPq e de outras agncias de fo-
mento pesquisa do governo, en-
viou, para treinamento, anualmente,
a partir dos anos 80, grande nmero
de cientistas para vrias universida-
des no exterior. Com grande massa
crtica adequadamente treinada, v-
rios centros de excelncia em
biotecnologia se estabeleceram no
Pas. Em 1995, foi homologada a Lei
de Biossegurana, que normatiza a
avaliao dos OGMs quanto segu-
rana para a sade humana e animal
e para o meio ambiente. Desde en-
to, o Brasil tem realizado pesquisas
com plantas geneticamente modifi-
cadas e avaliado, em condies con-
troladas, a segurana das novas vari-
edades GM. Em 1998, a CTNBio,
aps avaliar a segurana da soja tole-
rante ao glifostato, recomendou sua
liberao para plantio comercial.
Entretanto, uma liminar judicial sus-
pendeu esse direito, at que em
2003 o governo federal regulou esta
matria por meio de uma medida
provisria. Os motivos que levaram
o governo a autorizar o plantio dessa
soja foram a segurana da soja
transgnica para o homem e para o
meio ambiente, concluso qual a
CTNBio j havia chegado anterior-
mente. O atraso na liberao dessa
variedade GM no Brasil obrigou os
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 27
sojicultores a continuarem usando
herbicidas mais txicos e residuais
que o glifosato. Esse herbicida teve
sua patente expirada h alguns anos
e hoje produzido por mais de 18
empresas no Pas. Portanto, o atraso
no uso dessa tecnologia representou
grande nus para o meio ambiente
do Brasil e para o produtor brasileiro.
Bibliografia
Adam A. 2000. Now for the hard
ones. Nature 408: 792-793.
Ammann, K. 1997. Botanists to
blame? Plant Talk 8: 4.
Ammann, K. e Papazov, Ammann, B.
1999. Where do we come from,
where do we go from here ? p.
199-204 In: Ammann, K., Jacot,
Y., Simonsen, V. e Kjellson, G.
(eds.). 1999. Methods for risk
assessment of transgenic plants
III. Ecological risks and prospects
of transgenic plants, where do
we go from here? A dialogue
between biotech industry and
science. Proceedings of the Bern
International Conference, 28-31.
January 1998, Berne, Switzerland.
Birkhuser, Basel.
Ammann, K., Jacot, Y. e Rufener, M.
P. 1996. Fi el d rel ease of
transgenic crops in Switzerland:
an ecological assessment of ver-
tical gene flow. In: Schulte, E. e
Kppel i , O. (or gs. )
S c h we r p u n k t p r o g r a mm
Biotechnologie, BATS, Basel.
p.101-157. http://www.bats.ch/
data/english/k3titel.htm
Ammann, K., Jacot, Y., Kjellsson, G.
e Simonsen, V. 1999. Methods of
risk assessment of transgenic
plants, III. Ecological risks and
prospects of transgenic plants,
where do we go from here? A
di al ogue bet ween bi ot ech
i ndust r y and sci ence. A
multifaceted conference report.
Birkhuser Verlag, Basel, Boston,
Berlin. 260 p.
Anonymous: FAO World Food
Summit, Technical Background
Documents, v. 1, 1996. p. 9.
Anonymous: Population division of
the Department of Economic and
Social Affairs of the UN Secretariat
Long Range Popul at i on
projections based on the 1998
revision New York, 1999. (Ver-
so eletrnica).
Anonymous: UNEP/CBD/SBSTTA/4/
8. http://www.biodiv.org/doc/
sbstta/sbstta4/english/sbstta-4-
08-e.doc
Borm, A. 2005. Biotecnologia e meio
ambiente. Viosa, MG: UFV. 1.
ed. 425 p.
Borm, A. 2000. Escape gnico: os
riscos do escape gnico da soja
no Brasil. Biotecnologia Cincia
& Desenvolvimento 10:101-107.
Borm, A. 2001 Escape gnico e
transgnicos. Visconde do Rio
Branco: Editora Suprema. 2.004
p.
Borm, A. 2001. Avaliao dos riscos
de escape gnico. Biotecnologia
Cincia & Desenvolvimento 18:
54-59.
Borm, A. e Ramalho, M.A.P. 2002.
Escape gni co e i mpact o
ambiental. Biotecnologia Cin-
cia & Desenvolvimento 28: 44-
47.
Borm, A., Freire, E.C., Penna, J.C.V.
e Bar r oso, P. A. V. 2003.
Considerations about cotton gene
escape in Brazil: a review. Crop
Br eedi ng and Appl i ed
Biotechnology 3: 315-332.
Buhenne-Guilmin, F. e Glowka, L.
An Introduction to the CBD In:
Krat t i ger, A. et al . 1994.
Widening Perspectives on
Biodiversity. IUCN, The World
Conservation Union and the
International Academy of the
Environment.
Bull, A. T. 1994. University of Kent,
UK, 7th IUMS Congress.
Burslem, D. F. R. P., Garwood, N. C.
e Thomas, S. C. 2001. Tropical
forest diversity the plot
thickens. Science 291: 606-607.
Cohen, J. 2000. Ground zero: AIDS
research in Africa. Science 288:
2150-2153.
Comst ock, G. 2000. ht t p: //
www.agbioworld.org/.
Conway, G. 1999. The Doubly Green
Revolution: Food for All in the
21st Century. London Penguin
Books.
Crawley, M. J., Brown, S. L., Hails, R.
S., Kohn, D. D. e Rees, M. 2001.
Transgenic crops in natural
habitats. Nature 409: 682-683.
Crosby, A. W. 1986. Ecological
Imperialism, The Biological
Expansion of Europe, 900-1900.
Cambridge University Press.
Dennis, C. e Surridge, C. 2000. A.
thaliana genome. Nature 408: 791.
Haywood V. Per sonal
Communication, Workshop on
Biodiversity and Biotechnology,
Botanical Garden. University of
Bern, March 9-11, 2000.
Dickson, D. e Cyranoski, D. 2001.
Commercial sector scores success
with whole rice genome. Nature
409: 551.
Freire, E.C., Barroso, P.A.V., Penna,
J.C.V. e Borm, A. 2002. Fluxo
gnico: anlise do caso do algo-
do no Brasil. Biotecnologia Ci-
ncia & Desenvolvimento 29:
104-113.
Gianessi, L. P. e Carpenter, J. E.
2000. Case study in benefits and
r i sks of agr i cul t ur al
biotechnology: roundup ready
soybeans, f t p: //
debate:friends@sgiserv.unibe.ch/
home/debate/soy85.pdf
Girsberger, M. A. 1999. Biodiversity
and the concept of farmers rights
in international law, factual
background and legal analysis.
In: Th. Cottier, Series on Global
Economic Law, n. 1, p. 283-291.
Gura, T. 1999. New genes boost rice
nutrient. Science 285: 994-995.
Hector, A. et al. 1999: Plant
biodiversity and productivity
exper i ment s i n Eur opean
grasslands. Science 286: 1123-
1127.
IRRI, 2000. Press release. http://
www.cgiar.org/.
James, C. 2000. www.isaaa.org
Jayaraman, K. S. 2000. India
intends to reap the full economic
benefits. Nature 402: 342-343.
Jennings, S. et al. 2000. To conserve
rainforests, we have to help local
people live sustainable. Nature
405: 507.
Jensen, M. N. 2000. Silk moth deaths
show perils of biocontrol. Science
290: 230-231
Johnson, B. 2000. Genetically
28 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
modi fi ed crops and ot her
organisms: implications for
agricultural sustainability and
biodiversity. In: Persley, G. J e
Lanti n, M. M. Agri cul tural
Biotechnology and the Poor.
Consul t at i ve Gr oup on
I nt er nat i onal Agr i cul t ur al
Research. p.131-138.
Kaiser, J. 2000. Rift over biodiversity
divides ecologists. Science 289:
1282-1283 .
Lei si nger, K. M. 2000. Et hi cal
chal l enges of agri cul t ural
biotechnology for developing
countries. In: Persley, G. J e Lantin,
M. M. Agricultural Biotechnology
and the Poor. Consultative Group
on International Agricultural
Research. p. 173-180
Lipton, M. 2000. Reviving the stalled
momentum of global poverty
r educt i on: what r ol e f or
genetically modified plants. 1999
Sir John Crawford Memorial
Lecture, CGIAR International
Cent r es Week, CGI AR
Secretariat.
Losey, J. E., Raynor, L. S. e Carter M.
E. 1999: Transgenic pollen harms
monarch larvae. Nature 399: 214.
Mace, G. M. 2000. Its time to work
together and stop duplicating
conservation efforts. Nature 405:
393.
MacIlvain, C. 1999. Access issues
may determine whether agri-
biotech will help the worlds
poor. Nature 402: 341-345.
Mahoney, R. J. 2000. Opportunity
for agricultural biotechnology.
Science 288: 615.
Manteo, N. 1998. Wild Biodiversity:
The Last Frontier? In: Yves, C. L.
e Bedford, B. M. Agricultural
Biotechnology in International
Devel opment . CABI
Publications.
Mepham, B. 2000. Ethics and novel
food: an analytical framework.
In: First European Congress on
Agriculture and Food Ethics,
Wageningen, March 4-6, 2000.
Mikkelsen, T. R., Andersen, B. e
Jorgensen, R. B. 1996: The risk
of transgene spread. Nature 380:
31.
Myers, N. et al. 2000. Biodiversity
Hotspots for Conservati on
Priorities. Nature 403: 853-858.
Naylor, R. L. et al. 2000. Effect of
aquaculture on world fish
supplies. Nature 405: 1017-1024.
Ndi r i t u, C. G. 2000. Kenya,
Biotechnology in Africa: Why the
controversy? In: Persley, G. J. e
Lanti n, M. M. Agri cul tural
Biotechnology and the Poor.
Consul t at i ve Gr oup on
I nt er nat i onal Agr i cul t ur al
Research. p 109-114.
Ni r aj , V. 1998. Si mi l ar i t i es,
connect i ons and syst ems.
Lexington Books. 192 p.
Normile, D. 2000. Monsanto donates
its share of golden rice. Science
289: 843-845.
Nuffield Council on Bioethics. 1999.
Genetically modified crops: the
ethical and social issues. 164 p.
Pimentel, D. 2000. Biological control
of invading species. Science 289:
869.
Pimm, S. L. e Raven, P. 2000.
Extinction by numbers. Nature
403: 843-845.
Pinstrup-Andersen, P. e Cohen, M. J.
2000. Modern Biotechnology for
food and agriculture: Risks and
opportunities for the poor. In:
Persley, G. J. e Lantin, M. M.
Agricultural Biotechnology and
the Poor. Consultative Group on
I nt er nat i onal Agr i cul t ur al
Research. p. 159-169.
Pinstrup-Andersen, P. e Pandya-Lorch,
R. 2000. Securing and sustaining
adequate world food production
for the third millennium. In: World
food security and sustainability:
The impact of biotechnology and
industrial consolidation. NABC
Report, 11.
Raven, P. H. Botanical Garden,
Missouri, Biotechnology and
Genetic Resources, US-EC Task
Force on Biotechnology Research,
1992.
Reichhardt, T. 2000. Will souped up
salmon sink or swim? Nature 406:
10-12
Sears M. M. University of Guelph,
Canada, press release January 4,
2000, M. K. Sears D. E. Stanley-
Horn H. R. Mattila March 2000:
Preliminary Report on the
Ecological Impact of BT Corn Pollen
on the Monarch Butterfly in Ontario
msears@evbhort.uoguelph.ca,
prepared for the Canadian Food
Inspect i on. Agency and
Environment Canada. ftp://
debate:friends@sgiserv.unibe.ch/
home/debate/Searsreport1.doc).
Sharma, M. 2000. Biotechnology
research and development. In:
Persley, G. J. e Lantin, M. M.
Agricultural Biotechnology and the
Poor. Consultative Group on
International Agricultural Research.
p. 51-57.
Six Academies Report on Agricultural
Biotechnology. Document 08/00
http://www.roalsoc.ac.uk/
Staley, J. T. 1997. Current opinion.
Biotechnology 8: 340-345.
Strong, D. R. e Pemberton, R. W. 2000.
Biological control of invading
species Risk and reform. Science
288: 1969-1970.
Sukopp, U. e Sukopp, H. 1993. Das
Modell der Einfhrung und
Einbrgerung nicht einheimischer
Arten - Ein Beitrag zur Diskussion
ber die Freisetzung gentechnisch
vernderter Arten. Gaia 2: 267-
288.
Syngenta International. Press release.
http://www.syngenta.com
Watkinson, C. R, Freckleton, R. P.,
Robinson, R. A. e Sutherland, W. J.
2000. Predictions of Biodiversity
response to genetically modified
herbicide tolerant crops. Science
289: 1554-1556.
Wolfe, M. S. 2000. Crop strength
through diversity. Nature 406:
681-682.
Ye, X., Al-Babili, S., Klti, A., Zhang,
J., Lucca, P., Beyer, P. e Potrykus,
I . 2000. Engi neer i ng t he
provitamin A (beta-carotene)
bi osynt het i c pat hway i nt o
(car ot enoi d- f r ee) r i ce
endosperm. Science 287: 303-
305.
Youyoung, Z., Harlu, C., Jinghua, F.
Yunyue, W. Yan, L., Jlanbing, C.,
Fan, J. X., Shisheng, Y., Lingping,
H., Hei, L., T. W., Mew, P. S.,
Teng, Zonghua Wang & Mundt
C. C. 2000. Genetic diversity and
disease control in rice. Nature
406: 718-722.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 29
Edio especial
Maurcio Antnio Lopes
Eng. Agrnomo, Ph.D., Pesquisador da Embrapa
Recursos Genticos e Biotecnologia.
mlopes@cenargen.embrapa.br
Luciano Loureno Nass
Eng. Agrnomo, Ph.D., Pesquisador da Embrapa
Recursos Genticos e Biotecnologia.
llnass@cenargen.embrapa.br
Itamar Soares de Melo
Eng. Agrnomo, Ph. D., Pesquisador da Embrapa
Meio Ambiente.
itamar@cnpma.embrapa.br
Imagens cedidas pelos autores
BIOPROSPECO
1. Introduo
busca do desenvolvi-
mento sustentvel re-
presenta um dos maio-
res desafios para a hu-
manidade e, em espe-
cial, para o Brasil. Ao longo de
sculos, o modelo de desenvolvi-
mento no pas tem evoludo do
extrativismo e da agricultura de sub-
sistncia para uma explorao
agroindustrial intensa, com a aplica-
o de tecnologias modernas e, em
muitos casos, com ocupao e utili-
zao desordenada dos recursos do
ambiente, o que coloca em risco a
nossa rica biodiversidade.
Apesar de o desenvolvimento
de um setor agroindustrial pujante e
moderno, ainda ocorrem no pas as
queimadas, provocadas e espont-
neas, que consomem grandes reas
de cobertura vegetal, alm de aes
antrpicas diversas que provocam
degradao do solo e dos recursos
hdricos, reduo progressiva da ve-
getao nativa de diversos biomas,
em especial a Floresta Atlntica, o
Semi-rido, o Cerrado e a Amaznia,
a maior floresta mida do planeta,
que abriga um percentual significati-
vo da diversidade biolgica conheci-
da e porcentagem ainda maior das
reservas de gua doce do planeta.
O Brasil rene em seu territrio
ent re 15% e 20% de t oda a
biodiversidade mundial, o que lhe
confere o ttulo de pas megadiverso.
So 55 mil espcies vegetais, ou
22% do total mundial, 524 mamfe-
ros (dos quais 131 endmicos), 517
anfbios (294 endmicos), 1622 aves
(191 endmicas) e 468 rpteis (172
endmicos), 3 mil espcies de pei-
xes de gua doce (ou trs vezes mais
que qualquer outro pas), provavel-
mente entre 10 e 15 milhes de
espcies de insetos (muitas famlias
ainda no catalogadas), alm de des-
conhecida riqueza de microrganis-
mos, abrangendo imensa diversida-
de de espcies e de populaes
dentro de cada espcie, alm de
grande diversidade de interaes
entre espcies em cada ecossistema.
Globalmente, aproximadamen-
te 1,7 milhes de organismos tm
sido identificados. Contudo, o co-
nhecimento sobre a riqueza de es-
pcies incompleto, especialmente
nos trpicos. Estimativas conserva-
doras com relao ao nmero de
espcies ainda no descritas nos tr-
picos podem chegar a 30 50 mi-
lhes de espcies. Da a necessidade
premente da conservao dos gran-
des biomas da Terra, pois quase
todas as espcies que outrora vive-
ram sobre o nosso planeta esto hoje
extintas.
Para o Brasil, a Conveno sobre
Diversidade Biolgica (CDB), de
1992, foi um marco para novas abor-
dagens polticas, econmicas e tc-
nicas relacionadas ao acesso e utili-
zao sust ent vel dest a r i ca
biodiversidade. A Conveno tem
mot i vado gr ande debat e e
mobilizao pblica, individual e co-
letiva, em relao diversidade bio-
lgica, tornando-se tema de preocu-
pao central no pas na ltima dca-
da. A Conveno determina que a
diversidade biolgica, alm de preo-
cupao comum da humanidade,
Meio ambiente
Biotecnologia aplicada a prospeco e uso de servios e funes da biodiversidade
30 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
patrimnio de cada pas onde ocor-
re, sendo seu uso sujeito a sua legis-
lao, o que tem ensejado a discus-
so e a definio de arcabouos le-
gais e normativos para regulao do
seu acesso, compartilhamento e uso
em diversos pases, incluindo o Bra-
sil.
A principal nfase deste novo
cdigo de uso da biodiversidade a
conservao e o seu aproveitamen-
to sustentvel, atravs da regula-
mentao do seu acesso, compreen-
dendo modelos e formas de contra-
tos, que reconheam direitos de pro-
priedade intelectual ou formas alter-
nativas de proteo do conhecimen-
to associado, incluindo aqueles rela-
tivos aos conhecimentos tradicionais.
A grande nfase na discusso deste
arcabouo legal para regulao do
acesso e uso da biodiversidade no
Brasil se situa geralmente na viso
de que a Biodiversidade nacional
uma imensa riqueza inexplorada ou
um grande potencial de oportunida-
des econmicas para os setores far-
macutico, agroindustrial, biotecno-
lgico, etc, o que sem dvida
verdadeiro.
No entanto, h que se conside-
rar que, a despeito do potencial eco-
nmi co r epr esent ado pel a
biodiversidade, o foco central da CDB
foi a busca de formas de contraposio
ao problema global causado pela
Figura 1. Bancos de Caracteres e Funes viabilizam o acesso variabilidade gentica de espcies silvestres, variedades
tradicionais e colees ex-situ, visando organizao de acervos de recursos de interesse do melhoramento gentico e
da biotecnologia. Estes acervos so constitudos por populaes, linhas endogmicas e suas prognies, que expressem
de diferentes maneiras caracteres ou funes biolgicas de interesse (gentipos constrastantes, populaes segregantes,
linhas recombinantes etc.) sendo teis para introgresso de variabilidade aos programas de seleo, bem como para
produo de estoques apropriados para estudos detalhados (gentico-fisiolgico-moleculares) das bases biolgicas desses
caracteres ou funes. Segundo este modelo, pode-se criar repositrios de variabilidade til aos programas de
melhoramento gentico, prospeco de genes e estudos das bases biolgicas de processos importantes como tolerncia/
resistncia a estresses biticos e abiticos ou programas de diversificao de uso e agregao de valor como
desenvolvimento de novos alimentos, matrias-primas e biomateriais aplicveis a diversos ramos dos setores agroalimentar
e agroindustrial.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 31
perda acelerada da biodiversidade e
suas conseqncias diretas e indire-
tas, como a degradao do solo e da
gua, o aquecimento global com a
conseqente intensificao de
estresses hdricos, trmicos e
nutricionais, alm de outros perigo-
sos riscos ambientais, como a perda
da diversidade de vida, que certa-
mente colocam sob risco a prpria
sustentabilidade da civilizao.
Considerando este objeto cen-
tral da CDB, grande parte das ativi-
dades econmicas hoje desenvolvi-
das em diversos setores, como o
ext r at i vi st a, o i ndust r i al , o
agroindustrial etc., devero ser gra-
dualmente reconvertidas a modelos
mais sustentveis de explorao dos
recursos naturais. O grande desafio
, portanto, a antecipao de alter-
nativas, especialmente no campo
tecnolgico, alm da implementao
de polticas pblicas e mecanismos
de gesto que viabilizem estratgias
de acesso e uso sustentvel dos
recursos naturais para suporte a ati-
vidades essenciais para o bem-estar
e o progresso do homem, como a
agricultura, a minerao, o lazer
etc.
2. Sustentabilidade da
Agricultura
Recursos chaves para produo
de alimentos (sementes, solo, mat-
ria orgnica, gua etc.) so renovveis,
o que potencialmente permitiria que
a agricultura fosse uma atividade al-
tamente sustentvel. Por outro lado,
a agricultura moderna tem outras
caractersticas que mais a aproxi-
mam de uma indstria extrativa, si-
milar, por exemplo, minerao, o
que tende a torn-la no sustentvel.
Adicionalmente, a agricultura pode
envolver custos no ambientais de
longo prazo, como impactos para os
trabalhadores, comunidades, regies
e consumidores, em diferentes graus,
de acordo com a atividade.
Apesar de os grandes avanos
tecnolgicos das ltimas dcadas, eles
tm sido ainda tmidos para superar
o desafio de tornar a agricultura e
atividades associadas, como um todo,
mais sustentveis. Hoje vivemos a
necessidade premente de produzir
volumes crescentes de alimentos e
matrias-primas e de gerar supervits
econmicos que aumentem a capa-
cidade de investimentos do pas.
No h dvidas que o agronegcio
brasileiro se definir, cada vez mais,
pela nossa capacidade de incorpo-
rar, de forma contnua, inovaes
tecnolgicas que permitam atender
s crescentes demandas do mercado
interno e desafiar os subsdios dos
competidores e a tendncia histrica
de preos decrescentes no mercado
internacional de produtos agrcolas.
Em futuro prximo, as inovaes
demandadas da pesqui sa
agropecuria tero que propiciar a
incorporao de avanos simultne-
os nas vertentes da produtividade e
da qualidade, com uma velocidade
comparvel ou superior velocida-
de de avano tecnolgico dos nossos
competidores.
Esta presso, que tender a se
intensificar no futuro, dada a voca-
o agrcola do pas, submete a nos-
sa agricultura, que tem sido o setor
mais responsivo da economia brasi-
leira durante a ltima dcada, a uma
presso de crescimento e expanso
pouco compatveis com as deman-
das de tempo e esforo na direo
de modelos mais sustentveis de
produo. , portanto, difcil imagi-
nar que os avanos tecnolgicos ba-
Figura 2. Vertentes de inovao da biotecnologia moderna. A biotecnologia moderna tem gerado impactos significativos
a partir: a) da gentica molecular, baseada na utilizao de marcadores para desenvolvimento de mapas genticos, kits e
ferramentas para anlises moleculares detalhadas; b) engenharia gentica para produo de organismos modificados para
funes e caracteres de interesse econmico, social e ambiental; c) das cincias genmicas que permitem compreenso
da composio e funcionamento de genomas completos, seus produtos, interaes e funes; d) das tecnologias
reprodutivas avanadas, que permitem potencializar e especializar sistemas de produo animal para diversos fins. O
avano nessas grandes vertentes de inovao tem provocado ainda o surgimento de diversas disciplinas e tecnologias
assessrias, como a bioinformtica, a biossegurana etc.
32 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
seados nas estratgias convencio-
nais de inovao nos permitiro dar
grandes saltos em direo a sistemas
sustentveis em curto espao de
tempo.
Modelos de reconverso deve-
ro ser buscados, muitas vezes sus-
tentados em solues do prprio
ambiente, que aplicadas a estas ati-
vidades, as tornem menos agressi-
vas. Em certa medida, a agricultura
brasileira d exemplos da possibili-
dade de se alcanar tal objetivo. A
utilizao do manejo de culturas ba-
seado no plantio direto ocupa, no
Brasil, cerca de 20 milhes de hecta-
res de lavouras, com expressiva con-
tribuio para reduo de eroso,
melhoria geral da qualidade do solo
e recarga do lenol fretico. A fixa-
o biolgica do nitrognio, atravs
da i nocul ao de bact r i as
diazotrficas, tem possibilitado a re-
duo significativa da aplicao de
fertilizantes qumicos em culturas
como a soja e, mais recentemente,
cana-de-acar, com importante re-
duo de impactos ambientais como,
por exemplo, a contaminao de
recursos hdricos por nitratos. O con-
trole biolgico utilizado regularmen-
te em diversas culturas, como soja,
cana-de-acar, algodo e fruteiras
tambm tem reduzido a demanda
por controle qumico de pragas e
doenas em diversos sistemas de
manejo, com impactos positivos para
o meio ambiente, a qualidade de
vida dos trabalhadores rurais e para a
segurana e qualidade dos produtos.
Azevedo (1998) destacou a impor-
tncia do emprego do controle bio-
lgico em pases de clima tropical e
com vastas reas plantadas como
caso do Brasil. O autor ressaltou,
ainda, que o pas tem um bom con-
tingente de pesquisadores envolvi-
dos em controle biolgico e detm
quase que uma supremacia no setor
tanto em termos de pesquisa bsica
como principalmente aplicada.
H, no entanto, que se conside-
rar que, pela diversidade e comple-
xidade da agricultura brasileira, estes
avanos, embora relevantes, dificil-
ment e bast ar o par a mel hor
posicionar a atividade do ponto de
vista de sustentabilidade. Quando
se avalia o conjunto da agricultura
brasileira, h claras evidncias de
que as tecnologias tradicionais, con-
sagradas na chamada Revoluo Ver-
de, j no resolvem todos os proble-
mas e cobram um alto preo em
termos de qualidade ambiental e de
sade humana, especialmente pelo
uso crescente de insumos qumicos.
A taxa de crescimento mdio no
rendimento das safras, por exemplo,
caiu de 3% ao ano na dcada de 70
para cerca de 1% ao ano na dcada
de 90, indicando a gradual exausto
deste modelo.
3. Agroecossistemas,
Biodiversidade e Servios
Ambientais
A grande presso da agricultura
sobre o meio ambiente indica que
precisamos buscar um novo patamar
de conheci ment o, um novo
paradigma cientfico e tecnolgico,
a fim de romper estes limites, em
especial na regio tropical do globo,
onde esto os ambientes mais desa-
fiadores para a agricultura, alm das
naes mais pobres. Os sistemas de
inovao para agricultura tero, cada
vez mais, que se referenciarem em
aspectos que compreendam, alm
da viso utilitria da agricultura, como
produtora de alimentos e matrias-
primas essenciais para a sobrevivn-
cia e progresso do homem, outras
dimenses e valores.
Em 1998, a FAO realizou em
conjunto com a Secretaria Executiva
da CDB e o Governo da Holanda um
encontro tcni co denomi nado
Sustaining Agricultural Biodiversity
and Agro-ecosystem Functions
quando foram discutidas oportunida-
des, incentivos e estratgias para
conservao e uso sustentvel da
biodiversidade em agroecossistemas.
Considerando as discusses ocorri-
das no evento, o documento final
apresentou uma srie de recomen-
daes importantes, dentre as quais
se destacou a necessidade de se
ampliar a compreenso de que
biodiversidade agrcola engloba gran-
de diversidade de animais, plantas e
microrganismos, necessrios para
manuteno de funes vitais dos
agroecossistemas, sua estrutura e pro-
cessos que suportam a produo de
alimentos e matrias-primas vitais
para a humanidade. Trs dimenses
da agrobiodiversidade foram apre-
sentadas como teis para estruturao
de futuros programas e planos:
1. Sustentabilidade dos sistemas
produtivos em todos os nveis, com
nfase em diversidade, contrapondo
a viso de homogeneizao e
massificao de sistemas;
2. nfase na conservao e
melhoria dos recursos biolgicos que
suportam os sistemas de produo,
especialmente o solo e a microbiota,
os polinizadores e predadores;
3. Reconhecimento, recuperao
e incorporao aos sistemas produti-
vos dos servios ecolgicos e sociais
dos agroecossistemas, como prote-
o da paisagem e da vida selvagem,
proteo do solo e promoo de sua
qualidade (fertilidade, estrutura e fun-
es), pr ot eo dos ci cl os
hidrolgicos, da qualidade do ar, se-
questro de carbono etc.
O encorajamento da manuten-
o, da sust ent abi l i dade e a
dinamizao da diversidade biolgi-
ca em todos os sistemas de produo
agrcola, dos diversificados aos
especializados, intensivos ou exten-
sivos uma necessidade. premen-
te que se reconhea a intedepen-
dncia entre plantas e animais que
se colhem dos sistemas produtivos
com a intrincada teia de organismos
e sistemas que provem suporte
biolgico e servios ambientais vi-
tais para o funcionamento desses
sistemas.
Assim, melhorar a integrao e a
coordenao das atividades e pro-
cessos que sustentam a diversidade
biolgica em agroecossistemas, sua
produtividade e o provimento das
funes e servios ambientais deles
provenientes so fundamentais para
que se alcance e se mantenha a
sustentabilidade dos agroecossis-
temas. A valorao desses recursos,
com diretrizes para prospectar e
potencializar servios e funes
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 33
como balano de gases atmosfri-
cos, regulao do clima, regulao
dos ciclos hidrolgicos, controle de
eroso, formao e qualidade do solo,
detoxificao/eliminao de resdu-
os, polinizao, controle biolgico,
refgio, produo de alimentos se-
guros, desenvolvimento de novas
fontes de biomateriais, suporte para
culturas e valores, incluindo valores
estticos e espirituais, alm de opor-
tunidades para recreao, lazer e
turismo, um grande desafio a ser
encarado e superado, em especial
pelas organizaes de cincia e
tecnologia agropecuria.
4. Biotecnologia Aplicada
Prospeco e Uso de Servios e
Funes da Biodiversidade
A revoluo na base de conheci-
mentos dos sistemas biolgicos a
partir da biotecnologia moderna vem
gerando novas e fascinantes oportu-
nidades de inovao nas reas da
sade, agricultura, meio ambiente,
alm de grandes avanos na base de
conhecimentos no mbito das cin-
cias da vida (life sciences). Este um
movimento global, e o acervo de
conhecimentos sobre organismos
vivos vem estimulando o desenvol-
vimento de novas vertentes de ino-
vao como a genmi ca, a
bioinformtica, a engenharia meta-
blica etc., alm de novas aplicaes
de processos e funes biolgicas
nos mais variados campos da ativida-
de humana, com profundas implica-
es econmicas e sociais.
Apesar de as atenes estarem
muito centradas na produo e no
uso de plantas geneticamente modi-
ficadas na agricultura, as implicaes
e impactos das diversas vertentes de
i novao que compem a
biotecnologia moderna vo muito
alm da transgenia.
Com o seqenciamento com-
pleto de genomas de diversos orga-
nismos, expandem-se as possibilida-
des no campo da genmica compa-
rativa, que faz uso das similaridades,
muitas vezes significativa, existen-
tes entre espcies. Conhecimentos
gerados por estudos de espcies
bastante distintas, como por exem-
plo o camundongo, tambm contri-
buem para a compreenso da orga-
nizao e do funcionamento do
genoma humano, enquanto espci-
es mais relacionadas, como o arroz,
sorgo, milho, trigo e outras gramneas
apresentam similaridades surpreen-
dentes em organizao genmica,
seqncias e funes gnicas. As-
sim, com os novos recursos e tcni-
cas baseadas em manipulao gnica
e transgenia, um novo universo se
abre para identificao de nova vari-
abilidade que, ordenada, estudada e
definida como til, poderia ser
transferida s espcies de interesse
por meio de transformao gentica.
O acmulo de informaes de
dados de seqncia de DNA e de
mapeamento de genes no genoma
de diferentes espcies vegetais evi-
denciou a conservao de genes e
da ordem de genes no genoma de
diferentes organismos. Recentes
avanos da gentica molecular e da
genmica vm permitindo a identifi-
cao em espcies com genoma
menos complexo, principalmente
naquelas que tiveram o genoma com-
pletamente seqenciado como o ar-
roz e arabidopsis, genes ou regies
genmicas associadas ao controle de
caractersticas econmicas. Por meio
da genmica comparativa possvel
identificar em espcies com genomas
mais complexos (ex., milho e trigo)
regies ortlogas com funo gnica
similar, acelerando o conhecimento
bsico e facilitando o trabalho com
outras espcies. Estes avanos tm
estimulado o desenvolvimento de
programas inovadores na interface
Recursos Genticos-Biodiversidade-
Biotecnologia, onde residem possi-
bilidades extraordinrias para se
prospectar servios & funes que
possam ser integrados agricultura,
tornando-a mais competitiva, segura
e sustentvel. Alm de aumentar as
possibilidades de utilizao dos aces-
sos mant i dos nos bancos de
germoplasma, intensificando os es-
foros de caracterizao e desenvol-
vimento de acervos de variabilidade
para o melhoramento gentico e
programas de bioprospeco, a
integrao da genmica aos progra-
mas de recursos genti cos e
melhroramento permite acesso a um
novo acervo de caracteres da
biodiversidade, antes inacessvel.
Hoje, programas de pesquisa que
integram estratgias tradicionais,
como o melhoramento gentico e a
genmica comparativa buscam iden-
tificar, manipular e validar a expres-
so de diferentes genes de impor-
tncia econmica e ambiental, cul-
minando no desenvolvimento de
novos recursos genticos com um
valor agregado potencial muito mai-
or do que os disponveis.
5. Bancos de Caracteres para
Prospeco e Uso de Servios e
Funes da Biodiversidade
Conforme aumenta o interesse
por diversificao e agregao de
valor agricultura, na forma de no-
vos alimentos, fibras, aromas e
biomateriais aplicveis a diversos
ramos industriais, alm de caracteres
e funes que agreguem segurana
ambiental e sustentabilidade aos sis-
temas produtivos, o interesse do
melhoramento gentico se voltar
i nevi t avel ment e par a a
biodiversidade, buscando-se diversi-
ficao de espcies, sistemas e pro-
cessos. Adequadamente estudadas
e conhecidas, muitas funes biol-
gicas importantes podero gradual-
mente ser incorporadas s espcies
de interesse. Assim, caracteres s
vezes pouco considerados no mbi-
to dos programas de melhoramento
gentico, como aqueles relaciona-
dos qualidade ambiental, devero
despertar cada vez mais interesse,
em funo da mobilizao da socie-
dade por um ambiente mais limpo,
alm do crescimento das barreiras
no tarifrias, que imporo penalida-
des aos nossos produtos e processos,
caso no levem em conta critrios e
prticas ambientalmente seguros. A
busca de funes que tenham im-
pacto positivo em processos como
regulao da composio qumica da
atmosfera, regulao do clima, ab-
soro e reciclagem de resduos, su-
primento de gua, ciclo de nutrien-
tes, polinizao e controle biolgico,
dentre outros, se tornar mais inten-
sa na medida em que cresam os
34 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
impactos das atividades do homem
sobre o meio fsico, com a conse-
qente reduo na disponibilidade
de recursos. Neste cenrio, o melho-
ramento gentico combinado
biotecnologia poder se tornar im-
portante estratgia de descoberta e
disponibilizao de funes biolgi-
cas viabilizadoras de uma agricultura
mais sustentvel.
Os programas de pr-melhora-
mento podem se tornar, alm de elo
de ligao entre os recursos genti-
cos vegetais e o melhoramento ge-
ntico, uma importante estratgia
de ligao destes com os programas
biotecnolgicos, em especial aque-
les dedicados genmica compara-
tiva. Considerando que o principal
objetivo dos programas de pr-me-
lhoramento buscar a identificao
de genes e/ou caractersticas de in-
teresse em germoplasma extico ou
em populaes no melhoradas para
incorporao em materiais elites, eles
podero se tornar importantes fon-
tes de variabilidade para composi-
o de Bancos de Caracteres e
Funes para os mais variados ob-
jetivos (Figura 1). Na verdade, para
funes biolgicas com variabilidade
gentica insuficiente, composio de
Bancos de Caracteres a partir dos
materiais elite poder ser invivel,
havendo necessidade da busca de
variabilidade em parentes silvestres,
raas locais (landraces), ou mesmo
em outras espcies do mesmo pool
gnico e, em casos mais extremos,
em espcies completamente distan-
tes filogeneticamente. A existncia
de tais bancos abrir oportunidades
extraordinrias para se prospectar
servios & funes que possam ser
integrados agricultura, tornando-a
mais competitiva, segura e sustent-
vel. Alm do mais, os bancos de
caracteres ampliariam a possibilida-
de de se aumentar a utilizao dos
acessos mantidos nos bancos de
germoplasma, intensificando os es-
foros de caracterizao e desenvol-
vimento de acervos de variabilidade
para o melhoramento gentico e
programas de bioprospeco (Figu-
ra 1).
O conceito de Bancos de
Caracteres se baseia no fato de que
estudos de mecanismos e funes
biolgicas so extremamente depen-
dentes de tcnicas de screening e
seleo de gentipos teis, de pre-
ferncia gentipos contrastantes que
permitiriam a gerao de popula-
es estruturadas para estudos deta-
lhados dos caracteres em questo.
Os melhoristas trabalham continua-
mente com screening e seleo,
muito embora no seja usual os pro-
gramas identificarem e manterem
gentipos constrastantes. Indivdu-
os com desempenho inadequado
para o carter em questo so usual-
mente descartados ao longo das v-
rias etapas do processo. No entanto,
para organizao de Bancos de
Caracteres, h necessidade de se
identificar padres reconhecidamen-
te contrastantes, na forma de popu-
l aes, l i nhagens ou out r os
gentipos de interesse, que so es-
senciais para desenvolvimento de
conjuntos de prognies segregantes
(r ecombi nant es) F
2
, F
3
, F
4
,
retrocruzamentos na direo dos dois
genitores e, quando desejvel, con-
juntos de linhas recombinantes. A
exi st nci a desses acervos de
recombinantes poder viabilizar pro-
gressos considerveis no estudo de
caracteres complexos, utilizando os
modernos recursos disponveis para
mapeamento e estudos funcionais.
Linhas recombinantes so acer-
vos especialmente desejveis na
composio de Bancos de Caracteres.
Estas linhas endogmicas so produ-
zidas por meio de sucessivas
autofecundaes de indivduos F
2
,
oriundos de um cruzamento entre
duas linhagens divergentes e com
caractersticas bem definidas. Os in-
divduos (S
1
) provenientes de cada
autofecundao de indivduos F
2
contm cerca da metade dos genes
em homozigose em relao gera-
o anterior. Aps certo nmero de
geraes de autofecundao (single
seed descent ), cada l i nha
recombinante ter teoricamente,
aproximadamente 100% dos alelos
dos genitores em homozigose e fixa-
dos aleatoriamente. Quanto maior o
nmer o de pr ogni es F
2
autofecundadas, maiores sero as
combinaes de genes dos genitores,
permitindo anlises detalhadas de
mltiplas combinaes de genes e
QTLs (Quantitative Traits Loci) en-
volvidos na definio de caracteres
complexos. Em relao a outros ti-
pos de prognies segregantes como
F
2
, F
3
e retrocruzamentos, as linhas
recombinantes apresentam como
principal vantagem o fato de consti-
turem uma populao permanente,
na qual o processo de segregao
completo ou quase completo, man-
tendo indefinidamente sua compo-
sio gnica para estudos detalhados
do carter em questo. Em adio,
linhagens recombinantes podem ser
avaliadas em condies diferentes
de ambientes. Desde que um
gentipo representado por uma
linhagem, ao invs de um indivduo
heterozigoto, avaliaes mais preci-
sas dos componentes genticos de
caracteres mais complexos podero
ser realizadas com vantagem nesses
gentipos. Uma desvantagem das
linhas recombinantes o fato de
que, sendo homozigotas, podero
limitar a avaliao do impacto da
heterozigose e da heterose na ex-
presso de determinados caracteres.
Tambm, a depender do modo de
reproduo da espcie, pode ser
difcil produzir tais linhas em quanti-
dades suficientes.
Muito embora o esforo tradici-
onal em recursos genticos vegetais
seja direcionado produo de
insumos teis ao melhoramento ge-
ntico, h possibilidades de se am-
pliar a utilidade desses acervos, de
forma a incluir de forma mais eficien-
te outros potenciais usurios, como
os programas de bioprospeco e
descoberta de genes e funes bio-
lgicas de interesse. Com o avano
nas tecnologias que permitem anli-
ses gent i cas det al hadas,
fenotipagem eficiente via anlises
fisiolgicas e bioqumicas, alm de
genotipagem de alta resoluo via
tcnicas moleculares, amplia-se tre-
mendamente a nossa capaciade de
extrair mais valor dos recursos gen-
ticos, aumentando a produtividade
dos acervos dos Bancos Ativos de
Germoplasma (BAGs) e das cole-
es de trabalho dos programas de
melhoramento. Hoje existem mi-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 35
lhares de genes de vrios organis-
mos seqenciados cuja funo biol-
gica precisa ser determinada. A dis-
ponibilidade de recursos genticos
vegetais adequadamente caracteri-
zados e organizados e a capacidade
de determinao massiva da funo
de um grande nmero desses genes
abre possibilidade para avanos sig-
nificativos no campo da genmica
comparativa e funcional. Uma
tecnologia para caracterizao dos
nveis de expresso de grande n-
mero de genes que vem ganhando
dest aque a t ecnol ogi a de
microarrays ou microarranjos. A
tecnologia de microarranjos de DNA
baseada em clones de DNAs que
so roboticamente fixados em pla-
cas de vidro e subseqentemente
hibridizados com sondas marcadas
com diferentes tipos de fluorescncia.
Essa metodologia tem auxiliado a
anlise funcional de um grande n-
mero de genes em um curto espao
de tempo e poder gerar grandes
volumes de informaes teis acer-
ca de caracteres complexos, especi-
almente se Bancos de Caracteres e
colees de mutantes adequadamen-
te organizados proverem os fentipos
e gent i pos adequados para
anlises.
6. Concluses
Diferentemente dos grandes
produtores de alimentos localizados
em regies de clima temperado, o
Brasil apresenta a maior parte do seu
territrio marcado por grande frag-
mentao ambiental, com marcantes
diferenas edafoclimticas, estrutura
fundiria complexa e padres de
utilizao tecnolgica, de infra-es-
trutura e logstica bastante dspares.
Apesar disso o Brasil lder mundial
na produo agropecuria tropical,
tanto com respeito diversidade da
produo quanto produtividade e
eficincia do sistema agroindustrial.
O Brasil vem experimentando nos
ltimos anos contnuos aumentos de
produtividade em praticamente to-
das as culturas de importncia estra-
tgica, culminando com os avanos
extraordinrios observados nas lti-
mas safras, quando a produo de
gros rapidamente superou a barrei-
ra dos 100 milhes de toneladas. Na
ltima dcada a produtividade das
principais commodities mais que
dobrou, o que tem evitado avano
desordenado sobre regies sensveis
do ponto de vista ambiental; os avan-
os em melhoramento gentico,
manejo integrado de pragas, em
manejo de solos, nutrientes e cultu-
ras de acordo com a l gi ca
conservacionista do plantio direto
tm sido fatores importantes na
viabilizao de uma agricultura mais
sustentvel com reduo na utiliza-
o de agroqumicos e de prticas
que l evem degradao ou
fragilizao da nossa base de recur-
sos naturais.
Conforme aumenta o interesse
por diversificao e agregao de
valor agricultura, na forma de no-
vos alimentos, fibras, aromas e
biomateriais aplicveis a diversos
ramos industriais, o interesse do
melhoramento gentico se voltar
i nevi t avel ment e par a a
biodiversidade, buscando-se diversi-
ficao de espcies, sistemas e pro-
cessos. Adequadamente estudadas
e conhecidas, muitas funes biol-
gicas importantes podero gradual-
mente ser incorporadas s espcies
de interesse. Por outro lado,
caracteres s vezes pouco conside-
rados no mbito dos programas de
melhoramento gentico, como aque-
l es rel aci onados a qual i dade
ambiental, devero despertar cada
vez mais interesse, em funo da
mobilizao da sociedade por um
ambiente mais limpo, alm de bar-
reiras no tarifrias, que imporo pe-
nalidades aos nossos produtos, caso
no sejam produzidos de acordo com
critrios e prticas ambientalmente
seguros. Assim, a busca de funes
que tenham impacto positivo em
processos como regulao da com-
posio qumica da atmosfera,
regulao do clima, absoro e
reciclagem de resduos, suprimento
de gua, ciclo de nutrientes,
polinizao e controle biolgico,
dentre outros se tornar mais intensa
na medida em que cresam os im-
pactos das atividades do homem
sobr e o mei o f si co, com a
consequent e r eduo na
disponbilidade de recursos. Neste
cenrio, espera-se que a combina-
o de estratgias da biotecnologia
moderna com as estratgias tradici-
onais de inovao tecnolgica para a
agricultura, como o melhoramento
gentico, o controle biolgico e ou-
tras, se torne o caminho para desco-
berta e incorporao de funes bi-
olgicas viabilizadoras de uma agri-
cultura mais sustentvel.
Literatura consultada
Duvi ck, D. N. 1990. Genet i c
enhancement and pl ant
breeding. In: J. Janick; Simon, J.E.
(Ed.) Advances in new crops.
Timber Press, Portland, OR. P.90-
96.
Lopes, M. A. 1999. Banco de
Caracteres: Desenvolvimento de
Recursos Genticos Utilizveis
na Investigao de Mecanismos
de Controle de Caracteres de
Importncia Econmica em Mi-
lho. Embrapa Milho e Sorgo, 13
pp. (manuscrito no publicado).
Lopes, M.A. 2002. Biodiveridade e
Biotecnologia. In: Anais da Con-
ferncia Nacional de Cincia,
Tecnologia & Inovao - Tema:
Desafios Estratgicos, Simpsio
3: Bi odi ver si dade e
Biotecnologia. Revista Parcerias
Estratgicas. Ministrio da Cin-
cia e Tecnologia - MCT.
Nass, L.L.; Paterniani, E. 2000. Pre-
breeding: a link between genetic
resources and maize breeding.
Scientia Agricola, v.57, p.581-
587.
Nass, L.L.; Valois, A.C.C.; Melo, I.S.;
Valadares-Inglis, M.C. 2001. (Ed.)
Recursos genticos e melhora-
mento plantas. Rondonpolis,
MT - Fundao MT. 1183p.
World Resources Institute. 1992.
World resources 1992-93: an
assessment of the resource base
t hat suppor t s t he gl obal
economy. New York: WRI.
36 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Meio ambiente
Christine Claire Gaylarde
Microbiologista, M.Sc., Ph.D., Profa. do Depto. de
Biofsica, UFRGS
cgaylarde@yahoo.com
BIORREMEDIAO
Biorremediao um processo
no qual organismos vivos, normal-
mente plantas ou microrganismos,
so utilizados tecnologicamente para
remover ou reduzir (remediar)
poluentes no ambiente. Este proces-
so biotecnolgico de remediao tem
sido intensamente pesquisado e re-
comendado pela comunidade cient-
fica atual como uma alternativa vi-
vel para o tratamento de ambientes
contaminados, tais como guas su-
perficiais, subterrneas e solos, alm
de resduos e efluentes industriais
em aterro ou reas de conteno.
Embora outras tecnologias que usam
processos fsicos e/ou qumicos se-
j am t ambm i ndi cadas par a
descontaminar ambientes poludos,
o pr ocesso bi ol gi co de
biorremediao uma alternativa
ecologicamente mais adequada e
eficaz para o tratamento de ambien-
tes contaminados com molculas or-
gnicas de difcil degradao e me-
tais txicos.
As molculas orgnicas de difcil
degradao, denominadas recalci-
trantes, podem ser de origem natu-
ral, sintetizadas pelo metabolismo
biolgico, ou sintticas, produzidas
por tecnologias industriais modernas
e estranhas ao ambiente natural,
por est a r azo denomi nadas
xenobiticas (xenos, do grego =
est rangei ro). Est as mol cul as
xenobiticas, introduzidas no ambi-
ente desde o incio do sculo XX,
compreendem vrios tipos de com-
postos, aplicados na industria qumi-
ca e de mat eri ai s, t al como
agrotxicos, corantes, frmacos,
polmeros e plsticos, podendo ser
txicas a sistemas biolgicos e/ou
recalcitrantes, uma vez que no fa-
zem parte do conjunto de molculas
produzi das pel o metabol i smo
evolutivo que propicia a vida na
Terra. Muitos dos xenobiticos e/ou
seus produtos de degradao resul-
tam em efeitos nocivos e/ou
mutagnicos aos organismos vivos,
podendo levar eliminao seletiva
de indivduos e acarretar modifica-
es na estrutura ecolgica e funcio-
nal da comunidade biolgica.
Por estas razes h, atualmente,
uma grande preocupao em se
desenvolverem biotecnologias para
descontaminar ambientes poludos
por xenobiticos. Os processos bio-
lgicos de descontaminao, enqua-
drados na categoria de biorreme-
diao, utilizam, geralmente, micror-
ganismos autctones (do prprio
ambiente) ou introduzidos (em esta-
do nativo ou geneticamente modifi-
cados) com capacidade de bio-
degradar xenobiticos, resultando em
produtos de degradao com estru-
tura menos recalcitrante em relao
Maria De Lourdes Bellinaso
Bioqumica, M.Sc., Ph.D., Profa. do Depto. de Biologia
e Qumica, UNIJU
malou@cpovo.net
Gilson Paulo Manfio
Bilogo, M.Sc., Ph.D., Pesquisador da Natura
Inovao e Tecnologia em Produtos Ltda
gilsonmanfio@natura.net
mol cul a or i gi nal , ou na
mineralizao do xenobitico, pro-
duzindo compostos qumicos sim-
ples, como: CO
2
, H
2
O, NH
3
, SO
4
-2
,
PO
4
-2
.
Biodegradao dos
xenobiticos
O sistema metablico que se
tem mostrado mais apto para
biodegradar molculas xenobiticas
recalcitrantes, nos processos de
biorremediao, o microbiano, uma
vez que os microrganismos desem-
penham a tarefa de reciclar a maior
parte das molculas da biosfera, par-
ticipando ativamente dos principais
ciclos biogeoqumicos e, represen-
tando, portanto, o suporte de manu-
teno da vida na Terra. Esta extraor-
dinria diversidade metablica se
deve combinao do potencial
gentico individual das diferentes
espcies microbianas em um siste-
ma natural, com enzimas e vias me-
tablicas que evoluram ao longo de
bilhes de anos, e a capacidade de
metabolismo integrado apresentada
pela comunidade microbiana em
conjunto: produtos do metabolismo
de um microrganismo pode ser
substrato para outros. Este intenso
sinergismo metablico entre micror-
ganismos, praticamente ausente nos
organismos mais complexos, de
f undament al i mpor t nci a na
biodegradao de xenobiticos. Mui-
tos fatores ambientais de natureza
fsica, qumica e biolgica influenci-
am na capacidade de um sistema
microbiano de biodegradar uma
Aspctos biolgicos e tcnicos da biorremediao de xenobiticos
Imagens cedidas pelos autores
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 37
molcula.
Fatores fsicos e qumicos
Os principais parmetros fsicos
que influenciam na degradabilidade
so: natureza fsica da matriz onde o
composto encontrado (solo, gua,
sedimento), temperatura e luz. Por
exemplo, ambientes complexos, tais
como solos e sedimentos, tm a
propriedade de, atravs da atrao
de cargas opostas, adsorver molcu-
las, diminuindo, desta maneira, a
biodisponibilidade do poluente. Nas
regies temperadas do globo, a ati-
vidade metablica de microrganis-
mos pode ser reduzida em funo
das baixas temperaturas mdias anu-
ais, reduzindo, conseqentemente,
a taxa de degradao de poluentes
nestas reas.
Diversos fatores qumicos po-
dem influenciar, acelerando ou redu-
zindo, a taxa de degradao de um
poluente. Entre estes fatores inclu-
em-se a composio qumica da
matriz ambiental, que define a capa-
cidade nutritiva, o pH, umidade, teor
de oxignio dissolvido, o potencial
redox do meio e a composio e
estrutura qumica do poluente. Me-
tais pesados, quando presentes, po-
dem interagir com enzimas produzi-
das pelos microrganismos, inibindo a
sua atividade e, por conseguinte, a
capacidade degradativa destes. Por
outro lado, concentraes adequa-
das de metais que tm ao de
cofatores enzimticos podem me-
lhorar a capacidade degradativa do
meio. A presena de outros compos-
tos xenobiticos de estrutura sim-
ples pode tambm dificultar o meta-
bolismo de molculas mais comple-
xas, pois a comunidade microbiana
se direcionaria seu metabolismo para
degradar, preferencialmente, os
menos complexos.
Como exemplo da influncia da
estrutura qumica na degradao de
um poluente, pode-se citar a alta
per si st nci a de compost os
nitroaromticos no ambiente. Ape-
sar de intensos esforos, ainda no
foram isoladas bactrias capazes de
mineralizar muitos dos nitroaro-
mticos produzidos pelo homem,
como, por exemplo, o TNT (utiliza-
do em explosivos) e os herbicidas
orizalin e trifluralina. Os trs com-
postos apresentam, em comum, trs
grupos nitro no anel aromtico que
dificultam sua mineralizao.
Fatores biolgicos
A biodegradao de um com-
posto qumico no meio ambiente
depende, sobretudo, da presena de
uma populao de microrganismos
capaz de metabolizar a molcula
original e seus produtos de degrada-
o. No existem, na biosfera atual,
rotas enzimticas catablicas capa-
zes de degradar todos os compostos
novos que a cultura humana sinteti-
zou durante os ltimos 100 anos.
Sabe-se, entretanto, que alguns
xenobi t i cos podem ser
biodegradados por microrganismos
que possuam enzimas capazes de
catabolizar molculas especficas, ou
mesmo pela ao conjunta de con-
srcios microbianos, em que cada
microrganismo atua individualmen-
te sobre diferentes etapas do pro-
cesso de biodegradao.
A biodegradao mais prov-
vel quando a estrutura qumica do
xenobitico semelhante estrutu-
ra de molculas naturais. Por exem-
plo, existe uma grande diversidade
de molculas naturais com estruturas
complexas, tais como a lignina, rica
em anis benznicos - estrutura
molecular natural mais abundante na
biosfera depois da glicose -, os
esterides, os terpenos e compostos
halogenados naturais, que ocorrem
em grande abundncia e so normal-
mente metabolizados por microrga-
nismos no ambiente.
As enzimas que catabolizam a
degradao de compostos naturais
podem apr esent ar bai xa
especificidade pelo seu substrato e,
desta maneira, os xenobiticos com
estrutura qumica semelhante a com-
postos naturais podem ser reconhe-
cidos pelo stio ativo da enzima,
possibilitando, assim, que sejam qui-
micamente transformados. Quando
o xenobitico tem a possibilidade de
percorrer todos os passos catalticos
de uma determinada rota catablica
enzimtica, provavelmente ele se
torna uma possibilidade nutritiva para
o microrganismo, sendo os produtos
de sua degradao aproveitados pelo
seu metabolismo construtivo e
energtico. Porm, quando o com-
posto apenas parcialmente degra-
dado, por ao de uma ou mais
enzimas de uma rota catablica sem
que o produto resultante contribua
para a sobrevivncia do microrganis-
mo, esta transformao metablica
denominada de co-metabolismo.
O produto do co-metabolismo,
muitas vezes, pode servir de substrato
para transformaes enzimticas de
outras espcies microbianas, possi-
bilitando a degradao completa do
xenobitico (mineralizao). O co-
metabolismo, aparentemente uma
transformao ftil quando analisada
sob a tica de um microrganismo
isolado, tem um papel importante
nas biotecnologias de remediao
de stios contaminados, pois, geral-
mente, nenhum microrganismo pos-
sui todas as enzimas necessrias para
a metabolizao completa de um
xenobitico.
Trocas de material gentico
podem ocorrer entre microrganis-
mos na natureza e constituem um
outro fator que contribui para o po-
tencial biodegradador de uma comu-
nidade. Muitas rotas catablicas de
compostos complexos esto locali-
zadas no genoma pl asmi di al .
Plasmdeos podem ser trocados en-
tre bactrias de uma mesma esp-
cie, ou mesmo entre microrganis-
mos de espcies diferentes, atravs
de mecanismos de conjugao ou
transformao de clulas naturalmen-
te competentes (clulas com capa-
cidade de assimilar DNA exgeno na
natureza). Estes processos de inter-
cmbio de material gentico favore-
cem a disseminao de genes, e,
conseqentemente, a disseminao
potencial de enzimas relacionadas
ao metabolismo catablico de uma
molcula recalcitrante.
Obviamente, as caractersticas
fsico-qumicas e nutricionais do meio
ext er no e o compar t i ment o
intracelular microbiano esto estrita-
mente relacionados. Mesmo que um
sistema microbiano porte todos os
requisitos bioqumicos e genticos
necessrios para a degradao de
um xenobitico, se as caractersticas
fsico-qumicas e componentes
nutricionais do meio no condizem
38 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
com as necessidades metablicas do
microrganismo, a biodegradao no
ocorrer.
Viso interdisciplinar
A pesquisa tcnico-cientfica,
com o objetivo de tornar os fenme-
nos naturais mais facilmente com-
preensveis, geralmente enfoca o
estudo de parmetros fsicos, qumi-
cos e biolgicos relacionados de-
gradao de maneira separada. Como
abordado anteriormente, estes
parmetros so estritamente relacio-
nados em um pr ocesso de
biorremediao. Por esta razo, a
implementao de processos de
remediao em um ambiente conta-
minado requer a conduo de um
estudo detalhado, com uma viso
interdisciplinar, envolvendo profis-
sionais de diferentes reas de conhe-
cimento, como microbiologia, bio-
qumica, biologia molecular, qumica
orgnica e analtica e engenharia.
Por exemplo, necessrio um
conhecimento aprofundado das ca-
ractersticas qumicas da molcula
xenobitica que se pretende elimi-
nar em um pr ocesso de
biorremediao, uma vez que a es-
trutura qumica influencia vrios as-
pectos do metabolismo biolgico. A
presena de grupos qumicos na es-
trutura molecular, como halognios,
-NO
2
, -SO
3
H, CN, -CH
3
, -CF
3
, -NH
2
, -
OCH
3,
bem como arranjos especfi-
cos destes radicais na cadeia de car-
bono, que interferem na distribuio
eletrnica da molcula (proprieda-
des enantiomricas ou quirais), pode
dificultar a catlise enzimtica, con-
Avaliao da natureza
do ambiente contaminado
(p.ex., solo, sedimento, aqfero)

Caracterizao da contaminao
(natureza do composto,
quantidade, distribuio)

Planejamento do
tipo de biorremediao
(anlises biolgicas, geolgicas,
geofsicas, hidrolgicas)

Deciso por biorremediao


in-situ ou ex-situ

Utilizao de plantas
(fitorremediao)
Utilizao de
microrganismos


Seleo e
introduo de
plantas
GEPs
(geralmente
alctones com as
propriedades de
interesse)
(introduo
de plantas
geneticamente
modificadas)
Bioestimulao
(favorecimento de
populaes de
microrganismos
autctones
degradadores)
Bioaumentao
(introduo de microrganismos degradadores)

OGMs (introduo
de microrganismos
geneticamente
modificados)
Autctones
(isolamento e
seleo de
microrganismos
com as
propriedades de
interesse a partir
de amostras do
ambiente a ser
tratado)
Alctones
(seleo de
microrganismos
com as
propriedades de
interesse a partir
de material ex
situ disponvel
em colees de
culturas ou outras
fontes)
Propagao e introduo
no ambiente

Monitoramento do processo
e intervenes para ajuste
Figura 1. Esquema geral das
etapas para defi ni o e
implementao de um processo
de biorremediao
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 39
f er i ndo mol cul a mai or
recalcitrncia. Por exemplo, os de-
tergentes sintticos alquilbenzeno
sulfonados, comercializado nos anos
60-70, provocaram srios impactos
ambientais decorrentes de elevado
grau de persistncia no ambiente.
Espessas camadas de espumas se
acumulavam nos rios, acarretando
grande mortandade de peixes. Pes-
quisas biolgicas mostraram que a
sua alta persistncia no ambiente
estava relacionada presena de
trs grupos metilas na molcula. Um
novo desenho qumico da molcula,
em que foram retirados os grupos
metilas, permitiu o aumento da
biodegradabilidade destes detergen-
tes sintticos, diminuindo, desta
maneira, o impacto ambiental.
O grau de toxicidade de uma
molcula tambm relacionado com
sua estrutura molecular. A estrutura
molecular define o tipo e a intensi-
dade de interao com diferentes
component es e met abl i t os
intracelulares (estruturas da parede
e membrana celular, organelas, e
estrutura terciria de protenas e ci-
dos nuclicos), que podem ocasio-
nar ef ei t os ci t ot xi cos e/ou
mutagnicos.
Um outro efeito importante as-
sociado estrutura molecular que
tambm deve ser considerado a
biodisponibilidade da molcula.
Muitos xenobiticos tm carter
apolar, o que muitas vezes no
compatvel com stios de entrada e
transportadores da membrana celu-
lar, indisponibilizando-o, desta ma-
neira, para o metabolismo intracelular.
Alguns microrganismos contornam
est e obst cul o pr oduzi ndo
surfactantes e possibilitando, assim,
a entrada de molculas apolares para
o interior da clula. A busca de
biossurfactantes que possam ser uti-
lizados como aditivos em solos con-
taminados com compostos pouco
solveis hoje uma das linhas com
grande desenvolvimento em pes-
quisas de biorremediao.
Outro aspecto a ser analisado
a composio qumica do ambiente,
a qual contribui para definio do
valor nutritivo do meio. Quando o
mei o no f or nece macr o e
micronutrientes necessrios para o
metabolismo celular dos microrga-
nismos degradadores, necessria a
adio controlada destes ao sistema,
por meio do emprego de tcnicas de
engenharia, como, por exemplo, a
injeo de nutrientes via galerias e/
ou buracos no solo e uso de formu-
laes de liberao lenta nos ambi-
entes aquticos. Como conseqn-
cia destas adies, a taxa de degra-
dao pode ser aumentada.
Tcnicas de aplicao de nutri-
entes tm se mostrado eficientes
para a despoluio de ambientes
aquticos contaminados com petr-
leo. Experimentos de campo de-
monstraram um aumento de 5 a 10
vezes nas taxas de degradao. No
entanto, existem dvidas sobre os
efeitos a longo prazo, uma vez que
as taxas de degradao em reas
tratadas e no-tratadas tendem a se
equalizar com o tempo. A introduo
de nutrientes e/ou surfactantes com
o objetivo de aumentar a atividade
microbiana ou a biodisponibilidade
do pol uent e um t i po de
biorremediao conhecido como
bioestimulao.
Outra opo que pode ser ado-
tada para se melhorar o potencial
biodegradador de um ambiente con-
taminado a adio de populaes
de microrganismos degradadores
autctones (que j presentes naque-
le ambiente), ou de organismos
degradadores ou mediadores de
biodegradao (e.g, produtores de
biossurfactantes) estranhos ao siste-
ma (alctones), repicados em labo-
ratrio. A utilizao de tcnicas para
se aumentar populaes microbianas
degradadoras denominada de
bioaugmentao.
Portanto, cada processo de
biorremediao particular e quase
sempre necessita de uma adequao
e de uma otimizao especfica para
aplicao em diferentes stios afeta-
dos, requerendo sempre uma anli-
se integrada de parmetros fsicos,
qumicos e biolgicos.
Etapas de implementao
de um processo de
Biorremediao
A bi orremedi ao uma
t ecnol ogi a compl exa e sua
implementao ocorre em etapas
que compreendem um estudo do
ambiente, do tipo de contaminante,
dos riscos e da legislao pertinente
(Figura 1). Em primeiro lugar, ne-
cessrio uma caracterizao do tipo
e da quantidade do poluente, bem
como avaliaes de natureza biol-
gi ca, geol gi ca, geof si ca e
hidrolgica do stio contaminado.
As avaliaes biolgicas ocor-
rem, em primeira estncia, em labo-
ratrio, e tm como objetivo a
otimizao da biodegradao do com-
posto. Elas compreendem os testes
de bioestimulao, pela adio de
nutrientes e/ou surfactantes, e os
testes de bioaugmentao, pela
adio de culturas de microrganis-
mos biodegradadores ou mediado-
res. Com base nos dados obtidos ,
ento, escolhida a tcnica de
biorremediao mais adequada para
a situao e testes de campo so
realizados, para verificar a eficincia
do processo in situ.
Porm, devido complexidade
desta biotecnologia, cuja eficincia
envolve vrios fatores, muitos pro-
blemas de difcil equacionamento
podem surgir no decorrer do proces-
so. Entre os principais problemas
encontrados na aplicao de proces-
sos de biorremediao esto:
a poluio geralmente envol-
ve vrios compostos, de diferentes
classes qumicas, requerendo a sele-
o e utilizao de diferentes micror-
ganismos com metabolismo espec-
fico para os diferentes poluentes;
quando as concentraes dos
poluentes so baixas, os microrga-
nismos podem no produzir as
enzimas necessrias; quando so
muito altas, os microrganismos po-
dem ser inibidos;
alguns dos poluentes presen-
tes podem ser incompatveis com o
pr ocesso de bi odegr adao
implementado;
alguns compostos so rapida-
mente adsorvidos pelo solo, sedi-
mento e/ou gua, diluindo-se abaixo
do nvel exigido para a ativao da
biodegradao, contudo permane-
cendo ainda em concentraes aci-
ma da desejvel;
a taxa da biorremediao pode
ser muito baixa, resultando em um
40 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
processo de longa durao.
Alguns dos problemas acima re-
latados podem ser superados atravs
do uso de microrganismos genetica-
mente modificados, os OGMs (Gene-
tically Engineered Microorganisms,
ou GEMs, em ingls).
OGMs na despoluio ambiental
O uso de organismos-genetica-
mente-modificados (OGMs) oferece
a possibilidade de se contornar algu-
mas das limitaes dos processos de
biorremediao, principalmente as
relacionadas taxa da degradao do
poluente. A manipulao gentica de
um microrganismo pode permitir o
aumento da taxa de degradao atra-
vs de diferentes estratgias:
insero de genes que codifi-
cam enzimas catablicas especficas
para a molcula-alvo;
insero de genes que confe-
rem resistncia a compostos inibitri-
os no ambiente ou aos produtos de
degradao da molcula-alvo;
insero de genes ou altera-
es genticas que auxiliam na solu-
o de problemas ligados baixa
concentrao do poluente, como, por
exemplo, aumento da captao/ab-
soro do composto pela clula ou da
expresso da enzima.
A incorporao destes genes em
uma bactria geralmente feita via
plasmdios ou transposons, e pode
resultar na manuteno do DNA
exgeno na forma de plasmdio ou na
insero dos genes no cromossomo
bacteriano.
Os primeiros OGMs a serem apli-
cados na despoluio do ambiente
foram as bactrias recombinantes
desenvolvidas por Chakrabarty, nos
anos 70. Atravs de sucessivas
recombinaes entre cepas com di-
versos plasmdeos, foram obtidas v-
rias linhagens de bactrias capazes de
degradar mais de um tipo de
hidrocarboneto. A mais conhecida foi
a capaz de degradar cnfora, naftalina,
octano e xileno.
Obviamente, a produo de uma
bactria capaz de degradar mltiplos
poluentes em laboratrio no signifi-
ca a resoluo completa dos proble-
mas da biorremediao. Muitos
questionamentos de ordem tcnica e
tica necessitam ser respondidos:
os organismos sobrevivero no
ambiente?
eles se reproduziro?
eles se espalharo para outros
locais?
causaro danos ao ambiente?
transferiro os genes para ou-
tros organismos no ambiente?
A seguir sero examinadas essas
questes.
Sobrevivncia
Microrganismos modificados em
laboratrio podem ser selecionados
par a apr esent ar em bai xa
competitividade com o objetivo de
serem eliminados ou, ainda, para per-
derem as caractersticas especiais de
recombinao aps um certo tempo
de vida, sendo, assim, pouco compe-
tentes para sobrevivncia no ambien-
te natural.
No entanto, um dos problemas
principais dos OGMs a instabilidade
de seus genes exgenos, principal-
mente quando inseridos em forma de
plasmdios. Quando esta instabilida-
de devido segregao deficiente,
ou seja, parte da populao gerada
aps um ciclo de diviso celular pode
no ter o plasmdio, o problema pode
ser superado com a insero dos genes
de i nt er esse no cr omossomo
bacteriano, mediante o uso de
transposons. Entretanto a insero de
novos genes no cromossomo de um
microrganismo pode ter efeitos ines-
perados, como interferncia na
regulao de outras vias metablicas,
acarretando, por exemplo, o aumen-
to da produo de toxinas ou
inativao da expresso de outras
propriedades de interesse.
Multiplicao no local
Figura 2. Possveis estratgias de trabalho para deteco, monitoramento e
caracterizao da diversidade em amostras ambientais utilizando abordagens
tradicionais e independentes-de-cultivo (adaptado de diferentes fontes).
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 41
Quando o poluente o nico
subst r at o par a cr esci ment o
microbiano, a multiplicao das c-
lulas terminar na presena de bai-
xos nveis do mesmo. Esta uma boa
maneira de controlar a populao de
OGMs no ambiente. Contudo os mi-
crorganismos podem perder a ativi-
dade antes que a concentrao do
poluente atinja o nvel desejado. Este
problema pode ser superado com
engenharia gentica, utilizando pro-
motores induzidos pela deprivao
de nutrientes. Como exemplo, po-
demos citar os genes T4MO (tolueno
4-monoxigenase) de Pseudomonas
mendocina KR1, que foram clonados
sob o controle do gene groEL. A
bactria geneticamente modificada
promoveu, nas mesmas taxas, a de-
gradao de tolueno, fenol e
tricloretileno sob condies adequa-
das e sub-ptimas de glicose, nitro-
gnio e fsforo.
Riscos e disperso dos OGMs
no ambiente
Quais so os efeitos indesej-
veis da liberao de OGMs no meio
ambiente? Sem dvida, conhecer os
efeitos indesejveis da insero de
organismos vivos geneticamente mo-
dificados na natureza uma das
metas mais importantes da comuni-
dade cientfica atual. Entre os efeitos
mais questionados esto:
competio do OGM com a
microbiota, flora e fauna local, po-
dendo levar extino destas esp-
cies nativas;
a troca de genes entre micror-
ganismos geneticamente modifica-
dos e populaes microbianas au-
tctones, j cientificamente compro-
vada, pode levar degradao gen-
tica das espcies autctones;
a possibilidade de introduo
ao ambiente de espcies que apre-
sentem fatores de patogenicidade
para a populao autctone, espci-
es que produzem endo- e/ou
exotoxinas ou que contenham genes
de resistncia a antibitico; esta
uma situao que deve de ser avali-
ada em laboratrio antes da libera-
o dos microrganismos no ambien-
te;
o desequilbrio da estrutura da
comunidade, podendo levar de-
gradao ambiental;
a impossibilidade da elimina-
o dos microrganismos introduzi-
dos depois que eles terminam o seu
trabalho.
Grande parte destes efeitos po-
deriam ser contornados atravs do
isolamento fsico dos OGMs, ou seja,
pelo confinamento do stio contami-
nado durante o tratamento com
OGMs. Porm surge uma nova ques-
to: possvel o isolamento fsico
dos OGMs?
Microrganismos tm uma gran-
de capacidade de disseminao, sen-
do capazes de se espalhar atravs do
solo, na gua, no vento, por coloni-
zao ou adsoro a outros seres
vivos, incluindo microrganismos
(protozorios, algas), pequenos ani-
mais, razes e sementes de plantas.
Por estas razes, razovel que a
resposta desta pergunta seja: Pro-
vavelmente, na maioria dos casos,
impossvel o isolamento de OGMs.
Em vista disso, necessrio que o
microrganismo seja construdo de
maneira que seus efeitos no meio
ambiente sejam mnimos e/ou seu
tempo de sobrevivncia seja limita-
do.
Avanos cientficos, contudo, su-
gerem que OGMs no ambiente no
trazem necessariamente efeitos in-
superveis. No ano 1993, no
Horticultural Research International
de Littlehampton, e no Institute of
Vi r ol ogy and Envi r onment al
Microbiology de Oxford, no Reino
Uni do, uma l i nhagem de
Pseudomonas f l uorescens
cromossomalmente modificada foi
aplicada em sementes do trigo e
vaporizada nas folhas emergentes.
As concluses das investigaes fo-
ram as seguintes:
a vaporizao no causou gran-
de espalhamento do OGM nas reas
locais adjacentes aos locais de apli-
cao;
P. f l uorescens normal e
recombinante causaram mudanas
temporrias (de at 69 dias) na
microbiota do filoplano e na rizosfera
das plantas inoculadas, mas no no
restante do solo, e os microrganis-
mos mais sensveis foram os no-
formadores de esporos de cresci-
mento rpido;
as mudanas produzidas pela
introduo da linhagem recombinan-
te no foram diferentes daquelas
causadas pela no-recombinante;
as perturbaes foram peque-
nas, sem efeitos para o crescimento
e/ou sade das plantas.
Mesmo que estes resultados su-
giram que o ambiente no tenha sido
significativamente alterado, sem-
pre recomendado, diante das pou-
cas evidncias experimentais e prti-
cas existentes, limitar o espao e o
tempo de vida dos OGMs. Devido
quase i mpossi bi l i dade do
confinamento fsico dos OGMs, pes-
quisas, hoje, sugerem que o prprio
DNA do microrganismo porte em
seu cdigo o limite de espao fsico
e de tempo de vida. Por exemplo,
estes atributos so contemplados
quando os OGMs so construdos
para sobreviverem somente em con-
dies de poluio ou, ainda, at que
um evento especfico, geneticamen-
te projetado, ocorra na fisiologia do
microrganismo ou no ambiente. Um
exemplo de evento geneticamente
projetado o uso dos elementos
suicidas, tais como o gene hok, que
controla a produo de uma protena
killer (assassina) nas clulas, ativa-
da pela ausncia de poluente. O
problema do uso deste gene suicida
que pode sobreviver at 1 em 10
4
clulas por gerao, devido s taxas
de mutaes normais em estirpes
suicidas negativas. Utilizando-se um
sistema suicida de 2 componentes
(cada um dos quais codifica um me-
canismo suicida diferente), a taxa de
sobrevivncia cai para 10
-7
a 10
-8
clulas/gerao. Entretanto, esta taxa
de sobrevivncia ainda pode ser
considerada elevada, em funo das
densidades que as populaes
introduzidas no ambiente podem
atingir. Clculos mostram que um
nvel de confinamento satisfatrio
atingido somente quando os organis-
mos modificados carregam 8 meca-
nismos suicidas separados, cada qual
com um tipo de controle diferente.
Contudo, um outro problema
surge. Pesquisas mostram que o DNA,
de OGMs ou, mesmo, o liberado
aps a morte das clulas podem ser
42 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
transferidos para outras clulas
Transferncia de genes e seu
controle
Os microrganismos podem
transferir DNA atravs dos processos
de conjugao (transferncia de
plasmdios entre clulas), transduo
(transferncia mediada por vrus) e
transformao (entrada de DNA do
meio em clulas competentes). So
processos naturais, cujos mecanis-
mos no cabem nos objetivos deste
captulo. Entretanto, cabe ressaltar
que existe a possibilidade desta trans-
ferncia de DNA e, conseqente-
mente, dos genes de degradao ou
controle, entre os OGMs e os micror-
ganismos naturalmente presentes no
ambiente.
Para evitar transferncias de
genes dos OGMs para populaes
autctones, cientistas tm desenvol-
vido estratgias moleculares, como,
por exemplo, vetores suicidas de
confinamento que no permitem a
replicao ou causam a destruio
do DNA aps serem transferidos para
outros microrganismos.
Uma outra possibilidade para
evitar a transferncia de genes
indesejados optar pela utilizao
de genes marcadores ou reguladores
que no representem riscos de da-
nos ao ambiente. Por exemplo, genes
de resi st nci a a ant i bi t i cos,
comument e ut i l i zados como
marcadores de OGMs, podem ser
substitudos por genes marcadores
de resistncia a sais de Hg, arsenito,
telurito, herbicidas, ou outros
marcadores que no apresentem ris-
co ambiental.
Deteco de microrganismos e
genes de degradao no
ambiente
A introduo de microrganismos,
sejam eles OGMs ou no, e/ou a
utilizao de estratgias que favore-
am o aumento de populaes
microbianas especficas em um dado
ambiente para fins de biorremediao
requer, necessariamente, a adoo
de prticas de monitoramento
microbiolgico voltadas para a
deteco e/ou quantificao de mi-
crorganismos e/ou dos genes intro-
duzidos no ambiente. Este tipo de
prtica pode visar diferentes objeti-
vos, ligados direta ou indiretamente
atividade de degradao desejada:
quantificar a populao dos
microrganismos de interesse, ligados
ao processo de degradao do
poluente ou xenobitico;
avaliar a disseminao de
OGMs e no-OGMs introduzidos no
ambiente;
avaliar a possibilidade de trans-
ferncia dos genes para comunida-
des microbianas locais, e, ainda;
fornecer informaes valiosas
para avaliao de possveis impactos
ambientais da introduo ou do
favorecimento de populaes espe-
cficas, refletido em alteraes na
composio e estrutura de comuni-
dades microbianas naturais do stio.
Diferentes estratgias podem
ser adotadas para a realizao destes
monitoramentos. Os mtodos expe-
rimentais utilizados podem ser divi-
didos, basicamente, em dois grandes
grupos, de acordo com a abordagem
que empregada:
mtodos baseados em iso-
lamento e cultivo: o monitoramen-
to realizado utilizando-se protoco-
los convencionais de microbiologia,
baseados no isolamento dos micror-
ganismos da amostra ambiental e
inoculao em meios de cultivo sele-
tivos e/ou no-seletivos, avaliando
os resultados atravs do crescimento
de colnias em placas de Petri ou em
ensaios de diluio utilizando tubos
mltiplos, e;
mtodos independentes-
de-cultivo: o monitoramento de li-
nhagens microbianas e/ou de gru-
pos microbianos especficos na amos-
tra realizado atravs da anlise de
clulas e/ou cidos nuclicos extra-
dos da amostra, utilizando-se sondas
moleculares para genes determina-
dos ou a amplificao destes por
metodologias de PCR.
Dependendo da estratgia de
biorremediao utilizada, do tipo de
amostra e ambiente alvo, os mto-
dos de cultivo podem ser facilmente
empregados e fornecer parmetros
adequados para avaliao das popu-
l aes de mi cr or gani smos
biodegradadores e aspectos gerais
das populaes microbianas na amos-
tra. No caso de stios e estratgias de
biorremediao onde populaes
microbianas altamente diversificadas
so favorecidas (alta diversidade de
espcies envolvidas no processo),
onde existam fatores limitantes ao
cultivo, como presena de compos-
tos recalcitrantes altamente txicos
ou amostras de difcil coleta e mani-
pulao (subsolo, aqferos profun-
dos, resduos industriais txicos), em
casos onde os OGMs introduzidos
no so diferenciveis de popula-
es naturais por cultivo, os mto-
dos baseados em isolamento e culti-
vo no so adequados para o
monitoramento. Nestes casos, o uso
de mtodos independentes-de-cul-
tivo podem representar uma alter-
nativa mais eficaz e eficiente para o
monitoramento.
Os mtodos independentes-de-
cultivo, por sua vez, permitem a
deteco e monitoramento tanto dos
microrganismos especficos como dos
genes de degradao relacionados
ao processo de biorremediao. Den-
tre os mtodos mais utilizados para
deteco especfica de microrganis-
mos e genes podemos citar a
hibridizao com sondas moleculares
em ensaios de FISH (fluorescent in
situ hybridization) ou em membra-
na de nylon (dot blot), e a amplifica-
o dos genes-alvo em reaes de
PCR.
Uma representao de diferen-
t es poss vei s est r at gi as e
metodologias que podem ser em-
pregadas em um estudo de popula-
es microbianas em amostras
ambientais apresentada na Figura
2. O detalhamento destes mtodos e
apresentao de protocolos no so
objetos deste captulo. Porm, como
estes so amplamente difundidos,
fcil a localizao de trabalhos na
literatura que relatam a aplicao de
diferentes estratgias moleculares ao
est udo de pr ocessos de
biorremediao.
Al gumas est r at gi as e
metodologias independentes-de-cul-
tivo podem ser utilizadas para uma
caracterizao fina das comunidades
microbianas presentes na amostra e
populaes especficas. A amplifica-
o de genes ribossomais utilizando
iniciadores (primers) grupo- ou es-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 43
pci e- espec f i cos per mi t e a
visualizao de padres de bandas
representativos da comunidade es-
tudada em anlises eletroforticas,
como no caso do DGGE/TGGE
(denat uri ng gradi ent gel
electrophoresis e thermal gradient
gel electrophoresis), mtodos que
permitem a separao de fragmen-
tos de mesmo tamanho, porm com
seqncias gnicas diferentes, e do
ARDRA (amplified ribosomal DNA
restriction analysis) ou t-RFLP (ter-
mi nal f ragment l engt h
polymorphism), mtodos que per-
mitem a diferenciao de microrga-
nismos nas amostras pela anlise do
padro de bandas gerados por restri-
o enzimtica do DNA amplificado.
Por outro lado, a construo de
bancos genmicos, produzidos a
partir da clonagem dos fragmentos
de genes ribossomais (ou de outros
genes de interesse, incluindo genes
codificadores de enzimas de vias
catablicas), amplificados por PCR,
permite a gerao de material para
seqenciamento de DNA e anlise
posterior filogentica de seqncias
de DNA ribossomal e protenas.
A apl i cao de mt odos
moleculares geralmente implica em
custos mais elevados, comparado
com a utilizao de protocolos tradi-
cionais baseados em isolamento em
cultivo. Contudo, mtodos indepen-
dentes-de-cultivo permitem a gera-
o de dados com elevado contedo
de informao e de natureza com-
pl ement ar aos mt odos
microbiolgicos tradicionais, possi-
bilitando a deteco e quantificao
de OGMs e microrganismos no-
modificados tambm pela presena
dos genes de degradao no DNA e
pelo nvel de atividade metablica
(quantidade de RNA intracelular)
presente na clula. Na Figura 2 ob-
serva-se relacionamento entre as
tcnicas que podem ser utilizadas
nos estudos tradicionais e moleculares
de amostras ambientais.
Referncias Bibliogrficas
Alexander, M. (1999). Biodegrada-
tion and bioremediation. 2nd
ed. New York: Academic Press.
453 pp.
Amann, R.I.; Krumholz, L.; Stahl,
D.A. (1990). Fluorescent-oli-
gonucleotide probing of who-
le cells for determinative,
phylogenetic, and environ-
mental studies in microbio-
logy. Journal of Bacteriology
v.172, p. 762-770.
Amann, R.I.; Ludwig W.; Schleifer,
K.H. (1995). Phylogenetic iden-
tification and in situ detection of
individual microbial cells without
cultivation. Microbiological
Reviews v.59 (1), p. 143-169.
Atlas, R.M.; Bartha, R. (1998). Mi-
crobial ecology. 4
th
ed. Menlo
Park: The Benjamin/Cummings.
533 pp.
Borm, A.; Santos, F.R. (2004). Bior-
remediao. In: Borm A.; dos
Santos, F.R. (Eds) Biotecnolo-
gia simplificada. Universida-
de Federal de Viosa/MG, p. 179-
187.
Crawford, R.L. (Eds). (2002). Bio-
transformation and biodegradati-
on. Section VIII. In: Hurst, C.J.;
Crawford, R.L.; Knudsen, G.R.;
McInerney, M.J.; Stetzenbach,
L.D. (Eds.) Manual of environ-
mental microbiology. 2nd ed.
ASM Press, Washington DC. p.
898-1094.
Fernandes, F.M. (1998). Bioremedi-
ation State of the art. In: Third
Latin American Biodegrada-
tion & Biodeterioration Sym-
posium. Florianpolis, 27-30
Abril.
Glazer, A.N.; Nikaido, H. (1995).
Microbial biotechnology. New
York: W.H. Freeman. 662 pp.
Grimberg, S.J.; Aitken, M.D. (1995).
Biodegradation of phenanthrene
solubilized in surfactant micelles.
In: Hinchee, R.E.; Brockman, F.J.;
Vogel, C.M. Microbial process
for bioremediation. Columbus:
Battelle Press. p. 59-66.
Leung, K.; Errampalli, D; Cassidy, M.;
Lee, H.; Trevors, J.T.; Okamura,
H.; Bach, H.J.; Hall, B. (1997). A
case study of bioremediation of
polluted soil: biodegradation and
toxicity of in soil. In: van Elsas,
J.D.; Trevors, J.T.; Wellington,
E.M.H. (Eds.). Modern soil
microbiology. Marcel Dekker,
New York. p. 577-605.
Melo, I.S.; Azevedo, J.L. (1997).
Microbiologia ambiental.
Embrapa-CNPMA. 440 pp.
Melo, I.S.; Souza Silva, C.M.M. (2003).
Biorremediao de solos poludos.
In: Borm, A.; Santos, F.R.; Almeida,
M.R. (Eds.). Biotecnologia de A
a Z. Universidade Federal de Vi-
osa/MG, p. 95-125.
Spain, J.C.; Hughes, J.B.; Knackmuss,
H.-J. (2000). Biodegradation of
nitroaromatic compounds and
explosives. New York: Lewis
Publishers. 434 pp.
Spilborghs, M.C.F.; Casarini, D.C.P.
(1998). Biorremediao do solo
contaminado com compostos or-
gnicos. Revista Meio Ambiente
Industrial v. 12, maio-junho, p.
66-69.
Trevors, J.T.; van Elsas, J.D. (Eds.)
(1995). Nucleic acids in the
environment: methods and
applications. Springer-Verlag,
Heidelberg, Germany. 256 pp.
Whyte, L.G.; Bourbonnire, L.G.;
Bellerose
,
C.G.; Greer, C.W. (1999)
Bioremediation assessment of
hydrocarbon-contaminated soils
f r om t he hi gh Ar ct i c.
Bioremediation Journal, v. 3,
n. 1, p. 69-79.
Yarden, O.; Salomon, R.; Katan, J.;
Ahar onson, N. (1990).
Involvement of fungi and bacteria
in enhanced and nonenhanced
biodegradation of carbendazim
and ot her benzi mi dazol e
compounds in soil. Canadian
Journal of Microbiology, v.
36, p. 15-23.
Zarda, B.; Hahn, D.; Chatzinotas,
A.; Schnhuber, W.; Neef, A.;
Amann, R.; Zeyer, J. (1997).
Anal ysi s of bacteri al
community structure in bulk
soil by in situ hybridization.
Archives of Microbiology v. 168,
p. 185-192.
44 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Meio ambiente
Luiz Roberto Guimares Guilherme
Professor Adjunto, Universidade Federal de Lavras,
Departamento de Cincia do Solo, Lavras, MG
Pesquisador Bolsista do CNPq
guilherm@ufla.br
Imagens cedidas pelo autor
FUNDAMENTOS DA
ANLISE DE RISCO
Introduo
Este artigo apresenta alguns fun-
damentos a respeito do que venha a
ser a anlise de risco e de como esta
ferramenta pode ser usada. Antes,
porm, necessrio tornar clara a
diferena entre o que o risco e o
que o perigo. Freqentemente,
h confuso relativa ao significado
destes termos. Risco a probabilida-
de e a intensidade de dano (por
exemplo, doena) resultante da ex-
posio a um perigo. Em contraste, o
perigo um agente (fsico, qumico
ou biolgico) ou uma ao que pode
causar dano. Por exemplo, doenas
humanas tm sido associadas
ingesto de alimentos contaminados
com alguns elementos-trao, e.g., o
chumbo. O perigo o chumbo (nas
suas mais diversas formas), uma subs-
tncia (agente) qumica. O risco re-
presenta a quantidade de pessoas
que esto ou que podem ser afeta-
das de uma forma danosa, dentro do
conjunto da populao como um
todo, informao esta advinda de
uma avaliao de risco. Esta distin-
o apresentada com mais deta-
lhes no item Avaliao de riscos
para a sade humana deste artigo.
O que vem a ser, ento, a an-
lise de risco, e para que finalidade
ela usada? A anlise de risco um
processo composto de trs partes:
avaliao de risco, gerncia de risco
e comunicao do risco. usada para
avaliar os dados cientficos, compa-
rar e selecionar as polticas de ao
disponveis e comunicar toda a infor-
mao obtida no intuito de prevenir
ou controlar riscos no desejados.
Conceitos em Anlise de Risco ecolgica e para a sade humana
Cada um destes elementos da anli-
se de risco tem um papel distinto.
Os elementos da anlise de ris-
co so usados por um agente regula-
dor qualquer (de sade pblica ou
do meio ambiente) na tomada de
decises para prevenir ou controlar
riscos. Neste contexto, importante
ressaltar que todas as nossas deci-
ses do dia-a-dia - independente-
mente se foram tomadas por um
indivduo, um agente regulador ou
uma indstria, por exemplo - acon-
tecem a partir de uma anlise de
risco. A nica diferena o nvel de
complexidade que necessrio para
se tomar uma deciso aps a anlise
de cada caso.
Conceitos envolvidos na
anlise de risco
O problema j previamente le-
vantado com relao terminologia
risco e perigo tem levado a uma
srie de discusses sobre o uso segu-
ro de substncias qumicas, visto que
usos os mais diversos tm sido dado
a estes termos. No intuito de estabe-
lecer um consenso acerca dos ter-
mos (e de seus usos) envolvidos no
processo de avaliao de risco, cons-
tituiu-se um grupo de trabalho den-
tro do Programa Internacional de
Segurana Qumica da Organizao
para a Cooperao Econmica e
Desenvolvimento (IPCS/OECD), o
qual iniciou os trabalhos de padroni-
zao de terminologia (Lewalle,
1999) que resultaram ento numa
publicao posterior a este respeito
(Duffus, 2001). Os conceitos apre-
sentados a seguir advm de uma
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 45
tentativa de se adaptar a terminolo-
gia descrita na lngua inglesa para o
portugus. Os termos considerados
orientadores das aes, conforme
descrito no artigo original (Duffus,
2001), so apresentados no corpo
desse artigo. Alguns outros termos
considerados bsicos dentro do con-
texto da avaliao de risco so des-
critos no glossrio da publicao edi-
tada por Borm (2004).
A associao dos diferentes
termos descritos a seguir foi
estabelecida atravs de um diagra-
ma conceitual, o qual mostrado na
figura 1.
Antes de iniciarmos a discusso
dos termos descritos no diagrama
em si, cabe ressaltar a distino que
feita no trabalho de Duffus (2001)
entre as expresses anlise e ava-
liao. A anlise consiste no exame
detalhado de algo complexo, feito
com a finalidade de entender sua
natureza ou determinar suas caracte-
rsticas essenciais. A avaliao des-
crita como sendo a combinao de
anlise de fatos e da inferncia de
poss vei s conseqnci as
concernentes a um objeto particular.
Neste contexto, so destacados dois
termos de uso freqente em avalia-
o de risco, mas que no fazem
parte do diagrama da figura 1, quais
sejam:
Indicador ou ponto final da
avaliao (do ingls, endpoint):
expresso quantitativa de um fator
especfico a que um risco pode estar
associado, conforme determinado por
uma avaliao de risco apropriada.
Fator de avaliao: ajuste
numrico usado na extrapolao de
relaes de dose-resposta determi-
nadas experimentalmente, para se
estimar o nvel de exposio a uma
substncia acima do qual efeitos ad-
versos podem acontecer.
Avaliao do perigo
A avaliao do perigo o pro-
cesso designado para determinar
quais so os fatores que contribuem
para os possveis efeitos adversos de
uma substncia qual uma popula-
o humana ou um compartimento
ambiental poderiam estar ou esto
expostos. O processo inclui trs pas-
sos: identificao do perigo, caracte-
rizao do perigo e levantamento do
perigo (Figura 1). Os fatores acima
referidos podem incluir mecanismos
de toxicidade, relaes de dose-efei-
to e dose-resposta, variaes na
suscetibilidade do alvo, etc.
Identificao do perigo: a pri-
meira fase da avaliao do perigo,
que consiste na determinao das
substncias de interesse e dos efei-
tos adversos inerentes que elas po-
dem estar causando a sistemas alvo
sob certas condies de exposio,
levando em conta dados sobre sua
toxicidade. (Nota: as definies po-
dem variar na sua formulao, de-
pendendo do contexto. Assim, no
contexto da avaliao de risco, a
identificao de risco consiste na
primeira fase onde so determina-
dos os perigos particulares a que um
determinado sistema alvo pode es-
tar exposto, incluindo dados de
toxicidade associados).
Caracterizao do perigo: o
segundo passo no processo de ava-
liao do perigo, consistindo na des-
crio qualitativa e, quando for pos-
svel, quantitativa, da natureza do
perigo associado com um agente
biolgico, qumico ou fsico, baseado
em um ou mais elementos, como
mecanismos de ao envolvidos,
extrapolao biolgica, relaes de
dose-resposta e dose-efeito e as suas
respectivas incertezas associadas.
Levantamento do perigo: o
terceiro passo no processo que tem
por finalidade a determinao da
relao qualitativa e quantitativa
existente entre exposio a um pe-
rigo sob certas condies, incluindo
as incertezas associadas, e o resul-
tante efeito adverso.
Avaliao de risco
A avaliao de risco o proces-
so cujo objetivo calcular ou estimar
o risco que possa existir para um
determinado sistema alvo em decor-
rncia da sua exposio a uma subs-
tncia particular, levando-se em conta
as caractersticas inerentes da subs-
tncia em questo, assim como tam-
bm as caractersticas do sistema
alvo especfico. O processo inclui
quatro passos: identificao do peri-
go, avaliao da dose-resposta, ava-
liao da exposio e caracterizao
do risco (Figura 1). tambm o
primeiro passo dentro da anlise de
risco.
Identificao do perigo: a pri-
meira fase na avaliao de risco,
consistindo na determinao dos
perigos particulares a que um deter-
minado sistema alvo pode estar ex-
posto, incluindo dados de toxicidade
associados: (Nota: vide definio al-
ternativa no contexto da avaliao
do perigo).
Avaliao da dose-resposta: o
segundo dos quatro passos da avali-
ao de risco, que consiste na anli-
se da relao entre a quantidade
total de um agente que absorvida
por um grupo de organismos e as
mudanas desenvolvidas no grupo
em reao a este agente, assim como
inferncias derivadas de tal anlise
com respeito populao inteira.
Avaliao da exposio: pas-
so da avaliao de risco que consis-
te em uma anlise quantitativa e
qualitativa da presena de um agen-
te (incluindo seus derivados) em um
determinado ambiente e a inferncia
das possveis conseqncias que ele
pode ter para uma determinada po-
pulao de interesse particular.
Caracterizao do risco:
integrao das evidncias, dos argu-
mentos e das concluses coletadas
nas fases de identificao do perigo,
avaliao da dose-resposta e avalia-
o da exposio, e estimativa da
probabilidade, incluindo as incerte-
zas a esta associada, de ocorrncia
de um efeito adverso se um agente
administrado, ingerido ou absorvi-
do por um organismo particular ou
uma populao. o ltimo passo da
avaliao de risco. (Nota: na avalia-
o de risco ecolgico, a avaliao da
dose-resposta substituda pela ava-
liao da concentrao-resposta, ou,
ento, feita uma estimativa qualita-
tiva e, ou, quantitativa, incluindo as
incertezas a ela associadas, da seve-
ridade e da probabilidade de ocor-
rncia de efeitos adversos conheci-
dos e potenciais de uma substncia
em uma determinada populao).
Ainda dentro do contexto da
avaliao de risco, procura-se definir
o risco aceitvel, que aquele risco
46 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
tal em que os benefcios derivados
para um organismo, uma populao
ou um sistema ecolgico excedem
em valor os efeitos adversos que
poderiam resultar da exposio a um
agente particular.
Gerncia de risco
A gerncia de risco constitui-se
no processo de tomada de deciso
que envolve a considerao de fato-
res polticos, sociais, econmicos e
tcnicos, bem como informao re-
levante proveniente da avaliao de
risco pertinente a um perigo, no
intuito de desenvolver, analisar e
comparar opes regulatrias e no
regulatrias e ainda selecionar e
implementar as melhores decises e
aes para assegurar a segurana
contra aquele perigo. Essencialmen-
te, a gerncia de risco a combina-
o de trs passos: avaliao do ris-
co-benefcio, controle de emisso e
exposi o e, f i nal ment e, o
monitoramento do risco (Figura 1).
No passo intermedirio (controle de
emisso e exposio), a expresso
controle usada mais num sentido
geral do que com conotao
regulatria.
Avaliao do risco-benefcio:
estabelecimento de uma relao
qualitativa ou quantitativa entre ris-
cos e benefcios, envolvendo o pro-
cesso complexo de determinar a
importncia dos perigos identifica-
dos e dos riscos estimados para aque-
les organismos ou pessoas interessa-
dos ou afetados. o primeiro passo
dentro da gerncia de risco.
Monitoramento do risco: pro-
cesso de acompanhamento interno
das decises e aes para averiguar
se a reduo ou conteno de risco
relativo a um perigo particular est
assegurada.
Anlise de risco
Finalmente, aps a definio
prvia de alguns de seus termos
associados, a anlise de risco en-
to descrita por Duffus (2001) como
sendo o processo usado para contro-
lar situaes onde populaes ou
sistemas ecolgicos poderiam estar
expostos a um perigo. Normalmente
inclui trs passos, quais sejam, a
avaliao de risco, a gerncia de
risco e a comunicao do risco (Figu-
ra 1). Os termos avaliao de risco
e gerncia de risco j foram previa-
mente definidos, restando apenas a
definio a seguir:
Comunicao do risco: troca
interativa de informao sobre riscos
entre avaliadores de risco, gerentes,
imprensa, grupos interessados e o
pblico em geral.
Entendendo melhor a avaliao
de risco
Aps apresentarmos uma tenta-
tiva de padronizao de terminolo-
gia envolvendo a avaliao e a an-
lise de risco, procura-se, nos tpicos
a seguir, abordar com mais detalhes
alguns aspectos da avaliao de risco
de per si. O enfoque desta discusso
basicamente o mesmo adotado
pela Agncia de Proteo Ambiental
dos Estados Unidos, em documentos
conceituais relacionados a este as-
sunto (USEPA, 1998; 1992a,b,c).
Adicionalmente, procurou-se tam-
bm inserir recomendaes advindas
de relatrio especfico sobre o as-
sunt o, edi t ado pel a Agnci a
Ambiental Europia (Fairman et al.,
1999).
A avaliao de risco tem se tor-
nado uma ferramenta analtica im-
portante na tomada de deciso
ambiental. Ela pode ser definida
como a identificao de efeitos ad-
versos potenciais a humanos ou a
ecossistemas que resultam da expo-
sio a perigos ambientais. O risco
envolvido (dano, infeco, deficits
funcionais ou morte) pode ser ex-
presso em condies quantitativas
ou qualitativas. Conforme j descrito
anteriormente, o processo de avalia-
o de risco para a sade humana
freqentemente envolve os passos
seguintes:
1.Identificao de perigo - de-
terminao se um poluente afeta
Figura 1. Diagrama conceitual envolvendo as vrias etapas da anlise de risco.
Fonte: Adaptado de Duffus (2001).
Avaliao de dose-resposta
Avaliao do perigo
Identificao do perigo
Caracterizao do perigo
Levantamento do perigo
Avaliao de risco
Identificao do perigo
Avaliao da exposio
Caracterizao do risco
Gerncia de risco Anlise de risco
Avaliao do risco-benefcio
Controle da emisso e
da exposio
Avaliao de risco
Gerncia de risco
Comunicao de risco
Monitoriamento do risco
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 47
adversamente a sade humana;
2.Avaliao de dose-resposta -
determinao da relao entre o n-
vel de exposio e a probabilidade
de ocorrncia de efeitos adversos;
3.Avaliao da exposio - de-
terminao da extenso de exposi-
o;
4.Caracterizao do risco - des-
crio da natureza e, freqentemente,
da magnitude do risco, incluindo as
incertezas acompanhantes.
O fato de pode acontecer simul-
taneamente a exposio a muitos
perigos potenciais e em magnitude
variada faz com que o processo de
avaliao de risco seja complexo. A
avaliao de risco emprega um pro-
cesso de avaliao sistemtico para
determinar se um perigo existe e
que risco ele poderia representar.
Efeitos observados, julgamentos e
extrapolaes so todos usados no
estabelecimento de estimativas e de
suas incertezas para apoiar o pla-
nejamento e a tomada de deciso.
A aval i ao de r i sco
freqentemente usada no desenvol-
vimento de aes regulatrias para
proteger o pblico da exposio a
poluentes txicos. A avaliao de
risco tambm aplicada na anlise
de ecossistemas e em assuntos como
a depleo de oznio na estratosfera
e as mudanas climticas globais.
Devido ao fato de geralmente haver
lacunas no levantamento de dados
da avaliao de risco, esforos para
comparar e cl assi fi car ri scos
ambientais devem sempre levar em
conta o julgamento profissional.
Avaliao de risco comparativa
A maioria das avaliaes de risco
envolve a anlise de uma substncia
especfica ou de uma rea considera-
da problema. Outro uso da avaliao
de risco como uma ferramenta
para comparar riscos advindos de
problemas mltiplos no mbito esta-
dual, regional, nacional ou global.
Este processo de avaliao de risco
comparativo envolve os passos se-
guintes.
1. Listagem de todas as reas
com problema na regio, estado ou
pas;
2. Ranqueamento dos problemas
com base no risco (sade humana,
ecolgico, bem-estar ou qualidade
de vida); esta classificao est base-
ada em uma anlise de dados dispo-
nveis especficos para o problema
daquela regio, estado ou pas;
3. Desenvolvimento de uma
agenda de aes para cuidar das
reas com problema, baseando-se
na classificao de risco e em outros
fatores (por exemplo, viabilidade,
opinio pblica, etc.).
A avaliao de risco comparati-
va uma metodologia que usa co-
nhecimento cientfico, polticas
regulatrias, anlise econmica e
participao das partes interessadas
para identificar e tratar das reas que
r epr esent am mai or es r i scos
ambientais, provendo uma estrutura
organizacional que permita a
pr i or i zao dos pr obl emas
ambientais. Os resultados de uma
anlise de risco comparativa podem
ser usados para prover uma base
tcnica indicativa das aes de con-
trole e das prioridades administrati-
vas e de uso de recursos.
Um exemplo envolvendo o uso
da avaliao de risco comparativa no
estabelecimento de prioridades de
controle aquele adotado pela Agn-
cia de Proteo Ambiental dos Esta-
dos Unidos (USEPA) e pela Agncia
para Registro de Substncias Txicas
e Doenas (ATSDR) para a classifica-
o de substncias consideradas
poluentes prioritrios, nos Estados
Unidos. Este levantamento realiza-
do a cada dois anos e, em funo de
dados atualizados relativos possibi-
lidade de exposio e ao perigo
envolvendo cerca de 275 substnci-
as, estas so ento ranqueadas. A
tabela 1 mostra a classificao das 20
principais substncias, em 2003. A
lista completa das substncias avali-
adas encont r a- se em ht t p: //
www.atsdr.cdc.gov/clist.html. Adici-
onalmente, informaes extensivas
relacionados toxicidade e compor-
tamento ambiental da maioria dessas
substncias podem ser consultados
em http: //www. atsdr. cdc. gov/
toxpro2.html.
Um outro exemplo de avaliao
de risco comparativa aquele que
foi usado tambm pela USEPA para
classificar problemas ambientais con-
siderados de alto, mdio e baixo
risco para a populao humana ou
para o ambiente, nos Estados Uni-
dos, no documento intitulado
Unfinished Business: A Comparative
Assessment of Envi ronment al
Problems, publicado em 1987. Este
documento foi considerado ponto
de referncia sobre o assunto e base
para inmeros trabalhos futuros, in-
cluindo dentre estes um software
desenvolvido em 1995 por pesqui-
sadores da Universidade de Purdue
(EUA), o qual encontra-se disponvel
para carregamento em http://
w w w . e p a . g o v / s e a h o m e /
comprisk.html
A figura 2 ilustra a abordagem
adotada nesse software e a tabela 2
traz a classificao de riscos relativos
representados por alguns dos 31 pro-
blemas ambientais considerados
prioritrios, ranqueados em 4 gran-
des categorias de risco, a saber: 1)
Figura 2. Abordagem sistemtica para a tomada de deciso envolvendo riscos
comparativos.
Riscos para a Sade Humana, o
Ambiente e a Qualidade de Vida
Metas
Prioridades
Estratgias
Definio do Problema
Anlise dos Dados
Avaliao e
Retroalimentao
Implementao do Plano
de Ao Ambiental
48 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
exemplos apresentados para anlise
de risco comparativa sejam proveni-
entes de um pas com condies de
desenvolvimento diferentes daque-
las existentes no Brasil, o que
importante nesse contexto a ne-
cessidade de estabelecimento de pri-
oridades. Este o ponto principal a
ser considerado quando se pergunta:
Por que fazer uma avaliao de
risco comparativa? Independente-
mente da situao financeira que
atravessa um determinado pas, es-
tado ou municpio, no h recursos
disponveis para tratar de todos as
preocupaes ambientais de uma
comunidade ao mesmo tempo. Como
os tomadores de deciso trabalham
sempre com restries oramentri-
as, ento esses so obrigados a esco-
lher o que deve ser priorizado, quer
seja atravs de um processo definido
de tomada de deciso, quer seja
atravs de decises circunstanciais.
Alm disso, esses tomadores de
deciso esto sempre enfrentando
presses polticas e da opinio p-
blica para agir no sentido de reduzir
riscos ambientais ditos percebidos,
os quais podem ou no representar
uma ameaa atual para a sade hu-
mana, o ambiente ou a qualidade de
vida.
Relao entre avaliao
de risco e gerncia de risco
Conforme j definido anterior-
mente, a gerncia de risco o pro-
cesso de tomada de deciso atravs
do qual uma ao ou uma poltica
desenvolvida uma vez que um risco
tenha sido determinado. Ela integra
a avaliao de risco com assuntos
tcnicos, polticos, sociais e econ-
micos para desenvolver estratgias
de reduo e preveno do risco. A
integrao de todos esses fatores
envolvidos na gerncia de risco
bastante complexa e um caso espe-
cialmente interessante e para o qual
tem sido dada uma grande nfase
mais recentemente o que diz res-
peito anlise econmica de bene-
fcios ecolgicos, visto que as dife-
rentes vises e perspectivas de eco-
nomistas e ecologistas devem ser
integradas visando uma avaliao
i nt erdi sci pl i nar das quest es
1 a l e b a T s a d a r e d i s n o c s a s o g i r e p s a i c n t s b u s e d o c s i r e d o a c i f i s s a l C .
. s o d i n U s o d a t s E s o n e l o r t n o c a r a p s a i r t i r o i r p
m e o a c i f i s s a l C
3 0 0 2
a i c n t s b u s a d e m o N
o a c i f i s s a l C
1 0 0 2 m e
1 o i n s r A 1
2 o b m u h C 2
3 o i r c r e M 3
4 a l i n i v e d o t e r o l C 4
5 s a d a r o l c i l o p s a l i n e f i B 5
6 o n e z n e B 6
7 o i m d C 7
8
s o c i t m o r a s o t e n o b r a c o r d i H
s o c i l c c i l o p
9
9 o n e r i p ) a ( o z n e B 8
0 1 o n e t n a r o u l f ) b ( o z n e B 0 1
1 1 o i m r f o r o l C 1 1
2 1 p , p , T D D 2 1
3 1 4 5 2 1 r o l c o r A 3 1
4 1 0 6 2 1 r o l c o r A 4 1
5 1 o n e c a r t n a ) h , a ( o z n e b i D 6 1
6 1 o n e l i t e o r o l c i r T 5 1
7 1 e t n e l a v a x e h , o m o r C 8 1
8 1
n i r d l e i D 7 1
9 1 o c n a r b , o r o f s F 4 2
0 2 e n a d r o l C 9 1
l m t h . t s i l c / v o g . c d c . r d s t a . w w w / / : p t t h : e t n o F
r i scos sade humana -
carcinognicos; 2) riscos sade
humana - no carcinognicos; 3) ris-
cos ecolgicos; e, 4) riscos para o
bem-estar (qualidade de vida).
Um resumo dos resultados des-
se estudo de 1987 revela que:
Nenhum pr obl ema f oi
ranqueado como sendo de risco rela-
tivamente alto ou baixo em todas as
4 grandes categorias de risco;
Problemas classificados como
de mdio a alto risco em 3 categorias
foram: poluentes atmosfricos co-
muns, depleo da camada de oz-
nio na estratosfera, resduos de
pesticidas em alimentos e outros
riscos associados a pesticidas (e.g.,
lixiviao, escorrimento superficial);
Problemas classificados como
de alto risco para a sade e de baixo
risco ecolgico e para o bem-estar
foram: poluentes atmosfricos txi-
cos ou perigosos, radnio em recinto
fechado, poluio de ar em recinto
fechado (exclui radnio), aplicao
de pesticidas, exposio a produtos
de consumo diversos e exposio do
trabalhador a substncias qumicas;
Problemas classificados como
de alto risco ecolgico ou para o
bem-estar foram: efeito estufa, fon-
tes pontuais e no pontuais de polui-
o de guas de superfcie, alterao
fsica de habitats aquticos (incluin-
do reas pantanosas e esturios) e
rejeitos de minerao.
Ressalta-se que embora os
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 49
1
Classe 1 representa o mais alto risco e classe 5 representa risco de cncer no identificado (nmero entre parnteses
identifica ranqueamento dentro das classes);
2
Classificao relativa alto, mdio ou baixo;
3
Nmero 1 representa o
maior risco e 6, o menor (problemas classificados com mesmo nmero no foram ranqueados);
4
Classificao relativa
alto, mdio, baixo ou mnimo (nmero entre parnteses identifica ranqueamento dentro das classes de alto, mdio
ou baixo risco relativo).
2 a l e b a T o r t a u q m o c o d r o c a e d , s o d i n U s o d a t s E s o n s i a t n e i b m a s a m e l b o r p s n u g l a e d o c s i r e d a v i t a r a p m o c o a c i f i s s a l C .
o c s i r e d s a i r o g e t a c s e d n a r g
l a t n e i b m a a m e l b o r P
o c s i r e d a i r o g e t a C
e d a s s o c s i R
a n a m u h
s o c i n g o n i c r a c
1
e d a s s o c s i R
o n a n a m u h
s o c i n g o n i c r a c
2
s o c s i R
s o c i g l o c e
3
o a r a p s o c s i R
r a t s e - m e b
4
O S ( s n u m o c s o c i r f s o m t a s e t n e u l o P
2
O N ,
x
, O C , o i n z o ,
e s i e v m s e t n o f e d s e t n e i n e v o r p ) s o d a l u c i t r a p , o b m u h c
s a i r n o i c a t s e
) 2 2 ( 3 e s s a l C o t l A 3 ) 1 ( o t l A
s i e v s s o p i u l c n i ( s o s o g i r e p u o s o c i x t s o c i r f s o m t a s e t n e u l o P
) s o c i n g o n i c r a c
) 6 ( 1 e s s a l C o t l A 4
) 3 2 ( o x i a B
) o i n d a r i u l c x e ( o d a h c e f o t n i c e r m e r a o d o i u l o P ) 4 ( 1 e s s a l C o t l A - o m i n M
a n o i n z o e d a d a m a c a r a t e f a e d s a t i e p s u s s a i c n t s b u S
a r e f s o t a r t s e
) 8 ( 2 e s s a l C o i d M 1 ) 6 ( o t l A
a f u t s e o t i e f e & o c i n b r a c s G
) 8 2 ( 5 e s s a l C
o d a e u q n a r o N 1 ) 5 ( o t l A
e d s a u g m e a g e r r a c s e d e d s a t e r i d s i a u t n o p s e t n o F
e i c f r e p u s
) 3 2 ( 4 e s s a l C o x i a B 3 ) 8 ( o t l A
e d s a u g m e a g e r r a c s e d e d ) s a s u f i d ( s i a u t n o p o n s e t n o F
e i c f r e p u s
) 0 2 ( 3 e s s a l C o i d M 3 ) 2 ( o t l A
o d a n i m a t n o c ) o d i l s s o i b ( o t o g s e e d o d o L ) 7 1 ( 3 e s s a l C o x i a B 5
) 2 2 ( o x i a B
) a r i e n r o t a n ( l e v t o p a u g e d o i u l o P ) 9 ( 2 e s s a l C o t l A ) 9 1 ( o x i a B
s o v i t a n i - s o s o g i r e p s o u d s e r e d e t r a c s e d e d s i a c o L ) 7 ( 2 e s s a l C o x i a B 5 ) 9 ( o i d M
s i a p i c i n u m - s o s o g i r e p o n s o u d s e r e d e t r a c s e d e d s i a c o L ) 6 1 ( 3 e s s a l C o i d M 5 ) 0 1 ( o i d M
s i a i r t s u d n i - s o s o g i r e p o n s o u d s e r e d e t r a c s e d e d s i a c o L ) 4 1 ( 2 e s s a l C o i d M 5 ) 5 1 ( o x i a B
o a r e n i m e d s o t i e j e R ) 8 1 ( 3 e s s a l C o x i a B 2 ) 1 2 ( o x i a B
s o c i x t s o t u d o r p - s i a t n e d i c a s o t n e m a z a V ) 5 2 ( 4 e s s a l C o t l A 5 ) 7 1 ( o x i a B
o e l e d o t n e m a m a r r e d - s i a t n e d i c a s o t n e m a z a V ) 6 2 ( 4 e s s a l C o d a e u q n a r o N 5 ) 8 1 ( o x i a B
o t n e m a n e z a m r a e d s e u q n a t e d s o t n e m a z a V ) 9 1 ( 3 e s s a l C o x i a B 6
) 6 1 ( o x i a B
e i c f r e p u s b u s e d a u g e d o a n i m a t n o c e d s e t n o f s a r t u O ) 1 2 ( 3 e s s a l C o d a e u q n a r o N 5 o m i n M
a d i v e d e o n a m u h ( o t n e m i l a o n s a d i c i t s e p e d s o u d s e R
) m e g a v l e s
) 3 ( 1 e s s a l C o t l A 3
o m i n M
s a d i c i t s e p e d o a c i l p A ) 0 1 ( 2 e s s a l C o t l A -
o m i n M
, o a i v i x i l , . g . e ( s a d i c i t s e p a s o d a i c o s s a s o c s i r s o r t u O
) l a i c i f r e p u s o t n e m i r r o c s e
) 2 1 ( 2 e s s a l C o i d M 3 ) 3 1 ( o i d M
e t n e m a c i t e n e g s o m s i n a g r o i u l c n i ( a i g o l o n c e t o i b a d s o c s i R
) s o d a c i f i d o m
) 7 2 ( 5 e s s a l C o d a e u q n a r o N - ) 4 1 ( o i d M
o m u s n o c e d s o g i t r a m e s o c i m u q s o t u d o r p a o i s o p x E
s o s r e v i d
) 4 ( 1 e s s a l C o t l A - o m i n M
s a c i m u q s a i c n t s b u s a r o d a h l a b a r t o d o i s o p x E ) 1 ( 1 e s s a l C o t l A - o m i n M
50 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
ambientais. Para informaes adicio-
nais pertinentes a esta questo suge-
re-se uma consulta ao documento A
Framework f or t he Economi c
Assessment of Ecological Benefits
recentemente editado pela USEPA
(disponvel em http://www.epa.gov/
osa/spc/pdfs/feaeb3.pdf), bem como
ao texto de Guilherme (2000).
A gerncia de risco tem que
levar em conta as incertezas associ-
adas com as vrias suposies e jul-
gamentos feitos em cada passo do
processo envolvendo a avaliao de
risco. Quando possvel, a avaliao
de risco deve discutir as incertezas
de tal forma que o responsvel por
gerenciar o risco possa levar isto em
considerao na sua tomada de deci-
so. Como ilustrao, apresenta-se,
na figura 3, a relao entre os ele-
mentos da avaliao de risco e da
gerncia de risco, levando-se em
considerao a sade humana.
Sumarizando-se as informaes
constantes na figura 3, nota-se que
diferentes tipos de informao so
usados na avaliao de risco sade.
A identificao do perigo uma
determinao qualitativa de que um
determinado agente est casualmente
ligado a efeitos especficos sade.
Dados avaliados neste processo po-
dem incluir estudos epidemiolgicos,
estudos com animais, ensaios de curta
durao e comparaes baseadas nas
relaes entre atividade e estrutura.
Uma avaliao de dose-resposta
executada por pessoal especializa-
do que usa dados disponveis sobre
o indicador ou ponto final de avalia-
o envolvendo a sade tanto para
estudos com humanos quanto com
animais. Esta avaliao de dose-res-
posta inclui o exame de como os
dados dos estudos com humanos e
animais so influenciados pelo nvel
de exposio ao agente qumico,
assim como tambm diferenas en-
t r e espci es ou na r espost a
toxicolgica de um determinado r-
go. O componente avaliao da
exposio usa informao sobre n-
veis ambientais, destino e transpor-
te, anlises ecolgicas, exposies
no ponto de contato, modelagem
farmacocintica dos dados e caracte-
rsticas demogrficas. O componen-
te final, denominado caracterizao
do risco, uma medida do risco ao
indivduo ou para a populao que
leva em conta a informao colecio-
nada durante a identificao do peri-
go, a avaliao de dose-resposta e a
avaliao de exposio, as quais so
caracterizadas completamente por
meio da discusso e interpretao
dos pontos fortes e fracos envolven-
do os dados, do conhecimento e ou
da falta de conhecimento sobre os
fenmenos biolgicos avaliados e
sobre as incertezas qualitativas ou
quantitativas da anlise. Esses passos
da avaliao de risco para a sade
humana so discutidos com mais
detalhes no item a seguir.
Avaliao de riscos para a
sade humana
No sentido mais simples, riscos
populao advindos de poluentes
txicos existem em funo de dois
fatores mensurveis: perigo e expo-
sio. Para gerar um risco, uma subs-
tncia qumica tem que apresentar
perigo e estar presente no ambiente
Figura 3. Elementos da avaliao e gerncia de risco
Observaes de
laboratrio e de campo
dos efeitos adversos
para a sade advindos
da exposio a agentes
particulares
Identificao do perigo
(o agente causa efeito
adverso?)
Informaes sobre
mtodos de
extrapolao de dose
alta para baixa e de
testes com animais
para humanos
Medies de campo,
estimativas de
exposies e
caracterizao da
populao
Avaliao da dose-
resposta(qual a
relao entre dose e
incidncia do dano em
humanos?)
Avaliao da exposio
(que exposies
ocorrem atualmente ou
podem ser esperadas
sob diferentes
circunstncias?)
Caracterizao do risco
(descrio do risco que
combina resultados de
identificao do perigo,
estudos de dose-
resposta e avaliao da
exposio)
Desenvolvimento de
opes regulatrias e
no regulatrias
Avaliao da sade
pblica e das
conseqncias
econmicas, sociais e
polticas das opes
regulatrias
Decises das agncias
regulatrias e aes
Pesquisa Avaliao de risco Gerncia do risco
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 51
em um certo nvel tal que seja
significante. A avaliao de risco
uma interpretao da evidncia des-
ses dois pontos. A figura 4 procura
ilustrar isso.
Nota-se na figura 4 que o risco
representado pela substncia qumi-
ca ou agente (ilustrado graficamente
pela rea em cinza claro derivada da
interseco entre o perigo e a expo-
sio) ser tanto maior quanto maio-
res forem a exposio e o perigo
(maiores reas dos crculos). Se a
rea de interseco - que representa
o risco - puder ser avaliada em ter-
mos de quantidade de um agente
perigoso qualquer que atinge um
determinado indivduo ou popula-
o, ento a mesma poder ser com-
parada com os valores representa-
dos pela entrada diria aceitvel
ou dose de referncia (vide defini-
es em Borm, 2004), obtendo-se,
assim, um parmetro comparativo
entre o risco estimado e aquele con-
siderado aceitvel. Caso o valor esti-
mado para o ri sco (rea da
interseco) seja igual ou menor que
o valor que representa a entrada
diria aceitvel ou dose de refern-
cia (rea em preto), ento uma inter-
veno no ambiente afetado poder
ser descartada. Do contrrio se o
risco estimado for maior que o acei-
Figura 4. Ilustrao grfica do conceito de risco (interseco das reas que
representam o perigo e a exposio), comparando-o com o conceito de entrada
diria aceitvel ou dose de referncia (rea em preto).
tvel ento h que se proceder a
uma estratgia de remediao que
possa tornar o local seguro para uso
atual e futuro.
Pode-se inferir tambm pela fi-
gura 4 que se o perigo pequeno
(pequeno tamanho do crculo em
cinza escuro), ento mesmo que a
exposio seja grande (crculos em
branco), o risco estimado poder ser
negligvel ou estar prximo do nvel
aceitvel. Analogamente, se a expo-
sio pequena, ento mesmo que
o perigo seja grande, h a possibili-
dade de que o risco estimado seja
igual ou menor que aquele conside-
rado aceitvel. Esse ltimo caso de
especial interesse, pois controlar a
exposio (por exemplo, mediante
o uso de equipamentos de proteo
individual ou da correta utilizao de
produtos qumicos) representa a
melhor maneira de se reduzir o risco
advindo de um agente qualquer que
possui um perigo intrnseco a ele
associado. Obviamente, nas circuns-
tncias em que inexiste o perigo e,
ou, a exposio a um agente qual-
quer, ento o risco considerado
nulo. Essa situao de risco zero,
entretanto, utpica.
A avaliao de risco permite
julgar se efeitos adversos acontece-
ro ou no e, caso aconteam, quais
seriam os clculos necessrios para
se estimar a extenso total dos efei-
tos. A estrutura organizacional da
avaliao de risco til para auxiliar
no agrupamento de informaes e
nas interpretaes cientficas dos
fatos, o que ajuda na formulao de
polticas regulatrias e de estratgias
de gerenciamento ambiental. Em
cada um dos quatro passos no pro-
cesso de avaliao de risco, dados
so agrupados e interpretados visan-
do concluses sobre fatores de risco.
Freqentemente a interpretao da
informao expressa como sendo
o melhor julgamento cientfico pos-
svel por parte dos avaliadores de
risco. Para auxiliar no estabelecimento
de ref ernci as t oxi col gi cas,
freqentemente lana-se mo de
bancos de dados como aquele da
USEPA (The I nt egr at ed Ri sk
Information System - IRIS), o qual
contm informaes resumidas acer-
ca de efeitos crnicos sade huma-
na para aproximadamente 500 subs-
tncias qumicas e outros agentes.
Esse sistema de informao de risco
inclui sees sumarizando efeitos
potenciais da exposio oral a (dose
de referncia oral) ou da inalao de
(concentrao de referncia para ina-
lao) substncias consideradas no
carcinognicas, bem como informa-
o sobre risco de carcinognicos.
Essa base de dados representa um
recurso inicial til para a identifica-
o do perigo e para a busca de
informaes sobre dose-resposta,
permitindo ainda que o usurio bus-
que informaes sobre os dados ori-
ginais nos quais a informao foi
baseada. Para acessar esse banco de
dados, consulte a lista de websites
sugeridos ao final deste artigo.
Identificao do perigo
A Identificao do perigo, o pri-
meiro passo no processo de avalia-
o de risco para a sade humana,
envolve o julgamento da evidncia
disponvel acerca da possibilidade
de uma substncia particular causar
um efeito adverso para a sade.
Tambm pode envolver a caracteri-
zao do comportamento de uma
substncia qumica dentro do corpo
e sua interao com rgos, clulas
52 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
ou at mesmo componentes das c-
l ul as. I deal ment e, est udos
epidemiolgicos so os mais ade-
quados e importantes nesses casos,
porm, a disponibilidade destes da-
dos limitada. Estas avaliaes de-
pendem mais freqentemente de
testes com animais. Estes testes per-
mitem o controle rigoroso de muitos
fatores que podem gerar incertezas.
Porm, sistemas biolgicos de ani-
mais so diferentes daqueles dos
seres humanos. Algumas espcies
de animais parecem ser mais sens-
veis que os humanos a certas subs-
tncias e menos sensveis a outras.
Avaliao da dose-resposta
A avaliao da dose-resposta o
processo de caracterizao da rela-
o existente entre a dose recebida
de um agente qualquer e a incidn-
cia de efeitos adversos na populao
exposta. Enquanto a identificao do
perigo procura determinar se pro-
vvel que uma substncia qumica
cause um efeito particular em huma-
nos ou animais, o estudo da dose-
resposta quantifica este efeito, ou
seja, determina qual a intensidade
de resposta obtida em vrios nveis
de exposio (dose). A intensidade
de dano causado por diferentes subs-
tncias varia amplamente; por exem-
plo, uma substncia qumica A e
outra B podem, ambas, causar cn-
cer em animais, mas pode ser neces-
srio uma dose muito maior da subs-
tncia A do que da B para produzir
tumores em animais testados no la-
boratrio. Quando os resultados da
avaliao da dose-resposta com ani-
mais so extrapolados para seres
humanos, devem ser feitos ajustes
para se corrigirem diferenas entre
humanos e animais no que diz res-
pei t o sensi bi l i dade e
farmacocintica (taxa de transforma-
es fisiolgicas das substncias).
Normalmente, efeitos de baixas do-
sagens so deduzidos de resultados
de estudos de laboratrio ou
epidemiolgicos com altas dosagens.
Embora algumas diferenas possam
ser ajustadas, muitas outras no so
suficientemente entendidas, geran-
do, assim, incertezas (por exemplo,
animais e humanos podem diferir
em suscetibilidade em funo de
idade, sexo, diversidade gentica,
estado de sade, estilo de vida ou
outros fatores). Para informao atu-
alizada relativa a estudos de dose-
resposta, sugere-se uma consulta
base de dados descrita anteriormen-
te (IRIS).
Avaliao da exposio
A exposio acontece quando
os seres humanos entram em conta-
to com um agente qualquer. Por
outro lado, a dose a quantidade da
substncia que realmente penetra
no organismo. A exposio pode
acontecer por ingesto, inalao ou
absoro dermal (Figura 5). A rota de
exposio geralmente afeta a exten-
so da absoro e, conseqentemen-
te, a dose. Exposio e dose so
consideradas ao se avaliar o risco,
pois: 1) um agente tem que alcanar
receptores biolgicos (por exem-
plo, rgos ou clulas) para produzir
uma resposta; 2) a produo de uma
resposta e a intensidade da mesma
so relacionadas com a dose do agen-
te no receptor; e, 3) a concentrao
e a rota de exposio afetam signifi-
cativamente a dose do agente no
receptor.
A avaliao da exposio est
baseada em moni t or ament o
ambiental ou em modelagem, po-
dendo tambm advir da combinao
desses. Ressalta-se, entretanto, que
dados concretos provenientes da
exposio de humanos bem como
dados extensivos de monitoramento
so geralmente limitados, devido a
limitaes oramentrias. Um resu-
mo dos dados disponveis sobre v-
rios fatores usados na avaliao da
exposio humana, incluindo consu-
mo de gua potvel, consumo de
diferentes alimentos (como frutas,
verduras, carnes, laticnios e peixes)
padres para solos e massa corprea,
pode ser encontrado nas publica-
es EPA/600/8-89/043 Exposure
Factors Handbook e EPA/600/R-03/
029 CSFII Analysis of Food Intake
Distributions, as quais podem ser
obtidas consultando-se um dos
websites sugeridos ao final deste ar-
tigo (http://www.epa.gov/nepis/).
Caracterizao do risco
A caracterizao do risco a
combinao da identificao do pe-
rigo com informaes sobre dose-
resposta e exposio. Embora os
clculos finais para se estimar o risco
sejam diretos, o modo atravs do
qual a informao apresentada
importante. A avaliao final deve
revelar toda a informao pertinente
ao assunto que estava disponvel no
momento da tomada de deciso, in-
cluindo aquela relativa a fatores tais
como a natureza e a relevncia da
evidncia levantada em cada passo
do processo, as incertezas associa-
das e a distribuio do risco atravs
dos vrios segmentos da populao.
Avaliao de riscos ecolgicos
A abordagem usada na avaliao
de r i scos ecol gi cos
conceitualmente semelhante quela
usada na avaliao de riscos para a
sade humana. A avaliao de riscos
ecolgicos determina a probabilida-
de de que efeitos ecolgicos adver-
sos estejam acontecendo ou aconte-
cero como resultado da exposio a
um ou mais agentes. O termo agen-
te pode ser definido como qualquer
entidade qumica, fsica ou biolgica
que pode induzir efeitos adversos
em indivduos, populaes, comuni-
dades ou ecossistemas. Esses agen-
tes podem ser representados tanto
por uma drenagem de uma rea
pantanosa quanto pela liberao de
substncias qumicas no ambiente.
Assim, a avaliao de riscos ecolgi-
cos deve ser flexvel o suficiente de
modo a proporcionar uma estrutura
lgica e cientfica que permita aco-
modar uma ampla gama de agentes
que possam resultar em um risco. A
avaliao de riscos ecolgicos pode
ajudar na identificao de problemas
ambientais, no estabelecimento de
prioridades e no provimento de uma
base ci ent f i ca par a aes
regulatrias. Esse processo pode
identificar riscos existentes ou ento
prever os riscos de advindos de agen-
tes que ainda no esto presentes no
ambiente.
A avaliao de riscos ecolgicos
inclui trs fases primrias: formula-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 53
o do problema, anlise e caracteri-
zao do risco (Figura 6). Durante a
formulao do problema, os avalia-
dores de risco estabelecem metas e
selecionam os indicadores da avalia-
o, preparam o modelo conceitual
e desenvolvem um plano de anlise.
Durante a fase de anlise, so avali-
adas a exposio ao(s) agente(s) e a
relao entre nvel de exposio e
os efeitos ecolgicos. Na terceira
fase, caracterizao do risco, os ava-
liadores estimam os riscos com base
no cruzamento das informaes de
exposio com o perfil de resposta
ao(s) agente(s). Estes riscos so en-
to descritos, discutindo-se as evi-
dncias e determinando-se as adver-
sidades ecolgicas, sendo posterior-
mente relatados em um relatrio.
Uma estreita cooperao entre as
partes interessadas e os avaliadores
e gerentes de risco, durante o plane-
jamento inicial, bem como a correta
comunicao do risco, ao trmino da
avaliao, so crticos para assegurar
que os resultados da avaliao de
risco possam ser usados para supor-
tar as decises de gerncia.
Em funo da necessidade de
participao de pessoas com notrio
conhecimento numa determinada
rea especfica (especialmente em
avaliaes de risco ecolgico com-
plexas), avaliadores de risco e ge-
rentes de risco freqentemente
trabalham em equipes multidiscipli-
nares.
Tanto os gerentes quanto os
Figura 5. Rotas principais de exposio na avaliao de risco sade humana.
Fonte: Adaptado de Fairman et al. (1999)
54 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
avaliadores de risco devem contri-
buir significativamente para as ativi-
dades iniciais de planejamento da
avaliao de risco ecolgico. Geren-
tes de risco encarregados de prote-
ger o ambiente devem identificar a
informao que eles precisam para
tomar suas decises, enquanto que
os avaliadores de risco devem asse-
gurar que o conhecimento cientfico
seja usado efetivamente para enfocar
as preocupaes ecolgicas. Juntos,
avaliadores e gerentes podem julgar
se a avaliao de risco realmente
focalizou os problemas identifica-
dos. Ressalta-se que o processo en-
volvido nesse planejamento inicial
distinto daquele procedimento cien-
tfico requerido para uma avaliao
de risco ecolgico. Esta distino
deve assegurar que questes polti-
cas e sociais possam ajudar na defini-
o dos objetivos da avaliao de
risco sem, entretanto, induzir a deci-
ses tendenciosas.
Consideraes finais
Conforme foi relatado neste ar-
tigo, a anlise de risco um proces-
so de avaliao, gerenciamento e
comunicao usado para avaliar
dados cientficos, comparar e seleci-
onar as polticas de ao disponveis
e comunicar toda a informao obti-
da no intuito de prevenir ou contro-
lar riscos no desejados advindos da
exposio de um indivduo ou po-
pulao a um agente particular.
A avaliao de risco um passo
crucial nesse processo, pois nesta
fase que so levantadas todas as
informaes sobre os riscos estima-
dos, os quais tendem a ser compara-
dos com riscos considerados aceit-
veis, visando respaldar, de maneira
obj etiva, as futuras aes de
gerenciamento e comunicao de
risco. Entretanto, a tentativa de se
comparar, em termos quantitativos,
um risco calculado (a partir da esti-
mativa da exposio de um indiv-
duo ou uma populao a um agente
perigoso qualquer) com um risco
considerado aceitvel (valor este
proveniente de testes toxicolgicos
ou ecotoxicolgicos), nem sempre
possvel, especialmente em se tra-
tando de avaliaes de riscos ecol-
gicos.
Mesmo sabendo-se que algu-
mas incertezas qualitativas e quanti-
tativas cercam as estimativas de ris-
co para a sade humana, a possibili-
dade de comparao de valores cal-
culados com aqueles considerados
aceitveis traz um referencial mais
objetivo para a tomada de deciso
por parte dos agentes regulatrios.
J no caso da avaliao de riscos
ecolgicos e, mais especificamente,
aqueles associados aos organismos
geneticamente modificados (OGMs),
a multitude dos indicadores a serem
avaliados, aliada ao pouco conheci-
mento acerca dos efeitos ecolgicos
em longo prazo torna o processo de
caracterizao de risco bem menos
preciso e a tomada de deciso bem
mais complexa, diante do desafio de
decidir o que venha a ser o risco
aceitvel. Esta situao tem levado
alguns autores a sugerir uma aborda-
gem do risco de OGMs baseada no
princpio da precauo (Ervin et al.,
2000), sem que isto signifique, en-
tretanto, uma moratria aos organis-
mos geneticamente modificados
(Batie, 2003).
No caso da avaliao de risco
dos OGMs ou de outro agente qual-
quer, embora seja desejvel, do pon-
to de vista da proteo da sade
humana e do ambiente, que no haja
efeitos adversos s populaes ou
aos ecossistemas, razovel que se
admita, do ponto de vista da gern-
cia de risco, que a filosofia do risco
zero impraticvel numa socieda-
de onde a interveno antrpica atin-
giu os nveis correntemente obser-
vados nas civilizaes atuais. Assim
sendo, de se esperar que os bene-
fcios derivados para um organismo,
uma populao ou um sistema eco-
lgico excedem em valor os efeitos
adversos resultantes da exposio a
um agente particular. O uso de vaci-
nas (um agente biolgico) um
exemplo concreto disso e facil-
mente aceito pela populao, j que
os benefcios so bastante mais evi-
dentes que os provveis efeitos ad-
versos.
Finalizando, vale ressaltar, po-
rm, que por ocasio da comunica-
o de risco para a sociedade, esta
deve ser alertada para o fato de que
suas necessidades bsicas, bem como
Figura 6. Modelo de avaliao de riscos ecolgicos utilizado pela Agncia de
Proteo Ambiental dos Estado Unidos.
Fonte: USEPA Risk Assessment Forum (vide website ao final deste artigo)
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 55
os bens de consumo que a cerca - os
quais lhe trazem graus variveis de
satisfao ou de benefcio - somente
podem existir a partir da explorao
de recursos naturais que, mesmo
que sejam extrados ou produzidos
de modo a gerar o menor efeito
adverso possvel ao ambiente, pos-
suem uma taxa de renovao ou de
reposio geralmente menor do que
aquela em que atualmente so con-
sumidos.
Literatura Consultada
BATIE, S.S. 2003. The environmental
impacts of genetically modified
plants: challenges to decision
making. Oxford: American Journal
of Agricultural Economics,
85(5):1107-1111.
BORM, A. (Org.). Biotecnologia e
meio ambiente. 1 ed. Viosa, EDI-
TORA UFV, 2004. 425 p.
DUFFUS, J.H. 2001. Risk assessment
terminology. Research Triangle
Park: Chemistry International,
23(2):34-39.
ERVIN, D.; BATIE, S.; WELSH, R.; CAR-
PENTIER, C.; FERN, J.; RICHMAN,
N. & SCHULZ, M. 2000. Transgenic
crops: an environmental assess-
ment. Arlington: Henry A. Wallace
Center For Agricultural and Envi-
ronmental Policy at Winrock Inter-
national, 81p. (Policy Studies Re-
port N
o
15)
LEWALLE, P. 1999. Risk assessment
terminology: methodological con-
siderations and provisional results.
Vienna: Terminology Standardiza-
tion and Harmonization, 11(1-4):
1-28.
FAIRMAN, R.; MEAD, C.D. & WILLIA-
MS, W.P. 1999. Environmental risk
assessment - approaches, experi-
ences and information sources.
Denmark: European Environment
Agency. Environmental issue re-
port N
o
4. (disponvel em http://
reports.eea.eu.int/GH-07-97-595-
EN-C2/index_html)
GUILHERME, L.R.G. 2000. Impacto
ambiental e anlise de risco: risco e
custo como elementos para toma-
da de deciso. Lavras: Editora UFLA,
26 p.
USEPA. 1998. Guidelines for ecologi-
cal risk assessment. Washington,
DC: Risk Assessment Forum, U.S.
Environmental Protection Agency.
EPA/630/R-95/002F.
USEPA. 1992a. Guidelines for exposu-
re assessment. Washington, DC:
Risk Assessment Forum, U.S. Envi-
ronmental Protection Agency. EPA/
600/Z-92/001.
USEPA. 1992b. Framework for ecolo-
gical risk assessment. Washington,
DC: Risk Assessment Forum, U.S.
Environmental Protection Agency.
EPA/630/R-92/001.
USEPA. 1992c. Risk assessment. Wa-
shington, DC: Office of Research
and Development, Office of Inter-
national Activities, U.S. Environ-
mental Protection Agency. EPA/
600/M-91/034.
Web Sites Sugeridos
Agency for Toxic Substances and Disease Registry: http://www.atsdr.cdc.gov
A Citizens Guide to Risk Assessments and Public Health Assessments: http://www.atsdr.cdc.gov/publications/
CitizensGuidetoRiskAssessments.html
EEA (European Environment Agency): http://www.eea.eu.int/
EEA Multilingual Environmental Glossary:http://glossary.eea.eu.int/EEAGlossary
EEA Reports: http://reports.eea.eu.int/index_table?sort=Thematically
Glossary of IRIS (Integrated Risk Information System) Terms: http://www.epa.gov/iris/gloss8.htm
The Society for Risk Analysis: http://www.sra.org/
Terms of the Environment: http://www.epa.gov/OCEPAterms/
USEPA (United States Environmental Protection Agency): http://www.epa.gov/
USEPA Integrated Risk Information System (IRIS): http://www.epa.gov/iris/
USEPA Office of Research and Development: http://www.epa.gov/ord/
USEPA National Center for Environmental Assessment: http://www.epa.gov/ncea/
USEPA National Environmental Publications Information System: http://www.epa.gov/nepis/
USEPA Comparative Risk Assessment: http://www.epa.gov/seahome/comprisk.html
USEPA Risk Assessment Forum: http://cfpub.epa.gov/ncea/raf/index.cfm
56 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
RISCO E SEGURANA
AMBIENTAL
Pesquisa
Vagner Augusto Benedito
Dr, Engenheiro Agrnomo, M.Sc., PhD e Ps-
doutorando do Centro de Energia Nuclear na
Agricultura (CENA) Universidade de So Paulo (USP).
benedito@cena.usp.br
Antonio Vargas de Oliveira Figueira
Dr, Engenheiro Agrnomo, PhD, Livre Docente e
Professor Associado do Centro de Energia Nuclear
na Agricultura (CENA), Universidade de So Paulo
(USP).
figueira@cena.usp.br
Introduo
falta de conhecimento
pelos consumidores das
prticas agrcolas tende a
enfatizar as preocupa-
es sobre o impacto
ambiental do cultivo de plantas ge-
neticamente modificadas. Um as-
pecto importante quando se avalia o
impacto das plantas transgnicas a
definio de uma base comparativa,
uma vez que todos os tipos de agri-
cultura, mesmo o cultivo orgnico,
causam grandes impactos ao meio
ambiente. A origem do desequilbrio
ambiental causado pela agricultura
reside na necessidade primordial de
fornecer alimentos e matria-prima
para a manuteno e desenvolvi-
mento das sociedades humanas,
muito mais numerosas hoje do que
num equilbrio pr-civilizao.
O impacto dos transgnicos so-
bre o ambiente vem sendo muito
discutido, chegando a envolver seri-
amente as esferas cientficas, polti-
cas e da sociedade leiga. A tecnologia
transgnica tem o potencial de revo-
lucionar a agricultura, prometendo
desde maiores produtividades (pela
resistncia a estresses biticos e
abiticos, ou melhor eficincia
fotossinttica) at menor aplicao
de pesticidas e fertilizantes, alm de
possibilitar a produo de frmacos
e alimentos com melhores proprie-
dades nutricionais. Contudo, os
transgnicos tm sido alvo de dis-
cusso em relao aos possveis ris-
cos de desequilbrio do ecossistema
oriundos da introduo de varieda-
des transgnicas no campo.
A natureza dos riscos ambientais
de transgnicos depende das carac-
tersticas particulares da biologia de
cada espcie, do transgene, do
ecossistema no qual a lavoura ser
implantada, alm do manejo do sis-
tema de produo e de uma
regulao governamental e sua apli-
cao. Entretanto, no se deve per-
der a perspectiva do impacto
ambiental causado pela prpria agri-
cultura convencional.
Para a maioria dos riscos poten-
ciais das plantas transgnicas, estra-
tgias tm sido desenvolvidas e
adotadas para minimiz-los. A ado-
o de transgnicos no Brasil preci-
sa, assim, ser considerada caso a caso
e os dados experimentais acerca do
impacto no ambiente necessitam ser
validados em condies tropicais e
subtropicais.
Neste artigo, uma anlise do
debate sobre os transgnicos e de
seus potenciais riscos ambientais ini-
cia-se luz do legado de Rachel
Carson, do princpio da precauo e
da revoluo verde, culminando nos
problemas ambientais levantados a
respeito das plantas transgnicas e
da perspectiva de superao desses
problemas.
O legado de Carson
O momento aps a II Guerra
Mundial trouxe um desenvolvimen-
to nunca antes presenciado pela
humanidade e a maioria dos mem-
bros da sociedade acreditava que a
cincia levava a criao de coisas
essencialmente boas. Essa era a
viso da sociedade acerca de todo o
progresso tecnolgico ps-guerra,
incluindo o que passou a se chamar
de revoluo verde, um pacote de
novas tecnologias de produo agr-
Meio ambiente
Efeitos potenciais da introduo de plantas transgnicas
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 57
cola, como tratores, cultivares me-
lhorados (milho hbrido, trigo-ano),
o uso massivo de fertilizantes e de-
fensivos (incluindo-se o inseticida
DDT, usado contra o vetor da mal-
ria e na agricultura).
Rachel Carson (1907-1964) ob-
servou e relatou em seu livro Prima-
vera Silenciosa (1962), o impacto
imprevisto na natureza e na socieda-
de humana causado pelo uso desen-
freado do DDT, como o desequilbrio
em insetos no-alvo, o acmulo do
inseticida nas cadeias trficas e no
homem e os seus potenciais efeitos
carcinognicos nas futuras geraes.
O livro causou grande impacto, le-
vando proibio de seu uso em
diversos pases a partir da dcada de
1970. Entretanto, esse livro foi mais
longe, ajudando a firmar a conscin-
cia de uma relao entre as ativida-
des humanas e o equilbrio da natu-
reza, alm de deixar a sociedade
alerta quanto aos riscos potenciais
das novas tecnologias e conquistas
cientficas. Rachel Carson lembra-
da por ter alertado a humanidade
que o progresso cientfico deve es-
tar sempre aliado conservao
ambiental. nesse contexto que se
faz premente e salutar o debate em
todo o mundo sobre a segurana e
riscos potenciais envolvidos na pro-
duo das plantas transgnicas.
Risco e Segurana
Ambiental e o mtodo
cientfico
O risco ambiental de uma
tecnologia envolve a probabilidade
inerente dessa tecnologia trazer dano
ao ambiente. Por outro lado, segu-
rana ambiental a certeza dessa
tecnologia ser inofensiva ao bioma.
Infelizmente, dada complexidade
envolvida nas relaes ecolgicas
naturais, muito difcil de serem
estabelecidos com preciso todos os
riscos potenciais ou de se dar um
ndice absoluto de segurana
ambiental para uma tecnologia ainda
a ser implementada.
Da mesma forma, o rigor cient-
fico tambm no permite oferecer
concluses absolutas fora do mbito
da experimentao e anlise, ou seja,
no possvel concluir a segurana
ambiental de uma tecnologia sem
antes test-la nas mesmas condies
de sua utilizao, nem de certific-la
por um tempo maior do que aquele
avaliado experimentalmente.
Entretanto, h avaliaes cient-
ficas que podero oferecer nveis de
segurana ambiental, embora per-
guntas inovadoras podero ficar sem
resposta at que uma experimenta-
o adequada seja concluda.
Os riscos ambientais causados
pela inovao biotecnolgica so
basicamente o desequilbrio dos
ecossistemas biolgicos pela intro-
duo de novos agentes catalisadores
de mudanas nas relaes ecolgi-
cas; a perda da biodiversidade natu-
ral de um ecossistema pelos danos
causados pelo potencial de seleo
de uma ou mais espcies (adaptabi-
lidade); e o fluxo gnico entre esp-
cies relacionadas ou no (transfern-
cia gnica vertical ou horizontal).
importante ressaltar que riscos
ambientais semelhantes derivam da
atividade agrcola tradicional.
Com relao aos riscos ineren-
tes biotecnologia, incluindo a
transgenia, diversos documentos ofi-
ciais de governos e organizaes
trabalharam no tema ambiente e
impacto causado pelo homem, esta-
belecendo-se o princpio da pre-
cauo.
Princpio da Precauo
O princpio da precauo a
formulao em redao jurdica do
ditado popular antes prevenir do
que remediar e descreve a procu-
ra pela imposio de medidas pre-
ventivas antecipadas para preven-
o daqueles riscos para os quais se
tem pouco ou nenhum conhecimen-
to no qual se possa predizer a proba-
bilidade de dano futuro (Conko,
2003). a aplicao da mxima
latina in dubio pro reo, que se
torna in dubio pro natura.
Tendo surgido na dcada de
1980, o princpio da precauo foi
reformulado tantas vezes em docu-
mentos oficiais, que Sandin (1999)
encontrou 19 formulaes diferen-
tes. Assim, pode-se dizer hoje que
existem vrios princpios da precau-
o, seguindo duas correntes: uma
forte e outra mais branda (Morris,
2000).
A corrente forte do princpio da
precauo dita que a incerteza sobre
a exposio ou magnitude de um
risco justifica necessariamente uma
resposta regulatria para prevenir
ou minimizar o risco. Essa acepo
do princpio da precauo exige uma
garantia de segurana absoluta, o
que impossvel de ser oferecida
pelo rigor do mtodo cientfico.
J a verso mais branda do prin-
cpio, mais amplamente adotada,
pondera que a incerteza no deve
ser usada como uma desculpa para a
inao governamental nem como
justificao para prevenir uma res-
posta regulatria. O exemplo clssi-
co dessa definio dada pela De-
clarao Ministerial da II Conferncia
das Naes Unidas sobre Meio Ambi-
ente e Desenvolvimento, ocorrida
no Rio de Janeiro em 1992 (ECO-
92). O documento, conhecido como
Declarao do Rio, afirma no Princ-
pio 15 da Carta da Terra: onde
existam ameaas de riscos srios ou
irreversveis, no ser utilizada a fal-
ta de certeza cientfica total como
razo para o adiamento de medidas
eficazes em termos de custos para
evitar a degradao ambiental (ONU,
1992).
Mais recentemente, a Conven-
o sobre Diversidade Biolgica, em
2000, levou formulao do Proto-
colo de Biossegurana de Cartagena,
que busca a pr ot eo da
biodiversidade ecolgica dos riscos
potenciais impostos por organismos
transgnicos, referindo-se ao princ-
pio da precauo e reafirmando o
Princpio 15 da Declarao do Rio.
Ademais, o protocolo tambm esta-
belece medidas de compensao
para a biossegurana (Biosafety
Clearing-House) no intuito de facili-
tar o intercmbio de informaes
cientficas, tcnicas, ambientais e
legais e as experincias com os orga-
nismos geneticamente modificados.
O Brasil ratificou o protocolo em
novembro de 2003, o qual entrou
em vigor em fevereiro de 2004.
Inerente precauo que o prin-
cpio postula, h dialeticamente o
risco de paralisao (Sustein, 2002),
uma vez que novas tecnologias, pela
58 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
prpria definio de inovao, tra-
zem incertezas e riscos. No se
podendo calcular riscos imprevisveis,
o que deve ser analisado na deciso
sobre uma tecnologia ou produto
so os parmetros que levem a julgar
sobre os possveis custos ambientais
em relao aos provveis benefcios
soci ai s t r azi dos por sua
implementao ou banimento.
Revoluo Verde
e Biotecnologia
A revoluo verde, trazendo
novas perspectivas de produo e
produtividade agrcola, foi um ele-
mento-chave na conquista da segu-
rana alimentar atual. A fome mun-
dial j no se deve mais falta de
alimento, mas m distribuio de
riquezas entre pases e classes soci-
ais (FAO, 2001). A revoluo na
produo agrcola ocorrera no pero-
do ps-guerra, mas toda a tecnologia
produtiva estava limitada ao poten-
cial gentico-produtivo inerente s
culturas.
Hoj e, com o advent o da
biotecnologia, se fala numa segunda
revoluo verde, que no mais esta-
ria limitada ao potencial gentico
natural das espcies, mas que permi-
te o intercmbio gnico de uma es-
pcie a uma outra no relacionada,
superando at mesmo barreiras en-
tre os domnios da vida, como a
introduo de genes de uma bactria
ou animal em uma planta ou vice-
versa. A biotecnologia tem, assim, a
potencialidade de aumentar enor-
memente a produtividade agrcola,
bem como gerar produtos at ento
inexistentes e facilitar a obteno ou
melhorar a qualidade dos produtos
primrios.
certo que o sistema produtivo
proveniente da revoluo verde trou-
xera consigo um imenso impacto
ambiental, no uso em grande escala
de mquinas e agroqumicos, alte-
rando drasticamente as relaes eco-
lgicas naturais, embora a agricultura
seja essencialmente impactante ao
ambiente, at mesmo a agricultura
ecolgica, ao estabelecer novas rela-
es trficas e introduzir novas es-
pcies no ecossistema ou modificar
as propores das espcies nativas.
O que se busca atualmente
uma agricultura que apresente o me-
nor impacto ambiental possvel, que
necessite de um menor consumo
energtico no sistema produtivo e
com a maior produtividade possvel,
para minimizar a expanso das terras
agrcolas e atender ao aumento
populacional.
Embora o problema nos dias
atuais no seja o volume da produ-
o agrcola, mas sua distribuio, a
populao mundial vem crescendo
em ndices elevados e a cincia no
pode deixar para pensar a questo
alimentcia quando o fato j estiver
instalado. Ao invs, um dever dos
cientistas buscar respostas antecipa-
damente instalao dos problemas
e, assim, garantir o curso da humani-
dade. nesse fato que as plantas
transgnicas de alto desempenho
produtivo podem exercer um papel
preponderante.
Riscos potenciais
associados aos cultivos
transgnicos
Os riscos ambientais potenciais
da i nt r oduo das pl ant as
transgnicas incluem: a) o fluxo
gnico para espcies selvagens, que
dependendo da vantagem seletiva
oferecida pelo transgene poderia
levar ao aumento da populao de
ervas daninhas; b) os efeitos colaterais
indesejveis em organismos no-
alvo, sejam os microorganismos ou
os insetos inimigos naturais presen-
t es nas cul t uras, af et ando a
biodiversidade de um ecossistema;
c) ou mesmo o aumento das chances
de extino de populaes de esp-
cies vegetais selvagens causada pela
depresso gentica devido intro-
duo de novos genes no
ecossistema. Todos esses riscos
ambientais no so exclusivos das
culturas transgnicas, sendo tambm
inerentes aos sistemas convencio-
nais de agricultura, seja pelo empre-
go de novas culturas ou cultivares
geneticamente melhoradas ou pelo
controle agroqumico de pragas, do-
enas e ervas daninhas.
Entretanto, o que se conjectura
mais fortemente em relao aos
transgnicos a utilizao de genes
oriundos de outros domnios da vida,
especialmente os genes bacterianos
e virais, cujas plantas transgnicas
poderiam servir de ponte gentica
para o surgimento de variedades ou
cepas incontrolveis pelo homem.
Cada um dos pontos levantados so-
bre os ri scos ambi entai s dos
transgnicos examinado abaixo.
Fluxo Gnico
no intencional.
Entende-se por fluxo gnico no
intencional (escape gnico) a capa-
cidade de um gene chegar indeseja-
velmente e ser inserido em popula-
es onde este gene no exista. Em
relao aos transgnicos, temem-se
trs casos, em ordem crescente da
probabilidade: a) de uma planta
transgnica para organismos no re-
lacionados, como microorganismos
ou plantas de outras famlias botni-
cas; b) de uma planta transgnica
para uma outra espcie da mesma
famlia; c) de uma planta transgnica
par a a mesma espci e no
transgnica.
Em relao s possibilidades do
fluxo gnico dos transgnicos a ou-
tros organismos, a transferncia na-
tural de um transgene para organis-
mos no relacionados no foi relata-
da at o momento, podendo ser
considerada, portando, de baixo ris-
co. Do mesmo modo, a transfern-
cia gnica entre espcies vegetais
no relacionadas dificultada por
barreiras biolgicas naturais, incluin-
do incompatibilidades de polinizao
e fecundao.
A transferncia de genes de uma
espcie transgnica a uma espcie
botanicamente relacionada mais
plausvel e deve ser analisada caute-
losamente. Espcies ou famlias de
culturas silvestres apresentam maior
potencial de fluxo gnico pela maior
probabilidade de existirem outras
espcies geneticamente compatveis
por cruzamento, algumas podendo
ser espcies invasoras de culturas,
criando-se o risco de se produzir
super-ervas daninhas, dependendo
do transgene. No Brasil, muitas es-
pcies cultivadas so nativas do pas
ou da Amrica do Sul e possuem
espcies selvagens no pas, como
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 59
mandioca, cacau, batata, amendoim,
tomate, maracuj, goiaba e abacaxi.
Em alguns casos, mesmo sendo as
espcies cultivadas originrias de
outros continentes, podem existir no
pas espcies relacionadas selvagens
com potencial de serem sexualmen-
te compatveis. Como o caso do
arroz, originrio da sia, mas que
possui espcies daninhas sexualmen-
te compatveis no Brasil (arroz ver-
melho). A capacidade de cruza-
mentos interespecficos deve ser
investigada caso a caso e nota-se
uma falta de informao acerca das
possibilidades dos cruzamentos exis-
tentes entre as espcies e as culturas
brasileiras.
J o caso mais plausvel de fluxo
gnico a contaminao de uma
lavoura no transgnica pelo plen
oriundo de culturas transgnicas da
mesma espcie. Aqui importante
lembrar a classificao das culturas
vegetais em dois tipos distintos de
polinizao: as de fecundao cruza-
da (algamas, cuja biologia favorece
a disperso do plen no intuito de
fecundar outras plantas, com taxa
normalmente superior a 90% de fe-
cundao cr uzada), e as de
autofecundao (autgamas, cuja
bi ol ogi a f l or al f avor ece a
autopolinizao, com um mximo
de 5% de fecundao cruzada).
Quanto maior a disperso do plen e
a taxa de fecundao cruzada, maior
a probabilidade de o fluxo gnico
atingir locais mais distantes.
Tambm se deve levar em con-
ta os vetores da polinizao. Muitas
espcies utilizam vetores abiticos
para a disperso, especialmente o
vento e a gua. Outras espcies
utilizam vetores biolgicos, como
insetos (abelhas, mamangavas), ps-
saros (beija-flores) e mamferos (mor-
cegos). Uma anlise do fluxo gnico
no impacto ambiental deve levar em
considerao a eficincia e alcance
da disperso do plen.
O milho, originrio do Mxico,
espcie algama e usa especialmen-
te o vento para a disperso de plen.
Um trabalho conduzido por Eastham
e Sweet (2002) indica que a distn-
cia mxima alcanada pelo plen do
milho Bt foi de 100 m, enquanto uma
mdia de 98% do plen se restringiu
aos primeiros 50 m da lavoura. Vale
ressaltar que as distncias de alcance
do plen podem variar de regio
para regio, dependendo da varieda-
de do milho, da fora do vento no
local e perodo de florescimento da
cultura, da geografia do terreno, dos
tratos culturais etc.
A soja, por outro lado, espcie
autgama originria do continente
A possibilidade da insero de genes de interesse produtivo ou qualitativo que antes no estavam disponveis em uma
dada espcie aumentou enormemente as perspectivas do melhoramento gentico. Um dos genes mais comentados nos meios
de comunicao o que confere resistncia ao glifosato, um herbicida no seletivo. A introduo desse gene em culturas
como a soja facilita a tarefa de controlar as plantas daninhas no campo, ao necessitar apenas um herbicida para conter o
crescimento do mato na cultura, podendo at mesmo diminuir o consumo de agroqumicos no ciclo da cultura.
Tambm se fala muito na mdia sobre o gene Bt, que confere resistncia a insetos mastigadores em culturas como
milho, algodo, batata, tabaco e tomate. Esse gene codifica endotoxinas cry (cristal) originrias da bactria do solo
Bacillus thuringiensis. O cultivo de plantas Bt traz menor custo de produo, ao diminuir a pulverizao de inseticidas
contras as pragas. No caso do algodo, cujo cultivo est limitado no Brasil por causa do bicudo, o uso de cultivares
Bt poderia trazer aumentar a produtividade e reduzir o consumo de inseticidas. Alternativamente ao gene bacteriano
Bt, j existem alternativas de genes derivados do reino vegetal na conferncia de resistncia a insetos, como o gene
OC1 (orizacistatina1), derivado do arroz.
Alm das pragas, muitas culturas tm sua produo dificultada ou inviabilizada por doenas produzidas por
infeces virais. No Brasil, podem-se citar exemplos como o mosaico dourado do feijoeiro, a mancha anelar do
mamoeiro, o mosaico da batateira e o enrolamento da batateira. A expresso de fragmentos do gene da capa protica
do vrus em uma planta pode conferir resistncia ao ataque viral, possibilitando o plantio ou o aumento da produo
em reas infestadas. Tambm se explora o potencial dos transgenes na conferncia de resistncia a estresses
abiticos, como seca, salinidade e temperaturas extremas.
Apesar de muito se falar no ganho produtivo conferido pelos transgnicos, h vrios estudos que objetivam o
aumento da qualidade dos produtos agrcolas, como uma maior vida de prateleira dos produtos hortcolas e
ornamentais e uma melhor qualidade nutricional de alimentos como o milho, a soja e o arroz. Esses produtos, ao
invs de visarem facilitar o processo produtivo, visam fornecer produtos com maior qualidade ou incluir novas
caractersticas de interesse direto do consumidor. Um exemplo de alimento transgnico funcional o arroz dourado
(Golden Rice

), que atravs da introduo de dois genes que codificam enzimas importantes na rota metablica do
b-caroteno, aumentam a quantidade de vitamina A no gro, o que pode ajudar a suprir a deficincia dessa vitamina
em crianas de regies pobres do globo. Na mesma linha, tm-se conduzido pesquisas para aumentar as quantidades
de ferro e outros micronutrientes e vitaminas em outras culturas alimentares (Potykrus, 2001; Welch e Graham, 2004).
Algumas plantas transgnicas tambm tm como objetivo nico o benefcio do ambiente. A fitorremediao por
plantas transgnicas visa a descontaminao de guas e solos poludos pela alterao no metabolismo das plantas
que permite absorver substncias poluentes a um nvel no alcanado por plantas no transgnicas. Um dos exemplos
na absoro de metais pesados (como arsnio, cdmio, chumbo, cobalto, cobre, cromo, mercrio, nquel, ltio,
selnio, zinco). As plantas podem, ento, ser removidas do lugar para possibilitar um trabalho de purificao e
reutilizao do metal pesado absorvido.
POTENCIALIDADES DAS PLANTAS TRANSGNICAS
60 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
asitico. Estudos conduzidos com
variedades no transgnicas de soja,
ao analisar a polinizao natural em
campo aberto no delta do Mississipi,
mostraram uma taxa de polinizao
cruzada de 0,41% a 0,9 m e 0,03% a
5,4 m da fonte de plen (Ray et al.,
2003). J um trabalho envolvendo
disperso de plen transgnico da
cultivar BR-16 no cerrado brasileiro
relata uma taxa de 0,45% de
polinizao cruzada a 0,5 m, chegan-
do a 0,14% a 1,0 m e atingindo
assintoticamente a nulidade a 6,5 m
da cultura transgnica (Abud et al.,
2003).
Portanto, o alcance do plen das
plantas transgnicas, a possibilidade
de ocorrncia de fluxo gnico entre
suas espcies relacionadas e o im-
pacto que o transgene possa ter em
espcies selvagens compatveis de-
vem ser avaliados criteriosamente.
importante ressaltar, entretanto,
que o fluxo transgnico s ser bem
sucedido se conferir vantagem
adaptativa nas condies naturais do
ambiente.
Impacto das culturas
transgnicas nas relaes
trficas do ecossistema
Outro ponto de debate sobre os
transgnicos refere-se ao seu impac-
to no ecossistema quanto s mudan-
as das relaes alimentares entre os
insetos, as plantas e outros organis-
mos. O caso mais lembrado do
efeito das culturas transgnicas so-
bre o meio ambiente a morte das
larvas de borboletas monarcas
provocada pela alimentao com
plen de milho Bt (Losey et al.,
1999). Houve ampla discusso na
comunidade cientfica e chegou-se
concluso que os ensaios conduzi-
dos em laboratrio no refletiriam as
reais condies que as larvas enfren-
tariam no campo, (cuja dieta no
seria exclusivamente de plen de
milho, como feito no experimento),
embora o trabalho tenha contribudo
para levantar o debate sobre os pos-
sveis efeitos das plantas transgnicas
sobre as relaes trficas do
ecossistema.
Junto s pragas de uma lavoura
co-habitam inmeras espcies de
insetos, incluindo espcies benfi-
cas que atuam como controladoras
dos nveis das pragas (espcies de
parasitides e predadores de inse-
tos, como vespas e joaninhas). As
plantas transgnicas que possuem
resistncia a insetos abaixam os n-
veis das pragas to drasticamente,
que as relaes ecolgicas do siste-
ma se modificam e podem tambm
levar perda da fauna benfica da
lavoura.
intil, porm, qualquer discus-
so sobre o impacto das culturas
transgnicas sobre as populaes de
insetos (benficos ou pragas) sem
relacion-los com os impactos das
culturas no transgnicas e os tratos
culturais tradicionais, como a pulve-
rizao das culturas com inseticidas
de amplo espectro, que tambm
tero vrios nveis de impacto sobre
a populao de insetos benficos.
Tambm se deve ter em mente que
anlises ecolgicas preliminares
conduzidas em laboratrio podem
no refletir as condies encontra-
das no campo e que, dependendo da
metodologia adotada, podem levar
a, quando muito, indicaes das pos-
sibilidades a serem alcanadas no
campo. Tambm se levanta a dis-
cusso sobre a presena da protena
i nset i ci da nos t eci dos dos
transgnicos durante todo o ciclo da
cultura, em comparao presena
ocasional de inseticidas nos cultivos
tradicionais, que so degradados aps
um perodo de carncia de dias ou
semanas.
Head et al. (2001) estudou a
presena da protena Cry1Ab nos
tecidos de pragas alimentadas com
milho transgnico, para analisar o
potencial de risco de exposio
protena pelos inimigos naturais des-
sas pragas. O trabalho concluiu que
os nveis da protena transgnica
encontrados nos tecidos das pragas
eram extremamente baixos para se-
rem danosos ao metabolismo dos
inimigos naturais. Dessa forma, pelo
menos diretamente, a protena
Cry1Ab parece segura ao nvel trfico
superior aos das pragas das culturas.
O impacto da canola transgnica
com o gene da orizacistatina1 (OC1)
sobre a populao de joaninhas (Har-
monia axyridis) foi avaliado por
Ferry et al. (2003), concluindo que o
consumo de pragas que se alimen-
tam de cultura transgnica no teve
impacto no desenvolvimento nem
na sobrevi vnci a da espci e
predadora de insetos. Essa conclu-
so reforada pelos estudos de
Bouchard et al. (2003), que encon-
traram uma compensao digestiva
no metabolismo dos predadores na-
turais de insetos que consumiam
pragas da batata transgnica com a
protena OC1.
Schuler et al. (1999) confirma-
ram que a presena da toxina Bt em
larvas da traa da canola no teve
efeito significativo na populao de
vespas parasitides, mas que os
parasitides no emergiam das lar-
vas de traas alimentadas por plan-
tas transgnicas porque as traas
morriam antes que as vespas pudes-
sem se desenvolver ou emergir de-
las. Concluram, assim, que as plan-
tas Bt podem at apresentar vanta-
gens ecolgicas sobre a aplicao de
inseticidas de amplo espectro.
Tambm no se deve esquecer
que os altos ndices de insetos-praga
na lavoura j um manifesto da
modificao descontrolada do
ecossistema introduzida pela agri-
cultura convencional, ao utilizar in-
seticidas que no distinguem entre
pragas e insetos benficos e ao intro-
duzir novas espcies ou aumentar
seu nmero no ecossistema.
Os cientistas tambm conside-
ram grande o potencial de os insetos
desenvolverem resistncia prote-
na Bt no mdio e longo prazo
(Rahman et al., 2004; Tabashnik et
al., 2003). Liu et al. (1999) fizeram
estudos em laboratrio e desenvol-
veram modelos matemticos para a
seleo a favor da resistncia pro-
tena Bt pela traa do algodoeiro
(Pectinophora gossypiella), conclu-
indo que a possvel seleo natural
de indivduos resistentes toxina Bt
poderia levar formao de toda
uma populao de pragas resisten-
tes. O trabalho publicado por Zhao
et al. (2000) tambm relata a rpida
adaptao de traas protena Cry1C
em brcolis transgnico.
Uma estratgia levantada para
controlar ou adiar a emergncia da
resistncia dos insetos a toxinas
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 61
t r ansgni cas a ut i l i zao
concomitante de dois transgenes
bacterianos de induo de resistn-
cia a insetos (piramidao; Zhao et
al., 2003). Outra estratgia para
postergar o surgimento de insetos
resistentes s toxinas transgnicas
em um ecossistema o plantio de
plantas sem expresso da toxina
perto da lavoura com transgnicos,
objetivando a criao de refgio para
os elementos faunsticos locais, in-
cluindo pragas no resistentes ao Bt,
que seriam fonte gentica de sus-
ceptibilidade toxina para geraes
futuras de insetos. Modelos mate-
mticos indicam que a resistncia
dos insetos pode ser adiada conside-
ravelmente com a adoo da estrat-
gia de refgios (Gould, 1998). En-
tretanto, Chilcutt e Tabashnik (2004)
ponderam que a contaminao dos
refgios pelo fluxo gnico possa li-
mitar a eficincia dessa estratgia
nas pragas das espigas de milho.
Toxicidade das protenas
transgnicas biota do solo
O solo um ambiente comple-
xo composto por elementos mine-
rais (areia, argila e silte), materiais
orgnicos em decomposio e uma
comunidade biolgica que envolve
microorganismos, razes e animais
inferiores, incluindo muitos exem-
plos de relaes simbiticas. Teme-
se que cul t uras t ransgni cas
introduzidas no ambiente lancem no
solo, atravs dos exsudatos de suas
razes, compostos nocivos aos
microorganismos e que modifiquem
suas relaes ecolgicas.
Mendensohn et al. (2003) estu-
dou a bioatividade das protenas Bt
no solo e nos tecidos das plantas e
concluiu que a protena cry1Ab tinha
meia-vida (DT
50
) mdia de 1,6 dia
com o tecido vegetal no solo; de
25,6 dias com o tecido vegetal no
exposto ao solo e 8,3 dias com a
protena purificada colocada direta-
mente no solo. Uma degradao de
90% (DT
90
) foi atingida, respectiva-
mente, com 15; 40,7 e 32,5 dias.
Note-se, porm, que as concluses
do estudo esto contidas nas condi-
es edafoclimticas utilizadas no
experimento e no devem ser
extrapoladas para outras condies
sem experimentao in loco. Nesse
mesmo trabalho, tambm foi analisa-
da em organismos no-alvo a
toxicidade das protenas cry deriva-
das de plen, farinha de milho ou
protena purificada e adicionada ao
solo. No foram encontrados, po-
rm, efeitos adversos nos organis-
mos estudados e nas dosagens estu-
dadas.
Transgnicos e
plantas daninhas
A ut i l i zao de pl ant as
transgnicas com genes que confe-
rem resistncia a herbicidas de am-
plo espectro tende a facilitar os tra-
tos culturas e a manter a cultura sem
competidores (no limpo), mas,
alm do perigo do fluxo gnico dis-
cutido anteriormente, tambm pode
ocorrer a seleo natural de plantas
que sejam resistentes aos herbicidas
e, assim, induzir a invaso de plantas
daninhas cultura cuja pulverizao
com o herbicida seja incua tanto
cultura transgnica, quanto planta
daninha, criando-se super-plantas
daninhas. O caso mais conhecido
de cultura resistente a um herbicida
o da soja resistente ao glifosato
(Roundup

, Monsanto), herbicida de
amplo espectro, o qual poucas esp-
cies vegetais tm mecanismo de re-
sistncia ou tolerncia.
Um gene de resistncia de
herbicida alternativo derivado de
plantas o ahas, da Arabidopsis
thaliana. Esse gene codifica a
enzima cido acetohidroxi sintase,
cuja presena confere resistncia ao
herbi ci da de ampl o espect ro
imazapyr (Arsenal

, BASF), de longo
efeito residual (seis meses a dois
anos no solo), mas com pouco efeito
na microbiota do solo e baixa
toxicidade nos organismos animais
(classificao toxicolgica IV, ou seja,
um produto que normalmente no
oferece perigo). O Brasil, atravs da
Embrapa, j gerou uma variedade de
soja transgnica com o gene ahas,
chamada BR-16.
Tambm so causa de preocu-
pao as sementes de culturas resis-
tentes a herbicidas que ficam no solo
aps a colheita, caso a prxima cul-
tura a ser instalada utilizar o mesmo
herbicida para o controle das plantas
daninhas. As plantas emergentes
das sementes da cultura passada atu-
aro, ento, como plantas daninhas
da nova cultura e causando menor
produtividade da nova cultura dada
competio instalada entre as duas
espcies na lavoura.
Surgimento de
novas cepas de vrus
Constitudos basicamente de
uma capa protica e RNA (ou DNA,
em alguns casos), os vrus so para-
sitas obrigatrios que necessitam usar
a maquinaria metablica de clulas
hospedeiras para se multiplicarem.
Os organismos eucariticos (fungos,
protozorios, vegetais e animais) tm
mecanismos de defesa contra infec-
es virais, mas os prprios vrus
tm uma enorme plasticidade gen-
tica que lhes permite adquirir rapida-
mente novas caractersticas e driblar
os mecanismos de defesa de suas
clulas hospedeiras.
O melhoramento gentico cls-
sico tem colaborado na criao de
cultivares resistentes a diversas do-
enas virais, mas h muitos casos em
que fontes naturais de resistncia
no esto disponveis. Uma das
formas de induo de resistncia viral
a imunizao de clulas vegetais
pela insero e expresso de um
fragmento do gene que codifica a
protena da capa do vrus no genoma
da planta. Entretanto, teme-se que
novas cepas virais possam ser origi-
nadas a partir de eventos naturais de
recombi nao genti ca, como
transcapsidao, encapsidao
heterloga ou complementao
(Tepfer, 2003), cepas essas que
podero trazer diferentes caracters-
ticas, como a capacidade de infectar
novas espcies, de utilizar novos
vetores, possuir novos mecanismos
de infeco ou maior virulncia.
O primeiro exemplo de planta
transgnica resistente a vrus foi um
tabaco com um transgene do vrus
do mosaico (TMV), enquanto hoje
exi st em dezenas de pl ant as
transgnicas, como batata, ervilha,
feijo, mamo, melo, pepino, to-
mate, trigo, uva, cujo objetivo in-
62 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
duzir resistncia viral. Entretanto, j
foram identificados eventos de
recombinao entre o genoma de
planta transgnica e o genoma de
vrus em condies de laboratrio
(Borja et al., 1999) e de campo
(Vigne et al., 2004), levantando ques-
tes acerca da gerao de possveis
cepas virais com propriedades dife-
rentes das originalmente geradas.
Outra estratgia seria o uso de
RNAs satlites (parasitas moleculares
naturais de alguns vrus). Essa
metodologia foi verificada contra o
vrus do mosaico do pepino e, ape-
sar de o nvel de proteo ao ataque
viral ter sido considerado efetivo, o
risco de mutao numa forma
necrognica (infecciosa) foi consi-
derado excessivo para uso extensi-
vo e essa abordagem foi abandona-
da. Um caso a ser lembrado a
epidemia que ocorreu no final da
dcada de 1980 em campos de to-
mateiros da Itlia e da Espanha, cau-
sada por RNAs satlites necrognicos
no transgnicos. Estudos chegaram
concluso que mutaes num ni-
co nucleotdeo do genoma do RNA
satlite de uma cepa no necrognica
poder i a ser suf i ci ent e par a
transform-l a em necrogni ca
(Tepfer, 2003).
Estudos tambm apontam que
outra opo induo de resistncia
baseada nos mecanismos de defesa
das pl ant as so est r at gi as
moleculares de induo de resistn-
cia nos mecanismos de ataque e
proliferao dos vrus, como a resis-
tncia mediada pela replicase ou
pela protena de movimento do v-
rus (Wilson, 1993). H cientistas
que, assim como na resistncia con-
tra insetos, apostam na piramidao
transgnica de induo de resistn-
cia viral como uma estratgia efici-
ente na produo de plantas com
resistncia duradoura (Prins, 2003),
enquanto outra corrente aposta no
desenvolvimento de protenas
antivirais (Uhrig, 2003).
possvel, entretanto, que estu-
dos detalhados dos mecanismos
moleculares da infeco viral e nos
modos de ao dos genes a serem
utilizados originem em alguns casos
estratgias transgnicas potencial-
mente seguras quanto aos possveis
efeitos de encapsidao heterloga
e a transmisso de vrus por seus
vetores, enquanto em outros casos
ainda no foram desenvolvidos mei-
os de eliminao dos riscos potenci-
ais associados resistncia viral
transgnica (Tepfer, 2002).
Avaliao dos riscos
ambientais
A avaliao dos riscos ambientais
dos cultivos transgnicos funda-
mental para identificar os riscos po-
tenciais dessa tecnologia, dar segu-
rana populao e auxiliar os cien-
tistas a eliminar esses riscos. Em
qualquer estudo de anlise de risco
ambiental, deve-se levar a cabo um
estudo comparativo com manejos
agrcolas tradicionais, para evitar um
julgamento tendencioso.
Tambm se deve ter em mente
que estudos conduzidos em labora-
trio na maioria das vezes no condi-
zem com as condies encontradas
no campo. Dessa forma, os resulta-
dos obtidos nesses experimentos
podero apenas indicar situaes ou
tendncias, mas no podero afirmar
que a dinmica ecolgica natural se
comportar como nos ensaios.
Um procedimento posterior aos
ensaios laboratoriais pode ser a ava-
liao em campos de produo, onde
plantios transgnicos so conduzi-
dos em situaes reais de produo
e comparados com os cultivos con-
vencionais. Essa possivelmente a
metodologia mais adequada para se
tomar concluses cientficas sobre
os transgnicos. Recentes avalia-
es em campos de produo de
transgnicos tolerantes a herbicidas
foram realizadas na Gr-Bretanha
com respeito ao manejo e contexto
agronmico (Champion et al., 2003);
os efeitos na abundncia e diversida-
de de ervas daninhas (Heard et al.,
2003a); os efeitos sobre espcies
individuais (Heard et al., 2003b); as
respostas da fauna artrpode
(Haughton et al., 2003); das relaes
trficas entre invertebrados e plan-
tas (Hawes et al., 2003); e avaliaes
dos invertebrados e da vegetao
em campos marginais aos campos
com transgnicos (Roy et al., 2003),
alm do racional cientfico e uma
interpretao das avaliaes em cam-
pos de produo (Squire et al., 2003).
Estudos similares em condies tro-
picais so recomendveis para se
chegar a uma concluso do impacto
dos transgnicos sobre o ambiente e
perigos inerentes.
A anlise de risco de plantas
transgnicas resistentes a vrus foi
discutida por Tepfer (2002), exami-
nando riscos potenciais associados a
vrias estratgias moleculares e con-
cluiu que a anlise de risco do uso
desses transgnicos tambm deve
levar em conta um estudo compara-
tivo das vantagens e desvantagens
das plantas transgnicas e no
transgnicas para se chegar a uma
deciso ambientalmente sustentvel.
Estratgias para diminuir o
potencial de risco ambiental
das plantas transgnicas
No nvel molecular, pode-se
optar por estratgias alternativas
como: a) uso de promotores de ex-
presso especficos para tecidos ou
somente em alguns estdios do de-
senvolvimento, ao invs do uso de
promotores constitutivos; b) siste-
mas induzveis quimicamente, cujos
promotores so ativados com aplica-
es de produtos pouco txicos,
como o lcool (Deveaux et al., 2003);
c) uso de transgenes eucariticos em
detrimento de genes e seqncias
reguladoras oriundas de bactrias e
vrus; d) evitar o uso de genes de
resistncia a antibiticos durante a
seleo de plantas, mas preferir al-
ternativas como genes de resistncia
a compostos sintticos (Lohar et al.,
2001); e) e t ecnol ogi a de
recombinao ps-transformao,
em que os genes marcadores de
seleo co-inseridos no genoma da
planta so retirados. importante
notar, entretanto, que nem todas
essas tcnicas j esto disponveis
para uso comercial, sendo que algu-
mas ainda esto sendo testadas em
modelos biolgicos, mas podero
estar disponveis num futuro prxi-
mo.
Concluses
O debate sobre as implicaes
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 63
ambientais envolvendo as plantas
transgnicas apenas a parte tcni-
co-cientfica da discusso sobre o
assunto, a qual tambm abrange as-
pectos econmicos, polticos, soci-
ais e ticos. importante salientar,
porm, que os vrios transgnicos j
produzidos so distintos em relao
espcie da cultura e suas relaes
trfico-ecolgicas, biologia floral e
mecanismos de polinizao, proba-
bilidade de fluxo gnico no intenci-
onal, alm de cada transgene confe-
rir uma caracterstica peculiar, de
maior ou menor potencial de impac-
to no ambiente, de maior ou menor
grau de ganho econmico, de maior
ou menor interesse social. Deve-se,
portanto, ser criada uma poltica aber-
ta de anlise caso a caso, alm de se
permitir sociedade o acesso aos
dados cientficos numa linguagem
clara, didtica e no preconceituosa
acerca dos transgnicos para que a
sociedade forme uma opinio e se
decida conscientemente sobre o con-
sumo ou no das plantas transgnicas.
Referncias
Abud S, Souza PIM, Moreira CT,
Andrade SRM, Ulbrich AV, Vi-
anna GR, Rech EL, Arago FJL.
2003. Disperso de plen em soja
transgnica na regio do Cerrado.
Pesquisa Agropecuria Brasileira
38:1229-1235
Borja M, Rubio T, Scholthof HB,
Jackson AO. 1999. Restoration of
wild-type virus by double recom-
bination of tombusvirus mutants
with a host transgene. Molecular
Plant-Microbe Interactions 12:153-
162
Bouchard E, Cloutier C, Michaud
D. 2003. Oryzacystatin I expres-
sed in transgenic potato induces
digestive compensation in an in-
sect natural predator via its herbi-
vorous prey feeding on the plant.
Molecular Ecology 12:2439-2446
Champion GT, May MJ, Bennett S,
Brooks DR, Clark SJ, Daniels
RE, Firbank LG, Haughton AJ,
Hawes C, Heard MS, Perry JN,
Randle Z, Rossall MJ, Rothery
P, Skellern MP, Scott RJ, Squire
GR, Thomas MR. 2003. Crop
management and agronomic con-
text of the Farm Scale Evaluations
of genetically modified herbicide-
tolerant crops. Philosophical Tran-
sactions of the Real Society of
London B 358:1801-1818
Chilcutt CF, Tabashnik BE. 2004.
Contamination of refuges by Baci-
llus thuringiensis toxin genes from
transgenic maize. Proceedings of
the National Academy of Science
of the USA 101:7526-7529
Conko G. 2003. Safety, risk and the
precautionary principle: rethinking
precautionary approaches to the
regulation of transgenic plants.
Transgenic Research 12:639-647
Deveaux Y, Peaucelle A, Roberts
GR, Coen E, Simon R, Mizuka-
mi Y, Traas J, Murray JA, Doo-
nan JH, Laufs P. 2003. The etha-
nol switch: a tool for gene-specific
induction during plant develop-
ment. Plant Journal 36:918-930
Eastham K, Sweet J. 2002. Geneti-
cally modified organisms (GMOs):
the significance of gene flow throu-
gh pollen transfer. European Envi-
ronment Agency. Copenhagen,
Denmark
FAO. 2001. Ethical issues in food and
agriculture. Food and Agriculture
Organization of the United Nati-
ons, Roma. 32p. ftp://ftp.fao.org/
doc r e p/ f a o/ 0 0 3 / X9 6 0 1 e /
X9601e00.pdf
Ferreira ABH. 2001. Novo Aurlio
Sculo XXI: o dicionrio da lngua
portuguesa. Nova Fronteira, Rio
de Janeiro. 4
th
ed., 2128p.
Ferry N, Raemaekers JM, Majerus
MEN, Jouanin L, Port G, Ga-
tehouse A, Gatehouse AMR.
2003. Impact of oilseed rape ex-
pressing the insecticidal cysteine
protease inhibitor oryzacystatin on
the beneficial predator Harmonia
axyridis (multicoloured Asian la-
dybeetle). Molecular Ecology
12:493-504
Gould F. 1998. Sustainability of trans-
genic insecticidal cultivars: inte-
grating pest genetics and ecology.
Annual Review of Entomology
43:701-726
Haughton AJ, Champion GT, Ha-
wes C, Heard MS, Brooks DR,
Bohan DA, Clark SJ, Dewar
AM, Firbank LG, Osborne JL,
Perry JN, Rothery P, Roy DB,
Scott RJ, Woiwod IP, Birchall
C, Skellern MP, Walker JH,
Baker P, Browne EL, Dewar
AJG, Garner BH, Haylock LA,
Horne SL, Mason NS, Sands
RJN, Walker MJ. 2003. Inverte-
brate responses to the manage-
ment of genetically modified her-
bicide-tolerant and conventional
spring crops. II. Within-field epi-
geal and aerial arthropods. Philoso-
phical Transactions of the Real
Society of London B 358:1863-
1877
Hawes C, Haughton AJ, Osborne
JL, Roy DB, Clark SJ, Perry JN,
Rothery P, Bohan DA, Brooks
DR, Champion GT, Dewar AM,
Heard MS, Woiwod IP, Daniels
RE, Young MW, Parish AM, Scott
RJ, Firbank LG, Squire GR. 2003.
Responses of plants and inverte-
brate trophic groups to contrasting
herbicide regimes in the Farm Sca-
le Evaluations of genetically modi-
fied herbicide-tolerant crops. Phi-
losophical Transactions of the Real
Society of London B 358:1899-
1913
Head G, Brown CR, Groth ME,
Duan JJ. 2001. Cry1Ab protein
levels in phytophagous insects
feeding on transgenic corn: impli-
cations for secondary exposure risk
assessment. Entomologia Experi-
mentalis et Applicata 99:37-45
Heard MS, Hawes C, Champion
GT, Clark SJ, Firbank LG, Hau-
ghton AJ, Parish AM, Perry JN,
Rothery P, Scott RJ, Skellern
MP, Squire GR, Hill MO. 2003a.
Weeds in fields with contrasting
conventional and genetically mo-
dified herbicide-tolerant crops. I.
Effects on abundance and diversi-
64 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
ty. Philosophical Transactions of
the Real Society of London B
358:1819-1832
Heard MS, Hawes C, Champion
GT, Clark SJ, Firbank LG, Hau-
ghton AJ, Parish AM, Perry JN,
Rothery P, Roy DB, Scott RJ,
Skellern MP, Squire GR, Hill
MO. 2003b. Weeds in fields with
contrasting conventional and ge-
netically modified herbicide-tole-
rant crops. II. Effects on individual
species. Philosophical Transactions
of the Real Society of London B
358:1833-1846
Liu Y-B, Tabashnik BE, Dennehy
TJ, Patin AL, Bartlett AC. 1999.
Development time and resistance
to Bt crops. Nature 400:519
Lohar DP, Schuller K, Buzas DM,
Gresshoff PM, Stiller J. 2001.
Transformation of Lotus japonicus
using the herbicide resistance bar
gene as a selectable marker. Jour-
nal of Experimental Botany
52:1697-1702
Losey JE, Rayor LS, Carter ME.
1999. Transgenic pollen harms
monarch larvae. Nature 399:214
Mendelsohn M, Kough J, Vaituzis
Z, Matthews K. 2003. Are Bt
crops safe? Nature Biotechnology
21:1003-1009
Morris J (ed.) 2000. Rethinking Risk
and the Precautionary Principle.
Butterworth-Heinnemann, Oxford,
United Kingdom
ONU. 1992. Rio Declaration on Envi-
ronmental and Development. UN
Doc. A/CONF.151/5/Ver.1. United
Nations, New York
Potrykus I. 2001. Golden rice and
beyond. Pl ant Physi ol ogy
125:1157-1161
Prins M. Broad virus resistance in
transgenic plants. 2003. Trends in
Biotechnology 21:373-375
Rahman MM, Roberts HL, Sarjan
M, Asgari S, Schmidt O. 2004.
Induction and transmission of Ba-
cillus thuringiensis tolerance in
the flour moth Ephestia kuehnie-
lla. Proceedings of the National
Academy of Sciences of the USA
101:2696-2690
Ray JD, Kilen TC, Abel CA, Paris
RL. 2003. Soybean natural cross-
pollination rates under field condi-
tions. Environmental Biosafety
Research 2:133-138
Roy DB, Bohan DA, Haughton AJ,
Hill MO, Osborne JL, Clark SJ,
Perry JN, Rothery P, Scott RJ,
Brooks DR, Champion GT,
Hawes C, Heard MS, Firbank
LG. 2003. Invertebrates and ve-
getation of field margins adjacent
to crops subject to contrasting her-
bicide regimes in the Farm Scale
Evaluations of genetically modifi-
ed herbicide-tolerant crops. Philo-
sophical Transactions of the Real
Society of London B 358:1879-
1898
Sandin P. 1999. Dimensions of the
precautionary principle. Human
Ecology Risk Assessment 5:889-
907
Schuler TH, Potting RPJ, Denholm
I, Poppy GM. 1999. Parasitoid
behaviour and Bt plants. Nature
400:825-826
Squire GR, Brooks DR, Bohan DA,
Champion GT, Daniels RE, Hau-
ghton AJ, Hawes C, Heard MS,
Hill MO, May MJ, Osborne JL,
Perry JN, Roy DB, Woiwod IP,
Firbank LG. 2003. On the ratio-
nale and interpretation of the Farm
Scale Evaluations of genetically
modified herbicide-tolerant crops.
Philosophical Transactions of the
Real Society of London B 358:1779-
1799
Sustein CR. 2002. The paralyzing
principle. Regulation, winter 2002-
2003: 32-37
Tabashnik BE, Carriere Y, Den-
nehy TJ, Morin S, Sisterson
MS, Roush RT, Shelton AM,
Zhao JZ. 2003. Insect resistance
to transgenic Bt crops: lessons from
the laboratory and field. Journal of
Economic Entomology 96:1031-
1038
Tepfer M. 2003. Biosafety considera-
tions relevant to virus-resistant
transgenic plant, in particular to
tomato resistant to CMV. In: Col-
lection of Biosafety Reviews.
ICGEB, Italy, p.84-95
Tepfer M. 2002. Risk assessment of
virus-resistant transgenic plants.
Annual Review of Phytopathology
40:467-491
Uhrig JF. 2003 Response to Prins:
broad virus resistance in transgenic
plants. Trends in Biotechnology
21:376-377
Vigne E, Komar V, Fuchs M. 2004.
Field safety assessment of recom-
bination in transgenic grapevines
expressing the coat protein gene
of Grapevine fanleaf virus. Trans-
genic Research 13:165-179
Welch RM, Graham RD. 2004. Bre-
eding for micronutrients in staple
food crops from a human nutrition
perspective. Journal of Experimen-
tal Botany 55:353-364
Wilson TMA. 1993. Strategies to pro-
tect crop plants against viruses:
pathogen-derived resistance blos-
soms. Proceedings of the National
Academy of Science of USA
90:3134-3141
Zhao JZ, Cao J, Li Y, Collins HL,
Roush RT, Earle ED, Shelton
AM. 2003. Transgenic plants ex-
pressing two Bacillus thuringien-
sis toxins delay insect resistance
evolution. Nature Biotechnology
21:1493-1497
Zhao JZ, Collins HL, Tang JD, Cao
J, Earle ED, Roush RT, Herrero
S, Escriche B, Ferre J, Shelton
AM. 2000. Development and cha-
racterization of diamondback moth
resistance to transgenic broccoli
expressing high levels of Cry1C.
Applied Environmental Microbio-
logy 66:3784-3789
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 65
O PRINCPIO DA
PRECAUO
Pesquisa
Francis Bacon (1561-1626), em
sua obra Novum organum, afirmou
que a cincia est destinada a pro-
porcionar ao homem o domnio so-
bre a natureza. Considerado o profe-
ta da tcnica, o pensamento de
Francis Bacon est na base da estru-
t ur a da moder na soci edade
tecnolgica.
Tanto , que o filsofo Martin
Heidegger (1889-1976), em sua obra
O fim da filosofia ou a questo do
pensamento, ao explicar indagao
feita pelo professor Kojima, sobre
qual o significado da expresso
europeizao do mundo, observou
que se a expresso for considerada
sob o ponto de vista de seu domnio
planetrio, para identificar a seu prin-
cipal elemento necessrio se faz
perguntar: De onde vem este dom-
nio? De que retira seu estranho po-
der? Qual o elemento que nele se
apresenta dominador?
Aps formular as perguntas
que julgou necessrias reflexo do
tema, Heidegger se mostrou con-
victo ao afirmar que o elemento que
fornece a fora conquistadora e
dominadora que integra o significa-
do da expresso europeizao do
mundo, no outra seno a tcnica
moderna.
Sem dvidas, o entendimen-
to de Heidegger foi brilhante.
Na atualidade, a Unio Eu-
ropia, dando seqncia es-
tratgia de Lisboa, adotada em
2000, comunicou em 2003 o pro-
grama - Poltica de inovao:
atualizar a abordagem da Unio
no contexto da estratgia de Lis-
boa -, cujo objetivo atingir o
investimento de 3% do Produto
Reginaldo Lopes Minar
Bacharel em Cincias Jurdicas
Mestre em Direito pela Universidade Metodista de
Piracicaba- UNIMEP
rminare@uol.com.br
A palavra tcnica, oriunda do
grego techn, que significa: ter co-
nhecimento na produo, sintetiza
perfeitamente a capacidade e a qua-
lidade de produo que o homem
moderno passou a ser detentor aps
o desenvolvimento das cincias da
natureza, cujo grande conhecimento
produzido permitiu a profissionali-
zao da cincia e a implementao
do saber fazer, ou seja, do saber
produzir de uma forma at ento
nunca experimentado pela humani-
dade. J o termo produzir, derivado
do latim producere, que significa:
fazer existir, conduzir sua manifes-
tao, tornar acessvel e disponvel
algo que antes no estava ai presen-
te, constitui, por sua vez, o objeto
para o qual o aperfeioamento tc-
nico direcionado.
Com o advento da globalizao
e a crescente competitividade por
mercados, a busca pela melhor qua-
lificao tcnica vem promovendo
uma verdadeira disputa, onde os
Estados, principalmente os mais po-
derosos, concentram de forma cres-
cente seus esforos e investimentos
nas pesquisas cientficas destinadas
implementao de novas tcnicas.
Ter o conhecimento no momento da
produo um fator que impulsiona
o desenvol vi ment o e a
competitividade da indstria e, con-
seqentemente, do comrcio, que
representam a grande fonte da ri-
queza material dos Estados.
Nessa competio entre os pa-
ses, aqueles subdesenvolvidos ou
em desenvolvimento possuem, por
um lado, a vantagem comparativa
com o conhecimento cientfico e
tecnolgico j produzido e, por ou-
tro, a desvantagem da carncia de
recursos financeiros e humanos, pois
para absorver e bem utilizar o co-
nhecimento cientfico e tecnolgico
estrangeiro, necessita-se de pessoas
preparadas e de recursos financeiros
Meio ambiente
Princpio tico relevante para a numerosa sociedade tecnolgica atual e futura
Interno Bruto PIB em investi-
gao e desenvolvimento e fazer
da Unio Europia a economia
mais dinmica e competitiva do
mundo at 2010.
Segundo a Comisso Europia,
essa poltica de inovao tecnolgica
contribuir para formar um quadro
coerente para o desenvolvimento
da poltica empresarial que impulsi-
ona a competitividade das empre-
sas, que contribui para o crescimen-
to da economia da Europa.
A inovao, no entendimento
da Comisso Europia, consiste na
produo, assimilao e explorao
bem sucedida da novidade nos do-
mnios econmico e social, e permi-
te s empresas conquistar novos
mercados ou resistir concorrncia.
Assumindo formas diversas, as ino-
vaes vo da inveno provenien-
te da investigao e do desenvolvi-
mento adaptao de processos de
produo, explorao de novos
mercados, utilizao de novas abor-
dagens organizacionais ou criao
de novos conceitos de comercializa-
o.
Embora considere ainda no
se fazer sentir o atraso em matria
de inovao relativamente aos Esta-
dos Unidos e ao Japo, a Comisso
Europia entende ser importante que
a Unio Europia desenvolva uma
poltica de inovao capaz de recu-
perar o atraso que tem relativamen-
te aos seus principais concorrentes.
Constata-se, portanto, clara-
mente, que a Unio Europia pre-
tende retornar posio que sempre
ocupou, ou seja, vanguarda da
sociedade tecnolgica, que tem seu
marco inicial na Europa insular em
meados do sculo XVIII, e segue a
orientao contida no pensamento
baconiano, ou seja, a natureza deve
ser conhecida e seu conhecimento
usado para implementar tcnicas de
produo.
66 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
para preparar pessoas, ou seja, h a
necessidade de melhorar a reserva
do pas em matria de trabalhadores
educados, que por si s j representa
um ativo muito importante. Como
bem observou Noam Chomsky, em
sua obra Regras e representaes - a
inteligncia humana e seu produto,
entre a capacidade de fazer algo e a
capacidade de saber fazer algo h,
em particular, o elemento intelectu-
al fundamental do saber fazer.
Podemos, portanto, constatar
que se um pas subdesenvolvido ou
em desenvolvimento pretender tri-
lhar os caminhos que atualmente
levam ao que definido como de-
senvolvimento, consolidar uma eco-
nomia moderna e participar ativa-
mente de um mundo cada vez mais
globalizado e tecnolgico, ser neces-
srio superar a grande distancia que
separa sua ci nci a e i novao
tecnolgica daquelas praticadas nos
pases industrializados mais avana-
dos, sob pena de permanecerem de-
fasados e, conseqentemente, em-
purrados cada vez mais para a mar-
gem do progresso.
Nessa competio pelo dom-
nio da melhor tcnica, que fonte de
riqueza material dos Estados, e, inclu-
si ve, necessri a para afastar a
concretizao da teoria de Thomas
Malthus (17661834), segundo a qual
o crescimento da populao tende
sempre a superar a produo de ali-
mentos, pois ela cresce em progres-
so geomtrica enquanto a produo
de alimentos aumenta em progresso
aritmtica, a comunidade humana ter
que conviver e administrar os riscos
decorrentes da organizao dessa nova
e numerosa sociedade global.
Nesse contexto, a palavra risco,
do latim risque, significa a probabili-
dade de um perigo com ameaa fsica
para o homem e o ambiente de forma
geral. Por sua vez, a palavra probabi-
lidade, do latim probabiltas, significa
a caracterstica do que provvel, do
que pode ocorrer, o grau de segurana
que se espera da realizao de uma
atividade.
A preocupao com o risco,
principalmente a preocupao de
mant-lo dentro de um grau de segu-
rana aceitvel, garantindo a preser-
vao do meio ambiente dentro de
um contexto que vai alm do curto e
mdio prazo, chegando ao longo pra-
zo e incluindo o bem estar das futuras
geraes no contexto da reflexo,
motivou a comunidade internacional a
adotar gradativamente o princpio da
precauo como princpio tico
ori ent ador e pri nc pi o j ur di co
motivador da ao humana na comu-
nidade global.
Oriunda do grego arch e do
latim principium, a palavra princpio
significa o primeiro instante do ser de
alguma coisa, o ponto considerado
como comeo ou origem de algo ou
de um comportamento, o fundamen-
to ou base de um raciocnio ou discur-
so.
Do latim praecautio, a palavra
precauo significa o agir com pru-
dncia, com cuidado, com cautela para
evitar ou prevenir os inconvenientes,
embaraos ou danos que podem te-
mer-se, a atitude de prudncia que
possibilita a reflexo que pode levar
ao conhecimento antecipado do grau
de probabilidade de ocorrncia de um
dano ou prejuzo, a ao aplicada ou
medida tomada para evitar um mal.
Podemos, portanto, inferir que
uma ao fundada no princpio da
precauo constitui uma ao realiza-
da, desde seu incio, com moderao,
orientando o agir com prescincia do
futuro para acautelar-se com relao
aos resultados da prpria ao, sem-
pre procurando evitar que a ao pro-
voque, no momento ou no futuro, um
resultado danoso.
No mbito internacional, com a
elaborao da Carta Mundial da Natu-
reza, que foi adotada pela Assemblia
Geral das Naes Unidas em 1982, o
princpio da precauo comeou a ser
inserido no contexto jurdico.
Uma dcada aps a elaborao
da Carta Mundial da Natureza, a Con-
ferncia das Naes Unidas sobre Meio
Ambiente e Desenvolvimento, junho
de 1992, proclamaram a Declarao
do Rio Sobre Meio Ambiente e Desen-
volvimento, cujo princpio 15 dispe
da seguinte forma: Com o fim de
proteger o meio ambiente, o princ-
pio da precauo dever ser ampla-
mente observado pelos Estados, de
acordo com suas capacidades. Quan-
do houver ameaa de danos graves
ou irreversveis, a ausncia de certe-
za cientfica absoluta no ser utili-
zada como razo para o adiamento
de medidas economicamente viveis
para prevenir a degradao
ambiental.
O princpio da precauo tam-
bm est presente na Conveno
Quadro das Naes Unidas sobre Mu-
dana do Clima, na Conveno sobre
Diversidade Biolgica, e no Protocolo
de Cartagena sobre Biossegurana.
No mbito domstico, embora
no figure expressamente no texto
da atual Constituio da Repblica
Federativa do Brasil, alguns entendem
que o princpio da precauo est
implcito no artigo 225 da mesma,
pois este artigo afirma que todos tm
direito ao meio ambiente equilibrado,
bem essencial sadia qualidade de
vida, e que incumbe ao Poder Pblico
e coletividade o dever de defende-
lo e preserva-lo para as presentes e
futuras geraes. Considerando a pre-
ocupao com a preservao da qua-
lidade de vida atual e futura que o
texto apresenta, trata-se de um enten-
dimento com o qual se pode concor-
dar.
Todavia, de forma expressa, o
princpio da precauo foi introduzido
no Brasil por meio da incorporao das
normas internacionais pelo direito na-
cional.
Recentemente, a Lei n 11.105,
de 24 de maro de 2005, que regula-
menta os incisos II, IV e V do 1
o
do
artigo 225 da Constituio Federal, e
estabelece normas de segurana e
mecanismos de fiscalizao de ativi-
dades que envolvam organismos ge-
neticamente modificados OGM e
seus derivados, dispe em seu artigo
1 que: Esta Lei estabelece normas de
segurana e mecanismos de fiscaliza-
o sobre a construo, o cultivo, a
produo, a manipulao, o transpor-
te, a transferncia, a importao, a
exportao, o armazenamento, a pes-
quisa, a comercializao, o consumo, a
liberao no meio ambiente e o des-
carte de organismos geneticamente
modificados OGM e seus derivados,
tendo como diretrizes o estmulo ao
avano ci ent fi co na rea de
biossegurana e biotecnologia, a pro-
teo vida e sade humana, animal
e vegetal, e a observncia do princpio
da precauo para a proteo do meio
ambiente.
Trata-se, portanto, de um prin-
cpio abrangente que atinge grande
parte dos segmentos que compem o
conjunto da economia baseada no co-
nhecimento, e sua interpretao e
aplicao devem ser realizadas de for-
ma muito razovel.
Determinar qual o nvel de
risco aceitvel para a sociedade, em
qualquer segmento, uma responsa-
bilidade cientfica e poltica. As ins-
tncias de deciso, quando confron-
tadas com uma situao de probabi-
lidade de risco potencial de uma
atividade ou produto, podem lanar
mo do princpio da precauo e
identificar, atravs duma avaliao
cientfica e objetiva, o risco permiti-
do ou proibido.
Todavia, as instncias de deci-
so devem cuidar para no justifica-
rem uma tomada de deciso arbitr-
ria com o princpio da precauo,
que s deve ser aplicado aps a
avaliao dos dados cientficos dis-
ponveis e a identificao do grau de
risco oferecido.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 67
Samuel Martinelli
Engenheiro Agrnomo, M. S., Doutorando em
Entomologia da Escola Superior de Agricultura Luiz
de Queiroz, Universidade de So Paulo
smartine@esalq.usp.br
Celso Omoto
Engenheiro Agrnomo, M. S., Ph. D., Professor da
Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz,
Universidade de So Paulo
celomoto@esalq.usp.br
Imagens cedidas pelos autores
RESISTNCIA DE INSETOS
A PLANTAS GENETICAMENTE MODIFICADAS
1. Introduo
As plantas geneticamente mo-
dificadas (GM) resistentes a insetos
foram resultantes da combinao
dos conhecimentos e avanos
tecnolgicos da engenharia gentica
e da moderna biotecnologia, e po-
dem ser consideradas como uma t-
tica adicional de controle em progra-
mas de Manejo Integrado de Pragas
(MIP) em diversos agroecossistemas.
Neste contexto, tem sido crescente
a utilizao de plantas GM que pos-
suem a insero de genes que codi-
ficam a produo de toxinas com
ao inseticida, os quais foram obti-
dos a par t i r da bact r i a
ent omopat ogni ca Baci l l us
thuringiensis Berliner (Bt). Entre-
tanto, a obteno de plantas geneti-
camente modificadas resistentes a
insetos tambm inclui a possibilida-
de de uso de genes de outras esp-
cies de plantas para produo de
lectinas e inibidores de proteinases
(Loc et al. 2002; Ceci et al. 2003), ou
ainda a utilizao de genes de ani-
mai s par a expr esso de
neurohormnios (Fitches et al. 2002)
e inibidores enzimticos (Cristeller
et al. 2002). Alm disso, outras estra-
tgias moleculares alternativas esto
sendo direcionadas para o melhor
entendimento da base molecular dos
mecanismos endgenos de resistn-
cia, os quais as plantas manifestam
em resposta ao ataque de vrios
insetos herbvoros (Gatehouse 2002;
Ferry 2004). Entretanto, a aplicao
prtica atual da biotecnologia de plan-
tas na proteo de cultivos tem se
concentrado no uso de plantas GM
resistentes a insetos como o algodo
e o milho que expressam protenas
inseticidas de Bt.
As experincias com o uso de
plantas GM resistentes a insetos tm
permitido a identificao de benef-
cios diretos proporcionados por esta
tecnologia aos agricultores e meio
ambiente. Na China, o algodo Bt
tem sido cultivado desde 1997 e
atualmente responde por 50% da
rea total cultivada com algodo na-
quele pas. O uso da tecnologia do
algodo Bt prorcionou uma reduo
de 78.000 toneladas na quantidade
de inseticidas utilizados em 2001, e
em algumas provncias chinesas foi
verificado uma reduo de 20 para 7
aplicaes de inseticidas por safra de
algodo (Wu et al. 2005). Conse-
qentemente, houve o registro de
diminuio em at 75% nos casos de
intoxicao de produtores rurais por
i nseti ci das (Pray et al . 2002;
Toenniessen et al. 2003; Hossain et
al. 2004). Alm disso, na regio No-
roeste da China foi observada a re-
verso do quadro de resistncia a
inseticidas como lambda-cialotrina
(pi r et r i de) e endosul f an
(ciclodieno), o qual j se encontrava
previamente instalado e documen-
tado naquela regio (Wu et al 2005).
Na frica do Sul o algodo Bt tem
auxiliado os agricultores na implan-
tao de programas de MIP, o que
tambm tem resultado nas redues
de uso de inseticidas, ndices de
intoxicao de trabalhadores por
defensivos, e custo de produo da
cultura (Thirtle et. 2003). Entretan-
to, a reduo no uso de inseticidas
promovida pelo uso de plantas GM
Meio ambiente
Relevncia da implantao de estratgias pr-ativas para o manejo da resistncia
68 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
resistentes apresenta repercusses
positivas em outros aspectos relaci-
onados obteno, distribuio e
uso destes defensivos agrcolas. Por
exemplo, foi observada a diminui-
o na taxa de explorao de mat-
rias primas utilizadas na fabricao
de inseticidas, e por conseqncia
redues significativas na poluio
provocada por rejeitos industriais,
alm de redues nos custos empre-
sariais e ambientais decorrentes do
transporte e armazenamento de in-
seticidas. Por fim, as plantas GM
resistentes a insetos colaboram para
que se diminua a produo e o
acmul o de embal agens de
agrotxicos, as quais muitas vezes
no possuem um destino seguro no
meio ambiente.
Todavia, devido expresso
contnua das toxinas inseticidas ao
longo do perodo de desenvolvi-
mento, as plantas Bt exercem uma
elevada presso de seleo sobre as
populaes de insetos praga que so
alvos do controle. Assim, a preserva-
o da suscetibilidade nas popula-
es de insetos a toxinas presentes
nas culturas Bt est dependente da
adoo de programas adequados de
liberao e manejo destas plantas no
ambiente. Estas medidas tm o obje-
tivo de retardar ao mximo a evolu-
o da resistncia nos insetos a toxi-
nas de B. thuringiesis. Com a evolu-
o da resistncia , existe a possibi-
lidade de perda desta tecnologia no
MIP. Alm disso, existe a chance de
que ocorram restries ao uso de
biopesticidas formulados base de
Bt e o aumento no uso de inseticidas
sintticos no controle de pragas. Este
acrscimo no uso de inseticidas re-
presentaria um retrocesso no desen-
volvimento e emprego de prticas
agrcolas compatveis com a preser-
vao do meio ambiente e dos recur-
sos naturais. Deste modo, diante dos
benefcios ao meio ambiente e das
conseqncias associadas ao desen-
vol vi ment o da resi st nci a, a
normatizao do processo de regis-
tro, liberao e manejo das plantas
GM tem sido regulamentada por r-
gos de proteo ambiental. Por
exemplo, nos EUA a Agncia de
Proteo Ambiental (EPA) monitora
de modo bastante programtico a
regulamentaco e a situao dos
plantios de plantas GM.
At o momento no h nenhum
relato de evoluo de resistncia de
qualquer praga s toxinas de Bt no
campo a partir da exposio a plan-
tas GM resistentes a insetos. Em
diferentes pases, os resultados das
estratgias de manejo da resistncia
podem ser conferidos nos dados de
programas de monitoramento da
suscetibilidade de po-
pulaes de insetos pra-
ga s protenas insetici-
das de Bt. Com base
nestes estudos, pode-
se dizer que no perodo
de 1995-2003 no foi
registrado aumento na
freqncia de resistn-
cia s toxinas insetici-
das provocada pela ex-
posio s culturas Bt
comercialmente utiliza-
das (Tabashnik et al.
2003; Bourguet 2004;
Carrire et al. 2005).
Diante do expos-
to, pode-se concluir que
a adoo da tecnologia
de plantas GM em pro-
gramas de MIP exige o
estabelecimento de es-
tratgias para o manejo
pr-ativo da resistncia de insetos. O
manejo da resistncia de insetos
pode ser definido como o conjunto
de prticas que devem ser adotadas
com o objetivo de reduzir o potenci-
al para a evoluo da resistncia na
populao da praga. Neste sentido,
programas de monitoramento da
suscetibilidade das pragas-alvo so
indispensveis para que se acompa-
nhe o desempenho das estratgias
de manejo para o retardamento da
evoluo da resistncia.
2. Potencial para Evoluo da
Resistncia a Toxinas de
Bacillus thuringiensis
em Plantas GM
A bactria B. thuringiensis
um microrganismo de solo, gram-
positiva, que foi inicialmente isolada
no Japo por Ishiwata e descrita por
Berliner em 1915. Este patgeno
apresenta a capacidade de formar
cristais contendo endotoxinas, as
quais so protenas com ao inseti-
cida, durante a fase de esporulao
do seu ciclo de desenvolvimento.
No entanto, sabe-se que protenas
inseticidas da fase vegetativa (VIP)
tambm so produzidas antes da
esporulao.
Os cristais de diferentes linha-
gens de Bt podem conter uma srie
Figura 1. Respostas de indivduos homozigotos suscetveis (SS), resistentes (RR) e heterozigotos
(RS) mediante uso de baixa dose e alta dose (Modificado de Gould, 1998)
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 69
de diferentes protenas que possu-
em ao inseticida (ICP) as quais so
txicas para diferentes grupos de
insetos. Entre estas toxinas desta-
cam-se as conhecidas protenas Cry
ou -endotoxinas. Entretanto, o his-
trico de uso de B. thuringiensis no
controle de pragas no recente,
pois na Frana j no fim de 1930 foi
comercializado o Sporeine, o qual
era um produto formulado base de
Bt. Segundo EPA, existiam 182 pro-
dutos registrados base de Bt em
1995. Todavia, devido baixa esta-
bilidade em condies de campo,
baixa eficincia no controle de esp-
cies de insetos consideradas crpticas
e reduzido espectro de ao (Ferr
& Van Rie 2002), at 1999 menos de
2% do total comercializado em in-
seticidas podia ser atribudo a ven-
das de produtos base de Bt. Em
1987, pela primeira vez genes de Bt
responsveis pela produo de pro-
tenas inseticidas foram introduzidos
e expressos em plantas de fumo.
Aps alguns anos os cientistas obti-
veram plantas que expressavam de
modo efetivo os genes de Bt. Deste
modo, em 1996 tornou-se possvel a
utilizao comercial de plantas ge-
neticamente modificadas resistentes
a insetos as quais eram eficientes no
controle de pragas. Entretanto, o
potencial de evoluo de resistncia
de populaes de insetos s toxinas
de Bt uma das principais ameaas
e limitaes ao emprego sustentvel
de plantas geneticamente modifica-
das para o controle de pragas
agrcolas.
Em condies de campo, tm-
se relatos da resistncia da traa-das-
cruc f eras, Pl ut el l a xyl ost el l a
(Lepidoptera: Yponeumatidae), para
biopesticidas formulados base de
Bt. Neste caso, foram detectados
altos nveis de resistncia toxina
Cry1Ab em populaes de P.
xylostella originrias das Filipinas,
Hava, Flrida e sia (Tabashnik
1990, 1994). Na populao da praga
coletada no Hava foi tambm de-
tectada resistncia cruzada entre as
toxinas Cry1Ab e Cry1F. Este foi o
primeiro e at o momento ainda
representa o nico caso de resistn-
cia de insetos a biopesticidas formu-
lados base de Bt em condies de
campo (Ferr & Van Rie 2002).
Por outro lado, h vrios casos
caracterizados de evoluo da resis-
tncia de insetos a toxinas de Bt em
condies de laboratrio (Tabela 1).
No entanto, a capacidade das linha-
gens resistentes em sobreviver
exposio a protenas ou formula-
es de Bt em dieta artificial ou em
bioensaios com folhas contaminadas
no garante necessariamente a so-
brevivncia das larvas sobre as plan-
tas Bt (Tabela 1) Existem algumas
hipteses que podem nos auxiliar no
entendimento destes resultados. Por
exemplo, a maior exposio dos in-
setos s toxinas em testes nos quais
se utiliza diretamente as plantas Bt,
ou a presena de concentraes mais
elevadas das toxinas nas plantas GM.
Alm disso, so tambm considera-
das as possveis interaes de com-
ponentes qumicos da planta e as
toxinas de Bt, e a produo da forma
ativa da toxina inseticida ao invs da
protoxina. Vale lembrar que a
protoxina a forma no ativada das
-endotoxinas, e que tem sido o
agente de mortalidade muitas vezes
testado nos bioensaios em condi-
es de laboratrio. Por ltimo, h
ainda a hiptese de que diferenas
no conjunto de toxinas produzidas
pelas plantas em comparao que-
las testadas no ambiente de labora-
trio poderiam ser responsveis pela
diminuio da sobrevivncia das li-
nhagens resistentes de insetos quan-
do expostas s plantas Bt.
As toxinas Cry ou -endotoxinas
possuem um mecanismo de ao
que envolve uma srie de etapas
intimamente relacionadas com a
ingesto dos cristais proticos que
so digeridos e solubilizados em fai-
xas especficas de pH do intestino
1 a l e b a T s a t n a l p m e o i r t a r o b a l m e s a d a n o i c e l e s s o t e s n i e d s n e g a h n i l e d a i c n v i v e r b o S - c t B s a d a v i t l u c e t n e m l a i c r e m o
) 3 0 0 2 , . l a t e k i n h s a b a T e d o d a c i f i d o M (
a u t l u C t B e d a n i x o T t B o t e s n I m e g a h n i L
R R
a
a i c n v i v e r b o S
a r u t l u c a n t B
) % (
b
a i c n r e f e R
o h l i M c A 1 y r C u o b A 1 y r C s i l a l i b u n . O c S - S K 0 7 0 2 0 0 2 , . l a t e g n a u H
o d o g l A c A 1 y r C a r e g i m r a . H l e s - c A 1 y r C 3 1 5 2 0 0 0 2 , . l a t e n a F
X B 7 5 8 5 3 0 0 2 , . l a t e t s u r h k A
s n e c s e r i v . H 2 D H D Y 0 0 0 . 0 1 0 3 0 0 2 , . l a t e k i n h s a b a T
a l l e y p i s s o g . P R - P Z A 0 0 1 . 3 5 4 3 0 0 2 , . l a t e n i r o M
R - 6 9 - S I H P A 0 0 1 > 7 3 9 9 9 1 , . l a t e u i L
a t a t a B A 3 y r C a t a e n i l m e c e d . L R - t B 0 0 4 > 0 6 9 9 1 , . l a t e a g n e r e i W
a
L C = ) a i c n t s i s e R e d o z a R ( R R
0 5
L C / e t n e t s i s e r m e g a h n i l a d
0 5
l e v t e c s u s m e g a h n i l a d
b
a r u t l u c a n a i c n v i v e r b o S ( t B o n e d a d e i r a v a m u n a i c n v i v e r b o S / t B a 2 D H D Y s n e g a h n i l s a a r a P . 0 0 1 X ) a r u t l u c a m s e m a d
d o g l a o n e t B o d o g l a o n % 0 i o f a i c n v i v e r b o s n t B o .
70 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
mdio dos insetos e com a posterior
l i berao das prot oxi nas. As
protoxinas so processadas por
proteases do instestino mdio dos
insetos, originando um fragmento
resistente a ao de proteases que,
por sua vez, considerado a toxina
inseticida na sua forma ativada. A
toxina atravessa ento a membrana
peritrfica e liga-se a receptores es-
pecficos localizados na membrana
ciliada das clulas do intestino m-
dio. A ligao que seguida do
encaixe parcial das toxinas na mem-
brana leva formao de poros, lise
celular e eventualmente morte do
inseto por inanio ou septicemia.
(Frre & Van Rie 2002). Por exem-
plo, os insetos da ordem Lepidoptera
so particularmente sensveis a pro-
tenas Cry1. A solubilizao do cristal
protico libera a protoxina de peso
molecular de 130-KDa, a qual ati-
vada por proteases no intestino
mdio, o que origina a forma truncada
e ativa da protena inseticida a qual
tem por alvo a membrana ciliada das
clulas do intestino mdio (Bravo et
al. 1992). A ligao da protena inse-
ticida nos receptores especficos do
intestino mdio provoca a alterao
na conformao da toxina, o que
permite a insero de canais de ons
ou poros na membrana ciliada que
acarretam o desequilbrio inico no
intestino mdio do inseto (Gill et al.
1992). Entretanto, admite-se que com
produo pelas plantas GM das toxi-
nas de Bt na sua forma ativa, existe
uma limitao nas possibilidades de
alteraes nas etapas que compre-
endem o mecanismo de ao das
protenas de Bt. Isto porque nesta
condio h uma sensvel reduo
no nmero de pontos na rota de ao
destas protenas, os quais poderiam
ser alterados conferindo resistncia a
insetos (Gould 1998).
Os estudos com relao a meca-
nismos de resistncia a protenas
inseticidas de Bt tm sido bastante
explorados pelo menos nos ltimos
10 anos. At o momento, foram iden-
tificados receptores da toxina Cry1
pertecentes a famlia das caderinas e
aminopeptidases N (Darboux et al.
2002). O envolvimento de caderinas
na resistncia de protenas Cry1Ab j
foi observada em larvas de Manduca
sexta (Vadilamudi et al. 1993; 1995)
e Ostrinia nubilalis (Flannagan et
al. 2005). Por sua vez, o envolvimento
de caderinas e toxina Cry1Ac j foi
verificado em Heliothis virescens
(Gahan et al. 2001) e Pectinophora
gossypiella (Morin et al. 2003). Alm
disso, j foram identificados outros
mecanismos de resistncia de inse-
tos a toxinas de Bt, como, por exem-
pl o, al t er aes na at i vi dade
proteoltica de extratos do intestino
mdio que afetam o processo de
ativao das protoxinas (Oppert
1999; Huang et al. 1999; Li et al.
2005) e inclusive a reposio de
clulas danificadas do intestino m-
dio dos insetos pela
ao de clulas tronco
(Martinez-Ramirez &
Real 1999). Recente-
mente, foi reportada a
evidencia de uma as-
sociao entre resistn-
cia a toxinas de Bt e o
aumento da resposta
do si st ema
i munol gi co de
Ephestia kuehniella
(Rahaman et al. 2004)
e Hel i coverpa
armigera (Ma et al.
2005).
Todavia, a taxa de
evoluo da resistn-
cia afetada por uma
srie de fatores genti-
cos e bioecolgicos da praga alvo de
cont r ol e, al m dos f at or es
operacionais vinculados s caracte-
rsticas intrnsicas das plantas GM, ao
sistema de rotao ou sucesso de
culturas e s estratgias de uso e
liberao das dessas plantas GM. A
seguir sero apresentados os princi-
pais pontos para a compreenso da
evoluo da resistncia de insetos a
plantas GM.
2.1. Herana da Resistncia e
Mortalidade de Heterozigotos
A resistncia de insetos a inseti-
cidas e a toxinas Bt caracteriza-se
por ser pr-adaptativa. O conheci-
mento do padro de herana da re-
sistncia permite a avaliao do po-
tencial risco de evoluo no campo.
Por exemplo, situaes em que a
herana da resistncia recessiva, o
resultado final uma baixa sobrevi-
vncia dos indivduos heterozigotos
porque estes se comportariam
fenotpicamente como homozigotos
suscetveis. Por outro lado, a
dominncia da resistncia resultaria
numa al t a sobrevi vnci a dos
indivduos heterozigotos no campo,
os quai s se compor t ar i am
fenotipicamente como homozigotos
resistentes. Assim, a mortalidade dos
heterozigotos um dos pontos fun-
damentais no manejo da resistncia,
j que de acordo com o Equilbrio de
Hardy-Weinberg, os insetos de
gentipo heterozigoto so, princi-
Figura 2. Disposio esquemtica da rea de refgio na forma de faixas alternadas de plantas
geneticamente modificadas e plantas convencionais. As dimenses das reas a serem interca-
ladas devero ser determinadas em funo da bioecologia da praga alvo.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 71
palmente no incio do processo de
seleo, os principais carregadores
dos alelos de resistncia. Portanto,
uma das estratgias para retardar a
evoluo da resistncia tem sido a
expresso da toxina em altas con-
centraes na planta GM para garan-
tir uma elevada mortalidade de
heterozigotos. A premissa bsica para
o sucesso desta estratgia a
recessividade do carter resistncia.
2.2. Aspectos Bioecolgicos
da Praga-Alvo
O conheci ment o da
bioecologia da praga alvo de contro-
le da planta GM fundamental para
a elaborao e refinamento das es-
tratgias de manejo da resistncia de
insetos a toxinas das plantas GM.
Deste modo, a passo inicial a cor-
reta definio de quais pragas sero
o alvo do controle proporcionado
por determinada planta GM resisten-
te a insetos. Em seguida, deve ser
levantada uma srie de aspectos
bsicos da bioecologia do inseto por
meio da reviso da literatura e de
experimentos especficos. Estas pes-
quisas, quando conduzidas de modo
cor r et o, podem aument ar a
confiabilidade nas estratgias de
manejo e a capacidade efetiva de
que seja retardada a evoluo da
resistncia. Os aspectos bioeco-
lgicos relevantes na composio
das estratgias de manejo da resis-
tncia envolvem, por exemplo, o
conhecimento da faixa efetiva de
movimento das larvas da praga entre
as plantas da cultura, assim como a
capacidade de disperso dos adul-
tos. No obstante, devem ser reuni-
das informaes sobre o hbito ali-
mentar e a efetividade com que
hospedeiros alternativos so utiliza-
dos pela praga para a alimentao e
ou para abrigo. Neste aspecto, de
grande importncia a obteno de
dados da utilizao no apenas dos
hospedeiros cultivados, mas tambm,
das plantas hospedeiras selvagens.
De modo adicional, esforos devem
ser direcionados para a compreen-
so do comportamento de cpula e
oviposio dos insetos (Gould 1998).
Por sua vez, tambm deve ser consi-
derada a variedade de sistemas de
produo em que a cultura GM ser
utilizada e as particularidades locais
e regionais devem ser consideradas
por afetarem direitamente aspectos
como a dinmica populacional da
praga.
No estado do Arizona (EUA), a
rea de algodo transgnico entre
1997 e 1999 representou mais de
50% da rea total plantada com algo-
do. Deste modo, a alta presso de
seleo exercida pelas plantas
transgnicas e a ausncia de hospe-
deiros alternativos aumentar consi-
deravelmente a probabilidade de
evoluo de resistncia em popula-
es de l agar t a r osada (P.
gossypiella) toxina Cry1Ac (Carrire
et al. 2001).
No Brasil um bom exemplo des-
tas relaes que envolvem os inse-
tos-praga e as plantas cultivadas o
plantio das culturas de algodo e
milho em reas adjacentes ou em
sucesso de culturas. As culturas de
algodo e milho apresentam insetos
pragas em comum, destacando-se
Spodoptera frugiperda (Lepidoptera:
Noctuidae). Certamente, haver um
impacto deste padro de explorao
da atividade agrcola sobre o deline-
amento das estratgias de manejo da
resistncia de S. frugiperda a toxinas
presentes em plantas GM resisten-
tes a insetos.
2.3. Dose e Nmero de Toxinas
Inseticidas Expressas
na Planta GM
A dose e o nmero de toxinas
utilizadas no controle de insetos in-
fluem diretamente na mortalidade
dos indivduos heterozigotos e na
probabilidade de que sejam selecio-
nados indivduos resistentes. Como
mencionado anteriormente, a mor-
talidade de insetos heterozigotos
um dos pontos mais importantes que
devem ser considerados na tentativa
de se retardar a evoluo da resistn-
cia. A utilizao de altas doses para o
manejo da resistncia a inseticidas
sempre foi limitada por problemas
prticos. Por exemplo, o aumento da
dose de um inseticida torna o contro-
le qumico ainda mais caro e impra-
ticvel comercialmente. Alm disso,
o uso de altas doses pode acarretar
elevada mortalidade de agentes de
controle biolgico e insetos no-al-
vos de controle contrariando os fun-
damentos do MIP, alm de colocar
em risco a sade de trabalhadores
rurais e dos consumidores pela ele-
vao do nvel de resduos qumicos
nos alimentos.
Entretanto, a expresso de
Figura 3. Disposio esquemtica da rea de refgio na forma reas adjacentes
de plantas geneticamente modificadas e plantas convencionais. As dimenses
das reas adjacentes e distncias mximas entre estas reas tambm devero ser
determinadas em funo da capacidade de disperso da praga alvo.
72 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
toxinas inseticidas de Bt nas plantas
GM tornou possvel a utilizao de
altas doses como parte integrante do
manejo da resistncia. Considera-se
como alta dose, a expresso de toxi-
nas inseticidas de Bt em doses 25x
superiores para matar 99% de uma
populao da praga suscetvel de
referncia (U.S. EPA/USDA 1999).
Porm, ainda no existe consenso
sobre os limites de mortalidade na
populao de insetos para que uma
planta GM seja considerada como
capaz de proporcionar o efeito de
alta dose da toxina inseticida na pra-
ga alvo de controle.
Com relao ao binmio dose da
toxina e mortalidade da praga alvo
de controle, as diferenas existentes
na eficincia do controle entre os
diferentes eventos de milho e algo-
do Bt, a avaliao da atividade inse-
ticida da planta Bt ao longo do seu
desenvolvimento e a expresso de
toxinas inseticidas nos diferentes
tecidos vegetais, so pontos impor-
tantssimos e que devem ser rigoro-
samente avaliados diante da elabora-
o de programas para o manejo da
resistncia de insetos a plantas GM.
Como exemplo, tem-se o com-
plexo de pragas que ataca a cultura
do algodo na Austrlia. Helicoverpa
armigera (Lepidoptera: Noctuidae)
uma praga importante em algumas
culturas na sia atacando tambm a
cultura do algodo na Austrlia. No
entanto, a toxina inseticida Cry1Ac,
expressa no algodo Bt Ingard

,
cerca de 30 vezes menos txica para
H. armigera do que para Heliothis
virescens (Lepidoptera: Noctuidae)
que tem sido a praga alvo nos EUA.
Resultados de pesquisa mostram que
a atividade inseticida nas plantas do
algodo Bt Ingard diminui com a
maturao das plantas e alguns indi-
vduos de H. armigera so capazes
de completar seu desenvolvimento
nas fases mais tardias da cultura. Esta
sobrevivncia diferencial dos inse-
tos deve ser entendida como parte
de um processo de seleo e apre-
senta-se como um srio risco para a
sustentabilidade desta tecnologia por
facilitar o desenvolvimento da resis-
tncia na populao da praga.
Nos EUA por sua vez so
comercializados hbridos de milho Bt
apresentando a expresso da toxina
Cry1Ab os quais so registrados para
o controle de Ostrinia nubilalis
(Lepidoptera: Crambidae). Estudos
mostram que estes eventos de milho
Bt apresentam mais de 90% de con-
trole das infestaes iniciais de O.
nubilalis. No entanto, existem dife-
rena entre os eventos de milho Bt
que expressam a toxina Cry1Ab em
seus tecidos com relao no nvel de
controle das infestaes de O.
nubilalis que ocorrem prximas ao
final do perodo de desenvolvimen-
to das plantas de milho. Por exem-
plo, os hbridos de milho contendo o
evento 176 expressam grandes quan-
tidades da protena inseticidas
Cry1Ab nos tecidos verdes e nos
gros de plen, porm baixos nveis
nos tecidos reprodutivos (Koziel et
al. 1993). Alm disso, pesquisas
mostraram que o evento 176 apre-
senta reduo na expresso da toxi-
na inseticida no tecido verde prxi-
mo a senescncia das plantas
(Fearing et al. 1997; Ostlie et al.
1997). Siegfried et al. (2001) verifi-
caram a sobrevivncia e danos cau-
sados pela segunda gerao de O.
nubilalis nas espigas de milho. Foi
observado que as lagartas que sobre-
viveram quando presentes nas plan-
tas Bt haviam sido expostas a doses
subletais de Cry1Ab. Portanto, h
alta probabilidade de ocorrncia de
aumento da presso de seleo para
a resistncia. Isso porque nestas situ-
aes a concentrao de toxina inse-
ticida presente nas plantas era me-
nor que a necessria para matar os
indivduos heterozigotos. Deste
modo, o evento de milho Bt 176 foi
retirado do mercado norte-america-
no por representar um risco conside-
rvel rpida evoluo da resistn-
cia toxina Cry1Ab. Como discutido
anteriormente, a mortalidade de
heterozigotos um dos pontos crti-
cos no sucesso das estratgias de
manejo da resistncia a plantas GM.
Admitindo-se uma planta de algodo
ou milho Bt que no atenda s pre-
missas da definio de alta dose, os
insetos heterozigotos poderiam so-
breviver na rea Bt e aumentarem a
freqncia dos genes de resistncia
na populao.
Apesar da estratgia de alta dose
e adoo de reas de refgio ser uma
das mais utilizadas e com excelentes
resultados principalmente nos EUA,
o manejo da resistncia pode tam-
bm ser elaborado para plantas GM
que expresso em seus tecidos as
toxinas inseticidas em baixa dose.
Entretanto, por no atingir a alta
dose, estas plantas poderiam permi-
tir a seleo e conseqentemente a
sobrevivncia de indivduos parcial-
mente resistentes (ex: insetos
heterozigotos com apenas um alelo
de resistncia) e, portanto, levando
ao aumento da freqncia de resis-
tncia na populao da praga. Assim,
as plantas GM expressando toxinas
de Bt em baixa dose podem repre-
sentar um risco considervel para a
sustentabilidade de culturas GM quan-
do comparadas expresso em alta
dose, caso os agentes de controle
natural da praga no atuem de modo
sinrgico com as plantas GM.
3. Estratgias para o Manejo
da Resistncia a Toxinas
em Plantas GM
Os programas de manejo da re-
sistncia apresentam os objetivos
principais de evitar, retardar, ou
mesmo, reverter a evoluo da resis-
tncia. As estratgias para o manejo
da resistncia de insetos praga a
plantas Bt podem ser divididas nas
seguintes categorias:
* Uso de plantas com altas do-
ses das toxinas Bt juntamente com
plantio de reas de refgio
* Uso de plantas com mais de
um gene de Bt
* Uso simultneo de diferentes
toxinas de Bt em diversos hbridos
ou variedades comerciais de plantas
GM
* Uso de plantas com baixo n-
vel de expresso dos genes respon-
sveis pela produo das toxinas
inseticidas
* Uso de plantas com expres-
so dos genes Bt direcionada para
determinados tecidos ou estdios
fenolgicos
3.1. Alta Dose e reas de Refgio
Esta estratgia baseia-se na uti-
lizao de plantas geneticamente
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 73
modificadas que expressam toxinas
de Bt em altas doses nos seus tecidos
e o plantio e manuteno de reas
de refgio. A obteno de plantas Bt
com altas doses de toxinas nos teci-
dos apenas tornou-se uma alternati-
va no manejo da resistncia no incio
da dcada de 90. Nesta poca, foi
demonstrado que a partir de altera-
es especficas na seqncia de
DNA dos genes de Bt foi possvel
obter aumentos significativos na pro-
duo e acmulo de toxinas insetici-
das nos tecidos da planta GM. Desde
modo, em teoria restariam nas reas
cultivadas com as plantas Bt apenas
uma pequena quantidade de insetos
heterozigotos, alm dos indivduos
homozigotos resistentes que so
bastante raros no incio da evoluo
da resistncia. Por esta razo, pode-
se dizer que as plantas Bt com altas
doses das protenas inseticidas per-
mitem que a resistncia seja consi-
derada funcionalmente recessiva
(Figura 1). Nos EUA todos os hbri-
dos de milho Bt disponveis ao agri-
cultor expressam as toxinas insetici-
das em alta dose para o controle de
O. nubilalis. J no caso do algodo
Bt, os cultivares disponveis prova-
velmente produzem o efeito de alta
dose par a H. vi rescens e P.
gossypiella, enquanto que nenhum
dos eventos disponveis atinge os
requerimentos de alta dose no con-
t r ol e de Hel i coverpa zea
(Lepidoptera: Noctuidae).
Por sua vez, as reas de refgio
devem ser suficientemente atrativas
para a oviposio da praga alvo do
controle, e deste modo servirem
como um reservatrio de insetos
suscetveis. Para que a estratgia da
alta dose e reas de refgios funcio-
ne, os insetos da rea de refgio
devem imigrar para a rea cultivada
com plantas Bt. Por conseqncia,
se a freqncia inicial do alelo de
resistncia for baixa tem-se que a
maioria dos insetos ser homozigoto
suscetvel. Logo, espera-se que os
raros indivduos homozigotos resis-
tentes acabem na maioria das vezes
por acasal ar com i ndi v duos
homozigotos suscetveis advindos das
reas de refgio. Portanto, a gerao
subseqente ser composta nova-
mente em sua maioria por indivdu-
os heterozigotos que sero suscet-
veis devido expresso das toxinas
de Bt em alta dose. Para que a rea
de refgio funcione de modo efeti-
vo, admite-se que o nmero de inse-
tos homozigotos suscetveis deva ul-
trapassar a soma do nmero de
heterozigotos e homozigotos resis-
tentes em uma proporo maior ou
igual a 500:1 (EPA 1998).
Entretanto, o sucesso da estra-
tgia da alta dose associada a reas
de refgio depende da satisfao de
uma srie de premissas envolvendo
questes operacionais da plantas GM
e bioecolgicas da praga alvo do
controle, tais como:
* As plantas devem produzir as
toxinas inseticidas em doses 25x o
necessrio para matar 99% dos inse-
tos suscetveis.
* A freqncia inicial dos genes
de resistncia deve ser baixa
* O padro de herana da resis-
tncia deve ser recessivo
* O acasalamento deve ser ale-
at r i o ent r e os i ndi v duos
homozigotos resistentes e suscet-
veis.
* O refgio deve estar localiza-
do de modo a assegur ar o
acasalamento aleatrio entre os in-
setos presentes nas reas com plan-
tas GM e na rea de refgio.
* Deve haver sincronia na emer-
gncia de insetos adultos entre as
duas reas. Possveis diferenas no
tempo de desenvolvimento podem
comprometer o acasalamento alea-
trio entre os indivduos resistentes
e os suscetveis.
A disposio das reas de ref-
gio um dos pontos de grande
discusso para o manejo da resistn-
cia. As possibilidades envolvem a
disposio do refgio internamente
rea Bt na forma de faixas de
plantio (Figura 2), ou estruturado
externamente s reas de plantas Bt
(Figura 3), ou ainda atravs da mistu-
ra de sementes GM e convencionais.
Deve-se salientar que a disposio
do refgio est intimamente relacio-
nada com a bioecologia da praga
alvo de controle da planta Bt. Nas
espcies de insetos nas quais as lar-
vas no se dispersam entre as plan-
tas no campo, a utilizao de mistura
de sementes ou linhas de plantio de
plantas GM e convencionais seria a
forma ideal de disposio de refgio.
Neste caso, possvel se assegurar
que a cultura GM possui uma rea de
refgi o com desenvol vi mento
fenolgico e prticas adicionais apli-
cadas para controle de pragas seriam
exatamente as mesmas nas plantas
GM e nas convencionais. Este tipo
de disposio para a rea de refgio
vem sendo empregado na cultura do
algodo Bt no Arizona, onde a lagarta
rosada, P. gossypiella, a praga alvo
de control e. As l arvas de P.
gossypiella apresentam movimento
limitado entre plantas de algodo e a
disperso de adultos tambm res-
trita. Alm disso, este inseto apre-
senta uma faixa limitada de plantas
hospedeiras. Neste caso, com base
em informaes sobre a bioecologia
de P. gossypiella, recomenda-se o
plantio de 1 linha de algodo no Bt
a cada 6 linhas da cultura Bt. No
entanto, h casos nos quais as larvas
se dispersam entre as plantas e aca-
bam por alimentar-se nos diferentes
hospedeiros presentes no campo.
Nestas situaes, a alta mobilidade
das formas larvais reduziria a propor-
o de indivduos que se desenvol-
veriam no refgio. Isso porque indi-
vduos suscetveis que se encontram
nas plantas convencionais poderiam
se dispersar para plantas Bt e serem
controladas pelas toxinas inseticidas.
Alm disso, larvas de gentipo
heterozigoto que seriam mortas en-
quanto neonatas poderiam sobrevi-
ver ao mover-se para plantas Bt em
um estdio larval mais desenvolvido.
Desta maneira, nas situaes em que
a praga alvo do controle apresenta
nas larvas uma elevada taxa de dis-
perso entre plantas, tem-se reco-
mendado a adoo de modo prefe-
rencial de um refgio estruturado
posicionado externamente rea Bt.
As reas destinadas a refgio devem
ser localizadas para otimizar o
acasalamento aleatrio entre os in-
setos suscetveis da rea de refgio e
os possveis resistentes que sobrevi-
vem na rea Bt. Portanto, a localiza-
o da rea de refgio externa
definida em funo de informaes
bsicas sobre o movimento dos inse-
74 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
tos adultos juntamente com o com-
portamento reproduti vo e de
oviposio da praga.
3.2. Plantas Expressando
Duas ou Mais Toxinas
de Bt - Pirmides de Genes
A pirmide de genes uma das
opes dos agricultores para o ma-
nejo da resistncia de insetos a toxi-
nas de Bt (Ferr & Van Rie 2002).
Consiste no cultivo de uma planta
geneticamente modificada conten-
do genes que codificam duas ou
mais protenas com ao inseticida.
Este tipo de estratgia envolvendo a
mistura de agentes de mortalidade
pode ser classificado dentro do con-
junto de medidas para manejo da
resistncia pertecentes clssica
estratgia de ataque mltiplo. Por
sua vez, as protenas inseticidas pro-
duzidas nestas plantas GM devem
ser suf i ci ent ement e di st i nt as
bioqumicamente e com baixo po-
tencial para resistncia cruzada. Um
bom exemplo da expresso conjun-
ta de duas protenas inseticidas na
mesma planta o algodo Bt de
marca regi strada Bol l gard

II
comercializado nos EUA e na Austr-
lia. Estas plantas expressam as toxi-
nas Cry1Ac e Cry2Ab2 as quais pos-
suem mecanismos de ao distintos
(Crickmore et al. 1998). Alm disso,
plantas de algodo combinando as
protenas Cry2Ab2 e Cry1Ac foram
capazes de controlar de modo efici-
ente insetos resistentes toxina
Cry1Ac (Tabashnik et al. 2002). Di-
versos estudos de simulao com
uso modelos matemticos tm de-
monstrado que a incorporao de
duas toxinas na mesma planta uma
estratgia que permite uma maior
durabilidade da tecnologia compara-
da liberao seqencial de plantas
GM contendo uma toxina, com pos-
sibilidades de reduo do tamanho
das reas de refgio (Roush 1998).
No entanto, o uso de uma planta GM
com duas ou mais protenas insetici-
das deve ser integrada a outras estra-
tgias de manejo da resistncia como
a manuteno de reas de refgio
para promover a sustentabilidade do
uso das plantas GM.
3.3. Dispor Diferentes Toxinas
em Diferentes Variedades
A disposio de diferentes to-
xinas em hbridos de uma cultura por
companhias concorrentes parece ser
um dos provveis cenrios a partir
da liberao para o plantio de plan-
tas GM resistentes a insetos. Este
padro de uso levaria formao de
mosaicos mediante a adoo de dife-
rentes plantas GM pelos agriculto-
res. Entretanto, deve-se atentar para
o fato de que numa formao de
mosaicos, as diferentes reas com
plantas GM no funcionariam como
refgio em comum. Isto no poss-
vel visto que dependendo no nvel
de expresso das toxinas, no have-
ria a produo suficiente de insetos
suscetveis em nenhuma destas re-
as. Mesmo com plantio de reas de
refgio, o sistema em mosaico ape-
nas estaria simultaneamente selecio-
nado para a resistncia a cada uma
das toxinas.
3.4. Uso Plantas com Baixa Dose
das Toxinas Inseticidas
A utilizao de doses modera-
das das toxinas inseticidas tambm
uma possvel estratgia para o ma-
nejo da resistncia s plantas GM.
Neste caso, espera-se a ao conjun-
ta das plantas Bt e de inimigos natu-
rais resulte em sucesso no controle
de pragas. Entretanto, modelos ge-
nticos mostram que o uso da baixa
dose associada ao controle proporci-
onado por inimigos naturais pode
diminuir, aumentar ou no afetar a
taxa de incremento na freqncia de
resistncia (Gould 1998). Pesquisas
tm mostrado que o resultado desta
associao depende dos detalhes
envolvidos nas interaes ecolgi-
cas entre a praga e os inimigos natu-
rais (Johnson & Gould 1992; Johnson
1997; Johnson et al. 1997).
3.5. Expresso Direcionada das
Toxinas Inseticidas
Esta estratgia baseia-se na
expresso das toxinas inseticidas de
modo no constitutivo. Assim, as
possibilidades envolvem o uso de
promotores que direcionem a ex-
presso das toxinas em um determi-
nado tecido ou estrutura vegetal, ou
ainda regulem a produo das prote-
nas inseticidas em determinados
perodos do ciclo fenolgico que so
crticos para a proteo da planta.
Entretanto, existe h necessidade de
que estudos bsicos de gentica
molecular sejam conduzidos para a
deteco destas regies promotoras.
4. O Monitoramento da Resistn-
cia s Toxinas de Bt
O monitoramento para a veri-
f i cao de al t er aes na
suscetibilidade dos insetos alvos de
controle s toxinas de Bt uma das
partes mais importantes dos progra-
mas pr-ativos de manejo da resis-
tncia de insetos a plantas GM. Atra-
vs deste tipo de monitoramento,
tem sido possvel no apenas se
avaliar a resultado das estratgias de
manejo implementadas em retardar
a evoluo da resistncia e garantir a
eficincia das plantas Bt no controle
de pragas, mas tambm validar mui-
tos dos parmetros biolgicos utili-
zados em modelos matemticos. O
passo inicial para os trabalhos de
monitoramento o estabelecimento
da resposta natural de populaes
geograficamente distintas da praga
s toxinas de Bt atravs do estabele-
cimento das linhas bsicas de
suscetibilidade antes da liberao das
culturas GM no campo. Na seqn-
cia deve ser realizado o acompanha-
mento sistemtico da suscetibilidade
dos insetos nestas regies preferen-
cialmente mediante o uso de con-
cent r aes di agnst i cas ou
discriminatrias. No contexto prti-
co, o uso de bioensaios utilizando-se
concentraes diagnsticas o m-
todo corrente recomendado pela EPA
no monitoramento da suscetibilidade
de populaes de insetos s toxinas
de Bt nos EUA. Admite-se que estes
bioensaios seriam eficientes para
detectar a resistncia quando a fre-
qncia dos alelos de resistncia atin-
gir 1%, o qual um valor prximo do
momento em que so observadas
falhas no controle de pragas. (U.S.
EPA/USDA 1999). A chance de se
detectar larvas resistentes numa cul-
tura Bt funo da presso de sele-
o exercida sobre a praga, da fre-
qncia inicial dos indivduos resis-
tentes, e do nmero de amostras
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 75
coletadas. Por sua vez o monitora-
mento atravs do uso da tcnica de
F
2
Screen particularmente inte-
ressante para a deteco de alelos
recessivos raros na populao de
insetos. Atravs desta tcnica pos-
svel a deteo de alteraes na
suscetibilidade das populaes de
insetos a partir de um nmero menor
de insetos coletados no campo. Ad-
mite-se que este mtodo apresenta
uma sensibilidade aproximadamen-
te 10 vezes maior que a utilizao de
bioensaios com concentraes
diagnsticas com uma gerao obti-
da a partir da coleta de parentais no
campo (Andow & Alstad 1998). As-
sim, o F
2
Screen e composto por
quatro procedimentos: inicialmente
fmeas adultas e fecundadas devem
ser coletadas no campo e no labora-
trio devem ser estabelecidas dife-
rentes linhagens a partir de uma
mesma fmea trazida do campo. Em
seguida, os indivduos resultantes da
gerao F
1
devem ser criados e re-
produzidos dentro de sua respectiva
linhagem. As larvas neonatas da ge-
rao F
2
devem ser utilizadas em
bioensaios para se verificar a
sucetibilidade dos indivduos a toxi-
nas de Bt. Por fim, os dados de
mortalidade dos insetos das diferen-
tes linhagens devem ser analisados
estatisticamente. O F
2
Screen
considerado um dos nicos procedi-
mentos disponveis que permite que
sejam detectados alelos raros e
recessivos em uma populao de
insetos.
As reas nas quais sero reali-
zadas as coletas para acompanha-
mento da suscetibilidade dos insetos
no devero ser apenas vinculadas
aos nveis de adoo de culturas GM
pelos agricultores. As definies des-
tas reas devero considerar os dife-
rentes regimes de seleo que os
insetos estaro sendo expostos, tam-
bm considerando, por exemplo, a
diversidade de culturas e o sistema
de produo. Deste modo, reas com
maior presso de seleo sobre a
populao da praga devero ser
criteriosamente amostradas.
5. O Manejo da Resistncia de
Insetos a Plantas GM no Brasil
O Brasil recentemente regula-
mentou e normatizou os procedi-
mentos para liberao experimental
e comercial de plantas GM por
intermdia da Lei de Biossegurana.
Certamente, a primeira gerao des-
ses organismos ser composta basi-
camente por plantas (milho e algo-
do) resistentes a insetos expressan-
do toxinas inseticidas de Bt. O
monitoramento da suscetibilidade
pragas a toxinas de Bt no Brasil
representa um enorme desafio na
tentativa de conciliar as necessida-
des prticas e as exigncias tcnicas
de um programa pr-ativo de mane-
jo da resistncia em um ambiente
agrcola altamente diversificado.
Inicialmente, h necessidade
de se coletar e organizar os dados,
no apenas da eficincia agronmi-
ca, mas que possibilitem a caracteri-
zao toxicolgica desses eventos
de plantas GM resistentes a insetos.
Alm disso, necessria uma boa
reviso dos aspectos bioecolgicos
das pragas chave alvos de controle e
novas pesquisas que preencham as
lacunas existentes. Sem dvida, h
necessidade de que sejam definidas
quais informaes so prioritrias,
para que dessa forma no exista um
atraso nos processos de liberao
comercial das plantas GM.
tambm de fundamental im-
portncia o conhecimento dos dife-
rentes agroecossistemas no Brasil.
Este ser uma difcil tarefa para todos
envolvidos no MIP. Isto porque nas
condies brasileiras as diferentes
culturas tm sido exploradas de modo
intensivo e numa grande variedade
dando origem a um considervel
nmero de composies de mosai-
cos de plantas e sistemas de produ-
o. E justamente este cenrio que
tem proporcionado periodicamente
a incluso de novas pragas nas dife-
rentes culturas. Entretanto, as pragas
chaves da cultura podem ser aponta-
das e selecionadas para os estudos
de bioecologia destes insetos. As-
sim, h algumas espcies de insetos
que certamente devero ser alvos
de estudos avanados envolvendo
movimento de larvas, adultos, com-
portamento de cpula e oviposio,
migrao e fluxo gnico, plantas
hospedeiras alternativas etc. Por
exemplo, S. frugiperda merece des-
taque devido sua importncia nas
culturas de milho e algodo. Portan-
to, h necessidade de se considerar
as estratgias de liberao de milho
Bt na elaborao de plano de manejo
de resistncia em algodo Bt, e vice-
versa. Sem dvida, ainda so neces-
srios avanos no estabelecimento
de linhas bsicas de suscetibilidade
de pragas s diferentes toxinas de Bt
no Brasil, bem com a validao de
mtodos de bioensaio para os pro-
gramas de monitoramento da resis-
tncia.
Devido ao grande potencial de
uso da tecnologia de plantas Bt no
Brasil, h necessidade de elaborao
de programas pr-ativos para o ma-
nejo da resistncia s toxinas de Bt.
Neste ponto, as Universidades, Insti-
tuies de Pesquisa, Empresas Esta-
tais e Privadas e rgos de Regula-
mentao devem atuar conjuntamen-
te para que todas as informaes
necessrias sejam geradas do modo
mais idneo e responsvel, afim de
que seja depositada a confiana da
sociedade como um todo nas estra-
tgias de manejo da resistncia. O
acompanhamento da eficincia das
estratgias de manejo por Laborat-
rios, Agncias ou rgos Pblicos
credenciados uma das alternativas
que podem ser consideradas num
plano nacional que regulamentaria a
adoo de culturas Bt. As reas de
refgio tm sido fundamentais para
o retardamento da evoluo da resis-
tncia. Sendo assim, este um dos
pontos que merece ateno para os
pr ogr amas de educao e
conscientizao da sociedade sobre
a necessidade da manuteno de
reas de refgio. Ainda, h necessi-
dade de se pensar em planos de
mitigao, caso sejam detectados
aumentos nos nveis de resistncia
em determinadas populaes de in-
setos.
6. Literatura citada
Andow, D. A.; Alstad, D. N. 1998. The
F
2
Screen for rare resistance alleles.
Journal of Economic Entomology,
91: 572-578.
Bourguet, D. 2004. Resistance to
76 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Bacillus thuringiensis toxins in the
European corn corer: what chance
for Bt maize? Physiological
Entomology, 29:251-256.
Bravo, A.; Hendrickx, K.; Jansens, S.;
Perfeoen, M. 1992.
Imunocytochemical analysis of
specific binding of Bacillus
thuringiensis insecticidal crystal
proteins to lepidopteran and
coleopteran midgut membranes.
Journal of Invertebrate Pathology,
60: 247-263.
Carrire, Y.; Tabashnik, B. E. 2001.
Reversing insect adaptation to
transgenic insecticidal plants.
Proceedings of Royal Society of
London, Biological Science, 268:
1475-1480.
Carrire, Y.; Ellis-Kirk, C.; Kumar, K.;
Heuberger, S.; Whitlow, M.; Whitow,
M.; Antilla, L.; Dennehy, T. J.,
Tabashnik, B. E. 2005. Long-term
evaluation of compliance with
refuge requirements for Bt cotton.
Pesticide Management Science, 61:
1519-1523.
Ceci, L. R.; Volpicella, M.; Rahbe, Y.;
Gallerani, R.; Beekwilder, J.;
Jongsman, M. A. 2003. Selection by
phage display of s variant mustard
trypsin inhibitor toxic against
aphids. Plant Journal, 33: 557-566.
Crickmore, N.; Zeigler, Z. R.; Feilelson,
J.; Schnepf, E.; Van Rie, J.; Lereclus,
D.; Baum, J.; Dean, D. H. 1998.
Revision of the nomenclature for
Bacillus thuringiensis encoded by
a cryptic gene. Microbiological
Molecular Biology Review, 62: 807-
813.
Christeller, J. T.; Burgess, E. P. J.; Mett,
V.; Gatehouse, H. S.; Markwick, N.
P.; Murray, C.; Malone, L. A.; Wright,
M. A.; Philip, B. A.; Watt, D. 2002.
The expression of a mammalian
proteinase inhibitor, bovine spleen
trypsin inhibitor in tobacco and its
effects on Helicoverpa armigera
larvae. Transgenic Research, 11:
161-173.
Darboux, I.; Pauchet, Y.; Catella, C.;
Silva-Filha, M.H.; Nielsen-leftoux,
C.; Charles, J.F.; Pauron, D. 2002.
Loss of the membrane anchor of
the target receptor is a mecha-
nism of biopesticide resistance.
Proceedings of National Academy
of Science (USA), 99: 5830-5835.
EPA, U. S. 1998. FIFRA Scientific Advi-
sory Panel, Sub panel on Bacillus
thuringiensis (Bt) Plant- Pestici-
des & Resistance Management.
Fearing, P. L.; Brown, D.; Vlachos, D.;
Meghji, M.; Privalle, L. 1997. Quan-
titative Analysis of Cry1Ab Ex-
pression in Bt Maize Plants, Tissu-
es and Silage, and Stability of Ex-
pression over the Generations.
Molecular Breeding, 3: 169-176.
Ferr, J.; Van Rie, J. 2002. Biochemistry
and Genetics of Insect Resistance
to Bacillus thuringiensis. Annual
Review of Entomology, 47: 501-
543.
Ferry, N.; Edwards, M. G.; Gatehouse,
J. A.; Gatehouse, A. M. R. 2004.
Plant-insect interactions: molecu-
lar approaches to insect resistan-
ce. Current Opinion on Biotech-
nology, 15: 1-7.
Flannagan, R.D.; Yu. C.; Mathis, J.P.;
Meyer, T.E.; Shi, X.; Siqueira, H.;
Siegfried, B.D. 2005. Identificati-
on, cloning and expression of a
Cry1Ab cadherin receptor from
European corn borer, Ostrinia
nubilalis (Lepidoptera: Crambi-
dae). Insect Biochemistry and
Molecular Biology, 35: 33-40.
Gahan, L.J.; Gould, F.; Hechel, D.G.
2001. Identifications of a gene
associated with Bt resistance in
Heliothis virescens. Science, 293:
857-860.
Gatehouse, J. A. 2002. Plant Resistan-
ce Towards Insect Herbivores: A
Dynamic Interaction. New Phyto-
palogy, 156: 145-169.
Gill, S.S.; Cowles, E.A.; Pietrantonio,
P.V. 1992. Mode of action of Baci-
llus thuringiensis endotoxins.
Annual Review of Entomology,
37: 615-636.
Gould, F. 1998. Sustainability of Trans-
genic Insecticidal Cultivars: Inte-
grating Pest Genetics and Ecology.
Annual Review of Entomology, 43:
701-726.
Hossain, F., Pray, C.E.; Lu, Y., Huang, J.,
Fan, C., Hu, R. 2004. Genetically
modified cotton and farmers heal-
th in China. International Journal of
Occupational and Environmental
Health, 10: 293-303.
Huang, F.; Zhu, K.Y.; Bushman, L.L.;
Higgins, R.A.; Oppert, B. 1999.
Comparison of midgut proteinases
in Bacillus thuringiensis suscepti-
ble and resistant European corn
borer, Ostrinia nubilalis (Lepidop-
tera: Pyralidae). Pesticide Bioche-
mistry and Physiology. 65:132-169.
Johnson, M. T.; Gould, F. 1992.
Interacti on of Geneti cal l y
Engineered host plant resistance
and natural enemies of Heliothis
virescens (Lepidoptera: Noctuidae)
i n tobacco. Envi ronmental
Entomology, 21:207-214.
Johnson, M. T. 1997. Interaction of
resi stant pl ants and wasp
parasitoids of Heliothis virescens
(Lepi doptera: Noctui dae).
Environmental Entomology, 26:
207-214.
Johnson, M. T.; Gould, F.; Kennedy, G.
G. 1997. Effect of natural enemies
on fitness of Heliothis virescens on
resistant host plants. Entomologia
Experimentalis et Applicata, 82:
219-230.
Koziel, M. G.; Beland, G. L. Bowman,
C.; Carozzi, N. B.; Crenshaw, R.;
Crossland, L., Dawson, J., Desai, N.,
Hill, M.; Kadwell, S. 1993. Field
performance of elite transgenic
maize plants expressing an protein
gene derived from Bacillus
thuringiensis. Bio/Technology, 11:
194-200.
Li, H.; Oppert, B.; Higgins, R.A.; Huang,
F.; Bushman, L.L.; Gao, J-R.; Zhu,
K.Y. 2005. Characterization of
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 77
cDNA enconding three trypsin-
like proteinases and mRNA
quantitative analysis in Bt-resistant
and susceptible strain of Ostrinia
nubilalis. Insect Biochemistry and
Molecular Biology, 35: 847-860.
Loc, N. T.; Tinjuangjun. P.; Gatehouse,
A. M. R.; Christou, P.; Gatehouse, J.
A. 2002. Linear transgene cons-
tructs lacking vector lacking back-
bone sequences generate transge-
nic rice plants with accumulate
higher levels of proteins confer-
ring insect resistance. Molecular
Breeding, 9: 231-244.
Ma, G.; Roberts, H.; Sarjan, M.; Fea-
therstone, N.; Lahnstein, J.; Akhurst,
R.; Schmidt, O. Is the mature endo-
toxins Cry1Ac from Bacillus thu-
ringiensis inactivated by coagula-
tion reaction in the gut lumen of
resistant Helicoverpa armigera lar-
vae? Insect Biochemistry and Mo-
lecular Biology, 35: 729-739.
Martinez-Ramirez, A.C.; Real, A.D. 1996.
Photolytic processing of CryIIIA
toxin and specific binding to brush-
border membrane vesicles of Lep-
tinotarsa decemlineata (Colorado
potato beetle). Pesticide Bioche-
mistry and Physiology, 54:115-122.
Morin, S. R.; Biggs, W.; Sisterson, M. S.;
Shriver, L.; Ellerskirk, C.; Higgin-
son, D.; Holley, D.; Gahan, J. J.;
Heckel, D. G.; Carrire, Y.; Den-
nehy, T. J.; Brown, J. K.; Tabashnik,
B. E. 2003. Three cadherin alleles
associated with resistance to Baci-
llus thuringiensis in pink bollworm.
Proceedings of National Academy
of Science of USA, 100: 5004-
5009.
Oppert, B. 1999. Protease interaction
with Bacillus thuringiensis insec-
ticidal proteins. Archives of Insect
Biochemistry and Physiology, 42:
1-12.
Ostlie, K. R.; Hutchinson, W. D.; Hell-
mich, R. L. 1997. Bt Corn and
European Corn Borer. NCR Publi-
cation 602, University of Minneso-
ta, St. Paul, MN.
Pray, C.; Huang, J.; Hu, R.; Rozelle.
2002. Five Years of Bt Cotton in
China - the Benefits Continue. Plant
Journal, 31: 423-430.
Rahman, M.M.; Roberts, H.L.S.; Sarjan,
M.; Asgari, S.; Schmidt, O. 2004.
Induction and transmission of Ba-
cillus thuringiensis tolerance in
flour moth Ephestia Kuehniella.
Proceedings of National Academy
of Science of USA, 10: 2696-2699.
Roush, R.T. 1998. Two-toxin strategies
for management of insecticidal
transgenic crops: can pyramiding
succeed where pesticide mixtures
have not? Phil.Trans. R. Soc. Lond.
B, 353: 1777-1786.
Siegfried, B. D.; Zoerb, A. C.; Spencer,
T. 2001. Development of Europe-
an corn borer larvae on the Event
176 Bt corn: Influence on survival
and fitness. Entomologia Experi-
mentalis et Applicata, 100: 15-20.
Tabashnik, B. 1994. Evolution to Resis-
tance to Bacillus thuringiensis.
Annual Review of Entomology, 39:
47-79.
Tabashnik, B. E.; Liu. Y.; Malvar, T.;
Heckel, D. G.; Masson, L.; Balles-
ter, V.; Granero, F., Mensua, J. L.;
Ferr, J. 1997. Global Variation in
the Genetic and Biochemical Basis
of Diamondback Moth resistance
to Bacillus thuringiensis. Procee-
dings of National Academy of Sci-
ence of USA, 94: 12780-12785.
Tabashnik, B.; Cushing, N. L.; Finson,
N.; Johnson, M. W. 1990. Field
Development of Resistance to
Bacillus thuringiensis in diamond
back moth (Lepidoptera: Plutelli-
dae). Journal of Economic Ento-
mology, 83: 1671-1676.
Tabashnik, B. E.; Dennehy, T. J.; Sims,
M. A.; Larkin, K.; Head, G. P.; Moar,
W. J.; Carrire, Y. 2002. Control of
resistant pink bollworm by trans-
genic cotton with Bacillus thurin-
giensis toxin Cry2Ab. Applied En-
vironmental Microbiology, 68:
3790-3794.
Tabashnik, B. E.; Carrire, Y.; Den-
nehy, T. J.; Morin, Shai; Sisterson,
M. S.; Roush, R. T.; Shelton, A. M.;
Zhao, J. 2003. Insect Resistance to
Transgenic Bt Crops: Lessons from
the Laboratory and Field. Journal of
Economic Entomology, 96(4):
1031-1038.
Thirtle, C.; Beyers, L.; Ismael, T.; Pies-
se, J. 2003. Can GM-technologies
help the poor? The impact of Bt
cotton in Makhathini Flats, KwaZu-
lu-Natal. World Development, 31:
717-732.
Toenniessen, G. H., J. C. OTolle, J.
Devries, J. 2003. Advances in plant
biotechnology and its adoption in
developing countries. Current
Opinion in Plant Biology 6: 191-
198.
U.S. Environmental Protection Agency
and US Department of Agriculture.
1999. Report of EPA/USDA
Workshop on Bt Crop Resistance
Management in Cotton. Memphis,
Tennessee. August 26, 1999. Es-
ther Day, ed. 80p. American Far-
mland Trust, Center of Agriculture
in the Environment (posted at:
http://www.epa.gov/pesticides/
biopesticides).
Vadilamudi, R.K.; Ji, T.H.; Bulla, L.A.
1993. A specific binding protein
from Manduca sexta for an insec-
ticidal toxin of Bacillus thuringi-
ensis subsp. Berl. Journal of Biolo-
gical Chemistry, 268:12334-12340.
Vadilamudi, R.K.; Weber, E.; Ji, T.H.;
Bulla, L.A. 1995. Cloning and ex-
pression of a receptor for an insec-
ticidal toxin of Bacillus thuringi-
ensis. Journal of Biological Che-
mistry, 270: 5090-5494.
Wu, K.; Mu, W.; Liang, G.; Guo, Y.
2005. Regional reversion of
insecticide resistance in Helicover-
pa armigera (Lepidoptera:
Noctuidae) is associated with
the use of Bt cotton in northern
China. Pest Management Science,
61:491498.
78 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Bacillus Thuringiensis
Deise Maria Fontana Capalbo
Dra em Engenharia de Alimentos, pesquisadora,
Embrapa Meio Ambiente
deise@cnpma.embrapa.br
Gislayne Trindade Vilas-Bas
Dra em Microbiologia, Universidade Estadual de
Londrina
gvboas@uel.br
Olvia M. Nagy Arantes
Dra em Agronomia, Professor Adjunto
Universidade Estadual de londrina
oarantes@uel.br
Marise T. Suzuki
Mestre em Biotecnologia, Doutoranda de
Biotecnologia pela USP/SP
Bolsista Capes, Embrapa Meio Ambiente
marisets@cnpma.embrapa.br
migos naturais e a recuperao da
biodiversidade nos ecossistemas tra-
tados.
Nos anos que se seguiram sua
descoberta, no incio do sculo XX,
Bacillus thuringiensis (Bt) recebeu
pouca ateno dos microbiologistas
e entomologistas. Entretanto, aps a
descober t a de sua at i vi dade
entomopatognica, ele passou a ser
estudado por enorme quantidade de
cientistas das mais diversas discipli-
nas, que exploraram seus segredos
em nvel molecular, fisiolgico e eco-
lgico. Hoje, Bt o inseticida
microbiano mais bem-sucedido, apli-
cado na proteo de gros, florestas
e no combate a vetores de doenas
aos humanos.
A atividade entomopatognica
desta bactria decorrente da pro-
duo de cristais proticos em con-
comitncia com o processo de espo-
rulao(figura1). Esses cristais so
formados por polipeptdios conheci-
dos como protenas Cry que apre-
sentam propriedades entomopato-
gnicas frente a insetos das ordens
Lepidoptera, Diptera, Coleoptera,
Hymenoptera, Homoptera, Dictyop-
tera, Orthoptera, Mallophaga, alm
de nematides (Strongylida, Tylen-
chida), protozorios (Diplomonadi-
da) e caros (Acari)
O avano das pesquisas com
esta bactria incentivou a busca de
novos isolados com atividade txica
at ento desconhecida queles in-
setos, bem como a obteno, por
engenharia gentica, de linhagens
com atividade bioinseticida frente a
controle de insetos-pra-
ga de lavouras nocivos
ao homem tem sido fei-
to com inseticidas qu-
micos desde o incio da
dcada de 40, no sculo passado.
Alm do problema de poluio
ambiental gerados, eles se mostra-
ram txicos e sem especificidade,
atingindo tambm os insetos benfi-
cos e induzindo casos de resistncia
nos insetos praga. Outros compostos
qumicos foram posteriormente ela-
borados, mas o seu emprego intensi-
vo, tanto na agricultura quanto na
sade pblica, resultou em novos
casos de resistncia e mesmo em
resistncia cruzada. Alm do proble-
ma da resistncia, com conseqente
reduo da efetividade do controle,
o uso de inseticidas qumicos tam-
bm l evou r eduo da
biodiversidade nas reas tratadas,
contaminao de alimentos, do solo
e da gua.
A agricultura sustentvel do s-
culo XXI exige, cada vez mais, inter-
venes alternativas para o controle
e manejo de insetos que sejam
ambientalmente seguras e que redu-
zam o contato humano com os
pesticidas qumicos sintticos. Como
opo podem ser utilizados micror-
ganismos entomopatognicos, inclu-
indo bactrias, vrus, fungos e
protozorios, com vantagens nume-
rosas, como por exemplo: a seguran-
a para seres humanos e outros orga-
nismos-no-alvo, a reduo de res-
duos de pesticidas nos alimentos, o
aumento da atividade de outros ini-
Meio ambiente
Formulaes e Plantas Transgnicas
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 79
um espectro maior de insetos alvo.
Esses avanos coincidiram com uma
mudana decisiva no modo como a
sociedade, e em especial os rgos
regulamentadores, perceberam as
conseqncias ambientais do uso
intensivo de pesticidas qumicos, em
especial o desenvolvimento de re-
sistncia dos insetos aos princpios
ativos. Esses fatos estimularam in-
meras empresas voltadas produ-
o de agrotxicos e biotecnologia,
a iniciarem ou fortificarem suas li-
nhas de pesquisa e desenvolvimen-
to com Bt (Quadro 1), bem como a
lanarem no mercado inmeros pro-
dutos registrados base desta bact-
ria.
O desenvolvimento de novos
produtos para o controle biolgico
foi possvel, especialmente, devido
atividade entomopatognica desta
bactria estar relacionada forma-
o da protena Cry, codificada por
um nico gene cry, o que facilita a
manipulao de diferentes genes cry
em processos biotecnolgicos. As-
sim, no final do sculo XX houve
uma diversificao das estratgias
de sua utilizao no controle biolgi-
co: maior produo de toxinas; au-
mento do espectro de ao por no-
vas variedades de B. thuringiensis;
introduo de genes cry em diferen-
tes mi crorgani smos e pl antas
transgnicas.
Foi assim contornado o limitado
espectro de controle e obtidas for-
mas mais eficazes e direcionadas de
aplicao, dando espao para novos
avanos na rea de gentica de Bt,
explorando-se ainda mais as bases
de sua t oxi ci dade sel et i va e
especificidade.
Genes cry e protenas Cry
A patogenicidade e a especifi-
cidade de uma linhagem de Bt so
determinadas pelos tipos de genes
cry funcionais que a mesma apre-
sent a. Uma l i nhagem de B.
thuringiensis pode conter uma ou
vrias cpias de um mesmo gene cry
ou de diferentes genes cujos produ-
tos formaro o mesmo cristal. A loca-
1 o r d a u Q 0 8 9 1 s o n a s o n o d a v i r p r o t e s o n s i s n e i g n i r u h t s u l l i c a B m o c a d i v l o v n e s e d a s i u q s e P .
o d o r e P a s e r p m E
s a p e C
o n
s a d a c i f i d o m
s a p e C
s a d a r o h l e m
s a t n a l P
s e t n a n i b m o c e r
o a c i l p A
r o p a d a i d e m
s o m s i n a g r o r c i m
s e t n A
e d
0 8 9 1
s e i r o t a r o b a L t o b b A +
m e h c o i B +
n o c e o Z +
r a h p u D +
s p A
0 8 9 1
t o b b A + +
r a h p u D / y a v l o S + +
z o d n a S / n o c e o Z + + +
o v o N + +
y g i e G - a b i C + +
I C I + + +
o m o t i m u S + +
o c n a l E w o D + +
n e g o c E +
+
n e g o c y M + + +
o t n a s n o M + +
s a a H d n a m h o R +
s m e t s y S c i t e n e G t n a l P +
s u t e c a r g A +
e n e g l a C +
. c n I . n h c e T e n e g n u S +
s c i t e n e g i r g A +
. n r e t n I s c i t e n e G p o r C +
e t n o F ) 3 9 9 1 ( n e z y u h n e k n a r F e d o d a t p a d A :
Figura 1. Microscopia eletrnica de varredura de esporos e cristais (setas) de Bacillus
thuringiensis. a) cristais com formato bipiramidal e b) cristais com formato esfrico.
Barras: 1 m.
Fotografias de Marise T. Suzuki
(CNPMA/EMBRAPA).
a b
80 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
lizao preferencial em plasmdios
conjugativos, bem como a freqente
associao a elementos genticos
mveis, determina a grande diversi-
dade destes genes e a conseqente
ocorrncia de linhagens contendo
diferentes combinaes deles, o que
resulta em perfis de toxicidade dis-
tintos.
Todos os avanos no conheci-
mento dos genes cry permitiram ain-
da a construo de sondas especfi-
cas para a seleo de linhagens por
meio de anlise de hibridao, em
razo da presena de seqncias de
nucleotdios conhecidas. Em 1998,
Crickmore e colaboradores propuse-
ram uma classificao das protenas
Cry, baseada somente na seqncia
de aminocidos, no levando em
considerao o perfil de toxicidade.
Atualmente so descritos mais de
250 genes diferentes, enumerados
por algarismos arbicos contendo 44
classes com subdivises (cry1 a
cry44). As atualizaes so freqen-
tes e podem ser acompanhadas pelo
site:http://epunix.biols.susx.ac.uk/
Home/Neil_Crickmore/Bt/index .
Modo de ao e estrutura das
protenas Cry
Na forma como so sintetizadas,
as protenas Cry apresentam-se como
protoxinas sem ao entomopato-
gnica, necessitando ser ativadas para
o desencadeamento de seus efeitos
txicos. Sua ao ocorre por via oral,
seguindo-se uma srie de passos. Ao
serem ingeridas por um inseto sus-
cetvel, as protoxinas so solubiliza-
das no ambiente alcalino do intesti-
no dele (pH ~ 10) e, em seguida,
processadas por proteases especfi-
cas. Os produtos ativos das protenas
Cry resultantes de todos esses pro-
cessos ligam-se de maneira irrevers-
vel a receptores de membrana das
clulas epiteliais do intestino do in-
seto, levando formao de poros
inespecficos ou canais inicos, que
alteram a permeabilidade das clu-
las. Essa alterao leva a uma lise
celular e ruptura da integridade
intestinal, com conseqente morte
da larva.
As protenas Cry apresentam
massas moleculares que variam de
40 a 140 kDa, possuindo duas regi-
es distintas: uma poro amino-
terminal, normalmente varivel e as-
sociada toxicidade, e uma poro
carboxi-terminal, mais conservada
entre as protenas, associada geral-
mente formao do cristal. Nos
insetos pertencentes ordem
Lepidoptera, a intoxicao manifes-
ta-se por paralisao imediata do
tubo digestivo e das peas bucais,
levando lise celular e interrupo
da alimentao. Esses sintomas so
seguidos por ruptura na integridade
do intestino, inanio e posterior
septicemia, levando o inseto
morte.
Ecologia de B. thuringiensis
Em todo o mundo, muitos pro-
gramas de i sol ament o de B.
thuringiensis tm encontrado este
microrganismo distribudo em ampla
gama de ambientes. Linhagens tm
sido isoladas principalmente a partir
de amostras de solo, de insetos vivos
ou mortos e de gros estocados ,
bem como de fontes alternativas,
como o filoplano de espcies vege-
tais e amostras de guas de rios e
lagos. No entanto, a sua distribuio
e suas relaes ecolgicas permane-
cem ainda em discusso. Sabe-se
que seus esporos podem persistir no
solo por diversos anos, contudo, se-
gundo est udos r ecent es, B.
thuringiensis no tem a capacidade
de se multiplicar nem no solo nem
na gua. Diversos dados evidenciam
que o inseto o nico ambiente
onde ocorre multiplicao e efetiva
troca de material gentico entre li-
nhagens de B. thuringiensis (Suzuki
et al. 2004; Vilas-Bas et al., 1998).
Isso explica o fato de nunca ter sido
descrita epizootia no caso de B.
thuringiensis e corrobora a seguran-
a dos produtos base desta bact-
ria.
Produtos formulados base de
B. thuringiensis
Formulaes comerciais basea-
das em B. thuringiensis so com-
postas por uma mistura de clulas,
esporos e cristais, que so formados
por protenas Cry. Estas protenas
so consideradas ambientalmente
seguras por apresentarem um modo
de ao extremamente especfico e
serem rapidamente biodegradadas
em ambientes naturais como o solo.
Os mecanismos envolvidos no modo
de ao de Bt garantem de certa
forma sua segurana especialmente
ao homem e insetos benficos. Em
adio, extensivos estudos em labo-
ratrio so requeridos para a libera-
o de novos produtos pela Agncia
Americana de Proteo Ambiental
(EPA-EUA) e outras autoridades
regulatrias de vrios pases, incluin-
do a Agncia Nacional de Vigilncia
Sanitria (ANVISA), o Ministrio da
Agricultura, Pecuria e Abastecimen-
to (MAPA) e o Instituto Brasileiro do
Meio Ambiente e dos Recursos Natu-
rais Renovveis (IBAMA) no Brasil. O
Quadro 2 mostra a disponibilidade
de produtos base de Bt, no Brasil,
at dezembro de 2003, registrados
nos rgos federais competentes.
A escolha de um produto para a
implantao de programas de con-
trole de insetos deve levar em conta,
entre outras caractersticas, a eficcia
e a persistncia da atividade
bioinseticida. No entanto, alguns pro-
dutos tm demonstrado baixa per-
sistncia e/ou atividade no campo, o
que leva a aplicaes recorrentes,
dependendo do produto e do inse-
to-alvo. Outros produtos no atin-
gem determinadas regies da plan-
ta, como razes, colmo e boto floral,
que so pontos estratgicos para o
controle de vrias pragas suscetveis
a B. thuringiensis. Assim, houve a
necessidade do desenvolvimento de
produtos biotecnolgicos base de
protenas Cry, visando preencher as
lacunas apresentadas pelos progra-
mas de controle de insetos baseados
em Bt.
Diferentes produtos biotecno-
lgicos foram lanados no mercado,
como o bioinseticida Raven

da
Ecogen, produzido a partir de uma
linhagem de B. thuringiensis onde
foram inseridos genes cry, respons-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 81
veis pela formao de protenas Cry
at i vas cont r a col ept er os e
lepidpteros. Outra estratgia en-
volvendo os genes cry a possibili-
dade de expresso em organismos
recombinantes heterlogos. Essa
tecnologia permitiu que a capacida-
de de produo da toxina Cry fosse
transferida para outros organismos,
agregando vantagens aos produtos,
como o controle de pragas inacess-
veis aos produtos convencionais e
maior estabilidade das protenas Cry
no ambiente. Com essa finalidade,
foram utilizados organismos coloni-
zador es de pl ant as, como
Pseudomonas cepacia, Pseudomo-
nas fluorescens, Azospiril-lum,
Bacillus pumilus e Rhizobium
leguminosarum, alm de fungos
ectomicorrzicos, como Laccaria
bicolor. Da mesma forma, a introdu-
o de genes cry em bactrias
endofticas que colonizam o sistema
vascular das plantas permitiu o con-
trole dos insetos que vivem no inte-
rior do caule e das razes (Arantes et
al., 2002).
Alm das linhagens de B.
thuringiensis melhoradas genetica-
mente e da construo de microrga-
nismos recombinantes heterlogos,
outro produto biotecnolgico surgiu
no final do sculo XX, gerado pela
insero de genes cry em plantas,
formando as chamadas plantas Bt, as
2 o r d a u Q 3 0 0 2 t a l i s a r B o n s o d a r t s i g e r s i s n e i g n i r u h t s u l l i c a B e d e s a b s a d i c i t s e p o i B .
o r t s i g e R e d o g r
a s e r p m E
a r o t u d o r p
e m o N
l a i c r e m o c
e t n e i d e r g n I
o v i t a
o m s i n a g r O
o v l a
1
e s s a l C
a c i g l o c i x o t
2
e d o n A
o r t s i g e r
A P A M
3
o m o t i m u S
e t n e m r o i r e t n a (
) . b a L t t o b b A
l e p i D
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k 1 - D H ,
s o r e t p d i p e L
V I
5 , 4
1 9 9 1
A M A B I
4
o m o t i m u S F l e p i D
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k 1 - D H ,
a i b o n r a a n i e t n i r y h T
V I
5 . 4
1 9 9 1
A P A M o m o t i m u S o c i n c T l e p i D
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
, i k a t s r u k 1 - D H
s o r e t p d i p e L
V I
5 , 4
1 8 9 1
A P A M o m o t i m u S
M P l e p i D
6
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k 1 - D H ,
s o r e t p d i p e L
V I
5 , 4
9 8 9 1
A P A M l o r t n o c - i r g A M P L o r t n o c - c a B
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k b 3 , a 3 ,
s o r e t p d i p e L
V I
5 . 4
7 8 9 1
A P A M
s i t r a v o N
a g i t n a ( . A . S
) y g i e G - a b i C
e e r g A
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
a w a z i a 1 9 C G , i
s o r e t p d i p e L
V I 5 I I I
4
5 9 9 1
A M A B I . A . S s i t r a v o N E e r g A
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i a w a z i a 1 9 C G ,
a i b o n r a . T
V I 5 I I I
4
5 9 9 1
A P A M
a g i t n a ( a i n e l i M
) c e t a r e G
M P r u t c a B
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k b 3 , a 3 - H ,
s i l a t a m m e g . A
V I 5 I I I
4
6 9 9 1
A P A M
s a r b a r a h I
. A . S s i t r a v o N
) z o d n a S a g i t n a (
e d i c i r u h T
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k 1 - D H ,
s o r e t p d i p e L
V I
5 , 4
1 9 9 1
A M A B I
/ s a r b a r a h I
. A . S s i t r a v o N
M P e d i c i r u h T
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
i k a t s r u k
s o r e t p d i p e L
V I
5 , 4
5 9 9 1
A S I V N A . A . S s i t r a v o N r a n k e T
s i s n e i g n i r u h t . B . r a v
s i s n e l e a r s i
s e l e h p o n A , s e d e A , x e l u C ,
s o e d l u m i S
V I 9 8 9 1
A S I V N A o m o t i m u S o c i r e h p S s u c i r e a h p s . B t p y g e a s e d e A s o e d c i l u C i V I 5 9 9 1
A P A M
r e y a B o v e r g A
e c n e i c S p o r C
o r P h c e t o c E s i s n e i g n i r u h t . B
V I 5 I I I
4
8 9 9 1
A P A M o m o t i m u S i r a t n e X s i s n e i g n i r u h t . B
V I 5 I I
4
8 9 9 1
A S I V N A o m o t i m u S G - x e l o t c e V s u c i r e a h p s . B o i r t i n a s s i m o D
o i r t i n a s s i m o D
7
9 9 9 1
1
Classe toxicolgica: III = medianamente txico, IV = pouco txico
2
Ano em que o registro foi autorizado
3
Ministrio da Agricultura, da Pecuria e do Abastecimento
4
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovveis
Ministrio do Meio Ambiente
5
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria/ANVISA Ministrio da Sade
6
PM = p molhvel (tipo de formulao)
7
Uso em campanhas de sade pbica e por instituies especializadas
82 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
quais produzem suas prprias prote-
nas Cry, ficando protegidas do ata-
que de insetos susceptveis. A pro-
duo destas plantas ocorre em labo-
ratrio com o emprego de mtodos
de engenharia gentica (Capalbo et
al. 2004).
Mtodos moleculares para
se obter plantas Bt
O desenvolvimento das plantas
transgnicas s foi possvel devido a
universalidade da molcula de DNA,
presente nas clulas de todos os
organismos vivos. Essa molcula es-
toca a informao gentica e orques-
tra os processos metablicos da vida.
Mesmo espcies completamente di-
ferentes tm mecanismos equiva-
lentes para converter a informao
gentica contida no DNA em prote-
nas, o que significa que um segmen-
to de DNA proveniente de uma bac-
tria pode ser bem interpretado e
traduzido em uma protena funcio-
nal quando inserido numa planta.
O fragmento de DNA a ser inse-
rido no genoma da clula vegetal
nor mal ment e acr escent a um
fentipo ou causa alteraes no
fentipo original, como a produo
de nova(s) protena(s). O primeiro
passo para que isso seja feito, a
preparao do DNA exgeno, que
deve conter, no mnimo, um promo-
tor (para ativar o gene), o gene de
interesse (um gene cry no caso das
plantas Bt), uma seqncia de trmi-
no (uma seqncia de DNA que
sinaliza o final da transcrio do gene)
e um gene codificante para uma
marca que permita a seleo das
clulas que foram transformadas.
Para a obteno de plantas
transgnicas, o DNA exgeno deve
ser inserido no genoma da clula
vegetal, permanecendo estvel. Se
a insero do DNA direcionada a
um loco pr-determinado, o proces-
so chamado de recombinao
homloga. Ao contrrio, se a inser-
o do DNA ocorrer ao acaso, o
pr ocesso denomi nado
recombinao heterloga. Uma vez
estabelecido o DNA no genoma da
clula (cromossomo ou cloroplasto),
seqncias exgenas so quimica-
mente indistinguveis daquelas da
clula vegetal, ou seja, a origem da
seqncia de DNA no interfere nos
processos de replicao e segrega-
o. Para a obteno das plantas Bt,
segundo Prescott et al. (1999),
quatro tcnicas de transformao
tm sido correntementeutilizadas: sis-
tema Agrobacterium, eletroporao,
biobalstica e microinjeo.
O rendimento de qualquer um
desses mtodos de transformao
extremamente baixo, e para obter
alto nvel de transformantes, a sele-
o, em geral, feita por meio de
cultura de tecidos indiferenciados
(calos) sobre um meio seletivo nor-
malmente contendo antibitico ou
herbicida. Posteriormente, as clulas
so estimuladas a iniciar um proces-
so de diferenciao, para em seguida
formar uma planta regenerada e
frtil.
Estratgias de seleo de
plantas transformadas
Uma das etapas essenciais ao
sucesso na obteno de uma planta
transgnica a seleo de clones
estveis para a formao de plantas
adul tas nas quai s podem ser
quantificados os nveis de expresso
da molcula de interesse. Entre as
estratgias correntemente utilizadas
para recuperar transformantes, es-
to: o emprego de genes de resis-
tncia a um agente qumico seletivo,
como um antibitico ou um herbicida;
o uso de genes que conferem um
fentipo que permite seleo visual
ou fsica (como o desenvolvimento
da colorao); ou a identificao de
plantas transformadas por meio de
amplificao do gene inserido por
PCR (Reao de Polimerizao em
Cadeia) ou por Southern blot.
A utilizao de agentes seleti-
vos extremamente vantajosa em
relao a outros mtodos, por isso
o mtodo mais empregado na sele-
o de OGMs. Em meio seletivo,
esses agentes impedem o desenvol-
vimento de clulas no-transforma-
das, ou seja, que no so portadoras
dos transgenes, no havendo neces-
sidade de posterior separao entre
clulas transformadas e no-transfor-
madas. Entre os genes de resistncia
a antibiticos mais utilizados, desta-
cam-se o gene bla
TEM
, que codifica
resistncia aos aminoglicosdios,
como a ampicilina e a penicilina, o
gene aadA, que confere resistncia
estreptomicina e espectinomicina,
e um gene aph, mais especificamen-
te o aph(3), tambm designado
nptII, que codifica para a resistncia
kanamicina e neomicina.
A preocupao com os poss-
veis efeitos ambientais indesejveis
dos genes de resistncia aos antibi-
ticos foi um dos principais fatores
que incentivaram o desenvolvimen-
to de novas tecnologias de clonagem.
Entre elas, a tcnica em que as clu-
las vegetais so transformadas com
construes especficas em que o
gene de resistncia ao antibitico se
encontra flanqueado por seqncias
de DNA denominadas lox. Posterior-
mente, as plantas obtidas so cruza-
das com outras plantas transgnicas
contendo o gene cre, que codifica
para a recombinase Cre. Dentre as
plantas resultantes, obtm-se aque-
las em que o gene de resistncia ao
antibitico foi retirado mediante a
recombinao das seqncias lox,
mantendo-se, no entanto, o gene de
interesse. Um exemplo desse pro-
cesso encontrado no trabalho de
Ow (2002).
Entre os mtodos que permi-
t em a sel eo vi sual dos
transformantes, destaca-se a utiliza-
o de genes que codificam para a
formao de pigmentos, sendo
visualizada colorao especfica nos
transformantes. A enzima beta-
glucuronidase a base do sistema
GUS, cuja expresso verificada em
meio de cultura em condies prop-
cias ao desenvolvimento da colora-
o azul pelas clulas transformadas.
Essas clulas so ento separadas
daquel as sem a col orao e
transferidas para um novo meio de
cultura, para a regenerao de uma
planta adulta. Um exemplo do em-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 83
prego desse sistema pode ser en-
contrado no trabalho de Arencibia et
al. (1997).
Quando o nmero de clulas
transformadas baixo, pode-se tam-
bm verificar a ocorrncia de trans-
formao por meio de reaes de
PCR, utilizando-se um iniciador cuja
seqncia seja complementar ao
gene trabalhado (no caso de planta
Bt, o prprio gene cry). Tambm,
pode-se utilizar o mtodo Southern
blot, detectando-se a presena de
seqncias de DNA por meio da
hibridao com um fragmento de
DNA, marcado radioativamente ou
por meio de mtodos colorimtricos.
Aps a confirmao da estabili-
dade do gene, mediante a verifica-
o do fentipo, deve-se ento veri-
ficar e, ou, quantificar sua expresso.
Entre os mtodos utilizados, desta-
ca-se Northern blot (deteco do
RNAm), Western blot (deteco da
protena codificada pelo gene) e
ensaios imunolgicos. Posteriormen-
te, feita a constatao e a
quantificao da atividade inseticida
da planta transgnica, por meio de
bioensaios com os insetos-alvo.
Alteraes moleculares dos
genes cry
Antes de serem introduzidos
numa planta, os genes cry devem
ser alterados em sua seqncia de
DNA por mutagnese stio-dirigida.
Isso necessrio para que as dife-
renas nos mecanismos de expres-
so entre organismos procariontes e
eucariontes no bloqueie ou diminu-
am a expresso do gene. Alguns
exemplos de alteraes, realizadas
na obteno de algumas plantas Bt,
so apresentados a seguir.
Os primeiros experimentos,
para a obteno de plantas expres-
sando genes cry, foram realizados
usando o gene cry1A inteiro. No
entanto, somente baixos nveis de
protenas Cry foram obtidos e a plan-
ta no apresentou qualquer ativida-
de inseticida. Os primeiros sucessos
foram obtidos pela expresso de
fragmentos de genes cry que codifi-
cam para a parte txica de protenas
Cry. Dessa forma, a expresso de
fragmentos truncados dos genes
cry1Aa e cry1Ab em plantas de
t abaco resul t aram em n vei s
significantes de produo de prote-
nas Cry e eficiente controle de la-
gartas de Manduca sexta.
No entanto, nveis de expresso
de genes cry nativos truncados em
plantas levam produo de cerca
de 0,001% do total de protenas
solveis, sendo esses nveis meno-
res que aqueles obtidos com outros
transgenes. Isso se deve ao fato do
genoma da planta apresentar alto
contedo de Guanina (G) e Citosina
(C), enquanto os genes cry tm alto
contedo de Adenina (A) e Timina
(T), o que pode levar a planta a
processamentos incorretos e for-
mao de RNAm no-funcionais. Alm
disso, os cdons usualmente presen-
tes em genes cry so raramente uti-
lizados em plantas, o que pode pro-
vocar pausas no ribossomo e talvez
acelerar a degradao do RNAm do
gene cry contido nas plantas.
Mui t as pl ant as Bt f or am
construdas com os genes cry1Ab e
cry1Ac truncados, mas outros genes
tambm tm sido utilizados, como o
cry9C em milho, resultando em pro-
teo contra Ostrinia nubilalis, e a
insero do gene cry3A em batatas,
que levou expresso da produo
de altos nveis da protena Cry3A e
ao cont r ol e de Lept i not arsa
decemlineata . Alm desses genes,
foi construda uma verso do gene
cry1C para a obteno de altos n-
veis de expresso em plantas, pro-
porcionando a proteo de tabaco e
alfafa contra as lagartas Spodoptera
littoralis e S. exigua e de brcolis
contra Plutella xylostella.
Com o passar dos anos e o de-
senvolvimento de novos mtodos
moleculares, outras geraes de plan-
tas Bt surgem, cada vez mais seguras
e voltadas no s ao controle do(s)
inseto(s)-alvo, mas tambm con-
servao das condies ecolgicas
estabelecidas nas reas de cultivo.
Com esse intuito, pesquisadores vm
desenvolvendo plantas em que as
protenas Cry podem ser expressas
somente onde e quando necessrias
atravs do uso de promotores tecido
especfico, tempo especfico ou
genes promotores induzveis. Esses
e outros cuidados so tomados no
sentido de minimizar o desenvolvi-
mento de resistncia dos insetos s
protenas Cry e o fluxo gnico para
variedades selvagens. Alm disso,
deve-se lembrar que vrias outras
estratgias tambm tm sido pro-
postas para serem utilizadas no cam-
po e que ajudam a retardar a ocor-
rncia destes eventos.
Anlise de risco e adoo
das plantas Bt
Os debates sobre a introduo
comercial de plantas geneticamente
modificadas em algumas regies do
mundo levaram a questionamentos
sobre seu impacto potencial no am-
biente. Dvidas surgiram quanto
possibilidade de afetar organismos
no alvo, cruzar e produzir plantas
daninhas, ter efeito adverso sobre a
biodiversidade e reduzir efetivamen-
te o uso de insumos qumicos inde-
sejveis. Embora se saiba do impacto
inevitvel da agricultura sobre o
ambiente, foi questionado o quanto
estas plantas afetariam o balano
entre a produo agrcola e a vida
silvestre.
A controvrsia atingiu a opinio
pblica, demandou, e continua de-
mandando, estudos extensos. Tais
preocupaes da sociedade trans-
formaram as plantas Bt nas mais bem
estudadas quanto aos riscos/benef-
cios envolvidos. A comunidade cien-
tfica constatou evidncias de que os
benefcios so elevados para os pro-
dutores, porm reconhece que o
processo regulatrio precisa ser mais
bem ajustado. H um bem docu-
mentado histrico de segurana da
aplicao de Bt, como produto for-
mulado, no ambiente, devendo ago-
ra ser verificada se esta segurana
mantida na diversidade de veculos
(como outras bactrias e plantas)
desta bactria bioinseticida.
As discusses que circundam o
84 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
processo regulatrio das plantas
transgnicas, e das plantas Bt espe-
cificamente, devem levar em conta
a caracterstica peculiar destas plan-
tas de disseminar um princpio inse-
ticida, tendo por veculo a prpria
planta. A maioria dos pesticidas sin-
tticos e tambm os naturais so
aplicados por pulverizao em tem-
po e quantidade determinados; a
cobertura nunca atinge 100% e, em
conseqncia, o princpio ativo no
atinge todas as partes das plantas. O
agricultor decide quando, onde e
como ser aplicado o pesticida tradi-
cional, enquanto o princpio pestici-
da das plantas transgnicas (como
nas plantas Bt) ser liberado, na
maioria dos casos, durante todo o
ciclo de vida da planta e, com fre-
qncia, em todas as partes da plan-
ta.
Como forma de garantia de se-
gurana para o ambiente e os consu-
midores, compete aos rgos pbli-
cos de cada pas controlar o uso de
produtos utilizados no ambiente (ali-
mentos, agricultura, pecuria, sade
pblica, entre outros), requerendo
sua avaliao adequada previamen-
te ao seu registro para uso comercial.
Compete ainda aos mesmos rgos
pblicos estabelecer os critrios para
a avaliao destes produtos, dentro
de normas especficas que conside-
rem as diferenas fundamentais en-
tre produtos qumicos e biolgicos,
transgnicos e no transgnicos, no
que se refere a composio, forma
de ao e comportamento no ambi-
ente.
Os riscos ambientais analisados
para as plantas transgnicas com ca-
racterstica pesticida (caso das plan-
tas Bt) enquadram-se em quatro ca-
tegorias amplas: - fluxo gnico do
transgene para outras espcies ou
variedades; - evoluo de resistncia
nas pragas-alvo; - efeitos adversos
nas espcies no alvo expostas
protena Bt; - efeitos da protena Bt
na biota do solo; das quais discutire-
mos brevemente as duas ltimas.
Efeito nas espcies no alvo
Quando esto no campo, as cul-
turas abrigam no somente os inse-
tos-praga, mas tambm outros artr-
podes (parasitides e predadores),
os quais desempenham importante
papel na regulao das populaes
de herbvoros. Em termos ecolgi-
cos, essa hierarquia chamada de
interao trfica. As interaes trfi-
cas e os mecanismos para a interfe-
rncia das plantas Bt sobre essas
interaes so complexos e depen-
dem de muitos fatores, como: nvel
de resistncia da planta, especifici-
dade do novo carter introduzido/
expresso, em quais tecidos este ca-
rter ser expresso e por quanto
tempo, presena de plantas suscet-
veis prximas e manejo da cultura,
ou seja, aplicao de inseticidas, con-
trole de plantas invasoras, entre ou-
tros. A preocupao que levou a
estes estudos foi a de que os insetos-
alvo pudessem adquirir a protena
Cry produzida na planta Bt quando
se alimentassem dela e, assim, expor
a protena aos inimigos naturais, seja
por meio de seus fluidos corpreos,
seja mediante contaminao de suas
larvas e disseminao em suas fezes
H ainda a possibilidade de que, com
a reduo das aplicaes de insetici-
das em culturas Bt, as pragas secun-
drias tornem-se importantes, atin-
gindo o papel de praga primria em
relao quela cultura.
Deve-se ressaltar que, em uma
anlise de risco, apesar da necessida-
de de se saber quantos e quais orga-
nismos podem consumir os tecidos
das plantas, esse consumo e a dis-
perso deles na cadeia trfica s se
constitui em risco se, em nvel nor-
mal de consumo em campo, resultar
em efeitos adversos.
Em 2001, a Agncia de Proteo
Ambiental americana (EPA) concluiu,
em reavaliao do risco apresentado
por plantas Bt, que as protenas Cry
de Bt produzidas nas plantas trans-
gnicas no apresentam efeitos ad-
versos s populaes de organismos
no alvo expostas s quantidades
desta protena que so encontradas
nos t eci dos dessas pl ant as
(www.epa.gov/pesticides/biopesti-
cides/pips/bt_brad.htm).
Efeitos da protena Bt
na biota do solo
Para que o ecossistema solo per-
manea saudvel, necessrio man-
ter sua biodiversidade e a estabilida-
de desta diversidade. Assim, um dano
potencial associado a plantas Bt a
possibilidade de alteraes nos gru-
pos funcionais presentes no solo,
favorecendo determinado grupo em
detrimento de outro. Protenas Bt
podem apresentar novo efeito txi-
co para a biota, ou ser uma nova
fonte de substrato. Mudanas na di-
versidade dos microrganismos do solo
podem alterar irreversivelmente a a
dinmica funcional do sistema solo-
planta original.
O assunto to extenso quanto
a diversidade de micro e macrorga-
nismos presentes no solo. Para efei-
to de ilustrao, podem-se apresen-
tar os seguintes efeitos, potenciais,
de plantas Bt na biota do solo:
Organismos fragmentadores e,
ou, decompositores Plantas Bt
exsudam, em maior ou menor quan-
tidade, toxinas atravs das razes,
que poderiam afetar organismos res-
ponsveis pela ciclagem de matria
orgnica, reduzindo ou impedindo a
degradao de compostos como ce-
lulose, hemicelulose, quitina, lignina,
com conseqncias para a fertilida-
de de plantas;
Organismos envolvidos na fixa-
o de N
2
atmosfrico se toxinas Bt
afetarem bactrias envolvidas na fi-
xao biolgica do nitrognio, como
as bactrias diazotrficas (Azospiril-
lum, Herbaspirillum, Azotobacter),
ou as simbiticas (Rhizobium e
Bradhyrizobium), haver dano s
plantas que se beneficiam desta fi-
xao biolgica de N
2
;
Organismos produtores de me-
tablitos secundrios Fungos, bact-
rias e actinomicetos, produtores de
metablitos secundrios (enzimas, an-
tibiticos), podem ser afetados pela
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 85
presena de plantas Bt, uma vez que
as toxinas Bt podem inibir o desen-
volvimento desses organismos no
solo, e com isso interromper o ciclo
de atividades benficas desses orga-
nismos, como controle biolgico na-
tural.
H muitos artigos cientficos que
evidenciam a inocuidade e a ausn-
cia de efeitos na biota do solo, pois
quando presente no solo, parte das
molculas de protenas Cry degra-
dada e parte delas adsorvida s
partculas do solo (no apresentando
efeito algum sobre minhocas, nema-
tides, protozorios, bactrias e fun-
gos presentes nele) sendo sugerida
a leitura do trabalho de Rumjanek e
Fonseca (2003) sobre o tema.
Comentrios finais
Todos os sistemas de produo
agrcola causam, inevitavelmente, al-
gum impacto ambiental. O uso de
plantas e microrganismos, transgni-
cos ou convencionais constitui mais
um fator de impacto, entre os muitos
j estabelecidos. A genmica e as
ferramentas biotecnolgicas podem
apresentar benefcios ambientais,
devendo ser avaliadas no contexto
de cada ecossistema e prtica de
manejo.
Pode-se, com segurana, con-
cluir que alguns fatores bsicos de-
vem, obrigatoriamente, ser conside-
rados numa avaliao de risco po-
tencial ao meio ambiente. Entre es-
ses fatores, podem ser includos:
comportamento j conhecido ou pre-
visvel do organismo transgnico;
possibilidade de multiplicao e dis-
seminao em ecossistemas descri-
tos; e impacto conhecido ou previs-
vel sobre plantas, animais e micror-
ganismos-no-alvo. O controle de
pragas essencial para manter a
produtividade em nveis elevados,
para que no seja necessria a ex-
panso da rea agriculturvel, favo-
recendo, dessa forma, a preservao
ambiental, sem prejuzo da instala-
o da crescente populao.
A avaliao e o estabelecimento
de mtodos para o estudo de impac-
to de biopesticidas foram apresenta-
dos no final dos anos 90. Esses mto-
dos devem ser estabelecidos para as
plantas transgnicas, uma vez que as
aes voltadas para a segurana
ambiental devem promover a pre-
servao da biodiversidade, a manu-
teno dos ecossistemas e os res-
pectivos padres de sustentabilidade
requeridos. Respostas a questes
como sobrevivncia, disseminao,
colonizao e funo da liberao
desses organismos em seus habitats
precisam ser obtidas, bem como
devem ser considerados os aspectos
socioeconmicos e os problemas
advindos da ausncia de barreiras
polticas ou fronteiras que restrinjam
a disseminao do organismo. Reco-
nhece-se que a l i berao de
transgnicos no ambiente sem avali-
ao apropriada de seu impacto
ambiental pode levar a prejuzos
importantes, especialmente em fun-
o dos custos elevados da tecnologia.
Alm disso, a biodiversidade est
relacionada aos valores e s tradi-
es culturais das comunidades, que
no podem ser relegadas a nvel
inferior de considerao.
Ressalta-se, ainda, que futuras
pesquisas com transgnese devem
incluir plantas com maior resistncia
a doenas e estresses (biticos e
abiticos), com maior contedo
nutricional, bem como espcies de
plantas e animais com capacidade
de produzir protenas de importn-
cia farmacutica, como vacinas. Para
tanto so necessrias atuao proativa
dos rgos pblicos de pesquisa e
uma poltica pblica que preconize
sua melhor atuao neste cenrio de
mudanas econmicas e tecnolgicas.
Referncias Bibliogrficas
Arantes, O.M.N., Vilas-Bas, L.A.,
Vilas-Bas, G.T. 2002. Bacillus
thuringiensis: Estratgias no
controle biolgico. In: Serafini,
L.A., Barros, N.M., Aevedo, J.L.
(Eds.). Biotecnologia: Avanos na
agricultura e agroindstria.
Caxias do Sul: EDUCS. v. 2, p.
269-293.
Arencibia, A., Vzquez, R. I., Prieto,
D., Tllez, P., Carmona, E. R.,
Coego, A., Hernndez, L., De la
Ri va, G. 1997. Transgeni c
sugarcane plants resistant to stem
borer attack. Molecular Breeding
3: 247-255.
Capalbo , D.M.F.; Vilas-Bas, G.T.
Arantes, O. M. N. 2004. B.
thuringiensis: Formulaes e Plan-
tas Transgnicas Biotecnologia
e Meio Ambiente, Viosa, 2004,
Cap.11, pp 309 a 350.
Frankenhuyzen, K. 1993. The
chal l ange of Baci l l us
thuringiensis. In: Entwistle, P.F.,
Cory, J.S., Bailey, M.J., Higgs, S.
(ed.). In: Bacillus thuringiensis,
an environmental biopesticide:
theory and practice. Chichester:
John Wiley and Sons. p. 1-36.
Ow, D.W. 2002. Recombinase-
directed plant transformation for
the post-genomic era. Plant
Molecular Biology 48: 183200.
Rumjanek, N.G., Fonseca, M.C.C.
2003. Possveis efeitos do cultivo
do al godoei ro Bt sobre a
comunidade de microrganismos
do solo. In: Pires, C.S.S. Fontes,
E.M.G. e Sujii, E. R. (eds.). Impacto
ecol gi co de pl ant as
geneticamente modificadas o
algodo resistente a insetos como
estudo de caso. Embrapa
Recur sos Gent i cos e
Biotecnologia, Braslia. p. 117-
134.
Suzuki, M.T., Lereclus, D., Arantes,
O.M.N. 2004. Fate of Bacillus
thuringiensis in differents insect
larvae. Canadian Journal of
Microbiology, 50: 973-975.
Vilas-Bas, G. F. L. T., Vilas-Bas, L.
A., Lereclus, D. e Arantes, O. M.
N. 1998. Bacillus thuringiensis
conjugation under environmental
conditions. FEMS Microbiology
Ecology 25: 369-374.
86 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
CONSIDERAES SOBRE O
FLUXO GNICO
Quais so os verdadeiros riscos do escape gnico
Aluzio Borm
Eng. Agrnomo, M.S., Ph.D. e Professor da
Universidade Federal de Viosa
borem@ufv.br
Imagem cedida pelo autor
Figura 1. Alguns possveis delineamentos para avaliao de fluxo gnico
transformao gnica
tem potencial para me-
lhorar a produtividade,
resistncia, qualidade
nutricional e outras ca-
ractersticas das plantas cultivadas.
As tcnicas moleculares utilizadas na
transformao gnica consistem ba-
sicamente na introduo e integrao
de pequenos fragmentos de DNA
isolados e clonados a partir de genes
de outros organismos no genoma da
espcie receptora. Apesar dos be-
nefcios evidentes dos cultivares ge-
neticamente modificados, a preocu-
pao de que estes possam apresen-
tar algum efeito adverso ao meio
ambiente, como o escape dos
transgenes, tem sido alvo de estudos
por pesquisadores em diversas insti-
tuies.
Um dos argumentos contra o
emprego de cultivares transgnicos
o risco de fluxo gnico, tambm
denominado escape gnico ou dis-
perso gnica, que, no contexto de
biossegurana, pode ser entendido
como a troca de alelos entre popula-
es ou espcies. De outra forma
a transferncia de alelos de uma
populao/espcie para outra, com
a permanncia do gene exgeno na
populao receptora nas geraes
seguintes transferncia. A possibi-
lidade de ocorrncia de disperso de
transgenes para espcies silvestres
tem recebido grande ateno na an-
lise de biossegurana, porque, se-
gundo alguns ambientalistas, esse
fato poderia mudar as propriedades
genticas das espcies nativas, com
prejuzo para a biodiversidade.
Do ponto de vista evolucionrio,
o fluxo gnico um processo migra-
trio de alelos, como se verifica nos
compndios de gentica de popula-
es. Como se sabe, o efeito da
migrao entre populaes da mes-
ma espcie depende da proporo
de indivduos migrantes e da dife-
rena nas freqncias do alelo nas
duas populaes (Falconer e Mackay,
1996). No caso dos transgnicos,
como a populao receptora no
possui ainda o gene, no como a
transferncia de alelos que normal-
mente ocorre entre populaes.
Contudo, ela pode ser tratada do
mesmo modo. Deve ser salientado
tambm que genes, uma vez intro-
duzidos no parente silvestre, pode-
ro, por meio da recombinao, ser
disseminados. evidente que a sele-
o natural ir atuar e, assim, ele s
permanecer na populao se con-
ferir alguma vantagem seletiva. Em
realidade, o fluxo gnico entre esp-
Meio ambiente
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 87
cies relacionadas, que sobrevivem
em um mesmo ambiente por milha-
res de anos, certamente ocorre com
freqncia e mesmo assim elas po-
dem permanecer com suas proprie-
dades genticas particulares. Como
esse assunto tem sido muito comen-
tado na atualidade, importante que
alguns aspectos do fluxo gnico se-
jam discutidos e, quando necessrio,
que sejam adotadas medidas para
atenuar algum eventual efeito ad-
verso.
O fluxo gnico pode ocorrer
por meio de semente ou por disper-
so de plen. Neste captulo, a nfa-
se ser a discusso sobre plen como
veculo do fluxo gnico. tambm
necessrio salientar que o fluxo
gnico pode ser vertical, quando
envolve cultivares e, ou, populaes
da mesma espcie, ou horizontal,
quando envolve a hibridao entre
espcies diferentes, aparentadas ou
no. Nesse aspecto, preciso ressal-
tar que, embora o termo hbrido seja
utilizado em diferentes conotaes,
em gentica de populaes, ele
utilizado quando envolve o cruza-
mento entre espcies. J a expres-
so recombinao restrita para os
cruzamentos entre populaes de
mesma espcie (fluxo gnico verti-
cal).
A disperso de genes de espci-
es cultivadas para parentes silves-
tres e espcies daninhas pode ser
um problema ecolgico. A literatura
disponvel sobre o assunto sugere
que a disperso de um gene, no
espao e no tempo, depender, em
parte, da vantagem competitiva do
gene, do fluxo gnico e da probabi-
lidade do movimento do gene de um
indivduo para outro em uma gera-
o (Manasse, 1992).
O fluxo gnico por si no fator
de risco. O risco existe quando o
gene transferido confere algum pe-
rigo populao receptora, alteran-
do sua adaptabilidade ou capacidade
de sobrevivncia. Se o gene transfe-
rido for neutro com relao capaci-
dade de sobrevivncia da popula-
o, ele no oferecer risco ambiental.
Entretanto, se o gene reduzir a capa-
cidade de sobrevivncia da popula-
o receptora, ela poder eventual-
mente ser eliminada. De outra for-
ma, se o gene em questo aumentar
a adaptabilidade da populao, ela
poder prevalecer no meio ambien-
te. Dessa forma, qualquer avaliao
de segurana ambiental decorrente
de fluxo gnico deve considerar as
possveis alteraes e o gene espe-
cfico transferido. O leitor deve se
referir aos captulos 6 (Anlise de
risco) e 13 (Agressividade de plantas
daninhas e transgenese) para maio-
res informaes sobre este assunto.
As alteraes que ocorrem nas
enzimas ou em sua regulao po-
dem interferir em sua atividade ori-
ginal, resultando em vantagem ou
desvantagem para o bitipo resis-
tente na presena ou ausncia da
presso de seleo. As plantas resis-
tentes podem tornar-se predominan-
tes quando ocorrerem mudanas no
ambiente que as favoream, isto ,
se elas possurem vantagem compe-
titiva. Entretanto, se a presso de
seleo for removida, sua vantagem
comparativa ser eliminada e os in-
divduos resistentes podero desa-
parecer (Vargas et al., 1999). Esse
princpio tem sido utilizado no ma-
nejo de bitipos resistentes a
herbicidas.
Considerando o conceito de es-
pcie (Ramalho et al., 2001), no
esperado que ocorram hibridaes.
Contudo, em casos espordicos, com
a interferncia do homem ou no,
ela pode ocorrer. Foi esse fenmeno
que deu origem a um grande nme-
ro de novas espcies, entre elas o
trigo cultivado Triticum aestivum L.,
o algodo Gosypium hirsutum e
vrias outras. importante salientar
que esses casos ocorreram h milha-
res de anos e, na realidade, o fluxo
gnico envolveu o genoma inteiro, e
no apenas alelos ou genes.
Fatores que afetam a disperso
de plen e o fluxo gnico
Tipos de espcie: As espcies
cultivadas diferem na taxa de fecun-
dao cruzada. Inclusive so classifi-
cadas em autgamas quando pre-
domina autofecundao, e algamas,
se predomina a fecundao cruzada,
alm das intermedirias. Como es-
pcies autgamas tpicas, citam-se:
soja, trigo, feijo e alface, cuja fre-
qncia de fecundao cruzada
inferior a 5%. Como algamas, tm-
se o milho, o girassol, a cebola e o
eucalipto, entre outras em que a
fecundao cruzada alta, normal-
mente acima de 90%. J nas espci-
es intermedirias, como o algodo, a
taxa de alogamia superior a 5% das
autgamas, mas inferior aos 90% das
algamas. O plen de milho, por
exemplo, pode percorrer distncias
superiores a 100 m, pela ao do
vento. No caso da soja, o gro de
plen possui maior densidade e a
nica maneira de dispers-lo na na-
tureza de forma entomfila. Mes-
mo assim, a disperso do plen de
soja extremamente limitada.
Diferena entre cultivares da
mesma espcie: H diferena entre
os cultivares com relao cor e ao
tamanho das flores, atraindo mais ou
menos polinizadores, e produo
de plen, os quais afetam a taxa de
fecundao cruzada. No milho, por
exemplo, h grande diferena no
tamanho do pendo entre cultivares
e por conseqncia na produo de
plen.
A taxa de fecundao cruzada
entre espcies ou entre cultivares da
mesma espcie depende da produ-
o e disperso de plen (Raybould
e Gray, 1993). Modelos matemti-
cos tm sido utilizados para simular
os padres de disperso de plen
em milho e outras espcies (Borm,
2001).
Vrias condies so necessri-
as para que o fluxo gnico ocorra em
condies de campo: i) existncia
de indivduos sexualmente compat-
veis, ii) coincidncia temporal e es-
pacial dos indivduos, iii) polinizao
cruzada, iv) grande longevidade do
plen, v) hbridos viveis, vi) trans-
misso gnica nas geraes seguin-
tes, vii) recombinao gnica entre
os genomas e viii) no excluso do
gene do genoma receptor (Chvre
et al., 1998).
A ocorrncia de fluxo gnico
tem sido investigada em vrias esp-
cies utilizando-se diferentes delinea-
mentos de plantio. A escolha de
determinado delineamento deve le-
var em considerao o modo de
reproduo da espcie, o veculo de
disperso do plen, alm de aspec-
88 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
t os r ef er ent es s condi es
ambientais. Alguns dos mais comuns
delineamentos so apresentados na
Figura 1.
Fluxo gnico entre as espcies
do gnero Brassica tem sido obser-
vado em alguns trabalhos envolven-
do rabanete, canola e espcies afins
(Salisbury, 2000; Chrvre et al., 1998;
Scheduler e Dale, 1994; Klinger et
al., 1991).
A disperso gnica do girassol
cultivado para espcies silvestres foi
analisada por Arias e Rieseberg (1994)
e por Whitton (1997), nos Estados
Unidos, onde existem diversas for-
mas silvestres de girassol. Esses pes-
quisadores detectaram moderados
nveis de fluxo gnico entre essas
espcies.
A probabilidade de um gene
especfico de um OGM tolerante a
um herbicida ser transferido para
uma espcie daninha depende de
uma srie de fatores, como observa-
do por Conner e Dale (1996). O
intercmbio gnico entre diferentes
espcies extremamente comple-
xo e requer a quebra de vrias barrei-
ras de isolamento reprodutivo, sen-
do algumas das mais freqentes: es-
pcies com habitats distintos, esp-
cies com maturidade sexual em po-
cas distintas, incompatibilidade ge-
ntica, fraqueza do hbrido, esterili-
dade hbrida, dreno metablico e
eliminao gnica.
Para que o fluxo gnico entre
dois bitipos ocorra, eles devem com-
partilhar o mesmo habitat e deve
existir sobreposio do perodo de
florescimento deles. Neste caso, a
ocorrncia da polinizao cruzada
depender da existncia de um agen-
te polinizador eficiente. Se as esp-
cies forem geneticamente compat-
veis e houver a fecundao cruzada
com a formao de um hbrido vi-
vel, o fluxo gnico poder se estabe-
lecer se o gene transferido no resul-
tar em menor competitividade para
o bitipo receptor, bem como no
ocorrer a eliminao do gene exti-
co nas geraes seguintes.
O risco de escape gnico para
vrias espcies de interesse agron-
mico da Inglaterra foi classificado em
trs categorias, com base na taxa de
fecundao cruzada e na existncia
de parentes silvestres na natureza:
Grupo I (mnimo risco), Grupo II
(mdio risco) e Grupo III (alto risco)
(Raybould e Gray, 1993). No Grupo
I foram includos batata, milho, trigo,
centeio, tomate, dentre outros. O
Grupo III inclui cenoura, beterraba,
repolho, pinus, ma, dentre outros.
O risco de fluxo gnico do milho
para uma espcie silvestre, na Ingla-
terra, mnimo, embora seja uma
espcie com elevada taxa de fecun-
dao cruzada. Essa reduzida proba-
bilidade de escape gnico deve-se
ao fato de naquele pas no existi-
rem parentes silvestres do milho
ocorrendo na natureza. No entanto,
o milho deveria ser classificado no
grupo de alto risco no Mxico, cen-
tro de diversidade dessa espcie,
onde seus parentes silvestres ocor-
rem espontaneamente na natureza.
Portanto, para existir alto risco de
escape gnico, a espcie deve apre-
sentar elevada taxa de fecundao
cruzada e devem existir parentes
silvestres compatveis com ela, com-
partilhando o mesmo habitat, geo-
grfica e temporalmente. Mesmo
nessas condies, outros aspectos
r el aci onados ao i sol ament o
reprodutivo devem ser considera-
dos.
Lonetti e Smale (2000) analisa-
ram o fluxo gnico entre variedades
crioulas e variedades melhoradas de
milho em uma localidade prxima a
uma reserva biolgica no Mxico.
Apesar dos inmeros fatores concor-
rendo para a instabilidade gentica
das variedades crioulas, a anlise
morfolgica e gentica destas pare-
ce indicar que a expresso fenotpica
dos caracteres agronmicos perma-
neceu estvel.
A resistncia de plantas dani-
nhas a herbicidas j registrada em
diferentes pases, proveniente da
seleo de tipos preexistentes na
populao nativa (no de escape
gnico), tem sido contornada com a
adoo de tcnicas adequadas de
manejo, que incluem rotao de prin-
cpio ativo do herbicida, rotao de
culturas, mistura de herbicidas com
diferentes mecanismos de ao, con-
trole cultural e cultivo mecnico,
entre outros. Dessa forma, na even-
tualidade de um escape gnico ocor-
rer de uma variedade transgnica
tolerante a um herbicida para esp-
cies silvestres, uma das prticas agr-
colas anteriormente descritas pode
ser adotada com o objetivo de elimi-
nar os bitipos resistentes.
Bibliografia
Baker, H. G. 1965. Characteristics and
modes of origin of weeds. In: Baker,
H.G., Stebbins, G. L. (eds.). The
genetics of colonizing species. New
York: Academic Press. p. 147-172.
Bateman, A. J. 1947. Contamination in
seed crops - I. Insect pollination. J.
Genet. 48: 257-275.
Borm, A. 2005. Biotecnologia e meio
ambiente. Viosa, MG: UFV. 1. ed.
425 p.
Borm, A. 2000. Escape gnico: os
riscos do escape gnico da soja no
Brasil. Biotecnologia, Cincia e
Desenvolvimento 10:101-107.
Borm, A. 2001. Escape gnico e trans-
gnicos. Rio Branco: Editora Su-
prema. 204 p.
Borm, A. 2003. Melhoramento de
plantas. Viosa: Editora UFV. 3
.
ed.
500 p.
Borm, A. e Ramalho, M.A.P. 2002.
Escape gnico e impacto ambien-
tal. Biotecnologia, Cincia e De-
senvolvimento 28: 44-47.
Borm, A., Freire, E.C., Pena, J.C.V. e
Barroso, P.A.V. 2003. Considerati-
ons about cotton gene escape in
Brazil: a review. Crop Breeding
and Applied Biotechnology 3: 315-
332.
Brasileiro, A.C.M. e Canado, G.M.A.
2000. Plantas transgnicas. Infor-
me Agropecurio 21: 28-35.
Brubaker, C.L, Brown, A.H.D, Stewart,
J.M, Kilby, M.J. e Grace, J.P. 1999.
Production of fertile hybrid germ-
plasm with diploid Australian Gos-
sypium species for cotton impro-
vement. Euphytica 108: 199-213.
Burrows, P. 1999. Deliberate release of
genetically modified organisms: the
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 89
UK regulatory framework. In: Gene
flow and agriculture: relevance for
transgenic crops. Proceedings of a
symposium held at Keele, UK 13-
21pp. BCPC Symposium Procee-
dings No.72. Farnham, UK: British
Crop Protection Council.
Canado, G.M.A. 2000. Plantas trans-
gnicas e biossegurana. Informe
Agropecurio 21: 89-96.
Carvalho, N.F., Frendo, P. Montagu, M.,
e Cornelissen, M. 1995. Post-trans-
criptional cosuppression of -1,
3-glucanase genes does not affect
accumulation of transgene nuclear
mRNA. The Plant Cell 7: 347-358.
Chvre, M.A., Eber, F., Baranger, A.,
Hureau, G. Barret, P., Picault, H.,
Renard, M. 1998. Characterization
of backcross generations obtained
under field conditions from oilseed
rape-wild radish F1 interespecific
hybrids: an assessment of transge-
ne dispersal. Theoretical and Ap-
plied Genetics 97: 90-98.
Conner, A.J., Dale, P.J. 1996. Reconsi-
deration of pollen dispersal data
from field trials of transgenic pota-
toes TAG, 92: 505-508.
Department of the Environment. 1994.
Genetically modified crops and
their wild relatives - A UK perspec-
tive. Research Report No. 1.
Doebley, J., Stec, A. , Wendel, J. e
Edwards, M. 1990. Genetic and
morphological analysis of a maize-
teosinto F2 population: implicati-
ons for the origin of maize. Proc.
Natl. Acad. Sci. USA 87: 9888-9892.
Eastham, K. e Sweet, J. 2002. Geneti-
cally modified organisms (GMOs):
The significance of gene flow throu-
gh pollen transfer. European Envi-
ronment Agency. Copenhagen,
Germany.
Emberlin, J., Adams-Groom, B. e Tid-
marsh, J. 1999. The dispersal of
maize (Zea mays) pollen. A report
commissioned by the Soil Associa-
tion: National Pollen Research Unit,
University College Woecester, UK.
Falconer, D. S., Mackay, T. F. C. 1998.
Introduction to quantitative gene-
tics. 4 ed. Edinburgh: Longman
Group. 464 p.
Freire, E.C., Barroso, P.A.V., Pena, J.C.V.
e Borm, A. 2002. Fluxo gnico:
anlise do caso do algodo no
Brasil. Biotecnologia, Cincia e
Desenvolvimento 29: 104-113.
Gabriel, W. 1993. Technologically
modified genes in natural popula-
tions: some sckeptical remarks on
risk assessment from the view of
population genetics. In: Wohr-
mann, K. e Tomiuk, J. (eds.). Trans-
genic Organisms: Risk Assessment
of Deliberate Release. Basel: Bi-
rkhause Verlag. p. 109-116.
Gliddon, C., Boudry, P. e Walker, D.S.
1990. Gene flow - a review of
experimental evidence. In: Gray,
A.J., Amijes, F. e Gliddon, C.J. (eds.).
Environmental impact of geneti-
cally modified crops. Genetically
Modified Organisms Research Re-
port 10-pp 67-81. Londres: DETR.
Govidaraju, D. R. 1988. Relationship
between dispersal ability and le-
vels of gene flow in plants. Oikos
52: 31-35.
Greef, W. 1999. A long term perspec-
tive on Ag-biotech. In: Gene flow
and agriculture: relevance for trans-
genic crops. Proceedings of a sym-
posium held at Keele, 33-37p.
BCPC Symposium Proceedings
No.72. British Crop Protection
Council.
Haldane, J.B.S. 1948. The theory of a
cline. Journal of Genetics 48: 277-
284.
Hamner, K.C., Bonner, J. 1938. Photo-
periodism in relation to hormones
as factors in floral initiation and
development. Botanical Gazette
100: 388-431.
Hartwig, E.E. 1973. Varietal develop-
ment. In: Caldwell, B.E. (ed.). Soy-
beans: improvement, production,
and uses. Madison, WI: ASA Press.
p.187-210.
Hersnsen, J. G. T. 1992. Introductory
considerations on distant hybridi-
zation. In: Kalloo, G. e Chowdhury,
J. B. (eds.): Distant hybridization of
crop plants. Berlin: Springer Verlag
p. 1-14.
Hinson, K. 1989. The use of long
juvenile trait in cultivar develop-
ment . In: Pascale, A.J. (ed.). Actas.
Conferncia Mundial de Investiga-
cion en Soja. Buenos Aires: Argen-
tina. p.983-987.
Ingram, J. 2000. Report on the separa-
tion distances required to ensure
cross-polinations is below specifi-
ed limits in non-seed crops of su-
gar beet, maize and oilseed rape.
MAFF Project No 0123.
Jones, M. D. e Brooks, J. S. 1950.
Effectiveness of distance and bor-
der rows in preventing outcrossing
in corn. Oklahoma Agricultural
Experimental Station. Technical
Bulletin No. T-38.
Kareiva, P., Morris, W. e Jacobi, C. M.
1994. Studying and managing the
risk of cross-fertilization between
transgenic crops and wild relati-
ves. Molecular Ecology 3: 15-21.
Kissmann, K.G. 1996. Resistncia de
plantas a herbicidas. So Paulo:
Basf Brasileira S.A. 33p.
Klingler, T., Elan, D.R. e Ellstrand, N.C.
1991. Radish as a model system for
the study of engineering gene es-
cape rates via cropweed mating.
Conservation Biology 4: 531-535.
Kuehl, R.O. 1961. Pollen viability and
stigma receptivity of Glycine max
(L.) Merrill. Raleigh: North Carolina
State College. (MS Thesis).
Lavigne, C., Godelle, B., Reboud, X. e
Gonyon, P.H. 1996. A method to
determine the mean pollen dis-
persal of individual plants growing
within a large pollen source. The-
oretical and Applied Genetics 93:
1319-1326.
Levin, D.A. e Kerster, H. 1974. Gene
flow in seed plants. Evolutionary
Biology 7: 139-220.
Louette, D., Smale, M. 2000. Farmers
seed selection practices and tradi-
tional maize varieties in Cuzalapa,
90 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Mexico. Euphytica, 113: 25-41.
Luna, V. et al. 2001. Maize pollen
longevity and distance isolation
requirements for effective pollen
control. Crop Science 41: 1551-
1557.
Manasse, R.S. 1992. Ecological risks of
transgenic plants effects of spa-
tial dispersion on gene flow. Ecolo-
gical Applications 2:431-438.
Nelson, R.L., Bernard, R.L. 1984. Pro-
duction and performance of hy-
brid soybeans. Crop Sci. 24: 549-
553.
Paterniani, E. e Goodman, M.M. 1977.
Races of maize in Brazil and adja-
cent areas. International Maize and
Wheat Improvement Center. Me-
xico, DF. CYMMIT.
Paterniani, E. e Stort, A. C. 1974. Effec-
tive maize pollen dispersal in the
field. Euphytica 23: 129-134.
Ramalho, M. A. P., Santos, J. B. e Pinto,
C. A. B. P. 2001. Gentica na agro-
pecuria. 2.ed. Lavras: UFLA 472
p.
Raybould, A. F. e Gray, A. J. 1993.
Genetically modified crops e hy-
bridization with wild relatives: A
UK perspective. Journal of Appli-
ed Ecology 30: 199-219.
Raybould, A.F., Gray, A.J. 1993. The
impact of genetically modified
crops on wild species in United
Kingdom. In: Proceeding of Sym-
posium Gene Transfer: Are Wild
S[ecoes Om Damger. Le Louve-
rain, Sua.
Regal, P.J. 1994. Scientific principles
for ecologically based risk assess-
ment of transgenic organisms. Mol.
Eco. 3: 5-13.
Sage, G.C.M. 1999. The role of DNA
technologies in crop breeding. In:
Gene flow and agriculture: rele-
vance for transgenic crops. Proce-
edings of a Symposium Held at
Keele, 23-31pp. BCPC Symposium
Proceedings No.72. British Crop
Protection Council.
Salamov, A. B. (1940) About isolation
in corn. Sel. I. Sem., 3. (Russian
translation by Michael Afanasiev in
1949).
Salisbury, P.A. 2000. Proceedings of
The myths of gene transfer a
canola case study. Biotechnology
Seminar. Clayton: Manash Univer-
sity Press. p. 71-76.
Schettler, J.A., Dale, P.J. 1994. Oppor-
tunities for gene transfer from trans-
genic oilseed rape (Brassica na-
pus) to related species. Transge-
nic Research 3: 263-278.
Sears, M. K. e Stanley-Horn, D. 2000.
Impact of Bt corn pollen on mo-
narch butterfly populations. In:
Fairbairn, C., Scoles, G. e McHu-
ghen, A. (eds.). Proceedings of the
6
th
International Symposium on
The Biosafety of Genetically Mo-
dified Organisms. University En-
tension Press, Canada.
Shanmugasundaram, S. 1981. Varietal
differences and genetic behavior
for the photoperiodic responses in
soybeans. Bull. Inst. Trop. Agr.,
Kyusho Univ. (Japan) 4: 1-61.
Singh, R.J., Kollipara, K.P., Hymowitz
T. 1988. Further data on the geno-
mic relationships among wild pe-
rennial species of the genus Glyci-
ne Willd. Genome 33: 166-176.
Skorupska, H., Albertsen, M.C., Lan-
gholz, K.D., Palmer R.G. 1989.
Detection of ribosomal-rna genes
in soybean (Glycine max (L) Merr.,
by insitu hybridization. Genome,
32: 1091-1095.
Skvortzov, G. 1927. The soybean -
wild and cultivated in Eastern Asia.
Proc. Manchurian Res. Pub. Ser. A.
Nat. History Sec. 22: 1-8.
Thomas, J.F. 1989. The flowering pro-
cess in soybean. In: Proceedings of
World Soybean Reseach Confe-
rence IV. Buenos Aires. p.250-255.
Tiedje, J.M., Clwell, R.K., Grossman,
Y.L., Hodoson, R.E., Lenski, R.E.,
Mack, R.N., RegaL, P.J. 1989. The
planned introduction of genetically
engineered organisms: ecological
considerations and recommenda-
tions. Ecology 70: 289-315.
Treu, R. e Emberlin, J. 2000. Pollen
dispersal in the crops maize (Zea
mays), oil seed rape (Brassica
napus ssp. oleifera), potatoes (So-
lanum tuberosum), sugar beet
(Beta vulgaris ssp. vulgaris) and
wheat (Triticum aestivum). Soil
Association 2: 144-149.
Tufto, J., Engen, S. e Hindar, K. 1997.
Stochastic dispersal process in plant
population. Theoretical and Appli-
ed Genetics 28: 114-138.
Van Schaik, P.H., Probst, A.H. 1958.
Effects of some enviromental fac-
tors on flower production and re-
productive efficiency in soybeans.
Agronomy Journal 50: 192-197.
Walker, A. K., Cianzio, S. R., Bravo, J.A.
1979. Comparison of emasculati-
on and non-emasculation for artifi-
cial hybridization of soybeans. Crop
Sci. 19: 285-286.
Weatherwax, p. 1955. Structure and
development of reproductive or-
gans. In: Sprague, G. F. (ed.). Corn
and corn improvemen. New York:
Academic Press. p. 89-121.
Weber, F.R., Hanson, P. 1961. Natural
hybridization with and without io-
nizing radiation in soybeans. Crop
Sci. 1: 389-392.
Whitton, J., Wolf, D.E., Arias, D.M.,
Snow, A.A., Rieseberg, L.H. 1997.
The persistence of cultivar alleles
in wild populations of sunflowers
generations after hybridization.
Theoretical and Applied Genetics
95: 33-4
Wilkes, H. G. 1977. Hybridization of
maize and teosinte, in Mexico and
Guatemala e the improvement of
maize. Economic Botany 31: 254-
293.
Wohrmann, K., Tomiuk, J., Pollex, C. e
Grimm, A. 1993. Evolutionsbiolo-
gische Risiken bei Freisetzungen
genetechnish veranderter Organis-
men in die Unwelt. Berlin: Bundes-
minister fur Unwelt. 183p.
Wright, S. 1943. Isolation by distance.
Genetics 28: 114-138.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 91
VARIEDADES TRANSGNICAS E
MEIO AMBIENTE
Segurana ambiental das variedades comerciais
As variedades geneticamente mo-
dificadas foram, pela primeira vez,
comercialmente plantadas em 1994,
com o lanamento do tomate Flavr
Savr, nos Estados Unidos. Desde en-
to, estas variedades vm sendo culti-
vadas em reas crescentes em diver-
sos pases, tanto nas Amricas quanto
na Europa, frica e Oceania. A rea
cultivada com variedades transgnicas
atingiu, em 2003, 67,8 milhes de
hectares, envolvendo mais de 17 pa-
ses e dezenas de espcies importan-
tes na produo de vveres. Todos os
grandes produtores e exportadores
mundiais de alimentos j utilizam essa
tecnologia.
A seguir so apresentadas, a ttulo
de ilustrao, consideraes sobre a
segurana ambiental de algumas vari-
edades geneticamente modificadas e
que so plantadas em vrios pases. As
consideraes sobre a segurana ali-
mentar de algumas delas so discuti-
das no livro Biotecnologia e Nutrio
(Costa e Borm, 2003). O leitor pode-
r encontrar na literatura especializa-
da, bem como em sites das agncias
reguladoras dos organismos genetica-
mente modificados, dados especficos
referentes s demais anlises de
biossegurana realizadas com essas
variedades.
Soja tolerante a
herbicida Evento GTS 40-3-2
A soja (Glycine max) cultivada
em mais de 80 pases, gerando mais de
162 milhes de toneladas mtricas de
gros. O Brasil o segundo maior
produt or e export ador dessa
leguminosa. A soja utilizada como
constituinte em muitos alimentos pro-
cessados e representa a principal fon-
te de leo e de protena para uso em
raes destinadas alimentao ani-
mal.
Plantas daninhas constituem um
dos principais fatores limitantes na
produo agrcola desta cultura. Tipi-
camente, elas so controladas com
uma combinao de prticas culturais
(arao e gradagem) e mtodos qu-
micos. Dependendo das espcies da-
ninhas prevalecentes, herbicidas, como
trifuralina, metribuzim e outros, so
aplicados. A soja RR, obtida via trans-
formao gnica, evento GTS 40-3-2,
foi desenvolvida pela Monsanto para
ser tolerante ao herbicida glifosato,
visando permitir seu uso no controle
das plantas daninhas. Essas variedades
de soja possuem uma forma modifica-
da da enzima EPSPS (5-enolpiruvil
chiquimato-3-fosfato sintase) que per-
mite planta sobreviver aplicao
do herbicida glifosato. O gene inserido
nessas variedades foi extrado da bac-
tria natural do solo Agrobacterium
tumefaciens estirpe CP4.
Resumo dos elementos
genticos introduzidos
Gene: cp4 epsps (5-enolpiruvil
chiquimato-3-fosfato sintase) de
Agrobacterium sp. cepa CP4.
Peptdeo de trnsito: ctp
Promotor: E35S.
Finalizador: nos 3
Caractersticas da soja
Centro de origem: Sudeste da
sia; espcies de soja silvestre so
endmicas na China, na Coria, no
Japo, em Taiwan; raramente exibe
Aluzio Borm
Eng. Agrnomo, M.S., Ph.D. e Professor da
Universidade Federal de Viosa
borem@ufv.br
Meio ambiente
92 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
qualquer caracterstica de dormncia
de sementes, no forte competidor
com outras espcies silvestres ou cul-
tivadas.
Modo de reproduo: auto-
fecundao.
Caractersticas do
organismo doador
Agrobacterium tumefaciens
uma bactria nativa do solo que vem
sendo largamente utilizada em trans-
formao gnica nos ltimos 17 anos.
considerada segura para o homem e
animais, no havendo nenhuma evi-
dncia ou relato de qualquer efeito
adverso por ela causado.
Consideraes sobre
segurana ambiental
Testes em campo
A soja RR, evento GTS 40-3-2, foi
testada nos Estados Unidos, no Cana-
d, em Porto Rico, no Mxico, na
Argentina, na Costa Rica, e em outros
pases a partir do incio da dcada de
90. No Brasil, esses estudos iniciaram-
se a partir de 1997. Estudos agronmi-
cos de rendimento de gros, adaptabi-
lidade, estabilidade de comportamen-
to, incluindo outras caractersticas agro-
nmicas, foram conduzidos em dife-
rentes ambientes e anos de plantio. Os
dados coletados indicam que esta soja
to segura para o plantio em escala
comercial quanto as demais varieda-
des convencionais e que ela no ofe-
rece nenhum risco para o meio ambi-
ente ou para os sistemas agrcolas de
se tornar uma planta invasora.
Taxa de fecundao cruzada
A introgresso do gene de tole-
rncia ao glifosato da soja RR extre-
mamente improvvel de acontecer,
uma vez que no Brasil e demais pases
da Amrica nenhum parente da soja
cultivada encontrado, alm de esta
espcie ser autgama, isto , de
autofecundao, com taxa de fecun-
dao cruzada em geral menor que 1%
(Borm, 2000; Sediyama et al., 1999).
A soja cultivada (Glycine max)
cruza naturalmente com a espcie
silvestre G. soja. Porm, esta s ocorre
naturalmente na China, na Coria, no
Japo, em Taiwan e na Rssia e no
encontrada no meio ambiente no Bra-
sil. Dessa forma, a probabilidade de
transferncia da caracterstica tolern-
cia ao glifosato da soja RR para seus
parentes ou para outras espcies, por
fluxo gnico, muito pequena.
Invasivilidade
O gene cp4 epsps do evento GTS
40-3-2 no conferiu nenhuma vanta-
gem competitiva ou maior habilidade
de sobrevivncia soja na natureza,
caractersticas tpicas de espcies in-
vasoras e colonizadoras. A tolerncia
ao glifosato s confere vantagem com-
petitiva s plantas submetidas a pul-
verizaes com esse herbicida. Adici-
onalmente, a soja cultivada no exibe
nenhuma caracterstica tpica de esp-
cies daninhas, como dormncia de
sementes, desuniformidade de
maturao, sistema de disperso de
sementes, hbito de crescimento
trepador, dentre outras. Conclui-se,
ento, que a soja RR no possui poten-
cial para invadir e, ou, colonizar
ecossistemas agrcolas ou silvestres,
portanto considerada segura para o
plantio comercial.
Efeitos adversos secundrios
Dados de campo da soja RR,
evento GTS 40-3-2, mostraram ausn-
cia de efeitos adversos em organis-
mos-no-alvo, sugerindo que a prote-
na CP4 EPSPS modificada presente
nos tecidos da planta transgnica no
foi txica aos organismos benficos
encontrados na natureza. A protena
CP4 EPSPS no resultou em toxicidade
alterada ou alergenicidade, como de-
monstrado em estudos com dose oral
aguda e crnica com ratos e outros
animais em laboratrio (Costa e Borm,
2003). Adicionalmente, o fato de que
protenas homlogas a EPSPS so
onipresentes na natureza e comuns
em plantas, fungos e alguns outros
micrbios indica sua segurana para
organi smos-no-al vo. A al ta
especificidade dessa enzima para seu
substrato torna improvvel que a
enzima introduzida metabolize outros
substratos endgenos para produzir
compostos secundrios txicos aos
organismos benficos. Todos os dados
experimentais indicam que a soja ge-
neticamente modificada, evento GTS
40-3-2, no possui nenhum efeito ad-
verso sobre organismos benficos ou
em organismos-no-alvo.
Efeito sobre a biodiversidade
A soja RR no possui nenhuma
caracterstica fenotpica nova que pro-
moveria a extenso de seu plantio
alm das regies geogrficas onde
atualmente se cultiva esta leguminosa.
Como no h nenhum parente silves-
tre da soja no Brasil e esta no uma
espcie invasiva e colonizadora, a ca-
racterstica tolerncia ao glifosato se-
guramente no ser transferida a ou-
tras espci es, modi fi cando a
biodiversidade nativa presente no
Brasil.
Milho resistente a lagartas
Evento MON810
O milho cultivado comercial-
mente em mais de 100 pases. Os trs
maiores produtores mundiais so Esta-
dos Unidos, China e Brasil. O milho
matria-prima para a produo de
amido, cuja maioria transformada em
adoantes e produtos fermentados.
leo de milho extrado do germe
dos gros, sendo apenas pequena parte
dos gros inteiros utilizada diretamen-
te na alimentao humana. Entretanto,
derivados dessa espcie esto na mesa
do brasileiro diariamente na forma de
cereais (sucrilhos), pes, bolos e pro-
dutos indiretos, como laticnios, ovos
etc.
As lagartas, da ordem dos
Lepidpteros, so as mais srias pra-
gas da cultura do milho. O uso de
inseticidas qumicos tem sido o mto-
do mais comum de controle dessas
pragas nas ltimas dcadas. Dois im-
portantes aspectos do controle qumi-
co das lagartas tm estimulado os
cientistas a buscar formas alternativas
de controle: poluio ambiental de-
corrente dos inseticidas e seu elevado
custo.
O evento MON810 foi desenvol-
vido pela Monsanto, com a introduo
do gene cry1Ab proveniente da bac-
tria do solo Bacillus thuringiensis
(Bt). Esse gene codifica para a produ-
o da protena Cry1Ab, uma
deltaendotoxina. MON810 produz essa
protena em uma dose efetiva durante
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 93
o ciclo da cultura, controlando algumas
lagartas-praga do milho.
A deltaendotoxina Cry1Ab vem
sendo amplamente usada na agricul-
tura, inclusive por produtores orgni-
cos, como formulaes comerciais. O
uso de Bt para controle biolgico das
pragas um procedimento bem co-
nhecido e aceito por mais de 30 anos.
Adicionalmente, Bacillus thuringiensis
uma bactria com disseminao na-
tural no ambiente e em alimentos e
completamente incua aos mamfe-
ros, inclusive ao homem.
Desde 1997, o evento MON810
adotado com sucesso nos Estados
Unidos, com a denominao YieldGard,
sem que qualquer efeito adverso te-
nha sido observado, enquanto a pro-
dutividade aumenta por volta de 10%.
Seu uso foi aprovado nos Estados Uni-
dos, na Europa, no Japo, no Canad e
em alguns outros pases. Todos apro-
vaes sucederam a extensivos testes
de biossegurana.
Resumo dos elementos
genticos introduzidos
Gene: cry1Ab, que codifica para a
produo da protena delta endotoxina
Cry1Ab, de Bacillus thuringiensis
subsp. Kurstaki.
Promotor: E35S.
Caractersticas do milho
O milho (Zea mays L.) uma
gramnea monica, isto , tem rgos
masculino (pendo) e feminino (espi-
ga) separados, porm na mesma plan-
ta. A inflorescncia masculina (pendo)
localiza-se na parte terminal do colmo,
enquanto as femininas (espigas), nas
axilas foliares. A quantidade de plen
produzida muito acima da necessi-
dade da planta. H estimativas de que,
para cada vulo que se desenvolve
em um gro, a planta produza de
9.000 a 50.000 gros de plen
(Weatherwax, 1955). Depreende-se
ento que, se considerada a espiga
com mdia de 500 gros, tem-se cerca
de 4,5 a 25 milhes de gros de plen
por planta (Eastham e Sweet, 2002).
Modo de reproduo: Tipica-
mente fecundao cruzada, com taxa
de alogamia em torno de 95%, sendo
a disperso do plen feita pelo vento.
A viabilidade do plen de cerca de
30 minutos aps sua liberao em
condies ambientais. O milho sexu-
almente compatvel com o teosinto e
raramente com outras espcies do
gnero Tripsacum.
Caractersticas de organismo
do doador
Embora pragas-alvo, tipicamente
lagartas, sejam suscetveis a doses orais
da protena Bt, no h evidncias de
efeitos txicos a mamferos ou pssa-
ros dose de at 10g protena/g de
peso corporal. A protena Bt tem sido
considerada um dos bioinseticidas mais
seguros, tanto que facultado aos
agricultores orgnicos o seu uso no
controle de pragas.
Consideraes sobre
segurana ambiental
Testes em campo
Avaliaes em campo de produ-
tividade, adaptabilidade, estabilidade
de comportamento, resistncia ao
acamamento e outras caractersticas
agronmicas foram feitas em diferen-
tes ambientes e anos de plantio com o
milho Bt, evento MON810. Todos os
dados indicam que variedades conten-
do este evento so to seguras para o
plantio comercial como as convencio-
nais e que elas no oferecem riscos
para o meio ambiente ou para os
sistemas agrcolas.
Foi constatado nos experimentos
conduzidos que o evento MON810
no alterou a produo, viabilidade e
demais caractersticas do plen. Foi
tambm observado que a disperso
do plen pelo vento e a taxa de
fecundao cruzada no foram altera-
das pela insero do gene cry 1Ab. O
fluxo de genes entre variedades con-
tendo o evento MON810 e outras
variedades dever ser semelhante ao
que j acontece naturalmente entre as
variedades convencionais. No Brasil,
onde no h nenhuma espcie silves-
tre sexualmente compatvel com mi-
lho, a probabilidade de fluxo gnico
para outras espcies extremamente
remota.
O milho (Zea mays ssp. mays)
sexualmente compatvel e cruza livre-
mente com o teosinto (Zea mays ssp.
mexicana) quando florescendo simul-
taneamente e em proximidade fsica.
Esse parente de milho nativo da
Amrica Central e no encontrado
no Brasil. Tripsacum, outro gnero
filogeneticamente relacionado a Zea,
contm 16 espcies, das quais 12 so
nativas do Mxico e da Guatemala.
Invasivilidade
MON810 no confere nenhuma
vantagem competitiva. Assim, ex-
tremamente improvvel que o milho
ainda que modificado com este even-
to consiga se estabelecer em
ecossistemas silvestres, pois durante o
seu processo de domesticao ele
perdeu as caractersticas tpicas de
plantas invasoras e colonizadoras, tor-
nando-se dependente do homem para
completar seu ciclo de vida no meio
ambiente. Todas as evidncias expe-
rimentais indicam que o milho no
sobrevive como uma planta daninha,
pois fraco competidor e possui dis-
perso de semente muito limitada.
Efeitos adversos secundrios
A histria de uso e os dados de
pesquisa reportados na literatura cien-
tfica mostram que a protena Bt no
txica a humanos, outros vertebrados
e insetos benficos. A parte ativa des-
ta protena expressa no milho MON810
(Cry1Ab) equivalente protena
microbiana original, amplamente utili-
zada na agricultura nos ltimos 30
anos. Esta protena s ativa contra
insetos lepidpteros (lagartas).
Linhagens e hbridos de milho
que produzem a protena Cry1Ab fo-
ram comparados em experimentos de
campo aos seus anlogos convencio-
nais (isognicos). Os dados mostram
que a populao relativa de artrpodes
benficos foi similar entre os materiais
geneticamente modificados e os con-
vencionais. Esses estudos de campo
mostraram que Cry1Ab no teve efei-
to adverso direto ou indireto nas po-
pulaes artrpodes benficas. Foram
realizados experimentos de alimenta-
o controlada e com vrias espcies
de insetos-no-alvo, incluindo abelha
melfera, himenpteros benficos,
joaninhas, invertebrados aquticos e
do solo, bem como minhocas. Em
todos os casos no houve nenhum
efeito adverso sobre essas espcies
94 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
estudadas. Em resumo, quando com-
parado com variedades convencionais
de milho, o MON810 no apresentou
risco para organismos-no-alvo ou be-
nficos, inclusive o homem. Portanto,
todos os dados experimentais indicam
que o milho geneticamente modifica-
do, evento MON810, seguro sob o
ponto de vista ambiental.
Efeito sobre a biodiversidade
O milho no possui nenhuma
caracterstica fenotpica nova que pro-
moveria a extenso de seu plantio
alm das regies geogrficas onde
atualmente cultivado. Como no h
nenhum parente silvestre desta
leguminosa no Brasil e como esta no
uma espcie invasiva ou colonizado-
ra, a caracterstica resistncia a lagartas
seguramente no ser transferida a
outras espcies, modificando a
biodiversidade nativa.
Outras consideraes
Para se prolongar a efetividade da
toxina Bt no milho e nas formulaes
comerci ai s, recomenda-se a
implementao de Programas de Ma-
nejo da Resistncia (PRM). Esses pro-
gramas foram estabelecidos nos pa-
ses que j cultivam variedades que
produzem Bt em seus tecidos, inclusi-
ve o milho MON810, e requerem que
produtores plantem determinada rea
com variedades convencionais, faixas
de escape ou refgio, para reduzir a
presso de seleo de insetos resisten-
tes protena Bt. Detalhes especfi-
cos e exigncias dos programas PMR
so discutidos no captulo 10 deste
livro.
Algodo resistente a lagartas
Evento 531
A Monsanto desenvolveu uma
variedade de algodo geneticamente
modificado tolerante s principais pra-
gas da ordem Lepidptera no Brasil,
como o curuquer (Alabama
argillacea), a l agarta-rosada
(Pectinophora gossypiella) e a lagar-
ta-da-ma (Heliothis virescens). O
algodo geneticamente modificado,
referido como Algodo Bollgard even-
to 531, foi obtido por meio do sistema
de transformao de plantas mediado
por Agrobacterium tumefaciens. Esse
processo resultou na introduo est-
vel de trs genes no genoma da vari-
edade convencional Coker 312: cry1Ac,
o gene neomicina fosfotransferase tipo
II (nptII) e o 3"(9)-O-aminoglicosdeo
adenililtransferase (aad). O gene
cry1Ac derivado de Bacillus
thuringiensis (Bt), uma bactria natu-
ralmente encontrada no solo, que co-
difica para a produo da protena
Cry1Ac, de ao biocida sobre insetos
lepidpteros. Os genes nptII e aad so
derivados da bactria Escherichia coli
e codificam para a produo das pro-
tenas NPTII e AAD, respectivamente,
conferindo resistncia a antibiticos
durante as fases iniciais do processo
de transformao do algodo. A prote-
na NPTII confere resistncia aos anti-
biticos aminoglicosilados canamicina
e neomicina, funcionando como
marcador de seleo de clulas vege-
tais transformadas. A protena AAD
confere resistncia aos antibiticos
espectinomicina e estreptomicina, fun-
cionando como marcador para a sele-
o de clulas bacterianas transforma-
das. Somente os genes cry1Ac e nptII
so expressos no algodo GM. O gene
aad controlado por um promotor
bacteriano e a protena AAD no
detectada no tecido do Algodo
Bollgard evento 531.
Resumo dos elementos
genticos introduzidos
Genes: cry1Ac, Cry1Ac
deltaendotoxina (B. thuringiensis
subsp. kurstaki (Btk)); neo, neomicina
fosfotransferase II (E. coli K12); e aad,
3"(9)-O-aminoglicosdeo adenilil-
transferase.
Promotores: E35S, nopalina
sintase (nos) de A. tumefaciens e
promotor bacteriano.
Finalizador: 3' poli A da
subunidade alfa do gene beta-
conglicinina da soja.
Caractersticas do algodo
Centro de origem: Meso-ameri-
cana (Peru, Equador e Bolvia).
Modo de reproduo: Geral-
mente autgama, com freqente
alogamia, especialmente na presena
de insetos polinizadores, como abe-
lhas. Espcies sexualmente compat-
veis incluem G. hirsutum, G.
barbadense e G. tomentosum.
Caractersticas do organismo
doador
As caractersticas de Bacillus
thuringiensis subsp. Kurstaki foram
anteriormente descritas.
Consideraes sobre segurana
ambiental
Testes em campo
O Algodo Bollgard evento 531
vem sendo testado em campo desde
1992 e foi aprovado para produo
comercial nos Estados Unidos em 1996.
Posteriormente, o produto passou a
ser comercializado na Argentina, na
Austrlia, na frica do Sul, na China, na
ndia, no Mxico e na Indonsia. No
Brasil, testes em campo foram inicia-
dos durante as safras de 1997/1998 e
de 1999/2000, com a autorizao da
Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana (CTNBio). Com exce-
o da tolerncia a insetos-alvo, que
resulta da expresso do gene cry1Ac,
os testes em campo e a experincia
em produo comercial indicam que
as caractersticas fenotpicas e agron-
micas do Algodo Bollgard evento
531 so equivalentes s de variedades
de algodo convencional em comr-
cio.
Estudos foram realizados em la-
boratrio e em campo para a caracte-
rizao do Algodo Bollgard evento
531 e para a determinao da seguran-
a ambiental e alimentar do produto.
Os estudos basearam-se no conceito
de familiaridade acoplado ao concei-
to de equivalncia substancial e vi-
saram determinar se a nova planta e
seus produtos apresentam um risco
novo ou maior do que variedades
convencionais para o meio ambiente
ou para consumo como alimento para
seres humanos e, ou, animais. Os estu-
dos partiram dos conhecimentos so-
bre a biologia da planta e as prticas
agrcolas utilizadas no cultivo do algo-
do, sobre a origem dos genes inseri-
dos, a funo e a segurana das novas
protenas produzidas e sobre a com-
posio nutricional da planta, entre
outros aspectos.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 95
Os estudos de caracterizao de-
terminaram o DNA inserido, o nvel de
expresso dos genes inseridos, o
fentipo e o desempenho agronmi-
co da planta. Os parmetros analisados
no indicam nenhum efeito no-inten-
cional resultante da modificao gen-
tica, a qual herdada pelas geraes
subseqentes, sem alteraes.
A avaliao da segurana
ambiental do Algodo Bollgard even-
to 531 mostrou a segurana da planta
e das novas protenas produzidas para
organismos-no-alvo e para o meio
ambiente. A protena Cry1Ac, produ-
zida no Algodo Bollgard evento
531, vem sendo utilizada com segu-
rana como princpio ativo de formu-
laes microbianas j comercializadas
no Brasil e em vrios pases h mais de
40 anos. A protena segura para a
fauna e para organismos benficos,
degradando-se rapidamente no solo.
No foram encontrados efeitos adver-
sos desta variedade GM ou das prote-
nas Cry1Ac e NPTII sobre o meio
ambiente. O potencial de cruzamento
com espcies silvestres presentes no
Brasil possvel pela existncia de
organismos compatveis, mas impro-
vvel nas reas de plantio comercial. A
capacidade invasiva dos genes cry1Ac
e nptII por meio de transferncia
gnica para organismos no relaciona-
dos praticamente inexiste.
Por meio dos estudos de avalia-
o da segurana alimentar do Algo-
do Bollgard evento 531, demons-
trou-se que as novas protenas produ-
zidas pela planta so seguras para a
alimentao humana e para a produ-
o de rao animal. As protenas
Cry1Ac e NPTII encontram-se no caro-
o do Algodo Bollgard evento 531,
mas, aps o processamento das fibras
e do caroo, elas no so detectadas.
Entretanto, caso fossem consumidas,
essas protenas no despertariam ne-
nhuma preocupao com a sade
humana e animal. O modo de ao
delas, a especificidade, o histrico de
uso e exposio, a rpida degradao
no sistema digestivo, a ausncia de
similaridades com protenas txicas ou
alrgicas, assim como a ausncia de
toxicidade oral aguda em camundon-
gos, mostraram a sua segurana para o
consumo humano e animal. A compo-
sio, o valor nutricional e a salubrida-
de das fraes da planta utilizada como
alimento e, ou, rao so equivalentes
s fraes das variedades comerciais
de algodo convencional. Na verifica-
o da equivalncia nutricional e quanto
composicional do Algodo Bollgard
evento 531 em relao s variedades
convencionais, utilizou-se a compara-
o de 67 componentes do caroo de
algodo e do leo. As anlises inclu-
ram a determinao dos nveis de
protena, gordura, umidade, calorias,
minerais, aminocidos, cidos graxos
ciclopropenides e gossipol.
Em adi o aos est udos
composicionais, a salubridade do caro-
o do Algodo Bollgard evento 531
foi demonstrada por meio de estudos
de alimentao com ratos, vacas leitei-
ras, peixes e aves submetidos a dietas
que continham o caroo do algodo
geneticamente modificado e o do al-
godo convencional. Esses estudos no
mostraram nenhuma diferena signifi-
cativa entre os animais alimentados
com o caroo do algodo GM e os
alimentados com o caroo de algodo
convencional.
Os principais benefcios observa-
dos com o cultivo comercial desta
vari edade GM, desde a sua
comercializao inicial nos EUA e em
outros pases, so: melhor controle de
pragas-alvo, reduo do uso de inseti-
cidas, aumento no rendimento, redu-
o dos custos de produo, melhor
rentabilidade e menor risco para o
produtor. A introduo dessa tecnologia
nos Estados Unidos entre 1996 e 1999
levou reduo no uso de ingredien-
tes ativos de inseticidas de aproxi-
madamente 1,2 milho de quilos. Os
produtores obtiveram aumento de 118
milhes de quilos de algodo na pro-
duo anual, o que resultou em apro-
ximadamente US$99 milhes adicio-
nais na receita lquida em 1999. A
reduo do uso de inseticidas tambm
est associada a uma srie de benef-
cios secundrios, como o aumento das
populaes de insetos benficos e de
animais silvestres, a diminuio da
lixiviao potencial de inseticidas e
maior segurana para os funcionrios
da propriedade, devido menor ex-
posio potencial. Benefcios seme-
lhantes vm sendo observados em
outros pases onde essa tecnologia j
foi aprovada para uso comercial.
Simulaes indicam que os bene-
fcios potenciais que esta tecnologia
trar para o Brasil tambm podem ser
significativos. Caso tivesse sido adota-
da em 50% da rea total cultivada do
Brasil em 2000/2001, estima-se que
tivesse havido reduo de aproxima-
damente 1 milho de litros de insetici-
da e significativa elevao na produti-
vidade.
Outras consideraes
O Algodo Bollgard evento 531
oferecer aos produtores brasileiros
uma nova opo para o manejo da
cultura. Os resultados dos estudos de
caracterizao e de segurana
ambiental e alimentar claramente indi-
cam que este Algodo GM equiva-
lente e to seguro para o meio ambi-
ente, os organismos-no-alvo, no uso
em rao animal e no consumo huma-
no, quanto as variedades convencio-
nais atualmente disponveis no merca-
do. As experincias bem-sucedidas
com o uso do Algodo Bollgard even-
to 531 desde o incio de sua
comercializao, em 1996, nos EUA, e
posteriormente em outros pases, con-
firmam a segurana do produto. Sua
utilizao em plantios comerciais re-
duz drasticamente a aplicao de
pesticidas convencionais nas lavouras
e agrega benefcios econmicos,
ambientais, bem como sade huma-
na. A adoo dessa tecnologia trar
maior competitividade global para a
indstria algodoeira do Brasil e agrega-
r benefcios diretos e indiretos seme-
lhantes para o produtor e para o meio
ambiente.
Milho tolerante ao glifosato
Evento NK603
A Monsanto desenvolveu o milho
NK603 com a caracterstica de tolern-
cia ao glifosato, que o ingrediente
ativo dos herbicidas Roundup. O
NK603 produz protenas CP4 5-
enolpiruvilchiquimato-3-fosfato sintase
(CP4 EPSPS) tolerantes ao glifosato. O
controle de plantas daninhas que
realizado pelo glifosato ocorre pela
inibio da enzima EPSPS, produzida
naturalmente pela planta. Essa enzima
catalisa uma etapa crtica na via meta-
blica do cido chiqumico para a
biossntese de aminocidos aromti-
cos em plantas e microrganismos. As
protenas CP4 EPSPS possuem baixa
96 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
afinidade com o glifosato, se compara-
da com a protena EPSPS selvagem.
Assim, quando o milho NK603, que
produz as protenas CP4 EPSPS,
tratado com glifosato, as plantas conti-
nuam se desenvolvendo normalmen-
te. A ao contnua da enzima CP4
EPSPS tolerante ao glifosato catalisa a
sntese dos aminocidos aromticos
necessrios ao desenvolvimento nor-
mal das plantas. A via biossinttica de
aminocidos aromticos no encon-
trada em animais, o que explica a
atividade seletiva desse herbicida em
plantas, contribuindo para a baixa
toxicidade a mamferos. Dois cassetes
para expresso do gene cp4 epsps
foram introduzidos no genoma do milho
por meio de um nico inserto, produ-
zindo o milho NK603. O gene cp4
epsps derivado de uma bactria
comum de solo, a Agrobacterium sp.
cepa CP4, que codifica para a produ-
o da protena EPSPS, tolerante ao
glifosato.
Resumo dos elementos
genticos introduzidos
Gene: cp4 epsps (5-enolpiruvil
chiquimato-3-fosfato sintase) de
Agrobacterium sp. cepa CP4.
Promotores: Intron P-ract1/ract1
contendo actina 1 de arroz, CaMV 35S
e HSP70 do milho.
Finalizador: nos 3
Caractersticas do milho
e modo de reproduo
Detalhes sobre as caractersticas
desta gramnea, bem como seu modo
de reproduo, foram anteriormente
descritos quando o evento MON810
foi abordado, neste captulo.
Consideraes sobre segurana
ambiental
Testes em campo
A segurana ambiental do milho
NK603 mostrou-se ser equivalente
do milho convencional, o que foi con-
firmado em diversos estudos, realiza-
dos inclusive no Brasil. A estabilidade
gentica da caracterstica de tolern-
cia ao glifosato, a ausncia de efeitos
em organismos-no-alvo, o baixo po-
tencial de transferncia gnica, a au-
sncia de caractersticas que faam
com que se torne uma planta daninha,
o desenvolvimento e o desempenho
agronmico so fatores que compro-
vam essa segurana ambiental. Adici-
onalmente, as observaes da segu-
rana do produto utilizado como ali-
mento/rao, desde a liberao co-
mercial do milho NK603 nos Estados
Unidos em 2000, e no Canad e outros
pases, em 2001, substanciam as afir-
mativas acima.
A segurana alimentar do milho
NK603 foi estabelecida com base em
avaliaes da atividade da protena
CP4 EPSPS e sua homologia com as
protenas EPSPS presentes em amplo
espectro de plantas utilizadas como
alimento. A baixa exposio a CP4
EPSPS na dieta, ou seja, baixa concen-
trao no gro e na forragem; a rpida
digestibilidade da protena CP4 EPSPS;
e a ausncia de toxicidade ou
alergenicidade das protenas EPSPS
em geral foram verificadas por meio
de estudos com as protenas CP4 EPSPS
produzidas em plantas. A equivalncia
entre o milho NK603 e o convencional
foi demonstrada por meio de anlises
dos nutrientes-chave, incluindo prote-
nas, lipdeos, carboidratos, umidade,
aminocidos, cidos graxos e minerais,
em estudos realizados em vrios ambi-
entes agrcolas, por exemplo no Brasil.
A equivalncia nutricional entre a va-
riedade NK603 e o milho convencio-
nal foi confirmada mediante avaliao
do desempenho alimentar em estu-
dos com frangos de corte, ratos, vacas
leiteiras, sunos e gado de corte.
No Brasil, os resultados de estu-
dos de eficcia agronmica e tolern-
cia, assim como das avaliaes agron-
micas, de descritores morfolgicos, de
expresso da protena CP4 EPSPS e de
composio (bromatologia) mostraram
que o NK603 equivalente e to
seguro quanto o milho convencional
em termos de biossegurana alimen-
tar e ambiental.
Outras consideraes
O milho NK603 tolerante ao
glifosato, alm de ser to seguro quan-
to o convencional, fornece aos agricul-
tores inmeros benefcios, que inclu-
em: sistema efetivo, flexvel e simples
para o controle de plantas daninhas na
cultura, com potencial para aumento
de produtividade; reduo de custos,
pela diminuio do uso de produtos
herbicidas e do nmero de aplicaes
necessrias para o controle efetivo das
plantas daninhas; adequao e
encorajamento para a adoo de siste-
mas conservacionistas de cultivo, como
o plantio direto; melhoria da qualidade
da gua em fontes vulnerveis, por
reduzir a aplicao de herbicidas que
so lixiviados; segurana alimentar e
ambiental equivalente do milho con-
vencional, sendo to nutritivo quanto
este, o que foi demonstrado por meio
de diversos estudos especficos com a
protena CP4 EPSPS, anlises dos nutri-
entes-chave, da equi val nci a
nutricional, bem como avaliaes
ambientais.
Milho resistente a lagartas
e tolerante a herbicida
Evento Bt11
As lagartas, pertecentes famlia
dos Lepidpteros, so as mais srias
pragas da cultura do milho. Alm de-
las, as plantas daninhas, mesmo em
baixa densidade, podem reduzir a pro-
dutividade do milho de forma signifi-
cativa. O uso de agroqumicos tem
sido o mtodo mais comum de contro-
le das lagartas e das plantas daninhas
nesta cultura.
O milho Bt11 foi desenvolvido
pela Syngenta com o objetivo de ser
resistente s lagartas pela produo de
uma protena inseticida. Esse evento
foi obtido com a introduo do gene
Cry1Ab, semelhana do milho
MON810, apresentado anteriormen-
te. Alm da resistncia a lagartas, o
evento Bt11 apresenta resistncia ao
glufosinato de amnio, o ingrediente
ativo dos herbicidas Liberty, Finale e
Basta. O milho Bt11 possui, portanto,
o gene pat, isolado da bactria
Streptomyces viridochromogenes. Esse
gene codifica para a produo da
enzi ma fosfi notri ci na N-
acetiltransferase (PAT), a qual confere
tolerncia ao glufosinato. A enzima
PAT do milho Bt11 converte L-
fosfinotricina (PPT), o ingrediente ati-
vo do glufosinato de amnio, para
uma forma inativa. Na ausncia de
PAT, a aplicao de glufosinato leva
reduo na produo do aminocido
glutamina e ao aumento na produo
de amnia nos tecidos da planta, resul-
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 97
tando em sua morte. A enzima PAT
no possui qualquer efeito txico.
Resumo dos elementos
genticos introduzidos
Genes: pat, que codifica para a
produo da enzima fosfinotricina
N-acetiltransferase (PAT), provenien-
te de Streptomyces viridochromoge-
nes, e cry1Ab, que codifica para a
produo da protena delta endotoxi-
na de Bacillus thuringiensis subsp.
kurstaki
Promotor: CaMV 35S.
Caractersticas do milho e modo
de reproduo
Detalhes sobre as caractersticas
desta gramnea, bem como seu modo
de reproduo, foram anteriormente
descritos quando o evento MON810
foi abordado, neste captulo.
Caractersticas dos organismos
doadores
Streptomyces viridochromogenes
uma bactria nativa do solo.
Suas cadei as de esporos so
espiraladas, com colorao azul ou
verde, dependendo do pH do meio. S.
viridochromogenes exibe atividade
antimicrobiana devido estreptomicina
produzida pela bactria. Os dados re-
portados na literatura indicam sua se-
gurana para o homem, animais e
plantas.
Bacillus thuringiensis subsp.
Kurstaki
Embora pragas-alvo, tipicamente
lagartas, sejam susceptveis a doses
orais da protena Bt, no h evidncias
de efeitos txicos a mamferos e ps-
saros dose de at 10 g protena/g
de peso corporal. A protena Bt tem
sido considerada um dos bioinseticidas
mais seguros, tanto que facultado
aos agricultores orgnicos o seu uso no
controle de pragas.
Consideraes sobre segurana
ambiental
Testes em campo
O milho Bt11 foi testado em v-
rias linhagens e hbridos de milho em
campo a partir de 1992 nos Estados
Unidos, no Canad, na Europa e tam-
bm no Brasil mais recentemente.
Esses experimentos compararam as
variedades Bt11 com outras isognicas
convencionais, e detectou-se que ca-
ractersticas agronmicas, como vigor
vegetativo, dias para a maturao, ren-
dimento de gros, peso e densidade
de gros, foram similares s das varie-
dades no-transgnicas, indicando que
no evento Bt11 no foram alteradas as
variedades para outras caractersticas
alm da resistncia s pragas-alvo. O
nvel de expresso da enzima PAT nas
variedades Bt11 foi suficientemente
elevado para conferir tolerncia ao
herbicida glufosinato. Todos os dados
de campo mostram que o milho Bt11
no possui nenhum potencial risco ao
ambiente.
Taxa de fecundao cruzada
Os dados de campo tambm indi-
caram que a produo, viabilidade,
disperso do plen e taxa de fecunda-
o cruzada permanecem inalteradas
com a modificao gentica Bt11.
Dessa forma, o fluxo gnico entre
variedades Bt11 e outras variedades
convencionais ser semelhante ao que
naturalmente ocorre entre as cultiva-
das. No Brasil, onde h poucas espci-
es aparentadas com o milho, a proba-
bilidade de fluxo de gene para esp-
cies silvestres extremamente remo-
ta. O milho Zea mays L. subsp. mays
sexualmente compatvel com ou-
tros membros do gnero Zea, e em
menor grau com algumas espcies do
gnero Tripsacum.
Invasivilidade
Os genes pat e cry1Ab, do even-
to Bt11, no conferiram nenhuma van-
tagem competitiva ou maior habilida-
de de sobrevivncia para o milho na
natureza ou ao aparecimento de ca-
ractersticas tpicas de espcies inva-
soras e colonizadoras. A tolerncia
fosfinotricina s confere vantagem
competitiva s plantas pulverizadas
com este herbicida. Adicionalmente,
nenhuma vantagem competitiva foi
conferida pelo gene cry1Ab, alm da
resistncia a lagartas-alvo. Essa resis-
tncia no transforma, por si mesma, o
milho em uma espcie daninha ou
com capacidade de invadir e colonizar
o meio ambiente.
Todos os dados experimentais
indicam que o milho no sobrevive
como uma planta daninha, pois fraco
competidor e possui disperso de se-
mente muito limitada, portanto no
oferece nenhum risco para o meio
ambiente.
Efeitos adversos secundrios
Foi observado nos ensaios de cam-
po e em laboratrio que o milho Bt11
no tem efeito adverso sobre organis-
mos benficos para os ecossistemas
agrcolas. A histria de uso registrada
na literatura cientfica mostra que a
protena Bt no txica a humanos,
outros vertebrados e insetos benfi-
cos. Estudos de alimentao forada
em laboratrio no mostraram nenhum
efeito negativo no desenvolvimento
de abelhas melferas, joaninhas e ou-
tros insetos-no-alvo. Em estudos com
aves alimentadas com milho Bt11 tam-
bm no se verificou nenhum efeito
adverso.
Em resumo, foi determinado que
o milho Bt11 no apresenta risco para
o meio ambiente e para a sade huma-
na. Seu efeito especfico para algu-
mas espcies de insetos-praga
lepidpteros.
Efeito sobre a biodiversidade
O milho Bt11 no possui nenhu-
ma caracterstica fenotpica nova que
fomentaria a extenso de seu plantio
alm das regies geogrficas que atu-
almente cultivam esta espcie. Como
no h nenhum parente silvestre do
milho no Brasil e como esta no uma
espcie invasiva ou colonizadora, a
caracterstica resistncia a lagartas se-
guramente no ser transferida a ou-
tras espcies, modificando a biodi-
versidade nativa.
Outras consideraes
Para a sustentabilidade de uso da
toxina Bt expressa no milho e nas
formulaes comerciais desta mesma
toxina, recomenda-se a implementa-
o de Programas de Manejo da Resis-
tncia (PRM). Esses programas so
obrigatrios nos pases que j cultivam
98 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
variedades Bt11 e requerem que pro-
dutores plantem certa rea com varie-
dades convencionais, faixas de escape
ou refgio, para reduzir a presso de
seleo de insetos resistentes prote-
na Bt. Detalhes especficos e exign-
cias dos programas PMR so discutidos
no captulo 10 deste livro.
pouco provvel que o milho
Bt11 resulte na eliminao do uso de
inseticidas qumicos que so tradicio-
nalmente aplicados nas lavouras de
milho, pois estas variedades so resis-
tentes apenas a algumas das pragas
desta espcie. Variedades de milho
Bt11 podem, entretanto, contribuir para
a preservao do meio ambiente ao
oferecer um mtodo alternativo para
o controle das lagartas do milho, redu-
zindo o uso de lagarticidas e os poten-
ciais efeitos adversos resultantes des-
ses inseticidas em insetos benficos,
contribuindo para a segurana do tra-
balhador e evitando a contaminao
da gua e do solo.
Milho tolerante a
herbicida Evento T 25
O milho LibertyLink foi desenvol-
vido pela AgrEvo (hoje Bayer Crop
Science) com o objetivo de possibilitar
o uso seletivo dos herbicidas cujo
ingrediente ativo o glufosinato de
amnio, para o manejo de plantas
daninhas. O gene pat, que confere
este atributo foi clonado de um seg-
mento especfico do genoma da bac-
tria de solo Streptomyces viridochro-
mogenes e codifica para a produo da
enzima fosfinotricina-N-acetiltransfe-
rase (PAT). Este produto encontra-se
aprovado na Europa, no Japo, nos
Estados Unidos, na Argentina, e sua
comercializao ocorre nestes e em
outros pases.
Resumo dos elementos genti-
cos introduzidos
Genes: pat, que codifica para a
resistncia ao herbicida fosfinotricina
N-acetiltransferase (PAT), e bla trun-
cado, que no codifica para a produ-
o de b-lactamase. Cultivos de milho
derivado do Evento T25 podem ter
suas plantas daninhas manejadas com
o herbicida biodegradvel glufosinato
de amnio, sem entretanto restringir a
opo de uso de qualquer outro tradi-
cionalmente utilizado.
Promotor: CaMV 35S
Caractersticas do milho e
modo de reproduo
Detalhes sobre as caractersticas
desta gramnea, bem como seu modo
de reproduo, foram anteriormente
descritos quando o evento MON810
foi abordado neste captulo.
Caractersticas do
organismo doador
Streptomyces viridochromoge-
nes: uma bactria nativa do solo.
Suas cadeias de esporos so espirala-
das, com colorao azul ou verde,
dependendo do pH do meio. S. viri-
dochromogenes exibe atividade anti-
microbiana, devido estreptomicina
produzida pela bactria. Os dados re-
portados na literatura indicam sua se-
gurana para o homem, animais e
plantas.
Consideraes sobre
segurana ambiental
Testes em campo
O evento T25 foi estudado em
campo a partir de 1992 em diferentes
pases, inclusive no Brasil. Linhagens e
hbridos de milho T25 foram extensi-
vamente avaliados em laboratrio, casa
de vegetao e no campo. Os experi-
mentos compararam o milho T25 com
outros milhos convencionais, quando
se determinaram caractersticas agro-
nmicas como produtividade, altura
de planta, data de florescimento, sus-
cetibilidade s doenas. Os dados ex-
perimentais indicam que o milho T25
semelhante aos convencionais an-
logos para todas as caractersticas es-
tudadas. Esses dados tambm mos-
tram que este milho no possui ne-
nhum potencial risco ao ambiente.
Taxa de fecundao cruzada
A produo, viabilidade e disper-
so de plen pelo vento permanece-
ram inalteradas com a modificao
gentica T25. Dessa forma, a freqn-
cia de intercambio gnico entre varie-
dades T25 e outras convencionais
dever ser semelhante observada
entre variedades no-transgnicas. No
Brasil, onde h poucas espcies filoge-
neticamente relacionadas ao milho no
meio ambiente, a probabilidade de
fluxo gnico para outras espcies
remota.
Invasivilidade
O gene pat, do evento T25, no
conferiu nenhuma vantagem compe-
titiva ou maior habilidade de sobrevi-
vncia do milho na natureza ou o
aparecimento de caractersticas tpi-
cas de espcies invasoras e coloniza-
doras. O fentipo das plantas T25
permaneceu inalterado para todas as
caractersticas agronmicas, exceto
para tolerncia ao glufosinato de am-
nia. A tolerncia a este herbicida s
confere vantagem competitiva s plan-
tas pulverizadas com este produto,
portanto dependente de prticas agro-
nmicas. Essa caracterstica adicionada
no transforma, por si mesmo, o milho
em uma espcie daninha ou com
capacidade de invadir e colonizar o
meio ambiente ou reas no agricult-
veis.
Todos os dados experimentais
indicam que o milho no sobrevive
como uma planta daninha, pois fraco
competidor e possui disperso de se-
mente muito limitada, portanto no
oferece nenhum risco ambiental.
Efeitos adversos secundrios
Foi observado nos ensaios de cam-
po e em laboratrio que o milho T25
no tem efeito adverso sobre organis-
mos benficos ou no-alvo nos
ecossistemas agrcolas. A enzima PAT,
responsvel pela tolerncia ao
glufosinato de amnio, tem atividade
enzimtica substrato-especfica, no
possui estabilidade trmica ou
proteoltica, tpicas de compostos t-
xicos, e no afeta o metabolismo da
planta. Outras espcies, como soja,
arroz, algodo, trigo, cevada, lentilhas,
ervilhas, linho e alfafa, foram modifica-
das para tambm produzirem a enzima
PAT, sem deteco de efeito adverso
para o meio ambiente.
Finalmente, aps inmeros tes-
tes de biossegurana, foi determinado
que o milho T25 no apresenta risco
para o meio ambiente nem para a
sade humana.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 99
Efeito sobre a biodiversidade
O milho T25 no possui nenhu-
ma caracterstica fenotpica nova que
fomentaria a extenso de seu plantio
alm das regies geogrficas que atu-
almente cultivam esta espcie. Como
no h nenhum parente silvestre do
milho no Brasil e como esta no uma
espcie invasiva ou colonizadora, a
caracterstica tolerncia ao glufosinato
de amnia seguramente no ser
transferida a outras espcies. Mesmo
que o fosse, a caracterstica adicionada
no se correlaciona com capacidade
adaptativa ou invasiva, portanto sem
potencial de modificar a biodiversidade
nativa no Brasil.
Foi determinado que o impacto
global do milho T25 sobre a
biodiversidade vegetal neutro, bem
como sobre a bi odi versi dade
microbiana e animal, uma vez que a
enzima PAT, produzida pelo milho
T25, no altera o metabolismo da
planta e no resulta na produo de
compostos secundrios novos.
Bibliografia
Betz, F.S., Hammond, B.G. e Fuchs,
R.L. 2000. Safety and advantages
of Bacillus thuringiensis-protec-
ted plants to control insect pests.
Regulatory Toxicology 32: 156-
173.
Borm, A. 2005. Biotecnologia e meio
ambiente. Viosa, MG: UFV. 1.
ed. 425 p.
Borm, A. 2000. Escape gnico: os
riscos do escape gnico da soja
no Brasil. Biotecnologia, Cincia
e Desenvolvimento 10: 101-107.
Borm, A. 2001. Escape gnico e
transgnicos. Rio Branco: Editora
Suprema. 204 p.
Borm, A. 2003. Melhoramento de
plantas. Viosa: Editora UFV. 3.
edio 500 p.
Borm, A. e Ramalho, M.A.P. 2002.
Escape gnico e impacto ambi-
ental. Biotecnologia, Cincia e
Desenvolvimento 28: 44-47.
Borm, A. Freire, E.C., Pena, J.C.V. e
Barroso, P.A.V. 2003. Considera-
tions about cotton gene escape
in Brazil: a review. Crop Bree-
ding and Applied Biotechnology
3: 315-332.
Costa, N.M.B. e Borm, A. 2003.
Biotecnologia e nutrio. So
Paulo: Editora Nobel. 214 p.
Freire, E.C., Barroso, P.A.V., Pena,
J.C.V. e Borm, A. 2002. Fluxo
gnico: anlise do caso do algo-
do no Brasil. Biotecnologia, Ci-
ncia e Desenvolvimento 29:
104-113.
Giesy, J.P., Dodson, S. e Solomon,
K.R. 2000. Ecotoxocological risk
assessment for Roundup herbici-
de. Reviews of Environmental
Contamination and Toxicology
167: 35-120.
Hammond, B.G., Vicini, J.L., Hartne-
ll, G.F., Naylor, M.W., Knight,
C.D., Robinson, E.H., Fuchs, R.L.
e Padgette, S.R. 1996. The fee-
ding value of soybeans fed to
rats, chickens, catfish and dairy
cattle is not altered by genetic
incorporation of glyphosate to-
lerance. Journal of Nutrition 126,
717-727.
Harrison, L.A., Bailey, M.R., Naylor,
M.W., Ream, J.E., Hammond,
B.G., Nida, D.L., Burnette, B.L.,
Nickson, T.E., Mitsky, T.A., Taylor,
M.L., Fucsh, R.L. e Padgette, S.R.
1996. The expressed protein in
glyphosate-tolerant soybean, 5-
enolypyruvylshikimate-3-phos-
phate synthase from Agrobacte-
rium sp. Strain CP4, is rapidly
digested in vitro and is not toxic
to acutely gavaged mice. Journal
of Nutrition 126: 728-740.
Padgette, S.R., Kolacz, K.H., Delan-
nay, X., Re, D.B., LaVallee, B.J.,
Tinius, C.N., Rhodes, W.K., Ote-
ro, Y.I., Barry, G.F., Eichholtz,
D.A., Peschke, V.M., Nida, D.L.,
Taylor, N.B. e Kishore, G.M. 1995.
Development, identification, and
characterization of a glyphosate-
tolerant soybean line. Crop Sci-
ence 35: 1451-1461.
Paterniani, E. e Stort, A. C. 1974.
Effective maize pollen dispersal
in the field. Euphytica 23: 129-
134.
Ramalho, M. A. P., Santos, J. B., Pinto,
C. A. B. P. 2001. Gentica na
agropecuria. 2.ed. Lavras: UFLA.
472 p.
Sears, M.K., Hellmich, R.L., Stanley-
Horn, D.E., Oberhauser, K.S., Ple-
asants, J.M, Mattila, H.R., Siegfri-
ed, B.D e Dively, G.P. 2001.
Impact of Bt corn pollen on
monarch butterfly populations:
A risk assessment. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA Early Edition
Sediyama, T., Teixeira, R.C. e Reis,
M.S. 1999. Melhoramento da soja.
In: Borm, A. (ed.) Melhoramen-
to de espcies cultivadas. Vio-
sa: Editora UFV.p. 488-533.
Stanley-Horn, D.E, Dively, G.P., He-
llmich, R.L., Mattila, H.R., Sears,
M.K., Rose, R., Jesse, L.C.H., Lo-
sey, J.E., Obrycki, J.J. e Lewis, L.
2001. Assessing the impact of
Cry1Ab-expressing corn pollen
on monarch butterfly larvae in
field studies. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA Early Edition.
Taylor, N.B., Fuchs, R.L., MacDonald,
J., Shariff, A.R. e Padgette, S.R.
1999. Compositional Analysis of
Glyphosate-Tolerant Soybeans
Treated with Glyphosate. Jour-
nal of Agricultural and Food Che-
mistry 47: 4469-4473.
Teshima, R., Akiyama, H., Okunuki,
H., Sakushima, J., Goda, Y., Ono-
dera, H., Sawada, J., Toyoda, M.
2000. Effect of GM and non-GM
soybeans on the immune system
of BN rats and B10A mice. Jour-
nal of the Food Hygienic Society
of Japan 41: 188-193.
U.S. EPA. 1993. Reregistration Eligi-
bility Decision (RED): Glypho-
sate. Office of Prevention, Pesti-
cides and Toxic Substances, U.S.
Environmental Protection Agen-
cy, Washington, D.C.
WHO. 1994. Glyphosate. World He-
alth Organization (WHO), Inter-
national Programme of Chemical
Safety (IPCS), Geneva. Environ-
mental Health Criteria No. 159.
Williams, G.M., Kroes, R. e Munro,
I.C. 2000. Safety evaluation and
risk assessment of the herbicide
Roundup and its active ingredi-
ent, glyphosate, for humans. Re-
gulatory Toxicology and Phar-
macology 31: 117-165.
Windels, P., Taverniers, I., Depicker,
A., Van Bockstaele, E. e De Loo-
se, M. 2001. Characterization of
the Roundup Ready soybean in-
sert. Eur. Food Res. Technol. 213:
107-112.
100 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
Meio ambiente
Evoluo adaptativa das plantas invasoras
Robinson Antonio Pitelli
Professor Titular
Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias
UNESP, Jaboticabal
pitelli@fcav.unesp.br
Maria do Carmo Morelli Damasceno Pavani
Professor Assistente Doutor
Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias
UNESP, Jaboticabal
mcarmo@fcav.unesp.br
Imagem cedida pelos autores
desenvolvimento de po-
pulaes ferais sempre
ocorreu ao longo do pro-
cesso de evoluo da
civilizao humana. So
populaes animais ou
veget ai s com al gum gr au de
domesticao, que retornam vida
selvagem, melhor dizendo, para uma
condio em que sobrevivem por seus
prprios atributos, sem necessidade
da tutoria do homem. H vrios exem-
plos de populaes ferais no Brasil
como o porco-monteiro, ces e gatos
ferais que vivem no Parque Nacional
de Braslia e o pssaro bico-de-lacre.
O conceito de populao feral
pode ser aplicado s espcies vegetais
exticas j domesticadas e introduzidas
com fins agrcolas, ornamentais ou
para pastagens e que passam a invadir
outras reas com atividades humanas
e reservas naturais. O exemplo mais
flagrante e recente o capim-braquiria
(Brachiaria decumbens), introduzida
de Uganda como pastagem bastante
rstica e que seria capaz de viabilizar
a pecuria nas regies de solos mais
pobres da zona dos cerrados. A intro-
duo foi bem sucedida, o propsito
da introduo foi alcanado e a pecu-
ria cresceu em muitas destas regies,
gerando oportunidades e riqueza. Sua
disperso ocorreu rapidamente, parte
pelo homem que expandiu suas reas
de plantio com esta pastagem e parte
por agentes naturais de disperso, in-
cluindo animais. Esta planta tpica
do estdio clmax de pradaria na fri-
ca e possui uma srie de formas de
interferncia sobre o crescimento de
plantas de porte arbreo e arbustivo.
Assim, hoje constitui uma das princi-
pais plantas daninhas das culturas
florestais e de pomares de fruteiras
tropicais e sub-tropicais e, alm disso,
constitui importante fator de reduo
da biodiversidade em reservas de cer-
rados. Nos Parques Nacionais de
Braslia e de Emas, esta gramnea ex-
tica est substituindo a flora rasteira
nativa, simplificando as redes alimen-
tares e, em conseqncia, reduzindo a
biodiversidade total do sistema.
No entanto, a grande preocupa-
o com populaes vegetais ferais
no Brasil apenas foi ressaltada aps a
possibilidade de introduo de plan-
tas transgnicas. Sempre houve mode-
rada preocupao com a introduo
de algumas plantas exticas, princi-
palmente aquelas que sabidamente
causam problemas em outros locais
como Striga spp, Orobanche spp,
Rot t boel l i a exal t at a, Hydri l l a
verticillata e outras. Menores preocu-
paes tm sido dedicadas com plan-
tas com propriedades medicinais, agr-
colas e ornamentais.
Com a introduo de culturas
transgnicas h a preocupao relaci-
onada formao de populao feral
dentro da prpria espcie genetica-
mente modificada. Com novos atribu-
FERALIDADE VEGETAL
E TRANSGENESE
Figura 01 Modelo esquemtico triangular das relaes entre as intensidades do
distrbio, estresse e ambiente de competio e as relativas estratgias adaptativas
desenvolvidas pelas populaes vegetais e as tendncias induzidas pela agricultura
para formao das plantas infestantes de agroecossistemas. (Adaptado de Grime
(1989).
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 101
1 0 a l e b a T s o p i t e a z e r u t a n a n r e r r o c o e d s i e v s s a p e s s e r t s e e d e o i b r t s i d e d s e d a d i s n e t n I -
) 9 7 9 1 , e m i r G ( s e r o i r e p u s s a t n a l p s a l e p s a d i v l o v n e s e d a v i t a t p a d a a i g t a r t s e e d
o i b r t s i d o d e d a d i s n e t n I
e s s e r t s e o d e d a d i s n e t n I
a x i a B a d a v e l E
a x i a B ) C ( s a r o d i t e p m o C ) S ( e s s e r t s e o a s e t n a r e l o T
a d a v e l E ) R ( s i a r e d u R l e v i v a i g t a r t s e m e S
tos ecofisiolgicos recebidos pela
transginese estas plantas poderiam
perpetuar suas populaes sem inter-
veno do homem, passando invadir
outros agroecossistemas ou reas de
vegetao nativa. A segunda preocu-
pao importante que com o fluxo
gnico das plantas cultivadas para
algumas espcies nativas ou invaso-
ras, estas mudassem seu fitness tan-
to para as presses biticas como
abiticas e tivessem alteraes expres-
sivas em suas caractersticas de rustici-
dade, invasividade e de competitividade
tornando-se mais agressiva na ocupa-
o dos vrios segmentos destinados
colonizao vegetal.
Para melhor discusso deste tema
interessante destacar algumas carac-
tersticas importantes de populaes
com grande capacidade de coloniza-
o. A grande possibilidade de que
uma cultura anual transgnica desen-
volva a condio de populao feral
a de que adquira caractersticas de
plantas pioneiras, salvo algumas esp-
cies perenes, especialmente de hbito
arbreo.
Perpetuao das populaes
vegetais em ambientes sob ao
antrpica
No desenvolvimento das plantas
pioneiras, as adaptaes envolveram
caractersticas importantes para a per-
petuao e expanso das espcies,
como (i ) el evada pr oduo de
disporos; (ii) capacidade de produ-
o de disporos em larga faixa de
condio ambientais; disporos dota-
dos de (iia) adaptaes para dissemi-
nao a curta e a longa distncia, (iib)
diversos e complexos mecanismos de
dormncia, (iic) elevada longevidade;
(iid) desuniformidade no processo
germinativo; e (iie) capacidade de
germinao em muitos ambientes.
Capacidade de (iii) produo cont-
nua de disporos pelo maior tempo
que as condies permitirem; (iv)
desuniformidade nos processos de
florescimento, frutificao, brotao
de gemas em tubrculos, bulbos ou
ri zomas; (v) rpi do cresci mento
vegetativo e florescimento; (vi) produ-
o de estruturas reprodutivas diver-
sas; (vii) plantas auto-compatveis, mas
no completamente autgamas ou
apomticas; (viii) quando algama,
utilizao de agentes de polinizao
inespecficos ou o vento; (ix) utiliza-
o de processos especiais de compe-
t i o pel a sobr evi vnci a como
alelopatia, hbito trepador e outros. Se
perene, (x) vigorosa reproduo
vegetativa ou regenerao de frag-
mentos e (xi) fragilidade na regio do
colo, de modo no poder ser arranca-
da totalmente do solo. Todas estas
caractersticas conferem alta capaci-
dade de sobrevivncia destas plantas
em muitos ambientes, especialmente
naqueles com poucas limitaes de
recursos e elevado distrbio.
Plantas com grande parte destas
caractersticas so pioneiras importan-
tes, tem grande capacidade de coloni-
zao de reas onde, por algum moti-
vo, a vegetao original foi parcial ou
totalmente deslocada e esto includas
entre as plantas invasoras, especial-
mente as de agroecossistemas. im-
portante ressaltar que a prpria prtica
da agricultura colaborou para o apri-
moramento desta caracterstica de
invasividade de algumas populaes
vegetais.
A agricultura evoluiu sempre vi-
sando estabelecer condies timas
ao crescimento vegetal para assegurar
excelente desempenho das plantas
cultivadas em seu desenvolvimento e
produtividade. Assim foram desenvol-
vidos sistemas de semeadura ou plan-
tio que assegurasse uma distribuio
eqitativa da luz, gua e nutrientes
para as plantas cultivadas, pocas de
semeadura que assegurassem boa dis-
ponibilidade de luz e gua nas etapas
crticas do crescimento das plantas e
outras. Todas estas prticas tambm
favoreceram sobremanei-
ra as plantas pioneiras que
passaram a conviver e se
adaptar s praticas impos-
tas pelo homem ajustan-
do, dentre outros atributos
eco-fisiolgicos, o fluxo de
germinao e emergncia
dos disporos, o compri-
mento do ciclo de desen-
volvimento e as formas de
disperso dos propgulos.
Assim, com os anos de
agricultura, as plantas pioneiras altera-
ram alguns atributos permitindo que
suas populaes fossem paulatinamen-
te se especializando na colonizao
de agroecossistemas. Assim, a maioria
das plantas daninhas importantes dos
cultivos no existia em sua forma atual
antes do advento da agricultura
(Fernandez, 1974). Como na natureza
reconhece-se o desenvolvimento de
ecotipos fotoperidicos (Olmsted, 1944)
e ecotipos edficos (Wilkins, 1960)
razovel considerar que as plantas
invasoras representam ecotipos agr-
colas, com um carter regional ou
limitado a um ou vrios cultivos
(Fernandez, 1974).
A evoluo da estratgia de
colonizao das plantas
Grime (1979) considera que so
dois os fatores externos que determi-
nam a estratgia adaptativa das plan-
tas: o estresse e o distrbio. O estresse
se refere aos fenmenos que limitam o
desempenho fotossinttico e de cres-
cimento das plantas como as limita-
es de luz, gua e nutrientes essenci-
ais e disponibilidade de espao para o
crescimento das razes. O distrbio se
refere destruio parcial ou total da
vegetao e pode ser resultado de
presses biticas como a predao e
parasitismo ou abiticas no peridi-
cas como tempestades de vento, fogo,
eroso do solo. O mais destacado
distrbio dos tempos modernos cau-
sado pelas atividades do homem no
preparo do solo, queima de restos
culturais e outras relacionadas s suas
atividades agrcolas.
As intensidades destes dois fato-
res externos podem variar no ambien-
te, desde brandas at elevadas, pro-
vendo situaes diversas para adapta-
o das plantas superiores. Na Tabela
01 esto apresentadas quatro combi-
naes de situaes extremas de vari-
ao destes fatores.
A primeira condio a ser consi-
102 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
derada constitui ambiente com eleva-
das intensidades de distrbio e de
estresse. Nesta situao, Grime (1989)
considera que no h possibilidade
de uma estratgia de colonizao que
seja vivel para ser desenvolvida pelas
plantas superiores, pois com distrbio
freqentes as plantas deveriam ter r-
pido ciclo para reposio do estoque
de indivduos, o que inviabilizado
pelas restries do meio. Nesta condi-
o, h colonizao por organismos
inferiores.
Em situaes de elevado estresse
e baixo distrbio a estratgia desen-
volvida pelas populaes chamada
de tolerncia ao estresse e as plantas
so designadas por estrategista S ou
tolerantes ao estresse. Estas plantas
tm que apresentar caractersticas
adaptativas adequadas para regulao
do crescimento em ambientes com
muitas restries ao desenvolvimento
vegetal. A plasticidade fenotpica e as
adaptaes especiais para sobrepujar
as limitaes impostas pelo meio so
as principais caractersticas desenvol-
vidas por plantas.estrategistas S.
Em situaes de elevado distr-
bio e de baixo estresse, as plantas
desenvolvem caracterstica adaptativa
chamada R ou ruderal. As plantas tm
que sobreviver aos freqentes distr-
bios em um ambiente com boa dispo-
nibilidade de recursos que podem
propiciar rpido crescimento e desen-
volvimento dos indivduos. A princi-
pal estratgia desenvolvida por estas
plantas um eficiente e rpido sistema
reprodutivo e a formao de denso e
persistente banco de disporos que
propicia uma re-colonizao rpida e
consistente do solo to logo o distr-
bio terminado.
Em situaes de baixos distrbio
e estresse, as plantas apresentam me-
canismo adaptativo denominado por
estrategista C ou planta competidora.
Por competio se deve entender a
tendncia de plantas vizinhas de utili-
zar os mesmos recursos que so limi-
tados no ambiente de colonizao.
Estas plantas maximizam a locao de
recursos no crescimento vegetativo e
apresentam arquitetura que as capaci-
tam a ocupar mais eficientemente os
recursos do meio e se estabelecer de
forma consistente.
Considerando a evoluo de uma
comunidade vegetal, as ruderais seri-
am as plantas com caractersticas pio-
neiras, as quais seriam substitudas
pelas competidoras determinando o
estgio intermedirio da sucesso eco-
lgica. As competidoras, depois de
estabelecidas, seriam suplantadas pe-
las plantas tolerantes ao estresse, as
quais de forma lenta e contnua cres-
ceriam sob as limitaes impostas pe-
las estrategistas C e se estabeleceriam
no estgio considerado clmax.
Grime ainda disps as estratgias
adaptativas em um modelo triangular
visando descrever as vrias situaes
intermedirias de estresse, distrbio e
competio (Figura 01a). Este modelo
triangular ser extremamente til para
o entendimento dos efeitos da agricul-
tura no mecanismo evolutivo das plan-
tas infestantes de agroecossistemas.
As prticas agrcolas sempre bus-
cavam preparar o ambiente da lavoura
para favorecer o crescimento das plan-
tas cultivadas. As prticas correntes
eram o preparo do solo com arao,
gradagem, cultivos freqentes; a quei-
ma de restos culturais, a correo da
acidez, a imobilizao de elementos
t xi cos como o al um ni o e o
mangans, fertilizao com elementos
essenciais ao crescimento e desenvol-
vimento das plantas e irrigao. Enfim,
uma grande variedade de interven-
es que impunham grande freqn-
cia e diversidade de distrbios e redu-
ziam drasticamente as limitaes ao
crescimento vegetal. Este tipo de ma-
nejo do agroecossistema propiciava
as condies ambientais para o de-
senvolvimento e aprimoramento de
plantas com caractersticas ruderais
(Figura 01b).
Para a sobrevivncia neste ambi-
entes altamente perturbados as plan-
tas infestantes de agroecossistemas as
plantas desenvolveram certos ajustes
eco-fisiolgicos aos nveis de indiv-
duos e de populaes, que atualmente
so chamados de caractersticas de
agressividade das plantas daninhas.
No entanto, estas caractersticas visam
garantir a perpetuao das espcies
no ambiente agrcola e condiciona-
da por uma integrao entre a capaci-
dade de mudana de cada indivduo e
os processos em longo prazo que, ao
nvel de populao, garante flexibili-
dade adaptativa da espcie frente a
eventuais mudanas do meio ou aos
fenmenos que inexoravelmente ocor-
rem em condies naturais em todo
ecossi st ema at r avs do t empo
(Fernandez, 1974).
Uma tendncia diferente ocorreu
para as plantas cultivadas. Com a
domest i cao os f at or es de
agressividade foram sendo eliminados
pelo melhoramento gentico. Foram
eliminadas: a desuniformidade dos
pr ocessos ger mi nat i vo, de
florescimento e de frutificao, a faci-
lidade de disperso dos disporos, a
arquitetura da planta e outras caracte-
rsticas que acabaram por tornar as
plantas domesticadas extremamente
dependentes a tutoria humana.
H grande preocupao de que a
hibridao introgressiva de plantas
infestantes com plantas transgnicas
possa gerar plantas daninhas altamen-
te problemticas na agricultura. A pos-
sibilidade de produo de hbridos
existe, mas depende de uma srie de
fatores. Alm disso, as variaes dos
ajustes eco-fisiolgicos, rusticidades e
agressividades destes hbridos depen-
dero tambm de outra srie de fato-
res.
O fluxo gnico entre plantas cul-
tivadas e plantas infestantes depende
da presena de compatibilidade gen-
tica, da coincidncia, pelo menos par-
cial, do perodo de florescimento e da
presena de agentes comuns de
polinizao.
Vrias plantas cultivadas tm es-
pcies de plantas infestantes relacio-
nadas e que h possibilidade real de
fluxo gnico, como a alface (Lactuca
sativa) e a alface-selvagem (Lactuca
serriola), a aveia (Avena sativa) e a
aveia-selvagem (Avena fatua), a ab-
bora (Cucurbita pepo) e a abbora-
selvagem (Cucurbita texana), dentre
outras. Muitas espcies cultivadas tm
seus ancestrais selvagens que perma-
neceram infestando agroecossistemas,
como a alfafa e a alfafa-selvagem
(Medicago sativa), cenoura e cenoura-
selagem (Daucus carota), a chicria e
chicria-selvagem (Chicorium intybus)
e o arroz (Oryza sativa). O fluxo
gnico e formao de hbridos entre
estes bitipos e espcies ocorrem e
so bem documentados.
Algumas culturas foram bastante
estudadas quanto a troca de genes
com plantas infestantes aparentadas.
A canola (Brassica napus), embora
apresente elevada taxa de auto-
polinizao, tem a possibilidade de
polinizar plantas infestantes da famlia
Brassicaceae. Chvre et al (1999) ob-
servou que a nabi a (Raphanus
raphanistrum) a planta infestante
com maior taxa de polinizao de
plantas de canola, quando compara-
do com outras brssicas infestantes.
Em condies de campo, a taxa de
hibridao foi bastante baixa, quando
se analisou o fluxo da canola para a
nabia. No entanto, quando se avaliou
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 103
a situao oposta observaram maior
taxa de hibridao da nabia para a
canola. Estes resultados esto de acor-
do com resultados citados por Baker
(1965) em que h a formao de uma
linhagem de rabanete selvagem (R.
sativus) pela introgresso de genes da
nabia (R. raphanistrum). Chvre et al
(1997), em experimento anterior, no
havia observado a transferncia da
transgnese da canola para a nabia.
Mais tarde, Chvre et al (1998) obser-
varam que a transmisso da tolerncia
ao herbicida variava de acordo com o
lcus.
Vrias culturas agrcolas so to-
talmente exticas no seu ambiente de
cultivo, e no tm parentais selvagens.
Nest e caso, a possi bi l i dade do
surgimento de uma planta infestante
hibrida bastante remota. A soja
(Glycine max) uma planta extica no
Brasil e, pelos estudos efetuados e
pela experincia prtica, no tm
parentais selvagens em que haja fluxo
gnico. importante destacar que para
ocorrncia de hibridao introgressiva
necessrio que haja a fecundao,
ocorra a produo de um hbrido frtil
e que este novo gentipo seja capaz
de trocar genes com as duas espcies
parentais.
A possibilidade de fluxo gnico
de plantas cultivadas para plantas
infestantes nas condies brasileiras
depende bastante da planta cultivada
e do local de seu cultivo. Por exemplo,
o cultivo de plantas de sorgo (S. bicolor)
em reas infestadas com S. halepense e
Sorghum arundinaceum pode propor-
cionar esta possibilidade. Embora de
pequena expresso, a canola uma
cultura desenvolvida em algumas regi-
es do sul do Brasil, onde h uma
srie de plantas infestantes aparenta-
das como o R. raphanistrum, Brassica
rapa, R. sativus, Rapistrum rugosum,
Sinapsis arvensis e outras. H a possi-
bilidade de fluxo gnico neste caso.
H uma grande preocupao do
fluxo gnico de plantas transgnicas
de algodo (Gossypium hirsutum) para
plantas de Gossypium barbadense e
Gossypium mustelinum. importante
destacar que tratam-se plantas silves-
tres nativas e no so infestantes de
agroecossistemas. Por isso, esta preo-
cupao ser tratada em outro captu-
lo desta obra.
As conseqncias do fluxo gnico
da planta transgnica no comporta-
mento futuro da planta infestante tm
gerado inmeras preocupaes. Estas
conseqncias dependem a planta
infestante envolvida, da caracterstica
da transformao gentica inserida e
do ambiente de colonizao da planta
infestante. No entanto, no caso de
fluxo gnico efetivo, o fator mais im-
portante no comportamento e na ado-
o de medidas mitigatrias o evento
da transformao gentica.
Em eventos de transformao
gentica para tolerncia substncias
xenobi t i cas, como caso de
herbicidas, o fluxo gnico dever con-
ferir tolerncia da planta infestante
aos produtos. Com a utilizao siste-
mtica do herbicida na rea cultivada,
o gentipo geneticamente modificado
da planta infestante passar a ser sele-
cionado e, aps algumas geraes,
sua populao no mais ser afetada
pelo produto. Nesta condio, algu-
mas opes de soluo do problema
so possveis: (i) a volta ao sistema
ant i go de manej o das pl ant as
infestantes empregado antes da intro-
duo da variedade transgnica ou (ii)
a introduo de um produto especfi-
co para a planta infestante que adqui-
riu tolerncia ao herbicida em combi-
nao com o herbicida utilizado. Esta
ltima opo tem algum grau de difi-
culdade em ser empregada, pois se a
planta infestante geneticamente to
prxima da planta cultivada a ponto
de ocorrer fluxo gnico, o herbicida
que afetar seu crescimento ou sobre-
vivncia tambm poder afetar a cul-
tura. claro que existem muitas moda-
lidades de seletividade dos herbicidas
que tornam possveis estas combina-
es, como o caso da seletividade
toponmica, mas as opes se tornam
menos numerosas e de mais difcil
aplicao. Para esta modalidade de
transformao gentica, o fluxo gnico
tem maior probabilidade de ser preju-
di ci al ent i dade det ent or a da
tecnologia, pois a vantagem econmi-
ca da adoo de planta transgnica
poder ser reduzida.
Para plantas geneticamente mo-
dificadas para resistncia a insetos, o
fluxo gnico dever conferir uma re-
duo da presso bitica dos inimigos
naturais da planta infestante que so
sensveis toxina codificada pelo gene
transferido. Estas plantas, se no hou-
ver efeitos pleiotrpicos que afetem
seu desempenho eco-fisiolgico, de-
vero ser favorecidas pela menor pres-
so de predao e, provavelmente,
iro assumir maior importncia relati-
va na comunidade infestante. Por ou-
tro lado, importante considerar que
as presses biticas so estabelecidas
num processo co-evolutivo. Assim, as
populaes de insetos afetados pela
toxina, passaro a sofrer um processo
de seleo e, com grande probabilida-
de, podero desenvolver tolerncia
toxina e voltar a predar a planta
infestante. Com a volta da situao
regular de presses biticas, a impor-
tncia da planta infestante na comuni-
dade tenderia a votar condio ori-
ginal. A rotao de cultura e a manu-
teno de reas-refgio, consideradas
com importantes medidas mitigatrias
para preveno do desenvolvimento
da resistncia dos insetos s plantas
transgnicas, teriam efeito pouco ex-
pressivo no caso das plantas infestantes
que sofreram fluxo gnico, pois estas
iro permanecer na rea como coloni-
zadoras espontneas. Embora, o fluxo
gnico desta modalidade de transfor-
mao gentica confira uma tolern-
cia uma presso bitica do meio,
esta vantagem tende a ser transitria e
no suficiente para produzir uma
super-planta daninha, uma vez que
tolerncia a presses biticas um
dos quesitos necessrios para uma
planta pioneira bem sucedida, como
j foi discutido no item trs deste
captulo. Este comportamento dever
ser similar para eventos de resistncia
fitopatgenos.
Considerando as plantas geneti-
camente modificadas para tolerncia
a fatores abiticos, aparentemente o
fluxo gnico para plantas infestantes
dever ter maior importncia na hist-
ria evolutiva posterior da sua popula-
o. Para os fatores abiticos no h
a processo co-evolutivo que atuaria
anulando a vantagem competitiva da
planta infestante geneticamente modi-
ficada. As presses contrrias ao novo
gentipo podero ser proporcionadas
pela reao da comunidade infestante
em relao a uma espcie que passar
a ocupar maior espao e mobilizar
mais recursos do meio, uma vez que
esta espcie passaria ser menos afeta-
da por fatores limitantes. As reaes
ao nvel de comunidade geralmente
so menos drsticas e relevantes que
as reaes presses biticas diretas.
importante ressaltar que plantas
infestantes que adquirirem maior tole-
rncia a estresse hdrico, por exemplo,
podero invadir ambientes ou se de-
senvolver em pocas do ano em que
no ocorriam, alterando as dinmicas
das respectivas comunidades. Este
um caso tpico de transformao ge-
ntica de uma planta infestante que
pode alterar permanentemente seu
104 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005
status, seus limites da distribuio ge-
ogrfica, suas pocas e habitats de
colonizao e pode contribuir para
aumentar a rusticidade da populao.
a situao que mais se aproxima de
uma expressiva vantagem de uma po-
pulao de planta infestante como
decorrncia do fluxo gnico de uma
cultura transgnica..
Outras modalidades de eventos
de transformao gentica que podem
alterar a histria evolutiva das plantas
infestantes pelo fluxo gnico seriam
algumas modificaes do comporta-
mento fisiolgico da planta, como
uni f or mi dade de f l or esci ment o,
maturao e conservao ps-colhei-
ta dos frutos. A resposta da planta para
estes tipos de transformao gentica
normalmente depende de uma srie
de interaes bioqumicas que dificil-
mente ocorreriam com a mesma ex-
presso numa outra espcie que vies-
se a receber o gene. Caso o fluxo
gnico produzisse o mesmo compor-
tamento, estaria comprometendo o
sucesso da populao como planta
infestante, por proporcionar tendn-
cia no sentido contrrio evoluo
adaptativa comentada nos itens 2 e 3
deste captulo.
Para outras modalidades de trans-
f ormao, como a produo de
frmacos, o fluxo gnico poderia pro-
mover alguns impactos nas popula-
es das plantas infestantes genetica-
mente modificadas. No entanto, se
trataria da incluso de maior tolern-
cia a presses biticas e o comporta-
mento poder muito prximo ao pre-
visto para plantas resistentes a insetos
e fitopatgenos.
Consideraes finais
No seu processo evolutivo, as
plantas infestantes de agroecossistema
desenvolveram caractersticas que ga-
rantem a perpetuao das espcies no
ambiente agrcola e so condiciona-
das pela integrao entre a capacida-
de de mudana de cada indivduo e os
processos em longo prazo que, ao
nvel de populao, garante flexibili-
dade adaptativa da espcie frente a
eventuais mudanas do meio ou aos
fenmenos que ocorrem na natureza
no decurso do tempo. Estas caracters-
ticas so to variadas e especializadas
que a simples insero de um gene
seria de pouca relevncia tanto ao
nvel individual como da populao,
por mais efeitos pleiotrpicos que esta
insero possa promover.
Sem dvida, a insero de uma
nova caracterstica pelo fluxo gnico
pode proporcionar vantagens ou des-
vantagens a uma populao de planta
infestante. Estas vantagens podem ser
transitrias ou permanentes, mas a
prpria descontinuidade do processo
agrcola em decorrncia de preos,
demanda de mercado, introduo de
novas tecnologias e culturas, propicia
um grande obstculo para que estas
vantagens possam elevar o status da
populao na condio de planta
infestante de forma permanente.
No caso especfico de culturas
transgni cas para tol ernci a aos
herbicidas, o uso peridico e prolon-
gado de um herbicida pode promover
seleo de flora ou desenvolvimento
de resistncia em algumas populaes
de plantas daninhas. Estes dois fen-
menos no esto relacionados exclu-
sivamente utilizao de plantas
transgnicas. Pitelli (1993) comenta a
forte seleo de flora ocorrida nos
estados do sul do Brasil pelo uso
peridico e continuado da seqncia
de culturas de soja, com a utilizao
dos herbicidas metribuzin e trifluralin,
e de milho, com o uso de triazinas
para o controle de plantas infestantes
na dcada de 80. Este manejo agrcola
proporcionou uma expressiva seleo
de Euphorbi a het erophyl l l a e
Brachiaria plantaginea.
O desenvolvimento de popula-
es de plantas infestantes resistentes
aos herbicidas um fato recente, mas
com grande expresso no Brasil que
apresenta populaes de Euphorbia
heterophyllla, Bidens pilosa e Sagittaria
mont evi densi s r esi st ent es aos
herbicidas inibidores de ALS, popula-
es de B. plantaginea e de Digitaria
ciliaris resistentes aos herbicidas
inibidores da ACCase, para os quais
no h qualquer cultura transgnica
no Brasil. A seleo de flora e o
desenvolvimento de resistncia aos
herbicidas tratam-se de respostas das
popul aes e das comuni dades
infestantes, respectivamente, pres-
so de seleo representada pelo
herbicida.
Finalmente, a possibilidade de flu-
xo gnico das plantas infestantes exis-
te, um risco controlvel e com con-
seqncias diversas dependendo do
evento de transformao gentica.
Medidas mitigatrias podem ser em-
pregadas e as possibilidades do
surgimento de uma super-planta-da-
ninha extremamente remota e im-
provvel.
Bibliografia consultada
Baker, H.G. Characteristics and modes
of origin of weeds. In: Baker, H.G.
& Stebbins, G.L. (Ed.) The genetics
of colonizing species. New York,
Academic Press, 1965.
Chvre, A.M.; Eber, F.; Baranger, A. &
Renard, M. Gene f l ow f rom
transgenic crops. Nature, n.389,
p.924, 1977.
Chvre, A.M.; Eber, F.; Baranger, A.;
Hureau, G.; Barret, P.; Picault, H.
& Renard, M. Characterization of
backcross generations obtained
under field conditions from oil
seed r ape- wi l d r adi sh F1
i nt er speci f i c hybr i ds: an
assessement of transgene dispersal.
Theoretical and Applied
Genetics, v.97, p. 90-98, 1988.
Chvre, A.M.; Eber, F.; Darmency, H. &
Renard, M Last results concerning
gene flow from transgenic oilseed
rape to wild radish. International
Rapeseed Congress, 10, Canberra,
1999. Proceedings.
Fernandez, O. Las malezas y su
evol ut i on. Cincia y
Investigation, p. 49-60, 1979
Grime, J.p. Plant strategies and
vegetation processes. New York,
John Wiley & Sons, 1979
Olmsted, C.E. Growth and development
in range grasses. IV Photoperiodic
responses in twelve geographic
strains of oats grama. Botanical
Gazzete, v.106, p. 46-74, 1944.
Pitelli, R.A. Weed-soybean interference
studies in Brazil. In: Cooping, L.G.;
Green, M.B.; Rees, R.T. Pest
Management in Soybean. London,
Elsevier Publishers Ltd., 1991.
p.282-289.
Wilkins, D.A. The measurement and
genetical analysis of lead tolerance
in Festuca aestiva. Report of the
Scottland Plant Breeding Station,
p. 85-98, 1960.
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento n.34 - janeiro/junho 2005 105