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INTRODUO A ESPECTROMETRIA DE
MASSAS
Espectrometria de massas: tcnica analtica que
separa e mede a relao m/z de ons, produzidos em
fase gasosa por algum mtodo de ionizao.
Qual o princpio da separao de ons de acordo com
a relao m/z? Diferenas nas trajetrias, em alto
vcuo, sob a influncia de campos eltricos e/ou
magnticos .
Um espectro de massas registra a abundancia
relativa de ons em funo de m/z.
Aplicaes e caractersticas da EM
Algumas aplicaes da EM:
(a) determinao de massa molecular com elevada
exatido, inclusive de biomolculas e materiais
polimricos;
(b) identificao de substancias, mesmo em misturas
complexas;
(c) informao estrutural: conectividade dos tomos
numa molcula; informaes termoqumicas;
(d) anlise e padres isotpicos.
Algumas caractersticas importantes da EM: (i) tcnica
qualitativa e quantitativa, capaz de analisar misturas
complexas; (ii) alta sensibilidade; (iii) universal e
especfica; (iv) tcnica rpida.
Massa em qumica




2.) Massa atmica se refere a massa de uma espcie isotpica especfica, p. ex.
1
H 1,00783 Da
2
H 2,01210 Da
3.) Massa atmica mdia de um elemento qumico,

Xi = frao de abundncia relativa natural do istopo
Mi Xi Mi Xi
70
Ge 69,924250 0,2084
74
Ge 73,921178 0,3628
72
Ge 71,922076 0,2754
76
Ge 75,921403 0,0761
73
Ge 72,923459 0,0773
M(Ge) = 72,64




Thomson: unidade de m/z (Dalton/carga do eltron)
Massa mdia (ou qumica) = massa calculada usando uma mdia
ponderada sobre a abundancia isotpica.
Massa nominal: massa calculada usando como nmero inteiro a
massa do istopo principal, p.ex. CH
4
= 16 u.
Massa exata: massa calculada usando o valor da massa do
istopo principal, p.ex.
12
C
1
H
3
79
Br = 93,941011 u.
m/z = grandeza abstrata sem unidades, ou em unidades de Th.
Espectro de massas = registro de abundncia inica em funo de
m/z.
Pico base sinal do on mais abundante.
Pico isotpico sinal devido a outros istopos da mesma
composio qumica.
Abundancia relativa = abundancia normalizada com relao ao
pico base.
Intensidade relativa = razo entre a intensidade do pico e o pico
base.
Intensidade percentual = (I
i
/ I
j
).
ESPECTRMETROS DE MASSA













Introduo da amostra
(a) direta
(b) por aquecimento
(c) via eluente cromatogrfico
(d) por dessoro
Ionizao da amostra
(a) por impacto de eltrons
(b) por ionizao qumica
(c) MALDI
(d) por electrospray
(e) por bombardeio com tomos
rpidos (FAB) ou ons (SIMS)
(f) atravs de um plasma de Ar
Separao dos ons (m/z)
(a) campo magntico (e eltrico)
(b) quadrupolo
(c) tempo de vo
Sistema de deteco/ aquisio
de dados
(a) abundancia dos ons
(b) identificao
(c) sensibilidade
(c) automatizao
(d) resoluo
Energia dos
eltrons =
energia cintica
resultante da
acelerao por
uma diferena de
potencial (V)
mv
2
= eV
Ionizao:
energia do
eltron deve ser
superior a
energia de
ionizao da
molcula
2
Ionizao eletrnica de um hidrocarboneto: energia do eltron suficiente
para causar ionizao da molcula e promover a fragmentao de M
+
Ionizao eletrnica de outro ismero C
7
H
16
: fragmentao extensa de M
+
auxiliada pela estabilidade dos fragmentos inicos produzidos
Espectros de massas
por ionizao
eletrnica de
sistemas inorgnicos
com padres
isotpicos
caractersticos:
a) caso do S
8
(
32
S e
34
S)
;
b) complexo de Cr
(
50
Cr,
52
Cr,
53
Cr,
54
Cr)
Energia eletrnica e espectrometria de massas: Eficincia
de ionizao a vrias energias: mximo ~ 70 eV
Espectros de massas de uma -lactama a duas energias eletrnicas diferentes:
maior fragmentao a 70 eV
Ionizao qumica
Ionizao produzida por uma reao qumica provocada por um gs
ionizado.
Gs reagente, p.ex. CH
4
CH
4
+
+ CH
4
CH
5
+
+ CH
3

CH
5
+
um cido de Brnsted muito forte em fase gasosa: ionizao suave
com formao de MH
+
e fragmentos eventuais
M + CH
5
+
MH
+
+ CH
4
Outros reagentes: isobutano, C
4
H
10
, NH
3
C
4
H
10
+ e
-
C
4
H
9
+
+ H

+ 2 e
-
NH
3
+
+ NH
3
NH
4
+
+ NH
2

Transferncia de prton depende da afinidade protnica relativa entre o

substrato neutro e a base conjugada do cido
M + H
+
MH
+
AP (M) = - H
o
AP (CH
4
) = 543,5 kJ mol
-1
AP (C
4
H
8
, isobuteno ou Me
2
C=CH
2
) = 802,1 kJ mol
-1
AP (NH
3
) = 853,6 kJ mol
-1
3
Comparao de
espectros de massa
obtidos por ionizao
eletrnica e por ionizao
qumica (mtodo suave
de ionizao)
preparao de amostra:
analito dissolvido junto
com uma substancia
orgnica, matriz, que
possui absoro
intensa no do laser (
= 337 nm para laser de
N
2
);
dessoro da soluo
slida por um laser
pulsado (ns) de alta
intensidade;
matrizes tpicas: cido
2,5-dihidroxibenzico;
cido 3,5-dimetxi-4-
hidroxicinmico; cido
5-clorosaliclico;
espectro resultante
inclui ons (M+H)+, e
outros com prtons
adicionais, retirados da
matriz.
MALDI
Espectro de massas
MALDI: a) espectro de um
anticorpo monoclonal;
b) espectro de poli-metil
metacrilato <M> = 7100 Da
Positive-ion (a) and negative-
ion (b) MALDI mass spectra
of CS-D tetra with pmg.
Polysulfated-Derived
Oligosaccharides
4
APCI (atmospheric pressure chemical
ionization)
Exemplos de
espectros obtidos
por APCI no modo
positivo e no
modo negativo
Positive APCI spectra
of n-octane in synthetic
air at
30 C, Vcone 1 V and at
different n-octane
concentrations of (a) 6
ppm, (b) 30 ppm, (c) 65
ppm, (d) 90 ppm, and
(e) 150 ppm
Espectro de
massas obtido no
modo negativo por
APPI
Espectro de massas de ons positivos obtido por APPI de petrleo
venezuelano (cortesia do lder imortal HC)
Por que no
te callas