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Curso: Engenharia de Produo

Profa. Dra. Renata Andrade Figueiredo


PRTICA 12 CROMATOGRAFIA
QUMICA EXPERIMENTAL
Cromatografia
Objetivos especficos:
Anlise de pigmentos de pimentes por
cromatografia em papel;



O termo cromatografia de origem grega (do grego:
Khroma, cor e "graph", grafia);

Consiste numa tcnica de separao dos componentes
de uma mistura homognea com base nas suas
diferentes afinidades para serem retidos por um material
estacionrio;

A cromatografia uma tcnica de separao que pode
ser usada para amostras pequenas.
O que a cromatografia?
Cromatografia Princpio Bsico
Fase Estacionria
Fase Mvel
Cromatografia
Modalidades e Classificao
Cromatografia
Modalidades e Classificao
Cromatografia em Papel
Trata-se de uma tcnica simples para anlise de
amostras em pequenas quantidades;

Aplicada principalmente na separao e identificao
de compostos polares, tais como acares, anti-biticos
hidrossolveis, aminocidos, pigmentos e ons metlicos;
Cromatografia
Modalidades e Classificao
Cromatografia em Papel
Ocorre quando a fase mvel for lquida e a fase
estacionria constituda sobre um suporte celulsico -
papel de cromatografia;





Ilustra os conceitos de interaes intermoleculares,
polaridade e propriedades de funes orgnicas.
Cromatografia
Modalidades e Classificao
Cromatografia em Papel
1 Etapa - Os componentes da mistura lquida a separar so colocados, em
pequenas pores, sobre o papel de cromatografia, a pequena distncia de um
dos lados;

2 Etapa - A ponta deste lado ento mergulhada num solvente lquido, que
constitui a fase mvel;

3 Etapa - O solvente que constitui a fase mvel vai-se deslocando de uma
extremidade outra do papel de cromatografia, arrastando os diferentes
componentes da mistura a separar com velocidades distintas, de acordo com
sua afinidade com a fase mvel.
Anlise de Pigmentos de Pimentes
por Cromatografia em Papel
A extrao dos pimentes com hexano:acetona
fornece extratos contendo os principais pigmentos dos
pimentes: carotenos, criptoxantinas, capsantinas e
capsorubina.

CAROTENOS - Tm pouca afinidade com a fase
estacionria e maior afinidade com a fase mvel; esses
hidrocarbonetos devem, portanto, ser eludos com
facilidade pela fase mvel e so os que, durante a
corrida cromatogrfica, mais se distanciam do ponto de
aplicao da amostra.

Anlise de Pigmentos de Pimentes
por Cromatografia em Papel
CRIPTOXANTINAS - apresentam apenas um
grupamento hidroxila e tm moderada afinidade com a
fase estacionria, j que a hidroxila pode formar ligaes
de hidrognio com a gua adsorvida no papel. Assim, as
criptoxantinas e outras xantofilas monooxigenadas
apresentam certa tendncia reteno pela fase
estacionria e, durante a corrida cromatogrfica,
distanciam-se moderadamente do ponto de aplicao da
amostra.
Anlise de Pigmentos de Pimentes
por Cromatografia em Papel
CAPSANTINAS E A
CAPSORUBINA - so substncias
polioxigenadas e, portanto, tm
maior afinidade com a fase
estacionria da cromatografia em
papel. Apresentam maior
tendncia reteno pela fase
estacionria e, durante a corrida
cromatogrfica, pouco se
distanciam do ponto de aplicao
da amostra.
Cromatografia em Papel Distncia
de Reteno Rf
A Rf, definida pela relao
entre a distncia percorrida pela
substncia (ds) e aquela percorrida
pelo solvente (dm), constitui uma
constante de grande utilidade na
identificao qualitativa do
composto
Cromatografia em Papel Distncia
de Reteno Rf
Na cromatografia em papel, a anlise qualitativa realizada
normalmente em funo da cor e do R
f
apresentados pela
substncia;

Analisando diretamente do papel, depois do cromatograma
pronto, deve-se comparar as intensidades das cores e a rea das
manchas do padro e da amostra que mais se aproximam,
pode-se ter um resultado semi-quantitativo;

Lembrando que para analisar a rea das manchas,
importante que o tamanho da gota aplicada seja sempre a
mesmo

Procedimento Experimental
1 Etapa) Preparo do extrato.
2 Etapa) Aplicao da amostra na placa.
3 Etapa) Corrida Cromatogrfica.