ALUMNA : BONIFACIO ESINOZA, !"#r$on CICLO : %&'( ) I
TIN*O MARIA + %&'( I. INTRODUCCION El punto de partida para la investigacin de una enfermedad animal en el laboratorio es la toma de muestras. Este primer captulo introductorio trata algunos de los principios generales relativos a la toma, envo y almacenamiento de muestras. Cada uno de los captulos de este Manual que versa sobre una enfermedad concreta proporciona informacin especfica sobre la toma de muestras para esa enfermedad. Las muestras pueden tomarse de los animales o de su entorno con diferentes fines, tales como el diagnstico de enfermedades, la vigilancia de enfermedades, el certificado sanitario o el seguimiento de la respuesta a un tratamiento o a una vacunacin. Para proporcionar resultados estadsticos vlidos, las muestras recogidas debern ser idneas para el fin que se persigue y adecuadas en cuanto al nmero y cantidad. Las muestras deben embalarse, etiquetarse y enviarse al laboratorio por el procedimiento ms rpido posible, controlando convenientemente la temperatura. !e deben seguir los requisitos especficos para el embala"e y e#pedicin de sustancias infecciosas, incluidos los especmenes para el diagnstico. Cuando se vaya a enviar material a un laboratorio de otro pas, se consultar previamente con dic$o laboratorio para asegurarse de que est dispuesto a recibir el material y a obtener la correspondiente licencia de importacin. %odas las muestras debern acompa&arse de una carta o formulario de envo en el que se indique el nombre y la direccin del remitente, el origen del material, el $istorial pertinente, la identificacin del animal y esp'cimen correspondiente y las pruebas solicitadas. OBJETIVOS ( Conocer las t'cnicas de envo y toma de muestras de laboratorio para diferentes tipos de muestras. II. REVISION LITERARIA II.1. TOMA Y EN ENVO DE MUESTRAS AL LABORATORIO II.1.1. Normas geera!es Para la adecuada recoleccin, conservacin y envo de muestras, es indispensable tener presente las siguientes normas) %oda muestra debe ser remitida con su $istoria clnica completa y perfectamente identificada. Las muestras ideales se obtienen de animales vivos en distintos estadios de la enfermedad. !i es necesaria la necropsia, 'sta debe guardar un orden y metodologa adecuados* adems, debe reali+arse al menor tiempo posible despu's de la muerte del animal ,- $ora.. Las muestras para estudio bacteriolgico deben tomarse antes de la administracin de medicamentos y empleando siempre material est'ril. Para evitar que la muestra se seque y lograr una adecuada conservacin, en algunos casos es necesario utili+ar medios de transporte. Para la recoleccin de cualquier otro tipo de muestra, utili+ar material limpio y seco. Los envases utili+ados para el envi de muestras deben ser en lo posible irrompibles, $erm'ticos y de dimensiones adecuadas* el tiempo entre la obtencin de la muestra y su llegada al laboratorio no debera ser superior a /0 $oras. II.". RECIPIENTES PARA LA TOMA DE MUESTRAS Fras#os $e m%es&reo Fras#os $e m%es&reo) -/1 ml como mnimo, tapa metlica $erm'tica. L'm('e)a: L'm('e)a: Lavado con detergente y agua caliente* en"uague con agua caliente 2 veces* en"uague con agua destilada. Age&e $es#!or'')a$or. Para muestras tratadas con cloro. %iosulfato de 3a al -45, 4,- ml por frasco de -/1 mlsuficiente para neutrali+ar -1 mg de cloro. Co+er&%ra $e! ,ras#o: papel 6raft, aluminio o pelcula plstica Es&er'!')a#'-: A%&o#!a.e: -/-7C por -1 minutos, Calor seco -847C por / $oras II./. TOMA DE MUESTRAS. II./.1. M%es&ra $e sagre Sagre s' a&'#oag%!a&e, !irve para obtener suero sanguneo A(!'#a#'oes) Para reali+ar todos los ensayos inmunolgicos como 9rucelosis, Leptospirosis, :iarrea ;iral entre otros, determinaciones de <umica sangunea como Minerales, en+imas etc. !e utili+an tubos al vaci tapa ro"a, para obtener suero para la mayora de e#menes de laboratorio se requieren mnimo 1 ml de sangre sin anticoagulante. !e de"a el tubo a temperatura ambiente en un ngulo de 247 por unos treinta minutos. Pre#a%#'oes) La alteracin ms frecuente en esta muestra es la $emlisis que se produce por la ruptura de los glbulos ro"os. Tras(or&e) !i la muestra llega al laboratorio antes de 0 $oras, se puede transportar a temperatura ambiente de lo contrario envelas refrigeradas. sagre #o a&'#oag%!a&e A(!'#a#'oes) Para Cuadro =emtico, >nvestigacin de =emoparsitos, >nvestigacin de factores de Coagulacin, :eterminacin de algunos ?ntgenos. !e utili+an tubos al vaco de tapn L>L? ,E:%?. para Cuadro =emtico y =emoparsitos, tubos tapn ?@AL ,Citrato de sodio. para determinacin de factores de coagulacin y tubos tapn ;EB:E ,=eparina. para determinacin de ?ntgenos. Enve la muestra refrigerada si se va a tardar ms de dos $oras antes de llegar al laboratorio. Para diagnstico de Cilaria debe traerse la muestra en tubo con $eparina. II./.". Ma&er'a ,e#a! En las muestras de materia fecal se pueden diagnosticar parsitos gastrointestinales, coccidias, Casciola $epatica, proto+oarios flagelados, parsitos broncopulmonares, aislar bacterias enteropatgenas, detectar algunos antgenos, ,Por e"emplo Parvovirosis canina, Botavirus y Coronavirus en bovinos. determinar sangre oculta y evaluar en+imas digestivas. Es&%$'o (aras'&o!-g'#o e e0%'os* +o.'os* o.'os 1 #a(r'os La materia fecal debe ser tomada directamente del recto usando un guante de palpacin nuevo. Coloque /4 a 24 gramos en un recipiente de boca anc$a limpio y seco, que permita su fcil transporte y manipulacin en el laboratorio Tras(or&e !i las muestras llegan el mismo da al laboratorio pueden ser transportadas a temperatura ambiente, protegidas de la lu+, en el sitio ms fresco posible. !i la muestra va a ser enviada por mensa"era, y llega al laboratorio antes de /0 (2D $oras, empaque y enve en forma refrigerada. Cuando el transporte demora ms de 2D $oras, o no tenga forma de enviar la muestra refrigerada, agregue formol puro a la dosis de - cc. por cada -4 gramos de materia fecal con el fin de preservar la muestra. Estas muestras 3E sirven para bacteriologa, parsitos broncopulmonares o proto+oarios flagelados. Pre#a%#'oes Las muestras no preservadas pueden durar $asta /0 ( 2D $oras antes de llevar al laboratorio, siempre y cuando sean mantenidas en refrigeracin. II././. Te2'$os Las muestras de te"ido se obtienen durante la necropsia ya sea para estudio microbiolgico o $istopatolgico Em(a0%e 1 Tras(or&e Atilice frascos de boca anc$a preferiblemente de plstico para evitar accidentes. >dentifique correctamente, las muestras pueden ser conservadas y enviadas a temperatura ambiente sin e#istir restricciones de tiempo para llegar al laboratorio, debido a que el material una ve+ fi"ado, no sufre alteraciones. ?d"unte un listado de los rganos remitidos, un resumen de la $istoria clnica y todos los $alla+gos de necropsia incluyendo e#tensin, color, consistencia de los te"idos etc. Enuncie un diagnstico presuntivo de acuerdo con los $alla+gos clnicos y de necropsia. Esta informacin es muy til para que el patlogo pueda $acer una correlacin clnica con los $alla+gos $istopatolgicos y debe ser ad"untada ad$erido e#ternamente a la ca"a cuando se utili+a un servicio de mensa"era para el envo de la muestra. II./.3. ORINA En las muestras de orina se pueden reali+ar diferentes anlisis como son, parcial de orina, urocultivo, determinacin de algunos residuos de medicamentos ,:oping. e investigacin de microorganismos especiales como Leptospira. Ana muestra de 1 a -4 mL es suficiente para los anlisis. Uro#%!&'.o La muestra de orina debe tomarse preferiblemente por cistocentesis o durante la miccin a mitad de c$orro. Colquela en un recipiente est'ril de cierre $erm'tico. Befrigere pero no congele. Enve refrigerada al laboratorio lo ms pronto posible. Par#'a! $e or'a Atilice un recipiente qumicamente limpio, seco y provisto de tapa. La muestra se toma durante la miccin, con sonda o por puncin vesical. Beporte al laboratorio el m'todo de toma. Enviar antes de 2 $oras en forma refrigerada. II./.4. E5%$a$os 9a"o esta denominacin se incluyen muestras tomadas de distintos rganos o cavidades como abdominocentesis, artrocentesis, lquido cefalorraqudeo, abscesos, y secreciones uterinas que se remiten para cultivo bacteriolgico, citologa e#foliativa o determinacin de algunos metabolitos como protenas y glucosa. Para #%!&'.o +a#&er'o!-g'#o Puestas en prctica todas las medidas de asepsia que se requieren y usando material est'ril apropiado, $aga la correspondiente puncin del rgano afectado y e#traiga la cantidad de e#udado posible ,mayor de 4.1 mL.. Tras(or&e :ependiendo del tiempo que se demore en llegar la muestra al laboratorio, puede aplicar los siguientes procedimientos) Jer'ga $e &oma) Cuando la muestra va a llegar al laboratorio en menos de una $ora, y transportada a temperatura ambiente, simplemente identifique la muestra y envela al laboratorio en la "eringa asegurndose que la punta de la agu"a est' introducida en un tapn de cauc$o. Esto evita que la muestra se salga o se contamine. T%+o es&6r'!: Cuando la muestra va a demorar ms de una $ora pero menos de -/ $oras en llegar al laboratorio esta debe ser enviada en forma refrigerada, para esto es necesario transferir las muestras de la "eringa a un tubo est'ril, puede usar un tubo al vaco, nuevo, de tapa ro"a. >dentifique la muestra y empquela para enviar en refrigeracin. II./.7. Seme Los anlisis que presta el laboratorio sobre muestras de semen se limitan a la evaluacin de semen congelado para determinar porcenta"e de motilidad, Becuento de espermato+oides vivos por dosis yFo estudio microbiolgico. Tras(or&e Por las caractersticas propias del semen congelado las muestras deben venir en el termo con nitrgeno lquido para tomar las pa"illas directamente en el laboratorio. Cuando se requiere estudio microbiolgico como prueba nica, la muestra puede ser enviada ya descongelada pero mantenida en refrigeracin. II./.8. Ras(a$o $e ('e! En estas muestras se investiga comnmente presencia de Ectoparsitos, $ongos y bacterias, con fines de identificacin y ?ntibiograma. Pro#e$'m'e&o +9s'#o) Limpie muy bien el rea afectada y rea perif'rica sana con solucin salina fisiolgica est'ril, no use ningn antis'ptico. Betire las costras y escamas que est'n sobre la lesin y seque con un pa&o de gasa est'ril. II./.:. Le#;e !obre muestras de lec$e se pueden efectuar distintos procedimientos de laboratorio como diagnstico de mastitis, calidad $igi'nica, e#menes fisicoqumicos. II./.<. Fe&os El feto y la placenta son las muestras ms importantes para llegar al diagnstico etiolgico de las enfermedades infecciosas que afectan la reproduccin en las especies mamferas, porque en estos te"idos se encuentran lesiones $istolgicas o de ellos se pueden aislar los agentes etiolgicos. Re#o!e##'- e e! #am(o Los fetos y placentas deben ser recogidos lo antes posible. >nmediatamente se deben lavar con agua limpia para retirar los residuos de pasto o tierra. :e acuerdo con el tama&o, estado del feto y el posible tiempo que transcurre para llegar al laboratorio, aplique el procedimiento que ms se a"usta a las circunstancias. II./.1=. S%ero $e .a#a a+or&a$a El diagnstico por aislamiento o $istopatologa que se reali+a en fetos es totalmente especfico pero de ba"a sensibilidad ,alrededor del 145 de los estudios en fetos no llegan a un diagnstico., por esto el estudio !erolgico con sueros pareados de la medre puede ser de gran ayuda. Con las muestras del feto tome y enve una muestra de sangre sin anticoagulante para determinar anticuerpos contra las enfermedades a sospec$ar. Bepita la muestra 0 semanas despu's y el $ec$o de encontrar seroconversin ,aumento de ttulos. para una enfermedad se convierte en un diagnstico bastante confiable. II.3. TRANSPORTE DE LA MUESTRA :espu's de la e#traccin de la muestra debe ser refrigerada a 07C para su transporte, colocndola en $ielo picado o en una cava. !e debe colocar en cada nevera de icopor suficiente refrigerante para preservar los te"idos frescos y los sueros. !e recomienda tener en cuenta una proporcin de /)- entre refrigerante y las muestras. Evite que los envases entren en contacto directo con el $ielo. Para esto cuando use bloques de $ielo m'+clelos con $ielo, aserrn, o cascarilla u coloque los tubos dentro de una bolsa plstica. Cuando utilice bolsas refrigerantes envuelva los tubos en papel peridico, colquelos en una bolsa plstica y as envelos en la ca"a termo. Es fundamental que se identifiquen perfectamente las muestras individuales mediante m'todos adecuados. Los instrumentos de marcado deben poder resistir las condiciones de uso* por e"emplo, la $umedad o la congelacin ,utilcese un marcador de escritura indeleble.. El lpi+ tiene tendencia a borrarse en los contenedores, y las etiquetas, pegadas al plstico, se desprenden cuando se almacenan a G847C. La informacin y el $istorial del caso siempre deberan acompa&ar a las muestras al laboratorio y deberan colocarse en un sobre de plstico, por fuera del embala"e de transporte. %al como se resume en la seccin siguiente sobre el transporte de muestras, esa informacin debe incluirse tambi'n dentro del embala"e de transporte. !e sugiere que se sigan los siguientes puntos. Es aconse"able contactar con el laboratorio receptor para determinar si tiene un formulario de envo que quisiera que le remitieran con las muestras o si necesita cualquier otra informacin. II.4. IDENTIFICACION DE LA MUESTRA La identificacin de las muestras es de primordial importancia para el laboratorio y debe estar acompa&ada de la siguiente informacin) 3ombre, tel'fono del m'dico veterinario. 3ombre, direccin, tel'fono y fa# del propietario. 3ombre del predio. Abicacin) Municipio, vereda, departamento. Especie, ra+a, se#o, edad e identificacin o nombre del animal o animales. !intomatologa. %iempo de evolucin de la enfermedad. %ratamiento efectuado si lo $ay. ;acunas aplicadas. En caso de necropsia, descripcin de $alla+gos o lesiones macroscpicas. %ipo de muestra, fec$a y $ora de la toma. :iagnstico presuntivo. Ebservaciones. II.7. INFORMACION >ENERAL DEL ?UE REMITE 3ombre y direccin del propietarioFtitular y ubicacin geogrfica 3meros de tel'fono y fa#, correo electrnico 3ombre del paciente, se#o, edad, ra+a, Enfermedades de cuya e#istencia se sospec$a y pruebas solicitadas. Cec$a de toma de las muestras y del envo. Lista de las muestras remitidas y medios de transporte utili+ados. :ebera incluirse un $istorial completo para el laboratorio, que contemplara los siguientes elementos) El tiempo que $an permanecido en la gran"a los animales enfermos* si son reci'n llegados y de dnde procedan. La fec$a de los primeros casos y de los posteriores, o de los animales muertos, con los nmeros de referencia de los envos anteriores. El nmero de animales muertos y de los que presenten signos clnicos, y edad, se#o y ra+a. Los signos clnicos y su duracin, incluidos la temperatura de los animales enfermos, el estado de la boca, o"os y patas, y los datos de produccin de lec$e y $uevos. =istorial de via"es al e#tran"ero por parte del propietario o de introduccin de animales de otros pases Cualquier medicacin administrada a los animales y cundo se les administr. Cualquier vacuna administrada y cundo se administr. Etras observaciones sobre la enfermedad, el mane"o de los animales y otras condiciones presentes de la enfermedad. III. MATERIALES Y METODOS III.1. L%gar 1 ,e#;a. El presente prctica se reali+ el da "ueves del presente a&o, en el Laboratorio de !anidad ?nimal de la facultad de +ootecnia, en la Aniversidad 3acional ?graria de la !elva situado en el departamento de =unuco, provincia de Leoncio Prado, distrito Bupa Bupa. Heogrficamente se encuentra ubicado a IJ -8K 1KK de latitud !ur y 8DJ -K -8KK de longitud Eeste con una altitud de DD4 m.s.n.m. $umedad relativa promedio /87C. /.".@ Ma&er'a!es. ( Lpi+ y cuaderno de apuntes ( Ana pi+arra acrlica ( Plumones ( Mota /./.@ Me&o$o!ogAa. El m'todo utili+ado en la prctica fue terico con una amplia e#plicacin de lo que es toma y envi de muestra y prctico con las adecuadas indicaciones del encargado de la prctica del M .;. Li+andro* %?CAB @E;?LLE!. IV. RESULTADOS
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Figura 1: Medicin del feto. Coloracin amarilla debida a restos de meconio. Figura 2: Toma de muestras de la placenta Figura 3: Toma de muestras del contenido del cuajar. Figura 4: Toma de muestras del hgado. Figura !: "n#i incorrecto$ caja no adecuada % con p&rdida de l'uidos Figura (: "n#o correcto$ el feto est) en#uelto en una bolsa de pl)stico herm&tica % refrigerada.
Figura *: Toma de muestra de sangre sacando de la #ena mamaria del #acuno. Figura 1+: "nsamblaje de muestras para luego ser en#iadas al laboratorio. Figura ,: Toma de muestra de piel para ser en#iado al laboratorio. Figura -: Toma de muestra de sangre con anticoagulante para ser en#iado al laboratorio. V. DISCUSION !egn la revisin bibliogrfica, nos da a conocer sobre los procedimientos a seguir y los materiales adecuados a emplear en cada muestra , pero en la practica reali+ada por el t'cnico y los alumnos no se procedi a obtener muestras y procedimiento que nos comenta la revisin bibliogrfica ,se obviaron muc$os pasos. VI. CONCLICIONES ?prender la toma y envi de muestras es muy importante para nuestra formacin como +ootecnista porque podemos aplicar estos m'todos y estudiar estas muestras para ver q tipo de enfermedades afectan a nuestros animales y que para luego tomar m'todos preventivos El alumno est en la capacidad de reali+ar una toma y envio de cualquier tipo de muestra VII. BIBLIO>RAFIA ?3E3 ,-II2.. Bemoval of blood from laboratory mammals and birds. Cirst Beport of t$e 9;?FCB?MEFB!PC?FAC?LFMoint LorNing Hroup on Befinement. Laboratory Animals, "8, -G//. C?MEBE3 ?.B. O 9?L:EC6 C.C. ,-IIP.. ? neQ probability formula for surveys to substantiate freedom from disease. Prev. Vet. Med., /3, -G-8. $ttp)FFQQQ.sld.cuFserviciosFsarsFguiaRmuestras.pdf $ttp)FFQQQ.laboratorioslife.comFtomaRmuestras.$tm Figura 12: "n#ases 'ue se deben de utili.ar para el recojo de muestras % en#i. Figura 11: Materiales 'ue se #an utili.ar para el recojo de muestras.