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Relatrio 2014

Qumica
Equipamentos, Mtodos e
Parmetros Bioqumicos e Imunolgicos










Instituio de Estgio:
Labocentro, Laboratrio de Anlises Clnicas

Tutor (a) de Estgio:
Dr. Ana Frota

Orientador (a) de Estgio:
Cilene Vicente




Escola Superior de Tcnologia do Barreiro
Curso de Especializao Tecnolgica Tcnicas de Laboratrio
1

ndice

I. Equipamentos do Sistema Architect ...................................................................................................... 2
Architect ci8200 ............................................................................................................................................... 2
Architect ci4100 ............................................................................................................................................... 3
II. Mtodos dos Sistemas Architect ........................................................................................................... 5
Fotometria .......................................................................................................................................................... 5
Colorimetria ....................................................................................................................................................... 5
Fluorometria ...................................................................................................................................................... 6
Espectrometria de Absoro Atmica ..................................................................................................... 6
Nefelometria ...................................................................................................................................................... 6
Mtodo de Elctrodos de Ies Selectivos ............................................................................................... 6
Turbidimetria .................................................................................................................................................... 7
Eletroforese ........................................................................................................................................................ 8
Espetrometria de Massa ................................................................................................................................ 8
Fluorescncia Polarizada .............................................................................................................................. 9
Fotometria de Chama ..................................................................................................................................... 9
HPLC .................................................................................................................................................................... 10
Cromatografia Gasosa .................................................................................................................................. 11
III. Anexos ....................................................................................................................................................... 12
Architect Bulas Reagentes Bioqumica ................................................................................................. 12
Architect Bulas Reagentes Imunologia ................................................................................................. 31
IV. Bibliografia ............................................................................................................................................... 78

ndice de Tabelas

Tabela 1 - Parmetros Architect ci8200 ...................................................................................................... 2
Tabela 2 - Caracteristicas do c4000 e do i1000sr .................................................................................... 3
Tabela 3 - Parmetros Architect ci4100 ...................................................................................................... 4
Tabela 4 - Resultados CMV .............................................................................................................................. 47
Tabela 5 - Resultados Toxo ............................................................................................................................. 69
Tabela 6 - Nveis Fisiolgicos de Testosterona ....................................................................................... 72


2

I. Equipamentos do Sistema Architect
Architect ci8200
A Architect ci8200 uma mquina de soro integrado que realiza testes fotomtricos,
electroquimicos e imunolgicos. uma estao de trabalho tecnologicamente evoluida que
permite uma anlise de amostras rpida e eficaz.
Conjugando os testes quimicos e imunologicos numa unica plataforma, a Architect ci8200
uma juno de duas mquinas, a Architect c8000 e a Architect i2000.
Com uma capacidade de reagente para 25 parametros imunologicos e 68 quimicos a
Architect ci8200 capaz de realizar aproximadamente 1200 testes de quimica e 200 de
imunologia por hora.
A Architect ci8200 analisa uma vasta quantidade de parmetros quimicos e imunologicos,
que so divididos entre as duas maquinas conjudas(Architect c8000 e a Architect i2000).
Os parmetros analisados no laboratorio de anlises clnicas do Labocentro so:

Tabela 1 - Parmetros Architect ci8200
Architect ci8200
c8000 i2000
Albumina AFP
cido rico Anti-Hbs
ALT/GPT Anti-HCV
Amilase CMV IgG
AST/GOT CMV IgM
Bilirrubina Directa Folatos
Bilirrubina Total HAV IgG
Clcio HAV IgM
CK Hbs Ag
Colesterol PSA Total
Creatinina Rubella IgG
CRP Ultra Rubella IgM
Ferro T4 L
Fosfatase Alcalina Toxo IgG
Fsforo Toxo IgM
Gama-GT TSH
Glucose Vit B12
HDL
LDH
Magnsio
Microalbumina
Proteinas Totais
Proteinas Urina
Transferrina
Triglicridos
Ureia

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Architect ci4100
O Architect ci4100 resulta da integrao do Architect c4000 de bioqumica mais o Architect
i1000 para imunoensaios, junto com tecnologias avanadas como a Chemiflex e FlexRate.
O Architect c4000 foi concebido para rotinas menores, que rodam em torno de 800 testes
por hora. Este o nico sistema automatizado para laboratrios de menor porte que
apresenta a capacidade de ser integrado a um aparelho de imunoensaio.
O Architect i1000SR, rene as caractersticas de um aparelho de grande porte, mas voltado
para pequenas rotinas, conseguindo realizar at 100 testes por hora.
Na tabela 2 apresenta-se as caractersticas especficas de cada um destes sistemas:

Tabela 2 - Caracteristicas do c4000 e do i1000sr

As vantagens da integrao destes dois sistemas so custos mais acessveis, velocidade da
resposta do teste mais rpida, preo por teste reduzido, acesso tecnologia de ponta e
Caractersticas c4100 i1000sr
Mtodos de Deteco
Fotomtrico, Potenciomtrico,
Turbidimtrico
Quimioluminescncia (Chemiflex)
Testes At 800 testes / hora At 100 testes / hora
Tipos de Amostra Soro, Plasma, Urina, CSF Soro, Plama, Urina, Sangue
Tubos de Amostra Altura: 72-102 mm - Dimetro: 8,25-16,1 mm
Clice de Amostra Sim (50 ul volume morto)
Capacidade de Amostra
100 65
ci4100 - 180
Volume de Amostra 1-35 l Mdia: 7 l 10-150 l. Mdia: 50 l
Diluio Automtica Sim
Arraste da Amostra e Amostra 0,1 partes por milho
Capaciade de Reagente
(refrigerado)
90 posies de refrigerao mais
do ISE patenteada (Na +, K +, Cl-)
25 posies refrigerados
Tipo de reagente 95% Lquido pronto para uso 100% Lquido pronto para uso
Estabiliedade do reagente a Bordo 5-65 dias Mdia: 40 dias 30 dias
Frequncia da calibrao
C4000 - 1-60 dias Mdia: 25 dias
i1000sr - Conforme necessidade
ci4100 - Ver especificaes de C4000 e i1000sr
Deteco Cogulo e Bolha de
Amostra
Sim
Monitoramento Presso do
Reagente
Sim
Medio de Interferncia de amostra
Indices sricos = Lipemia,
Hemlise, lctercia
No
Centro de controle do Sistema Um nico computador com monitor colorido e tela de toque, teclado e mouse
Logs de Manuteno a Bordo Sim
Ajuda Cdigo de erro online Sim
Requerimentos de gua
15 litros de gua destilada por
hora durante operao normal
A gua destilada para diluir o
concentrado de soluo
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optimizao da rotina (um nico tubo pode ser utilizado tanto para bioqumica quanto para
imunologia), um extenso menu de testes de diagnstico, software de fcil utilizao e
capacidades avanadas de gerenciamento de amostra, capacidade de priorizar os testes de
emergncia, a capacidade de usar reagentes comuns entre plataformas e monitoramento da
amostra, melhorando assim o fluxo de trabalho e a produtividade.
Estas caractersticas no s minimizam o treinamento, mas tambm reduzem potenciais
contaminaes das amostras, levando a melhores resultados para os laboratrios, mdicos
como tambm para os utentes.
Os parmetros analisados no laboratorio de anlises clnicas do Labocentro so:

Tabela 3 - Parmetros Architect ci4100
Architect ci4100
c4000 i1000sr
Ferritina Anti-HBC II
Ig M Anti-HBe
Ig A HBe Ag
Ig E HBs Ag
Ig G HIV
ASO Anti-HBC Ig M
C3 T3 T
C4 T3 L
Factoreumatide TSH
A1AT T4 T
APO A1 CA 15-3
APO A2 CA 19-9
APO B CA 125
B2 MicroAlbumina CEA
PSA Livre
VIT D 25 OH
-hCG
Cortisol
Estradiol
Anti-Tg
Anti-TPO
FSH
LH
Progesterona
Prolactina
Testosterona
Anti-CCP
C-P

Nota: Em anexo encontram-se os parmetros descritos referidos na tabela 1 e na tabela 3,
separados por bioquimica e imunologia, respectivamente.

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II. Mtodos dos Sistemas Architect
Fotometria
A fotometria o ramo da Cincia que mede a luz visivel tal como ela percebida pelo olho
humano, no intervalo de 360 nm e 730 nm. Para este mtodo utilizado o fotmetro que
um aparelho que mede a intensidade da luz.
Os valores medidos devem ter correlao com a sensao visual produzida num Humano
normal exposto a esta mesma radiao. A resposta visual humana restrita a uma pequena
faixa do espetro eletromgnetico. Esta faixa est situada entre 380 nm e 770 nm,
dependendo do observador. Para que as medies fotomtricas por instrumentos sejam
valorizadas necessrio que os instrumentos possuam uma resposta semelhante do olho
humano. A partir dessa necessidade, a Comission Internationale de clairage (CIE),
estabeleceu uma curva de resposta do observador padro. Foram estabelecidas duas
curvas: uma para a viso fotpica (alta luminncia) e uma para viso escotpica (baixa
luminncia).
Algumas das grandezas associadas fotometria so: energia (unidade de medida do SI,
medida em joules, (J)), potncia luminosa (unidade de medida do SI, que consiste na taxa
de fluxo da energia luminosa por unidade de tempo, chamada lmen, sendo equivalente
unidade de fluxo radiante (watt)), intensidade luminosa (unidade de medida do SI, que
consiste na potncia luminosa por unidade de ngulo slido), iluminncia (unidade de
medida do SI, que consiste na potncia luminosa incidente, numa superfcie por unidade de
rea) e luminncia (potncia luminosa por unidade de rea projetada por unidade de ngulo
slido).

Colorimetria
A colorimetria consiste num processo da qumica analtica que se baseia na comparao
direta ou indireta da intensidade da cor e da qual se deduz a concentrao. A determinao
realizada atravs de medies da sensao de cor. Esta medio utilizada para a
determinao quantitativa de uma substncia dissolvida numa soluo. A substncia deve
ser colorida (absorver luz) ou convertida num composto colorido.

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Fluorometria
A Fluorimetria um mtodo de anlise usado na determinao quantitativa ou qualitativa
de substncias que so capazes de emitir fluorescncia. Sendo assim, pode ser muito til em
anlises clinicas, identificao de impurezas, estudos de interaes ligante-receptor, e at
mesmo quantificao. Aparelhos usados em fluorimetria podem ser usados tambm como
sistemas de deteco em outros mtodos, como cromatografia lquida de alta eficincia
(CLAE) e cromatografia gasosa.

Espectrometria de Absoro Atmica
A espectroscopia de absoro atmica (AAS) baseia-se no princpio que estabelece que os
tomos livres em estado estvel podem absorver a luz a um certo comprimento de onda. A
absoro especfica a cada elemento, nenhum outro elemento absorve este comprimento
de onda. AAS um mtodo utilizado para a anlise de metais, como por exemplo, Fe, Mg, Al,
Pb, Mn, entre outros, em amostras biolgicas, metalrgicas, farmacuticas e atmosfricas.

Nefelometria
Nefelometria um mtodo analitico de laboratrio que se baseia na diminuio da
intensidade pela difraco da luz e na interao da radiao eletromagntica com partculas
em suspenso.
A Nefelometria uma tcnica laboratorial analtica quantitativa. A nefelometria serve para
medir as concentraes das protenas plasmticas de uma amostra. Os aparelhos utilizados
na Nefelometria medem a turbidez analisando a difrao (desvio) da luz ao passar por uma
soluo contendo complexos imunolgicos. A nefelometria, tambm, usada para estudos
da poluio do ar, observando a disperso da radiao nos aerossis poluentes.

Mtodo de Elctrodos de Ies Selectivos
Este mtodo baseia-se no principio da osmose. Os electrodos de ioes selectivos tm
membranas onde passa apenas um io especifico entre os presentes. Um eletrodo de io
seletivo mede o potencial de um io especfico em soluo.
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Basicamente um eletrodo de io seletivo composto por um medidor (capacitado a leituras
em mV), uma sonda (seletiva para cada analito de interesse) e vrios elementos
descartveis usados para ajustes no pH ou concentraes inicas. Um eletrodo de ies
seletivo composto por uma membrana, usualmente anexada ao fundo de um tubo que
contm um eletrodo de referncia interno.
Esse eletrodo de membrana e um eletrodo externo de referncia so ento imersos numa
soluo de interesse. Uma vez que, os potenciais dos dois eletrodos de referncia so
constantes, qualquer mudana de potencial na clula devida a mudana no potencial na
membrana. Os Ies em soluo so quantificados pela medida da variao na voltagem,
resultando na distribuio de ies entre a membrana sensvel e a soluo.
O potencial medido corrente zero com respeito ao eletrodo de referncia que tambm
est em contato com a soluo. O potencial medido proporcional ao logaritmo da
concentrao do analito, potencial esse, que medido em relao a um eletrodo estvel de
referncia de potencial constante. A diferena de potencial entre os dois eletrodos
depender da condutividade do io especfico em soluo.
Tal condutividade est relacionada concentrao desse io especfico, permitindo,
portanto, ao usurio final fazer uma medio analtica desse io especfico.
Muitos eletrodos seletivos de ies tm sido desenvolvidos, para uma variedade de
diferentes ies.
Resumindo, um eletrodo seletivo de ies um sensor que converte a atividade de um io
especfico dissolvido numa soluo num potencial eltrico que pode ser medido por um
voltmetro ou um medidor de pH.
A voltagem teoricamente dependente em logaritmo da atividade inica de acordo com a
equao de Nerst. A parte sensvel do eletrodo de ies seletivo usualmente feita com uma
membrana, junto de um eletrodo de referncia.

Turbidimetria
A turbidimetria pode ser denominada, como uma tcnica de anlise que faz a medida da
turbidez de uma soluo devido presena de materiais em suspenso (gases, lquidos e
slidos orgnicos ou inorgnicos) ou em estado coloidais.
8

A turbidimetria pode ser denominada como uma tcnica analtica que faz a medida da
turbidez de uma soluo. A turbidez pode ser obtida pela medida da absorvncia da
amostra, num espectrofotmetro, num determinado .

Eletroforese
A eletroforese uma tcnica baseada na separao de partculas, que ocorre quando as
mesmas so dissolvidas ou suspensas num eletrlito, atravs do qual uma corrente eltrica
aplicada. tambm usada na identificao de substncias, no estudo de homogeneidade
de sistemas biolgicos e na determinao de pontos isoeltricos.
Esta tcnica consiste na migrao de molculas ionizadas, em soluo, de acordo com suas
cargas eltricas e pesos moleculares em campo eltrico. Molculas com carga negativa
migram para o plo positivo (nodo) e molculas com carga positiva migram para o plo
negativo (ctodo).
Em razo de algumas partculas serem substncias anfteras, ou seja, capazes de
adquirirem carga positiva ou negativa em funo do pH, indispensvel manter constante
o pH do meio durante a eletroforese, pelo uso de solues-tampo.
Eletroforese em gel: uma tcnica de separao de molculas onde as partculas que so
carregadas negativamente por um composto denominado SDS (detergente do decil sulfato
de sdio), com exceo do DNA que j possui um carter de catio, migram num
determinado gel durante a aplicao de uma diferena de potencial em direo a um
eltrodo positivo, sendo que este criado por uma corrente eltrica, e posteriormente so
aplicadas sobre o gel. Para a separao das molculas nesta tcnica, temos que levar em
considerao o tamanho da molcula, sendo que as de menor massa migram mais
rapidamente do que as de maior, pois possuem mais agilidade de mobilidade. Em alguns
casos o formato da molcula tambm influencia, pois dependendo do formato as mesmas
tero mais facilidade de migrar pelo gel. importante ressaltar que a eletroforese utilizada
normalmente para a separao de protenas e molculas de DNA e RNA. Pode ser
eletroforese em gel de poliacrilamida e em gel agarose.

Espetrometria de Massa
O mtodo Cromatografia Gasosa - Espectrometria de Massa (CG-EM) combina as
caractersticas da cromatografia gasosa e da espectrometria de massa para identificar
9

diferentes substncias numa amostra. O CG-EM amplamente aceite como padro-ouro na
identificao qumica de compostos orgnicos volteis e semi-volteis em misturas,
deteco de drogas, anlise ambiental, investigao de explosivos e identificao de
amostras desconhecidas. Alm disso, possvel identificar oligoelementos em materiais que
passariam despercebidos por outras tecnologias.
composto por duas partes principais: o cromatgrafo a gs e o espectrmetro de massa.
O cromatgrafo a gs utiliza uma coluna capilar que depende das dimenses da coluna
(comprimento, dimetro e espessura de pelcula) e das propriedades da fase (por exemplo:
5% de fenil polisiloxano). As diferenas das propriedades qumicas das molculas de uma
mistura iro separar as molculas enquanto a amostra percorre o comprimento da coluna.
As molcula saem (eludem) do cromatgrafo a gs em perodos de tempo distintos
(chamado tempo de reteno), permitindo que a corrente do espectrmetro de massa
capture, ionize, acelere, desvie e detecte as molculas ionizadas separadamente. O
espectrmetro de massa faz isso dividindo cada molcula em fragmentos ionizados e
detectando estes fragmentos pela razo massa/carga.
Estes dois componentes usados em conjunto possibilitam um grau de identificao de
substncia muito maior que se usados separadamente. A combinao dos dois processos
reduz a possibilidade de erro, uma vez que extremamente improvvel que duas molculas
diferentes se comportem da mesma maneira tanto no cromatgrafo a gs como no
espectrmetro de massa. Portanto, quando um espectro de massa com tempo de reteno
caracterstico aparece numa anlise por CG-EM , a certeza que o componente de interesse
est presente na amostra normalmente aumenta.

Fluorescncia Polarizada
A imunofluorescncia polarizada (IFP) uma tcnica de triagem recomendada para a
determinao de benzoilecgonina, produto de biotransformao da cocana, em urina de
usurios deste frmaco. .

Fotometria de Chama
A fotometria de chama a mais simples das tcnicas analticas baseadas em espectroscopia
atmica.
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Uma amostra que contenha caties metlicos inserida numa chama e analisada pela
quantidade de radiao emitida pelas espcies atmicas ou inicas excitadas. Os elementos,
ao receberem energia de uma chama, geram espcies excitadas que, ao retornarem para o
estado fundamental, libertam parte da energia recebida na forma de radiao.
Apesar da simplicidade da tcnica, diversos conceitos importantes esto envolvidos no
desenvolvimento de experimentos usando a fotometria de chama, desde os princpios de
espectroscopia at a estatstica no tratamento de dados, passando pela preparao da
amostra.

HPLC
A cromatografia lquida de alta eficincia, (HPLC, High Performance Liquid
Chromatography), uma extenso da cromatografia lquida clssica e est caracterizada
pelo uso de colunas em ao inox muito mais estreitas, com dimetro interno de 2-5 mm,
empacotadas com partculas de tamanho muito pequeno, 3-10 m, que constituem a fase
estacionria. A fase mvel circula sob alta presso ao longo da coluna com um fluxo
controlado. A alta presso permite anlises mais rpidas e o uso de fases estacionrias
constitudas por micropartculas permite uma elevada eficincia na separao.
A tcnica de HPLC revelou-se um dos mais eficientes mtodos cromatogrficos, em virtude
do desenvolvimento de instrumentao automatizada. Permitiu a injeco de volumes de
amostra cada vez mais pequenos e reprodutveis e a deteco de quantidades de analto
cada vez menores em sistemas de deteco em fluxo que indicam quando os componentes
sofrem eluio da coluna.
Esta tcnica veio complementar a cromatografia de gases (GC) no tipo de compostos que
podem ser separados. Apresentou tambm a vantagem de tempos de reteno mais curtos
e maior nmero de anlises por unidade de tempo. A introduo de colunas capilares, como
em GC, oferece um maior nmero de pratos tericos e uma melhor resoluo do que as
colunas padro. Outra vantagem que esta tcnica apresenta a de menor quantidade de fase
mvel, o que permite utilizar solventes txicos, raros, ou caros bem como o uso de fases
estacionrias dispendiosas.
Assim, um sistema de HPLC consiste em quatro componentes principais: uma bomba, um
sistema de injeco, uma coluna de separao e um detector, todos conectados numa
instalao resistente a altas presses, que podem ir at 300 atm.
11

Em geral, a tcnica de HPLC um processo dinmico onde as molculas dos analtos se
movem atravs de um enchimento poroso, por aco da fase mvel

Cromatografia Gasosa
A cromatografia gasosa uma tcnica que permite a separao de substncias volteis
arrastadas por um gs atravs de uma fase estacionria.
A fase estacionria pode ser um slido ou um lquido que propicia a distribuio dos
componentes da mistura entre as duas fases atravs de processos fsicos e qumicos, tais
como a adsoro, diferenas de solubilidades, volatilidades ou partilha.
Como fase mvel utilizado um gs, denominado gs de arraste, que transporta a amostra
atravs da coluna cromatogrfica at ao detector onde os componentes separados so
detectados.
Os gases mais utilizados so o hidrognio, azoto, hlio e rgon. A cromatografia gasosa
usada em geral para fins analticos.





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III. Anexos
Architect Bulas Reagentes Bioqumica

ICT (Na+, K+,Cl-) Diluente de amostras
O Architect cSystems ICT (Integrated Chip Technology) utilizado para quantificar o Sdio,
Potssio e Cloreto no soro, plasma ou urina.
O Sdio o catio que se apresenta em maior quantidade no fludo extracelular, tendo um
importante papel na distribuio normal de gua e controlo da presso osmtica nos
compartimentos do fludo extracelular.
O Potssio o catio intracelular mais abundante. A Concentrao de otssio nos eritrcitos
aproximadamente 23 vezes maior do que a sua concentrao no plasma.
O Cloreto o anio extracelular mais abundante. A maior parte do Cloreto ingerido
absorvido, sendo o excesso excretado com outros ies atravs da urina.

Prncipio/Metodologia
Os eltrodos de ies seletivos para o Sdio, Potssio e Cloreto utilizam membranas seletivas
para cada um destes ies. Um Potencial eltrico (Voltagem) desenvolvido atravs de
membranas entre os eltrodos de referncia e de medida de acordo com a equao de
Nernst. A voltagem comparada a uma voltagem pr determinada (calibrador) e convertida
a concentrao inica.
Metodologia: eltrodos de Ies selectivos diludos (indireto)

cido rico
O teste de cido rico utilizado para a determinao quantitativa de cido rico no soro,
plasma ou urina.
O cido rico um metablito das purinas, cidos nucleicos e nucleoprotenas.
Consequentemente, os nveis anormais podem ser um indicativo de uma desordem no
metabolismo destas substncias. A hiperuricemia pode ser observada na disfuno renal,
gota, leucemia, policitemia, aterosclerose, diabetes, hipotiroidismo, ou em algumas doenas
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genticas. A diminuio dos nveis de cido rico esta presente em pacientes com doena
de Wilson.

Princpio/Metodologia
No teste de cido rico, este oxidado a alantona pela uricase com a produo de perxido
de hidrognio (H2O2). O H2O2 reage com 4-aminoantipirina (4-AAP) e 3-2,4,6-tribromo-
hidroxibenzico (TBHB) na presena de peroxidase para produzir um corante de
quinoneimina. A alterao resultante na absorvncia a 548 nm, proporcional
concentrao de cido rico na amostra.
cido rico + O
2
+2H
2
O Alantona + CO
2
+ H
2
O
2

H
2
O
2
+4 AAP +HMMPS Corante quinoneimina
Metodologia: Uricase

Alanina Aminotransferase
O teste da Alanina Aminotransferase (ALT) utilizado para quantificar a Alanina
Aminotransferase no soro ou plasma.
A ALT, tambm denominada como glutamato piruvato transaminase (GPT), uma enzima
involvida no metabolismo dos aminocidos. encontrada em vrios tecidos mas os maiores
nveis so encontrados no fgado e tecidos renais.

Prncipios/Metodologias
A ALT presente na amostra cataliza a transferncia do grupo amina da L-alanina para -
ketoglutarato, formando piruvato e L-glutamato.
O Piruvato na presena de NADH e Lactato dehidrogenase (LD) reduz-se a L-lactato. Nesta
reao o NADH oxidado a NAD, sendo monotorizada medindo a taxa do decrscimo da
absorvncia aos 340nm devido oxidao do NADH a NAD.
Metodologia: NADH (sem P-5-P).

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Albumina BCG
O teste da Albumina BCG utilizado para quantificar a Albumina BCG no soro ou plasma.
A Albumina a protena mais abundante nos indivduos comuns.

Prncipio/Metodologia
O Procedimento utilizado especificamente baseado na ligao de verde de bromocresol
com albumina produzindo um complexo colorido. A absorvncia do complexo a 628 nm
diretamente proporcional concentrao da albumina na amostra.
Metodologia: Verde de Bromocresol

Amilase
O teste da Amilase utilizado para quantificar a Amilase no soro, plasma ou urina.
Os indivduos comuns tm uma baixa, mas clculavel, atividade da -amilase no soro e urina,
que produzida no pncreas e glndulas parotidas.

Prncipios/Metodologia
A -amilase hidrolisa o 2-cloro-nitrofenilo--D-maltotrioside (CNPG3) para libertar 2-
cloro-4-nitrofenol (CPNP) e formar 2-cloro-4-nitrofenilo--D-maltosdeo (CNPG2),
maltotriose e glucose. O ritmo de formao de 2-cloro-4-nitrofenol pode ser detetado
espetrofotometricamente a 404 nm para fornecer uma medida direta da atividade da -
amilase na amostra.
Metodologia: substrato CNPG3

ASO
Os reagentes ASO so utilizados para quantificar a antiestreptolisina-O no soro.
O estreptococo -hemoltico do grupo A, produz uma srie de toxinas que podem atuar
como antignos. Uma destas exotoxinas a estreptolisina-O. O organismo afetado produz
anticorpos especificos contra as referidas exotoxinas, destacando-se a antiestreptolisina-O.
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Prncipio/Metodologia
O reagente ASO uma suspenso de particulas de ltex de poliestireno de tamanho
uniforme revestidas com estreptolisina-O. Quando uma amostra que contm
antiestreptolisina-O misturada com o reagente produz-se uma clara aglutinao que pode
ser medida por turbidimetria.

Aspartato Aminotransferase
O teste do Aspartato Aminotransferase utilizado para quantificar a AST no soro ou plasma.
O Aspartato Aminotransferase, tambm referido como glutamato oxaloacetato
transaminase (GOT), um dos grupos de enzimas que cataliza a interconverso de
aminocidos e -keto acidos transferindo grupos amina.

Prncipios/Metodologias
O AST presente na amostra cataliza a transferncia do grupo amina de L-aspartato para -
ketoglutarato, formando oxaloacetato e L-glutamato. O oxaloacetato na presena de NADH
e malato dehidrogenase (MDH), reduzido a L-malato. Nesta reao o NADH oxidado a
NAD. A reao monotorizada medindo a taxa de decrscimo da absorvncia a 340 nm
devido oxidao de NADH a NAD.
Metodologia: NADH (sem P-5-P)

Bilirrubina Direta
O teste da bilirubina direta utilizado para quantificar a bilirubina direta no soro ou plasma.
Os eritrcitos no fim do seu tempo de vida so colapsados no sistema reticuloendotelial,
principalmente no bao. Uma vez que o ferro removido o hemo resultante depois
convertido a bilirubina. Outras fontes de bilirubina incluem o colapso da mioglubina e
citocromos e o catabolismo de eritrcitos imaturos na mdula ssea.

Prncipio/Metodologia
A determinao de bilirubina geralmente baseada na reao da bilirubina com cido
sulfanilico diazotado. Neste mtodo, a bilirubina direta liga-se com um sal diaznio na
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presena de cido sulfmico para formar um composto colorido azobilirubina. O aumento
da absorvncia a 548 nm devido azobilirubina proporcional concentrao bilirubina
direta.
Metodologia: Reao de Diazo
Bilirrubina Total
O teste bilirrubina total utilizado para a determinao quantitativa de bilirrubina total no
soro ou plasma.
Os eritrcitos no fim do seu tempo de vida so colapsados no sistema reticuloendotelial,
principalmente no bao. Uma vez que o ferro removido o hemo resultante depois
convertido a bilirubina. Outras fontes de bilirubina incluem o colapso da mioglubina e
citocromos e o catabolismo de eritrcitos imaturos na mdula ssea.

Prncipio/Metodologia
A bilirrubina total (conjugada e no conjugada) liga-se a um reagente de diazo na presena
de um surfactante para formar azobilirrubina. A reao de diazo acelerada pela adio de
surfactante como um agente solubilizante. O aumento da absorvncia a 548 nm devido
azobilirrubina directamente proporcional concentrao de bilirrubina total.
Metodologia: Sal de diazonio.

Clcio
O teste do Clcio utilizado para quantificar o Clcio no soro, plasma ou urina. A maior parte
do clcio presente no Corpo Humano encontra-se nos ossos. O restante Clcio est presente
no soro e tem vrias funes, como por exemplo, os ies de clcio diminuem a excitabilidade
neuromuscular, participam na coagulao do sangue e ativam algumas enzimas.

Principio/Metodologia
O corante Arsenazo-III reage com o clcio numa soluo cida para formar um complexo
azul-prpura. A cor desenvolvida medida a 660 nm e proporcional concentrao da
amostra.
Metodologia: Arsenazo- III
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Colesterol
O teste do Colesterol utilizado para quantificar o Colestrol no soro ou plasma.
O clculo dos nveis de colesterol no soro pode servir como indicador da funcionalidade do
fgado, funcionalidade biliar, absoro intestinal, propenso a doenas da artria coronria
e funcionalidade da tiride.

Princpios/Metodologia
Os esteres do Colesterol so enzimaticamente hidrolisados por colesterol esterase para
colesterol e cidos gordos livres.
O Colesterol livre, incluindo o originalmente presente, depois oxidado pela colesterol
oxidase para colest-4- ene-3-one e perxido de hidrognio.
O perxido de hidrognio combina com o cido hidroxibenzico (HBA) e 4-aminoantipirina
para formar um cromforo (corante quinoneimina) que quantificado a 500 nm.
Metodologia: Enzimtica

Complemento C3
O teste do Complemento C3 utilizado para quantificar o C3 no soro ou plasma.
Todas as protenas complementares so reactivos de fase aguda e aumentam rapidamente
as concentraes em caso de inflamaes. Contrariamente, os niveis de catabolismo da
proteina complementar podem aumentar consideravelmente em vrias doenas
autoimunes, porque a determinao dos compenentes do complemento representa uma
medida esttica da concentrao liquida que resulta de um balano dinmico entre a sintese
e o catabolismo do complemento.

Prncipio/ Metodologia
O teste C3 um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da turbidez da
amostra causada pela formao de complexos imunes quando o anticorpo para o C3
adicionado amostra.
Metodologia: Imunoturbidimtrico
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Complemento C4
O teste do Complemento C4 utilizado para quantificar o C4 no soro ou plasma.
Todas as protenas complementares so reactivos de fase aguda e aumentam rapidamente
as concentraes em caso de inflamaes. Contrariamente, os niveis de catabolismo da
proteina complementar podem aumentar consideravelmente em vrias doenas
autoimunes, porque a determinao dos compenentes do complemento representa uma
medida esttica da concentrao liquida que resulta de um balano dinmico entre a sintese
e o catabolismo do complemento.

Prncipio/ Metodologia
O teste C4 um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da turbidez da
amostra causada pela formao de complexos imunes quando o anticorpo para o C4
adicionado amostra.
Metodologia: Imunoturbidimtrico

Creatina Quinase
O teste da creatina quinase utilizado para quantificar a creatina quinase no soro ou plasma.
As medies da creatina quinase so utilizadas no diagnostico e tratamento de doenas
associadas aos ossos, musculos, corao, sistema nervoso central e tiroide.

Princpio/Metodologia
A creatina quinase presente na amostra cataliza a transferncia de um grupo fosfato de
elevada energia de creatina fosfato para ADP. O ADP produzido nesta reao
subsequentemente usada para glucose fosforilada para produzir glucose-6-fosfato (G-6-P)
na presena de hexoquinase. A G-6-P depois oxidada pela glucose-6-fosfato dihidrogenase
(G-6-PDH) com a simultnea reduo de NADP a NADPH. A taxa de formao de NADPH
monotorizada a 340 nm e proporcional atividade da creatina quinase na amostra. Estas
reaes ocorrem na presena de N-acetilo-L-cisteina (NAC) que est presente como uma
enzima ativadora.
Metodologia: NAC (N-acetilo-L-cisteina)
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Creatinina
O teste da creatinina utilizado para quantificar a creatinina no soro, plasma ou urina. A
creatinina eliminada do sangue por filtrao glumerular.
A medio da creatinina no soro utilizada para diagnosticar e monotorizar doenas renais
agudas e crnicas, estimar a taxa de filtrao glumerular ou a ter acesso ao estado renal dos
paciente que fazem dilise.

Prncipio/Metodologia
A pH alcalino a creatinina na amostra reage com o picrato formando um complexo
creatinina-picrato. A taxa de aumento da absorvncia a 500 nm devido formao deste
complexo diretamente proporcional concentrao de creatinina na amostra.
Metodologia: Picrato alcalino cintico

CRP VARIO
O teste MULTIGENT CRP Vario (CRPVa) utilizado para a determinao
imunoturbidimtrica quantitativa de protena C-reativa no soro ou plasma.
A proteina C-reativa (CRP) uma protena de fase aguda, em que a sua concentrao
aumenta no especificamente em resposta inflamao. A CRP tende a aumentar como
resultado num processo inflamatrio, mais notvel na resposta em infees bacterianas
pneumoccicas, doenas histolticas e a uma variedade de outros tipos de doena.

Prncipio/Metodologia
A CRPVa um imunoteste de latx desenvolvido para medir os nveis de CRP Vario no soro
e plasma.
Quando uma reao antignio-anticorpo ocorre entre a CRP na amostra e o anticorpo anti-
CRP, que foi absorvido para as partculas de latx, ocorre aglutinao. Esta aglutinao
detetada com uma variao de aborvncia (572 nm), com a taxa de variao sendo
proporcional quantidade CRP na amostra.
Metodologia: Turbidimetria/ Imunoturbidimetria
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Ferritina
Os reagentes Ferritina so utilizados para quantificar a ferritina no soro ou plasma.
A Ferretina uma macromolcula 450 kD formada por uma uma parte proteica de 24
subunidade que envolve um ncleo de ferro. As isoferritinas diferenciam-se na proporo
de subunidades bsicas L e cidas H. As isoferritinas bsicas encontram-se no fgado,
bao e medula ossea, sendo os responsaveis pelo armazenamento de ferro a longo prazo.
As isoferritinas cidas encontram-se principalmente no miocrdio, placenta e tecido
tumoral, funcionando como intermediarias na transferencia do ferro.

Prncipio/Metodologia
O reagente Ferritina (FER) uma suspenso de particulas de ltex de poliestireno de
tamanho uniforme revestidas com IgG de coelho anti-ferritina humana. Quando uma
amostra que contm ferritina misturada com o reagente produz-se uma clara aglutinao
que pode ser medida por turbidimetria.

Ferro
O teste do ferro utilizado para a deterimnao colormetrica do ferro sem desprotonao
no soro ou plasma.
O ferro existe nos fludos biologicos como componente da hemoglobina e mioglubina e
limitado no soro e no plasma.

Prncipio/Metodologia
A um pH de 4,8, o ferro liberto da transferrina ao qual est vinculado, e depois reduzido
quantitativamente a um estado ferroso. O ferro forma conjuntamente com a ferene-s, um
complexo estavel colorido, onde a intensidade de cor proporcional quantidade de ferro
na amostra.
Metodologia: Ferene




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Fosfatase Alcalina
O teste da Fosfatase Alcalina utilizado para quantificar a Fosfatase Alcalina no soro ou
plasma.
A Fosfatase Alcalina Humana, consiste num grupo de pelo menos cinco isoenzimas tecido-
especficas que catalizam a hidrlise do monoster de fosfato a pH alcalino.

Prncipio/ Mtodologia
Vrios Substratos, como glicerofosfato, fenil-fosfato, p- nitrofenilo fosfato, tm sido usados
para medir a atividade da fosfatase alcalina.
A Fosfatase Alcalina presente na amostra cataliza a hidrlise do p- nitrofenilo fosfato incolor
formando p- nitrofenilo e fosfato inorgnico. No pH do teste (alcalino), o p- nitrofenilo est
ona forma ferxido amarelo. O aumento dos nveis de absorvncia a 404nm, diretamente
proporcional atividade da fosfatase alcalina na amostra.
Metodologia: Para-nitrofenilo- fosfato

Fsforo
O teste fsforo utilizado para a determinao quantitativa de fsforo no soro, plasma ou
urina.
A maioria dos fsforo do corpo (80% a 85%) est presente nos ossos como hidroxiapatita.
O restante do fosfato est presente como fsforo inorgnico e steres de fosfato. O clcio e
o fsforo no soro geralmente apresentam uma relao de reciprocidade. O aumento de
fsforo no soro pode ocorrer na hipervitaminose D, hipoparatiroidismo, e insuficincia
renal. Os reduzidos nveis sricos de fsforo so vistos em raquitismo (Deficincia de
vitamina D), hiperparatireoidismo, e sndrome de Fanconi.

Prncipio/Metodologia
O fosfato inorgnico reage com o molibdato de amnio, para formar um complexo
heteropolicido. O uso de um surfactante elimina a necessidade a preparar-se um filtrado
sem protena. A absorvncia a 340 nm directamente proporcional ao nvel de fsforo
22

inorgnico na amostra. Os ensaios em branco devem ser executados para corrigir qualquer
absorvncia no especfica na amostra.
Metodologia: Fosfomolibdato

Gama-Glutamil Transferase
O teste da gama-glutamil transferase (GGT) utilizado para quantificar a gama-glutamil
transferase no soro ou plasma.
A GGT foi primeiramente identificada no tecido renal. Apesar do tecido renal ter o nivel mais
elevado de GGT. Numa fase primria, a enzima presente no soro, parece ser originada no
sistema hepatobiliario, e a GGT elevada em varias formas de doena do figado.

Principio/Metodologia
A GGT cataliza a transferncia do grupo gamma-glutamil do substrato doador (L-gamma-
glutamil-3-carboxido-4-nitroanilido) para o recetor glicilglicina para produzir 3-carboxido-
4-nitroanilina. A taxa de absorvncia aumenta a 412 nm e diretamente proporcional a GGT
na amostra.
Metodologia: Substrato L-Gamma-glutamilo-3-carboxido-4-nitroanilido

Glucose
O teste da glucose utilizado para quantificar a glucose no soro, plasma, urina ou fludo
cerebrospinal (CSF).
A determinaao da glucose no sangue, o procedimento quimico clinico laboratorial
realizado mais frequententemente, sendo tambem utilizado como auxilio no diagnostico e
tratamento da diabetes.

Prncipio/ Metodologia
A Glucose fosforilada pela hexoquinase (HK) na presena de ATP e ies magnsio para
produzir G-6-P e ADP.
23

A G-6-PDH oxida especificamente a G-6-P para 6-fosfogluconato em simultneo com a
reduo de NAD para NADH. Uma micromol de NADH produzida para cada micromol de
glucose consumida. O NADH produzido absorve luz a 340nnm e pode ser detetado
espetrofotometricamente dando-se um aumento na absorvncia.
Metodologia: Hexoquinase/G-6-PDH

Imunoglobulina A
O teste da imunoglobulina A (IgA) utilizado para a determinao quantitativa de IgA no
soro ou plasma.
Aproximadamente 10% a 15% de imunoglobulina no soro IgA. A IgA predominante na
forma monomrica, sendo constituda de 10% a 15% por dmeros. A IgA secretora,
encontrada em lgrimas, suor, saliva, leite, colostro, e secrees gastrointestinais e
bronquiais. sintetizada principalmente pelas clulas plasmticas nas membranas mucosas
gastrointestinais e bronquiais e lactantes dctulos mamrios.

Prncipio/Metodologia
O teste de IgA um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da turbidez
da amostra, que causada pela formao de complexos imunes insolveis, quando o
anticorpo IgA adicionado amostra. A amostra que contem a IgA incubada com um
tampo, e uma amostra em branco realizada antes da adio do anticorpo IgA. Na presena
de um anticorpo apropriado em excesso, a concentrao de IgA medida como uma funo
de turbidez.
Metodologia: Imunoturbidimtrica

Imunoglobulina E
Os reagentes Imunoglobulina E so utilizados para quantificar a Imunoglobulina E no soro
ou plasma.
A determinao de IgE realiza-se em rotina para o diagnostico e monotorizao ps-
operatoria da eficacia do tratamento de doenas atpicas tais como, asma tpica, rinite,
dermatite, etc, assim como doenas parasitrias e mielomas IgE.
24

Prncipios/Metodologias
O reagente IgE uma suspenso de particulas de ltex de poliestireno de tamanho uniforme
revestidas com anticorpo monoclonal anti-IgE Humana. Quando uma amostra que contm
IgE misturada com o reagente, produz-se uma clara aglutinao que pode ser medida por
turbidimetria.

Imunoglobulina G
O teste Imunoglobulina G (IgG) utilizado para a determinao quantitativa de IgG no soro
ou plasma.
A IgG a principal imunoglobulina no sangue e produzida em grandes quantidades
durante respostas imuno-secundrias.

Prncipio/Metodologia
O teste de IgG um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da turbidez
da amostra, causada pela formao de complexos imuno-insolveis, quando o anticorpo IgG
adicionado amostra. A amostra que contem a IgG incubada com um tampo, e uma
amostra em branco realizada antes da adio do anticorpo IgG. Na presena de um
anticorpo apropriado em excesso, a concentrao de IgG medida como uma funo de
turbidez.
Metodologia: Imunoturbidimtrica

Imunoglobulina M
O teste Imunoglobulina M (IgM) utilizado para a determinao quantitativa de IgM no soro
ou plasma.
A IgM primariamente presente como pentamero, a primeira classe de imunoglobulina
produzida durante uma inicial imuno resposta e os complexos antgenio-IgM fixam
ativamente o complemento.


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Prncipio/Metodologia
O teste de IgM um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da turbidez
da amostra, causada pela formao de complexos imunes insolveis, quando o anticorpo
IgM adicionado amostra. A amostra que contem a IgM incubada com um tampo, e uma
amostra em branco realizada antes da adio do anticorpo IgM. Na presena de um
anticorpo apropriado em excesso, a concentrao de IgM medida como uma funo de
turbidez.
Metodologia: Imunoturbidimtrica

Lactato desidrogenase (LD)
O teste lactato dehidrogenase (LD) utilizado para a determinao quantitativa de IgA no
soro ou plasma.
A dehidrogenase de lactato (LD) uma enzima que pode ser encontrada na maioria dos
tecidos principais. Os nveis sricos de LD so elevados numa ampla variedade de condies
patolgicas, doenas cardacas e hepticas mais notavelmente. LD uma enzima
tetramrica composta por duas subunidades bsicas. Cinco isoenzimas podem ser
observadas aps a electroforese. As propores relativas das isoenzimas variam com a fonte
de tecido do LD.

Prncipio/Metodologia
A LD catalisa a converso de lactato em piruvato, a reaco directa e a converso de piruvato
em lactato, a reaco inversa. A enzima pode ser testada utilizando um ou outro material,
como um substrato, no entanto, as actividades enzimticas obtidas pelos dois mtodos no
so directamente comparveis.
A reaco para directa no necessita de pr-incubao para esgotar os cidos -ceto
endgenos e exibe linearidade ao longo de uma amplo gama de actividade em amostras de
doentes. Este mtodo utiliza o LD reaco directa. O Lactato e o NAD + so convertidos em
piruvato e NADH atravs da aco de LD. O NADH absorve fortemente a luz a 340 nm,
enquanto que o NAD + no. A taxa de aumento da absorvncia a 340 nm diretamente
proporcional a actividade de LD na amostra.
Metodologia: Lactato para piruvato (NADH)
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Magnsio
O teste magnsio utilizado para a determinao quantitativa de magnsio no soro, plasma
ou urina.
O magnsio um nutriente essencial que est envolvido em muitas funes bioqumicas.
Tem um papel estrutural em cidos nucleicos e partculas ribossomais, funciona tambm
como um activador de diversas enzimas e possui um papel importante na produo de
energia na fosforilao oxidativa.

Prncipio/Metodologia
Este mtodo utiliza um corante arsenazo que se liga preferencialmente com o magnsio. A
absorvncia do complexo de magnsio-arsenazo medida a 572 nm e proporcional
concentrao de magnsio presente na amostra. A interferncia de clcio impedida pela
incorporao de um agente quelante de clcio.
Metodologia: Arsenazo

MicroAlbumina
O teste da microalbumina utilizado para a determinao quantitativa de albumina na urina
humana.
A microalbumina uma condio caracterizada pelo aumento da excreo de urina, numa
evidente inesistencia de nefropatia, e pode ser usada para prevenir a nefropatia diabtica.

Prncipio/Metodologia
O teste da microalbumina um imuno teste turbidimtrico, que usa anticorpos policlonais
contra a albumina humana. Quando a amostra misturada com os reagentes, a albumina na
amostra combina-se com o anticorpo(cabra) anti-albumina humana no reagente, para se
obter um agregado insoluvel que provoca um aumento da turvao na soluo. O grau de
turvao proporcional concentrao de albumina presente na amostra e pode ser
medido opticamente
Metodologia: Turbidimetria/Imunoturbidimetria

27

Proteina Total
O teste proteina total utilizado para a determinao quantitativa de proteina total no soro
ou plasma.
As protenas do plasma derivam primariamente da sntese, no fgado, plasma clulas,
gnglios linfticos, bao e medula ssea. Em estados de doena, tanto o nvel de protena do
plasma total como a proporo das fraces individuais podem ser alterados de forma
dramtica a partir dos seus valores normais.

Prncipio/Metodologia
Os polipptidos que contm pelo menos duas ligaes peptdicas reagem com o reagente de
biureto. Em soluo alcalina, os ies de cobre formam um complexo de coordenao com
protena de azoto com muito pouca diferena entre albumina e globulina com base na
protena-azoto.
Metodologia: Biureto

RF
Os reagentes RF so utilizados para determinar quantitativamente os fatores reumatides
(RF) no soro.
A maioria dos soros de pacientes que sofrem de artrite reumatoide tm propriedade de
reagir com a imunoglobulina G, no apenas humana mas tambm de outras espcies. A
causa disto a presena nos citados soros de uma imunoglobulina (geralmente do tipo IgM)
conhecida como fator reumatoide. Esta reao do tipo antignio-anticorpo, sendo que nela
o fator reumatide atua como se fosse um anticorpo.

Prncipio/Metodologias
O reagente RF uma suspenso de particulas de ltex de poliestireno de tamanho uniforme
revestidas com gammaglobulina humana. Quando uma amostra que contm RF misturada
com o reagente, ocorre uma clara aglutinao que pode ser medida por turbidimetria.


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Transferrina
O teste de transferrina utilizado para a determinao quantitativa de transferrina no soro
ou plasma.
Transferrina uma -globulina, principalmente sintetizada no fgado, a principal protena
responsvel pelo transporte de ferro. A transferrina transporta ies frricos das reservas
intracelulares ou ferritina mucosa para a medula ssea, onde precursores de eritrcitos e
outras clulas tm recetores de transferrina superfcie. A transferrina responsvel por
50% a 70% da capacidade de ligao de ferro do soro. Uma vez que outras protenas podem
ligar-se o ferro, a concentrao de transferrina correlaciona-se com, mas no est idntico
a, TIBC.

Prncipio/Metodologia
O teste da transferrina um procedimento imunoturbidimtrico que mede o aumento da
turbidez da amostra, que causada pela formao de complexos imunes insolveis, quando
o anticorpo transferrina adicionado amostra. A amostra que contem a transferrina
incubada com um tampo, e uma amostra em branco realizada antes da adio do
anticorpo transferrina. Na presena de um anticorpo apropriado em excesso, a
concentrao de transferrina medida como uma funo de turbidez.
Metodologia: Imunoturbidimtrica

Triglicridos
O teste de triglicridos utilizado para a determinao quantitativa de triglicridos no soro
ou plasma.
Os triglicridos so uma famlia de lipdios absorvidos a partir da alimentao e produzidos
endgenamente a partir de hidratos de carbono e cidos gordos. A medio de triglicridos
importante no diagnstico e tratamento de hiperlipidemia. Estas doenas podem ser
genticas ou secundrias para outros distrbios, incluindo nefrose, diabetes mellitus, e
distrbios endcrinos.


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Prncipio/Metodologia
Os triglicridos so enzimaticamente hidrolisados pela lipase de cidos gordos livres e
glicerol. O glicerol fosforilado por trifosfato de adenosina (ATP) com glicerol-quinase (GK)
para produzir o glicerol-3-fosfato e difosfato de adenosina (ADP). O Glicerol-3-fosfato
oxidado a fosfato de dihidroxiacetona (DAP) por glicerol fosfato oxidase (GPO) produzindo
perxido de hidrognio (H2O2). Numa reao de cor catalisada pela peroxidase, o H2O2 reage
com 4-aminoantipirina (4-AAP) e 4-clorofenol (4-CP) para produzir um corante de cor
vermelha. Aabsorvncia deste corante proporcional concentrao de triglicridos
presente na amostra.
Metodologia: glicerol fosfato oxidase
Ultra HDL
O teste de ultra HDL (UHDL) utilizado para a determinao quantitativa de colesterol HDL
no soro ou plasma. As lipoprotenas plasmticas so partculas esfricas que contm
quantidades variveis de colesterol, triglicridos, fosfolpidos e protenas. Os fosfolpidos,
colesterol livre e protenas constituem a superfcie exterior da partcula de lipoprotena,
enquanto que o ncleo interno contm principalmente colesterol esterificado e
triglicridos. Estas partculas servem para solubilizar e transportar o colesterol e os
triglicridos no sangue.

Princpio/Metodologia
O teste Ultra HDL um mtodo homogneo para medir directamente as concentraes de
colesterol de HDL no soro ou plasma, sem a necessidade de pr-tratamento off-line ou
etapas de centrifugao. O mtodo utiliza um formato de dois reagentes e depende das
propriedades de um nico detergente. Este mtodo baseia-se na acelerao da reaco de
colesterol oxidase (CO) com o colesterol no-HDL no esterificado, e dissolvendo o
colesterol HDL usando selectivamente um detergente especfico. No primeiro reagente, o
colesterol no-HDL no esterificado sujeito a uma reaco enzimtica e o perxido gerado
consumido atravs de uma reaco de peroxidase com DSBmT produzindo um produto
incolor. O segundo reagente consiste num detergente (capaz de solubilizar o colesterol
HDL), colesterol-esterase (EC), e acoplador cromogneo para desenvolver a cor para a
determinao quantitativa do colesterol HDL.
Metodologia: Accelerator Seletiva Detergente
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Ureia
O teste de ureia utilizado para a determinao quantitativa de ureia no soro, plasma ou
urina.
Os resultados obtidos por este teste, so utilizadas no diagnstico de certas doenas renais
e metablicas. A determinao do nitrognio da ureia no soro um teste amplamente
utilizado para a avaliao da funo renal. O teste frequentemente requerido em conjunto
com o teste da creatinina srica para diagnstico diferencial da hiperuremia pr-renal, renal
e ps-renal.

Princpio/Metodologia
O teste da ureia uma modificao de um procedimento totalmente enzimtico. O teste
realizado como um ensaio cintico em que a taxa inicial da reaco linear para um perodo
limitado de tempo. A ureia na amostra hidrolisada pela urease em amonaco e dixido de
carbono. A segunda reaco, catalisada pela glutamato desidrogenase (GLD) converte a
amnia e a -cetoglutarato ao glutamato e gua com a oxidao concomitante de reduzida
nicotinamida-adenina-dinucletido (NADH) para adenina nicotinamida dinucletido
(NAD). Duas moles de NADH so oxidadas para cada mole de ureia presente. A velocidade
inicial de diminuio da absorvncia a 340 nm proporcional concentrao da ureia na
amostra.
Metodologia: Urease

Urina/CSF Protena
O teste da Urina/Protena CSF (UPro) utilizado para a determinao quantitativa de
protena na urina ou fludo cerebrospinal (CSF). Os resultados da protena CSF so
utilizados no diagntico e tratamento de condies como meningite, tumores cerebrais e
sistema nervoso central.
O papel do sistema renal na conservao de protenas plasmticas tem sido reconhecido
algum tempo. Soube condies psicologicas normais, proteinas de reduzido peso molecular
como a insulina passam atravs de glomrulos em quantidades relativamente grandes. As
protenas de tamanho intermdio como a transferrina e a albumina, tambm passam em
quantidades relativamente pequenas. A maior parte destas protenas so reabsorvidas nos
tubos renais.
31

Prncipios/ Metodologias
O teste UPro um procedimento turbidimtrico em que o cloreto de benzetnio utilizado
como um agente desnaturante de proteinas. As protenas presentes na urina ou CSF so
desnaturadas pelo cloreto de benzetnio, resultando a formao de uma suspenso
refinada, que quantificada turbidimetricamente a 404 nm.
Metodologia: cloreto de benzetnio

Architect Bulas Reagentes Imunologia
25- Hidroxivitamina D
O 25-hidroxivitamina D um imunoensaio de micropartculas por quimioluminescncia
(CMIA) para a determinao quantitativa de 25-hidroxivitamina D no soro ou plasma
humano. utilizado como meio auxiliar na avaliao da presena de nveis suficientes de
vitamina D no organismo.
A vitamina D uma pr-hormona esteride lipossulvel produzida fotoquimicamente na
pele a partir do 7-desidrocolesterol.
Existem duas formas da vitamina D biologicamente relevantes: a vitamina D3
(colecalciferol) e a vitamina D2 (ergocalciferol). Tanto uma como a outra podem ser
absorvidas apartir dos alimentos, sendo a vitamina D2 uma fonte arteficial, mas estima-se
que apenas 10-20% da vitamina D fornecida atravs da alimentao. As vitaminas D3 e D2
podem encontrar-se em suplementos vitaminicos. A vitamina D convertida na hormona
activa 1,25-hidroxivitamina D (calcitriol) atravs de duas reaces de hidroxilao.
A primeira hidroxilao converte a vitamina D em 25-hidroxivitamina D e ocorre no fgado.
A segunda converte a 25-hidroxivitamina D na 1,25-hidroxivitamina D biologicamente
activa e ocorre nos rins, bem como em muitas outras clulas do organismo. A maioria das
clulas apresenta o receptor da vitamina D e cerca de 3% do genoma humano directa ou
indirectamente regulado pelo sistema endcrino da vitamina D.
A principal forma de armazenamento da vitamina D a 25-hidroxivitamina D e est
presente no sangue numa de concentrao de mais de 1:1000 comparativamente com a
1,25-hidroxivitamina D activa. A 25-hidroxivitamina D tem uma semi-vida de duas, trs
semanas, enquando que a da 1,25-hidroxivitamina D de quatro horas. Por essa razo a 25-
hidroxivitamina D o analito da excelncia para a determinao do estado da vitamina D.
32

Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra e o reagente de pr-tratamento so combinados. Uma alquota de amostra pr-
tratada, combinada com o diluente de ensaio e as micropartculas paragmticas revestidas
de anticorpos de anti-vitamina D para criar uma mistura da reaco.
A vitamina D presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas de anticorpos de
anti-vitamina D. Aps a incubao com vitamina D biotinilada, um complexo de conjugado
de anticorpos de anti-biotina, marcado com laranja de acridna, adicionada mistura de
reaco e liga-se aos locais de ligao desocupados das micropartculas revestidas de
anticorpos de anti-vitamina D.
Aps a lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so
adicionadas e a reaco quimioluminescente resultante medida como unidades relativas
de luz (RLU). Existe uma relao indirecta entre a quantidade de vitamina D na amostra e
as RLUs detectadas pelo sistema ptico.

AFP (Alfa-Fetoprotena)
O ensaio do alfa-fetoprotena (AFP) um imunoensaio quimioluminescente de
micropartculas (CMIA) da determinao quantitativa de AFP no:
Soro humano ou plasma para ajudar no tratamento de utentes com cancro testicular no-
seminomatoso.
Soro, plasma e fluido amnitico humanos de 15 a 21 semanas de gestao para auxiliar na
deteco de defeitos de tubo neural (DTN) aberto em fetos. Os resultados dos testes,
combinados com ultrassonografia ou amniografia, so um mecanismo seguro e eficaz da
deteco de DTN aberto em fetos.
A descoberta da alfa-fetoprotena (AFP) no soro fetal foi registrado pela primeira vez por
Bergstrand e Czar em 1.956. A alfa-fetoprotena uma glicoprotena de cadeia nica
polipeptdica com um peso molecular de aproximadamente 70.000 daltons. As
propriedades fsico-qumicas e a composio de aminocidos so semelhantes aos da
albumina.
A sntese de AFP ocorre principalmente, no saco gestacional e no fgado do feto. Ela
secretada no soro fetal, atingindo um pico nas cerca de 13 semanas de gestao e
33

gradualmente diminuindo de seguida. Os nveis sricos elevados de AFP, podem
posteriormente reaparecer durante a gravidez e em conjunto com diversas doenas
malignas.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente a amostra, diluente de ensaio, e as micropartculas paramagnticas revestidas
de anti-AFP so combinados. A AFP presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas de anti-AFP. Aps a lavagem, o conjugado de anti-AFP marcado de acridinio
adicionado na segunda etapa.
As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida, adicionadas
mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida como
unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de AFP na
amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.

Anti-CCP
O Anti-CCP um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao semi-quantitativa da classe IgG de auto-anticorpos especficos para peptdeo
cclico citrulinado (CCP) no soro ou plasma humano. A deteco de anticorpos anti-CCP
usado como auxiliar no diagnstico da artrite reumatide (AR) e deve ser utilizado em
conjunto com outras informaes clnicas. Nveis de auto-anticorpos representam um
parmetro num processo de vrios critrios de diagnstico, abrangendo tanto as avaliaes
clnicas como as laboratoriais.
Artrite Reumatide (AR) uma doena auto-imune comum, sistmica que afecta 0,5-1% da
populao. caracterizada pela inflamao crnica da membrana sinovial, que geralmente
leva destruio progressiva das articulaes e na maioria dos casos, incapacidade e
reduo da qualidade de vida.
Em 2007, a Liga Europeia contra o Reumatismo (EULAR) publicou diretrizes para o
diagnstico de AR inicial, e a medio dos anticorpos anti-CCP foi includo como um
marcador de sorologia.


34

Princpios Biolgicos do Procedimento
No primeiro passo, a amostra pr-diluda com tampo de lavagem. A amostra pr-diluda,
as micropartculas paramagnticas revestidas do CCP, e o diluente de amostra so
combinados. Os anticorpos Anti-CCP presentes na amostra ligam-se s micropartculas
revestidas do CCP.
Aps a lavagem, adicionado o conjugado anti-Humano IgG marcado com acridnio na
segunda etapa. Seguido de outro ciclo de lavagem, solues pr-activadora (pr trigger) e
activadora (trigger) so adicionadas mistura de reaco. A reaco de
quimioluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao directa entre a quantidade de anti-HBc na amostra e os RLUs detectados por sistema
ptico.

Anti-HBc II
Anti-HBc II um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
deteco qualitativa de anticorpo para o antgeno do ncleo da Hepatite B (Anti-HBc) em
soro e plasma humano. O ensaio Anti-HBc II destina-se a uma triagem de sangue e plasma
para prevenir a transmisso do vrus da hepatite B (VHB/HBV) para os receptores de
sangue e componentes de sangue e como uma ajuda no diagnstico de infeco por HBV.
O ensaio anti-HBc II utiliza micropartculas revestidas com antignio do ncleo do vrus da
hepatite B recombinante (rHBcAg) para a deteco de anticorpos anti-HBc. Determinaes
de anti-HBc pode ser utilizado como um indicador de infeco presente ou passada pelo
HBV.
O anti-HBc encontrado no soro, pouco depois do aparecimento de antignios de superfcie
da hepatite B (HBsAg) em infeces agudas por HBV. Ele vai persistir aps o
desaparecimento do HBsAg e antes do aparecimento de anticorpos detectveis contra o
HBsAg (anti-HBs) . Na ausncia de informao sobre quaisquer outros marcadores de VHB,
ele deve ser considerado que um indivduo com nveis detectveis de anti-HBc pode ser
activamente infectado pelo VHB ou a infeco pode ter resolvido, deixar a pessoa immune.
O anti-HBc pode ser o nico marcador sorolgico da infeco pelo VHB e de sangue
potencialmente infeccioso. A presena de anti-HBc no diferencia entre a infeco aguda ou
crnica da hepatite B.
35

Princpios Biolgicos do Procedimento
No primeiro passo, a amostra, o diluente de ensaio, o diluente de espcime e as
micropartculas paramagnticas revestidas de rHBcAg combinam-se. O anti-HBc presente
na amostra liga-se s micropartculas revestidas de rHBcAg e a mistura de reaco lavada.
Na segunda etapa, o conjugado marcado com acridinio anti-humano adicionado. Seguido
de outro ciclo de lavagem, solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so
adicionadas mistura de reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medido
como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de
anti-HBc na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti- HBc na amostra determinada comparando o sinal
quimioluminescente na reaco ao sinal cutoff , determinada a partir de uma calibrao
activa de anti-HBc II. Se o sinal quimioluminescente na amostra for maior ou igual ao sinal
cutoff, a amostra considerada reactiva para anti- HBc.

Anti-HBc IgM
O ensaio Anti-HBc IgM um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA)
para a deteco qualitativa de anticorpos IgM para o antgeno do ncleo da Hepatite B (Anti-
HBc) no soro e plasma humano e indicado como auxiliar no diagnstico de infeco viral
da hepatite B aguda ou recente.
O ensaio de anti-HBc IgM utiliza o conjugado recombinante do vrus da hepatite B (rHBcAg)
marcado com acridinio para a deteco de anticorpos anti-HBc IgM. O anticorpo IgM
especfico viral foi detectado em infeces virais mais graves e um marcador fivel da
doena aguda.

Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra pr-diluda e o conjugado anti-humano IgM (anticorpo monoclonal de rato) de
micropartculas paramagnticas revestidas so combinados. O IgM humano presente na
amostra liga-se s micropartculas revestidas do conjugado anti- humano IgM (anticorpo
monoclonal).
Aps a lavagem, o IgM especfico do anti-HBc liga-se ao conjugado rHBcAg marcado com
acridinio, sendo este adicionado na segunda etapa. Seguido de outro ciclo de lavagem,
36

solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas ao recipiente
de reaco (RV).
A reaco de quimioluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de anti-HBc IgM na amostra e os RLUs
detectados por sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti-HBc IgM na amostra determinada comparando o sinal
quimioluminescente na reaco ao sinal cutoff , determinada a partir de uma calibrao
activa de anti-HBc IgM. Se o sinal quimioluminescente na amostra for maior ou igual ao sinal
cutoff, a amostra considerada reactiva para anti-HBc IgM.

Anti-HBe
O ensaio Anti-Hbe um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a deteco qualitativa de anticorpos para o antgeno e da Hepatite B (Anti-HBe) no soro e
plasma humano e indicado como auxiliar no diagnstico e monitoramento da infeco
viral da hepatite B.
O antignio e da hepatite B (HBeAg) e o seu anticorpo (anti-HBe) so encontrados em
associao com a infeco pelo vrus da hepatite B.
Um resultado negativo pode indicar HBeAg (1) infeco precoce aguda antes do pico de
replicao viral ou (2) convalescena precoce quando o HBeAg cai abaixo dos nveis
detectveis. A presena de anti-HBe serve para distinguir entre essas duas fases.

Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra, o reagente de neutralizao, e anti-HBe (rato, monoclonal) de micropartculas
paramagnticas revestidas so combinados. O anti-HBe presente na amostra liga-se ao
recombinante de HBeAg presente no reagente de neutralizao. O recombinante de HBeAg
desacoplado est disponvel para se ligar s micropartculas revestidas de anti-HBe.
Aps a lavagem, o conjugado anti-Hbe marcado de acridinio adicionado na segunda etapa.
Seguido de outro ciclo de lavagem, solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so adicionadas mistura de reaco.
37

A reaco de quimioluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao inversa entre a quantidade de anti-HBe na amostra e os RLUs
detectados por sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti-HBe na amostra determinada comparando o sinal
quimioluminescente na reaco ao sinal cutoff , determinada a partir de uma calibrao
activa de anti-HBe. Se o sinal quimioluminescente na amostra for maior ao sinal cutoff, a
amostra considerada no reactiva para anti-HBe.

Anti-HBs
O ensaio Anti-Hbs um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a deteco qualitativa (concentrao) de anticorpos para o antgeno de superficie da
Hepatite B (Anti-HBs) no soro e plasma humano.
Os ensaios de anti-HBs so muitas vezes utilizados para monitorizar o sucesso da vacinao
contra a hepatite B. A presena de anti-HBs foi demonstrada ser importante na proteco
contra o vrus da Hepatite B (HBV). Numerosos estudos demonstraram a eficcia da vacina
contra a Hepatite B para estimular o sistema imunitrio para a produo de anti-HBs e para
prevenir a infeco por HBV.
As amostras com concentraes de anti-HBs inferiores a 10,0 mIU / ml so consideradas
no-reactivas, um valor igual ou maior considerado reactivo por ensaio de anti-HBs.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente, a amostra, o HbsAg e o recombinante (rHBsAg) de micropartculas
paramagnticas revestidas so combinados. O anti-HBs presente na amostra liga-se s
micropartculas revestidas de rHBsAg.
Aps a lavagem, o conjugado rHBsAg marcado de acridinio adicionado na segunda etapa.
Seguido de outro ciclo de lavagem, solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so adicionadas mistura de reaco.
A reaco de quimioluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de anti-HBs na amostra e os RLUs
detectados por sistema ptico.
38

Anti-HCV
O ensaio Anti-HCV um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a deteco qualitativa de anticorpos para o vrus da Hepatite C (Anti-HCV) no soro e plasma
humano.
Imunoensaios quimioluminescentes so uma variante do princpio de imunoensaio
enzimtico (EIA). EIA esto disponveis para identificar antignios e anticorpos
relacionados com a infeco por hepatite viral.
O anti-VHC foi desenvolvido para detectar anticorpos para protenas estruturais e no
estruturais do genoma do VHC. O reagente composto de duas protenas recombinantes:
A protena HCr43, expressa na Escherichia coli, composta por duas regies de codificao
no contnuas da seqncia do genoma do VHC. A primeira regio representa o peptdeo
dos aminocidos e a segunda regio representa o peptdeo dos aminocidos (core) da
sequncia do VHC.
A protena c100-3 expressa no Saccharomyces cerevisiae (levedura). A organizao
genmica dos flavivrus sugere que a sequncia clonada est contida dentro das regies do
VHC supostamente no estruturais NS3 e NS4.
A presena de anticorpos anti-HCV indica que um indivduo pode se encontrar infectado
com HCV, podendo ser portador de HCV infeccioso, e/ou pode ser capaz de transmitir a HCV
por infeco. Embora a maioria dos indivduos infectados podem ser assintomticos, a
infeco por HCV pode evoluir para a hepatite crnica, cirrose, e/ou o aumento do risco de
carcinoma hepatocelular.
A implementao de triagem para a doao de sangue anti-HCV por EIA levou a um declnio
acentuado no risco de transmio de hepatites por transfuso.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Anti-HCV presente na amostra liga-se a micropartculas de HCV revestido.
O teste anti-VHC um imunoensaio de duas etapas, utilizando a metodologia de
quimioluminescncia por micropartculas (CMIA). Na primeira etapa, a amostra e as
micropartculas paramagnticas revestidas de antgeno recombinante do VHC e diluente de
ensaio so combinadas.
39

O anti-VHC presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas de VHC. Aps a
lavagem, o conjugado anti-humano marcado com acridnio adicionado na segunda etapa.
Seguindo outro ciclo de lavagem, solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so adicionadas mistura de reaco. A reaco quimioluminescente resultante
medida como unidades relativas de luz (URLs). Existe uma relao directa entre a
quantidade de anti-VHC na amostra e as URLs detectadas por sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti-VHC na amostra determinada comparando o sinal
quimioluminescente na reaco ao sinal de cutoff , determinada a partir de uma calibrao
de anti-VHC previamente gerada. Se o sinal quimioluminescente na amostra for maior ou
igual ao sinal de cutoff, a amostra considerada reactiva para anti-VHC.

Anti-Tg
O anti-Tg um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao quantitativa da classe IgG de auto-anticorpos de anti-tiroglobulina (anti-Tg)
no soro humano e plasma. O ensaio Anti-Tg destinado como auxiliar no diagnstico de
doenas da tireide auto-imune.
Tiroglobulina uma glicoprotena de 670 mil daltons, o qual composto por duas
subunidades idnticas e representa a principal protena encontrada na tiride. Esta
protena fornece 40 resduos de tirosina, de 140 na molcula, por iodao utilizados durante
a biossntese de tiroxina (T4) e triiodotironina (T3) e, por conseguinte, responsvel pela
acumulao de iodo pela glndula tiride.
Anti-Tg esto associados com casos de hipotireoidismo ou hipertireoidismo leve, e so
frequentemente encontrados em utentes com outras doenas auto-imunes como a artrite
reumatide, anemia perniciosa e Diabetes Tipo I.
Anti-Tg so detectados em 30-60% dos casos de utentes com carcinoma da tiride. Nesses
utentes, a medio do antignio Tg deve ter em conta a probabilidade da presena de nveis
significativos de anticorpos anti-TG, uma vez que a medio e deteco de antignio de Tg
pode ser influnciada pela presena de anticorpos anti-Tg.
Alm disso, os baixos nveis de anti-Tg tambm so encontrados em at 20 % dos indivduos
assintomticos particularmente os idosos e mais frequentemente em mulheres do que os
homens, embora o significado clnico destes anticorpos no seja clara.

40

Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra, o diluente do ensaio e as micropartculas paramagnticas revestidas do Tg so
combinadas e incubadas. O anti-Tg presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas do Tg.
Aps a lavagem, o conjugado anti-humano IgG marcado de acridinio adicionado segunda
etapa. Aps outra lavagem e incubao, as solues pr-activadora (pr trigger) e
activadora (trigger) so, em seguida, adicionadas mistura da reaco.
A reaco de quimioluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de anti-Tg na amostra e os RLUs
detectados por sistema ptico.

Anti-TPO
Anti-TPO um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao quantitativa da classe IgG de auto-anticorpos da tiride peroxidase (anti-
TPO) no soro humano e plasma. O Anti-TPO usado como auxiliar no diagnstico de
doenas da tireide.
O TPO uma enzima da glicoprotena ligada membrana, com uma massa aproximada de
107kD. A in vivo
1
em funo a iodao da tirosina na sntese de T3 e T4.
Ao contrrio de auto-anticorpos para tireoglobulina (anti-Tg), os auto-anticorpos de TPO
fixam o complemento, sendo potencialmente prejudiciais e podem ter um papel patognico
(destrutivo) na doena autoimune da tiride.
Os anticorpos anti-TPO so encontradas frequentemente em conjunto com anti-Tg na
maioria dos casos de tiroidite de Hashimoto, mixedema primrio, e a doena de Graves.
comum encontrar anticorpos anti-TPO, na ausncia de auto-anticorpos contra a
tiroglobulina, particularmente em utentes com bcio pequeno e at 64% dos casos de
hipotiroidismo autoimune tm sido associados aos anticorpos anti-TPO.

1
in vivo refere-se experimentao feita dentro ou no tecido vivo de um organismo vivo, em
oposio a um parcialmente ou totalmente morto.
41

Os anticorpos anti-TPO so frequentemente encontrados em utentes com outras doenas
auto-imunes tais como a artrite reumatide, a doena de Addison e Diabetes Tipo I.
Eles tambm so detectveis em nveis baixos em at 20% dos indivduos assintomticos,
em particular os idosos e mais frequentemente em mulheres do que em homens, embora a
significncia clnica destes auto-anticorpos no ser clara.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas do TPO so
combinadas e incubadas. O Anti-TPO presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas do TPO.
Depois da lavagem, o conjugado anti-humano marcado com acridnio adicionado
segunda etapa. Aps outra incubao e lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e
activadora (trigger) so adicionadas mistura de reaco.
A reaco de quimioluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de anti-TPO na amostra e as URLs
detectadas pelo sistema ptico.

B12
O B12 um ensaio quimioluminescente de micropartculas, de factor intrnseco para a
determinao quantitativa de vitamina B12 no soro humano e plasma.
A vitamina B12 refere-se a um grupo de corrinides que contm cobalto, sendo um co-factor
para a converso de metilmalonilo coenzima A (coA) de succinoilo coA. Alm disso, a
vitamina B12 um co-factor na sntese da metionina a partir da homocistena, est
implicada na formao de mielina, e, juntamente com o cido flico, necessrio para a
sntese de ADN. B12 absorvida a partir de alimentos depois de se ligar a uma protena
chamada factor intrnseco, que produzida pelo estmago.
Causas da deficincia de vitamina B12 pode ser dividida em trs classes: deficincia
nutricional, sndromes de m absoro, e outras causas gastrointestinais. A deficincia de
vitamina B12 pode causar anemia megaloblstica (MA), danos nos nervos e degenerao da
42

medula espinhal. A falta de vitamina B12, causa ainda deficincias moderadas, danos da
bainha de mielina que rodeia e protege os nervos, que pode levar a neuropatia perifrica.
O dano nos nervos causados por falta de B12 pode ficar permanentemente debilitante, se a
doena subjacente no tratada. Pessoas com defeitos fator intrnseco que no recebem
tratamento, eventualmente, desenvolver um MA chamada anemia perniciosa (PA).
A relao entre os nveis de vitamina B12 e MA nem sempre claro em que alguns utentes
com MA, pois ter os nveis de B12 normais, por outro lado, muitos indivduos com
deficincia de vitamina B12 no esto aflitos com MA. Apesar das complicaes, na presena
de MA (por exemplo, volume corpuscular mdio elevado (MCV)) geralmente h deficincia
de vitamina B12 ou de folato no soro. Distrbios associados com nveis elevados de vitamina
B12 no soro incluem insuficincia renal, doena heptica e doenas reumticas.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O ensaio B12 um ensaio de duas etapas com pr-tratamento de uma amostra
automatizada, para determinar a presena de vitamina B12 no soro e no plasma humano.
Os reagentes de pr-tratamento 1, 2, 3 e a amostra so combinados. Uma alquota da
amostra pr-tratada aspirada e transferida para um novo recipiente de reaco (RV). A
amostra pr-tratada, o diluente de ensaio, e as micropartculas paramgneticas revestidas
do factor intrnseco so combinados. O B12 presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas do factor intrnseco.
Aps a lavagem, o conjugado B12 marcado com acridnio adicionado na segunda etapa e
as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas mistura de
reaco.
A reaco de quimioluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao inversa entre a quantidade de B12 na amostra e as URLs
detectadas pelo sistema ptico.

CA 15 3
O ensaio CA 15-3 um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao quantitativa do antgeno definido DF3 no soro humano e plasma. Este ensaio
43

para ser utilizado como um adjuvante no tratamento da Fase II e III, nos doentes de cancro
da mama.
Testes de srie com valores de ensaio CA 15-3 de doentes devem ser usados em conjunto
com outros mtodos para a monitorizao clnica do cancro da mama. Os valores do ensaio
CA 15-3 so definidos usando os anticorpos monoclonais 115D8 e DF3.
O anticorpo monoclonal 115D8, dirigido contra as membranas dos glbulos de gordura do
leite humano, e o anticorpo monoclonal DF3, dirigido contra uma membrana enriquecida
da fraco de carcinoma da mama humano metasttico, que reagem com os eptopos
expressos por uma famlia de glicoprotenas de elevado peso molecular designados como
mucinas epiteliais polimrficas (PEMs) .
O ensaio CA 15-3 no recomendado como um procedimento de triagem para detectar
cancro na populao em geral, no entanto, tem sido relatado o uso do ensaio CA 15-3 como
um auxlio no tratamento de utentes com cancro de mama.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente, a amostra de tampo de lavagem e as micropartculas paramagnticas
revestidas de 115D8 so combinados. O antignio definido DF3 presente na amostra liga-se
s micropartculas revestidas de 115D8.
Aps a lavagem, o conjugado DF3 marcado com acridnio adicionado na segunda etapa e
as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas mistura de
reaco, resultando numa reaco de quimioluminescncia medido como unidades
relativas de luz (RLU). Existe uma relao inversa entre a quantidade de antignio definido
DF3 na amostra e as URLs detectadas pelo sistema ptico.
Este ensaio o nico em que os calibradores fornecidos so pr-diludo. Este sistema dilui
todas as amostras e controlos, pelo mesmo factor de diluio final como os calibradores pr-
diludos durante o curso do ensaio.

CA 19 9 XR
O ensaio CA 19 9XR um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a determinao quantitativa de reactivos determinantes de 1116-NS-19-9 no soro ou
44

plasma humano. Este ensaio para ser utilizado como um adjuvante no tratamento de
doentes com cancro pancretico em conjunto com outros mtodos clnicos.
O ensaio de CA-19 9XR detecta um antignio associado a um tumor, que ocorre no tecido
como um monossialogangliosdeo e no soro com de elevado peso molecular, uma
glicoprotena rica em hidratos de carbono conhecida como uma mucina. Este ensaio baseia-
se num anticorpo monoclonal, 1116-NS-19-9, que reage com um antignico determinante
de hidrato de carbono expresso no antignio circulante.
Os valores elevados do ensaio de CA 19-9 no soro tambm tm sido observados em utentes
com metstases e em condies no malignas tais como hepatite, cirrose, pancreatite, e
outras doenas gastrintestinais. Nveis elevados tambm foram observados na fibrose
cstica.
Um persistentemente aumento nos valor de ensaio CA 19-9 pode ser associado a uma
doena maligna progressiva e resposta teraputica pobre. Um declnio dos valores de ensaio
do CA 19-9 pode ser um indicativo de um prognstico favorvel e uma boa resposta ao
tratamento.
Teste para reactivos determinantes de 1116-NS-19-9 no devem ser usados como um
processo de rastreio para a malignidade. Os reactivos determinantes de 1116-NS-19-9 esto
presentes como um componente normal no soro e no plasma de indivduos sem carcinomas
gastrointestinais ou que tm certas condies no cancerosas.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Primeiramente, a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de 1116-NS-19-
9 so combinados. Os reactivos determinantes de 1116-NS-19-9 presentes na amostra
ligam-se s micropartculas revestidas de 1116-NS-19-9.
Aps a lavagem, o conjugado 1116-NS-19-9 marcado com acridnio adicionado na segunda
etapa para criar uma mistura na reaco.
Depois de outro ciclo de lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so adicionadas mistura de reaco, resultando numa reaco de
quimioluminescncia medido como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao
inversa entre a quantidade de reactivos determinantes de 1116-NS-19-9 na amostra e as
URLs detectadas pelo sistema ptico.
45

CA 125 II
O ensaio CA 125 II um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a determinao quantitativa de OC 125 antgeno definido no soro humano e plasma. O CA
125 II para ser usado como um auxlio no monitoramento da resposta terapia para
utentes com cancro epitelial de ovrio. Os testes de srie para CA 125 II devem ser usados
em conjunto com outros mtodos clnicos utilizados para monitorizar o cancro do ovrio.
O ensaio CA 125 no recomendado como um procedimento de triagem para detectar
cancro na populao em geral. No entanto, foi reportado que o uso do ensaio CA 125 serve
como auxilio no tratamento de utentes com cancro de ovrio.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente a amostra, e as micropartculas paramagnticas revestidas de OC 125 so
combinados. O antgeno definido de OC 125 presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas. Aps a lavagem, o conjugado M11 marcado de acridinio adicionado na segunda
etapa.
As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida, adicionadas
mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida como
unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de antgeno
definido de OC 125 na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.

CEA (Antignio Carcinoembrionrio)
O ensaio CEA um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao quantitativa do antignio carcinoembrionrio (CEA) no soro e no plasma
humano. O ensaio de CEA est a ser utilizado como uma ajuda no prognstico e tratamento
de doentes com cancro, onde so observadas as mudanas de concentraes do CEA.
Antignio carcinoembrionrio (CEA), um antignio associado a um tumor. CEA foi
caracterizado como uma glicoprotena de aproximadamente 200 mil de peso molecular,
com uma mobilidade -electroforese.
46

O resultado dos estudos clnicos at o momento indicam que CEA, embora originalmente
pensado para ser especfico para o cancor do trato digestivo, tambm pode ser direccionado
para outras doenas malignas e no malignas e para alguns distrbios.
Teste CEA pode ter um valor significativo no acompanhamento de utentes com neoplasias
malignas diagnosticadas em quem so observadas mudanas concentraes de CEA. A
elevao persistente na circulao CEA aps o tratamento um forte indicativo de
metstase oculta e / ou doena residual.
Um valor CEA persistentemente crescente pode estar associada com a doena maligna
progressiva e uma resposta teraputica pobre. Um valor CEA declnio geralmente
indicativo de um prognstico favorvel e uma boa resposta ao tratamento. Os utentes que
tm nveis de CEA baixo pr-terapia pode mais tarde mostram elevaes no nvel CEA como
uma indicao de doena progressiva.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Primeiramente, a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti-CEA so
combinados. O CEA presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas anti-CEA.
Depois da lavagem, o conjugado anti-CEA marcado com acridinio adicionado segunda
etapa. As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida,
adicionadas mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida
como unidades relativas de luz (URL). Existe uma relao directa entre a quantidade de CEA
na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.

CMV IgG
O ensaio CMV IgG um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a deteco qualitativa e determinao semi-quantitativa de anticorpos IgG para
citomegalovrus no soro e plasma humano.
As infeces por citomegalovrus (CMV), um membro da famlia do herpesvrus, so comuns
no homem e so geralmente leves e assintomticos.
47

Um indivduo pode sofrer infeco primria por CMV, a reinfeco com o vrus exgeno ou
reativao de vrus latente. Se a infeco primria precisar de ser excluda, as amostras
reactivas de CMV IgG devem ser testadas para CMV IgM e CMV IgG avidez.
Um resultado positivo de CMV IgM em conexo com baixa avidez resultado um forte
indicador de uma infeco primria por CMV nos ltimos 4 meses.

Tabela 4 - Resultados CMV

Um aumento substancial das concentraes de anti-CMV IgG em amostras sequenciais
tiradas de um indivduo acompanhado pela presena de anti-CMV IgM tambm pode indicar
evidncia sorolgica de infeco activa.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Primeiramente, a amostra, o diluente de ensaio e as micropartculas paramagnticas
revestidas do vrus CMV danificado (estirpe AD169) so combinados. O anti-CMV IgG
presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas do vrus CMV danificado (estirpe
AD169).
Aps a lavagem, o conjugado IgG anti-humano murino marcado com acridnio adicionado
para criar uma mistura de reaco. Seguindo um outro ciclo de lavagem, as solues pr-
activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas mistura de reaco.

CMV IgM
O ensaio CMV IgM um imunoensaio quimioluminescente micropartculas (CMIA) para a
deteco qualitativa de anticorpos IgM para citomegalovrus (CMV) no soro e plasma
humano.
CMV IgG CMV IgM CMV IgG Avidez Pode indicar / Recomendao de testes:
No reativo No reativo N/A Nenhuma infeco.
Reativo No reativo Alta avidez
Infeco curada:
Baixo risco para a transmisso do tero.
Reativo Reativo Baixa avidez
Infeco primria:
Baixo risco para a transmisso do tero.
Reativo Reativo Alta avidez
Infeco no primria:
Baixo risco para a transmisso do tero.
48

Infeco por CMV permanece difcil de diagnosticar baseado-se apenas nos sintomas, sendo
que uma alta percentagem de infeces permanecem sem sintomas. Na infeco do tero
pode resultar em sequelas de grau varivel, incluindo retardo mental, coriorretinite, perda
de audio e problemas neurolgicos.
A reinfeco com vrus exgeno ou reactivao do vrus latente pode levar presena de
anti-CMV IgM na ausncia de uma infeco primria por CMV. Embora a presena de anti-
CMV IgG reduza a probabilidade de complicaes relacionadas com o CMV, ele no garante
proteco completa contra a doena.
Aquisio CMV em recm-nascidos pode ocorrer via transplacentria aps a infeco
materna durante o nascimento pelo contacto com o vrus excretado do colo do tero ou aps
o nascimento atravs da ingesto de leite materno contaminado. As crianas alm do
perodo neonatal so suscetveis infeco e subsequente transmisso de CMV quando na
creche.

Princpios Biolgicos do Procedimento
No comeo, a amostra, o diluente de ensaio, e as micropartculas paramagnticas revestidas
so combinados. O anti-CMV IgM presente na amostra liga-se ao vrus CMV danificado
(estirpe AD169) e s micropartculas revestidas do recombinante antignio CMV.
Depois da lavagem, o conjugado IgM anti-humano marcado com acridinio adicionado para
criar uma mistura de reaco. As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so, em seguida, adicionadas mistura da reaco. A reaco de
quimioluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (URL). Existe uma
relao directa entre a quantidade de anti-CMV IgM na amostra e os RLUs detectados por
sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti-CMV IgM na amostra determinada comparando o sinal
quimioluminescncia na reaco ao sinal de cutoff , determinada a partir de uma calibrao
prvia. Se o sinal quimioluminescente na amostra for maior ou igual ao sinal de cutoff, a
amostra considerada reactiva para anti-CMV IgM.



49

C-Peptide
O ensaio peptdeo um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a determinao quantitativa de pptido C no soro, plasma e urina, sendo utilizado como um
auxiliar no diagnstico e tratamento de doentes com secreo anormal de insulina,
incluindo a diabetes Mellitus.
O pptido C humano um polipptido de cadeia nica que consiste de 31 aminocidos. Este
liga as cadeias A e B da insulina no precursor
2
de pr-insulina molcula, que armazenado
em grnulos secretores das clulas- pancreticas. A biossntese de insulina, facilita a
formao da correcta estrutura secundria e terciria da hormona.
Pptido C utilizado como um teste da funo de clulas- em seres humanos numa
variedade de condies, incluindo diabetes tipo 1, e para auxiliar no diagnstico diferencial
de hipoglicemia, e sub-reptcia insulina auto-administrao.
Um baixo nvel de peptdeo C esperado se a secreo de insulina est diminuda, como na
diabetes insulino-dependente (diabetes tipo 1, diabetes auto-imune latente de adultos
(LADA)). Nveis elevados de peptdeo C podem ser encontrados quando a actividade das
clulas- aumentada como em hiperinsulinismo e insulinomas.
A razo molar do peptdeo C/insulina pode ser considerado como uma estimativa da
depurao heptica, uma vez que a insulina no metabolismo da insuficincia heptica est
comprometida, conduzindo a uma percentagem anormalmente elevada de insulina na
circulao perifrica.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente, a amostra, o diluente de ensaio, e peptdeo C anti-humano de micropartculas
paramagnticas revestidas so combinados. O peptdeo C presente na amostra liga-se ao
peptdeo C anti-humanos de micropartculas revestidas, formando um complexo de
antignio-anticorpo.
Aps a lavagem, o conjugado peptdeo C anti-humano marcado com acridinio adicionado
para criar uma mistura de reaco no segundo passo. Depois de outro ciclo de lavagem,

2
um composto que participa numa reaco qumica que produz outro composto. Em bioqumica, o
termo "precursor" usado para referir-se a um composto que precede outro numa via metablica.
50

solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas mistura de
reaco.
A reaco quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (URLs).
Existe uma relao directa entre a quantidade de peptdeo C na amostra e as URLs
detectadas por sistema ptico. Os resultados so calculados automaticamente com base na
curva de calibrao previamente estabelecida.

Estradiol
O estradiol um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para a
determinao quantitativa de estradiol no soro e plasma humano.
O estradiol o estrognio natural mais potente nos humanos. Ela regula a funo
reprodutiva nas mulheres, e, com a progesterona, mantm a gravidez. A maioria do estradiol
secretado pelos ovrios (mulheres no grvidas), embora os testculos (em homens) e
crtex adrenal (em homens e mulheres) secretam pequenas quantidades.
Durante a gravidez, a placenta produz a maior parte do estradiol circulante. Em mulheres
no grvidas, o estradiol sintetizado pelo ovrio a fonte predominante da estrona e do
estriol. A quantidade e proporo da protena-bound de estradiol e estradiol livre variam
de acordo com o sexo, e com a gravidez e fase menstrual em mulheres.
Os nveis de estradiol so mais baixas normais na menstruao e na fase folicular precoce
(25-75 pg / ml) e, em seguida, subir na fase folicular tardia para um pico de 200-600 pg /
ml imediatamente antes do aumento repentino de LH, o qual normalmente seguido
imediatamente pela ovulao. Como os picos de LH, o estradiol comea a diminuir, antes de
voltar a subir durante a fase ltea (100-300 pg / ml).
Se a concepo no ocorre, estradiol cai ainda mais para seus nveis mais baixos, e a
menstruao comea logo em seguida. Se ocorrer a concepo, os nveis de estradiol
continuam a subir, atingindo nveis de 1,000-5,000 pg / mL durante o primeiro trimestre,
5,000-15,000 pg / mL durante o segundo trimestre, e 10,000-40,000 pg / mL durante o
terceiro trimestre.
Na menopausa, os nveis de estradiol permanecem baixos.


51

Princpios Biolgicos do Procedimento
No comeo, a amostra, o diluente da amostra, o diluente de ensaio, e micropartculas
paramagnticas revestidas do anti-estradiol (de coelho, anticorpo monoclonal) so
combinados. O estradiol presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas do anti-
estradiol.
Aps um perodo de incubao, o conjugado de estradiol marcado com acridnio
adicionado mistura de reaco. Depois de uma segunda incubao e lavagem, as solues
pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas e a reaco
quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao inversa entre a quantidade de estradiol na amostra e as RLUs detectadas pelo
sistema ptico.

Ferritina
O ensaio de ferritina um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA)
para a determinao quantitativa de ferritina no soro e plasma humano.
A ferritina uma protena que contm ferro de elevado peso molecular que funciona no
corpo como um composto de armazenamento de ferro. Cada molcula de ferritina
constitudo por uma protena de concha esfrica de peso molecular com cerca de 460 mil
daltons, composta de 24 subunidades com uma quantidade varivel de ferro como um
ncleo de ferricoxide-fosfato.
Foi demonstrado que a molcula de ferritina, quando completamente saturadas, podem ser
constitudas por mais de 20% de ferro em peso. Aproximadamente 25% do ferro em um
adulto normal est presente em vrias formas de armazenamento. Cerca de dois teros das
reservas de ferro no corpo humano existe sob a forma de ferritina. As reservas de ferro
restantes esto contidos em hemossiderina insolvel, o que provavelmente representa uma
forma de ferritina desnaturado.
A avaliao clnica das reservas de ferro baseiam-se historicamente na determinao de
ferro srico, na capacidade de ligao do ferro total (TIBC) e percentagem de transferrina
(proporo de ferro srico e TIBC) ou exame directo de medula ssea.
52

A estimativa de ferro na medula ssea o mtodo tradicional para avaliar as reservas de
ferro do corpo. Este mtodo de bipsia fornece um ndice sensvel de deficincia de ferro,
mas tem a desvantagem de ser subjectiva e semi-quantitativa. A literatura recente sugere
que a ferritina fornece uma medida mais sensvel, especfico e confivel para determinar a
deficincia de ferro num estgio inicial.
O uso combinado de nveis de ferritina srica e de volume corpuscular mdio (VCM) fez a
diferenciao entre a deficincia de ferro, talassemia-beta e indivduos normais
possvelmente com um nvel muito alto de preciso.

Princpios Biolgicos do Procedimento
No primeiro passo, a amostra e paramagnticas revestidas de anti-ferritina micropartculas
so combinados. A ferritina presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas do
anti-ferritina.
Aps a lavagem, o conjugado anti-ferritina marcado com acridinio adicionado no segundo
passo. Solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas
mistura de reaco.
A reaco quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (URLs).
Existe uma relao directa entre a quantidade de ferritina na amostra e as URLs detectadas
por sistema ptico.

Folato
O folato um ensaio de uma protena de unio quimioluminescente de micropartculas
folato para a determinao quantitativa de folato no soro humano, plasma e clulas
vermelhas do sangue.
Os folatos so uma classe de compostos de vitaminas relacionados com cido
pteroilglutmico (PGA), que servem como co-factores na transferncia enzimtica de
unidades individuais de carbono numa variedade de vias metablicas.
Os folatos so necessrios para a sntese dos cidos nuclecos e da protena mitocondrial, o
metabolismo de aminocidos, e outros processos celulares que envolvem a transferncia de
carbono simples. Os folatos pode servir como doadores de carbono ou receptores.
53

Uma vez que diferentes vias metablicas requerem grupos de carbono com diferentes nveis
de oxidao, as clulas contm numerosas enzimas que alteram o estado de oxidao dos
grupos de carbono transportados por folatos, resultando em diferentes formas
metabolicamente activas de folato.
A forma predominante de folato circulante o cido 5-metiltetrahidroflico (5-MTHF). Um
grupo metilo transferido de 5-MTHF para cobalamina na via que liga o metabolismo do
cido flico e vitamina B12.
As deficincias de ambos vitamina B12 e cido flico pode levar a anemia megaloblstica
(macroctica), tratamento adequado exige diagnstico diferencial da deficincia; assim, so
necessrios valores tanto de vitamina B12 e de folato.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Duas etapas de pr-tratamento realizo a mediao da libertao de folato a partir da
protena de ligao folato endgeno. No pr-tratamento (passo 1), a amostra e pr-tratada
com o reagente 2 (ditiotreitol ou DTT), so aspirados e dispensados para um vaso de
reaco (RV). No pr-tratamento (passo 2), uma alquota de amostra/mistura de pr-
tratado com o reagente 2, aspirado e distribudo para um segundo RV.
O pr-tratamento com o reagente 1 (ou hidrxido de potssio, KOH) ento adicionado.
Uma alquota da amostra pr-tratada transferida para um terceiro RV, seguido pela adio
de micropartculas paramagnticas revestidas das proteinas de ligao de folatos (FBP) e
diluente especfico de ensaio. O folato presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas FBP.
Aps a lavagem, o conjugado de cido pterico marcado com acridnio adicionado e liga-
se aos locais desocupados nas micropartculas revestidas-FBP. E de seguida as solues pr-
activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas e a reaco
quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao inversa entre a quantidade de folato na amostra e as RLUs detectadas pelo sistema
ptico.
No inicio do ensaio de folato RBC, um passo de pr-tratamento manual converte o folato de
ligao-RBC para folato mensurvel e depois estas amostras so processadas como
descritas acima.
54

Total -hCG
O ensaio total -hCG um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA)
para a determinao qualitativa e quantitativa de beta gonadotrofina corinica humana (-
hCG) no soro e plasma humano para a deteco precoce da gravidez.
Gonadotropina corinica humana (hCG) uma sialoglicoprotena, com um peso molecular
de aproximadamente 46 mil daltons. O hCG inicialmente segregado pelas clulas
trofoblsticas da placenta logo aps a implantao do vulo fertilizado na parede uterina. O
rpido aumento nos nveis sricos de hCG aps a concepo torna-o um excelente marcador
para confirmao e acompanhamento da gravidez precoce.
Fisiologicamente, o hCG aparece para manter o corpo lteo, permitindo assim a sntese de
progesterona e estrognio que suportam o endomtrio. Com as gestaes complicadas em
progresso, a placenta assume a produo dessas hormonas.
Os nveis de hCG no soro aumentam at concentrao de pico, para em seguida,
diminuirem e estabelizarem. O hCG circula como a molcula intacta no soro de mulheres
normais que tm uma gravidez simples. As subunidades so clivadas e rapidamente
eliminadas pelos rins.
A hormona da placenta, hCG, semelhante hormona luteinizante (LH), hormona do
folculo-estimulante (FSH), e hormona do estimulador da tireide (TSH). Todos so
glicoprotenas que consistem de duas subunidades diferentes no covalentemente ligadas,
designadas por alfa e beta, com cadeias laterais de hidratos de carbono ligados.
As subunidades alfa destas glicoprotenas so muito semelhantes. Em contraste, as pores
da subunidade beta determinam a especificidade biolgica e a de imunoqumica. As
subunidades beta de hCG e LH apresentam homologia considervel no teor em aminocidos.
Os resduos de aminocidos especficos para a subunidade beta de hCG confere a
especificidade imunoquimica.
Com a disponibilidade de ensaios quantitativos sensveis para a medio de soro -hCG, foi
demonstrado que os nveis de hCG podem ser teis na previso de abortos espontneos,
podem auxiliar na deteco da gravidez ectpica e da gestao mltipla.



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Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti--hCG so combinados.
O -hCG presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas com anti--hCG.
Depois da lavagem, o conjugado anti--hCG marcado com acridinio adicionado segunda
etapa. As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida,
adicionadas mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida
como unidades relativas de luz (URL). Existe uma relao directa entre a quantidade de -
hCG na amostra e a RLU detectada por sistema ptico.

PSA Livre (Antgeno Prosttico Especfico)
O teste de PSA livre um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a determinao quantitativa do antgeno especfico da prstata livre (PSA) no soro humano.
O ensaio de PSA livre destina-se a ser utilizado em conjuno com o ensaio de PSA total, em
homens com 50 anos ou mais velhos com valores de PSA total entre os 4 e 10 ng / mL e
exame de toque rectal (DRE) no suspeito de cancro, a fim de determinar o valor percentual
de PSA livre. O valor percentual de PSA livre pode ser utilizado como uma ajuda na
discriminao entre o cancro da prstata e uma doena benigna.
O antignio especfico da prstata (PSA), um membro da famlia do gene de calicrena
humana, uma protease da serina com actividade semelhante a quimotripsina. A forma
madura do PSA uma glicoprotena de cadeia nica com 237 aminocidos, contendo 7-8%
de hidratos de carbono como uma nica cadeia lateral oligossacardeo N-ligado. O PSA tem
um peso molecular de aproximadamente de 30 mil daltons.
O local principal de produo de PSA o epitlio glandular da prstata. O PSA produzido
pela prstata segregada para o fluido seminal, em elevadas concentraes. Tambm se
encontra presente na urina e no soro. A funo de PSA a clivagem proteoltica das
protenas de formao de gel no fluido seminal, resultando em liquefao do gel seminal e
mobilidade aumentada dos espermatozides.
Os baixos nveis de PSA so encontrados no sangue como um resultado da fuga de PSA a
partir da glndula da prstata. O aumento dos nveis de PSA so associados com patologia
prosttica; incluindo prostatite, hiperplasia prosttica benigna (BPH) e cancro da prstata.
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Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti-PSA livre so
combinados. O PSA livre presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas anti-PSA
livre.
Depois da lavagem, o conjugado anti-PSA marcado com acridinio adicionado segunda
etapa. As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida,
adicionadas mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida
como unidades relativas de luz (URL). Existe uma relao directa entre a quantidade de PSA
livre na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.

T3 Livre
O ensaio de T3 Livre (FT3) um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas
(CMIA) para a determinao quantitativa de triiodotironina livre (T3 livre) no soro e
plasma humano.
Tri-iodotironina (T3) uma hormona da tiride com um peso molecular de 651 daltons e
uma meia-vida no soro de 1,5 dias. Circula no sangue como uma mistura de equilbrio de
hormona ligada e livre de protenas.
O T3 ligado tiroxina globulina (TBG), pr-albumina e albumina. A distribuio real de T3
entre essas protenas de ligao controversa quanto as estimativas variam 38-80% para
TBG, 9-27% para o pr-albumina, e 11-35% para a albumina. A ligao destas protenas
tal que apenas 0,2-0,4% do T3 total est presente na soluo como T3 no ligado ou livre.
T3 livre geralmente elevado a um grau maior do que a tiroxina livre (T4) na doena de
Graves. Ocasionalmente, apenas o T3 livre elevado (T3 tireotoxicose) em cerca de 5% da
populao de hipertireoidismo. Em contraste, os nveis de T4 livre so elevados a um grau
maior do que os de T3 livre no bcio multinodular txico e terapia T4 excessiva.
T3 livre tambm pode ser importante no acompanhamento dos doentes em terapia anti-
tireide, onde o tratamento focado na reduo da produo de T3 e da converso T4 em
T3. O T3 livre do soro pode tambm ser til na avaliao da gravidade do estado de
tireotoxicose.

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Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti-T3 so combinados. O T3
livre (no ligado) presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas anti-T3.
A seguir da lavagem, o conjugado T3 marcado com acridinio adicionado segunda etapa.
As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so, em seguida, adicionadas
mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida como
unidades relativas de luz (URL). Existe uma relao inversa entre a quantidade de T3 livre
na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.

T4 Livre
T4 livre (FT4) um imunoensaio micropartculas quimioluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de tiroxina livre (T4 livre) no soro e plasma humano.
Tiroxina (T4) circula no sangue como uma mistura de equilbrio de hormona livre e
encontra-se ligado s protenas do soro. A ligao de globulina tiroxina (TBG), albumina e
a pr-albumina de aproximadamente 75%, 10% e 15%, respectivamente, do T4 total na
circulao. Uma vez que o T4 livre absorvido pelas clulas alvo, o equilbrio restabelece o
T4 livre na circulao.
O equilbrio resulta na manuteno de um nvel constante de T4 livre quando ocorrem
alteraes quer na concentrao ou na ligao da afinidade de protenas do soro. Os valores
de T4 livre pode, portanto, fornecer a melhor indicao de disfuno da tireide, uma vez
que o T4 livre menos sensvel a alteraes nas protenas de ligao de soro.
O diagnstico da funo tireoidiana envolveu a realizao de um ensaio total de T4 em
adio a uma absoro de tiroxina (TU) de doseamento da mesma amostra. A combinao
matemtica desses dois ensaios produz um ndice de tiroxina livre (FTI), que fornece uma
estimativa proporcional indirecta para T4 livre. Alternativamente, ensaios directos foram
desenvolvidos utilizando dilise de equilbrio, ultrafiltrao, RIA, e tecnologia EIA em fase
slida para medir T4 livre.
Nestes mtodos, a separao do marcador livre e ligado conseguida com uma membrana,
ou por ligao de T4 livre com um anticorpo de fase slida. Este passo de extraco remove
uma quantidade de T4, que proporcional quantidade inicial de T4 livre presente na
58

amostra do utente. Desde que o T4 extrado for inferior a cerca de 5% do T4 na amostra,
uma verdadeira estimativa do contedo de T4 livre pode ser obtida.

Princpios Biolgicos do Procedimento
No nicio, a amostra e micropartculas paramagnticas revestidas do anti-T4 so
combinadas. O T4 livre (no ligada) presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas do anti-T4.
Aps a lavagem, o conjugado de T3 marcado com acridnio adicionado na segunda etapa.
As solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas e a reaco
quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao inversa entre a quantidade de T4 livre na amostra e as RLUs detectadas pelo sistema
ptico.

HAVAb-IgG
O ensaio de HAVAB-IgG um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA)
para a determinao qualitativa de anticorpo IgG do vrus da hepatite A (anti-HAV IgG) no
soro e no plasma humano. Sendo indicado como auxiliar no diagnstico da infeco viral da
hepatite A ou na deteco de anticorpos anti-HAV IgG.
A presena de anti-HAV IgG, com resultado no reactivo do teste anti-HAV IgG, implicando
infeco passada com o vrus da hepatite A (HAV) ou vacinao contra a hepatite A.

Princpios Biolgicos do Procedimento
A amostra, o diluente de ensaio, e as micropartculas paramagnticas revestidas do vrus
(humano) da hepatite A so combinados. O anti-HAV IgG presente na amostra liga-se s
micropartculas paramagnticas revestidas do vrus (humano) da hepatite A.
Depois da lavagem, o conjugado anti-humano IgG marcado com acridinio adicionado
segunda etapa vinculando-se ao anti-HAV IgG.
Aps outro ciclo de lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger)
so, em seguida, adicionadas mistura da reaco. A reaco de quimioluminescncia
59

resultante medida como unidades relativas de luz (URL). Existe uma relao directa entre
a quantidade de anti-HAV IgG na amostra e os RLUs detectados por sistema ptico.
A presena ou a ausncia de anti-HAV IgG na amostra determinada por comparao do
sinal quimioluminescente na reaco com sinal cutoff, determinada a partir de uma
calibrao HAVAB-IgG.
As amostras com valores de sinal (S/CO) cutoff maiores de 1,00 so consideradas reactivas
para anti-HAV IgG. As amostras com valores S/CO menores de 1,00 so consideradas no
reactivas.

HAVAb-IgM
O HAVAB-IgM um imunoensaio de micropartculas quimioluminescentes (CMIA) para a
deteco qualitativa de anticorpos IgM para o vrus da hepatite A (IgM anti-HAV) em soro e
plasma humano. O ensaio HAVAB-IgM indicado como um auxiliar no diagnstico de
infeco viral recente ou aguda de hepatite A.
A Hepatite A uma doena auto-limitada e frequentemente uma doena subclnica,
particularmente em crianas.
Desde hepatite sintomtica Um vrus (HAV) infeces podem ser clinicamente
indistinguvel da infeco com o vrus da hepatite B ou C, o teste sorolgico uma
ferramenta importante para alcanar o diagnstico correto.
Se sintomtico as infeces do vrus da hepatite A (HAV) podem ser clinicamente
indistinguveis das infeces com o vrus da hepatite B ou C, o teste sorolgico uma
ferramenta importante para alcanar o diagnstico correcto.
Durante a fase aguda de infeco por HAV, o anti-HAV IgM aparece no soro do utente e
quase sempre detectvel no incio dos sintomas.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Primeiramente a amostra pr-diluda, o diluente de ensaio, e as micropartculas
paramagnticas revestidas do vrus (humano) da hepatite A so combinados. O anti-HAV
IgM presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas do vrus (humano) da
hepatite A.
60

Aps a lavagem, o anti-HAV IgM liga-se ao conjugado do anticorpo anti-humano IgM
marcado com acridinio que adicionado na fase seguinte. Aps outro ciclo de lavagem, as
solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so adicionadas e a reaco
quimioluminescente resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao directa entre a quantidade de anti-HAV IgM na amostra e as RLUs detectadas pelo
sistema ptico.
A presena ou ausncia de anti-HAV IgM na amostra determinado por comparao do sinal
de quimioluminescncia na reaco com sinal cutoff determinado a partir de uma
calibrao HAVAB-IgM.
As amostras com valores de sinal (S/CO) cutoff maiores do que 1,20 so consideradas
reactivas para o anti-HAV IgM. As amostras com valores S/CO entre os 0,80-1,20 so
consideradas gray zone reactivas. As amostras com valores de sinal S/CO menores do que
0,80 so consideradas no reactivas.

HBsAg Qualitative II Confirmatory
O HBsAg Qualitative II Confirmatory um imunoensaio de micropartculas por
quimioluminescncia (CMIA) para a confirmao da presena do do antgeno de superfcie
do vrus da hepatite B (HbsAg) no plasma e soro humano, atravs da neutralizao de
anticorpos especficos em amostras identificadas como repetidamente reactivas.
O vrus da hebatite B (HBV), um vrus de ADN com envelope, um agente causador da
hepatite srica. Durante ainfeco o HBV produz um excesso de antignio de superfice da
hepatite B (HBsAg), tambm cinhecido por antignio Austrlia, que pode ser detectado no
sangue de indivduos infectados. responsvel pela ligao do vrus s clulas hepticas e
a estrutura alvo dos anticorpos neutralizadores.
O HBsAg o primeiro marcador serolgico aps a infeco pelo HBV, aparecendo uma a dez
semanas aps a exposio e duas a oito semanas antes do aparecimento dos primeiros
sintomas. O HBsAg persiste durante a fase aguda e desaparece mais tarde durante o
prerodo de convalescncia a prevanlncia do HBsAg durante os seis meses indica que o
ndividuo portador crnico do vrus.
Os ensaios HBsAg so utilizados para identificar pessoas infectadas pelo HBV e para evitar
a transmisso do vrus por via sangunea e atravs de produtos sanguneos, bem como para
61

monotorizar o estado dos individuos infectados em combinao com os outros marcadores
serolgicos da hepatite B.
O anticorpo contra o antignio de superfice da hepatite B (anti-HBs, humano) incubado
com uma amostra. Caso se verifique a presena de HBsAg na amostra, este ser neutralizado
pelo anticorpo. O HBsAg neutralizado subsequentemente impedido de se ligar s
micropartculas revestidas de anticorpos anti-HBs. Isto conduzir a uma reduo do sinal
em comparao com o sinal de uma amostra emparelhada que no foi tratada com o
reagente de anticorpo. Uma amostra considerada confirmada se o sinal para o resultado
da amostra no-neutralizada (incubada com pr-tratamento 2) for superior ou igual ao sinal
de cutoff (S/CO 0,70) e a reduo das RLUs da amostra neutralizada for de pelo menos
50% em comparao com a amostra no-neutralizada.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O ensaio HBsAg Qualitative II Confirmatory composto por dois testes unicos, ambos
imunoensaios de pr-tratamento de um passo. A amostra e o pr-tratamento 1 so
combinados numa cuvete de reaco (RV) e incubados. Caso se verifique a presena de
HBsAg na amostra, este ser neutralizado pelo anticorpo (anti-HBs) no pr tratamento 1.
Uma alquota de amostra pr-tratada, as micropartculas pragmtica revestidas de
anticorpos de anti-HBs e o conjunto de anticorpos anti-HBs marcado com acridna so
combinados para criar uma mistura da reaco.
O HBsAg no-neutralizado presente na amostra liga-se s micropartculas revistidas de
anticorpos de anti-HBs e ao conjunto de anticorpos anti-HBs marcado com acridna. O
HBsAg neutralizado impedido de formar uma sanduche com o conjugado de anticorpos
de anti-HBs marcado com acridna e com as micropartculas pragmtica revestidas de
anticorpos de anti-HBs.
Aps a lavagem, o tampo de lavagem auxiliar adicionado RV e incubado. Aps outro
ciclo de lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so
adicionadas e a reaco quimioluminescente resultante medida como unidades relativas
de luz (RLU). Existe uma relao directa entre a quantidade de HBsAg na amostra e as RLUs
detectadas pelo sistema ptico.


62

Testosterona de 2 Gerao
O ensaio da Testosterona de 2 Gerao um imunoensaio de micropartculas por
quimioluminescncia (CMIA) para a determinao quantitativa de testosterona no soro e
no plasma humano. Medidas de testosterona so usados no diagnstico e no tratamento de
distrbios que envolvem as hormonas sexuais dos homens (andrgenos), incluindo o
hipogonadismo primrio e secundrio, atrasado ou puberdade precoce, impotncia nos
homens e, nas mulheres, hirsutismo (excesso de plos) e virilizao (masculinizao)
devido a tumores, ovrios policsticos, e sndromes adrenogenital.
A testosterona considerado como o mais importante dos esterides andrgenos. Nos
homens, que segregada pelas clulas de Leydig e intersticiais dos testculos, que so
estimulados pela hormona luteinizante (LH). Controlo da secreo de testosterona feito
atravs de um ciclo de feedback negativo para o hipotlamo, onde a secreo da hormona
libertadora de gonadotrofinas promove a sntese e libertao de LH e hormonas folculo-
estimulantes (FSH) pela glndula pituitria anterior.
Nas mulheres, a testosterona secretada pelas clulas theca foliculares e intersticiais dos
ovrios e tambm produzidos pelo metabolismo de andrognios adrenais. As concentraes
de testosterona so tipicamente cerca de 10-20 vezes menor para as mulheres do que para
os homens.
Na circulao, cerca de 97% de testosterona transportada por protenas, principalmente
por globulina ligadora de hormona sexual (SHBG), com uma afinidade de cerca de 10
9
L mol
-
1
. A testosterona tambm fracamente ligada albumina.
O ensaio testosterona 2 gerao liberta testosterona a partir de protenas ligadoras e mede
a testosterona total. A testosterona livre pode ser calculada a partir da testosterona total,
SHBG e concentraes de albumina. O ndice de andrgeno livre (FAI) tambm pode ser
calculado (FAI = [testosterona total] / [SHBG]) e fornece um ndice de status de
testosterona livre.
A concentrao de testosterona num indivduo flutua ao longo de 24 horas. A libertao
pulstil de LH durante a noite normalmente leva a um pico de concentrao de testosterona
no perodo da manh. Hora do dia, idade, sexo, puberdade, pr e ps-menopausa, e doenas,
todos tm uma influncia nas concentraes de testosterona e deviam ser consideradas na
interpretao dos resultados idividuais.

63

Princpios Biolgicos do Procedimento
Inicialmente, a amostra, o diluente especfico e as micropartculas paramagnticas
revestidas de anti-testosterona (ovelhas, monoclonal) so combinadas. A testosterona
presente na amostra liga-se micropartculas paramagnticas revestidas de anti-
testosterona. Aps a incubao, o conjugado de testosterona marcado com acridna
adicionado mistura de reaco.
Depois de outra incubao e lavagem, as solues pr-activadora (pr trigger) e activadora
(trigger) so adicionadas e a reaco quimioluminescente resultante medida como
unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao inversa entre a quantidade de
testosterona na amostra e as RLUs detectadas pelo sistema ptico. A concentrao de
testosterona interpolada a partir de uma curva de calibrao estabelecida com
calibradores de concentrao de testosterona conhecido.

Cortisol
O cortisol a principal hormona segregada pela glndula supra-renal de crtex. As suas
funes fisiolgicas incluem a regulao metablica de carboidratos e eletrlitos e a
distribuio de gua. O cortisol tem tambm uma funo imunossupressora e actividade
anti-inflamatria. A gravidez ou tratamentos com estrgeno pode provocar o aumento da
produo de cortisol, assim como os estmulos relacionados com o aumento so stress.
Elevados nveis de cortisol esto associados com os tumores supra-renais, tumores
hipofisrios ou tumores produtores de ACTH ectpica (responsvel prlo sndrome de
Cushing). Os testes ao cortisol so frequentemente realizados, em conjunto com certos
testes, para regular as hormonas segregadas pelo hipotlamo e hipfise. Estes incluem o
teste de supresso de dexametasona (DST), teste de estimulao do ACTH e teste de
tolerncia de insulina. O objetivo dos testes o diagnstico diferencial de sndrome de
Cushing (excesso de produo de cortisol) e da avaliao da Doena de Addison (cortisol
subproduo).

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do cortisol um imunoensaio de uma etapa para a determinao quantitativa de
cortisol em soro humano, plasma ou na urina.
64

A amostra e as microparticulas paramagnticas revestidas com anti-cortisol so
combinadas para criar uma mistura de reaco. O cortisol presente na amostra liga-se s
micropartculas revestidas anti-cortisol. Aps a incubao, a juno de cortisol aos
marcadores de acridinio adicionado mistura de reaco. O conjugado de cortisol e
acridinio compete para os locais de ligao disponveis nas micropartculas revestidas com
anti-cortisol. Aps uma segunda incubao, as micropartculas so lavadas, e as solues
pr-activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so em seguida adicionadas mistura da
reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida como unidades relativas de
luz (RLU). Existe uma relao inversa entre a quantidade de cortisol na amostra e a RLU
detectado por sistema ptico.

Insulina
A insulina um hormnio polipeptdeo (MW 6000), composto por duas cadeias, A e B, que
esto ligados por duas ligaes dissulfureto. A insulina formado a partir de um precursor,
pr-insulina (PM 9000), em que as clulas beta do pncreas.
Na pr-insulina, as cadeias A e B esto ligados por um pptido de ligao, que se refere a
como o C-pptido. Tanto a insulina e o pptido C so armazenadas em grnulos de secreo
as clulas das ilhotas pancreticas e so ento segregados.
A secreo de insulina segue dois mecanismos bsicos, secreo tnica e bifsico secreo.
A secreo basal ou tnica independente da estimulao pela glucose exgena, mas
modulada pelas flutuaes na fisiolgico os nveis de glicose. A secreo bifsica
primariamente uma resposta direta estimulao pela glucose exgena. A estimulao da
secreo de insulina pode ser causado por muitos factores, incluindo hiperglicemia,
glucagon, aminocidos, e por mecanismos complexos envolvendo o hormnio do
crescimento ou catecolaminas.
O aumento dos nveis de insulina devem-se obesidade, sndrome de Cushing,
contraceptivos orais, acromegalia, insulinoma e hipertireoidismo. A diminuio dos nveis
de insulina acontece em utentes com diabetes mellitus e por parte de um complexo
mecanismo que envolva catecolaminas.



65

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da insulina um imunoensaio quimioluminescente de micropartculas (CMIA) para
a determinao quantitativa de insulina no soro ou plasma humano.
So combinadas micropartculas paramagnticas revestidas de anti-insulina, e anti-insulina
conjugada com marcadores de acridinio para criar a mistura de reao. A insulina presente
nas amostras liga-se com as micropartculas de anti-insulina e o conjugado de insulina com
acridinio. Aps uma segunda incubao, as micropartculas so lavadas, e as solues pr-
activadora (pr trigger) e activadora (trigger) so em seguida adicionadas mistura da
reaco. A reaco de quimioluminescncia resultante medida como unidades relativas de
luz (RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade de insulina na amostra e a RLU
detectado por sistema ptico.

Progesterona
A progesterona produzida principalmente pelo corpo lteo do ovrio em mulheres
menstruadas e, em menor medida, pela adrenal crtex. Por volta da 6 semana de gravidez,
a placenta torna-se o maior produtor de progesterona. As principais funes de
progesterona esto na preparao do tero para a implantao e manuteno da gravidez.
Durante a fase folicular do ciclo, os nveis de progesterona permanecem baixo (0,2-1,5 ng /
mL). Seguindo o surgimento de LH e a ovulao, clulas lteas do folculo rompido
produzem progesterona em resposta LH. Durante esta fase ltea, progesterona aumenta
rapidamente at um mximo de 10-20 ng / ml a 5 a 7 dias aps a ovulao. Se a concepo
no ocorrer, os nveis de progesterona diminuem durante os quatro ltimos dias do ciclo
devido regresso do corpo lteo. Se ocorrer a concepo, os nveis de progesterona so
mantidos a nveis de meados de ltea pelo corpus lteo at cerca de seis semanas. Naquele
tempo, a placenta torna-se a principal fonte de progesterona e nveis de subir de cerca de
10-50 ng / mL em o primeiro trimestre de 50-280 ng / mL, no terceiro trimestre.
Serum progesterona um indicador confivel de natural ou induzido ovulao por causa de
sua rpida ascenso aps a ovulao. Distrbios da ovulao, incluindo anovulao, so
relativamente frequentes e so responsveis para a infertilidade em aproximadamente 15-
20% dos pacientes. Os nveis de progesterona so anormalmente baixos nestes pacientes
durante a fase mid-ltea.
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Princpios Biolgicos do Procedimento
O mtodo da progesterona um imunoensaio de uma etapa para determinar a presena de
progesterona no soro e no plasma humano usando Chemiluminescent Microparticle
Imunoensaio tecnologia (CMIA).
So combinadas micropartculas paramagnticas revestidas de progesterona anti-
fluorescena (rato, monoclonal) e anti-progesterona (ovelhas, monoclonal) conjugadas
com marcadores de acridinio. A progesterona presente na amostra compete com o anti-
fluorescena (rato, monoclonal) e o complexo de progesterona fluorescena revestido por
micropartculas de ligao com anti-progesterona (ovinos, monoclonal) conjuga-se com os
marcadores de acridinio para formar o anticorpo antgeno-anticorpos complexos.
As micropartculas so lavadas, e as solues pr-ativadora (pr trigger) e ativadora
(trigger) so em seguida adicionadas mistura da reao. A reao de quimiluminescncia
resultante medida como unidades relativas de luz (RLU).

TSH
A hormona humana estimuladora da tiroide (TSH) ou tirotropina uma glicoprotena com
um peso molecular de aproximadamente 28.000 daltons, sintetizada pelas clulas basfilas
(thyrotropes) da glndula pituitria anterior.
A TSH composta por duas subunidades ligadas no covalentemente designadas alfa e beta.
Embora a subunidade alfa de TSH seja comum para a hormona latinizante (LH), hormona
folculo-estimulante (FSH) e gonadotrofina corinica humana (hCG), as subunidades beta
destas glicoprotenas so hormona especfica e confere especificidade biolgica, bem como
imunolgica. Ambas as subunidades alfa e beta so necessrios para a atividade biolgica.
TSH estimula a produo e a secreo das hormonas da tiroide metabolicamente ativas,
tiroxina (T4) e triiodotironina (T3), por interao com um recetor especfico na superfcie
da clula da tiroide. T3 e T4 so responsveis por regular diversos processos bioqumicos
em todo o corpo que so essenciais para o desenvolvimento normal e metablica e atividade
neural. A sntese e secreo de TSH estimulada pela hormona libertadora da tirotrofina
(TRH), o tripptido hipotalmica, em resposta a baixos nveis de hormonas da tiroide em
circulao.

67

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do TSH um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de hormona estimulante da tiroide humana (TSH) no soro e no
plasma humano que acontece em dois passos.
No primeiro passo, a amostra de TSH e o anticorpo anti-TSH revestido de micropartculas
paramagnticas so combinados. A TSH presente na amostra liga-se ao anticorpo anti-TSH
revestido por micropartculas. Aps a lavagem, acontece o segundo passo, adicionando-se
ao anti- TSH marcadores de acridinio. As micropartculas so lavadas, e as solues pr-
ativadora (pr trigger) e activadora (trigger) so em seguida adicionadas mistura da
reao. Existe uma relao direta entre a quantidade de TSH na amostra e a RLUs detetado
por sistema tico.

Toxo IgG
A Toxoplasma gondii um protozorio intracelular que infecta a maioria das espcies de
animais de sangue quente, incluindo os seres humanos. A toxoplasmose adquirida
principalmente pela ingesto de mal cozida, carne infetada; via ocitos das mos com fezes
contaminadas, alimentos e gua; e maternalmente por transmisso por placenta. Alm
disso, a transmisso associada a transplante de rgo e, durante a transfuso de sangue tem
sido relatada, embora o risco de transmisso atravs da transfuso de sangue seja
extremamente baixo.
A infeo adquirida com Toxoplasma gondii em indivduos saudveis geralmente
assintomtica, contudo 10-20% dos pacientes com infeo aguda podem desenvolver
linfadenopatia. Infees graves podem ocorrer em utentes imunocomprometidos e adultos
pela quimioterapia ou pacientes transplantados que recebem tratamento imunossupressor
AIDS. Estas infees podem ser fatais. A neurotoxoplasmose a apresentao mais comum
e a causa mais frequente de leses focais do sistema nervoso central em utentes com AIDS.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da Toxo Ig G um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
a determinao quantitativa de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii no soro e no plasma
humano que acontece em dois passos.
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No primeiro passo, a amostra pr-diluda de antignio toxoplasma gondii (contendo P30
recombinante antignios (SAG1) e P35 (GRA8)) combinada com micropartculas
paramagnticas revestidas . Os anticorpos especficos do Toxoplasma gondii presentes na
amostra ligam.se s micropartculas revestidas dos antgenos de Toxoplasma gondii
recombinantes. Aps a lavagem, conjugado o IgG antignio com marcadores de acridinio
para criar uma mistura de reao. D-se a segunda etapa.
Aps lavagem das micropartculas, so adicionadas mistura da reao as solues pr-
ativadora (pr trigger) e ativadora (trigger). A reao de quimiluminescncia resultante
medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade
de insulina na amostra e a RLU detetado por sistema tico.

Toxo IgM
O Toxoplasma gondii um protozorio intracelular que infecta a maioria das espcies de
animais de sangue quente, incluindo os seres humanos.
A toxoplasmose adquirida principalmente pela ingesto de mal cozida, carne infetada; via
ocitos das mos com fezes contaminadas, alimentos e gua; e maternalmente por
transmisso transplacentria. Alm disso, a transmisso associada a transplante de rgo e,
durante a transfuso de sangue tem sido relatada, embora o risco de transmisso atravs
da transfuso de sangue extremamente baixo. Infeo adquirida com Toxoplasma gondii
em indivduos saudveis geralmente assintomtica, contudo 10-20% dos pacientes com
infeo aguda podem desenvolver linfadenopatia.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da Toxo Ig M um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
a determinao de anticorpos IgM para o Toxoplasma gondii no soro e no plasma humano,
acontece em dois passos.
No primeiro passo, a amostra pr-diluda de antignio IgM toxoplasma gondii (contendo
P30 recombinante antignios (SAG1) e P35 (GRA8)) combinada com micropartculas
paramagnticas revestidas . Os anticorpos especficos do Toxoplasma gondii presentes na
amostra ligam.se s micropartculas revestidas dos antgenos de Toxoplasma gondii
recombinantes. No segundo passo, aps a lavagem, conjugado o IgM antignio com
69

marcadores de acridinio para criar uma mistura de reao. Depois da lavagem das
micropartculas, so adicionadas mistura da reao as solues pr-ativadora (pr
trigger) e ativadora (trigger).
A reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU).
Existe uma relao direta entre a quantidade de insulina na amostra e a RLU detetado por
sistema tico.

Tabela 5 - Resultados Toxo

T4 total
A Tiroxina (T4) uma hormona que contem iodo, a qual tem um peso molecular de
aproximadamente 777 daltons, e segregada pela glndula tiroide. A T4 e a hormona
associada da tireoide T3 so responsveis por regular diversos processos bioqumicos em
todo o corpo, que so essenciais para o metabolismo normal e atividade neural.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da T4 total um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
a determinao da tiroxina (T4 total) no soro e no plasma humano.
No primeiro passo, a amostra e micropartculas paramagnticas revestidas de anti-T4 so
combinados. A tiroxina T4 removida a partir dos locais de ligao sobre a globulina de
ligao a tiroxina, pr-albumina e albumina. A T4 presente na amostra liga-se as
micropartculas anti-T4 revestido. Na segunda etapa adicionado T4 conjugado marcado
com acridinio e em seguida, adiciona-se mistura da reao as solues pr-ativadora (pr
trigger) e ativadora (trigger).
Toxo IgG Toxo IgM
Toxo IgG
Avidez
Pode indicar / Recomendao de testes:

No reativo No reativo N/A Nenhuma infeco.
No reativo Reativo N/A
Obteno de nova amostra de 2-3 semanas aps a
amostra inicial e teste para Toxo IgG e IgM Toxo.
Reativo No reativo Alta avidez
Infeco curada. Forte indicao de que a infeco
ocorreu h mais de 4 meses atrs.
Reativo Reativo
Baixa
avidez
Obter nova amostra 3 semanas aps a amostra
inicial e teste para Toxo IgG e IgM Toxo.
Reativo Reativo Alta avidez
Infeco curada. Forte indicao de que a infeco
ocorreu h mais de 4 meses atrs.
70

A reao de quimiluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz (RLU).
Existe uma relao inversa entre a quantidade de T4 total na amostra e a RLUs detetado
pelo sistema tico.

T3 total
A 3,5,3 'tri-iodotironina (T3) uma hormona da tiride com um peso molecular de 651
daltons e uma meia-vida no soro de 1,5 dias. Esta hormona circula no sangue como uma
mistura de equilbrio de hormona ligada e livre de protenas. A T3 necessrio para a
existncia da tiroxina globulina (TBG), pr-albumina e albumina. A distribuio real de T3
entre essas protenas de ligao controversa quanto as estimativas variam 38-80% para
TBG, 9-27% para o pr-albumina, e 11-35% para a albumina. A ligao destas protenas
tal que apenas 0,2-0,4% da T3 total est presente na soluo como T3 no ligada ou livre.
Esta frao livre representa a hormona da tiride como fisiologicamente ativa.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da T3total um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
a determinao do total de triiodotironina (T3 total) no soro e no plasma humano.
A amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas com anti-T3 so combinadas
para criar uma mistura de reao. A T3 total presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas anti- T3. A juno de T3 e acridinio compete para os locais de ligao disponveis
nas micropartculas revestidas com anti-T3. Aps a lavagem, a solues pr-ativadora (pr
trigger) e ativadora (trigger) so em seguida adicionadas mistura da reao. A reao de
quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao inversa entre a quantidade de T3 total na amostra e a RLU detectado por sistema
ptico.

PSA Total
O antignio especfico da prstata (PSA), um membro da famlia do gene de calicina humana,
uma protase da serina com atividade semelhante a quimiotripsina. A forma madura de
PSA uma glicoprotena de cadeia nica de 237 aminocidos, contendo 7-8% de hidratos
71

de carbono como uma nica cadeia lateral oligossacridos N-ligado. A PSA tem um peso
molecular de aproximadamente 30.000 daltons.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do PSA total um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
determinao do PSA total (tanto do PSA livre e de PSA complexado com alfa-1-
antiquimotripsina) no soro humano:
1. Como um auxlio na deteo de cancro da prstata, quando utilizado em conjuno com
exame digital rectal (DRE) em homens com 50 anos de idade ou mais velhos . Bipsia da
prstata necessria para o diagnstico de cancro.
2. Como um teste adjuvante para ajudar no tratamento de pacientes de cncer de prstata.
No primeiro passo, a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti-PSA
so combinadas. O PSA presente na amostra liga-se s micropartculas revestidas.de anti-
PSA. Na segunda etapa, aps a lavagem, adicionado ao anti- PSA o conjugado de
marcadores de acridinio . So adicionadas mistura da reao as solues de Pr-Tigger e
Tigger; a reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade de PSA total na amostra e a RLUs
detetada pela tica do sistema.

Testosterona
A testosterona uma hormona sexual masculino, secretada pelas clulas de Leydig ou
clulas intersticiais dos testculos, reguladas e controladas atravs de feedback negativo
sobre o hipotlamo e da hipfise pela hormona da hipfise, hormona latinizante (LH). As
concentraes sricas de testosterona vai passar por uma sequncia de ascenso e queda
durante o estgio fetal at 6 meses aps o parto devido a alteraes hormonais maternas. A
partir de 6 meses at a puberdade, a concentrao de testosterona permanece em cerca de
1 nmol / L (0,3 ng / mL). O aumento dos nveis de testosterona em homens gradual ps
puberdade at atingir o nvel adulto. Nas mulheres, a testosterona produzida
principalmente pela converso perifrica de ferohormonas.
Tpicos nveis fisiolgicos de testosterona:
72

Tabela 6 - Nveis Fisiolgicos de Testosterona

Princpios Biolgicos do Procedimento
Este teste um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de testosterona no soro e no plasma humano.
A amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas com anti- testosterona (rato,
monoclonal) so combinadas para criar uma mistura de reao. A testosterona presente na
amostra liga-se s micropartculas revestidas anti- testosterona (rato, monoclonal). O
conjugado de testosterona e acridinio compete para os locais de ligao disponveis nas
micropartculas revestidas com anti testosterona. Aps lavagem, a solues pr-ativadora
(pr trigger) e ativadora (trigger) so em seguida adicionadas mistura da reao. A reao
de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe
uma relao inversa entre a quantidade de testosterona na amostra e a RLU detectado por
sistema ptico.

Rubella IgM
A infeo por rubola ps-natal primria tipicamente uma doena autolimitada leve
caracterizada por uma erupo macropapular, febre e mal-estar.
Em contraste com infees ps-natais, infees pr-natais primrios pode ter efeitos
arrasadores. Nas infees tero pode danificar gravemente o feto, especialmente se
ocorrem durante os primeiros quatro meses de gestao. A criana congenitamente
infetado pode apresentar um ou mais de uma variedade de defeitos conhecidos
coletivamente como a Sndrome da Rubola Congnita (SRC). Entre eles esto o baixo peso
ao nascer, catarata, surdez, cardiopatia congnita e retardo mental.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Este teste um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a deteo
de anticorpos IgM para o vrus da rubola em soro e plasma humano.
Homem (ng/mL) Mulher (ng/mL)
Pr adolescente 0.01 - 1.77 0.01 - 0.20
Adolescente 0.02 - 8.00 0.02 - 0.40
Adulto 2.80 - 11.00 0.15 - 0.70
73

No primeiro passo, so combinadas a amostra e as micropartculas paramagnticas
revestidas de vrus de rubola parcialmente purificado. Os anticorpos IgM para rubola
presentes na amostra ligam-se s micropartculas revestidas.de vrus da rubola. Na
segunda etapa, aps a lavagem, adicionado ao anti- IgM humano o conjugado de
marcadores de acridinio . So adicionadas mistura da reao as solues de Pr-Tigger e
Tigger; a reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade de anticorpos IgM anti-rubola da
amostra e a RLUs detetada pela tica do sistema.
A presena ou ausncia de anti-IgM de rubola na amostra determinado por comparao
do sinal de quimiluminescncia na reao com o sinal de corte determinada a partir de uma
calibrao prvia. Se o sinal quimiluminescente na amostra maior ou igual ao sinal de
corte, a amostra considerada reativos para IgM anti-rubola.

Rubola IgG
A infeo pelo vrus da rubola ps-natal primria tipicamente uma doena autolimitada
leve caracterizada por uma erupo maculopapular, febre, mal-estar. Em contraste com
infees ps-natais, infees pr-natais primrios podem ter efeitos devastadores. Em
infees tero pode danificar gravemente o feto, especialmente se ocorrem durante os
primeiros quatro meses de gestao. A criana congenitamente infetado pode apresentar
um ou mais de uma variedade de defeitos conhecidos coletivamente como a sndrome da
rubola congnita (SRC). Entre eles esto o baixo peso ao nascer, catarata, surdez,
cardiopatia congnita e retardo mental.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Este teste um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa e qualitativa de anticorpos IgG para o vrus da rubola no soro e
plasma humano. O ensaio Rubola IgG pretende auxiliar na determinao do estatuto imune
da rubola.
No primeiro passo, so combinadas a amostra e as micropartculas paramagnticas
revestidas de vrus de rubola parcialmente purificado. Os anticorpos IgG para rubola
presentes na amostra ligam-se s micropartculas revestidas.de vrus da rubola. Na
segunda etapa, aps a lavagem, adicionado ao anti- IgG humano o conjugado de
74

marcadores de acridinio . So adicionadas mistura da reao as solues de Pr-Tigger e
Tigger; a reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz
(RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade de anticorpos IgG anti-rubola da
amostra e a RLUs detetada pela tica do sistema.

Prolactina
A prolactina produzida pela hipfise anterior e a sua secreo regulada fisiologicamente
por inibidora 3 e 4 libertando factores do hipotlamo. A prolactina aparece no sangue
imediatamente aps a administrao de hormonas libertadoras de tirotrofina (TRH). A
principal ao fisiolgica da prolactina a iniciao e manuteno da lactao em mulheres.
A prolactina humana (hPRL) um polipptido de cadeia nica de 199 aminocidos e um
peso molecular de aproximadamente 23.000 daltons. A sua existncia como uma entidade
qumica distinta, separada da hormona do crescimento, foi criada atravs de uma srie de
estudos entre 1965 e 1971.

Princpios Biolgicos do Procedimento
Este teste um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de prolactina no soro e no plasma humano.
No primeiro passo, a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti-
prolactina (rato, monoclonal) so combinadas. A prolactina presente na amostra liga-se s
micropartculas revestidas.de anti-prolactina (rato, monoclonal). Na segunda etapa, aps a
lavagem, adicionado anti-prolactina (rato, monoclonal) o conjugado de marcadores de
acridinio . So adicionadas mistura da reao as solues de Pr-Tigger e Tigger; a reao
de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe
uma relao direta entre a quantidade de prolactina na amostra e a RLUs detetada pela tica
do sistema.

LH
uma hormona latinizante humana (LH, lutropina) uma hormona de glicoprotena com
duas subunidades diferentes (e ). A subunidade essencialmente idntico para as
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subunidades da hormona folculo-estimulante (FSH, folitropina), a hormona estimulante da
tiride (TSH, tirotrofina), e gonadotrofina corinica humana (hCG). O -subunidade
consideravelmente diferente do que o de FSH e TSH. No entanto, as subunidades de LH e
a hCG so muito semelhantes.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste da LH um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de hormona latinizante humana (LH) no soro e no plasma
humano. O teste da LH um imunoensaio que se sucede em duas etapas.
No primeiro passo, a amostra e as micropartculas paramagnticas revestidas de anti- LH
so combinadas. A hormona LH presente na amostra liga-se s micropartculas
revestidas.de anti- LH. adicionado na segunda etapa, aps a lavagem, o conjugado de
acridinio ao anti-LH. So adicionadas mistura da reao as solues de Pr-Tigger e Tigger;
a reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU).
Existe uma relao direta entre a quantidade de LH na amostra e a RLUs detetada pela tica
do sistema.

HIV Ag/Ab Combo
O sndrome da imunodeficincia adquirida (AIDS) causado por dois tipos de vrus da
imunodeficincia humana.
O HIV o agente etiolgico da AIDS. O HIV transmitido por contato sexual, exposio a
sangue ou Hemo-derivados e infeo pr-natal de um feto ou infeo perinatal de um recm-
nascido. Os anticorpos contra o HIV so quase sempre detetado em pacientes com AIDS e
HIV infetados assintomticos, e infeo pelo HIV sempre detetado em pacientes com Aids
e seropositivos pela cultura ou amplificao do RNA viral e / ou DNA pr-viral.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do HIV Ag/Ab Combo um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes
(CMIA) para a deteo qualitativa simultnea de antgeno p24 de HIV e de anticorpos para
o vrus da imunodeficincia humana tipo 1 e/ou tipo 2 (HIV-1/HIV-2) no soro ou plasma
humano.
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No primeiro passo, as amostras de ensaio de e as micropartculas paramagnticos com
antignio HIV-1/HIV-2 e p24 de HIV so combinadas. O antignio p24 do HIV e anticorpos
HIV-1/HIV-2 presentes na amostra ligam-se ao antignio HIV-1/HIV-2 e p24 de HIV das
micropartculas revestidas de anticorpos monoclonal (rato). Aps a lavagem, o antignio
p24 do HIV e anticorpos HIV-1/HIV-2 ligam-se aos marcadores com acridinio conjugados
(antignios recombinantes HIV-1/HIV-2 , pptidos sintticos, e p24 do HIV [rato,
monoclonais]).
Seguindo um outro ciclo de lavagem, solues de pr-Tigger e Tigger so adicionadas
mistura de reao. A reao de quimiluminescncia resultante medida como unidades
relativas de luz (RLU). Existe uma relao direta entre a quantidade de antgeno HIV e
anticorpos na amostra e a RLUs detetada pela tica do sistema. A presena ou ausncia do
antignio p24 do HIV ou HIV-1/HIV-2 anticorpos na amostra determinado por
comparao do sinal de quimiluminescncia na reao com o sinal de corte determinada a
partir de uma calibrao de HIV Ag / Ab Combo.
As amostras com o sinal de corte (S / CO) com valores maiores ou iguais a 1,00 so
considerados reativos para o antignio p24 do HIV ou anticorpos HIV-1/HIV-2. As amostras
com valores S / CO inferior a 1,00 so considerados no reativos para o antgeno p24 do HIV
ou anticorpos HIV-1/HIV-2.

HBeAg
A determinaes HBeAg pode ser utilizado para monitorizar o progresso da infeco pelo
vrus da hepatite B. O HBeAg primeiramente detetvel na fase inicial da infeo do vrus
da hepatite B, depois do aparecimento de antignios de superfcie da hepatite B (HBsAg). os
ttulos de ambos os antignios subir rapidamente durante o perodo de replicao viral em
infeo aguda.
A presena de HBeAg se correlaciona com aumento do nmero de vrus infeciosos
(partculas de Dane), a ocorrncia de partculas do ncleo do ncleo do hepatcito, e a
presena do ADN especfico do vrus da hepatite B e de polimerase de ADN no soro. O HBeAg
pode persistir juntamente com HBsAg em infeo viral da hepatite B crnica. No entanto,
um subconjunto de doentes com hepatite B crnica no tm HBeAg detetvel no soro, mas
so positivos para anticorpos para HBeAg (anti-HBe); esses utentes podem tambm ser
positivo para o vrus da hepatite B no soro do ADN.
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Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do HBeAg um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para
a deteco qualitativa de hepatite B e antgeno (HBeAg) em soro e plasma humano e
indicado para uso como auxiliar no diagnstico e monitoramento da infeo viral da
hepatite B. O ensaio HBeAg um imunoensaio de dois passos.
No primeiro passo, a amostra de diluente de ensaio, e micropartculas paramagnticas
revestidas de anti-HBe (rato, monoclonal so combinados). O HBeAg presente na amostra
liga-se as micropartculas revestidas com anti-HBe. Aps a lavagem, o acridinio adicionado
e junta-se ao anti-HBe, esta a segunda etapa. Seguindo um outro ciclo de lavagem, as
solues de pr-Tigger e Tigger so adicionadas mistura de reao. A reao de
quimiluminescncia resultante medida como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao direta entre a quantidade de HBeAg na amostra e a RLUs.

FSH
O Folculo Estimulante de hormonas (FSH, folitropina) uma glicoprotena de
aproximadamente 30.000 daltons, que, com uma hormona latinizante (LH, lutropina),
gonadotrofina corinica humana (hCG) e hormnio estimulador da tiride (TSH,
tirotrofina), consiste em duas subunidades no covalentemente associados designados e
. A subunidade de FSH contm 92 aminocidos e muito semelhante das subunidades
de LH, hCG, e TSH. A subunidade de FSH nica e confere a sua especificidade
imunolgica e funcional.

Princpios Biolgicos do Procedimento
O teste do FSH um imunoensaio de micropartculas quimiluminescentes (CMIA) para a
determinao quantitativa de hormona folculo-estimulante (FSH) no soro e no plasma
humano. Acontece em dois passos.
No primeiro passo, a amostra e micropartculas paramagnticas anti- FSH revestidos so
combinados. O FSH presente na amostra liga-se a micropartculas de FSH revestidas anti-.
na segunda etapa, aps a lavagem, adicionado o acridinio aos anti- FSH. As solues de
Pr -Tigger e Tigger so, em seguida, adicionadas mistura da reao; a reao de
quimiluminescncia resultante medido como unidades relativas de luz (RLU). Existe uma
relao direta entre a quantidade de FSH na amostra e a RLUs detetado por sistema tico.
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IV. Bibliografia
https://www.abbottdiagnostics.com/en-us/products/ARCHITECT-ci4100.html
http://www.bloomberg.com/apps/news?pid=newsarchive&sid=aTpvPaQsZHt8
http://labvirtual.eq.uc.pt/siteJoomla/index.php?Itemid=451&id=103&option=com_cont
ent&task=view#2

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