PARAMETROS DE

CALIDAD DE LA
BROMATOLOGIA
MIEL (VI)
HIDROXIMETILFURFURAL
Nuestro Cdigo Alimentario (1967) especifica entre las
caractersticas a que debe responder la miel ... : ccc) Oximetilfurfurol,
no ms del 0,5 por 100 ... Contenido que estimamos desmerusado y
que se aparta totalmente de la realidad como tendremos ocasin de
comentar ms adelante.
Posteriormente la Norma sobre la miel" (B.O.E. 1975 y 1976)
expone en su apartado cc2.1.8. Actividad lde la diastasa y contenido
en hidroximetilfurfural.
lndice de diastasa en la escala de Got-
he, determinado despus de la elabo-
racin y mezcla: No menos de 8,
siempre que el contenido de hidroxi-
metilfurfural no sea mayor de
40 mg/kg.
Mieles con un contenido bajo en enzi-
mas naturales: por ejemplo, mieles de
ctricos, contenido en diastasa a la es-
cala de Gothe: No menos de 3, siem-
pre que el contenido de hidroximetil-
furfural no sea mayor de 15 mg/Kg.
En esta nueva disposicin el conteni-
do de hidroximetilfurfural (denomina-
cin ms adecuada que oximetilfur-
furol) se ajusta mejor a la realidad. En
el anterior texto resultaba inmesurable:
0,5 por 100 supondra 5000 mg/Kg.
Adems en esta se contempla la rela-
cin entre este parmetro, que no sea
mayor de 40 mg/kg (coherente con la
realidad) y el contenido en diastasas.
Igualmente se tiene en cuenta las pe-
culiaridades de las mieles de ctricos
por su bajo contenido enzimtico.
OFFARM Vol. 3 N 12/1984
Ms recientemente, la Orden de 5 de
Agosto (B.O.E. 1983) en su apartado,
5.3.3. Grado de frescura. Determina-
do despus de tratamiento y mezcla.
Actividad diastsica: Como mnimo el
8 en la escala de Gothe. Las mieles
con bajo contenido enzimtico, como
mnimo el 3 en la escala de Gothe,
siempre que el contenido en hidroxi-
metilfurfural no exceda de 15 mg/Kg.
Hidroximetilfurfural: No ms de
40 mg/Kg.
Como se desprende de su lectura no
varia el contenido de lo legislado con
el de la Norma sobre la miel (B.O.E.
1975 y 1976).
El hidroximetilfurfural se forma a partir
de los azcares por la presencia de
cido y/o calentamiento.
Desde principios de siglo, Browne,
C.A. (1908) demuestra que al calentar
suficientemente la miel da una prueba
positiva de hidroximetilfurfural.
Desde entonces, varias pruebas calo-
rimtricas fueron practicadas para
comprobar la adicin de almbares y
azcares invertidos a la miel. Entre s-
tas la del resorcinol (Fiehe) y la de la
anilina (Feder), se han estudiado y mo-
dificado continuamente.
Fiehe, J. (1929) determina el azcar in-
vertido con ayuda de una solucin
clorhdrica de resorcina, que da un co-
lor rojo cereza sobre el extracto etreo
de la miel problema. Tambin lo reali-
za por precipitacin mediante la floro-
glucina.
Weis, F. (1930) trata el extracto etreo
con ufla solucin actica de hidrazina
dando un compuesto Insolubl e en
agua '1 ter de petrleo. El precipita-
jo, tras las operaciones adecuadas, es
pesado y en funcin de ste se esta-
blece la cantidad de hidroximetil-
furfural.
Lampitt, L.H. y col. (1931) y Gautier,
J .A. y col. (1961) basndose en traba-
jos realizados por Shannon, Sher-
767
BROMATOLOGIA -----------------
wood, Greenleaf y Browne llegan a
concluir que las pruebas calorimtricas
eran tiles para distinguir la adultera-
cin del proceso de almacenamiento.
Llegando a sugerir ms tarde estos l-
timos que un prolongado almacena-
miento podra conducir tambin a una
acumulacin de hidroximetilfurfural su-
ficiente para dar positivo, siendo el
tiempo requerido funcin de la tempe-
ratura de almacenamiento. Asi mismo,
Lampitt y col. (1931) fueron los prime-
ros en demostrar el efecto positivo que
tiene la acidez en la formacin de hi-
droximetilfurfural.
Brannsdorf, K. (1932) compara la sen-
sibilidad de las pruebas de la floroglu-
cina y del resorcinol dando sta ltima
como ms sensible.
Rudolph, P. y Barsch, H. (1932), Mo-
reaux, B. (1936) y Mateu, G. {1938) si-
guen la reaccin de Fiehe con
pequeas variantes y estudian su sen-
sibilidad en cuanto a las mieles calen-
tadas y adulteradas.
La publicacin por Winkler, O. (1956)
de dos mtodos cuantitativos, para la
determinacin de hidroximetilfurfural
en la miel sirvi para que los pases
europeos establecieran lmites para el
contenido del mismo en relacin a los
valores de diastasa, ya que suponen
que sus propiedades caractersticas y
organolpticas estan viciadas por el
calor. Uno de estos mtodos efectua
la determinacin por reaccin colorea-
da que se produce en presencia de
cido barbitrico y p-toluidina, median-
te su espectro de absorcin.
Schade, J.'E. y col. (1958) emplean-
do el mtodo cuantitativo de Winkler,
O. demuestran la variacin entre las
mieles y que los efectos de almace-
namiento, calor y factores de com-
posicin influan en la formacin de hi-
droximetilfurfural y relacionan esta
formacin con su contenido inicial y la
humedad, amn de otros factores des-
conocidos.
Hadorn, H. y Kovacs, A.J. (1960) es-
tudiaron el efecto del almacenamien-
768
toen varios tipos de miel importada a
50 C y ms tarde Hadorn, H. (1961 )
atribuy el menor grado de formacin
de ste en mieles suizas calentadas a
su alto pH (4,5-5), en contraste con la
mayora de las otras mieles (pH = 3,8).
Gautier, J.A. ; Renault , J. y Alvrez, J.
(1961) revisan los mtodos seguidos
hasta entonces y proponen la reaccin
de Fiehe, J. y la cromatografa en pa-
pel como las tcnicas ms sensibles.
Duisberg, H. y Hadorn, H. resumen el
anlisis de 1554 mieles importadas en-
tre los aos 1960 y 1966 y que reco-
ge el Manuel Suisse des Denres
Alimentaires (197 4).
White, J .W. Jr. y col. (1964) sometie-
ron tres muestras de miel a almacena-
miento en un margen de siete
temperaturas entre -20 oc y 60 oc
analizando su contenido y determinan-
do grficamente el tiempo aproxima-
do que requiere una miel para
acumular 4 y 20 mg de H.M.F. por
100 gramos.
Tanto Piette, A.M. (1965) , como Duis-
berg, H. (1967) y Montes, AL. (1981)
consideran que los mejores resultados
son los obtenidos por el mtodo cua-
litativo de Fiehe modificado por Gau-
tier, J.A. y como cuantitativo el de
Winkler, O. Este ltmo modificado es
considerado como mtodo oficial en
Espaa (B.O.E. 1975) y figura en nu-
merosas obras como la del Manuel
Suisse des Denres Alimentaires
(1974). El de Fiehe, J. sigue figuran-
do en obras como la A.O.A.C. como
mtodo para investigar la adicin de
azcar invertido comercial, no siendo
concluyente.
Dhar, A.K. y Roy, B. R. (1972) presen-
tan un mtodo para la determinacin
de hidroximetilfurfural en la miel que
incluye el uso de una columna de ab-
sorcin en carbn activo.
El uso efectivo de los niveles de hidro-
ximetilfurfural para demostrar la adi-
cin de azcar invertido a la miel ,
requiere tener en cuenta las condicio-
nes de almacenamiento y procesado
as como la variacin que en el aumen-
to de hidrometilfurfural poseen las mie-
les segn el Manuel Suisse des
Denres Alimentaires (197 4).
White, J.W. Jr. (1979) y White, J.W. Jr., '
Kushnier, l. y Doner, L.W. (1979) pro-
ponen un mtodo espectrofotomtrico
para la valoracin de hidroximetilfurfu-
ral en miel por lectura de las absorban-
cas a 284 y 336 nm empleando como
agentes clarificantes las soluciones Ca-
rrez y para conseguir el blanco en la
porcin alcuota tratan la solucin de
miel clarificada con una de bisulfito s-
dico al 0,20 % (PN) de grado tcnico,
que ser al O, 1 O % (PN) previa dilu-
cin del problema, cuando se trate de
mieles con alto contenido en hidroxi-
metilfurfural. Este mtodo considerado
como Official First Action>> ha sido ra-
tificado por la A.O.A.C. (1982).
White, J.W. Jr. y Siciliano, J. (1980)
realizan la determinacin de hidroxi-
metilfurfural a fin de establecer la adi-
cin de azcar invertido como
adulteracin fijando la cuanta del mis-
mo, estableciendo la relacin con otros
parmetros.
Jeuring, H.J. y Kuppers, F.J.E.M.
(1980) aplican la cromatografa de al-
ta resolucin a la determinacin de es-
te dato y los resultados obtenidos son
relacionados con el mtodo de Wink-
ler, O. encontrando que existen dife-
rencias estadsticamente significativas.
Las muestras con un contenido menor
de 40 mg/Kg no dan respuesta ade-
cuada en el mtodo de Winkler.
Asi pues, conservar la miel en su es-
tado natural de alta calidad, delicioso
sabor y fragancia es posiblemente la
mayor responsabilidad del apicultor y
del envasador. Es, al mismo tiempo,
la operacin que recibe menos aten-
cin que ninguna otra por parte de to-
da la cadena de produccin y
comercializacin habida cuenta de la
incorrecta creencia ampliamente ex-
tendida de la calificacin de imperece-
dera que tiene la miel.
OFFARM Vol 3 N.
0
12/ 1984
Panales con cera estampada nueva,
no mezclar los cuadros de extraccin
con los de alimentacin del ltimo in-
vierno (habr cristales de glucosa); re-
cipientes y utensilios perfectamente
limpios antes de la nueva cosecha,
con especial cuidado de fisuras don-
de puedan encontrarse cristales de
glucosa, higiene en os apiarios (el pol-
vo e incluso el polen y las burbujas de
aire favorecen la granulacin) , etc. y
almacenamiento, tanto por parte del
productor como por toda la cadena de
comercializacin a una temperatura
adecuada ... , darian como resultado
una menor merma en las cualidades
de la miel al no precisar tratamientos
tan enrgicos en _la etapa de pro-
cesado.
Cuando las condiciones nos sean des-
favorables ser necesario realizar la
pasteurizacin de la miel y todas las
consideraciones que en nuestro ante-
rior artculo sobre las diastasas haba-
mos expuesto deben ser tenidas en
cuenta. Interesa destacar que el calor
especfico de la miel se relaciona con
su contenido en agua. La sensibilidad
trmica de la miel y su baja conduc-
tancia han supuesto una tecnologa
avanzada en el procesado de la miel
que va desde el habitual intercambia-
dar de calor, pasando por el horno de
microondas hasta llegar al calenta-
miento dielctrico.
En resumen, el hidroximetilfurfural no
es un componente intrnseco de la
miel, sin embargo se forma fcilmen-
te a partir de los azcares y su conte-
nido final depende del tiempo y de la
temperatura de almacenamiento, de la
composicin (pH y hmedad, funda-
mentalmente) y del contenido inicial
del mismo. Su relacin con el conteni-
do en diastasas permite tipificar la miel
en cuanto a las condiciones de proce-
sado y almacenamiento, as como po-
sibilita el descubrimiento de la accin
fraudulenta de azcar invertido.
Por nuestra parte se han probado los
mtodos de Winkler y de White a fin
de establecer la idoneidad de los mis-
mos. La medida de este parmetro en
OFFARM Vol. 3 N.a 12/1984
mieles comerciales se ha efectuado a
intervalos de un ao por dos veces al
objeto de poder observar ia evolucin
del contenido en hidroximetilfurfural.
PARTE EXPERIMENTAL
Para la evaluacin de este parmetro
se han ensayado los mtodos de
Winkler (1955) y el de White (1979).
En todos los casos la comprobacin
de los mtodos se llev a cabo utilizan-
do una solucin patrn de hidroxime-
tilfurfural preparada a partir de 5
Hydroximethyl-2-furaldehyde Fluka
AG, Buchs SG Art. 55690, cuya rique-
za se establece espectrofotomtrica-
mente siendo= 16.830 (J.H. Turnes,
1954) a 284 nm.
(A2s4 - A24s + A32sl
2
y empleando concentraciones de O a
BROMATOLOGIA
300 ug. La figura 1 recoge el registro
grfico de una de estas escalas.
Es de destacar que el compuesto de-
be guardarse en nevera y que es fo-
tosensible por lo que el producto y
disoluciones debern ser protegidas
adecuadamente. El reactivo viene co-
mercialmente en frasco topacio en at-
msfera de nitrgeno en cantidad de
1 g. Hemos observado que es nece-
saria la comprobacin continua de su
nqueza, por lo que se recomienda s-
ta y no el almacenamiento prolonga-
do. Un eJemplo de este clculo se
recoge en la Tabla 1 (126 es el peso
molecular del hidroximetilfurfural).
Las soluciones de miel por lo anterior-
mente expuesto debern ensayarse in-
mediatamente y en ambiente de
penumbra. la toma de muestra debe-
r realizarse agitando la misma con
ayuaa de una esptula para homoge-
nizarla, procedindose con las m1smas
precauciones que en la medida del n-
dice de diastasa.
0,40 Patrn de H.M.F .
o
0,30
IJ
e
o
n
..
o
0,20
111
n
<
0,10
.. ,J\.,.A
220 280 340 220 280 340 220 280 340 220 280 340 'A (nm)
Figura 1 Registro de una escala patrn de h1drox1metllfurfural.
771
BROMATOLOGIA ----------------
TABLA 1
Evaluacin de la riqueza del hidroximetilfurfural patrn
mg/100 mi
0,049
0,098
0,197
0,295
r=0,99999
a= 0,0001659
b = 1,2287
Riqueza en % del hidroximetilfurfural =
1 MTODO OFICIAL
EN ESPAA (B.O.E. 1975)
Fundamento
Se basa en el mtodo de Winkler
(1955) y no Winger como indica nues-
tra legislacin por error evidentemente.
En el cual se mide el color desarrolla-
do por el hidroximetilfurfural cuando se
mezcla con p-toluidina en isopropanol
y cido barbitrico. La lectura se efec-
ta a 550 nm frente a un ensayo en
blanco conteniendo las primeras solu-
ciones y agua en vez de cido barbi-
trico.
Reactivos
- Solucin de cido barbitrico. Se
pesan 500 mg de cido barbitrico
Merck p.a. Art. 132 y se trasvasan a
un matraz aforado de 1 00 m\., em-
pleando 70 mi. de agua destilada. Se
colocan en un bao Mara hasta su di-
solucin, se enfra y se completa has-
ta el volumen a 20 oc
- Solucin de p-toluidina. Se pesan
10,00 g. de p-toluidina para la deter-
minacin de hidroximetilfurfural segn
Winkler Merck Art. 10841 y se disuel-
ven en 50 mi de isopropanol Merck
p.a. Art 9636, calentando suavemen-
te a bao Mara. Se trasvasan a un ma-
traz aforado de 1 00 mi con isopropa-
772
Absorbancia neta
1 Lectura ~ Lectura
0,060 0,060
0,120 0,121
0,241 0,242
0,362 0,363
1228,7x 126
=92,0
10 X 16830
nol y se aaden 1 O mi de cido acti-
co glacial Merck p.a. Art. 90062. Se
enfra y completa a volumen con iso-
propano\. Se conserva la solucin en
lugar oscuro y no se emplea hasta que
por lo menos hayan transcurrido ven-
ticuatro horas.
- Agua destilada (libre de oxgeno)
haciendo pasar nitrgeno N-48 a tra-
vs de agua destilada en ebullicin.
- Hidroximetilfurfural Fluka AG,
Buchs SG Art . 55690.
Material y aparatos
- Espectrofotmetro Hitachi 100-60,
ultravioleta visible de doble haz.
- Cubetas apareadas de 1 cm de
espesor.
- Otro material de uso corriente en la-
boratorios de investigacin.
Procedimiento
El indicado en la Norma espaola so-
bre la miel (B.O.E. 1975) en su apar-
tado 6.8.5.
6.8.5.1. Preparacin de la muestra de
ensayo.
Pesar 1 O gramos de la muestra de
miel y disolver, sin calentar, en 20 mi-
lilitros de agua destilada libre de ox-
geno (6.8.2.3.). Transvasar esta
solucin a un matraz graduado de 50
mililitros y completar hasta volumen
(solucin de miel). La muestra deber
someterse a ensayo inmediatamente
despus de preparada.
6.8.5.2. Determinaciones fotomtricas.
Con una pipeta, verter 2,0 mililitros de
solucin de miel en cada uno de dos
tubos de ensayo y aadir en cada uno
de ellos 5,0 mililitros de solucin de p-
toluidina. Echar en uno de los tubos,
con una pipeta, un mililitro de agua y,
en otro, un mililitro de solucin de ci-
do barbitrico y agitar ambas mezclas.
El tubo, al que se ha aadido agua,
sirve como testigo. La adicin de los
reactivos debe hacerse ininterrumpida-
mente y terminarse en uno o dos
minutos.
Inmediatamente despus de haber al-
canzado el valor mximo (entre tres a
cuatro minutos, despus de la adicin
del cido barbitrico), leer la absorban-
ca de !a muestra contra el testigo a
550 nm., empleando una clula de
1 centmetro.
Clculos y expresin de
resultados
Como se ha indicado, en el mtodo
oficial espaol se consigue establecer
los mg de hidroximetilfurfural/1 00 g de
muestra, mediante la frmula general
de la espectrofotometra multiplicando
la absorbancia por la constante 19,2
obtenida con el coeficiente de extin-
cin molar, el espesor de la cubeta, el
peso molecular del hidroximetilfurfural
y el factor de dilucin.
Precisin
Como en las anteriores ocasiones se
establece 1 O veces sobre la misma
muestra. Los resultados obtenidos se
recogen en la Tabla 11.
En un principio se dud de los reacti-
vos, ms adelante nos preguntabamos
si la realizacin del mtodo por nues-
tra parte era correcta; pero nada con-
OFFARM Vol. 3 N 12/1984
J
..
-..
1
11
lJ
TABLA 11
Precisin del mtodo de Winkler en la determinacin de hidroximetilfurfural
0,105
0,085
0,080
0,090
0,093
0,100
0,087
0,082
0,084
0,090
X 0,0896
Sn-1 0,00793
Cv% 8,9
TABLA 111
Estudio de la recuperacin del mtodo de Winkler
de la determinacin de hidroximetilfurfural
HIDROXIMETILFUR-
FURAL PRESENTE AADIDO ENCONTRADO RECUPERACION
EN CADA MIEL
9,20 64,22 82,95
56,59 18,40 71,56 81,34
27,60 78,29 78,62
9,20 26,80 52,03
22,01 18,40 30,54 46,35
27,60 35,03 47,17
9,20 43,41 73,18
36,68 18,40 50,90 77,27
27,60 59,58 82,97
9,20 53,74 55,35
48,65 18,40 59,28 57,78
27,60 64,82 58,59
9,20 90,87 78,13
83,68 18,40 98,50 80,56
27,60 105,54 79,20
9,20 29,49 86,20
21,56 18,40 36,98 83,80
27,60 43,86 80,80
9,20 26,20 63,47
.20,36 18,40 32,93 68,31
27,60 39,82 70,51
X 70,69
Sn-1 12,97
Cv% 18,35
18,40 18,41 100,07
Patrn 1 27,60 27,10 98,17
36,80 35,78 97,22
46,00 44,31 96,33
18,40 19,76 107,39
Patrn 2 27,60 27,24 98,71
36,80 35,18 95,86
46,00 43,26 94,05
X 98,48
Sn-1 4,05
Cv% 4,11
OFFARM Vol. 3 N 12/1984
BROMATOLOGIA
seguimos para mejorar este aspecto.
An as, indagamos su exactitud.
Exactitud
Se realiz sobrecargando 7 mieles co- '
merciales con cantidades crecientes
de hidroximetilfurfural equivalentes a
18,4, 27,6 y 36,8 mg/Kg respectiva-
mente. Igualmente se aplic el mto-
do de Winkler a la escala patrn en
dos ocas1ones sucesivas (vase T a-
bla 111).
Como es lgico, dada la alta.variacin
del mtodo se obtuvieron resultados
discordantes (Tabla 111).
Por lo cual consideramos que este m-
todo debe ser rechazado como oficial.
No tiene precisin y en consecuencia
no tiene exactitud. El reactivo p-
toluidna es txico, son reactivos caros,
etc.
Paralelamente fue puesto a punto el
mtodo que emplea bisulfito sdico y
que era interinamente oficial en la
A.O.A.C. y hoy Official First Action.
El comprobar que ste era correcto y
no el de la p-toluidina cOn el mismo
mtodo de trabajo nos convenci ms
an de la no idoneidad del mtodo de
Winkler . oficial en Espaa y que no ha-
ba sido considerado por la A.O.A.C.
2? Mtodo oficial en la
A.O.A.C. (1982)
Fundamento
Se basa en el mtodo de White (1979)
que utiliza dos porciones alcuotas cla-
rificadas de la muestra. Una de ellas,
a la que se adiciona agua destilada se
lee frente a la otra, a la cual se le aa-
de 1gual volumen de solucin de bisul-
fito sdico. Este reactivo destruye la
absorbancia debida al hidroximetilfur-
fural por rotura de los dobles enlaces
conjugados con lo que las otras absor-
bancias inespecficas son corregidas.
775
BROMATOLOGIA -----------------
Reactivos
- Solucin Carrez l. Se disuelven 15 g
de ferrocianuro potsico trihidratado
Merck p.a. Art. 4984, en agua destila-
da y se lleva a un volumen de 100 mi.
-Solucin Carrez 11. Se disuelven
30 g de acetato de zinc dihidratado
Merck p.a. Art. 8802 en agua destila-
da y se lleva a un volumen de 100 mi.
- Solucin de bisulfito sdico al
0,20 % (PIV). Se pesan 0,20 g de bi-
sulfito sdico Fluka Art. P 6049 y se lle-
van a 100 mi con agua destilada. La
disolucin se prepara extempornea-
mente con bisulfito sdico de grado
tcnico o similar.
- Alcohol absoluto Probus 99-100 Art.
54595.
Materia y aparatos
- Papel de filtro Whatman n 40 de
11 cm de dimetro.
- Espectrofotmetro Hitachi 100-60,
ultravioleta visible de doble haz.
- Cubetas de cuarzo apareadas de
1 cm de espesor.
- Otro material de uso corriente en la-
boratorios de investigacin.
Procedimiento
Se transfieren alrededor de 5 g de miel
(pesados en balanza analtica) a un
matraz aforado de 50 mi empleando
un total de 25 mi de agua destilada.
Se aaden 0,50 mi de solucin Carrez
1, se agita, se aaden 0,50 mi de solu-
cin Carrez 11 , se agita y se lleva hasta
el volumen con agua destilada. En ca-
so de formacin de espuma en la su-
perficie, aadase un poco de alcohol.
Fltrese y rechacense los primeros mi
del filtrado.
Se pipetean 5 mi del lquido filtrado en
2 tubos de ensayo. Se aaden 5 mi de
agua al de la muestra y 5 mi de solu-
776
~ t. ~ 1
1 ~ 1 C 1 AL
25 so 75 100 125 150 175
Comerc i ales
Vl HMF (rng/Kg)
~ 1 '"AO
~
5
1. "' 1 ~ 1 - 1 1 1 1
25 50 75 100 125 150 175 200 225 250
Hi droxirnet i! furfural (mg./Kg)
Figura 2.
50
'
' ,
_, ,' i e: es e o m ere : al es
o
....
..? 30
....
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~
E
x 20
o
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10
'
o
'
'
'
,
,
,
2
Tiempo (aos)
Figura 3. Representacin grfica de los valores promedios de hidroximetilfurfural frente al tiempo
durante su almacenamiento a la temperatura de laborator o.
cin de bisulfito al 0,20% (PIV) al tes-
tigo. Se mezclan bien y se determina
la absorbancia en cubetas de 1 cm a
las longitudes de onda de 284 y
336 nm. En el caso de que la absor-
bancia superase el valor de 0,6, diluir
!a solucin de la muestra c.on el volu-
men apropiado de agua y en la solu-
cin de referencia destruir el H.M.F.
esta vez con una solucin de bisulfito
al O, 1 O % (PN), multiplicando poste-
riormente el factor de la absorbancia
obtenida por el apropiado factor de di-
lucin.
OFFARM Vol. 3 ~ 12/1984
Clculos y expresin de
resultados
mg H.M.F./1000 g de miel=
5
= (A284-A336) X X 149,7
g de muestra
El factor de 149,7 =
1 26 1 000 X 1 000
16830 X _1_0_ 5
Donde: 126 es el peso molecular del
hidroximetilfurfural , 16830 el coeficien-
te de extincin molar del hidroximetil-
furfural a 284 nm, 1 000 son los mg de
un gramo, 1 O los centilitros de un litro,
1 000 para expresar! os por kilo y 5 los
gramos de muestra.
Precisin
J
Se estudi la precisin del mtodo rea-
lizando diez anlisis de una misma
muestra, obtenindose resultados sa-
tisfactorios (Tabla IV).
Exactitud
Se utiliz el mtodo de la sobrecarga.
A las soluciones de las mieles se les
aadi el equivalente en mg/Kg de
9,2, 18,4 y 27,6 respectivamente.
La recuperacin result satisfactoria
pues sta presenta un promedio del
97,2 con un coeficiente de variacin
por ciento del 2,12 como muestra la
Tabla V.
Resultados y Discusin
El contenido en hidroximetilfurfural, co-
mo es lgico tambin es ms alto en
las mieles de menor ndice de diasta-
sa dado que este valor se incremen-
tara por un calentamiento excesivo y/o
un largo almacenamiento. De tal ma-
nera que de las muestras comerciales
sobrepasan el valor de 40 mg/Kg los
nmeros 2, 4, 7, 1 O, 18, 20 y 22. Esta
ltima con un valor de diastasa de 8,1
roza el lmite legal (vase Tabla VI).
OFFARM Vol. 3 N 12/ 1984
BROMATOLOGIA
TABLA IV
Comprobacin de la Precisin del mtodo de White
para la determinacin de hidroximetilfurfural
57,6
58,1
58,1
57,9
58,0
57,2
57,9
57,9
57,0
56,9
X 57,7
Sn-1 0,460
Cv%
0,79
TABLA V
Estudio de la recuperacin del mtodo de White
para la determinacin de hidroximetilfurfural
.
HIDROXIMETILFUR-
-
FURAL PRESENTE AADIDO ENCONTRADO RECUPERACION
EN CADA MIEL
9,20 65,03 99,89
55,84 18,40 74,17 99,61
27,60 83,93 101 '76
9,20 41,06 98,01
32,04 18,40 49,68 95,86
27,60 58,44 95,64
9,20 51,66 97,84
42,66 18,40 60,57 97,33
27,60 69,42 96,94
9,20 48,50 92,69
39,97 18,40 57,43 94,89
27,60 66,63 96,60
9,20 100,23 100,08
91,02 18,40 109,02 97,82
27,60 118,08 98,04
9,20 30,59 94,94
21,86 18,40 39,51 95,92
27,60 48,92 98,06
9,20 32,04 96,11
23,20 18,40 40,88 96,08
27,60 50,12 97,54
X 97,22
Sn-1 2,06
Cv% 2,12
La dispers1n de estos resultados y su representado promedios frente al tie m-
variacin del contenido en hidroxime-
po transcurrido en aos.
tilfurfurai pueden observarse en las fi-
guras 2 y 3. En esta ltima se han Es de sealar que los incrementos e n
779
BROMATOLOGIA
TABLA VI
Mieles comerciales
N!' ndice de HIDROXIMETILFURFURAL
orden Domicilio social diastasas Inicial 1!" ao
1 ASTORGA (LEON)
2 BARCELONA
3 BARCELONA
4 BARCELONA
5 BARCELONA
6 BARCELONA
7 BARCELONA
8 BARCELONA
9 BARCELONA
10 BARCELONA
11 BARCELONA
12 BARCELONA
13 BARCELONA
14 MADRID
15 MADRID
'
16 MADRID
17 MADRID
18 CAAVERAL (CACERES)
19 JIJONA (ALICANTE)
20 ALCANTARILLA (MURCIA)
21 ANDUJAR (JAEN)
22 ANDUJAR (JAEN)
23 ANDUJAR (JAEN)
24 DOS HERMANAS
X
(SEVILLA)
Sn-1
Cv o/o
hidroximetilfurfural son ms intensos
en aquellas muestras que inicialmen-
te tenan menos contenido en este
componente y la gran correlacin de
los resultados de hidroximetilfurfural
con el ndice de diastasas.
Conclusiones
1 Se demuestra que el mtodo de
Winkler para la determinacin de hi-
droximetilfurfural en la miel, oficial en
Espaa, carece de precisin y exacti-
tud. Asi mismo, se comprueba la vali-
dez del mtodo de White, Official First
Action en la A.OAC. (Cv%=0,79 y
% de recuperacin= 97,2), por lo que
se sugiere, sustituya a aquel como m-
todo oficial.
2Por lo que respecta al contenido en
hidroximetilfurfurai de las mieles co-
merciales analizadas, se observa que
780
18,8 5,60 12,11
6,4 103,00 240,10
18,2 12,80 18,34
5,7 88,30 108,13
16,7 7,80 11,96
24,0 2,11 4,22
2,3 96,30 113,30
12,8 14,50 25,92
8,2 22,30 39,13
6,7 110,50 127,16
17,5 16,50 30,39
14,3 24,20 35,59
21,0 4,80 12,94
26,5 9,18 17,16
25,4 1,91 3,79
12,5 21,00 38,17
26,7 7,10 17,17
8,1 96,80 120,24
14,4 23,80 39,91
4,0 50,80 62,21
21,8 14,80 31,24
7,9 48,30 76,04
16,0 18,40 27,89
13,2 22,80 37,88
14,5 34,32 51,71
7,35 36,11 55,06
50,7 105,2 106,5
7 muestras superan los 40 mg/Kg que
es el mximo legal permitido. Igual-
mente, como tuvimos ocasin de de-
mostrar en el trabajo anteriormente
publicado, para las mismas muestras
se observa que no superan el valor de
8 exigido para el ndice de diastasas
(la muestra nmero 18 roza este lmi-
te) lo que pone de manifiesto una in-
correcta manipulacin.
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Toxicologa y Anlisis Qumico
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de Farmacia y Seccin de
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