Estructura de la clula bacteriana

Las bacterias son organismos relativamente sencillos. Sus dimensiones son muy reducidas, unos 2 m de
ancho por 7-8 m de longitud en la orma cil!ndrica "bacilo# de tama$o medio% aun&ue son muy recuentes
las especies de ',(-),( m.
*l tratarse de organismos procariotas, tienen las caracter!sticas b+sicas correspondientes como la
carencia de un n,cleo delimitado por una membrana aun&ue presentan un nucleoide, una estructura
elemental &ue contiene una gran molcula circular de *-.. El citoplasma carece de org+nulos delimitados
por membranas y de las ormaciones protoplasm+ticas propias de las clulas eucariotas. En el citoplasma
se pueden apreciar pl+smidos, pe&ue$as molculas circulares de *-. &ue coe/isten con el nucleoide,
contienen genes y son com,nmente usados por los procariontes en la con0ugaci1n. El citoplasma tambin
contiene vacuolas "gr+nulos &ue contienen sustancias de reserva# y ribosomas "utili2ados en la s!ntesis de
prote!nas#.
3na membrana citoplasm+tica compuesta de l!pidos rodea el citoplasma y, al igual &ue las clulas de las
plantas, la mayor!a posee una pared celular, &ue en este caso est+ compuesta por peptidoglicano
"mure!na#. La mayor!a de bacterias, presentan adem+s una segunda membrana lip!dica "membrana
e/terna# rodeando a la pared celular. El espacio comprendido entre la membrana citoplasm+tica y la pared
celular "o la membrana e/terna si esta e/iste# se denomina espacio peripl+smico. *lgunas bacterias
presentan una c+psula y otras son capaces de desarrollarse como endosporas, estados latentes capaces
de resistir condiciones e/tremas. Entre las ormaciones e/teriores propias de la clula bacteriana destacan
los lagelos y los pili.
Estructuras intracelulares
La membrana citoplasm+tica de las bacterias es similar a la de plantas y animales, si bien generalmente
no presenta colesterol.
La membrana citoplasm+tica bacteriana tiene una estructura similar a la de plantas y animales. Es una
bicapa lip!dica compuesta undamentalmente de osol!pidos en la &ue se insertan molculas de prote!nas.
En las bacterias reali2a numerosas unciones entre las &ue se incluyen las de barrera osm1tica, transporte,
bios!ntesis, transducci1n de energ!a, centro de replicaci1n de *-. y punto de ancla0e para los lagelos. *
dierencia de las membranas eucari1ticas, generalmente no contiene esteroles "son e/cepciones
micoplasmas y algunas proteobacterias#, aun&ue puede contener componentes similares denominados
hopanoides.
4uchas importantes reacciones bio&u!micas &ue tienen lugar en las clulas se producen por la e/istencia
de gradientes de concentraci1n a ambos lados de una membrana. Este gradiente crea una dierencia de
potencial an+loga a la de una bater!a elctrica y permite a la clula, por e0emplo, el transporte de
electrones y la obtenci1n de energ!a. La ausencia de membranas internas en las bacterias signiica &ue
estas reacciones tienen &ue producirse a travs de la propia membrana citoplasm+tica, entre el citoplasma
y el espacio peripl+smico.
(5
6uesto &ue las bacterias son procariotas no tienen org+nulos citoplasm+ticos delimitados por membranas
y por ello presentan pocas estructuras intracelulares. 7arecen de n,cleo celular, mitocondrias, cloroplastos
y de los otros org+nulos presentes en las clulas eucariotas, tales como el aparato de 8olgi y el ret!culo
endoplasm+tico.
((
7omo e/cepci1n, algunas bacterias contienen estructuras intracelulares rodeadas por
membranas &ue pueden considerarse primitivos org+nulos. E0emplos son los tilacoides de las
cianobacterias, los compartimentos &ue contienen amonio monoo/igenasa en .itrosomonadaceae y
diversas estructuras en 6lanctomycetes.
(9
7omo todos los organismos vivos, las bacterias contienen ribosomas para la s!ntesis de prote!nas, pero
stos son dierentes a los de eucariotas.
(7
La estructura de los ribosomas y el *:. ribosomal de ar&ueas y
bacterias son similares, ambos ribosomas son de tipo 7'S mientras &ue los ribosomas eucariotas son de
tipo 8'S. Sin embargo, la mayor!a de las prote!nas ribosomiales, actores de traducci1n y *:.t ar&ueanos
son m+s parecidos a los eucari1ticos &ue a los bacterianos.
4uchas bacterias presentan vacuolas, gr+nulos intracelulares para el almacena0e de sustancias, como por
e0emplo gluc1geno,
(8
poliosatos,
(;
a2ure
9'
o polihidro/ialcanoatos.
9)
7iertas especies bacterianas
otosintticas, tales como las cianobacterias, producen ves!culas internas de gas &ue utili2an para regular
su lotabilidad y as! alcan2ar la proundidad con intensidad de lu2 1ptima y<o unos niveles de nutrientes
1ptimos.
92
=tras estructuras presentes en ciertas especies son los carbo/isomas "&ue contienen en2imas
para la i0aci1n de carbono# y los magnetosomas "para la orientaci1n magntica#.
Elementos del citoes&ueleto de Caulobacter crescentus. En la igura, estos elementos procari1ticos se
relacionan con sus hom1logos eucariotas y se hipoteti2a su unci1n celular.
9>
-ebe tenerse en cuenta &ue
las unciones en la pare0a ?ts@-4reA se invirtieron durante la evoluci1n al convertirse en tubulina-actina.
Las bacterias no tienen un n,cleo delimitado por membranas. El material gentico est+ organi2ado en un
,nico cromosoma situado en el citoplasma, dentro de un cuerpo irregular denominado nucleoide.
95
La
mayor!a de los cromosomas bacterianos son circulares, si bien e/isten algunos e0emplos de cromosomas
lineales, por e0emplo, Borrelia burgdorferi. El nucleoide contiene el cromosoma 0unto con las prote!nas
asociadas y *:.. El orden 6lanctomycetes es una e/cepci1n, pues una membrana rodea su nucleoide y
tiene varias estructuras celulares delimitadas por membranas.
(9
*nteriormente se pensaba &ue las clulas procariotas no pose!an citoes&ueleto, pero desde entonces se
han encontrado hom1logos bacterianos de las principales prote!nas del citoes&ueleto de los eucariontes.
9(
Estos incluyen las prote!nas estructurales ?ts@ "&ue se ensambla en un anillo para mediar durante la
divisi1n celular bacteriana# y 4reA "&ue determina la anchura de la clula#. El citoes&ueleto bacteriano
desempe$a unciones esenciales en la protecci1n, determinaci1n de la orma de la clula bacteriana y en
la divisi1n celular.
99
Estructuras e/tracelulares
Las bacterias disponen de una pared celular &ue rodea a su membrana citoplasm+tica. Las paredes
celulares bacterianas est+n hechas de peptidoglicano "llamado antiguamente mure!na#. Esta sustancia
est+ compuesta por cadenas de polisac+rido enla2adas por pptidos inusuales &ue contienen amino+cidos
-.
97
Estos amino+cidos no se encuentran en las prote!nas, por lo &ue protegen a la pared de la mayor!a de
las peptidasas. Las paredes celulares bacterianas son distintas de las &ue tienen plantas y hongos,
compuestas de celulosa y &uitina, respectivamente.
98
Son tambin distintas a las paredes celulares de
*rchaea, &ue no contienen peptidoglicano. El antibi1tico penicilina puede matar a muchas bacterias
inhibiendo un paso de la s!ntesis del peptidoglicano.
98
E/isten dos dierentes tipos de pared celular bacteriana denominadas 8ram-positiva y 8ram-negativa,
respectivamente. Estos nombres provienen de la reacci1n de la pared celular a la tinci1n de 8ram, un
mtodo tradicionalmente empleado para la clasiicaci1n de las especies bacterianas.
9;
Las bacterias 8ram-
positivas tienen una pared celular gruesa &ue contiene numerosas capas de peptidoglicano en las &ue se
inserta +cido teicoico. En cambio, las bacterias 8ram-negativas tienen una pared relativamente ina,
consistente en unas pocas capas de peptidoglicano, rodeada por una segunda membrana lip!dica "la
membrana e/terna# &ue contiene lipopolisac+ridos y lipoprote!nas.
Las micoplasmas son una e/cepci1n, pues carecen de pared celular. La mayor!a de las bacterias tienen
paredes celulares 8ram-negativas% solamente son 8ram-positivas ?irmicutes y *ctinobacteria. Estos dos
grupos eran antiguamente conocidos como bacterias 8ram-positivas de contenido 87 ba0o y bacterias
8ram-positivas de contenido 87 alto, respectivamente.
7'
Estas dierencias en la estructura de la pared
celular dan lugar a dierencias en la susceptibilidad antibi1tica. 6or e0emplo, la vancomicina puede matar
solamente a bacterias 8ram-positivas y es ineica2 contra pat1genos 8ram-negativos, tales como
Haemophilus influenzae o Pseudomonas aeruginosa.
7)
-entro del ilo *ctinobacteria cabe hacer una
menci1n especial al gnero Mycobacterium, el cual, si bien se encuadra dentro de las 8ram positivas, no
parece serlo desde el punto de vista emp!rico, ya &ue su pared no retiene el tinte. Esto se debe a &ue
presentan una pared celular poco com,n, rica en +cidos mic1licos, de car+cter hidr1obo y ceroso y
bastante gruesa, lo &ue les coniere una gran resistencia.
4uchas bacterias tienen una capa S de molculas de prote!na de estructura r!gida &ue cubre la pared
celular.
72
Esta capa proporciona protecci1n &u!mica y !sica para la supericie celular y puede actuar como
una barrera de diusi1n macromolecular. Las capas S tienen diversas "aun&ue todav!a no bien
comprendidas# unciones. 6or e0emplo, en el gnero Campylobacter act,an como actores de virulencia y
en la especie Bacillus stearothermophilus contienen en2imas supericiales.
7>
Los lagelos son largos apndices ilamentosos compuestos de prote!nas y utili2ados para el movimiento.
Bienen un di+metro apro/imado de 2' nm y una longitud de hasta 2' m. Los lagelos son impulsados por
la energ!a obtenida de la transerencia de iones. Esta transerencia es impulsada por el gradiente
electro&u!mico &ue e/iste entre ambos lados de la membrana citoplasm+tica.
75
Las imbrias son ilamentos inos de prote!nas &ue se distribuyen sobre la supericie de la clula. Bienen un
di+metro apro/imado de 2-)' nm y una longitud de hasta varios m. 7uando se observan a travs del
microscopio electr1nico se aseme0an a pelos inos. Las imbrias ayudan a la adherencia de las bacterias a
las supericies s1lidas o a otras clulas y son esenciales en la virulencia de algunos pat1genos.
7(
Los pili
son apndices celulares ligeramente mayores &ue las imbrias y se utili2an para la transerencia de
material gentico entre bacterias en un proceso denominado con0ugaci1n bacteriana.
79
4uchas bacterias son capaces de acumular material en el e/terior para recubrir su supericie.
-ependiendo de la rigide2 y su relaci1n con la clula se clasiican en c+psulas y glicocali/. La c+psula es
una estructura r!gida &ue se une irmemente a la supericie bacteriana, en tanto &ue el glicocali/ es le/ible
y se une de orma la/a. Estas estructuras protegen a las bacterias pues diicultan &ue sean agocitadas por
clulas eucariotas tales como los macr1agos.
77
Bambin pueden actuar como ant!genos y estar implicadas
en el reconocimiento bacteriano, as! como ayudar a la adherencia supericial y a la ormaci1n de
biopel!culas.
78
La ormaci1n de estas estructuras e/tracelulares depende del sistema de secreci1n bacteriano. Este
sistema transiere prote!nas desde el citoplasma al periplasma o al espacio &ue rodea a la clula. Se
conocen muchos tipos de sistemas de secreci1n, &ue son a menudo esenciales para la virulencia de los
pat1genos, por lo &ue son e/tensamente estudiados.
7;
Endosporas
Bacillus anthracis "te$ido p,rpura# desarroll+ndose en el l!&uido cealorra&u!deo. 7ada pe&ue$o segmento
es una bacteria.
7iertos gneros de bacterias 8ram-positivas, tales como Bacillus, Clostridium, Sporohalobacter,
Anaerobacter y Heliobacterium, pueden ormar endosporas.
8'
Las endosporas son estructuras durmientes
altamente resistentes cuya unci1n primaria es sobrevivir cuando las condiciones ambientales son
adversas. En casi todos los casos, las endosporas no orman parte de un proceso reproductivo, aun&ue
Anaerobacter puede ormar hasta siete endosporas a partir de una clula.
8)
Las endosporas tienen una
base central de citoplasma &ue contiene *-. y ribosomas, rodeada por una corte2a y protegida por una
cubierta impermeable y r!gida.
Las endosporas no presentan un metabolismo detectable y pueden sobrevivir a condiciones !sicas y
&u!micas e/tremas, tales como altos niveles de lu2 ultravioleta, rayos gamma, detergentes, desinectantes,
calor, presi1n y desecaci1n.
82
En este estado durmiente, las bacterias pueden seguir viviendo durante
millones de a$os,
8>

85
e incluso pueden sobrevivir en la radiaci1n y vac!o del espacio e/terior.
8(
Las
endosporas pueden tambin causar enermedades. 6or e0emplo, puede contraerse carbunco por la
inhalaci1n de endosporas de Bacillus anthracis y ttanos por la contaminaci1n de las heridas con
endosporas de Clostridium tetani.
89
7lasiicaci1n e identiicaci1n
7ultivo de E. coli, donde cada punto es una colonia.
La clasiicaci1n ta/on1mica busca describir y dierenciar la amplia diversidad de especies bacterianas
poniendo nombres y agrupando organismos seg,n sus similitudes. Las bacterias pueden clasiicarse con
base en dierentes criterios, como estructura celular, metabolismo o con base en dierencias en
determinados componentes como *-., +cidos grasos, pigmentos, ant!genos o &uinonas.
)2;
Sin embargo,
aun&ue estos criterios permit!an la identiicaci1n y clasiicaci1n de cepas bacterianas, a,n no &uedaba
claro si estas dierencias representaban variaciones entre especies dierentes o entre distintas cepas de la
misma especie. Esta incertidumbre se deb!a a la ausencia de estructuras distintivas en la mayor!a de las
bacterias y a la e/istencia de la transerencia hori2ontal de genes entre especies dierentes,
)>'
la cual da
lugar a &ue bacterias muy relacionadas puedan llegar a presentar morolog!as y metabolismos muy
dierentes. 6or ello, y con el in de superar esta incertidumbre, la clasiicaci1n bacteriana actual se centra
en el uso de tcnicas moleculares modernas "ilogenia molecular#, tales como la determinaci1n del
contenido de guanina<citosina, la hibridaci1n genoma-genoma o la secuenciaci1n de *-. ribos1mico, el
cual no se ve involucrado en la transerencia hori2ontal.
)>)
El 7omit Cnternacional de Sistem+tica de 6rocariotas "C7S6# es el organismo encargado de la
nomenclatura, ta/onom!a y las normas seg,n las cuales son designados los procariotas.
)>2
El C7S6 es
responsable de la publicaci1n del 71digo Cnternacional de .omenclatura de Aacterias "lista de nombres
aprobados de especies y ta/ones bacterianos#.
)>>
Bambin publica la :evista Cnternacional de
Aacteriolog!a Sistem+tica "Cnternational Dournal o Systematic Aacteriology#.
)>5
En contraste con la
nomenclatura procari1tica, no hay una clasiicaci1n oicial de los procariotas por&ue la ta/onom!a sigue
siendo una cuesti1n de criterio cient!ico. La clasiicaci1n m+s aceptada es la elaborada por la oicina
editorial del 4anual Aergey de Aacteriolog!a Sistem+tica "AergeyEs 4anual o Systematic Aacteriology#
como paso preliminar para organi2ar el contenido de la publicaci1n.
)>(
Esta clasiicaci1n, conocida como
FBhe Ba/onomic =utline o Aacteria and *rchaeaF "B=A*#, est+ disponible en Cnternet.
)>9
-ebido a la
reciente introducci1n de la ilogenia molecular y del an+lisis de las secuencias de genomas, la clasiicaci1n
bacteriana actual es un campo en continuo cambio y plena e/pansi1n.
)>7

)>8
La identiicaci1n de bacterias en el laboratorio es particularmente relevante en medicina, donde la
determinaci1n de la especie causante de una inecci1n es crucial a la hora de aplicar un correcto
tratamiento. 6or ello, la necesidad de identiicar a los pat1genos humanos ha dado lugar a un potente
desarrollo de tcnicas para la identiicaci1n de bacterias.
Streptococcus mutans visuali2ado con la tinci1n de 8ram. 7ada pe&ue$o punto de la cadena es una
bacteria.
La tcnica de tinci1n de membranas de bacterias de 8ram, desarrollada por Gans 7hristian 8ram en
)885,
)>;
ha supuesto un antes y un despus en el campo de la medicina, y consiste en te$ir con tintes
espec!icos diversas muestras de bacterias en un portaob0etos para saber si se han te$ido o no con dicho
tinte.
)5'
3na ve2 se han adicionado los tintes espec!icos en las muestras, y se ha lavado la muestra pasados unos
minutos para evitar conusiones, hay &ue limpiarlas con unas gotas de alcohol et!lico. La unci1n del
alcohol es la de eliminar el tinte de las bacterias, y es a&u! donde se reconocen las bacterias &ue se han
tomadoH si la bacteria conserva el tinte, es una 8ram positiva, las cuales poseen una pared m+s gruesa
constituida por varias decenas de capas de diversos componentes proteicos% en el caso de &ue el tinte no
se mantenga, la bacteria es una 8ram negativa, la cual posee una pared de una composici1n dierente. La
unci1n biol1gica &ue posee sta tcnica es la de abricar antibi1ticos espec!icos para esas bacterias.
Esta tinci1n es empleada en microbiolog!a para la visuali2aci1n de bacterias en muestras cl!nicas. Bambin
se emplea como primer paso en la distinci1n de dierentes especies de bacterias,
)5)
consider+ndose
bacterias 8ram positivas a a&uellas &ue se tornan de color violeta y 8ram negativas a las &ue se tornan de
color ro0o.
)52

)5>
En el an+lisis de muestras cl!nicas suele ser un estudio undamental por cumplir varias uncionesH
Cdentiicaci1n preliminar de la bacteria causante de la inecci1n.
7onsideraci1n de la calidad de la muestra biol1gica para el estudio, es decir, permite apreciar el n,mero
de clulas inlamatorias as! como de clulas epiteliales. * mayor n,mero de clulas inlamatorias en cada
campo del microscopio, m+s probabilidad de &ue la lora &ue cre2ca en los medios de cultivo sea la
representativa de la 2ona inectada. * mayor n,mero de clulas epiteliales sucede los contrario, mayor
probabilidad de contaminaci1n con lora sapr1ita.
3tilidad como control de calidad del aislamiento bacteriano. Las cepas bacterianas identiicadas en la
tinci1n de 8ram se deben corresponder con aislamientos bacterianos reali2ados en los cultivos. Si se
observan mayor n,mero de ormas bacterianas &ue las aisladas, entonces hay &ue reconsiderar los
medios de cultivos empleados as! como la atm1sera de incubaci1n.
4orolog!a
Las bacterias se dierencian de las clulas eucari1ticas en &ue no tienen membrana nuclear ni org+nulos
citoplasm+ticos, a,n as! son organismos dotados de una gran comple0idad.
Las principales estructuras presentes en las bacterias sonH
7+psula bacteriana. Es una capa e/terna &ue no presenta una estructura deinida y est+ presente en las
bacterias pat1genas. Entre sus unciones destaca la regulaci1n del intercambio de sustancias o la
protecci1n rente a bacteri1agos o anticuerpos.
6ared bacteriana. Es una envuelta r!gida &ue mantiene la orma de la clula rente a los cambios de
presi1n osm1tica, regula el paso de iones y es resistente a los antibi1ticos. Su estructura se observa
gracias a la tinci1n 8ram, &ue permite dierenciar dos grupos de bacteriasH las 8ram positiva y las 8ram
negativa.
4embrana plasm+tica. Es una membrana de tipo unitario &ue limita al citoplasma y regula el paso de
sustancias. Se caracteri2a por la ausencia de colesterol y la presencia de mesosomas "invaginaciones
hacia el interior de la clula# en los &ue se sit,an en2imas &ue llevan a cabo la mayor!a de los procesos y
la *-. polimerasa.
7itoplasma. Es una disoluci1n gelatinosa de agua y prote!nas de aspecto granuloso &ue rodea al
nucleoide, &ue es donde se sit,a el material gentico. 7onsta de ribosomas ",nicos org+nulos#,
inclusiones "sustancias acumuladas por la bacterias# y ves!culas "almacen de sustancias#.
4aterial gentico. Es una ,nica y larga molcula de *-. circular y bicatenario asociada a prote!nas no
hist1nicas. *dem+s e/isten los pl+smidos "pe&ue$as molculas circulares de *-.#.
6ili y imbrias. Son estructuras tubulares en la supericie de bacterias 8ram negativas como sistema de
ancla0e.
?lagelos. Son estructuras de locomoci1n &ue aparecen en n,mero variable. Salen de las envueltas
bacterianas. Se componen de un cuerpo basal u de un largo ilamento.
?isiolog!a
La estructura bacteriana les permite llevar a cabo las unciones propias de cual&uier ser vivoH nutrici1n,
reproducci1n y relaci1n.
.utrici1n
Son el grupo de seres vivos m+s amplio de la naturale2a, por lo &ue presentan una gran gama de
metabolismos.
Se clasiican seg,n la uente de carbono necesaria para sinteti2ar molculas org+nicas y seg,n el origen
de la energ!a empleadaH
Aacterias otoaut1troas. 7aptan la energ!a de la lu2, ya &ue reali2an la otos!ntesis y utili2an 7=
2
como
uente de carbono. 7aracter!stico de las cianobacterias.
Aacterias otoorgan1troas. :eali2an la otos!ntesis y la uente de carbono son molculas org+nicas.
Aacterias &uimioaut1troas. =btienen la energ!a &ue liberan reacciones de o/idaci1n de molculas
inorg+nicas. La uente de carbono es el 7=
2
. Estas bacterias son imprescindibles para los ciclos
biogeo&u!micos.
Aacterias &uimioorgan1troas. La energ!a procede de de la o/idaci1n de molculas org+nicas, &ue tambin
constituye la uente de carbono. Es propia de la mayor!a de las bacterias, &ue son los pricipales seres
descomponedores.
:eproducci1n
Las bacterias son seres haploides &ue se reproducen ase/ualmente por bipartici1n.
*dem+s e/isten otros mecanismos, denominados parase/uales, &ue implican recombinaci1n gentica, por
lo &ue generan variabilidadH
7on0ugaci1n. 3na bacteria donadora transmite *-. de sus pl+smidos a travs de pilis se/uales a una
bacteria receptora.
Bransormaci1n. Las bacterias captan del medio ragmentos de *-. &ue integran en su cromosoma.
Bransducci1n. Las bacterias intercambian material gentico mediante un virus transmisor o bacteri1ago.
7recimiento bacteriano
El crecimiento se muestra como L I log"n,m# donde n,m es el n,mero de colonias por mL con actividad
reproductora positiva, rente a "tiempo.#
El crecimiento bacteriano es la divisi1n de una bacteria en dos clulas hi0as en un proceso llamado isi1n
binaria. 6reviniendo &ue no se produ2ca ning,n caso de mutaci1n las clulas hi0as resultantes ser+n
genticamente idnticas a la clula original. -e este modo tiene lugar la Fduplicaci1n localF de la poblaci1n
bacteriana. Las dos clulas hi0as creadas tras la divisi1n no sobreviven necesariamente. Sin embargo, si el
n,mero de supervivientes supera la unidad, en promedio, la poblaci1n bacteriana e/perimenta un
crecimiento e/ponencial. La medici1n de una curva del crecimiento e/ponencial de las bacterias en un
cultivo ha sido tradicionalmente una parte de la ormaci1n de todos los microbi1logos. Los procesos
undamentales empleados para ello son la enumeraci1n bacteriana "conteo bacteriano# por mtodos
directos e individuales "microscop!a, citometr!a de lu0o
)
#, por mtodos directos y masivos "biomasa#, por
mtodos indirectos e individuales "conteo de colonias#, o por mtodos indirectos y en blo&ue "n,mero m+s
probable, turbide2, absorci1n de nutrientes#. Los modelos permiten conciliar la teor!a con las mediciones.
2
7recimiento
?ases del crecimiento bacteriano.
El crecimiento bacteriano sigue tres ases. 7uando una poblaci1n bacteriana se encuentra en un nuevo
ambiente con elevada concentraci1n de nutrientes &ue le permiten crecer necesita un per!odo de
adaptaci1n a dicho ambiente. Esta primera ase se denomina ase de adaptaci1n o ase lag y conlleva un
lento crecimiento, donde las clulas se preparan para comen2ar un r+pido crecimiento, y una elevada tasa
de bios!ntesis de las prote!nas necesarias para ello, como ribosomas, prote!nas de membrana, etc.
)'(
La
segunda ase de crecimiento se denomina ase e/ponencial, ya &ue se caracteri2a por el crecimiento
e/ponencial de las clulas. La velocidad de crecimiento durante esta ase se conoce como la tasa de
crecimiento ! y el tiempo &ue tarda cada clula en dividirse como el tiempo de generaci"n g. -urante esta
ase, los nutrientes son metaboli2ados a la m+/ima velocidad posible, hasta &ue dichos nutrientes se
agoten, dando paso a la siguiente ase. La ,ltima ase de crecimiento se denomina ase estacionaria y se
produce como consecuencia del agotamiento de los nutrientes en el medio. En esta ase las clulas
reducen dr+sticamente su actividad metab1lica y comien2an a utili2ar como uente energtica a&uellas
prote!nas celulares no esenciales. La ase estacionaria es un per!odo de transici1n desde el r+pido
crecimiento a un estado de respuesta a estrs, en el cual se activa la e/presi1n de genes involucrados en
la reparaci1n del *-., en el metabolismo antio/idante y en el transporte de nutrientes.
)'9
7onteo bacteriano
El conteo bacteriano se$ala la magnitud de la poblaci1n total bacteriana, en ese sentido se puede
determinar por muchas tcnicas &ue se basan en algunos de los siguientes tipos de medidaH cuenta celular
"directamente al microscopio o mediante un contador electr1nico de part!culas o indirectamente con la
cuenta de colonias#, masa celular "en orma directa pesando el contenido celular del nitr1geno o
indirectamente por turbidimetr!a, proporcional al n,mero de clulas# y actividad celular "indirectamente
relacionando el grado de actividad bio&u!mica al tama$o de la poblaci1n bacteriana#.E/isten muchos
medios dierenciales, en la practica rutinaria se usan los siguientesH
Bipos de conteo bacteriano
7onteo en ca0a de petriH 4todo m+s usado para contar bacterias. 3n caldo de cultivo con
microorganismos es diluido y posteriormente muestras del mismo son distribuidas en la ca0a de petri
contenedora de agar. Es de suponerse &ue cada clula se dividir+ en sus m,ltiples alrededores para
producir colonias separadas en el agar. 7ada clula es llamada unidad ormadora de colonias "3?7#.
-espus de la incubaci1n, el n,mero de colonias se rele0ar+ en el n,mero de clulas 3?7 originalmente
presentes. Es importante considerar un n,mero limitado de colonias pues de no ser as!, stas pueden
sobrepoblarse y diicultar el conteo de las mismas "rango sugerido de acuerdo a ?-* 2(-2(' colonias#. El
conteo se acilita utili2ando un contador de colonias.
Este mtodo es deseable por&ue arro0a el total de clulas viables "s1lo clulas vivas#% en contraste con el
conteo microsc1pico y el conteo de peso seco. 3na desventa0a se encuentra en el tiempo &ue re&uiere
para producir las colonias, ya &ue se necesitan como m!nimo 25 horas o m+s. 6or otra parte, no es )''J
iable por&ue regularme las colonias crecen unidas en cadenas o en grupos.
7onteo por iltraci1nH Es reali2ado cuando la cantidad de bacterias es muy pe&ue$a, como en casos de
lagos y arroyos relativamente puros. En esta tcnica se necesitan al menos )'' ml. de agua &ue
atraviesen una membrana delgada de un iltro, con poros tan pe&ue$os &ue no permitan el paso de
bacterias, de esta orma stas son retenidas en la supericie del iltro. 6osteriormente el iltro es transerido
a una ca0a de petri &ue cuenta con un caldo nutritivo, en la cual las colonias surgen de las bacterias en la
supericie del iltro. Las colonias bacterianas ormadas por este mtodo son distintivas cuando se ocupan
un medio dierencial.
Este mtodo es aplicado recuentemente en la detecci1n y enumeraci1n de bacterias coliormes, las
cuales son indicadores de contaminaci1n ecal en la comida o en el agua.
4todo del n,mero m+s probable ".46#H Es una tcnica de estimaci1n estad!stica basada en el hecho
&ue a mayor n,mero de bacterias en una muestra, mayor ser+ la diluci1n necesitada para reducir la
densidad hasta el punto en &ue ninguna bacteria se le permita crecer en la serie de tubos de diluci1n.
4uestras microbianas son a$adidas a tubos con caldos de lactosa y la presencia o ausencia de gas
ormado en la ermentaci1n y da un estimado de n,mero de clulas.
Este mtodo es m+s ,til cuando las bacterias &ue est+n siendo contados no crecer+n en medios s1lidos,
como en el caso de 7hemoautotro phic nitriying bacteria. Bambin es ,til cuando el crecimiento de la
bacteria es en un medio l!&uido dierencial, usado para identiicar microbios, como en bacterias coliormes.
El .46 es la ,nica airmaci1n en la cual e/iste ;(J de probabilidad &ue la poblaci1n bacteriana sea de
rango correcto, siendo el n,mero estad!stico m+s probable.
-eterminaci1n directa por microscopioH Las clulas se pueden contar como un rote te$ido colocando en la
preparaci1n un volumen conocida de la suspensi1n de clulas sobre un +rea conocida del portaob0etos.
-espus de haber i0ado y te$ido el rote, es posible contar con un microscopio las bacterias.
7omo no es pr+ctico recorrer toda el +rea, se cuenta el n,mero de clulas en unos cuantos campos
microsc1picos seleccionados al a2ar. Si el di+metro del campo microsc1pico se mide con micr1metro
ob0etivo, se puede calcular +cilmente el +rea, entonces el n,mero de campos en ) cm2 se multiplicar+ por
el promedio del n,mero de clulas por campo y despus por )'' "si se vierte .') ml# el resultado ser+
igual al n,mero de clulas por mililitro. Este mtodo es susceptible a muchas cr!ticas debido a su alta de
uniormidad al momento de hacer el rote.
4todo de turbiedadH 6ara algunos e/perimentos, es necesario estimar turbiedad, ya &ue es una orma
pr+ctica de monitorear el crecimiento bacteriano. 7omo una bacteria se multiplica en un medio l!&uido,
ste se torna turbio o de aspecto nublado por las clulas.
El instrumento usado para medir la turbiedad es un espectroot1metro "color!metro#. En el
espectroot1metro, un ha2 de lu2 es transmitido a travs de la suspensi1n bacteriana a un detector
sensible a la lu2. 4ientras incremente el n,mero de bacterias, menor ser+ la lu2 captada por el detector.
Este cambio en la lu2 se registrar+ en la escala del instrumento como el porcenta0e de transmisi1n.
Bambin se registra una e/presi1n logar!tmica llamada absorbancia "algunas veces nombrada densidad
1ptica#, un valor derivado del porcenta0e de transmisi1n &ue puede ser reportado. 4+s de un mill1n de
clulas por mil!metro deben estar presentes para &ue la primera se$al de turbiedad sea visible.
*pro/imadamente de )' millones a )'' millones de clulas por mililitro son necesitadas para hacer una
suspensi1n suicientemente turbia para leer en el espectroot1metro. La turbiedad no es ,til para medir
contaminaci1n en l!&uidos por la pe&ue$a cantidad relativa de bacterias.
-eterminaci1n del peso seco en las clulasH Es el mtodo m+s directo para las mediciones cuantitativas de
la masa celular y probablemente el m+s +cilmente reali2able y reproducible, aun&ue se debe aplicar s1lo
en suspensiones celulares muy densas y las clulas deben ser lavadas muy bien para removerles todo
material e/tra.
Se utili2a para bacterias ilamentosas y mohos. En este proceso, el ungus es removido del medio de
crecimiento, iltrado para remover material e/tra$o, drenado en un secador y despus es pesado.
7onteo bacteriano
El conteo bacteriano se$ala la magnitud de la poblaci1n total bacteriana, en ese sentido se puede
determinar por muchas tcnicas &ue se basan en algunos de los siguientes tipos de medidaH cuenta celular
"directamente al microscopio o mediante un contador electr1nico de part!culas o indirectamente con la
cuenta de colonias#, masa celular "en orma directa pesando el contenido celular del nitr1geno o
indirectamente por turbidimetr!a, proporcional al n,mero de clulas# y actividad celular "indirectamente
relacionando el grado de actividad bio&u!mica al tama$o de la poblaci1n bacteriana#.E/isten muchos
medios dierenciales, en la practica rutinaria se usan los siguientesH
Bipos de conteo bacteriano
7onteo en ca0a de petriH 4todo m+s usado para contar bacterias. 3n caldo de cultivo con
microorganismos es diluido y posteriormente muestras del mismo son distribuidas en la ca0a de petri
contenedora de agar. Es de suponerse &ue cada clula se dividir+ en sus m,ltiples alrededores para
producir colonias separadas en el agar. 7ada clula es llamada unidad ormadora de colonias "3?7#.
-espus de la incubaci1n, el n,mero de colonias se rele0ar+ en el n,mero de clulas 3?7 originalmente
presentes. Es importante considerar un n,mero limitado de colonias pues de no ser as!, stas pueden
sobrepoblarse y diicultar el conteo de las mismas "rango sugerido de acuerdo a ?-* 2(-2(' colonias#. El
conteo se acilita utili2ando un contador de colonias.
Este mtodo es deseable por&ue arro0a el total de clulas viables "s1lo clulas vivas#% en contraste con el
conteo microsc1pico y el conteo de peso seco. 3na desventa0a se encuentra en el tiempo &ue re&uiere
para producir las colonias, ya &ue se necesitan como m!nimo 25 horas o m+s. 6or otra parte, no es )''J
iable por&ue regularme las colonias crecen unidas en cadenas o en grupos.
7onteo por iltraci1nH Es reali2ado cuando la cantidad de bacterias es muy pe&ue$a, como en casos de
lagos y arroyos relativamente puros. En esta tcnica se necesitan al menos )'' ml. de agua &ue
atraviesen una membrana delgada de un iltro, con poros tan pe&ue$os &ue no permitan el paso de
bacterias, de esta orma stas son retenidas en la supericie del iltro. 6osteriormente el iltro es transerido
a una ca0a de petri &ue cuenta con un caldo nutritivo, en la cual las colonias surgen de las bacterias en la
supericie del iltro. Las colonias bacterianas ormadas por este mtodo son distintivas cuando se ocupan
un medio dierencial.
Este mtodo es aplicado recuentemente en la detecci1n y enumeraci1n de bacterias coliormes, las
cuales son indicadores de contaminaci1n ecal en la comida o en el agua.
4todo del n,mero m+s probable ".46#H Es una tcnica de estimaci1n estad!stica basada en el hecho
&ue a mayor n,mero de bacterias en una muestra, mayor ser+ la diluci1n necesitada para reducir la
densidad hasta el punto en &ue ninguna bacteria se le permita crecer en la serie de tubos de diluci1n.
4uestras microbianas son a$adidas a tubos con caldos de lactosa y la presencia o ausencia de gas
ormado en la ermentaci1n y da un estimado de n,mero de clulas.
Este mtodo es m+s ,til cuando las bacterias &ue est+n siendo contados no crecer+n en medios s1lidos,
como en el caso de 7hemoautotro phic nitriying bacteria. Bambin es ,til cuando el crecimiento de la
bacteria es en un medio l!&uido dierencial, usado para identiicar microbios, como en bacterias coliormes.
El .46 es la ,nica airmaci1n en la cual e/iste ;(J de probabilidad &ue la poblaci1n bacteriana sea de
rango correcto, siendo el n,mero estad!stico m+s probable.
-eterminaci1n directa por microscopioH Las clulas se pueden contar como un rote te$ido colocando en la
preparaci1n un volumen conocida de la suspensi1n de clulas sobre un +rea conocida del portaob0etos.
-espus de haber i0ado y te$ido el rote, es posible contar con un microscopio las bacterias.
7omo no es pr+ctico recorrer toda el +rea, se cuenta el n,mero de clulas en unos cuantos campos
microsc1picos seleccionados al a2ar. Si el di+metro del campo microsc1pico se mide con micr1metro
ob0etivo, se puede calcular +cilmente el +rea, entonces el n,mero de campos en ) cm2 se multiplicar+ por
el promedio del n,mero de clulas por campo y despus por )'' "si se vierte .') ml# el resultado ser+
igual al n,mero de clulas por mililitro. Este mtodo es susceptible a muchas cr!ticas debido a su alta de
uniormidad al momento de hacer el rote.
4todo de turbiedadH 6ara algunos e/perimentos, es necesario estimar turbiedad, ya &ue es una orma
pr+ctica de monitorear el crecimiento bacteriano. 7omo una bacteria se multiplica en un medio l!&uido,
ste se torna turbio o de aspecto nublado por las clulas.
El instrumento usado para medir la turbiedad es un espectroot1metro "color!metro#. En el
espectroot1metro, un ha2 de lu2 es transmitido a travs de la suspensi1n bacteriana a un detector
sensible a la lu2. 4ientras incremente el n,mero de bacterias, menor ser+ la lu2 captada por el detector.
Este cambio en la lu2 se registrar+ en la escala del instrumento como el porcenta0e de transmisi1n.
Bambin se registra una e/presi1n logar!tmica llamada absorbancia "algunas veces nombrada densidad
1ptica#, un valor derivado del porcenta0e de transmisi1n &ue puede ser reportado. 4+s de un mill1n de
clulas por mil!metro deben estar presentes para &ue la primera se$al de turbiedad sea visible.
*pro/imadamente de )' millones a )'' millones de clulas por mililitro son necesitadas para hacer una
suspensi1n suicientemente turbia para leer en el espectroot1metro. La turbiedad no es ,til para medir
contaminaci1n en l!&uidos por la pe&ue$a cantidad relativa de bacterias.
-eterminaci1n del peso seco en las clulasH Es el mtodo m+s directo para las mediciones cuantitativas de
la masa celular y probablemente el m+s +cilmente reali2able y reproducible, aun&ue se debe aplicar s1lo
en suspensiones celulares muy densas y las clulas deben ser lavadas muy bien para removerles todo
material e/tra.
Se utili2a para bacterias ilamentosas y mohos. En este proceso, el ungus es removido del medio de
crecimiento, iltrado para remover material e/tra$o, drenado en un secador y despus es pesado.
Cmportancia
La naturale2a no solo se encarga de brindarnos los sorprendentes 6aisa0es .aturales &ue tanto
otograiamos en nuestras vacaciones sino &ue tambin se encarga de brindar un E&uilibrio .atural en
todos los sistemas donde los seres vivos conviven y generan inluencias unos sobre todos, siendo esto
considerado como Ecosistema y enmarcado en un +rea o soporte &ue es 0ustamente el G+bitat .atural de
todas las especies &ue all! habiten.
Kisto en orma particular en el punto de vista de la *limentaci1n, cada uno de los seres vivos tiene su rol
en la 7adena *limentaria, desde los organismos &ue son capaces de generar su propio alimento, como lo
son las Especies Kegetales "mediante el proceso de ?otos!ntesis# como a&uellos &ue se alimentan de las
mismas, Especies Gerv!boros, y otros &ue se alimentan de los anteriores, Especies =mn!voros, e
interactuando con ellos en todo momento est+n las Aacterias.
Estos organismos son tan diminutos &ue para poder notar su presencia en muchos casos necesitamos
utili2ar un Cnstrumental Lptico espec!ico, siendo el m+s simple y conocido el 4icroscopio, ya &ue est+n
enmarcados en la clasiicaci1n de 4icroorganismos "tambin conocidos simplemente como 4icrobios# y
son estudiados por la ciencia conocida como 4icrobiolog!a.
En la naturale2a tienen principalmente la unci1n de -escomposici1n o :ecicla0e, pudiendo desdoblar las
distintas sustancias rompiendo sus molculas, degrad+ndolas y permitiendo &ue en un uturo puedan ser
aprovechadas por otras materias como por Seres Kivos, como tambin interactuando en una gran cantidad
de 6rocesos Aio&u!micos &ue inclusive se presentan en nuestro cuerpo.
:especto a esto ,ltimo, seguramente muchos habis leido acerca de su alta presencia en el Sistema
-igestivo, teniendo muchas de ellas un rol protector del organismo contribuyendo al Sistema
Cnmunol1gico, aun&ue otros tipos en cambio son causales de Brastornos de la Salud, inclusive pudiendo
causar Enermedades 4ortales de tipo inecciosas, para lo cual se nos debe suministrar un *ntibi1tico &ue
puede ser de amplio espectro "para atacar a un tipo inespec!ico de Cnecciones Aacterianas# como
a&uellos &ue son espec!icos para una Aacteria en particular.