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Generalidades
Jorge Monroy, M.D.
Patlogo Quirrgico
Epidemilogo Clnico
Histologa
La HISTOLOGA tiene como objeto el estudio de la estructura.
Que es PATOLOGA???
Es el estudio cientfico de la enfermedad.
En la prctica clnica y educacin mdica, la patologa tambin tiene un significado ms
amplio: la patologa constituye un gran cuerpo de conocimientos cientficos y de investigacin,
mtodos esenciales para la comprensin y la prctica de la medicina moderna.
Comprende los cambios funcionales y estructurales en la enfermedad, de el nivel molecular a
los efectos sobre el individuo.
Patologa est continuamente sujeta a cambios, revisin y ampliacin de nuevos mtodos
cientficos y as mejorar nuestro conocimiento de la enfermedad.
El objetivo final de la patologa es la identificacin de las causas de la
enfermedad, un objetivo fundamental que lleva a una terapia exitosa y prevencin de
enfermedades.
HISTORIA
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Patologa celular y microscopio
Rudolf Virchow (1821-1902), patlogo alemn
La clula es la unidad ms pequea constituyente viable del cuerpo (patologa celular)
El microscopio de luz permiti ver los cambios en los tejidos enfermos a nivel celular y sus
observaciones, ampli el uso posterior del microscopio electrnico
Gua de la PATOLOGA
Patologa Clnica y Patologa Experimental
El conocimiento cientfico sobre las enfermedades humanas se derivan de las observaciones
de los pacientes o, por analoga, a partir de estudios experimentales en animales y cultivos
celulares.
PATOLOGA CLNICA
La medicina clnica se basa en un enfoque longitudinal a la enfermedad-el de un paciente la
historia del paciente, la exploracin y la investigacin, el diagnstico y el tratamiento.
La patologa clnica se preocupa ms por un anlisis de corte transversal a nivel de la
enfermedad en s misma, estudi en profundidad la causa y los mecanismos de la enfermedad,
y los efectos de la enfermedad en los distintos rganos y sistemas del cuerpo.
Estas dos perspectivas son complementarias e inseparables: la medicina clnica no se puede
practicar sin una comprensin de la patologa, la patologa no tiene sentido si est desprovista
de implicaciones clnicas.
PATOLOGA EXPERIMENTAL
Patologa experimental es la observacin de los efectos de la manipulacin en sistemas
experimentales como modelos animales de enfermedad o en cultivos celulares.
Subdivisiones de la Pat. Clnica
Histopatologa: la investigacin y el diagnstico de la enfermedad a partir del examen de los
tejidos
Citopatologa: la investigacin y el diagnstico de la enfermedad a partir del examen de las
clulas aisladas
Hematologa: el estudio de los trastornos de los componentes celulares de la sangre y
coagulable
Microbiologa: el estudio de las enfermedades infecciosas y los organismos responsables de
los mismos
Inmunologa: el estudio de los mecanismos de defensa especficos del cuerpo
Patologa qumica: el estudio y diagnstico de la enfermedad a partir de los cambios qumicos
en los tejidos y fluidos
Gentica: el estudio de los cromosomas y los genes anormales
Toxicologa: el estudio de los efectos de los venenos conocidos o sospechosos
Patologa forense: la aplicacin de la patologa a los efectos legales (por ejemplo, la
investigacin de la muerte en circunstancias sospechosas)
Introduccin a la microscopa
Ayuda del microscopio
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Visualiza la estructura de tejidos
Bioqumica, fisiologa y otras ciencias
Microscopio ptico
Microscopio electrnico
Corteza
Zona GLOMERULOSA
Zona FASCICULADA
Zona RETICULAR
Mdula
Zona GLOMERULOSA
Corticoides
Mineralocorticoides
ALDOSTERONA
Zona FASCICULADA
Corticoides
Glucocorticoides
CORTISOL
Hormonas sexuales andrognicas
Zona RETICULAR: pequeas cantidades de andrgenos y glucocorticoides
Mdula
Catecolaminas:
Adrenalina
Noradrenalina (N-metilo)
Encefalinas
Clulas cromafines (sales de oro)
Pancreas:
Islote de Langerhans
3000 clulas secretoras
Alfa: Glucagn
Beta: Insulina
Delta: Somatostatina
Clulas Beta > 60%
Clulas Alfa 25%
Microscopio electrnico
ME de transmisin
Haz de electrones
Imgenes bidimensionales (2D)
ME de barrido
Imgenes tridimensionales (3D)
Solamente su superficie
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MO y ME son complementarios
MO se observan grandes reas
Amplia gama de tinciones
Arquitectura de clulas y tejidos
ME ultraestructura de la clula
Imgenes monocromticas
Costoso en tiempo y dinero
Mtodos de localizacin especfica para el estudio con el MO y el ME
Coloracin bsica (H&E)
Tcnicas de histoqumica (coloraciones especiales)
Tcnicas de histoqumica enzimtica
Tcnicas de inmunofluorescencia
Tcnicas de inmunohistoqumica
Tcnicas de biologa molecular
o FISH
o CISH
Neutrfilos Fosfatasa alcalina
Grosor de Membranas Basales Capilares
Nios hasta un ao: 100 nm, aumento progresivo en la infancia hasta 340 nm.
Rango normal en adultos:
Hombres 374 +/- 74
Mujeres 328 +/- 38
(New England Journal of Medicine 1989, 320: 14-18)
Requisitos para el estudio con MO y ME:
aspectos relacionados con la preparacin del tejido
Evitar la degeneracin autoltica y conservar la estructura celular
Fijadores:
Formaldehdo (Formol 10%-BUFERADO)
Glutaraldehdo
Fijacin, deshidratacin, inclusin, corte y tincin
Artificios
Hematoxilina y Eosina
Ms utilizada
Colorante bsico hematoxilina
Tie estructuras cidas de color azul
Ncleos, ribosomas y RER
Colorante cido eosina
Tie estructuras bsicas de color rosa
Protenas citoplasmticas
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PAS (cido perydico de Schiff)
Tie los carbohidratos complejos de color: magenta
Mucinas
Moco
Colgeno
Glucgeno
Membranas basales
Tricrmico de Masson
Tcnica del tejido conjuntivo
Colgeno
Tres colores:
Colgeno de azul o verde
Ncleos y otras estructuras basfilas de azul
Citoplasmas, msculos, eritrocitos y queratina de rojo brillante
Azul alcin (Alcian blue)
Mtodo para la mucina
Combinacin con H&E o van Gieson
Se tien de azul
Azul de toluidina
Tincin bsica que tie componentes cidos en diversos tonos de azul
Muestra finas (resina)
Metacromasia
Elstica de van Gieson
Otro mtodo para tejido conjuntivo
Colgeno se tie de rojo
En combinacin con una tincin para fibras elsticas estas se tien de azul/negro
Reticulina
Fibras de reticulina del tejido de sostn
Se tien de azul/negro
Giemsa
Para clulas sanguneas y otras extensiones de las clulas
Ncleos de azul oscuro o violeta
Citoplasma de fondo de azul plido
Eritrocitos de rosa plido
Neutrfilos Giemsa
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Tcnicas inmunohistoqumica
Especificidad de los anticuerpos por sus correspondientes antgenos
Ms de 2000 marcadores
Segn la naturaleza de la clula
Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)
La FISH es una tecnologa reciente que utiliza sondas de DNA marcadas con un fluorforo para
detectar o confirmar anomalas gnicas o cromosmicas que generalmente estn ms all de la
capacidad de resolucin de la citogentica de rutina.
1. En primer lugar, la muestra de DNA (cromosomas metafsicos o ncleos en interfase) se
desnaturaliza, proceso que separa las hebras complementarias de la estructura en doble
hlice del DNA.
2. A la muestra desnaturalizada se le aade entonces la sonda de inters, marcada con un
fluorforo, que se asociar al DNA de la muestra en el sitio diana, en el proceso
denominado hibridacin, donde se vuelve a formar una doble hlice.
3. La seal emitida por la sonda se observa mediante un microscopio de fluorescencia y as la
muestra de DNA se puede clasificar segn la presencia o ausencia de la seal.
CISH
CISH (chromogenic in situ hybridization) es un proceso en el que una etiqueta de ADN
complementario o ARN de cadena se utiliza para localizar una determinada secuencia de ADN o
ARN en una muestra de tejido.
CISH metodologa para evaluar la amplificacin del gen, la eliminacin de genes, translocacin
cromosmica, y el nmero de cromosomas.
CISH
CISH utiliza peroxidasas convencionales o reacciones de la fosfatasa alcalina para visualizarse con
un microscopio estndar de campo claro, y es aplicable a la formalina-fijos, sangre o frotis de
mdula sea
Qu ofrece CISH?:
Evaluacin del estado de genes simultneamente con la morfologa del tejido
COLORACIONES EXTICAS
Azn
Para tejido conjuntivo
Demuestra detalles citolgicos finos, sobretodo los del epitelio
Colgeno, membranas basales y la mucina de azul
Mtodos de plata y oro
Prolongaciones celulares
Neuronas
Placas motoras terminales
Uniones intercelulares
Segn mtodo
Color negro, pardo o dorado
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Almina de cromo/hematoxilina
Poco usado
Fundamento igual que la H&E
Pncreas
o Cels. Insulina de azul
o Cels. Glucagn de rojo
Azul isamina/eosina
Mtodo similar a la H&E
Azul mucho ms intenso
Mtodos de Nissl y azul de metileno
Colorante bsico para teir el RER de las neuronas que, cuando aparece formando grumos se
llama sustancia de Nissl
Sudn negro y osmio
Colorantes que tien estructuras con lpidos (mielina)
Color pardo/negruzco