UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

CARRERA DE INGENIERA BIOQUMICA
INGENIERIA DE BIOPROCESOS

Docente: Ing. Cecilia Carpio
Ayudante: Ing. Juan Pablo Peafiel
Estudiante: Tarsis Camacho-Cristian Carvajal Prctica: 1
Nivel: 7
mo
U BQ. Fecha: 09-05-2014
Tema:
OBSERVACIN DE Rhizobium EN NDULOS DE RACES DE
LEGUMINOSAS
I. INTRODUCCIN
Rhizobium es un gnero de bacterias gram-negativas de perfil de suelo que fijan
nitrgeno atmosfrico. (SAWADA H, 2003)
Pertenece a un grupo de bacterias fijadoras de nitrgeno que se denominan
colectivamente rizobio. Viven en simbiosis con determinadas plantas (como por
ejemplo las leguminosas) en su raz, despus de un proceso de infeccin inducido por la
propia planta mediante la secrecin de lectina, a las que aportan el nitrgeno necesario
para que la planta viva y est a cambio le da cobijo. (MADIGAN M, 2003)
Las bacterias Rhizobium son organismos de vida libre que habitan en la rizosfera y se
alimenta de los restos de organismos muertos. Estas contienen un plasmdeo que
codifica informacin que es vital para la infeccin y la nodulacin de la planta
hospedadora correspondiente. Son bacilos mviles, Gram-negativos, con dos capas de
pared celular (la primera capa esta hecha por carbohidratos y protenas, y la segunda
capa por lpidos y carbohidratos), procariotas, aerbicos (necesita oxgeno para crecer),
motiles (al hacerse el test de motilidad, el agar se vuelve amarillo y no de su color
original morado-), beta (digiere la hemoglobina), crece casi en cualquier temperatura,
pero su desarrollo es ms ptimo en una temperatura de 25 C o 77 F, sus dimensiones
son de 0.5-0.9 x 1.2-3.0m, y cuenta con flagelos. (PRESCOTT L, 2002)
La simbiosis entre la bacteria Rhizobium y las leguminosas tiene una gran importancia
tanto en la agricultura, como en el medio ambiente. En cuanto a la agricultura, se dice
que se ve beneficiada ya que causa un aumento significativo de nitrgeno combinado en
suelos desnudo y que carecen de este. Adems las leguminosas, parte esencial de la
agricultura, se ven favorecidas al poder crecer en zonas donde otras plantas no podran.
Por otro lado, ya que el nitrgeno es uno de los nutrientes esenciales limitados para el
crecimiento de las plantas, esta simbiosis aumenta el nivel de fijacin del nitrgeno
atmosfrico, aumentando as la produccin agrcola. (TARRANT A, S/F)
II. OBJETIVOS

2.1.OBJETIVO GENERAL

Observar Rhizobium mediante dos distintos instrumentos de observacin
microscpica.

2.2.OBJETIVOS ESPECFICOS

Diferenciar los ndulos presentes en las races de las diferentes leguminosas.
Aplicar un mtodo de tincin diferencial para la distincin de Rhizobium en los
ndulos de las leguminosas.

III. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales
Microscopio
Estereomicroscopio
Mechero de alcohol
Aceite de inmersin
Piceta
Escarpelo
Gotero
Lupa
Asa
Portaobjetos y cubreobjetos
Reactivos
Etanol
Agua destilada


Races de habas, frejol, alfalfa
chocho y trbol con ndulos.


IV. PROCEDIMIENTO
Se observ los ndulos presentes en las races de cada leguminosa
Con la ayuda de una lupa se observ los ndulos para identificar similitudes y
diferencias entre las distintas leguminosas.
Con un escarpelo se realiz un corte en un ndulo, se presion con una varilla y se
extrajo una pequea porcin, se realiz un frotis de la muestra en un portaobjetos y
se fij en un mechero.
Se coloc la muestra fijada con rojo congo durante 1 minuto. Se enjuag con agua
destilada.
Se observ en el estereomicroscopio y un microscopio con el lente de inmersin.

V. RESULTADOS

GRAFICO N1: Trbol



Fuente: Laboratorio de Bioprocesos-FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N2: HABA E



Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal



GRAFICO N3: HABA A


Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N4:NODULO DE HABA
E

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N5 NODULO DE HABA
E

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N6: NODULO DE HABA
E

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N7: NODULO DE
TREBOL

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N8: NODULO DE
TREBOL

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N9: NODULO DE
TREBOL

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO N10: NODULO DE
HABA A

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO #11 NODULO DE HABA
A

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal

GRAFICO #12 NODULO DE HABA
A

Fuente: Laboratorio de Bioprocesos FCIAL 2014
Elaborado por: Camacho-Carvajal
VI. DISCUSION

VII. CONCLUSIONES

Observar Rhizobium mediante dos distintos instrumentos de observacin
microscpica.
Diferenciar los ndulos presentes en las races de las diferentes leguminosas.
Aplicar un mtodo de tincin diferencial para la distincin de Rhizobium en los
ndulos de las leguminosas.

VIII. CUESTIONARIO
8.1.Especifique la especie de m.o. presente en cada una de las muestras observadas.

8.2.Cules son las funciones que cumple el nitrgeno en los cultivos vegetales?

8.3.Qu factores influyen sobre la simbiosis?


IX. BIBLIOGRAFIA
Tarrant, A. (n.d.). Rhizobium leguminosarum. En Modmedmicrobes
Prescott, L. (2002). Microbiology. (5a ed., pp. 441-446). McGraw-Hill Science
Madigan, M., Martinko, J., & Parker, J. (2003). Brock biologa de los
microorganismos. (10a ed., pp. 654 - 684).
Sawada H, Kuykendall LD, Young JM (2003). Changing concepts in the systematics
of bacterial nitrogen-fixing legume symbionts. J. Gen. Appl. Microbiol. pp. 155-79.