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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS


CENTRO SUPERIOR DE EDUCAO TECNOLGICA
TECNOLOGIA EM SANEAMENTO AMBIENTAL













Disciplina: ST 405 QUMICA SANITRIA E LABORATRIO DE
SANEAMENTO II


APOSTILA DE LABORATRIO


Prof.Dra. Maria Aparecida Carvalho de Medeiros,


Tecnloga MSc. Josiane Aparecida de Souza Vendemiatti,

Tecnlogo MSc. Geraldo Dragoni Sobrinho,

Tecnloga MSc. Anjana Fernades de Albuquerque,





Limeira, maro de 2006.






2

SMARIO DO LABORATRIO DE SANEAMENTO II

ASSUNTO PGINA

CRITRIOS DE AVALIAO DA PARTE EXPERIMENTAL 03

NORMAS DE SEGURANA 03

1
A
. EXP. DETERMINAO DA DEMANDA QUMICA DO OXIGNIO (DQO) 04

2
A
. EXP. OXIGNIO DISSOLVIDO (OD) (Parte 1) 09

2
A
. EXP. DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO (DBO
5
) (Parte 2) 12

3
A
. EXP. DETERMINAO DE LEOS E GRAXAS 17

4
A
. EXP. DETERM. DE RESDUOS OU SLIDOS: SRIE COMPLETA 20

5
A
. EXP. DETERMINAO DA SRIE DO NITROGNIO 25

5
A
. EXP. DETERMINAO DE NITRITO EM GUAS (Parte 1) 27

5
A
. EXP. DETERMINAO DE NITRATO EM GUAS (Parte 2) 31

5
A
. EXP. NITR. AMONIACAL adaptado 4500 NH
3
. B (Standard Methods) (P3) 34

6
A
. EXP. DETERMINAO DE FSFORO TOTAL 36

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 40

ANEXOS (NO SERO REALIZADOS) 41

A - EXP. DETERMINAO DA DQO (Mtodo do Refluxo com dicromato 41
em balo de fundo chato, titulando a amostra com SFA na presena
do indicador ferroin (Standard Methods 5220B)

B - 2
A
. EXP. OXIGNIO DISSOLVIDO (OD) e DBO pelo Mtodo de Winkler 44

C - 5
A
. EXP. DETERMINAO DO NITROGNIO KJELDAHL 48















3
ST405 - QUMICA SANITRIA E LABORATRIO DE SANEAMENTO II
EXPERIMENTOS A SEREM REALIZADOS, EM EQUIPES: Experincias 1 a 6. Os roteiros das
experincias esto colocados nesta apostila e em papel no xerox do CESET.
AULAS NO LABORATRIO:
Pr-condies para a realizao dos experimentos:
a) Apresentao do Pr-Laboratrio(individual), em caderno de laboratrio de partes do relatrio: Ttulo,
Introduo (Fundamentao terica dos conceitos envolvidos no experimento), Objetivos, Procedimento
Experimental (Fluxograma esquemtico do que ser feito no experimento com os respectivos clculos
necessrios, Cuidados a serem tomados na manipulao, bem como no uso de equipamentos e
Procedimentos de descarte de substncias e/ou materiais usados no experimento). A verificao destas
informaes, pelo(a) professor(a), ser realizada durante o experimento.
b) Uso de avental e culos de segurana, no ser permitido a realizao da experincia caso o aluno
esteja sem avental e/ou culos.
CRITRIOS DE AVALIAO DA PARTE EXPERIMENTAL:
Sero atribudas duas notas para cada um dos alunos/equipes ao longo do perodo, como segue:
a) avaliao contnua (10%): Referente ao resultado das checagens do caderno de laboratrio durante a
realizao de cada experimento, das respostas s questes formuladas e da postura/desempenho no
laboratrio.
b) relatrio (20%): Aps a realizao do experimento em equipe, cada equipe dever elaborar o relatrio,
contendo as seguintes partes: Ttulo da experincia realizada, Introduo; Objetivos; Parte Experimental:
Materiais, Equipamentos, Reagentes, Procedimento Experimental; Resultados e Discusso; Concluses e
Bibliografia. Ler a apostila de ST108 Qumica Aplicada para obter detalhes de como redigir um relatrio.
O relatrio dever ser entregue 15 dias aps a data da realizao do experimento, no sero aceitos
relatrios atrasados. O aluno que faltar na aula de laboratrio ficar com zero naquele experimento.
NORMAS DE SEGURANA:
O Laboratrio de Qumica Sanitria no um local extremamente perigoso de se trabalhar, mas necessrio uma
dose constante de prudncia por parte de cada aluno (nada deve ser feito sem antes pensar nas possveis conseqncias
de cada ato). Esteja sempre alerta, inclusive com o que est acontecendo ao seu redor. Para a maioria das operaes de
laboratrio existem instrues especficas que devem ser rigorosamente seguidas por cada aluno (esta observao
aumenta a segurana de todos). As seguintes normas devem ser sempre observadas: a) o uso de avental e culos de
segurana; b) fazer somente a experincia indicada pela professora, lendo a apostila previamente e efetuando o pr-
laboratrio; c) ler atentamente os rtulos dos frascos de reagentes, antes de utiliz-los; d) ao manusear lquidos txicos
ou volteis, sempre utilizar uma das capelas; e) sempre usar banhos adequados para aquecer lquidos volteis ou
inflamveis (nunca usar chama para aquec-los!); f) ao diluir uma soluo concentrada de cido, sempre adicionar o
cido gua (nunca fazer o contrrio!); g) se alguma soluo ou reagente respingar na pele ou olho, lavar-se imediata
e profusamente com gua corrente; h) quaisquer acidentes devem ser imediatamente comunicados professora e/ou
tecnlogos; i) lavar as mos antes de sair do laboratrio.
CLASSES DE INCNDIOS E SEU COMBATE:
Existe um tipo de extintor de incndio (CO
2
) no Laboratrio de Saneamento, o qual deve ser usado como
recomendado abaixo:
Classe A: queima de combustveis slidos comuns (papel, madeira etc.). Pode ser combatido com gua (resfria,
encharca e apaga) ou com espuma (abafa e resfria) ou com CO
2
(abafa e resfria) ou com p qumico (apaga na
superfcie, por abafamento).
Classe B: queima de lquidos (gasolina, leo etc.), graxas ou gases. Pode ser combatido com espuma (deve se
direcionar o jato a um anteparo, visando a formao de uma camada de espuma) ou com p qumico ou com CO
2
(este
o extintor recomendado se o incndio envolver equipamentos eletro-eletrnicos, pois no deixa resduos).
Classe C: queima de equipamentos eletro-eletrnicos. Deve ser combatido somente com CO
2
, pois no deixa resduos
ou causa danos. No deve ser usada espuma qumico, por ser condutora de corrente eltrica.
Nota: em caso de incndio, procure manter-se calmo, pois uma aguda capacidade de raciocnio fundamental para
sua maior segurana.





4
1
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO DA DEMANDA QUMICA DO
OXIGNIO (DQO)
A - Mtodo Colorimtrico: DR2000 Curva Padro Inserida no. 955
Standard Methods 5220 D.

I Introduo
A determinao do contedo de matria orgnica um a das caractersticas mais importantes no estudo
das guas residuais e naturais.
A anlise de matria orgnica em gua e esgoto pode ser classificada em dois tipos gerais de medidas:
aquelas que quantificam uma quantidade de matria orgnica agregada compreendendo constituintes orgnicos
com uma caracterstica comum e aquelas que quantificam compostos orgnicos individuais.
Vrios mtodos tm sido desenvolvidos para a determinao do contedo de matria orgnica, entre eles
aquele que nos permite determinar a demanda qumica de oxignio ((DQO), em ingls, chemical oxygen
demand(COD)), ou seja, quantidade de oxignio consumido por diversos compostos orgnicos atravs de uma
oxidao qumica.
Adicionalmente, tem-se a determinao do carbono orgnico total ((COT), em ingls total organic
carbon (TOC) que consiste em um mtodo instrumental, originalmente desenvolvido pela Dow Chemical
Company.
O carbono orgnico em gua e esgoto composto de uma variedade de compostos orgnicos em vrios
estados de oxidao. Alguns destes compostos podem ser oxidados por processos biolgicos ou qumicos. A
demanda bioqumica de oxignio ((DBO), em ingls biochemical oxygen demand (BOD)) e a DQO so
usadas para caracterizar estas fraes.
Na anlise da DQO, o oxignio necessrio para oxidar a matria orgnica contida na gua e possvel de
ser oxidada, medido utilizando-se um composto fortemente oxidante como, por exemplo, o dicromato de
potssio em meio fortemente cido, oxidando at mesmo a matria orgnica mais resistente oxidao,
convertendo-a em dixido de carbono e gua, conforme a equao qumica:

C
n
H
a
O
b
+ c Cr
2
O
7
2-
+ 8c H
+
n CO
2
+ [(a + 8c)/2] H
2
O + 2c Cr
3+


Onde c = 2/3n + a/6 b/3

Durante o processo de oxidao qumica, quaisquer sais inorgnicos presentes so tambm convertidos
para as formas oxidadas.
O resultado da DQO especificado em mg/L de oxignio que seria consumido equivalente
quantidade de oxidante requerido, conforme exemplifica as equaes qumicas:
catalisador
3 CH
2
O + 2 Cr
2
O
7
2-
+ 16 H
+
3 CO
2
+ 11 H
2
O + 4 Cr
3+

calor


microorganismos
3 CH
2
O + 3 O
2
3 CO
2
+ 3 H
2
O

Sob as condies fortemente oxidantes na anlise da DQO, a maioria dos compostos orgnicos fornece
de 95 100 % do oxignio terico consumido, mesmo para molculas aromticas mais estveis, tais como
benzeno e tolueno.
Portanto, a demanda qumica de oxignio (DQO) indica a quantidade de oxignio que seria consumido
atravs de reaes qumicas de oxidao de diversos compostos orgnicos presentes, sem a interveno de
microrganismos, indicando de maneira indireta a quantidade de matria orgnica presente no lquido.
A determinao da DQO muito mais simples e rpida que a DBO, sendo assim a determinao da
DQO cresce em importncia, principalmente no caso de controles de efluentes ou de estaes de tratamento.
Pelo fato de ser uma oxidao qumica, na DQO todo o material existente no efluente (biodegradvel ou no)
oxidado. Dessa forma os resultados de DQO so maiores ou iguais aos resultados da DBO. Para certos resduos
possvel estabelecer uma relao emprica entre estes dois parmetros.
O ensaio da DQO se emprega tanto para guas naturais como residurias industriais e municipais,
possuindo como vantagem a rapidez e simplicidade na determinao: aproximadamente 3 horas para a DQO e
no mnimo 5 dias para a DBO. Alm dessas vantagens, a DQO pode ser empregada em casos onde no se pode
5
determinar DBO com a exatido necessria, como por exemplo, quando da presena de compostos txicos para
os microrganismos.
O teste de DQO torna-se bastante importante para os estudos de corpos dgua, resduos industriais e
controle de esgotos sanitrios.

II - Metodologia

O mtodo de digesto do dicromato, trata-se de uma reao de oxidao em meio fortemente cido e
elevada temperatura na presena de um catalisador (o sulfato de prata). usado o dicromato de potssio (cromo
na forma de Cr
6+
) devido a sua forte capacidade oxidante, facilidade de manipulao e aplicabilidade, alm de
ser um padro primrio.
A utilizao de um catalisador, como o sulfato de prata, necessria para tornar possvel a oxidao de
compostos alifticos de cadeia reta.
Aps a oxidao da matria orgnica presente, a DQO obtida diretamente (mg O
2
/L) no
espectrofotmetro DR2000, atravs de uma curva padro inserida no laboratrio.

III - Interferentes

As principais interferncias no mtodo so:
- traos de matria orgnica existentes na vidraria, os quais so eliminados
efetuando-se prova em branco;
- o sulfato de prata, utilizado como catalisador, pode reagir com cloretos,
brometos, e iodetos produzindo precipitados diminuindo a sua ao cataltica. Para evitar a interferncia
principalmente de cloretos utiliza-se sulfato de mercrio. A presena de cloretos s comea a ser prejudicial
acima de 2000 mg/l.

IV - Amostragem

As amostras para esta anlise devem estar bem homogneas, principalmente aquelas que contenham
muito slidos sedimentveis, como o caso dos esgotos, tornando necessrio uma cuidadosa homogeneizao
antes de se tomar a alquota adequada para anlise. Desta forma devem ser observados os seguintes tens:

- Tipo de frasco: polietileno, polipropileno ou vidro
- Volume necessrio: 200 ml
- Preservao da amostra: adiciona-se cido sulfrico concentrado at
pH s 2, e refrigerao 4C
- Prazo de anlise: 7 dias

V - Materiais e equipamentos

a) EQUIPAMENTOS
- Espectrofotmetro DR2000 ou similar (= 600 nm)
- Tubo tipo ensaio de vidro com tampa rosquevel (medidas, Tabela 01)
- Bloco digestor com capacidade de 150 C
- Bales volumtricos
- Pipetas volumtricas
- Bquers 100, 250 e 500 mL
- Agitador magntico
- Esptulas





Tabela 01 Concentrao dos reagentes versus dimenses do tubo de digesto (DQO).

Tubo de digesto Amostra (mL) Soluo de
digesto (mL)
Reagente de cido
sulfrico (mL)
Volume
Total (mL)
6
16x100 mm 2,5 1,5 3,5 7,5
20x150 mm 5,0 3,0 7,0 15,0
25x150 mm 10,0 6,0 14,0 30,0
Ampola padro de 10 mL 2,5 1,5 3,5 7,5


b) REAGENTES
- Soluo de digesto: adicionar em 125 mL de gua destilada 2,554 g de
dicromato de potssio (K
2
Cr
2
O
7
), previamente seco em estufa a 103C por 2 horas, 41,75 mL de cido
sulfrico, 8,325 g de HgSO
4
. Dissolver, esfriar e completar com gua destilada o volume em balo
volumtrico de 250 mL.

- Reagente de cido sulfrico: adicionar sulfato de prata (Ag
2
SO
4
) cristal ou
p em H
2
SO
4
numa proporo de 2,03 g de Ag
2
SO
4
para 200 mL de cido sulfrico concentrado. A
dissoluo completa do sulfato de prata demora cerca de 24 horas, por isso se deve estar sempre
atento necessidade de se fazer nova soluo.

- Soluo padro de Biftalato de potssio: de uma quantidade de Bifatalato
de potssio, HOOCC
6
H
4
COOK, seca a 120C por 2 horas, pesar 425,0 mg e dissolver em
aproximadamente 500 ml de gua destilada e ento completar o volume para 1000 ml em balo
volumtrico. Esta soluo estvel por at 3 meses quando guardada sob refrigerao. Relao
terica entre o biftalato de potssio e a DQO: 1 mg de biftalato de potssio= 1,171 mg O
2
.

- cido sulfrico concentrado
- cido sulfrico 20%: dissolver 20 mL de H
2
SO
4
concentrado para
cada 100 mL de soluo.

VI Curva Padro de Calibrao para DQO.
A Tabela 02 contm um exemplo de dados para a obteno da curva
de calibrao da DQO. A Figura 01 mostra o grfico da curva de calibrao da DQO.
Observaes:
1) Toda vez que tiver que preparar nova soluo, mudana de marca de
reagente, etc, dever ser feita nona curva de padronizao.
2) Correr um padro conhecido a cada certo nmero de anlises para
certificar-se da validade da curva inserida.

Tabela 02 Exemplo de Curva padro para DQO.
Concentrao de
DQO (mg O
2
/L)
Volume da soluo Padro a
completar para 100 (mL)
*Absorbncia
0,0 (BRANCO) 0,0 0,000
50,0 10,0 0,009
100,0 20,0 0,029
200,0 40,0 0,068
300,0 60,0 0,098
400,0 80,0 0,149
500,0 SOLUO ESTOQUE (100 mL) 0,169
- Obs.: A ser obtido no espectrofotmetro.


0.000
0.050
0.100
0.150
0.200
0.0 200.0 400.0 600.0
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao
mg O2
/
L
7

Figura 01 Curva de calibrao da DQO.

VI - Procedimento experimental

1) Determinao da DQO de uma amostra:

1 Lavar os tubos com H
2
SO
4
20% para eliminar interferentes de amostras
anteriores;
2 Fazer uma prova em Branco, adicionando gua destilada no lugar da
amostra e executar o mesmo procedimento descrito para a amostra. O Branco ser utilizado para
zeraro espectrofotmetro.
A amostra de gua residuria deve ser homogeneizada, agitando-se o
frasco que contm a amostra, em seguida, quando for necessrio fazer a diluio da amostra, deve-
se diluir a amostra, utilizando-se o respectivo fator de diluio. A alquota de amostra deve ser
obtida com pipeta volumtrica, transferida em balo volumtrico e completado o volume com gua
destilada at o menisco. Em seguida, homogeneizar a amostra contida no balo, antes de retirar a
alquota a ser analisada na metodologia.
Em capela, executar as seguintes etapas:
3 - Colocar nos tubos, 1,5 mL da soluo de digesto;

4 Adicionar 2,5 mL de amostra de gua residuria;

5 adicionar 3,5 mL de reagente cido sulfrico;

6- fechar os tubos e agitar vrias vezes para a homogeneizao (cuidado:
reao exotrmica (quente!));
7 Colocar os tubos no bloco digestor para fazer a digesto da amostra a
150 C por 2 horas (tempo estabelecido no Standard Methods, porm, na aula de laboratrio
haver um ajuste do tempo para 30 min., apenas para viabilizar a execuo da experincia
dentro da durao da aula);
8- Retire os tubos do bloco digestor, esfriar, agitar e deixar sedimentar.
Tomar o cuidado de limpar bem os tubos antes das leituras, para evitar a interferncia na passagem da
luz.
9 ligar o espectrofotmetro, chamar o mtodo 955, ajustar o comprimento
de onda para 600 nm e zerar com a prova em Branco. Fazer a leitura da amostra. O valor obtido
no espectrofotmetro j est expresso em mgO
2
/L de DQO.






Questes para serem respondidas como anexo no relatrio
(Pode ser manuscrito).

1) Faa uma anlise do resultado obtido na anlise de DQO considerando:
a. No foi colocado o catalisador na reao de refluxo,
b. No foi deixado o tempo de refluxo necessrio,
c. No foi colocado dicromato de potssio suficiente.

2) (A) Quais so interferentes da anlise de DQO?
(B) Explique o que significa a anlise da DQO, Qual a metodologia utilizada? Quais as
vantagens desta anlise sobre a DBO?
(C) Escreva as equaes qumicas envolvidas nas reaes de oxidaes na anlise de DQO.
(D) Explique porqu efetuado a adio de sulfato de prata e de sulfato de mercrio na anlise
de DQO.
8

3) FAA UMA ANLISE DA PROPOSTA DE RECUPERAO DA GUA RESIDUAL
DA ANLISE DE DQO, se possvel faa outras sugestes para a recuperao da gua
residual da anlise de DQO:
Considerando que a gua residual da anlise de DQO, possui concentrao de cido
sulfrico e sais, tais como prata e mercrio, que se lanados no esgoto e so prejudiciais ao
meio ambiente.
Diante deste contexto, as amostras aps a anlise devem ser armazenadas para posterior
recuperao.




- PROCEDIMENTO

3.1- Utilizar um recipiente plstico para este procedimento.
3.2- Para cada litro de gua residual, adicionar 40 g de sal de cozinha e deixar decantar por 3 dias
(resduo precipitado = prata).
3.3- Retirar o lquido por sifonao, no precipitado. O resduo de prata dever ser acondicionado em
frasco fechado e identificado.
3.4- Na gua residual (sem o precipitado de prata), adicionar gua de torneira na proporo 1:1.
3.5- Para cada 12 litros da mistura (1:1), adicionar 8 g de sufeto de ferro II em p (pirita), deixar 3 dias
para ocorrer a decantao do mercrio (resduo precipitado).
3.6- Retirar o sobrenadante por sifonao, sem tocar no precipitado. O resduo de mercrio dever ser
acondicionado em frasco fechado e identificado.
3.7- Corrigir o pH da gua residual, com uma soluo de cal, antes de lana-la ao esgoto.

- OBSERVAES

3.1- O procedimento acima exala odor de gs sulfdrico, liberado na reao. Portanto, dever ser
realizado fora do laboratrio em local bastante ventilado (ao ar livre), considerando-se que sero
manipuladas grandes quantidades. Considerando-se pequenas quantidades, a capela poder ser
utilizada.
3.2- Cuidado com o manuseio da gua residual, pois contm alta concentrao cida.
3.3- A purificao dos sais invivel, devido ao alto custo.

4) Explique como deve ser efetuada a amostragem para a anlise de DQO.

5) Faa um grfico em papel milimetrado dos dados de calibrao obtidos na Experincia para
a Curva de calibrao das solues dos padres de biftalato de potssio para DQO. Verifique se a
lei de Beer obedecida, em caso positivo, qual a equao da reta ajustada.
2
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO DO OXIGNIO
DISSOLVIDO(parte 1)


OXIGNIO DISSOLVIDO (OD)
MTODO: OXMETRO

I - Introduo

O oxignio uma espcie qumica de importncia vital na gua, assim
como no ar atmosfrico (20,95 %, em volume de ar seco). As reaes qumicas e fotoqumicas
do oxignio na atmosfera so essenciais para o equilbrio e preservao das espcies na Terra.
Na gua o oxignio consumido rapidamente pela oxidao da matria
orgnica (CH
2
O):
microorganismos
9
CH
2
O + O
2
CO
2
+ H
2
O

As solubilidades dos gases na gua so calculadas com a lei de Henry,
a qual estabelece que a solubilidade de um gs em um lquido proporcional presso parcial do
gs em contato com o lquido. Matematicamente, a lei de Henry expressa como:

[X(aq)] = K P
X

onde [X(aq)] a concentrao do gs (X), P
X
a presso
parcial do gs, e K a constante de Henry aplicvel para um gs particular na temperatura
especificada. Para concentraes de gases em moles por litro e presso do gs em atmosferas, as
unidades de K so mol x L
-1
x atm
-1
. A constante K para o oxignio dissolvido em gua, a 25
C (KO
2
= 1,28x10
-3
mol x L
-1
x atm
-1
).

A solubilidade do oxignio na gua depende da temperatura da gua,
da presso parcial do oxignio, na atmosfera o contedo de sais da gua. Atravs da lei de
Henry, tem-se que o clculo da concentrao de oxignio dissolvido em gua a 25 C em
equilbrio com o ar na presso atmosfrica apenas 8,32 mg/L. Portanto, se processos que
consomem oxignio na gua esto ocorrendo (por exemplo, oxidao de poluentes orgnicos), o
nvel de oxignio dissolvido na gua se aproximar de zero a menos que algum mecanismo
eficiente de aerao da gua seja operado, tal como um fluxo de ar turbulento, atravs de
bombeamento. Este fenmeno de depleo da concentrao de oxignio na gua tem causado a
morte de peixes e outras espcies aquticas.

A aerao um processo de tratamento de gua. O oxignio
introduzido no interior da gua como o primeiro passo para remover o ferro ou mangans, antes
da filtrao. A areao tambm diminui os gases dissolvidos, como dixido de carbono e gs
sulfdrico, a nveis tratveis, em certas guas de reservatrios. A aerao tambm usada como
tratamento secundrio de esgotos no processo de lodos ativados.
O gosto e o odor da gua de alguns reservatrios melhoram tambm
com a aerao.
A gua em contato com o ar fica geralmente saturada com o oxignio, a
temperatura ambiente, por outro lado a gua que foi isolada do contato com o ar (guas
profundas) como as de poo ou de lagoas estratificadas contm pouco ou nenhum oxignio
dissolvido (OD). O contedo OD pode ser acrescido pelo oxignio produzido por plantas
aquticas durcnte a fotossntese. Um decrscimo no OD da gua superficial pode ocorrer quando
a temperatura das guas se eleva, de acordo com a equao de Clausius-Clapeyron, ou quando a
concentrao de poluentes aumenta.





II) Metodologia de determinao do oxignio dissolvido(OD)

A) Mtodo Eletromtrico (oxmetro)
Utilizando-se uma membrana permevel ao oxignio sobre um sensor
potenciomtrico, o oxignio que atravessa a membrana encontra o sensor sob tenso polarizante,
e reage no ctodo fazendo fluir uma corrente eltrica que a medida num galvanomtro. A fora
que faz com que o oxignio se difunda atravs da membrana proporcional presso absoluta do
oxignio fora da membrana (do lado do ambiente em estudo) uma vez que do outro lado (no
sensor) a presso do oxignio pode ser considerado nula j que o consumo de oxignio muito
rpido.
A corrente gerada no sensor pode ser medida, no galvanmetro,
diretamente em termos de concentrao de oxignio.
O equipamento usado neste mtodo o oxmetro.
10

Procedimento experimental
O procedimento experimental a ser executado para a determinao do Oxignio
Dissolvido (OD) est descrito na 2
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO
DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO (DBO
5
) (Parte 2) (ver pgina 16).

A Tabela 01 mostra a solubilidade do oxignio em gua a 760 mmHg.

Tabela 01 - Solubilidade do Oxignio em gua a 760 mmHg.
Temperatura (C) Oxignio Dissolvido (mg/L)
1 14,62
2 14,63
3 13,84
4 13,13
5 12,80
6 12,48
7 12,17
8 11,87
9 11,59
10 11,33
11 11,08
12 10,83
13 10,60
14 10,37
15 10,15
16 9,95
17 9,74
18 9,54
19 9,35
20 9,17
21 8,99
22 8,83
23 8,68
24 8,55
25 8,32
26 8,22
27 8,07
28 7,92
29 7,77
30 7,63



Questes para serem respondidas no relatrio


1) Faa o clculo da concentrao de equilbrio do oxignio dissolvido em gua a 25C, utilizando
a lei de Henry.


2) Explique qual a importncia da aerao no processo de tratamento de guas residurias.







11







































2
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO

DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO (DBO
5
) (Parte 2)

MTODO: OXMETRO

I - introduo

A demanda bioqumica de oxignio (DBO) um parmetro que indica
a quantidade de oxignio consumida durante a degradao bioqumica da matria orgnica
(demanda carboncea) juntamente com o oxignio usado na oxidao de produtos inorgnicos
em um certo perodo de tempo, e tambm o oxignio utilizado para oxidar formas reduzidas de
nitrognio (demanda nitrogenada), pelo metabolismo de microrganismos aerbios, que
promovem a estabilizao desta matria orgnica presente no meio lquido. Assim, o oxignio
dissolvido que se encontra no meio aqutico, pode ser consumido por trs diferentes maneiras:
1 - Oxidao de matria orgnica carboncea por organismos aerbios;
2 - Oxidao da amnia, nitrito e nitrognio orgnico oxidvel, atravs
das bactrias nitrificantes;
3 - Na oxidao qumica de compostos tais como on ferroso (Fe
2+
),
sulfito (SO
3
2-
), e sulfeto (S
2-
).
12

O grau de poluio de um corpo dgua e o desempenho de um
processo de tratamento de guas residurias, pode ser avaliado e controlado utilizando-se o valor
da DBO.
A oxidao bioqumica um processo lento, que depender dentre
outros fatores, da populao biolgica envolvida e da temperatura. Um tempo praticamente
infinito pode ser necessrio para uma completa oxidao biolgica, mas para propsitos prticos
pode-se considerar que esta reao seja completada em 20 dias, uma vez que neste perodo h
uma oxidao de cerca de 95% a 99% da matria orgnica. Acontece que o perodo de 20 dias
pode ser invivel para certos fins e assim determinou-se o prazo de 5 dias para o ensaio de DBO,
quando 60% a 70% da oxidao j se efetuou.
Desta forma, podemos dizer que a DBO quantidade ou a taxa de
oxignio a ser consumida bioquimicamente durante certo intervalo de tempo, a uma determinada
temperatura e numa dada quantidade de amostra.
Uma das tcnicas utilizadas com bastante freqncia consiste na
determinao da DBO atravs da medida da quantidade de oxignio dissolvido antes e aps 5
dias de incubao da amostra, a temperatura de 20C.
A cintica de reao da DBO formulada de acordo com a cintica de
primeira ordem, expressa por:



Integrando-se, a equao acima, temos:



onde: L = DBO remanescente no tempo t = 0
L = DBO = DBO da amostra aps um tempo t
K = constante obtida experimentalmente, relacionada com a
velocidade da reao.

Sendo o oxignio consumido diretamente proporcional quantidade de
matria orgnica oxidada bioquimicamente, obtm-se as curvas de matria orgnica versus
tempo.
Cabe lembrar, conforme a normalizao da CETESB que o teste da
DBO um procedimento emprico de valor limitado uma vez que as condies padronizadas de
laboratrio no so representativas de todas as condies que ocorrem na natureza, no sendo
includas por exemplo a luminosidade e a movimentao da gua. Existem ainda muitos outros
fatores interferentes cujas aes no podem ser controladas. Assim, pode-se obter dados
melhores ou mais significativos na determinao da qualidade de uma gua residuria atravs da
demanda qumica de oxignio, DQO, e do carbono orgnico total, TOC.


II - Metodologia

O teste da DBO consiste na determinao do oxignio dissolvido (OD),
em uma amostra antes e aps um perodo de incubao, usualmente de 5 dias, a uma temperatura
de 20 5C. A medida do OD pode ser feito por vrias tcnicas, e os mtodos de incubao
variam de acordo com a amostra a ser analisada.

Mtodos de Incubao:

a) Incubao sem diluio

Aplica-se a guas superficiais pouco poludas ou no, que contm
microrganismos prprios e oxignio suficiente para que, aps 5 dias de incubao, ainda haja
oxignio na amostra.

dL
dt
K L
t
t
= .
L L e
t
K t
=

13
b) Incubao com diluio e sem semente
(Metodologia a ser realizada em aula)

Aplica-se a guas superficiais poludas, efluentes e guas residurias,
que tem microrganismos prprios, porm no tem oxignio dissolvido suficiente para que, aps 5
dias de incubao, ainda haja oxignio dissolvido na amostra.
Os valores de diluio so selecionados de acordo com o valor da DQO
determinado, onde os valores de DQO e DBO guardam uma correlao entre si. Uma correlao
emprica apresentada para os clculos das diluies:




Em determinadas situaes, os resultados de DBO nas vrias diluies
necessrias apresentam valores decrescentes ou crescentes. Isto pode ser um indcio da
necessidade da adio de semente gua de diluio, procedendo-se ento conforme a
metodologia descrita em Anexo B nesta apostila.

c) Incubao com diluio e semente
Aplica-se a guas residurias e efluentes que no possuem
microrganismos prprios, nem oxignio na amostra.

d) Incubao e suspenso com diluio e semente
Aplica-se a lodos.



Determinao do oxignio dissolvido (OD)

a) Mtodo Eletromtrico (oxmetro)
Utilizando-se uma membrana permevel ao oxignio sobre um sensor
potenciomtrico, o oxignio que atravessa a membrana encontra o sensor sob tenso polarizante,
e reage no ctodo fazendo fluir uma corrente eltrica que a medida num galvanomtro. A fora
que faz com que o oxignio se difunda atravs da membrana proporcional presso absoluta do
oxignio fora da membrana (do lado do ambiente em estudo) uma vez que do outro lado (no
sensor) a presso do oxignio pode ser considerado nula j que o consumo de oxignio muito
rpido.
A corrente gerada no sensor pode ser medida, no galvanmetro,
diretamente em termos de concentrao de oxignio.
O equipamento usado neste mtodo o oxmetro.


III - Interferentes

As principais fontes de interferncias na determinao do valor da
DBO, so as seguintes:
- concentraes de nitrito acima de 50 mg/l no causam interferncia
quando se usa o mtodo modificado da azida sdica;
- concentraes de on frrico acima de 100 a 200 mg/l no causam
interferncia quando se usa uma soluo de fluoreto de potssio, KF;
- presena de luz (produo de O
2
pelas algas);
- nutrientes na gua de diluio;
- pH, devendo estar na faixa de 6,8 a 7,3;
- presena de microrganismos (semente);
- qualidade da semente.


IV - Amostra
d
DQO da amostra
d d d d
1 2 1 3 1
1200
2 4 (%)

= = =
14

Tipo de frasco:
- vidro, polietileno ou polipropileno

Volume necessrio:
- 2000 ml

Preservao da amostra:
- sob refrigerao 4C

Prazo de anlise:
24 horas

OBS: Para a determinao da DBO ao longo de vrios dias, o volume
necessrio de 5000 ml.



V - Materiais e equipamentos


a) Equipamentos:

- Bureta de 25 ou 50 ml, com divises de 0,1 ml
- Frascos de DBO, com volume aproximado de 300 ml
- Erlenmeyer de 250 ml
- Pipetas volumtricas
- Balo volumtrico de 500 e 1000 ml
- Oxmetro
- Frasco de vidro para gua de diluio
- Estufa incubadora de DBO, ou similar que mantenha uma temperatura
controlada de 20C


b) REAGENTES

Para a gua de diluio:

- Soluo tampo fosfato (1): dissolver 8,5g de fosfato monobsico de
Potssio, KH
2
PO
4
, 21,75g de fosfato dibsico de potssio, K
2
HPO
4
, 33,4g de fosfato dibsico
de sdio heptahidratado, Na
2
HPO
4
.7 H
2
O , 1,7 g de cloreto de amnio, NH
4
Cl
2
, em 500 ml de
gua destilada e diluir para 1000 ml. O pH da soluo deve ser 7,2 sem ajustes.

- Soluo de sulfato de magnsio (2): dissolver 22,5g de MgSO
4
.7H
2
O,
em gua destilada e diluir para 1000 ml.

- Soluo de cloreto de clcio (3): dissolver 27,5g de CaCl
2
anidro, em
gua destilada e diluir a 1000 ml.

- Soluo de cloreto frrico (4): dissolver 0,25g de FeCl
3
.6H
2
O, em
gua destilada e diluir a 1000 ml.

Procedimento experimental

Preparao da gua de diluio:
Em gua saturada de oxignio, obtida pelo borbulhamento de ar
comprimido limpo (usando bomba de aqurio) durante no mnimo 15 min, adicionar 1 ml das
solues 1 a 4 para cada litro de gua destilada. Esta gua de diluio no deve consumir mais de
0,2 mg/l de O
2
durante o perodo de incubao (branco).

15

PREPARO DA AMOSTRA E SUA INCUBAO

SEM SEMENTE:
1 - Calcular as trs diluies necessrias de cada amostra em funo da
DQO, ver clculo anterior;
2 - Cada diluio obtida, deve ser preparada em balo volumtrico de
1000 ml (ou 500 mL), seguindo exemplo abaixo:
d
1
= 1% 10 mL da amostra diludos a 1000 mL com gua de
diluio (ou 5 ml, no caso de duludos a 500 ml) .
3 - Para cada diluio encher dois frascos de DBO, um para leitura da
OD inicial, tempo 0, e o outro para ser encubado durante 5 dias 20C. Devem ser enchidos
tambm dois frascos somente com gua de diluio (brancos);
4 - O volume necessrio de gua de diluio de 3 litros para cada
amostra (1 litro para cada diluio) mais 600 ml para os brancos;
5 - A quantidade de OD, tanto inicial como aps os 5 dias,
determinada atravs do mtodo eletromtrico (oxmetro).














a) Determinao do Oxignio Dissolvido (OD)
Mtodo do oxmetro:

Calibrao do equipamento:
1 - Prepara-se uma gua saturada de O
2
. Para tanto, utiliza-se 150 ml de
gua destilada colocada em um becker de 250 ml e uma bomba de aqurio com pedra porosa para
promover a saturao, que pode tambm ser feita por meio de agitao em agitador magntico. O
tempo de aerao deve ser igual ou maior que 15 min. Ao mesmo tempo liga-se o oxmetro, e
anote a presso atmosfrica do local;
2 - Coloque o eletrodo imerso na gua saturada de O
2
, medindo a sua
temperatura. De posse dos valores da presso e temperatura, determina-se o valor mximo de O
2

dissolvido a estas condies e assim podemos realizar a calibrao do oxmetro, segundo o
manual do fabricante;
3 - Esta calibrao deve ser feita sempre que se utilizar o equipamento.

Medida da concentrao de OD:
1 - Colocar um peixinho no interior do frasco ou usar Becker de 250
mL, para possibilitar a agitao da amostra atravs do agitador magntico durante a leitura.
Introduza ento o eletrodo no frasco de DBO ou no becker;
2 - A leitura da concentrao de O
2
dissolvido direta, onde o
equipamento compensa as variaes de temperatura.

VI - Clculos

Valor da OD Mtodo do Oxmetro: Medido diretamente no
equipamento em mgO
2
/L

Clculo da DBO:

16
SEM SEMENTES

DBO mgO l
OD OD
dedilui ao
x
i f
c
( / )
( )
%
2
100 =




onde: Od
i
= conc. de O
2
dissolvido inicial
Od
f
= conc. de O
2
dissolvido aps 5 dias
% de diluio = diluio prvia da amostra (d1, d2 e d3)

Questes para serem respondidas no relatrio
1) Explique o que significa DBO, explique a metodologia utilizada, quais as vantagens da DBO
sobre a DQO. Explique como feito o preparo da amostra e a sua incubao.
2) Quais os interferentes da determinao da DBO?















3
A
. EXPERINCIA: DETERMINAO DE LEOS E GRAXAS

I - Introduo

O Os s l le eo os s, , g go or rd du ur ra as s e e g gr ra ax xa as s s s o o o os s l li ip p d di io os s m ma ai is s c co om mu un ns s, , s se en nd do o c co on ns st ti it t u u d do os s d de e t tr ri ig gl li ic ce er ri id de eo os s
f fo or rm ma ad do os s a a p pa ar rt ti ir r d de e l lc co oo ol l g gl li ic ce er ro ol l e e c ci id do o e es st te e r ri ic co o. .
O Os s l li ip p d di io os s s s o o s su ub bs st t n nc ci ia as s q qu ue e p po od de em m s se er r e ex xt tr ra a d da as s d de e p pl la an nt ta as s o ou u m ma at t r ri ia a a an ni im ma al l, , a at tr ra av v s s d de e
s so ol lv ve en nt te es s o or rg g n ni ic co os s a ap po ol l a ar re es s o ou u d de e b ba ai ix xa a p po ol la ar ri id da ad de e, , t ta ai is s c co om mo o c cl lo or ro of f r rm mi i o o, , t te er r e et t l li ic co o, , h he ex xa an no o, , o ou u
t to ol lu ue en no o. . A A T Ta ab be el la a 0 01 1 m mo os st tr ra a a as s p pr ro op pr ri ie ed da ad de es s f f s si ic ca as s d do os s s so ol l v ve en nt te es s m ma ai is s u us sa ad do os s e em m e ex xt tr ra a o o. .
O Os s l le eo os s, , g go or rd du ur ra as s e e g gr ra ax xa as s s s o o c co on ns st ti it tu ui in nt te es s i im mp po or rt ta an nt te es s d da as s g gu ua as s r re es si id du u r ri ia as s. . l le eo os s e e
g go or rd du ur ra as s, , g ge er ra al l m me en nt te e p pr ro ov ve em m d do os s a al li i m me en nt to os s e e c co on ns st ti it tu ue em m u um m g gr ru up po o d de e c co om mp po os st to os s s si i g gn ni if fi ic ca at ti iv vo os s, ,
p pr ri in nc ci ip pa al lm me en nt te e n na a c co om mp po os si i o o d do os s e es sg go ot to os s m mu un ni ic ci i p pa ai is s. .
O termo leo e graxa inclui leos, gorduras, ceras, e outros constituintes solveis em solventes
orgnicos como, por exemplo, o n-hexano. leos, gorduras e graxas so insolveis em gua. Os leos
apresentam-se no estado lquido temperatura ambiente e as gorduras so slidos nas mesmas condies.
Existem ainda, os lipdios complexos, constitudos pelos fosfolipdios, cerebrosdios e outros que so lipdios
combinados com certos grupos ou radicais qumicos que lhes conferem funes especficas no metabolismo dos
seres vivos.


T Ta ab be el la a 0 01 1. . P Pr ro op pr ri ie ed da ad de es s f f s si ic ca as s d do os s s so ol l v ve en nt te es s m ma ai i s s u us sa ad do os s e em m e ex xt tr ra a o o. .
S So ol lv ve en nt te e F F r rm mu ul la a
m mo ol le ec cu ul l a ar r
M Ma as ss sa a
M Mo ol le ec cu ul la ar r( (g g/ /m mo ol l) )
P Po on nt to o d de e
E Eb bu ul li i o o ( ( C C) )
D De en ns si id da ad de e, ,
2 20 0 C C ( (g g/ /c cm m
3 3
) )
C Co om me en nt t r ri io os s
t te er r e et t l li ic co o C C
2 2
H H
5 5
O OC C
2 2
H H
5 5
7 74 4 3 35 5 0 0, , 7 71 14 4 M Mu ui it to o u us sa ad do o n na a
e ex xt tr ra a o o. .
n n- -H He ex xa an no o C C
6 6
H H
1 14 4
8 86 6 6 68 8 0 0, , 6 65 59 9 P Pr ro op pr ri ie ed da ad de es s
s se em me el lh ha an nt te es s a ao o
t te er r d de e p pe et tr r l le eo o. .
D Di ic cl lo or ro om me et ta an no o C CH H
2 2
C Cl l
2 2
8 85 5 4 41 1 1 1, , 3 33 35 5 S So ol lv ve en nt te e m ma ai is s
d de en ns so o q qu ue e a a
17
g gu ua a. .
A Ac ce et ta at to o d de e e et ti il la a C CH H
3 3
C CO O
2 2
C C
2 2
H H
5 5
8 88 8 7 77 7 0 0, , 9 90 02 2 E Es st t s se en nd do o
p po op pu ul la ar ri iz za ad do o
s se eu u u us so o n no o
l lu ug ga ar r d de e t te er r
e et t l li ic co o. .

Os leos e graxas podem ser hidrolisados em meio alcalino, originando o glicerol e o sal de cido graxo
correspondente, normalmente denominados de sabes, sendo essa reao conhecida como saponificao.
O esgoto municipal contm leos e gorduras provenientes de alimentos como a manteiga, banha,
gorduras, leos vegetais. A gordura pode ter sua origem em diversas fontes como carnes, sementes e frutas. So
compostos orgnicos muito estveis, no sendo facilmente decomposto por bactrias em geral, e por esse fato,
podem causar srios problemas ao tratamento das guas residurias nas quais se encontram presentes.
leos e similares, derivados do petrleo, podem ser despejados nos esgotos atravs dos escoamentos
provenientes de postos, garagens, lojas, passeios, causando problemas as unidades de tratamento e a manuteno
das mesmas. Normalmente formam uma camada flutuante, interferindo na atividade biolgica superficial.
METCALF & EDDY citam que a quantidade limite de leos e graxas em guas residurias, despejadas em
cursos d gua, deve estar compreendida entre 15 e 20 mg/L.
Em guas naturais, a presena de leos e graxas pode ser resultado da decomposio do zooplancton,
das formas superiores de vida aqutica, despejos industriais e sanitrios ou como frao livre de petrleo em
soluo, onde pode formar uma pelcula na interface da gua ar causando danos a vegetao aqutica e, em geral
a todas as formas de vida aqutica em funo de dificultar a aerao superficial, podendo ocorrer acmulo de
leos e graxas nas margens dos outros cursos dgua, afetando diretamente todo ecossistema envolvido.
Uma das principais caractersticas dos leos e graxas a sua alta resistncia a degradao em meio
anaerbio. Quando presentes em altas concentraes podem causar problemas diversos tais como acmulo de
escuma em biodigestor, obstruo de poros em meio filtrante, alm de impedir a utilizao desse lodo como
fertilizante agrcola.
Para sua determinao pode-se utilizar trs mtodos: o mtodo de partio gravimtrica usando funil
de separao, o mtodo da partio infravermelho e o mtodo de extrao Soxhlet (atualmente, bloco digestor).
Nestes mtodos leos e graxas dissolvidos ou emulsionados so extrados da amostra acidificada por contato
com o solvente orgnico que posteriormente separado.
O teor de leos e graxas corresponde ao peso do resduo remanescente aps e evaporao do solvente.
Compostos que se volatilizam a uma temperatura igual ou menor que 70C, sero perdidos durante o
procedimento analtico. Os leos lubrificantes e querosene so de baixo ponto de ebulio e normalmente se
perdem nesta anlise.
Certos despejos industriais podem conter compostos sintticos como os de cadeia longa, utilizados
como lubrificantes ou como emulsificantes, que podem ser mais solveis na gua ou mais facilmente
emulsionados que os produtos naturais. Quando presentes na amostra, h necessidade de modificao no
mtodo.

II -Interferentes
O mtodo no aplicvel para medir hidrocarbonetos que volatilizem a
temperatura inferior a 70C. Certos leos crus e combustveis pesados contm uma porcentagem
significativa de material tipo resduo, que no extrado pelo solvente.

III -Tcnica de coleta e preservao
Tipo de frasco
- vidro de boca larga com tampa esmerilhada

Volume necessrio
- 1000 ml

Preservao da amostra
- cido clordrico concentrado at pH < 2,0
- refrigerar a 4C no escuro

Prazo para anlise
- 28 dias com amostra acidificada

IV -Materiais e equipamentos
18
1) Bloco digestor para determinao de leos e graxas;
2) Bomba vcuo;
3) Balana analtica;
4) Estufa a 105C;
5) Dessecador;
6) Kitassato de 2 litros;
7) Kitassato 500 mL;
8) Pina metlica;
9) Funil de Buckner;
10) Papel de filtro de 11cm de dimetro (tipo Whatman 40);
11) Tecido de Musseline;
12) Proveta de 100 mL;
13) Balo volumtrico de 1 litro;
14) L de vidro;
15) Cartucho de celulose;
16) Becker de 100 mL;
17) Becker para amostra;
18) Basto de vidro (bagueta);
19) Pisseta;
- Copos de vidro.






V Reagentes

20) cido clordrico concentrado (usar 1 mL do cido para cada 80 mL da amostra).
21) Suspenso de slica ou Terra de Diatomcea (concentrao 10 g/L em gua destilada),utilizada
como auxiliar de filtrao.
22) nHexano.
VI - Procedimento experimental

1) Os copinhos de vidro devero permanecer na estufa 105C durante 2 horas para secagem. Em
seguida coloc-los no dessecador at atingir a temperatura ambiente. Pesar em balana analtica.
2) Conectar o funil de Buckner no Kitassato de 2 litros e este linha de vcuo, usando o Kitassato de
500mL como sistema de segurana (intermedirio);
3) Preparao do filtro de papel/tecido de musseline: em um funil de Buckner colocar o tecido de
musseline, e sobre este o papel de filtro. Umedece-los com gua destilada, usando uma pisseta;
4) No sistema a vcuo montado, passar pelo funil de Buckner 100 mL de suspenso auxiliar de
filtrao e em seguida lavar o filtro com 1 litro de gua destilada. Aplicar o vcuo at esgotar a gua
pelo filtro;
5) Colocar um volume de amostra representativa no Becker e acidific-la na proporo 1 mL/80 mL,
em seguida filtre a amostra aplicando o vcuo;
6) Com a pina enrolar o filtro + tecido e transferi-los para o cartucho de celulose. Limpar o Becker
que continha a amostra acidificada e o funil, usando pedaos de papel de filtro umedecidos com
solvente (n-hexano), tomando cuidado para remover todo o filme formado pelos leos e graxas
presentes, coletando todo o material slido existente. Colocar todos os pedaos de papel no cartucho
de celulose;
7) Tampar o cartucho usando l de vidro, e coloca-lo em um Becker de 100 mL;
8) Secar o conjunto a 105 C por 30 minutos (tempo recomendado para a anlise, porm, em
aula o tempo ser de 15 min.);
9) Encaixar o cartucho no circuito do bloco digestor;
10) Ligar a gua para alimentar os condensadores;
11) Com uma proveta medir 120 mL de n-hexano e colocar no copinho;
12) Encaixar os copinhos no bloco digestor, fechando o sistema. O bloco digestor dever ser
programado para atingir a temperatura de 110 C;
13) Mergulhar lentamente o cartucho no n-hexano quando o solvente estiver em ebulio (~ 110 C);
19
14) Deixar o cartucho imerso durante 30 minutos (tempo recomendado para a anlise, porm, em
aula o tempo ser de 15 min.) a temperatura de 110 C;
15) Suspender o cartucho, mantendo o sistema aberto por 1 hora e 30 minutos (tempo recomendado
para a anlise, porm, em aula o tempo ser de 30 min.);

16) Fechar o sistema para recuperao de n-hexano, programando a temperatura para 135 C;
17) Retirar os copinhos do circuito e leva-los para estufa 105C, por 30 minutos;
18) Colocar os copinhos no dessecador at atingir a temperatura ambiente, pes-los em balana
analtica.
- O solvente recuperado deve ser retirado do sistema com auxlio de um bquer de 500 mL, usando
luvas para proteo a alta temperatura.
- Armazenar o solvente recuperado em frasco de vidro rotulado com a informao d e Solvente
recuperado.
VII - Clculos

mg de leo e graxas/L = ( A - B ) x 1.000
V

onde: A = peso do copinho aps a destilao da amostra, em gramas,
B = peso do balo vazio (mais prola de vidro), em gramas,
V = volume da amostra, em litros.

Questes para serem respondidas no relatrio
1) Explique o que so leos e graxas, qual a origem destes em guas naturais? Qual a
conseqncia da presena destas substncias em corpos dgua?
2) Quais so os principais mtodos para a determinao de leos e graxas? Explique.
3) Quais os interferentes da Determinao de leos e graxas?


4
A
. EXPERINCIA: DETERMINAO DE RESDUOS OU
SLIDOS: SRIE COMPLETA

Introduo

Todos os contaminantes presentes na gua, com exceo dos gases dissolvidos, contribuem para a carga
de slidos. Por esta razo, os slidos so analisados separadamente antes de se apresentar os diversos
parmetros de qualidade da gua.
De modo simplificado, os slidos podem ser classificados de acordo com:

- suas caractersticas fsicas (tamanho e estado): - Suspensos (1 m < tamanho < 10
3
m);
- Coloidais (10
-3
m < tamanho < 1 m);
- Dissolvidos (10
-6
m < tamanho < 10
-3
m) .

A diviso dos slidos por tamanho sobretudo uma diviso prtica. Por conveno, diz-se que as
partculas de menores dimenses, capazes de passar por um papel de filtro de tamanho especificado
correspondem aos slidos dissolvidos, enquanto que as de maiores dimenses, retidas pelo filtro so
consideradas slidos em suspenso. A rigor os termos filtrveis e no-filtrveis so mais adequados.
Na faixa intermediria situam-se os slidos coloidais, de grande importncia no tratamento de gua, mas
de difcil identificao pelos mtodos simplificados de filtrao em papel. Assim, nos resultados das anlises de
gua, a maior parte dos slidos coloidais acabam sendo considerados como slidos dissolvidos e o restante,
como slidos em suspenso.

- suas caractersticas qumicas: - volteis;
- fixos ou no volteis.
Ao submeter os slidos uma temperatura elevada (550C), a frao orgnica volatilizada,
permanecendo aps combusto apenas a frao inorgnica. Os slidos volteis representam portanto uma
estimativa da matria orgnica nos slidos, ao passo que os slidos no volteis (fixos) representam a matria
inorgnica ou mineral.

20
- sua decantabilidade: - em suspenso sedimentveis;
- em suspenso no-sedimentveis.

De uma maneira simplificada, consideram-se como slidos sedimentveis aqueles de densidade maior
que a da gua, que sejam capazes de sedimentar por ao da fora da gravidade em um determinado perodo de
tempo, quando o sistema est em repouso. Os valores podem ser determinados e quantificados em relao ao
seu volume (mL/L) atravs do cone Imhoff ou peso (mg/L), sendo o primeiro denominado de teste volumtrico
e o segundo de gravimtrico. A frao que no se sedimenta representa os slidos no-sedimentveis
(usualmente no expressos nos resultados da anlise).
A quantidade e a natureza dos slidos nas guas variam muito. guas com alto teor de slidos
suspensos podem prejudicar as caractersticas fsicas tornando-a imprpria para usos como o de recreao.
Como j exposto, em guas de abastecimento, os slidos ocorrem, em geral, na forma dissolvida constituindo-se
na sua maior parte por sais inorgnicos, como carbonatos, bicarbonatos, cloretos, sulfatos, pequenas quantidades
de ferro, magnsio e outros. Esses slidos podem afetar a qualidade da gua adversamente de vrias maneiras,
conferindo caractersticas qumicas e fsicas como cor, turbidez, sabor, odor, dureza, toxicidade. guas com
alto teor de slidos dissolvidos geralmente afetam a potabilidade podendo induzir reaes fisiolgicas
desfavorveis no consumidor mesmo em baixas concentraes. Alm disso, guas altamente mineralizadas so
tambm imprprias, para diversas aplicaes industriais. Por estas e tantas outras razes, a concentrao de
slidos bem como outros parmetros so controlados pelos padres de qualidade que regulamentam de uma
forma generalizada e conceitual a qualidade desejada para a gua em funo do uso previsto para a mesma.
Em termos prticos, h trs tipos de padres de interesse direto para a Engenharia Ambiental no que se
refere qualidade da gua:
- Padres de lanamento no corpo receptor;
- Padres de qualidade do corpo receptor;
- Padres de qualidade para determinado uso imediato como padres de potabilidade, irrigao.

A Resoluo CONAMA n357 de 2005 tem como principal objetivo preservar a qualidade no corpo
dgua e apresenta para isso os padres de qualidade dos corpos receptores e os padres para o lanamento de
efluentes nos corpos dgua. Segundo os padres de qualidade dos corpos receptores a concentrao limite de
slidos dissolvidos de 500 mg/L para as classes 1, 2 e 3, guas passveis de uso para abastecimento.
O padres de potabilidade esto diretamente associados qualidade da gua fornecida ao consumo
humano e foram estabelecidas pela Portaria n 518 de 2004, pelo Ministrio da Sade. A concentrao mxima
desejvel de slidos totais de 500 mg/L sendo a concentrao permissvel de 1500 mg/L. O valor mximo
permissvel para a concentrao de slidos totais dissolvidos de 1000 mg/L.
Dentre as vrias caractersticas das guas residuais, os slidos constituem um dos principais elementos,
uma vez que sua determinao possibilita o dimensionamento de vrias etapas de uma estao de tratamento de
guas residurias (ETE). O conhecimento das concentraes de partculas de tamanho acima da faixa de 0,1 a
0,4 mm ponto fundamental para o dimensionamento da caixa de areia logo na entrada da ETE, onde se remove
o material constitudo basicamente de areia proveniente da lixiviao do solo, lavagem de pisos, infiltrao, etc.
Da mesma forma, o dimensionamento das cmaras de decantao e dos decantadores secundrios est
diretamente relacionado concentrao de slidos sedimentveis e volteis, respectivamente.
Uma vez estabelecida a ETE, a determinao de slidos permite o controle da qualidade das operaes e
processos durante o tratamento. Assim, o conhecimento da frao de slidos volteis apresenta particular
interesse nos processos de lodos ativados e oxidao total para se estimar a quantidade de matria orgnica
tomando parte no processo e nos exames do lodo de esgoto para se estimar sua estabilidade biolgica.
Definies
Slidos Totais o termo aplicado ao resduo de material permanecido no recipiente aps a evaporao de
uma amostra e subsequente secagem em estufa temperatura de 103

a 105C, at peso constante. Slidos totais
incluem slidos suspensos totais, a poro total de slidos retida por um filtro e slidos dissolvidos totais,
a poro que passa atravs de filtro.
O O t ti ip po o d de e f fi il lt tr ro o a a s se er r u ut ti il li iz za ad do o, , o o t ta am ma an nh ho o d do o p po or ro o, , p po or ro os si id da ad de e, , r re ea a, , e es sp pe es ss su ur ra a d do o f fi il lt tr ro o e e
n na at tu ur re ez za a f f s si ic ca a, , t ta am ma an nh ho o d de e p pa ar rt t c cu ul la a e e v vo ol lu um me e d da a a am mo os st tr ra a a a s se er r d de ep po os si it ta ad do o n no o f fi il lt tr ro o s s o o o os s p pr ri in nc ci ip pa ai is s
f fa at to or re es s q qu ue e a af fe et ta am m a a s se ep pa ar ra a o o d do os s s s l li id do os s s su us sp pe en ns so os s d do os s d di is ss so ol l v vi id do os s. . S S l l i id do os s d di is ss so ol lv vi id do os s a a p po or r o o
d de e s s l li id do os s q qu ue e p pa as ss sa a a at tr ra av v s s d do o f fi il lt tr ro o c co om m t ta am ma an nh ho o n no om mi in na al l d do os s p po or ro os s i ig gu ua al l a a 2 2, , 0 0 m m ( ( o ou u m me en no or r) ) s so ob b
c co on nd di i e es s e es sp pe ec ci if fi ic ca as s. . S S l li id do os s s su us sp pe en ns so os s a a p po or r o o r re et ti id da a n no o f fi il lt tr ro o. .
Slidos fixos o termo aplicado ao resduo total, suspenso, ou dissolvido dos slidos, aps aquecimento
para secagem por um tempo e temperatura especificas (550C por uma hora). O peso perdido por ignio
(combusto) chamada de slidos volteis. A rigor, determinaes de slidos fixos e volteis no se
distinguem entre matria inorgnica e orgnica pois a perda na ignio no limitada matria orgnica. Ela
21
inclui perdas devido a decomposio ou volatilizao de alguns sais minerais. Melhor caracterizao de matria
orgnica pode ser feita por testes como carbono orgnico total.
Slidos sedimentveis o termo aplicado ao material em suspenso de densidade maior que a da gua,
que por ao da fora da gravidade sedimenta dentro de um perodo definido quando o sistema est em repouso.
Pode incluir material flutuante ou instvel dependendo da tcnica.
As faixas de variao e os valores tpicos das concentraes e contribuio per capta de slidos de um
esgoto domstico bruto de composio mdia podem ser encontradas na literatura.





II - Tcnica de coleta e preservao
a) Resduos sedimentveis

Tipo de frasco:
- vidro, polietileno, polipropileno.
Volume necessrio:
- 1000 ml
Preservao da amostra:
- 24 horas


b) Resduos Totais, Filtrveis, No Filtrveis, Fixos e Volteis

Tipo de frasco:
- vidro, polietileno, polipropileno

Volume necessrio para anlise:
- 1000 ml

Preservao da amostra:
- refrigerar 4C

Prazo para anlise:
- 7 dias

III - Materiais e equipamentos

- Cone de IMHOFF
- Cpsula de porcelana
- Forno Mufla para ignio em temperatura 550 50C
- Proveta 100 ml
- Banho Maria
- Dessecador
- Estufa para temperaturas de 103 105C
- Pisseta
- Balana de preciso 0,1mg
- Bomba de vcuo
- Kitassato de 1000 ml
- Kitassato de 500 ml
- Sistema de filtrao tipo Milipore
- Filtro de fibra de vidro (tipo WHATMAN GF/C)


IV - Interferentes

22
- Durante o processo de evaporao pode ocorrer perda de material
voltil
- H decomposio de compostos orgnicos
- Presena de leos e graxas
- Impreciso na pesagem, devido ao material no estar bem seco
- Perda de material devido ignio


V - Mtodo de ensaio

1.a. - Determinao de slidos totais 103 - 105C
1 - Secar uma cpsula de porcelana, em forno mufla 550C, por uma
hora, esperar que a cpsula resfrie e coloc-la no dessecador at atingir e a temperatura ambiente
e pes-la em balana analtica.
2 - Transferir para a cpsula 100 ml (medida em proveta) de uma
poro homognea da amostra. Lave a proveta com um pouco de gua destilada, afim de retirar
todo o material que fica aderido a parede da proveta, e despeje esse contedo na cpsula.
3 - Levar a cpsula ao banho-maria at que a amostra seque.
4 - Levar a cpsula estufa a 103 - 105C, durante uma hora.
5 - Esfriar a cpsula mais resduo, no dessecador e pesar o conjunto em
balana analtica.


1.b. - Determinao de Slidos totais fixos

Aps a pesagem da cpsula (tem a-5), lev-la ao forno mufla 550
50C, durante uma hora. Esfriar a cpsula no dessecador e pes-la.

1.c. - Determinao de slidos totais volteis

a poro de resduo (matria orgnica) que se perde na ignio da
amostra 550 50C (tem b).

2.a. - Determinao de slidos suspensos totais

1 - Calcinar o filtro de fibra de vidro (WHATMAN GF/C), em forno
mufla, durante uma hora 550 50C, esfriar no dessecador e pes-lo em balana analtica 0,1
mg.
2 - Colocar o filtro no suporte apropriado (Milipore), e conect-lo ao
kitassato e ao sistema de vcuo.
3 - Filtrar uma quantidade de amostra conhecida, homognea,
aplicando o vcuo, considerando encerrada a operao quando ocorre o entupimento do filtro.
Anotar o volume filtrado. Lavar o filtro trs vezes com 10 ml de gua destilada.
4 - Secar o filtro em estufa por uma hora 103 - 105C, esfriar no
dessecador e pes-lo em balana analtica 0,1 mg.

2.b. - Determinao de slidos suspensos fixos

Aps a secagem em estufa e a pesagem do filtro (tem 2 a 4), levar o
filtro ao forno mufla para ignio 550 50C, por uma hora. Esfriar o conjunto no dessecador e
pes-lo em balana analtica 0,1 mg.

2.c. - Determinao de slidos suspensos volteis

a poro do resduo (matria orgnica) que se perde aps a ignio,
550 50C.
3 - Determinao de slidos sedimentveis

1 - Agitar bem a amostra e despej-la no cone de IMHOFF, at a marca
de 1000 ml.
23
2 - Deixar sedimentar por 45 minutos. Aps passar o basto de vidro,
cuidadosamente, pelas paredes do cone, deixando-o em repouso por mais 15 minutos. Aps os 15
minutos, fazer a leitura, que d diretamente a quantidade de slidos sedimentveis em ml/l.
VI - Clculos
1.a. - Slidos Totais (ST)


onde: A = peso da cpsula mais resduo seco 103C, em g.
B = peso da cpsula vazia, em g.
Vol = volume da amostra, em litros.
1.b. - Slidos Totais Fixos (STF)


onde: C = peso da cpsula mais slidos, aps ignio 550 C, em g.
B = peso da cpsula, seca e limpa, em g.
Vol = volume da amostra, em litros.


1.c. - Slidos Totais Volteis (STV)



2.a. - Slidos Suspensos Totais (SST)



onde: D = peso do filtro mais slidos, em g.
F = peso do filtro seco e limpo, em g.
Vol = volume da amostra em litros.

2.b. Slidos Suspensos Fixos (SSF)



onde: E = peso do filtro mais slidos aps ignio 550 C, em g.
F = peso do filtro seco e limpo, em g.
Vol = Volume da amostra, em litros.

2.c. - Slidos Suspensos Volteis (SSV)



3.a. - Slidos Dissolvidos Totais (SDT)


3.b. - Slidos Dissolvidos Fixos (SDF)


3.c. - Slidos Dissolvidos Volteis (SDV)


Questes para serem respondidas no relatrio

ST
A B x
Vol
mg l =
( )
( / )
1000
STF
C B x
Vol
mg l =
( )
( / )
1000
STV ST STF mg l = ( / )
SST
D F x
Vol
mg l =
( )
( / )
1000
SSF
E F x
Vol
mg l =
( )
( / )
1000
SSV SST SSF mg l = ( / )
SDT ST SST mg l = ( / )
SDF STF SSF mg l = ( / )
SDV STV SSV mg l = ( / )
24
1) Explique o que so slidos totais, slidos fixos, slidos volteis, slidos sedimentveis,
classifique os slidos de acordo com:
a. Suas caractersticas fsicas;
b. Suas caractersticas qumicas;
c. Sua decantabilidade.

2) Quais so as conseqncias de um efluente industrial com alto teor de slidos?

3) Quais so os interferentes da anlise de resduos slidos?

4) Explique como se determina o teor de slidos orgnicos e inorgnicos numa amostra de
efluente coletada?





5
A
. EXPERINCIA: DETERMINAO DA SRIE DO NITROGNIO

I Introduo

O nitrognio constituinte natural de protenas, clorofila e vrios outros compostos biolgicos, podendo
tambm ser encontrado em despejos domsticos, despejos industriais, excrementos de animais e em fertilizantes.
O nitrognio altera-se entre vrias formas e estados de oxidao, sendo as de maior interesse, em ordem
decrescente do estado de oxidao, nitrato (NO
3
-
), nitrito (NO
2
-
), amnia (NH
3
ou NH
4
+
) e nitrognio orgnico
(dissolvido ou em suspenso).
O nitrognio orgnico e a amnia podem ser determinados juntos e so referidos como Nitrognio de
Kjeldahl, o termo que reflete a tcnica usada para suas determinaes. Nitrognio orgnico inclui matria
natural (protenas, peptdios, cidos nuclicos, uria) e numerosos compostos orgnicos sintticos. A amnia
est naturalmente presente em guas superficiais e guas residurias. Ela produzida largamente pela
amonificao de nitrognio orgnico e pela hidrlise da uria. Em algumas estaes de tratamento de gua, a
amnia acrescentada para reagir com o cloro formando cloro residual combinado, as cloraminas. Nitrato
geralmente ocorre em pequenas quantidades em guas superficiais, mas podem alcanar altos nveis em algumas
guas subterrneas. Em excesso, ele contribui para a formao de uma doena conhecida como
metahemoglobinemia (sndrome do bebe azul). Nitrito um estado de oxidao intermedirio do nitrognio,
obtido tanto da oxidao da amnia a nitrato como da reduo do nitrato. Sua oxidao ou reduo pode ocorrer
tanto em estaes de tratamento de esgoto, em sistemas de distribuio de gua e em guas naturais. Ele usado
como inibidor corrosivo em processos industriais de gua.
A fonte de nitrognio orgnico o material produzido aps a hidrlise qumica: aminocidos, acares
aminados, aminas e peptdios, como tambm o material proveniente da endogenia dos microrganismos. O
processo de amonificao consiste na transformao de nitrognio orgnico em amnia, na forma de on (NH
4
+
)
ou livre (NH
3
), por intermdio de bactrias heterotrficas. Tanto o processo de hidrlise como de amonificao
tem incio no sistema de coleta e interceptao fazendo com que a amnia j se encontre presente no esgoto
afluente estao de tratamento.
Em seguida, a amnia transformada em nitritos e estes em nitratos, fenmeno denominado de nitrificao.
Neste processo, os microrganismos envolvidos so auttrofos quimiossintetizantes, isto , utilizam o gs
carbnico como fonte de carbono e como fonte de energia qumica a amnia. Estes microrganismos autotrficos
so encontrados com freqncia nos processos de tratamento biolgico aerbio.
A transformao da amnia em nitritos realizada por bactrias do gnero Nitrosomonas, de acordo com a
seguinte reao:

2NH
4
+
-N + 3 O
2
2 NO
2
-
-N + 4H
+
+ 2 H
2
O


J a oxidao dos nitritos a nitratos d-se principalmente pela atuao de bactrias do gnero Nitrobacter,
segundo a seguinte reao:

2NO
2
-
-N + O
2
2 NO
3
-
- N
25

Em condies anxicas (ausncia de oxignio, mas presena de nitrato), os nitratos so utilizados por
microrganismos heterotrficos como o aceptor de eltron, em substituio ao oxignio. Este processo chamado
de desnitrificao, onde o nitrato reduzido a nitrognio gasoso, segundo a seguinte reao:

2NO
3
-
-N + 2H
+
N
2
+ 2,5

O
2
+ H
2
O

Na nitrificao ocorre o consumo de oxignio livre, demanda nitrogenada, e a liberao de H
+
, consumo
de alcalinidade do meio com possvel reduo de pH. J no processo de desnitrificao ocorre economia de
oxignio e consumo de H
+
, ou seja, aumento da capacidade tampo do meio.



Do ponto de vista de anlises, pode-se definir as formas de nitrognio como:

Nitrognio Total: nitrognio orgnico + amnia + nitrito + nitrato;
Nitrognio Total Kjeldahl (NTK): nitrognio orgnico + amnia;
Nitrognio orgnico: protenas, aminocidos e uria;
Nitrognio amoniacal: NH
3
+ NH
4
+
;
Nitrito NO
2
-
;
Nitrato NO
3
-
.

Observao: Em laboratrio, determina-se o Nitrognio Total Kjeldahl, o Nitrognio Amoniacal, o
Nitrito e o Nitrato.

Segundo a Resoluo CONAMA n 357 de 2005, os padres de qualidade para os corpos dgua das
diversas classes encontram-se definidos em concentraes mximas permitidas para cada espcie nitrogenada.


OBJETIVO DAS ANLISES:

O objetivo em se determinar amnia, nitrognio orgnico, nitrato e nitrito que o nitrognio um
componente de grande importncia em termos de gerao e controle de poluio das guas, devido aos seguintes
aspectos:

o nitrognio um elemento indispensvel para o crescimento de algas podendo levar ao fenmeno de
eutrofizao de lagos e represas;
a converso de amnia a nitrito e este a nitrato implica no consumo de oxignio livre do curso dgua (o que
pode afetar a vida aqutica);
amnia livre txica aos peixes;
associa-se o nitrato doena conhecida como metahemoglobinemia ( sndrome do bebe azul);
O nitrognio uma fonte para o crescimento dos microrganismos responsveis pelo Tratamento de
Esgotos;
Em um corpo dgua, a determinao da forma predominante do nitrognio pode fornecer informaes
sobre o estgio de poluio, Tabela 01.

TABELA 01 Distribuio relativa das formas de nitrognio segundo distintas condies (FONTE: Von
Sperling, 1996).
Condio Forma predominante de nitrognio
Esgoto Bruto Nitrognio orgnico, amnia
Poluio recente em curso dgua Nitrognio orgnico, amnia
Poluio mdia em curso dgua Orgnico, amnia, nitrito e nitrato
Poluio remota em curso dgua Nitrato
Efluente de tratamento sem nitrificao Amnia
Efluente de tratamento com nitrificao Nitrato
Efluente nitrificado e desnitrificado Concentrao mais reduzida de todas as formas
de nitrognio

26














5
A
. EXPERINCIA: DETERMINAO DE NITRITO EM GUAS
MTODO DA SULFANILAMIDA E
N- (1-NAFTIL) ETILENODIAMINA (Parte 1) Mtodo No. 965 DR2000


I . Introduo

Das formas bioquimicamente interconversveis do ciclo do nitrognio,
as que tem maior interesse no estudo da gua e de guas residurias so o nitrato, o nitrito, a
amnia e o nitrognio orgnico.
Nitrito uma forma intermediria do nitrognio, que pode resultar
tanto da oxidao da amnia pelos Nitrosomonas em condies aerbias, como da reduo de
nitratos em condies anaerbias. Dificilmente a concentrao de nitritos em guas naturais ou
em guas residurias passa de 1 mg/L, e em geral as guas naturais tem menos de 0,1 mg/L.
Sendo o nitrito um redutor muito empregado no abastecimento industrial, como inibidor, pode
vir a contaminar cursos dgua.


II - Tcnica de coleta e preservao

Tipo de frasco
- vidro, polietileno, polipropileno

Volume necessrio para anlise
- 200 mL

Preservao da amostra
- refrigerar a 4
0
C

Prazo para anlise
- 24 horas


III - Materiais, equipamentos e reagentes

- Proveta de 50 mL com tampa de p.p;
- Becker 300 mL;
- Bales volumtricos;
- Pipetas volumtricas ;
- Funil de vidro;
- Bagueta;
- Espectrofotmetro, para uso a 540 nm.
- Membrana filtrante, 0,45 m.
- Papel de filtro, Whatman 41.

Reagentes
27

Suspenso de Hidrxido de Alumnio: dissolver 125g de sulfato de
alumnio e potssio, AIK (SO
4
)
2
. 12 H
2
O p.a., ou sulfato de alumnio e amnio, Al(NH
4
) (SO
4
)
2
.
12 H
2
O, p.a., em um litro de gua destilada isenta de nitritos . Aquecer a 60
0
C e adicionar 55
mL NH
4
OH conc., lentamente e com agitao. Deixar a mistura em repouso por 1 hora, tranfer -
la para um becker de 2 litros, e lavar o precipitado vrias vezes por adio de gua destilada
isenta de nitritos, misturar e deixar decantar. Remover o mximo de sobrenadante possvel,
restando a soluo concentrada.

Reagente Sulfanilamida: dissolver 5g de 4-NH
2
C
6
H
4
SO
2
NH
2
, p.a., em
uma mistura de 50 mL de HCl conc. e 300 mL de gua destilada. Diluir a 500 mL com gua
destilada. Estvel por alguns meses.

Soluo de Dicloreto de N-(1-naftil) Etilenodiamina: dissolver 500 mg
de C
10
H
7
HN CH
2
CH
2
NH
2
. 2 HCl, p.a., em gua destilada. Guardar em frasco ambar, descartar se
aparecer colorao marrom intensa. Soluo estvel por 1 ms.

Soluo de Permanganato de Potssio 0,05N,padronizada: dissolver 1,6
g de KMnO
4
, p.a., em 1000 mL de gua destilada. Aquecer at a fervura e manter temperatura
pouco inferior da ebulio por 1 hora. Filtrar por l de vidro. Transferir o filtrado para o frasco
ambar de tampa esmerilhada, lavado com soluo sulfocrmica. Refiltrar e padronizar
novamente se aparecer depsito de MnO
2
.

Padronizao:
Pesar 3 pores de 100 a 200 mg de oxalato de sdio anidro, Na
2
C
2
O
4
,
p.a., e colocar em beckers de 400 mL;
Adicionar a cada becker 100 ml de gua destilada, e mexer para
dissolver o oxalato;
Adicionar a cada becker 10 mL de soluo H
2
SO
4
1+1 e aquecer
imediatamente a 90 - 95
0
C;
Titular cada becker com a soluo de permanganato, com agitao , at
que se forme a cor rosa clara do ponto final, que persista por pelo menos 1 minuto. Ter o cuidado
de no deixar a temperatura baixar a menos de 85
0
C.
Efetuar prova em branco com gua destilada.
Para cada soluo de oxalato.

onde:
A = mL da soluo de KMnO
4
gastos na titulao
B = mL da soluo de KMnO
4
gastos na titulao da prova em branco
A normalidade da soluo ser a mdia aritmtica dos valores obtidos.

Soluo Oxalato de Sdio 0,05N, padro primrio; dissolver 3,350 g
de Na
2
C
2
O
4
, p.a., padro primrio, em gua destilada. Completar para 1000 mL em balo
volumtrico.

Soluo estoque de Nitrito, padronizada: dissolver 1,232 g de NaNO
2
,
p.a.,(que permaneceu em dessecador por 24 horas) em gua destilada. Diluir a 1000 mL em balo
volumtrico. manter o frasco bem fechado.

Padronizao:
Pipetar 50 mL de soluo de Permanganato de Potssio 0,05 N, 5 mL
de cido Sulfrico conc. e 50 mL de soluo-estoque de nitrito em um erlenmeyer de 250 mL,
tendo o cuidado de imergir a pipeta contendo nitrito no lquido.
Misturar e aquecer a 70 - 80
o
C em chapa eltrica.
Adicionar soluo de oxalato de sdio 0,05 N padro em pores de 10
ml, at desaparecer a cor do permanganato de potssio.
N
gNa C O
A B
KMnO4
2 2 4
0 06701
=
( ). ,
28
Titular o excesso de oxalato de sdio com soluo de permanganato de
potssio at o ponto final rosa claro.
Efetuar prova em branco com gua destilada.


onde:
B = volume total da soluo de permanganato de potssio 0,05N
padro empregada;
C = volume da soluo de permanganato de potssio empregada;
D = volume total da soluo de oxalato empregado;
E = normalidade da soluo de oxalato empregada;
V = volume de soluo-estoque de nitrito.


Soluo intermediria de Nitrito: diluir um volume



de soluo-estoque padronizada a 250 mL em balo volumtrico, com
gua destilada isenta de nitritos. 1,00 mL = 50 g NO
2
em N. Preparar diariamente e guardar em
geladeira.

Soluo Padro de Nitrito: diluir 10,00 mL da soluo intermediria de
nitrito a 1000 mL em balo volumtrico, com gua destilada. Preparar 2 litros 1,00 mL = 0,500
g NO
2
em N. Preparar diariamente.


IV - Interferentes

- Material em suspenso interfere, e removido por filtrao atravs de
membrana de 0,45 m.
- A cor interfere, e removida por tratamento com hidrxido de
alumnio.
- A alcalinidade interfere quando superior a 600 mg/L (600ppm). A
interferncia eliminada atravs do ajuste de pH.

- Oxidantes e redutores, em geral interferem.

V - Mtodo de Ensaio

- Se a amostra apresentar material em suspenso, filtrar 200 mL atravs
de filtro de 0,45 m, e utilizar 50 mL do filtrado ou um volume diludo a 50 mL;
- Se a amostra apresentar cor e turbidez clarificar pela adio de 2 mL
de hidrxido de alumnio a 100 mL de amostra, e filtrar por papel filtro. Desprezar a primeira
poro do filtrado;
- Numa proveta com tampa colocar 50 ml de amostra (ou amostra
filtrada, ou clarificada), ou volume menor diludo a 50 mL;
- Adicionar 1 mL de reagente de sulfanilamida;
- Esperar 2 a 8 minutos, adotar 5 min.;
- Adicionar 1 mL de dicloreto de N - (1-naftil) etilenodiamina;
- Entre 10 minutos e 2 horas aps a adio, fazer a leitura no
espectrofotmetro a 540 nm. Adotar 10 min.
- fazer o Branco, utilizando gua destilada e repetindo o procedimento
executado para a amostra. O Branco ser utilizado para zerar o espectrofotmetro.

mg / L NO em N =
[(BxC) - (DxE)]
V
2
V (mL) =
12,5
mg / L NO em N da solucao - estoque 2
29









VI - Construo da Curva de Calibrao

- Preparar solues-padro de vrias concentraes de nitrito, fazendo
diluies da soluo padro em balo volumtrico conforme a Tabela 1.
Tabela 1 Solues-padro para a curva de calibrao do nitrito.
Concentrao de NO
2
em N , mg/L Volume de soluo -padro a elevar a 1000 mL com
gua destilada isenta de nitritos, mL
0 (branco) 0
0,01 20
0,03 60
0,05 100
0,07 140
0,09 180
0,10 200



- Tratar cada uma destas solues-padro conforme tratamento da
amostra, empregando a soluo padro de concentrao 0 mgN/L em NO
2
para ajustar o
espectrofotmetro em absorbncia zero.
- Construir uma curva: Absorbncia x mgN/L em NO
2
, utilizando papel
milimetrado. A partir da curva-padro elaborar uma tabela (Absorbncia x mgN/L em NO
2
).
- A curva de calibrao vale para um determinado aparelho, e deve ser
feita nova curva cada vez que forem preparados ou utilizados novos reagentes ou for feita alguma
alterao no aparelho.


VII - Clculos

Leitura direta em mgN/L em NO
2
-
.




















30






5
A
. EXPERINCIA: DETERMINAO DE NITRATO EM GUAS
MTODO DO CIDO FENOLDISSULFNICO (Parte 2)
Curva Padro Inserida: DR 2000; Mtodo no. 952.

I - Introduo

O nitrato ocorre em quantidades pequenas em guas superficiais, e
pode atingir nveis elevados em guas subterrneas. Nas guas residurias em geral encontrado
pouco nitrato, exceo feita aos efluentes do tratamento biolgico, em que se encontra at 50
mg/L de nitrato. guas de abastecimento contendo quantidades excessivas de nitrato podem ser
causadoras de metahemoglobinemia nas crianas, por isso o limite estabelecido para nitratos
neste tipo de gua de 45 mg/L sob forma de NO
3
-
, ou 10 mg/L sob forma de nitrgenio.
Antes do desenvolvimento das nalises bacteriolgicas, as
determinaes das vrias formas de nitrognio eram feitas para verificar a qualidade sanitria das
guas, em conjunto com adeterminao de cloretos. Concentraes elevadas de nitrognio
orgnico e de amnia so indicativas de poluio recente, enquanto que concentrao elevada de
nitrato considera-se devida a poluio mais antiga.
O conhecimento da concentrao de nitratos, bem como das outras
formas de nitrognio, empregado na verificao do grau de oxidao em rios e esturios e na
avaliao dos nveis de purificao obtidos em processos biolgicos de tratamento.


II Tcnica de coleta e preservao

Tipo de frasco:
- Vidro, polietileno e polipropileno;

Volume necessrio:
- 300 mL;

Preservao da amostra:
- adicionar cido sulfrico concentrado at pH<2;
- usar pipeta;
- usar papel indicador de pH;
- refrigerar a 4
0
C.

Prazo para anlise:
- 24 horas.


III - Materiais, equipamentos e reagentes

- Baguetas de vidro;
- Cpsulas de porcelana de 100 mL;
- Provetas de 100 mL com tampa de p.p. ou bales volumtricos de 100
mL;
- Pipetas graduadas de 5 e 10 mL;
- Papel de filtro, Whatman ou similar, dimetro de 11 cm;
- Espectrofotmetro, para uso a 410 e a 480 nm.





31




Reagentes

Hidrxido de amnio, NH
4
OH, conc., p.a.

Suspenso de hidrxido de alumnio:
- Dissolver 125g de sulfato de alumnio e potssio, AlK(SO
4
)
2
. 12
H
2
O, p.a., ou sulfato de alumnio e amneo, AlNH
4
(SO
4
)
2
. 12 H
2
O p.a., em 1 litro de gua
destilada.
- Aquecer a 60
0
C e adicionar 55 ml de hidrxido de amneo conc.,
lentamente e com agitao. Deixar a mistura em repouso por 1 hora, transfer-la para um becker
de 2 litros, e lavar o precipitado vrias vezes por adio de gua destilada e decantao, at que
os testes indiquem ausncia de amnia, cloreto,nitrito e nitrato. Remover o mximo de
sobrenadante possvel, restando a soluo concentrada.

Soluo de hidrxido de sdio 1N: dissolver 40g de NaOH, p.a., em
gua destilada e diluir a 1 litro em balo volumtrico.

Soluo de cido sulfrico 1N: diluir 30 mL H
2
SO
4
, conc., p.a.,
densidade 1,84, a 1 litro com gua destilada.

Soluo padro de sulfato de prata: dissolver 4,40g Ag
2
SO
4
, p.a., em
gua destilada e diluir a 1000 mL em balo volumtrico.

Reagente cido fenoldissulfnico: dissolver 25g de fenol branco,
C
6
H
5
OH, p.a., em 150 mL de cido sulfrico conc.. Adicionar cuidadosamente 75 mL de cido
sulfrico fumegante (15% de SO
3
livre), misturar bem com uma bagueta de vidro e aquecer em
banho-maria durante 2 horas.

Soluo-estoque de nitrato: dissolver 721,8 mg nitrato de potssio
anidro, KNO
3
, p.a., em gua destilada e diluir a 1000 mL em balo volumtrico. A soluo assim
preparada contm 100 mg/L em N.

Soluo-padro de nitrato: diluir 20 mL da soluo-estoque de nitrato a
1000 mL com gua destilada, em balo volumtrico.

Soluo de permanganato de potssio 0,1N: dissolver 316 mg KMnO
4
,
p.a., em gua destilada e diluir a 100 mL.

Soluo perxido de hidrognio : elevar 10 mL de H
2
O
2
, 30% , p.a., a
100 mL com gua destilada.


IV - Interferentes

- A cor interfere quando superior a 10, e eliminada tratando a
amostra com suspenso de hidrxido de alumnio;
- Os nitritos interferem quando em concentrao superior a 0,2 mg/L,
so eliminados por oxidao por permanganato de potssio;
- Cloretos interferem quando em concentrao superior a 10 mg/L, sua
interferncia minimizada atravs da precipitao com sulfato de prata.






32



V Procedimento experimental

- Medir o volume de 100 mL de amostra em uma proveta.
- Adicionar 5 gotas de H
2
SO
4
1N;
- Juntar 1 mL de gua oxigenada;
- Neutralizar com 5 gotas de NaOH 1N;
- Transferir todo o volume para uma cpsula de porcelana, e evaporar
at secura em banho-maria;
- Adicionar sobre o resduo 2 mL de cido fenoldissulfonico atritar com
a bagueta , para misturar bem o resduo com o reagente e dissolver todo o resduo;
- Adicionar ento 10-20 mL de gua destilada e, com agitao e
lentamente, 6-7 mL de hidrxido de amnio
- Transferir todo o volume frio para uma proveta com tampa de p.p de
100 mL, filtranto se necessrio, diluir at a marca com gua destilada, tampar e misturar bem;
- Transferir a soluo para a cubeta e fazer a leitura no
espectrofotmetro a 410 nm ( para concentraes de at 2 mg/L) ou a 480 nm (para
concentraes de at 12 mg/L);
- Preparar prova em Branco, utilizando gua estilada em lugar da
amostra e utiliz-la para ajustar o aparelho em absorbncia zero.


VI - Construo da curva-padro

- Preparar solues-padro de vrias concentraes de nitratos, fazendo
diluies da soluo-padro em balo volumtrico, conforme a Tabela 01.
Tabela 01 - Solues-padro de vrias concentraes de nitratos.

Concentrao de N em NO
3

(mg/L)
Volume de soluo padro a elevar a 100 ml com
gua destilada
(ml)
0 (branco) 0
0,02 1,0
0,05 2,5
0,10 5,0
0,14 7,0
0,20 10,0
0,30 15,0
0,40 20,0
0,50 25,0
0,60 30,0
0,80 40,0
1,00 50,0

- Tratar os padres da mesma forma que a amostra, ajustando o
aparelho para absorbncia zero com a prova em branco.
- Construir uma curva Absorbncia x mgN/L em NO
3
, utilizando papel
milimetrado. A partir da curva-padro, elaborar uma tabela (Absorbncia x mg N /L em NO
3
).

VII - Clculos

Leitura direta em (mg N /L em NO
3
-
).





33

5
A
. EXPERINCIA: NITROGNIO AMONIACAL adaptado 4500 NH
3
. B (Standard
Methods) Parte 3

Curva Inserida DR-2000; Mtodo n 953

1 - Introduo:
A amostra tamponada em pH 9,5 com tampo de borato para reduzir a hidrlise de cianatos e de
compostos orgnicos de nitrognio, e permitir a evoluo total de amnia durante a destilao. Em seguida
destilada e recolhida em cido brico. A concentrao de amnia no destilado determinada por anlise
espectrofotomtrixa, aps nesslerizao.

2 Coleta de Amostras
- tipo de frasco: plstico ou vidro
- volume necessrio: 1000ml; e,
- preservao: cido sulfrico at pH<2,0 at 7 dias sob refrigerao a 4C.

3 Matrias Necessrios para o Ensaio
a) equipamento:
- medidor de pH;
- espectrofotmetro (420nm); e,
- conjunto para destilao de nitrognio para tubo micro/macro.
b) vidrarias
- tubo micro/macro;
- balo volumtrico de 100ml;
- balo volumtrico de 250ml;
- micropipetas de 0,1; 0,5; 1,0ml;
- pipeta graduada de 10ml;
- proveta de 50ml;
- erlenmeyer de 250ml;
- prolas de vidro,
- funil,
- pisseta.

c) reagentes
- tampo de borato: adicionar 88ml de soluo de NaOH 0,1N a 500ml da soluo de borato de sdio
0,025M (5g de Na
2
B
4
O
7
ou 9,5g de Na
2
B
4
O
7
. 10H2O a 1000ml de gua destilada) e diluir a 1000ml de gua
destilada;
- Raegente declorinizante: dissolver 3,5 g de tiossulfato de sdio (Na
2
S
2
O
3
5H
2
O) em gua destilada e
diluir a 1000 mL . Preparar semanalmente. Utilizar 1 mL do reagente para remover 1 mg/L de cloro residual em
500 mL da amostra;
- hidrxido de sdio 0,1N: dissolver 0,4 g de NaOH em gua destilada e completar a 1000ml;
- hidrxido de sdio 1N: dissolver 4 g de NaOH em gua destilada e completar a 1000ml;
- hidrxido de sdio 6N: dissolver 240 g de NaOH em gua destilada e completar a 1000ml;
- cido sulfrico 0,1N: diluir 3,0 ml de H
2
SO
4
em gua destilada e completar a 1000ml;
- cido brico (H
3
BO
3
): dissolver 20 g de H
3
BO
3
em 1000ml de gua destilada;
- reagente nessler (soluo desenvolvedora de cor):
I iodeto de potssio (KI): dissolver 61,75 g em 200 ml de gua destilada;
II hidrxido de potssio (KOH): dissolver 180 g em 250 ml de gua destilada;
III soluo saturada de cloreto de mercrio (HgCl
2
): ~ 30 g para 400 ml de gua destilada;
IV iodeto de potssio: pesar separado 0,75 g;
Adicionar (III) em (I) vagarosamente e com agitao at a precipitao do HgCl
2
vermelho intenso.
Dissolver o precipitado com (IV). Adicionar (II) quando frio e completar para 1000 ml com gua. Guardar em
frasco mbar.;
- Soluo estoque de amnia: cloreto de amnio (NH
4
Cl): depois de seco a 100 C por 2 h, dissolver
3,819 g e completar para 1000 ml de gua destilada; 1mL= 1g de amnia em N.
- soluo padro de amnia: diluir 10 ml da soluo estoque e completar para 1000 ml de gua
destilada, 1 mL= 10 g de amnia em N.
34
Preparar as solues padres para a obteno da curva de calibrao, conforme a Tabela 1.

Tabela 1 - Exemplo de obteno de curva padro (nitrognio amoniacal).
Concentrao (mg/L) Volume da soluo padro a completar
para 100 ml de gua destilada
*Absorbncia
0,0 0,0
0,3 3,0
0,5 5,0
1,0 10,0
5,0 50,0
8,0 80,0
10,0 100,0
* a obter no equipamento
Obs: se a concentrao amnia na amostra a ser analisada for maior do que 10 mg/L, dever haver
diluio prvia.

4 Procedimento Experimental

- colocar 100 ml da amostra no tubo macro contendo 3 prolas de vidro;
- ajustar o pH da amostra em 7,0, utilizando solues bsica (NaOH) ou cida (H
2
SO
4
), conforme o pH
inicial da amostra;
- remover o cloro se necessrio;
- adicionar 5 ml de tampo de borato e ajustar o pH para 9,5;
- acoplar o tubo macro ao conjunto de destilao de nitrognio, fazer a destilao recebendo o destilado
num erlenmeyer de 250 ml, contendo 50 ml da soluo de cido brico. A temperatura do condensador, do
conjunto, no dever ultrapassar 29 C. A ponta do condensador dever estar imersa na soluo de cido
brico para evitar a perda de amnia;
- interromper a destilao quando faltarem aproximadamente 10 ml para completar o volume de 250 ml;
- transferir o destilado para um balo volumtrico de 250 ml e completar o volume com gua destilada;
- agitar o balo, tomar 50 ml, neutralizar o pH e adicionar 10 ml do reagente nessler;
- aguardar 30 minutos e fazer a leitura no espectrofotmetro em 420 nm;

VII - Clculos

Leitura direta em (mg N /L em NH
3
).



QUESTES PARA SEREM RESPONDIDAS NO RELATRIO

1) Explique qual a importncia da anlise da Srie de Nitrognio para o Tratamento de
Esgotos.
2) Explique o fenmeno de nitrificao e desnitrificao.
3) Faa o esquema do ciclo do nitrognio, enfocando as variaes dos estados de
oxidaes das espcies qumicas.
4) Quais so os principais objetivos da anlise de nitrognio? Quais so os interferentes de
cada anlise?
5) Explique quais so as formas de nitrognio, enfocando as anlises efetuadas nesta
experincia.
6) Explique como se determina o nitrognio total Kjeldahl.
7) Escreva as equaes qumicas das diversas formas de nitrognio, variando os seus
estados de oxidao.


6
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO DE FSFORO TOTAL
Mtodo: cido Ascrbico

35
1 Introduo

Fosfatos so compostos que possuem o fsforo (P) em sua estrutura molecular. O fsforo ocorre em
guas naturais e em efluentes domsticos e industrias, quase exclusivamente na forma de fosfatos. Estes so
classificados como ortofosfatos, fosfatos condensados (piro-, meta- e outros polifosfatos) e fosfatos orgnicos.
As formas podem estar solubilizadas, em partculas, ou em corpos de organismos aquticos.
O fsforo, na gua, apresenta-se principalmente na forma de ortofosfatos, que esto diretamente
disponveis para o metabolismo biolgico sem necessidade de converses a formas mais simples. Dentre os
principais ortofosfatos tem-se: PO
4
2-
, HPO
4
2-
, H
2
PO
4
-
e H
3
PO
4
.
Os polifosfatos so molculas mais complexas, com dois ou mais tomos de fsforo. Os polifosfatos se
transformam em ortofosfatos pelo mecanismo de hidrlise, mas tal transformao usualmente lenta. Os
polifosfatos esto sempre presentes em despejos contendo detergentes sintticos.
O fsforo orgnico normalmente de menor importncia nos esgotos domsticos tpicos, mas pode ser
importante em guas residurias industriais e lodos provenientes do tratamento de esgotos. No tratamento de
esgotos e nos corpos dgua receptores, o fsforo orgnico convertido em ortofosfatos.
Quanto origem, os fosfatos presentes nas guas podem ser divididos em:
- Origem natural: devido dissoluo de compostos do solo, carregados pela chuva (lixiviao) e pela
decomposio de matria orgnica;
- Origem antropognica: devido aos despejos industriais e domsticos, aos detergentes, fertilizantes e
excrementos animais.
De acordo com o STANDARD METHODS (1995), pequenas quantidades de certos fosfatos
condensados so adicionadas a algumas guas de abastecimento durante seu tratamento. Grandes quantidades
desses compostos podem ser adicionadas quando a gua utilizada em lavanderias e outros tipos de limpeza,
porque esses materiais so os principais constituintes dos produtos comerciais de limpeza. Os ortofosfatos so
largamente empregados como fertilizantes comuns, e so carregados pelas enxurradas at os curso dgua.
Fosfatos orgnicos so formados primariamente nos processos biolgicos
Os esgotos domsticos so naturalmente ricos em fsforo, e a concentrao de fosfatos ultimamente
vem aumentando, dado o uso sempre crescente de detergentes sintticos, que contem fosfatos. Os organismos
envolvidos nos processos biolgicos de tratamento de despejos industriais e domsticos requerem fsforo para
reproduo e sntese. Esgotos domsticos contem fsforo em quantidade suficiente para a mineralizao da
matria orgnica, tanto que aparece em quantidades razoveis em efluentes de estaes de tratamento de
esgotos; j quando se trata de efluentes industriais, pode ser necessrio adicionar fosfato ao efluente a ser
biologicamente tratado. Alguns dos compostos utilizados para a adio de fsforo a efluentes industriais so:
Produtos Teor (Kg de P utilizvel por 100 Kg do produto bruto)
Superfosfatos simples 18
Superfosfato enriquecido 30
Superfosfato triplo 46
Fosfato de amnia 46
Outra possibilidade seria o cido fosfrico;
Fosfitos de Hipofosfitos so, em geral, txicos.
No tratamento biolgico, o fsforo e o nitrognio tm importante papel em relao matria orgnica
que se pretende remover. Assim, a relao DBO/N/P considerada muitas vezes como indicadora da velocidade
do tratamento biolgico. Tem sido adotada a relao 100/5/1 como sendo necessria para manter um balano
adequado de matria orgnica e nutrientes para o tratamento biolgico (100 mg/L de DBO, para 5 mg/L de
nitrognio, para 1 mg/L de fsforo).
O fsforo essencial ao crescimento dos organismos das guas superficiais, como por exemplo os
microrganismos do plncton, especialmente algas. Ele pode ser o nutriente que limita a produtividade destas
guas e, neste caso, o lanamento de despejos tratados ou no, ou o carreamento de fertilizantes para as guas
superficiais, pode estimular o desenvolvimento excessivo desses organismos.
Fosfatos acumulam-se ainda em sedimentos de fundo de guas e em lodos biolgicos, ambos como
formas inorgnicas precipitadas e incorporadas em compostos orgnicos.
O fsforo, na natureza, apesar de existir sempre com o mesmo estado de oxidao (+5), apresenta grande
diversidade de formas qumicas. um elemento imprescidvel para a vida. A matria viva contm
aproximadamente 2% de fsforo em peso seco. um fator limitante para o crescimento de algas em lagos,
reservatrios, etc. Age como nutriente, em tratamento biolgico de efluentes, precisando estar presente em
quantidade necessria para permitir o desenvolvimento de microrganismos responsveis pelo tratamento.
utilizado para o abrandamento de guas em indstrias, visto que os sais de fosfato de clcio e de ferro so muito
insolveis.
Os tripolifosfatos so usados na formulao de detergentes porque estabilizam as partculas de sujeira e
complexam o Ca e o Fe. Alguns detergentes contm at 13% de P.
36
A maior contribuio de fsforo para o meio ambiente ocorre atravs de esgoto domstico, que contm
em mdia, de 3 a 15mg/L de P, geralmente distribudo da seguinte maneira:
Ortofosfato: 50%
Tripolifosfato: 30%
Pirofosfato: 10%
P orgnico: < 10%
Outra fonte importante o escoamento agrcola, com 0,05 a 1,0 mg/L de P. Em geral as guas de lagos e
reservatrios apresentam concentraes de 0,01 a 0,04mg/L de P.
Definio de termos
A separao do fsforo dissolvido das formas suspensas feita atravs da filtrao em membrana de
0,45m. Deve-se desconsiderar o fato de que a filtrao feita atravs da membrana de 0,45 m no representa a
separao real das formas suspensas e dissolvidas de fsforo; ela meramente uma tcnica analtica conveniente
e de fcil repetio, utilizada para proporcionar uma separao grosseira.
Os fosfatos que respondem aos testes colorimtricos sem necessidade de hidrlise ou digesto oxidativa
preliminar da amostra so classificados como fsforo reativo. Enquanto o fsforo reativo , em grande
extenso, uma medida do ortofosfato, uma pequena poro do fosfato condensado usualmente presente
inevitavelmente hidrolisada durante o procedimento. O fsforo reativo ocorre tanto na forma dissolvida quanto
na suspensa.
A hidrolise cida, feita temperatura de gua fervente, converte os fosfatos condensados dissolvidos e
particulados em ortofosfato dissolvido. Essa hidrlise inevitavelmente libera algum fosfato a partir de
compostos orgnicos, mas isso pode ser minimizado atravs da seleo correta da fora do cido, do tempo de
hidrlise e da temperatura. Esses fosfatos so classificados como fsforo cido-hidrolisvel.
As fraes de fosfato que so convertidas a ortofosfatos apenas atravs da destruio por oxidao da
matria orgnica presente so consideradas fsforo orgnico. Assim como o fsforo reativo e o fsforo cido-
hidrolisvel, o fsforo orgnico ocorre nas fraes dissolvidas e suspensa.
Objetivos
A necessidade da determinao de fosfatos justificada pelos seguintes fatores:
1) A importncia do fsforo nos sistemas ecolgicos deve-se participao deste elemento em
processos fundamentais do metabolismo dos seres vivos, tais como: armazenamento de energia
(forma uma frao essencial da molcula de ATP) e estruturao da membrana celular (atravs dos
fosfolipdeos);
2) O fsforo um nutriente essencial para o crescimento dos microrganismos responsveis pela
estabilizao da matria orgnica. , portanto, essencial para o tratamento biolgico de despejos.
necessrio um balano adequado de DBO:N:P (100:5:1) no esgoto para o desenvolvimento dos
microrganismos. Usualmente os esgotos domsticos possuem um teor suficiente de fsforo, mas
este pode estar deficiente em certos despejos industriais.
3) O fsforo um elemento indispensvel para o crescimento de algas e, quando em elevadas
concentraes em lagos e represas, pode conduzir a um crescimento exagerado desses organismos
(eutrofizao). Assim sendo, o fsforo um dos mais importantes fatores limitantes vida dos
organismos aquticos e sua economia, em uma massa dgua, de importncia fundamental no
controle das algas.
II - Interferentes
- cor e turbidez elevada, embora minimizada com o uso de prova em
branco.
- cromo hexavalente e nitrito levam a resultados 3% mais baixos
quando presente em concentraes da ordem de 1mg/L e 10-15% mais baixos quando em
concentraes de 10mg/L.
- arsenatos devido a produo de cor azul, semelhante a produzida pelo
fsforo.



III - Tecnicas de Coleta
- tipo de frasco: vidro
lavar o frasco de colta com cido ntrico 1:1
- volume necessrio: 1000mL
- preservao da amostra: refrigerar a 4C.
- prazo para anlise: 48 horas


37
IV - Materiais e Reagentes

a) equipamentos
- bloco digestor;
-espectrofotmetro, comprimento de onda igual a 880 nm ou 700
nm;
- micropipetadores (0,1; 0,5 e 1,0 mL).

b) vidraria
- erlenmeyer;
- bequer;
- provetas;
- bales volumtricos;
- pipetas volumtricas;
- pipeta graduada;
- funil;
- prolas de vidro;
- tubo macro;
- pisseta.

c) reagentes
- cido sulfrico 5 N (sol. A);
- tartarato misto de antimnio e potssio hemihidratato: 1,3715 g de
K(SbO)C
4
H
4
O
6
.1/2H
2
O p/ 500 mL (sol. B);
- mobilidato de amnio: 20 g de (NH
4
)
6
Mo
7
O
24 .
4.H
2
O p/ 500ml
(Sol. C);
- cido ascrbico 0,01M, 1,76 g p/ 100 mL (Sol. D);
- soluo desenvolvedora de cor: misturar 50 mL sol. A + 5mL sol.
B + 15mL sol. C + 30mL sol. D. Esta soluo estvel por 4 horas;
- persulfato de amnio;
- hidrxido de sdio, NaOH, 1N,
- soluo fenolftalena,
- soluo estoque de fsforo: pesar 219,5 mg de KH
2
PO
4
anidro e
diluir para 1 L com gua destilada em balo volumtrico.


V - Procedimento Experimental

* LAVAR TODA VIDRARIA A SER USADA PARA
DETERMINAO DE P COM CIDO CLORDRICO 1:1.

a) Digesto da amostra
- pipetar 50 mL da amostra e transferir para um tubo macro;
- adicionar 1 mL de H
2
SO
4
conc.;
- adicionar 5 mL de HNO
3
;
- levar ao bloco digestor por 1 hora a 105 C (tempo
recomendado para a anlise, porm, na aula de laboratrio ser utilizado 30 min.);
- esfriar a temperatura ambiente;
- adicionar 3 gotas de fenolftalena e neutralizar com NaOH 1N;
- passar para um balo de 100 mL;
- medir 25 ml de amostra com uma pipeta, adicionar 8 mL da
soluo desenvolvedora de cor e fazer a leitura em espectrofotmetro a 880 nm ou em
espectrocolormetro a 700 nm num perodo compreendido entre 10 e 30 minutos (em aula
adotar 10 min.)
- dever ser efetuada uma prova em branco, com gua destilada
deionizada para diminuir erros e para zerar o equipamento.
b) preparao dos padres
Os dados obtidos da curva padro devero ser utilizados para
fazer o grfico na forma de concentrao versus absorbncia, conforme a Tabela 1.
38
Soluo estoque 50 mg/L (pesar 219,5mg de KH
2
PO
4
anidro
para 1000mL).
Tabela 1 Exemplo de curva de calibrao de solues-padro de fsforo.
Soluo Estoque
(mg/L)
Concentrao
Desejada (mg/L)
Alquota (mL) Volume do Balo
(mL)
Absorbncia
50 0,10 0,20 100 a obter
50 0,40 0,80 100
50 0,70 1,40 100
50 0,90 1,80 100
50 1,20 2,40 100
50 1,50 3,00 100

* Fazer clculo estatstico para verificar concordncia entre concentrao versus
absorbncia.

Construir uma curva de calibrao (absorbncia versus mg/L de P em PO
4
3
-,
utilizando-se papel milimetrado.

VI a - Clculos

mg/L de P = mgPO
4
3
- em P x V / Vam x1000

onde:
mgPO
4
em P obtido da curva-padro
V = volume usual de amostra, em mL
Vam = volume de amostra empregado, em mL.

O resultado expresso com 3 casas decimais.

VI b - Clculos

No Laboratrio de Saneamento, foi inserido a curva padro no
espectrofotmetro, portanto, o resultado da anlise j est diretamente em mgP/L em PO
4
3-
.

QUESTES PARA SEREM RESPONDIDAS NO RELATRIO

1) Explique qual a importncia da anlise de Fsforo para o Tratamento de Esgotos.
2) Explique quais so os interferentes desta anlise.
3) O que so fosfatos? Como o fsforo se apresenta na gua?
4) Explique qual a importncia do fsforo para o tratamento biolgico, qual a relao tem
sido adotada entre DBO/N/P para o tratamento biolgico?
5) Quais so os principais objetivos da anlise de fosfatos em efluentes ou esgotos?




REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

Apostila de Qumica Sanitria e Laboratrio de Saneamento II,
CESET/UNICAMP, Profa.Dra. Maria Aparecida C. de Medeiros e colaboradores, 2002.

CETESB, Companhia de Tecnologia e Saneamento Ambiental -
Normalizao Tcnica, NT 07 - Anlise Fsico-Qumica da gua, 1a. ed. So Paulo, 1978.

CETESB, Companhia de Tecnologia e Saneamento Ambiental - Guia de
Tcnico de Coleta e Preservao de Amostras, So Paulo, 1977.

39
AWWA - APHS - Standard Methods for The Examination of Water and
Wastewater, 20a. ed., New York, 1998.

AZEVEDO NETO, J. M. - Tcnica de Abastecimento e Tratamento de
gua, CETESB/ASCETESB, vol. 1 e 2, 1987.

BRANCO, S. M. - Hidrobiologia Aplicada Engenharia Sanitria, 2a.
ed. CETESB, So Paulo, 1978.

IMHOFF, K e IMHOFF, K. R. - Manual de Tratamento de guas
Residurias, 2a. ed. Editora Edgard Blucher Ltda., 1986.

NOUR, E. A. A., Procedimentos de Anlises Fsico-Qumicas e Exames
Microbiolgicos para guas de Abastecimento e Residurias, Apostila elaborada para a
disciplina EC-817 Laboratrio de Saneamento da FEC - UNICAMP, Campinas, 1995.

BRITO, I. R. C., ESCOLERA, O. A. N. e NASCIMENTO, R. A. Anlises
Fsico-Qumicas, Relatrio Final apresentado na disciplina de Ps-Graduao da FEC-
UNICAMP , 2o. semestre 1993.

VON SPERLING, M. (1996a). Introduo Qualidade das guas e ao
Tratamento de Esgotos. Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental da Escola de
Engenharia da UFMG, Belo Horizonte, 243p.

VON SPERLING, M. (1996b). Princpios Bsicos do Tratamento de
Esgotos. Departamento de Engenharia Sanitria e Ambiental da Escola de Engenharia da
UFMG, Belo Horizonte, 243p.


















ANEXOS
ANEXO A - 1
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO DA DEMANDA QUMICA
DO OXIGNIO (DQO)

- Mtodo do Refluxo com Dicromato em balo de fundo chato, titulando a amostra
com SFA na presena do indicador ferroin (Standard Methods 5220B)
(Este mtodo no ser utilizado na aula de laboratrio)

I Introduo

Idem Ao - Mtodo Colorimtrico: DR2000 Curva Padro Inserida no. 955
40

II - Metodologia

O mtodo de refluxo do dicromato, trata-se de uma reao de oxidao da matria orgnica e
inorgnica da amostra por uma quantidade conhecida de dicromato de potssio em meio fortemente cido e
elevada temperatura na presena de um catalisador (o sulfato de prata) e sulfato de mercrio como inibidor
de cloretos. usado o dicromato de potssio (cromo na forma de Cr
6+
) devido a sua forte capacidade
oxidante, facilidade de manipulao e aplicabilidade, alm de ser um padro primrio. A utilizao de um
catalisador, como o sulfato de prata, necessria para tornar possvel a oxidao de compostos alifticos de
cadeia reta.
Aps a oxidao da matria orgnica presente, o excesso de dicromato titulado com sulfato ferroso
amoniacal. A quantidade de matria orgnica oxidada medida como equivalente de oxignio, proporcional a
quantidade de dicromato de potssio consumida.
As reaes envolvidas so:

oxidao da matria orgnica:

catalisador
3 CH
2
O + 2 Cr
2
O
7
2-
+ 16 H
+
3 CO
2
+ 11 H
2
O + 4 Cr
3+
calor
alaranjado azul-esverdeado


Titulao do excesso de dicromato:

Cr
2
O
7
2-
+ 6 Fe
2+
+ 14 H
+
2 Cr
3+
+6 Fe
3+
7 H
2
O

azul-esverdeado marrom-avermelhado

Existem variaes do mtodo de acordo com a DQO, assim para amostras com DQO maior que 50
mg/l utiliza-se oxidao por dicromato de potssio, aplicando-se em geral, para guas poludas, efluentes
industriais e domsticos. Para DQO baixas, utiliza-se tambm o procedimento da oxidao por dicromato
de potssio com duas excees: usa-se o padro K
2
Cr
2
O
7
0,025 N. Este procedimento aplicado para guas
brutas, de rios, represas e mananciais com baixos valores de concentrao de poluio, e a efluentes cuja
DQO da ordem de 5 - 50 mg/l.

III - Interferentes

As principais interferncias no mtodo so:
- traos de matria orgnica existentes na vidraria, os quais so eliminados
efetuando-se prova em branco;
- o sulfato de prata, utilizado como catalisador, pode reagir com cloretos,
brometos, e iodetos produzindo precipitados diminuindo a sua ao cataltica. Para evitar a interferncia
principalmente de cloretos utiliza-se sulfato de mercrio. A presena de cloretos s comea a ser prejudicial
acima de 2000 mg/l.

IV - Amostragem

As amostras para esta anlise devem estar bem homogneas, principalmente aquelas que contenham
muito slidos sedimentveis, como o caso dos esgotos, tornando necessrio uma cuidadosa homogeneizao
antes de se tomar a alquota adequada para anlise. Desta forma devem ser observados os seguintes tens:

- Tipo de frasco: polietileno, polipropileno ou vidro
- Volume necessrio: 200 ml
- Preservao da amostra: adiciona-se cido sulfrico concentrado at pH s
2, e refrigerao 4C
- Prazo de anlise: 7 dias


41
V - Materiais e equipamentos

a) equipamentos:

- Condensador tipo Friedrich, 24/40
- Balo de fundo chato de 250 ou 500 ml, 24/40
- Chapa aquecedora
- Bales volumtricos
- Pipetas volumtricas
- Bureta de 25 ml, com divises de 0,1 ml
- Prolas de vidro

b) reagentes

- cido sulfrico concentrado - sulfato de prata: dissolver 10,13 g de sulfato
de prata (Ag
2
SO
4
) em 1 litro de cido sulfrico concentrado. A dissoluo completa do sulfato de
prata demora cerca de 24 horas, por isso se deve estar sempre atento necessidade de se fazer nova
soluo.

- soluo de dicromato de potssio 0,25 N: dissolver 12,259 g de dicromato
de potssio (K
2
Cr
2
O
7
), previamente seco em estufa a 103C por 2 horas, em 500 ml de gua destilada
e completar o volume em balo volumtrico de 1 litro.

- indicador de ferroin: dissolver 1,485 g de 1,10 - fenantrolina
monohidratada (C
12
H
6
N
2
.H
2
O), juntamente com 0,695g de sulfato de ferro (FeSO
4
.7H
2
O) em 50 ml
de gua destilada e diluir para 100 ml em balo volumtrico.

- soluo de sulfato ferroso amoniacal (SFA) 0,25 N: dissolver 98 g de
sulfato ferroso amoniacal, FeSO
4
(NH
4
)
2
SO
4
.6H
2
O, em gua destilada. Adicionar 20 ml de cido
sulfrico concentrado, deixar esfriar e completar o volume para 1 litro em balo volumtrico. Esta
soluo deve ser padronizada sempre que for utilizada.

Padronizao do SFA: pipetar, com pipeta volumtrica, 5 ml de soluo de
dicromato de potssio 0,25 N em 100 ml de gua destilada, acrescentando, com agitao, 15 ml de
cido sulfrico concentrado. Deixar esfriar e titular com a soluo de SFA preparada, utilizando o
indicador de ferroin. A mudana para a cor castanha indica o final da titulao. A normalidade correta
da soluo de SFA calculada por:



- soluo padro de Biftalato de potssio: de uma quantidade de Bifatalato
de potssio, HOOCC
6
H
4
COOK, seca a 120 C por 2 horas, pesar 425,0 mg e dissolver em
aproximadamente 500 ml de gua destilada e ento completar o volume para 1000 ml em balo
volumtrico. Cada ml desta soluo corresponde a 500 mg O
2
/L. Esta soluo estvel por at 3
meses quando guardada sob refrigerao.

- sulfato de mercrio: (HgSO
4
)

- cido sulfrico concentrado

VI - Procedimento experimental

a) Determinao da DQO de uma amostra:
1 - No balo de fundo chato, coloca-se 20 ml da amostra, ou uma poro
diluda, aproximadamente 0,4g de sulfato de mercrio e 10 ml de soluo de dicromato de potssio.
Ambos os volumes devem ser transferidos utilizando-se pipetas volumtricas;

2 - Cuidadosamente, acrescentar 30 ml de cido sulfrico-sulfato de prata,
sempre agitando o balo. Colocar algumas prolas de vidro. Fazer um branco, utilizando ao invs da
amostra, 20 ml de gua destilada;
42
3 - Colocar os bales nas chapas aquecedoras, conectando-os aos
condensadores. Deixar em refluxo por 2 horas, contadas a partir do incio da fervura;
4 - Aps completada as 2 horas, desligue as chapas. Aproximadamente 15
min, aps cessada a ebulio, lavar os condensadores com gua destilada. Colocar os bales em banho
de gelo at que atinjam a temperatura ambiente;
5 - Retire os bales dos condensadores e adicione em cada um 100 ml de
gua destilada;
6 - Com SFA j padronizado, realiza-se a titulao da amostra e do branco.
O indicador de ferroin s deve ser colocado momentos antes da titulao. O ponto final uma
mudana de cor de azul-esverdeado para marrom-avermelhado, apesar de que o azul-esverdeado
possa reaparecer dentro de minutos.

b) Padronizao do Mtodo:
Em algumas ocasies a calibrao de um mtodo se faz necessrio,
principalmente quando se coloca em dvida a confiabilidade dos reagentes, equipamentos envolvidos
e at mesmo dos executores da anlise. Assim para a anlise de DQO utiliza-se uma soluo de
biftalato de potssio como composto padro, a qual possui um valor de DQO igual a 500 mg O
2
/l.
Para tanto utiliza-se o mesmo procedimento descrito no tem A.

VII - Clculos

O valor da DQO para amostra analisada calculado da seguinte forma:


onde:
A = volume da soluo de SFA utilizada na titulao do branco, em ml
B = volume da soluo de SFA utilizada na titulao da amostra, em ml
C = normalidade da soluo de SFA (padronizada)
F = fator de diluio da amostra














ANEXO B - 2
a
. EXPERINCIA: DETERMINAO DO OXIGNIO
DISSOLVIDO E DA DBO
5

OXIGNIO DISSOLVIDO
MTODO DE WINKLER
(Este mtodo no ser utilizado na aula de laboratrio)

I - Introduo

O oxignio uma espcie qumica de importncia vital na gua, assim
como no ar atmosfrico (20,95 %, em volume de ar seco). As reaes qumicas e fotoqumicas
do oxignio na atmosfera so essenciais para o equilbrio e preservao das espcies na Terra.
Na gua o oxignio consumido rapidamente pela oxidao da matria
orgnica (CH
2
O):
DQO mg O l
A B x C x
x F ( / )
( )



2
8000
20
=

43
microorganismos
CH
2
O + O
2
CO
2
+ H
2
O

As solubilidades dos gases na gua so calculadas com a lei de Henry,
a qual estabelece que a solubilidade de um gs em um lquido proporcional presso parcial do
gs em contato com o lquido. Matematicamente, a lei de Henry expressa como:

[X(aq)] = K P
X

onde [X(aq)] a concentrao do gs (X), P
X
a presso
parcial do gs, e K a constante de Henry aplicvel para um gs particular na temperatura
especificada. Para concentraes de gases em moles por litro e presso do gs em atmosferas, as
unidades de K so mol x L
-1
x atm
-1
. A constante K para o oxignio dissolvido em gua, a 25
C (KO
2
= 1,28x10
-3
mol x L
-1
x atm
-1
).

A solubilidade do oxignio na gua depende da temperatura da gua, da
presso parcial do oxignio, na atmosfera o contedo de sais da gua. Atravs da lei de Henry, tem-
se que o clculo da concentrao de oxignio dissolvido em gua a 25 C em equilbrio com o ar na
presso atmosfrica apenas 8,32 mg/L. Portanto, se processos que consomem oxignio na gua
esto ocorrendo (por exemplo, oxidao de poluentes orgnicos), o nvel de oxignio dissolvido na
gua se aproximar de zero a menos que algum mecanismo eficiente de aerao da gua seja operado,
tal como um fluxo de ar turbulento, atravs de bombeamento. Este fenmeno de depleo da
concentrao de oxignio na gua tem causado a morte de peixes e outras espcies aquticas.

A aerao um processo de tratamento de gua. O oxignio
introduzido no interior da gua como o primeiro passo para remover o ferro ou mangans, antes
da filtrao. A areao tambm diminui os gases dissolvidos, como dixido de carbono e gs
sulfdrico, a nveis tratveis, em certas guas de reservatrios. A aerao tambm usada como
tratamento secundrio de esgotos no processo de lodos ativados.
O gosto e o odor da gua de alguns reservatrios melhoram tambm
com a aerao.
A gua em contato com o ar fica geralmente saturada com o oxignio, a
temperatura ambiente, por outro lado a gua que foi isolada do contato com o ar (guas
profundas) como as de poo ou de lagoas estratificadas contm pouco ou nenhum oxignio
dissolvido (OD). O contedo OD pode ser acrescido pelo oxignio produzido por plantas
aquticas durcnte a fotossntese. Um decrscimo no OD da gua superficial pode ocorrer quando
a temperatura das guas se eleva, de acordo com a equao de Clausius-Clapeyron, ou quando a
concentrao de poluentes aumenta.





II) Metodologia de determinao do oxignio dissolvido

a) Mtodo iodomtrico ou de Winkler
Este mtodo, conhecido tambm como mtodo de Winkler modificado
pela azida sdica, um preciso e seguro procedimento titulomtrico para anlise de OD. O
mtodo consiste da adio inicial de sulfato manganoso e, em seguida iodeto de potssio em
meio fortemente alcalino de hidrxido de potssio. O sulfato manganoso reage com hidrxido de
sdio para produzir um precipitado floculento branco de hidrxido manganoso, de acordo com a
reao:

MnSO
4
+ 2 KOH Mn (OH)
2
+ K
2
SO
4

O precipitado de hidrxido manganoso disperso uniformemente na
amostra por agitao do frasco fechado, e o oxignio dissolvido oxida rapidamente uma
quantidade de hidrxido de mangans bivalente para outro hidrxido onde o estado de valncia
do mangans +2, de colorao marrom:
44

2 Mn (OH)
2
+ O
2
2 MnO (OH)
2


Em seguida adiciona-se H
2
SO
4
, que solubiliza o precipitado, formando
sulfato mangnico:

MnO (OH)
2
+ 2 H
2
SO
4
Mn (SO
4
)
2
+ 3 H
2
O

O sulfato mangnico formado, libera iodo, I
2
, na reao com o iodeto
presente no reativo azida alcalino de iodeto de potssio:

Mn (SO
4
)
2
+ 2 KI MnSO
4
+ K
2
SO
4
+ I
2


O iodo formado titulado com tiossulfato de sdio padro,
empregando-se uma soluo de amido como indicador:

I
2
+ 2 Na
2
S
2
O
3
2 NaI + Na
2
S
4
O
6




O iodo estequiometricamente equivalente ao oxignio dissolvido na
amostra:

4 Na
2
S
2
O
3
= 2 Mn (SO
4
)
2
= 2 MnO (OH)
2
= O
2


III - Interferentes

As principais fontes de interferncias na determinao do valor do OD
so as seguintes:
- concentraes de nitrito acima de 50 mg/l no causam interferncia
quando se usa o mtodo modificado da azida sdica;
- concentraes de on frrico acima de 100 a 200 mg/l no causam
interferncia quando se usa uma soluo de fluoreto de potssio, KF;
- presena de luz (produo de O
2
pelas algas);
- pH, devendo estar na faixa de 6,8 a 7,3;



IV - Tcnica de coleta e preservao

Tipo de frasco:
- vidro neutro, boca estreita, tampa esmerilhada, volume aproximado
300 ml, com selo dgua, sem head space.

Volume necessrio para anlise:
- o do frasco cheio

Preparao da amostra:
- adicionar amostra coletada 2 ml de soluo de sulfato manganoso e
2 ml de reagente alcali-iodeto azida, tendo o cuidado de imergir a ponta da pipeta no lquido do
frasco.
- fechar bem, sem deixar bolhas de ar no interior e agitar.
- deixar o precipitado decantar at aproximadamente a metade do
volume e agitar novamente.

Prazo para anlise:
- 4 - 8 horas, aps a coleta e preservao.


V - Materiais, equipamentos e reagentes
45

- Bureta de 25 ml
- Balo volumtrico
- Pipetas graduadas e volumtricas
- Erlenmeyer
- Frasco de DBO de 300 ml

REAGENTES:

Soluo de Sulfato Manganoso
Dissolver 480 g de MnSO
4
.4H
2
O ou 364 g de MnSO
4
.H
2
O, em gua
destilada, filtrar e diluir para 1000 mL.

Soluo de Alcali-Iodeto Azida
Dissolver 500 g de NaOH (ou 700 g de KOH) e 135 g de NaI (ou 150 g
de KI) em gua destilada e diluir para 1000.mL.
Na soluo adicionar 10g de Azida sdica (NaN
3
), dissolvidos em 40
ml de gua destilada. Sais de Potssio e Sdio podem ser indiferentemente usados. Estes
reagentes no devem dar colorao com a soluo de amido, quando diludo e acidificado. Esta
soluo deve ser preparada em banho de gelo.

cido Sulfrico concentrado p.a.
A concentrao do cido de 36. Por esta razo 1 ml equivalente a
cerca de 3 ml de reagente alcali-iodeto azida.

Soluo de Amido:
Preparar uma emulso de 6 g de amido de batata, ou 5 g de amido
solvel, num almofariz ou num becker com uma pequena quantidade de gua destilada. Colocar
essa emulso em 1 litro de gua fervente, deixar por alguns minutos ferver e deixar em repouso
por toda a noite, coberto. Usar o sobrenadante da soluo. Esta soluo deve ser conservada com
1,25 g de cido Saliclico para cada 1000 ml, ou pela adio de algumas gotas de Tolueno.
Conservar em geladeira.
Soluo estoque de Tiossulfato de Sdio 0,1 N:
Dissolver 24,82 g de Tiossulfato de Sdio penta Hidratado em gua
destilada fervida e resfriada e diluir para 1000 mL. Esta soluo conservada pela adio de 5 ml
de clorofrmio ou 1,0g de NaOH por litro.

Soluo Padro de Tiossulfato de Sdio 0,025 N:
Esta soluo pode ser preparada das seguintes maneiras:
a) diluindo 250 ml da soluo estoque de tiossulfato 0,1 N a 1000 ml de
gua destilada.
b) dissolvendo 6,205 g de Na
2
S
2
O
3
.5H
2
O em gua destilada
recentemente fervida e resfriada e diluir para 1000 ml. Esta soluo padro pode ser conservada
pela adio de 5 ml de Clorofrmio ou 0,4 g de NaOH por litro. Esta soluo contm exatamente
0,02 mg de OD por ml.

Soluo Padro de Dicromato de Potssio 0,025 N:
Dissolver 1,226 g de K
2
Cr
2
O
7
, previamente seco em estufa 103C por
duas horas, em 1000 ml de gua destilada.

Padronizao do Tiossulfato de Sdio 0,025 N:
- Diluir 2 g de NaI em 100 ml de gua destilada, em um Erlenmeyer.
- Adicionar 10 ml de cido Sulfrico 1:9 ou 1 ml de cido Sulfrico
concentrado.
- Adicionar 5 ml da Soluo Padro de Dicromato de Potssio 0,025 N.
- Tampar o frasco e deix-lo em local escuro por 5 minutos.
- Adicionar 1 ml da Soluo de Amido.
- Titular com soluo de Tiossulfato de Sdio 0,025 N.
- Preservar com 0,4 g de NaOH p.a. por litro, guardar em frasco escuro.

46


Procedimento para a determinao do OD

a) Mtodo de Winkler
1 - Colocar a amostra em frasco de DBO, enchendo-o at a borda
sempre com o cuidado de no formar bolhas. Tampe-o logo em seguida;
2- Adicionar 2 ml de soluo de sulfato de mangans, com pipeta
graduada imersa dentro do frasco;
3 - Com a mesma tcnica, adicione 2 ml de soluo de azida sdica;
4 - Tampe o frasco e agite por inverses sucessivas at o
homogeneizao total;
5 - Deixe precipitado formado, se existir O
2
presente ser castanho,
atingir a metade do frasco e em seguida adicione 2 ml de cido sulfrico concentrado. Tampar o
frasco e agit-lo at a completa dissoluo do precipitado;
6 - Transferir 100 ml do contedo do frasco para um Erlenmeyer de
250 ml, atravs de uma pipeta volumtrica;
7 - Adicionar 1 a 2 ml de soluo indicadora de amido e titular
imediatamente com a soluo de tiossulfato de sdio padronizada. O ponto final da titulao
dado pelo primeiro desaparecimento da cor azul caracterstica.

V - Clculos



onde: V
1
= ml da soluo de Tiossulfato de Sdio usado na Titulao
N = normalidade do Tiossulfato de Sdio
V
2
= volume da amostra utilizada, em ml






ANEXO C - NITROGNIO TOTAL KJELDAHL; (Standard: adaptado 4500 ORG.B)
(Este mtodo no ser utilizado na aula de laboratrio)


Introduo
O nitrognio orgnico e a amnia podem ser determinados juntos e so referidos como
Nitrognio de Kjeldahl, o termo que reflete a tcnica usada para suas determinaes. Nitrognio
orgnico inclui matria natural (protenas, peptdios, cidos nuclicos, uria) e numerosos
compostos orgnicos sintticos.
A fonte de nitrognio orgnico o material produzido aps a hidrlise qumica: aminocidos,
acares aminados, aminas e peptdios, como tambm o material proveniente da endogenia dos
microrganismos.

Metodologia
O nitrognio da amostra convertido em sulfato de amnio, sem prvia remoo da amnia,
por digesto (bloco digestor Kjeldahl) com acido sulfrico, sulfato de potssio e sulfato de mercrio. O
material em seguida tratado com tiossulfato de sdio em meio alcalino e a amnia restante
destilada (conjunto de destilao de nitrognio, tubo micro/macro) e recolhida em cido brico, tendo
sua concentrao determinada em espectrofotmetro atravs de curva-padro.

Coleta da Amostra: Idem a metodologia convencional/amoniacal
N Tiossulfato
x
VT
=
0 025 5 ,
mg l de OD
V xNx
V
/ =
1
2
8000
47
Material Necessrio p/ o Ensaio:
a) equipamentos:
1) medidor de pH;
2) espectrofotmetro (420nm);
3) balana analtica;
4) bloco digestor Kjeldahl com controlador de temperatura para tubo micro/macro; e,
5) conjunto para destilao de nitrognio para tubo micro/macro.
b) vidrarias:
6) tubo micro/macro;
7) bales volumtricos de 100 e 250ml;
8) micropipetas de 0,1 0,5 1,0ml;
9) pipeta graduada de 10ml;
10) proveta de 50ml;
11) erlenmeyer de 250ml;
12) prolas de vidro
c) reagentes:
13) cido sulfrico concentrado (H
2
SO
4
);
14) sulfato de potssio (K
2
SO
4
);
15) cido sulfrico 6N, diluir 167 mL de H
2
SO
4
concentrado em 1000 mL de gua destilada;
16) sulfato mercrio (soluo): dissolver 2g de xido de mercrio vermelho (HgO) em 25ml de
cido sulfrico 6N;
17) fenolftalena;
18) hidrxido tiossulfato (soluo): dissolver 500g de hidrxido de sdio (NaOH) e 25g de
tiossulfato de sdio (Na
2
S
2
O
3
.5H
2
O) em 100ml de gua destilada. Geralmente usa-se 5ml para
cada 1ml de cido sulfrico usado na digesto;
19) cido brico (H
3
BO
3
): dissolver 20g em 1000ml de gua destilada
20) hidrxido de sdio 6N: dissolver 240g de NaOH em gua destilada e completar a 1000ml;
21) reagente nessler (soluo desenvolvedora de cor):
I iodeto de potssio (KI): dissolver 61,75g em 200ml de gua destilada;
II hidrxido de potssio (KOH): dissolver 180g em 250ml de gua destilada;
III soluo saturada de cloreto mercrio (HgCl
2
): ~ 30g p/ 400ml de gua destilada;
IV iodeto de potssio: pesar separado 0,75g;
Adicionar (III) em (I) vagarosamente e com agitao at a precipitao do HgCl
2
vermelho
intenso. Dissolver o precipitado com (IV). Adicionar (II) quando frio e completar para 1000ml
com gua. Guardar em frasco mbar;
22) soluo estoque de amnia; cloreto de amnia (NH
4
Cl), depois de seco a 100 C por duas
horas, dissolver 3,1819g de NH
4
Cl e completar p/ 1000ml de gua destilada, 1 mL= 1 mg de
NH
3
em N.
23) soluo padro de amnia: diluir 10ml da soluo estoque e completar para 1000ml de gua
destilada.
Para preparar as solues padres para a obteno da curva de calibrao, ver a Tabela 1.


Tabela 1 - Exemplo de obteno de curva padro de nitrognio total Kjeldahl.
Concentrao (mg/L) Volume da soluo padro a
completar p/ 100ml de H
2
O dest
* Absorbncia
0,0 0,0 0,000
0,3 3,0 0,112
1,0 10,0 0,169
3,0 30,0 0,477
6,0 60,0 0,948
* a obter no espectrofotmetro. A cada troca de reagente ou qualquer mudana de procedimento, nova curva dever ser
inserida. Se a concentrao de Nitrognio total Kjeldahl da amostra a ser analisada for maior do que 6,0 mg/L, dever haver
diluio prvia.

48
Procedimento Experimental:
1) ajustar o pH da amostra p/ 7,0;
2) colocar 100ml da amostra no tubo macro contendo 3 prolas de vidro;
3) adicionar 2ml de cido sulfrico concentrado, 1,34g de sulfato de potssio e 0,3ml de soluo
de sulfato de mercrio;
4) misturar, colocar o tubo no bloco digestor Kjeldahl e aquecer, aumentando a temperatura do
bloco gradativamente at a formao de fumos brancos (a amostra deve ficar incolor ou
amarelada e a temperatura chega at 350C). A temperatura dever ser aumentada
vagarosamente para evitar espirros de amostra para fora do tubo ou a quebra do mesmo;
5) digerir a amostra por mais 30 min. Tomar cuidado p/ no deixar secar a amostra no tubo;
6) deixar esfriar, transferir a amostra digerida para um balo volumtrico de 100ml e completar
com gua destilada;
7) adicionar 3 gotas de fenolftalena e agitar o balo;
8) voltar a amostra ao tubo macro j contendo 10ml do reagente hidrxido tiossulfato e se a
soluo no ficar rsea acrescentar mais hidrxido tiossulfato;
9) acoplar o tubo macro ao conjunto de destilao de nitrognio, fazer a destilao recebendo
portanto, o destilado num erlenmeyer de 250ml, contendo 50ml da soluo de cido brico. A
temperatura do condensador, do conjunto, no dever ultrapassar 29C. A ponta do
condensador dever estar imersa na soluo de cido brico para evitar a perda de amnia;
10) interromper a destilao quando faltarem aproximadamente 10ml p/ completar o volume de
250ml;
11) transferir o destilado p/ um balo volumtrico de 250ml e completar o volume com gua
destilada;
12) agitar o balo, tomar 50ml, neutralizar o pH e adicionar 2ml do reagente nessler;
13) aguardar 30 e fazer a leitura no espectrofotmetro em 420nm.

A Figura 1 apresenta o grfico e a regresso linear para a determinao do Nitrognio Total
Kjeldahl


Figura 1 - Curva de Calibrao de Nitrognio Total Kjeldahl em N.