UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAN CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA V- CILO MTODO DE CONCENTRACIN POR FLOTACIN EN SOLUSION DE AZUCAR
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I. INTRODUCCION
Las parasitosis intestinales pueden sospecharse por la presencia de sintomatologa y datos epidemiolgicos, pero la nica forma de confirmar el diagnstico es la demostracin del parsito en cualquiera de sus formas evolutivas: diagnstico parasitolgico. Este se fundamenta en el conocimiento de la biologa del parsito: hbitat, ciclo evolutivo, lo que permite tomar la muestra biolgica y la tcnica de laboratorio adecuada. El examen parasitolgico de las heces: coproparasitologa, tiene como objetivo diagnosticar los parsitos intestinales. Se han descrito muchas tcnicas de examen de heces, algunas de ellas son de utilidad general, mientras que otras slo sirven en casos muy concretos, de modo que se elige la ms adecuada para un determinado tipo de muestra o para la deteccin de un determinado parsito. La consistencia de una muestra de heces es de gran importancia, indicando el tipo de organismo que puede contener. Ha de examinarse toda la superficie de la muestra en busca de parsitos macroscpicos, utilizando el mtodo de concentracin por flotacin en solucin de azcar. Con frecuencia pueden verse los oxiuros en la superficie de la muestra de heces, del mismo modo que las progltides. El examen inmediato de las heces completamente formes no es tan importante, pero han de mantenerse refrigeradas. La efectividad de la tcnica depende de varios factores: sensibilidad, especificidad, calidad de los equipos y reactivos utilizados, adecuada ejecucin y experiencia del operador.
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II. OBJETIVOS
2.1. Objetivo general - Se espera que el estudiante conozca y aplique la tcnica de flotacin para concentrar ooquistes y otros parasitos.
2.2. Objetivo especfico - Identificar los distintos parasitos por medio de la diferenciacin en la estructura de cada uno de ellos.
III. MARCO TERICO
Giardia lamblia (conocida tambin como Giardia duodenalis o Giardia intestinalis) es un protozoo flagelado causal de la giardiosis y el nico protozoo patgeno que aparece a menudo en el duodeno y en el yeyuno de los seres humanos. Giardia existe en dos formas: el trofozoto y el quiste. El primero es un microorganismo en forma de corazn, con cuatro pares de flagelos y tiene 15 m, aproximadamente, de longitud. El gran disco cncavo para succin en la cara ventral hace que el microorganismo se adhiera fcilmente a las vellosidades intestinales. Al pasar los parsitos al colon, de manera tpica se enquistan apareciendo en las heces. stos son elpticos, de pared gruesa, muy resistente y de 8 a 14 m de longitud; las formas inmaduras contienen dos ncleos y los quistes maduros cuatro. El parsito Giardias es capaz de causar infeccin del intestino delgado provocando malestares de este. El parsito vive en el suelo, los alimentos y el agua. Tambin puede encontrarse en superficies que hayan estado en contacto con desechos animales o humanos. Usted puede resultar infectado si: - Est expuesto a un miembro de la familia con giardiasis. - Toma agua de lagos o arroyos donde animales, como los castores y ratas almizcleras, o animales domsticos, como las ovejas, han dejado sus desechos. - Ingiere alimentos crudos o mal cocidos que hayan estado contaminados. - Tiene contacto directo de persona a persona en guarderas, clnicas de convalecencia o asilos de ancianos. - Tiene sexo anal sin proteccin.
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Los viajeros estn en riesgo de contraer giardiasis en todo el mundo. Los excursionistas y caminantes estn en riesgo si beben aguas no tratadas provenientes de arroyos y lagos.
IV. MATERIALES
4.1. Materiales Biolgicos: - Muestras de heces
4.2. Materiales de Laboratorio: - Lminas y Laminillas - Tubos de ensayo 13 x 100 - Baja lenguas - Solucin saturada de azcar - Asa en anillo - Gradilla - Embudo - gasa
4.3. Reactivos: - Solucin salina fisiolgica
V. METODO Mtodo de concentracin por flotacin en solucin de azcar.
VI. PROCEDIMIENTOS
Homogenizar 1 a 2 gr. De materia fecal en suero fisiolgico. Colocar un embudo de vidrio con una gasa doblada en la abertura del tubo de ensayo y filtrar el material homogenizando. Centrifugar el tubo con el material homogenizado a 1 500 r.p.m. durante 2 a 5 minutos. Eliminar el sobrenadante, y agregar la solucin de azcar hasta un centmetro del borde del tubo, agitar hasta disolver el sedimento, centrifugar como en el paso anterior, completar con la solucin de azcar hasta el borde y esperar de 2 a 5 minutos la formacin de un menisco. Con la ayuda del asa de platino, tomar una muestra de la superficie del medio y colocarla en una lmina portaobjeto, agregar el lugol, cubrir con una laminilla y observar al microscopio. Observacin: esta tcnica es apropiada para la observacin y registro de ooquistes de isospora, Cryptosporidium, cyclospora y sarcocystis
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VII. RESULTADOS El resultado se dar de acuerdo a lo observado en las distintas formas.
A. MUESTRA DE HECES HUMANAS
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Parasitologa clnica de Antonio Atias. Tercera edicin. Prescott, Lansing M., Harley, John P., Klein, Donald, Microbiologa, Editorial McGraw-Hill, 5 Edicin, Espaa, 2004, Pg. 595 http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D- 92862.pdf
Muestra: Heces Mtodo: concentracin por flotacin en solucin de azcar. Estructura observada: quistes de giardia