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Imobilizao enzimtica

O principal interesse em imobilizar uma enzima obter um biocatalisador com


atividade e estabilidade que no sejam afetadas durante o processo (BAUMER; DIEGO,
2008).
De uma forma geral, busca-se, com a imobilizao, propiciar o uso de enzimas ou
clulas por perodos prolongados atravs de processos contnuos ou semicontnuos.
Acredita-se que o desenvolvimento de novos suportes de imobilizao, aliado
utilizao de tcnicas de biologia molecular, possam contribuir para o desenvolvimento
de novos processos em larga escala (CARVALHO, 2006). Existem quatro
princpios bsicos para a imobilizao de biocatalisadores, sendo eles a ligao a
superfcies, o aprisionamento em matrizes porosas, a conteno por membranas e a
auto-agregao (CARVALHO, 2006).
O mtodo de imobilizao por meio de ligao a superfcies pode ser realizado por meio
de interaes inicas ou adsortivas, ou atravs de ligaes covalentes entre grupos
reativos do suporte e do biocatalisador. A ligao por meio de adsoro e/ou interaes
inicas um mtodo simples e barato, sendo a principal desvantagem a vulnerabilidade
de perda dos biocatalisadores imobilizados para o meio reacional. Para aumentar a
massa de biocatalisadores imobilizados, suportes porosos tm sido geralmente
utilizados, permitindo a ligao do biocatalisador tambm estrutura superficial interna.
Por outro lado, a imobilizao por meio de ligaes covalentes resulta em uma interao
biocatalisador-suporte mais forte, sendo a principal desvantagem o risco de danos
membrana celular, no caso de imobilizao de clulas (CARVALHO, 2006).
O mtodo de aprisionamento consiste em aprisionar ou
enclausurar a molcula de enzima dentro de uma matriz polimrica, de forma que seja
possvel a entrada do substrato e sada do produto, mas no da enzima. O mtodo se
subdivide, de acordo com o material utilizado, em aprisionamento em gel, onde so
usados materiais tais como o gar, poliacrilamida, gelatina e alginato, e aprisionamento
em fibra em que o acetato de celulose um exemplo tpico. Uma terceira subdiviso diz
respeito ao aprisionamento em nano/microcpsulas, onde as enzimas so retidas dentro
de membranas polimricas, preparadas partir de material semi-permevel que
permitem a difuso do substrato e do produto (FERNANDES; LIMA; LOPES, 2010).
Como principais desvantagens, so citados o pequeno volume disponvel para a
conteno das clulas imobilizadas, a perda de clulas para o meio de fermentao, que
limitam a quantidade de clulas imobilizadas nas esferas, e a instabilidade dos suportes
normalmente utilizados, que limita a utilizao dos agregados por longos perodos
(PARK; CHANG, 2000). O mtodo de imobilizao por meio de conteno
em membranas envolve a utilizao de membranas pr-formadas ou a formao in situ
da membrana em torno das clulas a serem imobilizadas. Este mtodo, tambm
conhecido como encapsulamento, tem sido utilizado como uma tecnologia alternativa
ao aprisionamento em matrizes porosas, uma vez que oferece vantagens como maior
capacidade de conteno de clulas e preveno da perda de clulas para o meio de
fermentao (FERNANDES; LIMA; LOPES, 2010). O mtodo de imobilizao
por meio de auto-agregao envolve a agregao ou a floculao das clulas de maneira
natural ou artificialmente induzida. Desta forma, os biocatalisadores so ligados entre si
sem a necessidade de uso de um suporte de imobilizao. A floculao natural uma
propriedade de relativamente poucas clulas (FERNANDES; LIMA; LOPES, 2010).
FERNANDES, K. F.; LIMA, C. S.; LOPES, F. M. Tcnicas de Imobilizao de
Enzimas. Revista Processos qumicos, art 4, p.53-58. So Paulo, 2010. Disponvel em:
<file:///C:/Users/Windows/Downloads/rpq_v7_.53-58%20(1).pdf> Acessado em: 12
Jun, 2014.
KRABBE, E. L. Perspectivas quanto ao desenvolvimento de enzimas para uso na
panificao. Embrapa Sunos e Aves. Santa Catarina, 2010. Disponvel em:
<http://ainfo.cnptia.em brapa.br/digital/bitstream/item/67974/Avesui-Everton-Krabbe-
Perspectivas-qua nto-ao-desenvolvimento-de-enzima.pd f> Acessado em: 20 Jun, 2014.
PARK, J.K.; CHANG, H.N. A microencapsulao de clulas microbianas. Os
avanos da biotecnologia. v.18, p.303-319, 2000.