ANATOMIA FOLIAR COMPARADA ENTRE CLONES DE SERINGUEIRA

(PB 235 e IAN 873)

Maria Bernadete Gonalves Martins (IBILCE/UNESP/So Jos do Rio Preto)
Rodrigo Zieri (IBILCE/UNESP/So Jos do Rio Preto)
Aline Margareth Magri (IBILCE/UNESP/So Jos do Rio Preto)

Resumo- O objetivo do trabalho foi efetuar um estudo anatmico e morfolgico foliar
comparando os diferentes clones (PB 235 e IAN 873), sobre o mesmo porta enxerto
(TJ1), desenvolvidos sob as mesmas condies edficas e climticas, com o intuito de
obter informaes que possam diferenciar os clones e tambm ter referncias da
localizao e disposio dos laticferos nos tecidos foliares. Foram realizadas seces
transversais na regio do mesofilo, nervura central e pecolo, seguindo-se os mtodos
usuais de preparao de lminas permanentes. Foram realizadas anlises biomtricas de
extenses de tecidos dos parnquimas palidico e lacunoso e contagem do nmero de
clulas do parnquima lacunoso. Paralelamente foram realizadas anlises biomtricas
para aferies de estmatos. Comparando-se os dois clones atravs da anlise de
varincia, foi observado que houve diferenas significativas entre vrios parmetros
observados entre os clones. PB 235 apresentou maior altura de clulas epidrmicas,
maior altura e maior nmero de camadas do parnquima lacunoso e maior espao
intramarginal na regio do bordo foliolar em relao ao clone IAN 873. O clone IAN
873 obteve a maior espessura das clulas do parnquima palidico, o que pode estar
correlacionado a uma maior eficincia fotossinttica e consequentemente, maior
produtividade. Estmatos em maior nmero, porm com menor tamanho, maior
dimetro do pecolo e da nervura central do fololo mediano em relao ao clone PB
235. O contedo de fibras de esclernquima presente no clone IAN 873 foi superior ao
encontrado no clone PB 235, sugerindo suportar maior resistncia a perodos de seca.

Palavras-chave: anatomia, folha, seringueira, clones.

1. Introduo

Hevea brasiliensis (Euphorbiaceae) uma planta de fcil reconhecimento por
ser lenhosa, de porte mediano a grande, que apresenta um padro caracterstico de
desfolha e reenfolhamento e, sobretudo, pela produo de ltex.
No Brasil so encontradas 11 espcies, sendo o centro primrio de diversidade
gentica de sete delas (Wycherley apud Colombo et al.,1989), incluindo a Hevea
brasiliensis [(Willd. Ex. Adr. De Juss) Mel Arg.], que apresenta maior resistncia
doenas, sendo a principal produtora de borracha natural, matria prima para diversos
ramos da indstria.
Embora a seringueira seja uma cultura originria de regio de clima tropical e
mido (Bastos & Diniz, 1975), as regies de produo comercial vo desde a latitude
24 N (China) at 25 S (litoral do estado de So Paulo), indicando que possui
excepcional adaptao a grande variedade de condies edafoclimticas (Ortolani,
1986). Entretanto, clones adaptados para uma determinada regio nem sempre
apresentam o mesmo desempenho em outra, devido interao entre gentipo e
ambiente (Gonalves, 1982).
Muitos autores postularam variaes de folhas sob diferentes condies
ecolgicas, entre eles, Shields (1950) e Esau (1960), verificaram que fatores ambientais
podem induzir variaes estruturais, ocasionando a xeromorfia. Dentre os fatores mais


utilizados para caracterizao do xerofitismo esto: estmatos numerosos (Salisbury,
1927) e espessamento das folhas com maior compactao do mesofilo (Esau, 1960)
entre outros.
Medri (1983), atravs do estudo anatmico comparado, utilizando seis clones de
Hevea spp, observou uma estreita correlao entre a estrutura da folha e seu
comportamento, indicando que a anatomia pode ser utilizada eficientemente como
indicador de tolerncia seca, eficincia fotossinttica e conseqentemente de
produtividade.
O objetivo desse trabalho foi efetuar um estudo anatmico e morfolgico foliar
comparando os diferentes clones (PB 235 e IAN 873), sobre o mesmo porta enxerto (TJ
1), desenvolvidos sob as mesmas condies edficas e climticas, com o intuito de obter
informaes que possam diferenciar os clones e tambm ter referncias da localizao e
disposio dos laticferos nos tecidos foliares.

2. Material e Mtodo

O seringal foi instalado em janeiro de 1989 na rea experimental do IAC, seo
de Votuporanga-SP, a 20 20 S de latitude, 49 58 W de longitude e 510 m de altitude,
em solo Podzlico Vermelho Escuro, latosslico eutrfico A moderado e textura
arenosa mdia.
As rvores foram plantadas com espaamento de 7,0 m entre linhas e de 3,0
metros entre plantas, ocupando uma rea total de 1,2 hectare, dividida em trs blocos,
subdividido em 24 parcelas. O enxerto foi realizado sobre o clone TJ 1, e o experimento
mantido em condies de campo.
Com a finalidade de caracterizar a histologia da lmina foliar e do pecolo e
estabelecer uma anlise comparativa entre a anatomia e morfologia dos clones (PB 235
e IAN 873), que fazem parte dos recomendados para produo em alta escala na regio
de Planalto (Gonalves et al., 1991), foram coletadas folhas adultas do estrato inferior (8
metros de altura do solo), em bom estado fitossanitrio e sob condio de
sombreamento. Foi utilizada a poro mediana do fololo central e a poro mediana do
pecolo.
O preparo do material para obteno do laminrio histolgico para microscopia
ptica constou basicamente de processos usuais utilizados em microtomia, que incluem:
fixao do material vegetal (FAA-50%) em bomba vcuo, desidratao na srie
alcolica (etlica), infiltrao em parafina, emblocamento do material, tcnica de
microtomia, distenso dos cortes, colorao dupla e montagem de lminas permanentes
(Miller, 1968).
As peas includas em parafina foram seccionadas em micrtomo rotativo,
obtendo-se seces transversais da lmina foliar, da nervura principal e transversal do
pecolo, para observao da cutcula, epiderme adaxial e abaxial, nmero de camadas de
clulas e altura do mesofilo e localizao dos laticferos, padronizando a espessura do
corte em 12m.
Para observar o nmero e o tamanho de estmatos, foi utilizado a soluo de
Jeffrey (cido crmico 10% e cido ntrico 10% em partes iguais) na qual colocou-se
partes correspondentes regio mediana de cinco fololos de cada um dos clones (PB
235 e IAN 873) para dissociao das epidermes, permanecendo nessa soluo por
aproximadamente 72 horas. Aps a dissociao, as epidermes foram coradas em
safranina. A determinao do nmero e do tamanho estomtico foi realizada atravs de
ocular de retculo micromtrico, atravs de uma rea determinada (nmero/mm
2
).
Segundo Coutinho & Conforto (2001), esses dois clones apresentam maior densidade


estomtica na regio mediana do fololo. Tambm foi utilizado neste trabalho a tcnica
de diafanizao (Felippe e Alencastro,1966), com a finalidade de se estabelecer
diferenas entre os padres de nervuras.
O recurso utilizado para os clculos estatsticos foi o programa Origin do qual a
ferramenta utilizada foi o Teste One Way ANOVA com nvel de significncia a 5% .

3. Resultado e Discusso

A seringueira, quando enxertada, uma rvore constituda de duas partes, que
compreendem o enxerto (parte superior da planta) e o porta-enxerto (situado na poro
inferior). Geralmente, em um cultivo comercial, os clones so escolhidos quanto sua
adaptabilidade s condies locais. Quanto ao porta-enxerto, desde que preencha as
condies ideais de enxertia, pouca importncia lhe dada quanto sua procedncia ou
descendncia. No entanto, h muito tempo tem sido demonstrada a influncia do porta-
enxerto no crescimento e produo do enxerto; onde ocorreu uma variao de 14 a 40%
para a produo, e de 7 a 25% para o crescimento, provavelmente causada pela
heterogeneidade do porta-enxerto (Gonalves et al., 1994).
Anlises histolgicas permitiram diferenciar os dois clones estudados em
relao a vrios parmetros morfolgicos e anatmicos (Tabela I) por apresentarem
referncia para o diagnstico de plantas com resistncia seca.
O limbo foliolar (Figura 1) de Hevea brasiliensis dorsiventral, apresenta-
se com epiderme superior (adaxial), parnquima palidico unisseriado, parnquima
lacunoso com trs a cinco camadas de clulas e epiderme inferior (abaxial).Em relao
altura das epidermes abaxial e adaxial, os clones PB 235 e IAN 873 apresentaram
diferenas, sendo que PB 235 obteve maior mdia em relao a IAN 873 (Tabela I).

Tabela I. Valores mdios, desvio padro e anlise de varincia para altura da epiderme
adaxial e abaxial, altura do parnquima palidico, altura do parnquima lacunoso,
nmero de camadas de clulas do parnquima lacunoso, comprimento, largura (mm) e
densidade estomtica (mm
2
) para dois clones de seringueira.
Clones Ep. Ada Ep. Aba Alt. p.p. Alt. p.l. Cam. p.p. Comp. est. Larg. est. Dens. est.
PB 235 0.12 0.08 0.40 0.60 5 0,50 0,32 222,57
IAN 873 0.09 0.07 0.44 0.50 3,5 0,37 0,24 268,50
D.P. 1,69E-4* 0.02* 0.01* 0,78E-2* 6,12E-8* 1,38E-6* 0,17E-2* 0,48E-3*
* significativo 5% probabilidade

Em ambos os clones, a cutcula da epiderme superior glabra, sendo que a da
epiderme inferior mostra salincias opticamente semelhantes a plos, o que est de
acordo com Medri (1977).
Os clones PB 235 e IAN 873 apresentam diferenas significativas quanto
altura do parnquima palidico, sendo que o clone IAN 873 obteve a maior mdia
(0,44mm) em relao ao PB 235 (0,40mm), sugerindo maior eficincia fotossinttica e
consequentemente maior produtividade (Tabela I). Diferenas no significativas foram
encontradas por Coutinho & Conforto (2001), que obteve uma mdia de 38,32 m para
IAN 873 e 39,39 m para PB 235.
A tabela I mostra que h diferenas quando comparados os valores relativos
espessura e ao nmero de camadas do parnquima lacunoso. O clone PB 235 apresenta
maior mdia referente aos valores relativos altura e ao nmero de camadas do
parnquima lacunoso em relao ao clone IAN 873. Coutinho & Conforto (2001), em


seu trabalho verificou que este parmetro anatmico era distinto nos dois clones, tendo
IAN 873 uma mdia de 46,49m e PB 235 55,86 m.
Os valores mdios do comprimento e da largura estomtica entre os clones PB
235 e IAN 873 indicam que h diferenas quando comparadas essas duas caractersticas
nos dois clones. O clone PB 235 obteve a maior mdia referente aos valores de
comprimento e largura estomtica em relao ao clone IAN 873 (Tabela I).
O nmero mdio de estmatos por unidade de rea apresentou diferenas
significativas quando comparado os dois clones. O clone IAN 873 apresentou maior
nmero de estmatos em relao ao PB 235 (Tabela I).
Existem diversos fatores atuando de diferentes modos, ocasionando
variaes entre os valores de densidade estomtica encontradas em vrios trabalhos.
Gomez & Hamzah (1983) observaram diferenas na densidade estomtica entre plantas
do mesmo clone, entre idades das folhas do mesmo clone (tendo geralmente as mais
velhas, maior nmero de estmatos), e entre local de amostragem da folha (maior
nmero estomtico quanto maior a exposio ao sol).
Como constatado no presente trabalho e descrito por Medri (1977), os laticferos
ocorrem na regio floemtica das nervuras e entre os parnquimas palidico e lacunoso
da lmina foliar (Figura 1).
O padro morfolgico das folhas de PB 235 e IAN 873, apresentou fololos de
forma elptica, com pice acuminado, base cncava, margem inteira, levemente
ondulada, sendo que o padro de nervuras primrias pinado e as demais nervuras (2 e
3) so reticuladas (Figura 2 A-C). Ocorre diferenciao foliar na regio do bordo,
observada atravs do processo de diafanizao em relao ao espao intramarginal
(figura 2 B-D). PB 235 apresenta o espao intramarginal maior e bem definido em
relao ao IAN 873.
Segundo Medri (1977), os reforos mecnicos, representados por abundante
desenvolvimento do esclernquima, aumentam com a altura da planta (xerofitismo), e
so interpretados como estruturas que reduzem os efeitos danosos produzidos pelo
murchamento. Analisando a nervura central do fololo e o pecolo, IAN 873 apresentou
maior dimetro da nervura central do fololo e do pecolo e maior quantidade de fibras
de esclernquima que a PB 235 (Figuras 3 e 4).




























































Figura 1 : Seco transversal da regio do limbo foliolar mdiano de Hevea
brasiliensis (Clone PB 235). Colorao Safra-Blau.
(c- cticula; ep.ad.- epiderme adaxial; p.p.- parnquima palidico; L
laticfero; p.l - parnquima lacunoso; ep. ab. epiderme abaxial).





C
ep.ad
p.p.
L
p.l.
ep.ad
c
15 m



































Figura 2: Folhas diafanizadas de Hevea brasiliensis.
A: Clone IAN 873 mostrando nervura secundria e nervuras tercirias.
B: Clone de IAN 873 mostrando a regio do bordo, prximo ao pice da
folha.
C: Clone PB 235 mostrando nervura secundria e nervuras tercirias.
D: Clone de PB 235 mostrando a regio do bordo, prximo ao pice da
folha
(ns nervura secundria; nt nervura terciria; e.intr espao
intramarginal)







50m A
B
C
D
ns
nt
ns
nt
e.intr e.intr







































Figura 3: Seces transversais na regio do pecolo de folhas de Hevea brasiliensis.
Colorao
Safra-Blau
A: Clone IAN 873
B: Cone PB 235
(fe fibra de esclernquima)



50m
A
B
20m
fe









































Figura 4 : Seco transversal da regio da nervura principal da folha de Hevea
brasiliensis.
Colorao Safra-Blau.
A: Clone IAN 873
B: Clone PB 235
(fe fibra de esclernquima)



20m
A
B
fe



4. Concluso

1- O clone IAN 873 apresentou maior dimetro da nervura central do fololo e do
dimetro do pecolo, em relao ao clone PB 235.
2- PB 235 apresentou maior espao intramarginal observado na regio do bordo foliar
em relao ao clone IAN 873.
3- Houve diferena em relao altura da epiderme, sendo que PB 235 apresentou-se
com maior altura em relao a IAN 873.
4- Foi observado que houve diferena quanto altura do parnquima palidico, sendo
que o clone IAN 873 obteve a maior mdia em relao ao PB 235, o que sugere
possuir uma maior eficincia fotossinttica e conseqentemente maior
produtividade.
5- Houve diferena quando comparados os valores relativos espessura e ao nmero
de camadas dos parnquimas lacunoso, sendo que PB 235 apresenta maior nmero
de camadas e maior altura em relao IAN 873.
6- IAN 873 apresentou maior nmero de estmatos em relao ao clone PB 235, porm
com menor tamanho.
7- IAN 873 apresentou maior contedo de fibras de esclernquima em relao PB 235,
sugerindo suportar com maior resistncia os perodos de seca.
8- Ocorreu a presena de laticferos na regio floemtica das nervuras e entre ao
parnquimas palidico e lacunoso da lmina foliar.

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