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Microbiologa de los

organismos (2/2)
Autor: Pearson Educacin

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Presentacin del curso
Con este cursosituaremos a la microbiologa en una perspectiva histrica, como un
proceso del descubrimiento cientfico. Desde las contribuciones pioneras de los
primeros microbilogos hasta los hitos cientficos de la actualidad, podremos ver
la importancia creciente de la microbiologa en la medicina, la agricultura, el medio
ambiente, y en otros aspectos de nuestra vida diaria.
Conoceremos quin fue el primero en describir microorganismos y describir bacterias
bacterias. Descubriremos quien fund la bacteriologa y descubri las endosporas
bacterianas. Robert Koch estableci criterios para el estudio de microorganismos
infecciosos y desarroll los primeros mtodos para hacer crecer y obtener cultivos
puros de microorganismos, tambin conoceremos quienes estudiaron las bacterias
del suelo y del agua y desarrollaron la tcnica del cultivo de enriquecimiento para el
aislamiento de varios microorganismos.
Aprende con este curso de Pearson, fragmento del libro: "Brock. Biologa de los
microorganismos 12ED" Antonio Colmenar Michael T. Madigan, John M. Martinko,
Paul V. Dunlap y David P. Clark. Puedes descubrir y adquirir libros de Pearson en:
www.jetlibros.com
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1. Microbiologa. Historia (1/2)
LOS CAMINOS DEL DESCUBRIMIENTO EN MICROBIOLOGA
Como cualquier ciencia, la microbiologa debe mucho a su pasado. Aunque se
pueden encontrar races ms profundas, la ciencia de la microbiologa no se
desarroll realmente hasta el siglo XIX. Desde entonces se ha extendido hasta
originar nuevos campos de conocimiento relacionados entre s. Ahora
consideraremos algunos de los hitos que llevaron a importantes descubrimientos.
Las races histricas de la microbiologa: Hooke, van Leeuwenhoek y Cohn
Aunque durante mucho tiempo se sospech la existencia de criaturas demasiado
pequeas para ser percibidas a simple vista, su descubrimiento estuvo relacionado
con la invencin del microscopio. Robert Hooke (1635-1703), un matemtico y
naturalista ingls, fue tambien un excelente microscopista. En su famosos libro Micrographia
Micrographia(1665), que fue el primero dedicado a observaciones microscpicas,
Hooke describi, entre otras cosas, los cuerpos fructificantes de los mohos (Figura
1. 9), lo que representa la primera descripcin conocida de los microorganismos. La
primera persona que vi bacterias fue le comerciante holands Antoni van
Leeuwenhoek (1632- 1723), que tambin era un aficionado a construir microscopios.

a)b)
Figura 1.9 Robert Hooke y los orgenes de la microscopa.
(a) Dibujo del microscopio utilizado por Robert Hooke en 1664. La lente
objetivo se encajaba al final de un fuelle ajustable (G) y la iluminacin se
concentraba en la muestra por una lente sencilla (1).
(b) Dibujo de Robert Hooke en su Micrographia, publicada en 1655, que
representa la primera decripcin de un microorganismo: se trata de un
moho azulado creciendo en la
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superficie de un trozo de cuero; las estructuras redondeadas son
esporangios que contienen las esporas del moho.
En 1684, van Leeuwenhoek, que ya conocia el trabajo de Hooke, emple
microscopios muy simples de construccin propia (Figura 1.10) para examinar el
contenido microbiano de varias sustancias naturales.

a) b) c)
Figura 1.10 El microscopio de van Leeuwenhoek.
(a) Fotografa de una copia del microscopio de van Leeuwenhoek. La lente se
montaba sobre una placa de latn cerca del extremo del tornillo ajustable
de enfoque.
(b) Dibujos de van Leeuwenhoek de bacterias, publicados en 1684. En estos
sencillos dibujos podemos reconocer varios tipos morfolgicos de bacterias
frecuentes. A, C, F y G, formas bacilares; E, formas esfricas o cocos; H,
grupos de cocos.
(c) Micrografa de una extensin de sangre humana vista a travs de un
microscopio de
van Leeuwenhoek. Se aprecian claramente los gbulos rojos, que tienen
aproximadamente 6 un de dimetro.
Nota: Este curso es un fragmento del libro: "Brock. Biologa de los microorganismos
12ED", de los autores Antonio Colmenar Michael T. Madigan, John M. Martinko, Paul
V. Dunlap y David P. Clark (SBN: 9788478290970). Puedes descubrir y adquirir
libros de Pearson en: www.jetlibros.com
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2. Microbiologa. Historia (2/2)
Comparados con los actuales, los microscopios de van Leeuwenhoek eran muy
primitivos, pero mediante una cuidadosa manipulacin y un buen enfoque fue capaz
de ver bacterias, que son mucho ms pequeas que los mohos.
En 1676 observ bacterias mientras analizaba infusiones de pimienta y describi sus
observaciones en una serie de cartas dirigidas a la Royal Society de Londres, que las
public en 1684 traducidas al ingls. En la Figu ra 1.10b se muestran dibujos de lo
que denomin pequeos animlculos.
Pasados los aos, sus observaciones fueron confirmadas por otros, pero durante
casi 150 aos los avances en el conocimiento de la naturaleza e importancia de
estos pequeos organismos fueron muy lentos. En el siglo XIX, cuando los
microscopios fueron mejorados y se generaliz su uso, el alcance y la naturaleza de
las formas microbianas de vida se convirti en algo ms evidente.
Desde mediados del siglo XIX hasta finales del mismo se registraron importantes
descubrimientos en la ciencia microbiolgica, fundamentalmente porque se dedic
atencin a dos cuestiones inquietantes que dominaban la biologa y la medicina de
aquel tiempo: (1) la cuestin de la generacin espontnea y (2) la naturaleza de las
enfermedades infecciosas. Las respuestas a estas incgnitas surgieron sobre todo
del trabajo de dos gigantes en el campo de la microbiologa, el qumico francs
Louis Pasteur y el mdico alemn Robert Koch. Pero antes de analizar sus
aportaciones, debemos considerar la importante contribucin del botnico alemn
Ferdinand Cohn, contemporneo de Pasteur y de Koch, que fue el fundador de lo
que ahora llamamos bacteriologa.
Ferdinand Cohn y la ciencia de la bacteriologa Ferdinand Cohn (1828-1898) naci
en Breslau (en la actual Polonia). Se form inicialmente como botnico y lleg a ser
un excelente microscopista. Su inters por la microscopa le llev primero al estudio
de plantas unicelulares algas y ms tarde a las bacterias fotosintticas.
Cohn pensaba que todas las bacterias, incluso las que carecen de pigmentos
fotosintticos, eran miembros del reino vegetal, y sus estudios de microscopa sobre
plantas y algas le condujeron gradualmente al estudio de diversas bacterias, como la
bacteria oxidante de azufre Beggiatoa
En particular, Cohn se interes por la resistencia de las bacterias al calor, lo que le
llev a descubrir el importante grupo de las bacterias que forman endosporas.
Ahora sabemos que las endosporas bacterianas son muy resistentes a la
temperatura. Cohn describi el ciclo de vida completo de Bacillus, que es una
bacteria formadora de endosporas (clulas vegetativas >endosporas >clulas
vegetativas), y observ que las lulas vegetativas de Bacillus moran por ebullicin,
pero no las endosporas.
El hallazgo de Cohn sobre las endosporas ayud a explicar por qu sus
contemporneos, como el cientfico irlands John Tyndall, haban encontrado que la
ebullicin era generalmente un mtodo apropiado para evitar que las infusiones
lquidas permitieran el crecimiento microbiano, aunque no siempre era as.
Cohn continu trabajando con bacterias hasta su jubilacin, contribuyendo de
muchas maneras al desarrollo de la bacteriologa, aportando las bases
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experimentales para un esquema de clasificacin de las bacterias y fundando una
importante revista cientfica sobre biologa vegetal y microbiana. En su poca, Cohn
fue un entusiasta defensor de las tcnicas y las investigaciones desarrolladas por el
fundador de la microbiologa mdica Robert Koch. Tambin se debe a Cohn haber
ideado mtodos simples y efectivos para evitar la contaminacin de medios de
cultivo estriles, como el uso de algodn para tapar los tubos y los matraces. Estos
mtodos fueron usados posteriormente por Koch y permitieron grandes avances
como el aislamiento y la caracterizacin de bacterias causantes de enfermedades.
Robert Hooke fue el primero en describir microorganismos y Antoni van
Leeuwenhoek el primero en describir bacterias. Ferdinand Cohn fund la
bacteriologa y descubri las endosporas bacterianas.
- Qu frenaba el desarrollo de la microbiologa antes de Antoni van
Leeuwenhoek?
- Qu descubri Cohn estudiando la resistencia al calor de los
microorganismos?
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3. Microbiologa. Ismeros pticos de Pasteur
Pasteur y la derrota de la generacin espontnea
La segunda parte del siglo XIX supuso un gran desarrollo para la microbiologa. El
concepto de la generacin espontnea fue abandonado y apareci la ciencia del
cultivo puro. En esta poca destacan grandes figuras cientficas, y el primero de
ellos es el francs Louis Pasteur (1822-1895), que fue contemporneo de Cohn.
Ismeros pticos y fermentaciones
Pasteur se form como qumico y fue unos de los primeros cientficos que reconoci
la importancia de los ismeros pticos (vase Seccin 3.6). Una molcula es
pticamente activa si difracta la luz en una sola direccin cuando est en solucin o
en forma cristalizada. Pasteur estudi cristales de cido tartrico que haba
separado a mano segn desviaran un haz de luz polarizada hacia la derecha o hacia
la izquierda (Figura 1.12).
Eligi el tartrato porque era un producto de desecho en el proceso de vinificacin,
abundante en Francia, y tambin por su facilidad para cristalizar. Pasteur descubri
que el hongo Aspergillus slo metabolizaba D-tartrato y no su ismero ptico, el
L-tartrato. El hecho de que un organismo vivo fuera capaz de distinguir entre los
ismeros pticos tuvo una profunda significacin para Pasteur, que consider que
los procesos vitales eran fundamentalmente asimtricos a diferencia de los procesos
qumicos inanimados.
Segn l, slo los seres vivos mostraban selectividad para producir o consumir
ismeros pticos.
Los trabajos de Pasteur sobre la asimetra le llevaron al anlisis de las
fermentaciones y, en ltimo trmino, a la cuestin de la generacin espontnea. Los
industriales locales tenan problemas para la obtencin de alcohol por fermentacin
del azcar de remolacha e invitaron a Pasteur a realizar un estudio detallado de la
fermentacin alcohlica, que por entonces se consideraba que era un proceso
estrictamente qumico. Se interpretaba que las clulas de levadura que aparecan en
los caldos de fermentacin eran sustancias qumicas complejas y se originaban
como resultado de la fermentacin, en vez de actuar como catalizadores del
proceso. Uno de los productos laterales de la fermentacin es el alcohol amlico,
que Pasteur detect en el liquido de fermentacin encontrando que era pticamente
activo. Las observaciones microscpicas de Pasteur, junto a sus experimentos
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simples pero rigurosos, demostraron que la fermentacin alcohlica estaba
catalizada por las levaduras. En sus propias palabras la fermentacin est
asociada a la vida y a la integridad estructural de las clulas y no a su muerte o
desaparicin. Sobre estas bases, Pasteur inici una serie de experimentos clsicos
sobre la generacin espontnea que han ligado para siempre su nombre con la
microbiologa.
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4. Microbiologa. Mtodos de esterilizacin de
Pasteur
La generacin espontnea
El concepto de generacin espontnea exista desde los tiempos bblicos. La idea
bsica de esta teora puede comprenderse fcilmente. El alimento se pudre si
permanece durante cierto tiempo a la intemperie. Cuando este material putrefacto
se examina al microscopio se encuentra que est repleto de bacterias y tal vez de
otros organismos superiores, como gusanos. De dnde provienen estas bacterias
que no se ven en el alimento fresco? Algunos pensaban que provenan de semillas o
grmenes que llegaban al alimento a travs del aire, mientras otros opinaban que se
originaban a partir del material inerte por generacin espontnea. Para aclarar esta
controversia se necesitaba un enfoque inteligente, y este tipo de problema fue el
que atrajo la atencin de Luois Pasteur.
Pasteur fue un ferviente adversario de la generacin espontnea. Tras sus
descubrimientos sobre la fermentacin, demostr que en el aire haba estructuras
que se parecan mucho a los microorganismos encontrados en el material putrefacto
y concluy que aquellos presentes en dicho material derivaban de los que haba en
el aire y en la superficie de los recipientes que los contenan.
Adems, postul que dichas clulas en suspensin se depositan constantemente
sobre todos los objetos y que crecen cuando las condiciones son favorables. Pasteur
pens que, si sus suposiciones eran correctas, entonces no debera estropearse un
alimento tratado de tal modo que todos los organismos que lo contaminaran fueran
destruidos, es decir, que los alimentos estriles resultaran protegidos.
Pasteur emple calor para eliminar los contaminantes, pues otros investigadores
haban demostrado que si una solucin de nutrientes se introduca en un matraz de
vidrio, se sellaba y se calentaba luego hasta ebullicin no se descompona. La
eliminacin de todas las bacterias y otros organismos de un objeto es el proceso
llamado esterilizacin. Los defensores de la generacin espontnea criticaban tales
experimentos argumentando que se necesitaba aire fresco para la generacin
espontnea y que el calentamiento del aire dentro del matraz cerrado no era capaz
de permitir el proceso. En 1864 Pasteur super esta objecin de modo simple y
brillante construyendo un matraz con forma de cuello de cisne, que ahora se
designa como matraz Pasteur (Figura 1.13). En tales recipientes las soluciones
nutritivas se podan calentar hasta ebullicin esterilizndose y, despus, cuando el
matraz se enfriaba, el aire poda entrar de nuevo, pero la curvatura del cuello del
matraz evitaba que el material particulado conteniendo microorganimos alcanzase el
interior del matraz e iniciara la putrefaccin.
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Figura 1.13 La derrota de la generacin espontnea: experimento de
Pasteur con matraces de cuello de cisne.
(a) Esterilizacin del contenido del matraz.
(b) Si el matraz se mantiene en posicin vertical no hay crecimiento
microbiano.
(c) Si los microorganismos atrapados en el cuello alcanzan el lquido estril,
crecen rpidamente.
El material esterilizado en un matraz Pasteur no se descompona y no aparecan
microorganismos mientras el cuello del matraz no contactara con el lquido estril.
Sin embargo, bastaba con que el matraz se inclinara lo suficiente como para permitir
que el lquido estril contactara con el cuello, para que ocurriera la putrefaccin y el
lquido se llenara de microorganismos. Este sencillo experimento fue clave para
aclarar definitivamente la controversia sobre la generacin espontnea y para que la
ciencia de la microbiologa avanzara sobre bases firmes.
El trabajo de Pasteur tambin supuso el desarrollo de mtodos eficaces de
esterilizacin que favorecieron tanto la investigacin bsica como la aplicada. La
ciencia de los alimentos tambin tiene una deuda con Pasteur, pues sus principios
son los que se utilizan en el envasado y conservacin de la leche y otros alimentos
(pasteurizacin).
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Otros xitos de Pasteur
Pasteur consigui otros muchos xitos en microbiologa y medicina. Entre los
principales destaca el desarrollo de vacunas contra enfermedades como el carbunco,
el clera aviar y la rabia durante el perdo de 1880-1890. Su famoso trabajo sobre la
rabia culmin en julio de 1885 con la primera administracin de la vacuna de la
rabia al hombre, en la persona de un joven francs llamado Joseph Meister que
haba sido mordido por un perro rabioso.
Entonces, la mordedura por un perro rabioso significaba la muerte. La noticia del
xito de la vacunacin de Meister y la del joven pastor Jean Baptiste Jupille,
administrada poco despus, se extendi rpidamente y en tan solo un ao cerca de
2.500 personas viajaron a Pars para ser vacunados.
La fama de Pasteur se convirti en leyenda y condujo a la construccin en 1888 del
Instituto Pasteur por el gobierno francs. Inicialmente fue un centro clnico para el
tratamiento de la rabia y otras enfermedades infecciosas, y hoy constituye un
importante centro de investigacin biomdica especializado en la produccin de
antisueros y vacunas
Los avances mdicos y veterinarios de Pasteur no slo tuvieron importancia por s
mismos, sino que permitieron que arraigara el concepto de la teora microbiana de
las enfermedades infecciosas, cuyos principios estaban siendo desarrollados por
entonces por otro gran cientfico contemporneo, Robert Koch.
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5. Microbiologa. Koch, las infecciones
Koch, la enfermedad infecciosa y la microbiologa del cultivo puro
La prueba de que los microorganismos podan causar enfermedades aport un gran
mpetu al desarrollo de la ciencia de la microbiologa. En realidad, ya en el siglo XVI
se pensaba que se poda transmitir algo de una persona enferma a otra sana y
producir en sta la enfermedad de la primera. Tras el descubrimiento de los
microorganismos, se sospechaba que stos pudieran ser responsables de
enfermedades, pero faltaban las pruebas definitivas.
Las mejoras sanitarias preconizadas por Ignaz Semmelweis y Joseph Lister
suministraron pruebas indirectas sobre la importancia de los microorganismos
como causa de enfermedades en el hombre, pero para que ese concepto de la
enfermedad infecciosa fuera experimentalmente probado hubo que esperar hasta
los trabajos del mdico alemn Robert Koch (1843-1910).
La teora microbiana de las enfermedades infecciosas y los postulados de Koch
En su trabajo inicial Koch estudi el carbunco, una enfermedad del ganado que en
ocasiones afecta al hombre, y que est causada por una bacteria formadora de
endosporas llamada Bacillus anthracis. Mediante cuidadosos estudios de
microscopa y el uso de colorantes especiales, Koch puso de manifiesto que la
bacteria estaba siempre presente en la sangre de los animales infectados. Sin
embargo, la mera asociacin de la bacteria con la enfermedad, no demostraba que
la bacteria fuera la causa de la enfermedad; por el contrario, poda ser un efecto de
la misma. Cmo podra diferenciarse la causa y el efecto?
Koch percibi que esta enfermedad ofreca la oportunidad de abordar esta cuestin
experimentalmente; sus resultados establecieron pautas que todava se siguen en la
actualidad para el estudio de las enfermedades infecciosas.
Koch emple ratones como animales experimentales.
Usando los controles apropiados, demostr que cuando una pequea cantidad de
sangre de un ratn enfermo se inyectaba en uno sano se provocaba rpidamente en
ste la aparicin de carbunco. Tomando sangre de este segundo animal e
inyectndola en otro, obtena de nuevo los sntomas de la enfermedad. Koch llev
este experimento an ms lejos. Tambin demostr que la bacteria poda ser
cultivada en caldos nutritivos fuera del animal y que, incluso despus de muchas
resiembras o transferencias de cultivo, la bacteria poda causar la enfermedad
cuando se reinoculaba a un animal sano.
Mediante experimentos de este tipo y otros relacionados, llevados a cabo en sus
trabajos sobre el agente causante de la tuberculosis, Koch formul una serie de
criterios rigurosos, conocidos en la actualidad como postulados de Koch, para
demostrar que un tipo concreto de microorganismo es el agente etiolgico de una
enfermedad especfica:
1. El organismo causante de la enfermedad debe estar siempre presente en los
animales que sufran la enfermedad y no en individuos sanos.
2. El organismo debe cultivarse en cultivo axnico o puro fuera del cuerpo del
animal.
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3. Cuando dicho cultivo se inocula a un animal susceptible, debe iniciar en l los
sntomas caractersticos de la enfermedad.
4. El organismo debe aislarse nuevamente de estos animales experimentales y
cultivarse de nuevo en el laboratorio, tras lo cual debe mostrar las mismas
propiedades que el organismo original.
Estos postulados dieron un enorme impulso al estudio de las enfermedades
infecciosas, pues no slo permitieron establecer la relacin entre causa y efecto en
este tipo de enfermedades sino que pusieron de manifiesto la importancia de
cultivar en el laboratorio a los agentes especficos. Usando estos postulados como
gua, Koch, sus discpulos y otros investigadores posteriores lograron descubrir los
agentes causales de la mayora de las enfermedades infecciosas importantes que
afectan al hombre y a los animales. A su vez, estos descubrimientos condujeron al
establecimiento de tratamientos adecuados para la prevencin y cura de muchas
enfermedades infecciosas, amplindose de este modo las bases cientficas de la
medicina clnica y del bienestar humano.
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6. Microbiologa. Koch, los cultivos puros
Koch y los cultivos puros
Para relacionar un microorganismo especfico con una enfermedad determinada, el
microorganismo debe ser aislado primero de otros microorganismos en un cultivo
de laboratorio; en microbiologa ese cultivo de denomina puro. Este concepto fue
recogido por Koch en la formulacin de sus famosos postulados (Figura 1.15) y
desarroll varios mtodos ingeniosos para obtener cultivos puros (vase Informacin
adicional sobre Medios slidos, las placas de Petri y los cultivos puros).
Figura 1.15 Los postulados de Koch para demostrar que un determinado
microorganismo causa una enfermedad especfica.
Es esencial que, tras el aislamiento del microorganismo patgeno
sospechoso en cultivo puro, un cultivo de dicho micoorganismo en el
laboratorio sea capaz de producir la enfermedad y pueda ser recuperado del
animal enfermo. Resulta necesario determinar las condiciones apropiadas
para que el microorganismo sea capaz de crecer, pues de otro modo no
podr ser aislado.
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Koch empez estos estudios de forma rudimentaria, usando nutrientes slidos para
cultivar bacterias, como la superficie de una rebanada de patata, pero pronto dise
mtodos ms fiables, muchos de los cuales an se usan en la actualidad. Koch
observ que cuando se expona al aire la superficie de un nutriente slido se
desarrollaban colonias bacterianas que tenan formas y colores caractersticos.
Dedujo que cada colonia se originaba a partir de una sola clula bacteriana que
haba cado sobre la superficie y en presencia de los nutrientes adecuados se haba
multiplicado. Cada colonia era por lo tanto una poblacin de clulas idnticas, es
decir, cada colonia representaba un cultivo axnico o puro. Koch se dio cuenta de
que este descubrimiento supona un sencillo procedimiento para obtener cultivos
puros. Como muchos organismos no crecen en rebanadas de patatas, Koch ide
caldos nutritivos ms uniformes y reproducibles solidificados con gelatina y, ms
tarde, con agar.
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7. Microbiologa.Koch, la tuberculosis
Una prueba para los postulados de Koch: la tuberculosis
El mayor logro de Koch en la bacteriologa mdica est relacionado con la
tuberculosis. Cuando Koch comenz estos estudios (1881), una de cada siete
muertes en humanos era debida a la tuberculosis. Aunque en aquel tiempo se
sospechaba que la tuberculosis era una enfermedad contagiosa, el organismo
responsable no se haba visto en los tejidos de enfermos ni en cultivo. Koch se
propuso detectar el agente causante de la enfermedad y para ello emple todos los
mtodos que haba desarrollado cuidadosamente en los estudios previos sobre el
carbunco: microscopa, tincin de tejidos, aislamiento en cultivo puro e inoculacin
en animales (Figura 1.15).
Como sabemos ahora, el bacilo de la tuberculosis, Mycobacterium tuberculosis, es
muy difcil de teir debido a que posee grandes cantidades de lpidos en su pared
celular. Pero Koch dise un procedimiento para teir M. tuberculosis en muestras
de tejidos usando azul de metileno alcalino y un segundo colorante (marrn
Bismark) que tea slo los tejidos. Por este mtodo Koch observ las clulas
bacilares de M. tuberculosis teidas de azul en tejidos tuberculosos, mientras stos
ltimos quedaban teidos de marrn claro (Figura 1.16). Sin embargo, por su
trabajo anterior sobre el carbunco, Koch era consciente de que identificar a un
microorganismo asociado con la tuberculosis no era suficiente y que deba cultivar
el microorganismo para demostrar que era la causa especfica de la tuberculosis.
La obtencin de cultivos de M. tuberculosis no fue tarea fcil, pero finalmente Koch
tuvo xito al obtener colonias de este organismo sobre suero de sangre coagulada.
Posteriormente us agar, que acababa de ser introducido como agente solidificante.
En condiciones ptimas M. tuberculosis crece muy lentamente en cultivo, pero la
persistencia y paciencia de Koch hicieron posible la obtencin de cultivos puros de
este organismo a partir de diversas fuentes de origen humano y animal.
Con estos precedentes, ms tarde fue relativamente sencillo para Koch usar sus
postulados (Figura 1.15) para obtener la prueba definitiva de que el organismo
aislado era la causa de la tuberculosis. Los cobayas pueden ser infectados
fcilmente con M. tuberculosis y posteriormente mueren de tuberculosis sistmica.
Kochdemostr que los cobayas enfermos contenan masas celulares de M.
tuberculosis en sus tejidos y que los cultivos puros obtenidos de dichos animales
transmitan la enfermedad a animales sanos. Asi, Koch cumpli los cuatro criterios
de sus postulados y estableci la causa de la tuberculosis (Figura 1.15). Koch
anunci este descubrimiento en 1882 y public un extenso artculo sobre el tema en
1884. Por esta importante contribucin, Robert Koch recibi en 1905 el premio
Nobel de fisiologa y medicina.
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Figura 1.16 Dibujos de Robert Koch de Mycobacteriun tuberculosis. Robert Koch fue
el primero que aisl M. tuberculosis y que demostr que causaba la tuberculosis.
(a) Seccin transversal de un tubrculo en tejido pulmonar. Las clulas de M.
tuberculosis se tien de azul mientras que el tejido pulmonar se tie de marrn. (b)
Clulas de M. tuberculosis en un esputo de un paciente tuberculoso. (c) Crecimiento
de M. tuberculosis en una placa de vidrio con suero sanguneo coagulado dentro de
una caja de cristal (tapadera abierta). (d) Se tom una colonia de clulas de M.
tuberculosis de la placa y se observ al microscopio a 700 aumentos; las clulas
aparecen formando largas cuerdas. Los dibujos originales aparecieron en Koch, R.
1884 Die Aetiologie der Tuberkulose Mittheilungen aus dem Kaiserlichen
Gesundheitsamte 2: 1-88.
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8. Microbiologa.Koch (1/2)
En el caso de enfermedades que se pueden reproducir en modelos animales resulta
relativamente fcil demostrar los postulados de Koch. Sin embargo, esto no siempre
es sencillo en la medicina clnica moderna. Incluso para Koch el tema result difcil
en algunos casos, como en el clera. Hoy existe un sistema animal adecuado para
estudiar el clera, pero en los tiempos de Koch no se conoca.
Como slo una parte de los voluntarios humanos que se infectan con la bacteria
productora del clera, Vibrio cholera contraen la enfermedad, result difcil
entonces probar su origen.
Incluso en la actualidad, a veces resulta imposible poder cumplir los postulados de
Koch. Por ejemplo, los agentes causantes de varias enfermedades del hombre no
originan enfermedad en ningn animal conocido. Tal es el caso de muchas
enfermedades que se asocian con bacterias intracelulares, como las rickettsias y las
clamidias, y de enfermedades producidas por algunos virus y protozoos parsitos.
Como no sera tico utilizar a voluntarios humanos para comprobar los postulados
de Koch en estas enfermedades, es posible que nunca se establezca de modo
inequvoco la causa y el efecto en estos casos. Sin embargo, en muchas de estas
enfermedades, las evidencias clnicas y epidemiolgicas proporcionan algunas
pruebas sobre la causa especfica. Por tanto, aunque los postulados de Koch
constituyen el estndar de oro en microbiologa clnica, hasta ahora resulta
imposible satisfacer todos sus criterios en algunas enfermedades infecciosas.
Informacin adicional de Koch
Medios slidos, la placa de Petri y los cultivos puros
Robert Koch fue el primero que cultiv bacterias en medios de cultivo
slidos. El uso inicial de las rebanadas de patata presentaba muchos
problemas. Adems de que constitua un medio selectivo para las bacterias
que podan crecer en su superficie, las rebanadas se cubran frecuentemente
de mohos. Koch necesitaba un mtodo ms fiable y reproducible para
cultivar las bacterias en medios slidos y encontr la solucin en el empleo
del agar.
Al principio Koch utiliz la gelatina como agente solidificante de los caldos
nutritivos que empleaba para cultivar las bacterias y desarroll un mtodo
para preparar lminas horizontales de un medio slido que mantena libre
de contaminantes cubrindolas con una campana o tapadera de cristal
(vase Figura 1.16c). Los caldos nutritivos con gelatina constituan un buen
medio de cultivo para el aislamiento y estudio de varias bacterias, pero
presentaba algunos inconvenientes, y el ms importante era que la gelatina
no se mantena slida a la temperatura del cuerpo humano (37 C), que es
la ptima para el crecimiento de la mayora de los microorganismos que son
patgenos para el hombre. Por tanto, se necesitaba un agente solidificante
diferente.
El agar es un polisacrido derivado de las algas rojas. En el siglo XIX se
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utilizaba mucho como un agente gelificante. El primer uso del agar como
agente solidificante para medios de cultivo bacteriolgicos se debe a Walter
Hesse, un colaborador de Koch (Figura 1). La idea real de que el agar poda
ser usado en vez de la gelatina fue sugerida por la mujer de Hesse, Fannie,
quien haba usado el agar para la preparacin de mermeladas de fruta.
Cuando se ensay como agente solidificante en medios de cultivo, se
apreci que superaba a la gelatina en muchos aspectos. Hesse escribi a
Koch acerca de este descubrimiento y Koch adopt rpidamente esta tcnica
en sus propios trabajos, como los estudios clsicos sobre el aislamiento de
la bacteria Mycobacterium tuberculosis, que es el agente etiolgico de la
tuberculosis (vanse el texto y la Figura 1.16).
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9. Microbiologa.Koch (2/2)
El agar presenta otras muchas propiedades que lo hacen adecuado como
agente solidificante de los medios de cultivo para microorganismos. En
particular, permanece slido a 37 C (la temperatura del cuerpo humano) y,
despus de fundirse durante el proceso de esterilizacin, permanece lquido
hasta los 45 C, pudiendo as verterse en recipientes estriles.
Adems, a diferencia de la gelatina, que muchos microorganismos pueden
degradar volviendo lquido el medio, la mayora de las bacterias no
degradan el agar. El agar tambin permite que muchos medios slidos sean
transparentes, lo que facilita diferenciar las colonias bacterianas de las
partculas inanimadas del material que contiene el medio. Por todo ello, el
agar ocup desde el principio un puesto importante en los anales de la
microbiologa y an se emplea en la actualidad para aislar y mantener
cultivos puros de bacterias.
En 1887 el bacterilogo alemn Richard Petri public un corto artculo
describiendo una modificacin de las lminas horizontales de Koch (Figura
1. 16c). La mejora de Petri, que result ser enormemente til, consista en el
uso de las cajas o placas dobles circulares que llevan su nombre (Figura 2).
Las ventajas de las placas de Petri eran evidentes: podan ser
fcilmente almacenadas y esterilizadas independientemente del medio y,
despus de aadir el medio lquido fundido a la ms pequea de las dos
tapaderas circulares, la de tamao mayor poda utilizarse como tapadera
para evitar contaminaciones. Las colonias que se formaban en la superficie
del agar contenido en la placa de Petri quedaban en contacto con el aire y
podan ser fcilmente manipuladas para su estudio. La idea original de Petri
no ha sido superada hasta la fecha, y las placas de Petri, bien sean de vidrio
reutilizable y esterilizadas por calor seco, o de plstico desechable y
esterilizadas por xido de etileno (un gas esterilizante), constituyen el
principal apoyo del laboratorio microbiolgico.
Koch fue consciente de las implicaciones de sus mtodos de obtencin de
cultivos puros en relacin con el estudio de la sistemtica bacteriana.
Observ que sobre el medio slido expuesto a un objeto contaminante se
desarrollaban colonias con formas diferentes (diferan en color, forma,
tamao y otros caracteres, vase Figura 2) y que tales colonias se podan
perpetuar y diferenciar entre s por sus caractersticas particulares. Las
clulas de diferentes colonias diferan microscpicamente y a menudo
tambin en sus temperaturas ptimas de crecimiento o en sus
requerimientos nutricionales. Koch se dio cuenta de que todas estas
diferencias entre microorganismos equivalan a los criterios que los
taxonomistas haban establecido para la clasificacin de los organismos
superiores como animales y plantas. En palabras de Koch (traducidas del
20
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alemn) Toda bacteria
que mantenga las caractersticas que la diferencian de otras, cuando se
cultivan en el mismo medio y bajo las mismas condiciones, debera ser
designada como especie, variedad, forma o cualquier otra designacin
adecuada.
Koch tambin dedujo de sus estudios sobre cultivos puros que se poda
demostrar que determinados microorganismos tenan efectos especficos,
no solo para causar enfermedades sino tambin en lo que respecta a otras
capacidades. Tales ideas fueron muy importantes para la rpida aceptacin
de la microbiologa como una ciencia biolgica independiente a principios
del siglo XX.
El descubrimiento por Koch del medio de cultivo slido y su importancia en
la obtencin de cultivos puros tuvo influencia ms all del mbito de la
bacteriologa mdica. Sus aportaciones constituyeron los instrumentos
necesarios para el desarrollo de campos como el de la taxonoma
bacteriana, la gentica y otras disciplinas relacionadas. En conjunto, toda la
microbiologa tiene una enorme deuda de gratitud con Koch y sus
colaboradores por su intuicin al darse cuenta de la gran importancia de los
cultivos puros y por desarrollar algunos de los mtodos fundamentales en
microbiologa.
Figura 1. Fotografa coloreada a mano de colonias formadas sobre agar
realizada por
Walter Hesse, un colaborador de Robert Koch. Las colonias corresponden a
hongos (mohos) y bacterias que se obtuvieron en estudios iniciados por
Hesse sobre el contenido microbiolgico del aire de Berln, Alemania, en
1882.
Tomado de Hesse, W. 1884 Ueber quentitative Bestimmung der in der Luft
enthaltenen
Mikroorganismen,en Struck (ed.), Mittheilungen aus dem Kaiserlichen
Gesundheitsamte. August Hirschwald.
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Figura 2. Fotografa de una placa de Petri con colonias de bacterias marinas.
Cada
colonia contiene millones de clulas que se originan de una sola clula
inicial.
Robert Koch estableci criterios para el estudio de microorganismos
infecciosos y desarroll los primeros mtodos para hacer crecer y obtener
cultivos puros de microorganismos.
- Cmo diferencian los postulados de Koch entre causa y efecto en una
enfermedad?
- Qu ventajas ofrecen los medios slidos para el cultivo de
microorganismos?
- Qu es un cultivo puro?
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10. Diversidad microbiana y el surgimiento de la
microbiologa general
A medida que la microbiologa progres del siglo XIX al XX, el enfoque inicial de
esta ciencia sobre aspectos mdicos se ampli hasta incluir estudios sobre la
diversidad microbiana en el suelo y en las aguas y abarcar los procesos metablicos
que los microorganismos llevan a cabo en estos hbitats. Esto supuso el comienzo
de la microbiologa general, que es un trmino que incluye principalmente los
aspectos no mdicos de la microbiologa. En esta poca destacan dos figuras
importantes, el holands Martinus Beijerinck y el ruso Sergei Winogradski.
Martinus Beijerink y la tcnica de los cultivos de enriquecimiento
Martinus Beijerinck (1851-1931) fue un profesor de la Escuela Politcnica de Delft,
Holanda. En sus inicios tuvo una formacin botnica y lleg a la microbiologa a
travs del estudio de la microbiologa de las plantas. La aportacin ms importante
de Beijerinck al campo de la microbiologa fue la formulacin de la tcnica del
cultivo de enriquecimiento. Por esta tcnica los microorganismos se aslan de
muestras naturales de un modo muy selectivo mediante la manipulacin de las
condiciones nutricionales y de incubacin. El xito de la tcnica propuesta por
Beijerink se demostr cuando Winogradsky, despus de descubrir el proceso de
fijacin de nitrgeno, fue capaz de aislar por enriquecimiento la bacteria aerobia
fijadora de nitrgeno Azotobacter (Figura 1.17)
Dibujo realizado por la hermana de Beijerinck, Henriette Beijerinck, mostrando
clulas de Azotobacter chroococcum. Beijerinck utiliz estos dibujos para ilustrar
sus clases.
Utilizando la tcnica de cultivos de enriquecimiento, Beijerinck aisl los primeros
cultivos puros de muchos microorganismos del suelo y del agua, como las bacterias
sulfatoreductoras y las oxidantes de azufre, las bacterias fijadoras de nitrgeno de
los ndulos radiculares, diversas especies de Lactobacillus, algas verdes, varias
bacterias anaerobias, y muchas otras. En sus estudios sobre la enfermedad del
mosaico del tabaco, Beijerinck puso de manifiesto, mediante el uso de tcnicas de
filtracin selectiva, que el agente infeccioso (un virus) no era una bacteria sino algo
ms pequeo que se incorporaba en las clulas vivas de las plantas. Con este
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destacado trabajo, Beijerinck no slo describi el primer virus sino que tambin
estableci los principios bsicos de la virologa.
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11. Microbiologa. Aislar bacterias
Sergei Winogradsky y el concepto de quimiolitotrofa
Sergei Winogradsky (1856-1953) mostr inters por temas cientficos similares a los
de Beijerinck y tambin logr aislar o al menos enriquecer con xito varias bacterias
importantes presentes en muestras naturales. En particular, Winogradsky se interes
por las bacterias del suelo implicadas en los ciclos del nitrgeno y del azufre, como
las bacterias nitrificantes y las bacterias rojas sulfreas (Figura 1.18). Demostr que
existan determinadas bacterias relacionadas con transformaciones biogeoqumicas
especficas.
Figura 1.18 Dibujos coloreados a mano de clulas de bacterias fotosintticas rojas
del azufre. Los dibujos originales fueron realizados por Sergei Winogradsky hacia
1887 y luego copiados y coloreados a mano por su esposa Hlne. Las clulas
marcadas como Figuras 3 y 4 representan clulas del gnero Chromatium, como C. okeni i
okeni i.
Por ejemplo, las bacterias que intervienen en el cilco del ni trgeno no intervienen en
el ciclo del azufre y viceversa. Adems, los estudios de Winogradsky sobre la
biologa de estos microorganismos revel la significacin metablica de las
transformaciones biogeoqumicas que llevaban a cabo. En este contexto, a lo largo
de sus estudios sobre las bacterias oxidantes del azufre propuso el concepto de
quimio litotrofa, es decir, la oxidacin de compuestos inor gnicos acoplada a la
obtencin de energa utilizable (Figura 1.19a). Adems, estudiando el proceso de
nitrificacin (oxidacin del amonaco a nitrato) lleg a la conclusin de que las
bacterias nitrificantes responsables de este hecho obtenan su carbono del CO2 del
aire, es decir que, como las bacterias fottrofas, eran auttrofas (Figura 1.19a).
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Los principales conceptos desarrollados
por
Sergei Winogradsky. (a) Quimiolitotrofa
y quimioautotrofa. La oxidacin de
compuestos azufrados o nitrogenados
proporciona energa (ATP) y las clulas
obtienen carbono del CO2. La fotografa
de la izquierda representa la bacteria del
azufre Acromatium y la de la derecha a
Nitrobacter, una bacteria que realiza el
pri mer paso (NH3>NO2 ) de l a
nitrificacin.
(b) Fijacin de nitrgeno. Este
proceso consume ATP pero
permite a la clula utilizar como
fuente de nitrgeno el nitrgeno
atmosfrico (N2) para sus
necesidades de nitrgeno. La
fotografa muestra a Azotobacter,
una bacteria
aerobia fijadora de nitrgeno
Usando un mtodo de enriquecimiento, Winogradsky tambin aisl la primera
bacteria fijadora de nitrgeno, la bacteria anaerobia Clostridium pasteurianum, y
desarroll la nocin de fijacin de nitrgeno (Figura 1.19b).
Aos ms tarde, Beijerinck hizo uso de este descubrimiento para lograr el
aislamiento de bacterias fijadoras de nitrgeno pero aerobias (Figura 1.17).
Winogradsky lleg a ser casi centenario y public numerosos trabajos junto con la
importante monografa Microbiologie du Sol (Microbiologa del suelo). Esta obra,
que es un verdadero hito en la historia de la microbiologa, contiene dibujos
originales de muchos de los microorganismos que haba logrado aislar a lo largo de
su carrera (Figura 1.18).
Beijerinck y Winogradsky estudiaron las bacterias del suelo y del agua y
desarrollaron la tcnica del cultivo de enriquecimiento para el aislamiento
de varios microorganismos. Durante este perodo aparecieron nuevos e
importantes conceptos, como los cultivos de enriquecimiento, la
quimiolitotrofa, la quimioautotrofa, y la fijacin de nitrgeno.
-Qu es la tcnica del cultivo de enriquecimiento.
-Qu informacin de la Figura 1.19 indica que la oxidacin del azufre y la
nitrificacin son procesos quimiolitotrficos (productores de energa) y que
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la fijacin de nitrgeno no lo es?
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12. Microbiologa moderna
La Era Moderna de la microbiologa
Durante el siglo XX la microbiologa experiment un rpido desarrollo en dos
direcciones distintas pero complementarias, una bsica y otra aplicada. En dicho
perodo aparecieron nuevos instrumentos de estudio y la ciencia microbiolgica
experiment una madurez que di origen a nuevas subdisciplinas. Algunas de stas
fueron puramente bsicas y otras puramente aplicadas, pero la mayora tenan tanto
aspectos novedosos de descubrimiento (bsicas) como orientaciones a la solucin
de problemas (aplicadas). La Tabla 1.1 resume algunos de los ms importantes
logros de la microbiologa en sus primeros 300 aos de existencia. La Figura 1.20
muestra la secuencia temporal de los principales descubrimientos desde 1985 hasta
nuestros das.
Origen de las principales ramas de la microbiologa aplicada
Los progresos de Robert Koch en el conocimiento de la naturaleza de las
enfermedades infecciosas y en el cultivo de microorganismos patgenos en el
laboratorio actuaron como catalizadores que condujeron a la expansin de la
microbiologa mdica y la inmunologa, que son ramas de la microbiologa actual.
Los estudios en estas reas dieron como resultado el descubrimiento de muchas
nuevas bacterias patgenas para el hombre y otros animales, as como el
establecimiento de los mecanismos por los que estos patgenos infectan el cuerpo
o son controlados por las defensas del mismo. Otros progresos aplicados en el
campo de la microbiologa agrcola fueron impulsados por los descubrimientos de
Beijerinck y Winogradsky y favorecieron la comprensin de los procesos microbianos
que ocurren en el suelo, como la fijacin de nitrgeno, y que son beneficiosos para
el crecimiento de las plantas (Figura 1.19b). Posteriormente, los estudios sobre
microbiologa del suelo aportaron descubrimientos como los antibiticos y otros
compuestos importantes. Este hallazgo abri el campo de la microbiologa
industrial, es decir, el crecimiento de microorganismos a gran escala para la
produccin de productos comerciales.
Los avances registrados en la microbiologa del suelo tambin constituyeron una
base slida para el estudio de los procesos microbianos que ocurren en lagos, ros y
ocanos, que se agrupan en el rea de la microbiologa acutica y la microbiologa
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marina. Una rama de la microbiologa acutica se centra en los procesos de
tratamiento de aguas residuales y en el suministro de agua potable para consumo
humano. La microbiologa marina goza en la actualidad de una gran popularidad
porque encierra muchas posibilidades para el estudio de la biodiversidad y de las
actividades de los microorganismos marinos, y sobre todo por el reconocimiento de
que tales microorganismos marinos probablemente controlan muchos parmetros
globales crticos, como el clima y la composicin de la atmsfera. A medida que fue
creciendo el inters por la biodiversidad y las actividades microbianas fue surgiendo
la ecologa microbiana en los aos 1960-70, que en la actualidad est
experimentando una segunda edad de oro facilitada por la introduccin de nuevas
tcnicas moleculares, particularmente las derivadas de la genmica. Estas poderosas
tcnicas permiten a los eclogos microbianos definir la biodiversidad y las
actividades de comunidades microbianas muy complejas.
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13. Ramas cientficas bsicas de la microbiologa
( 1/ 2)
El siglo XX ha sido testigo del desarrollo de muchas subdisciplinas a partir de la
microbiologa como ciencia bsica.
Desde mediados de siglo se han cultivado muchos microorganismos nuevos,
originando un refinamiento considerable de la sistemtica microbiana, que es la
ciencia que agrupa y clasifica a los microorganismos. Este desarrollo ha culminado
con la construccin de rboles filogenticos de los seres vivos, como comentaremos
en el siguiente captulo. La ecologa microbiana ha permitido estos progresos
revelando, en muchos casos sin cultivar realmente los organismos, que existe un
ampio mundo inexplorado de diversidad microbiana en prcticamente cada hbitat
que se examina. El estudio de los nutrientes que requieren los microorganismos y
los productos que originan dieron lugar al rea de la fisiologa microbiana.
Por otra parte, los avances registrados en el conocimiento de la estructura fsica y
qumica de la clula (citologa) y las enzimas microbianas junto a las reacciones que
llevan a cabo ( bioqumica microbiana) han influido profundamente en la
microbiologa actual.
Un rea de investigacin bsica que se desarroll rpidamente desde mediados del
siglo XX, fue la gentica bacteriana, disciplina que se ocupa de la herencia y la
variacin en bacterias. Aunque a principios de siglo se tenan algunas ideas sobre la
variacin bacteriana, hubo que esperar hasta el descubrimento del intercambio
gentico en bacterias, alrededor de 1950, para que la gentica bacteriana llegara a
constituir realmente un intenso campo de estudio. La gentica, la bioqumica y la
fisiologa bacteriana se desarrollaron fundamentalmente hacia mediados de siglo
compartiendo races comunes, e, incluso hoy da, en muchos casos, dedican su
atencin a las mismas cuestiones cientficas. Desde principios de los aos sesenta
estos campos han permitido un conocimiento avanzado del DNA, el RNA y la
sntesis proteica.
La aparicin de la biologa molecular se debe en gran medida a los estudios de la
gentica bacteriana (Figura 1.20)
El estudio de los virus, que constituye la virologa, tambin apareci en el siglo XX.
Aunque Beijerinck descubri el primer virus hace ms de 100 aos, la verdadera
naturaleza de los virus no se conoci hasta mediados del siglo XX. Una gran parte
de este trabajo comprende el estudio de los virus que infectan bacterias, los
llamados bacterifagos. El descubrimiento de que la infeccin vrica era anloga a
una transferencia gnica fue un hallazgo importante que permiti establecer las
relaciones entre virus y clulas a partir de investigaciones realizadas con
bacterifagos. En la actualidad, los virus animales y vegetales ocupan una posicin
central dentro de la virologa debido al creciente nmero de virus patgenos y al
reconocimiento de la enorme diversidad gentica entre los virus.
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14. Ramas cientficas bsicas de la microbiologa
( 2/ 2)
Tabla 1.1 Trescientos aos de microbiologa: algunos trabajos clave en
mi crobi ol oga, 1684-2000a
1684 Antonie van Leeuwenhoek. Descubrimiento de las bacterias
1798 Edward Jenner.Vacunacin contra la viruela
1857 Louis Pasteur. Microbiologa de la fermentacin lctica
1860 Louis Pasteur. Funcin de las levaduras en la fermentacin alcohlica
1864 Louis Pasteur. Fin de la controversia sobre la generacin espontnea
1867 Robert Lister. Principios antispticos en ciruga
1876 Ferdinand Cohn. Descubrimiento de las endosporas
1881 Robert Koch. Mtodos de estudio de bacterias en cultivo axnico
1882 Robert Koch.* Etiologa de la tuberculosis
1882 lie Metchnikoff.* Fagocitosis
1884 Robert Koch. Etiologa del clera; postulados de Koch
1884 Christian Gram. Mtodo de la tincin de Gram
1885 Louis Pasteur. Vacuna contra la rabia
1889 Sergei Winogradsky. Concepto de quimiolitotrofa
1889 Martinus Beijerinck. Concepto de virus
1890 Emil von Behring.* y Shibasaburo Kitasato Antitoxina diftrica
1890 Sergei Winogradsky. Autotrofa en los quimiolittrofos
1901 Marinus Beijerinck. Mtodo de cultivo de enriquecimiento
1901 Karl Landsteiner.* Grupos sanguneos humanos
1908 Paul Ehrlich.* Agentes quimioterapeticos
1911 Francis Rous.* Primer virus oncognico
1915/17 Frederick Twort y Felix dHerelle. Virus bacterianos (bacterifagos)
1928 Frederick Griffith. Transformacin en neumococos
1929 Alexander Fleming.* Descubrimiento de la penicilina
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1931 Cornelius van Niel. H2S (sulfuro) como donador de electrones en la
fotosntesis anoxignica
1935 Gerhard Domagk.* Sulfamidas
1935 Wendall Stanley. Cristalizacin del virus del mosaico del tabaco
1941 George Beadle.* y Edward Tatum* Hiptesis un gen-una enzima
1943 Max Delbruck* y Salvador Luria*. Herencia de caracteres genticos en
bacterias
1944 Oswald Avery, Colin Macleod y Maclyn McCarthy. El DNA es el material
gentico
1944 Selman Waksman* y Albert Schatz. Descubrimiento de la
estreptomicina
1946 Edward Tatum y Joshua Lederberg.* Conjugacin bacteriana
1951 Barbara McClintock* Descubrimiento de los transposones
1952 Joshua Lederberg y Norton Zinder Transduccin bacteriana
1953 James Watson*, Francis Crick*, Rosalind Franklin Estructura del DNA
y Maurice Wilkins*
1959 Arthur Pardee, Franois Jacob*, Jacques Monod*, Regulacin gnica
por protenas represorasAndr Lwoff*
1959 Rodney Porter*. Estructura de las inmunoglobulinas
1959 F. Macfarlane Burnet. Teora de la seleccin clonal
1960 Franois Jacob, David Perrin, Concepto de opern Carmon Sanchez,
Jacques Monod
1960 Rosalyn Yalow* y Salomon Bernson. Desarrollo del radioinmunoensayo
(RIA)
1961 Sydney Brenner*, Franois Jacob*. mRNA y ribosomas en la sntesis
proteica
Matthew Meselson
1966 Marshall Nirenberg* y H. Gobind Khorana*. Descubrimiento del cdigo
gentico
1967 Thomas Brock. Bacterias capaces de crecer en agua en ebullicin
1969 Howard Temin*, David Baltimore*. Descubrimiento de retrovirus y
transcriptasa inversay Renato Dulbecco*
1969 Thomas Brock y Hudson Freeze. Thermus aquaticus, fuente de la DNA
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1969 Thomas Brock y Hudson Freeze. Thermus aquaticus, fuente de la DNA
polimerasa Taq
1970 Hamilton Smith* y David Nathans*. Enzimas de restriccin
1973 Stanley Cohen, Annie Chang, Robert Helling, Tcnicas de DNA
recombinante
Herbert Boyer y Paul Berg*
1975 Georges Kohler* y Cesar Milstein*. Anticuerpos monoclonales
1976 Susumu Tonegawa*. Reordenacin en genes de inmunoglobulinas
1977 Carl Woese** y Geoge Fox. Descubrimiento de Archaea
1977 Fred Sanger*, Steven Niklen y Alan Coulson. Mtodos de secuenciacin
del DNA
1981 Stanley Prusiner*. Caracterizacin de los priones
1982 Karl Stetter .Primeros cultivos de hipertermfilos
1982 Barry Marshall* y Robin Warren*. Helicobacter pyloricomo causa de
lceras gstricas
1983 Luc Montagnier. Descubrimiento del VIH como causa del SIDA
1985 Kary Mullis*. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
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15. Biologa molecular
La Era de la biologa molecular
Hacia 1970, el avance de los conocimientos sobre la fisiologa, la bioqumica y la
gentica molecular hizo posible la manipulacin experimental del material gentico
de las clulas hasta el punto de poder trasplantar a una bacteria DNA de otro
organismo y recoger las protenas codificadas por ese DNA exgeno. Esto llev a la
aparicin de la biotecnologa. Casi al mismo tiempo se desarrollaron tcnicas de
secuenciacin de cidos nucleicos, y los efectos de la aplicacin de esta nueva
tecnologa se notaron en todas las reas de la biologa. En microbiolo ga, la
secuenciacin de DNA revel las relaciones genticas (evolutivas) entre las bacterias,
introduciendo conceptos revolucionarios en la clasificacin de los microorganismos.
La secuenciacin tambin condujo hacia los aos 1990 a la aparicin de la genmica
genmica. La gran cantidad de informacin disponible en la actualidad sobre genes
y genomas ha impulsado importantes avances en medicina, agricultura,
biotecnologa y muchas otras reas. El dinmico campo de la genmica ha dado
origen, a su vez, a otras disciplinas como la protemica y la metabolmica, que
estudian respectivamente los modelos de expresin proteica y metablica de las
clulas.
Nuevas fronteras
Durante los 325 aos transcurridos desde las observaciones de van Leeuwenhoek, la
microbiologa no slo ha aportado un profundo y brillante conocimiento de la
biologa de los microorganismos, sino que ha abordado nuevos retos cientficos. Por
un lado, la aparicin de nuevas enfermedades emergentes sin previo aviso, como el
SARS (sndrome respiratorio agudo grave) y la gripe aviar, parecen desafiar nuestro
sofisticado conocimiento de las enfermedades infecciosas. Por otro, los nuevos
avances de la microbiologa, como la genmica, nos proporcionan un conocimiento
sin precedentes sobre el funcionamiento de las clulas al nivel ms fundamental.
La investigacin microbiolgica est a punto de definir el genoma minimalista, es
decir, el complemento mnimo de genes necesarios para una clula viva.
Cuando este objetivo se logre, seremos capaces de definir exactamente todos los
prerrequisitos para la vida, al menos en trminos bioqumicos, y tal vez estemos
entonces cerca de poder crear clulas vivas en el laboratorio.
Como expres el bilogo evolutivo Stephen Jay Gould, vivimos en la Edad de las
Bacterias. Nos espera un tiempo prometedor y muchas cosas que aprender de la
microbiologa. Hay que continuar en contacto con esta ciencia porque guarda
muchas cosas para el futuro.
En la segunda parte del siglo xx, la microbiologa bsica y la aplicada se
desarrollaron en paralelo hasta entrar en la era actual de la microbiologa
molecular.
- Indique en cada caso la rama o subdisciplina de la microbiologa que trata
sobre: metabolismo, enzimologa, sntesis de cidos nucleicos y protenas,
ambientes microbianos naturales, clasificacin microbiana, y estructura
celular de los microorganismos.
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16. Microbiologa. Glosario y repaso
Glosario
Clula: unidad fundamental de la materia viva.
Citoplasma: porcin fluida de una clula limitada por la membrana celular
exceptuando el ncleo (si existe).
Cultivo de enriquecimiento: mtodo para aislar microorganismos usando
medios de cultivo y condiciones de incubacin especiales.
Cultivo puro o axnico: cultivo que contiene una nica clase de
microorganismos.
DNA:cido desoxirribonucleico, material hereditario de las clulas y de
algunos virus.
Ecologa microbiana: estudio de los microorganismos en sus ambientes
naturales.
Ecosistema: conjunto formado por los organismos ms su medio externo.
Enzima: protena cataltica que funciona acelerando las reacciones qumicas
celulares.
Estril: ausencia de cualquier organismo vivo y de virus.
Generacin espontnea: hiptesis que supone que los organismos vivos se
pueden originar de materia inerte.
Genoma: conjunto completo de los genes de un organismo.
Genmica: identificacin y anlisis de genomas.
Hbitat: lugar de residencia de una poblacin microbiana en un medio.
Macromolculas:protenas, cidos nucleicos, lpidos y polisacridos de una
clula.
Membrana citoplasmtica: barrera semipermeable que separa el interior de
la clula (citoplasma) del medio externo.
Metabolismo: conjunto de reacciones bioqumicas de una clula.
Microorganismo:organismo microscpico constituido por una sola clula o
varias, incluyendo los virus.
Patgeno: microorganismo que causa enfermedad.
Postulados de Koch: conjunto de criterios que demuestran que un
microorganismo determinado causa una enfermedad especfica.
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Quimiolitotrofa:forma de metabolismo que usa compuestos inorgnicos
como fuente de energa.
Ribosomas: estructuras compuestas por RNA y protenas donde se fabrican
nuevas protenas.
RNA:cido ribonucleico, implicado en la sntesis de protenas como RNA
mensajero, RNA de transferencia y RNA ribosmico.

Cules fueron las contribuciones ms importantes de Hooke y de van


Leeuwenhoek a la microbiologa? Cmo contribuy Ferdinand Cohn a la
bacteriologa?
Explique el fundamento del tipo de matraz que utiliz Pasteur en los
estudios sobre generacin espontnea
Qu es un cultivo puro y cmo puede obtenerse? Por qu el conocimiento
de la obtencin de cultivos puros fue tan importante para el desarrollo de la
microbiologa?
Cules son los postulados de Koch y cul fue su influencia en el desarrollo
de la microbiologa? Son todava vlidos en la actualidad?
Describa una contribucin importante a la microbiologa del cientfico
pionero Martinus Beijerinck
Qu conceptos microbiolgicos importantes se deben a Sergei
Winogradsky?
Qu avances fundamentales han ocurrido en la microbiologa durante los
ltimos 60 aos?
Ejercicios prcticos
1.Los experimentos de Pasteur sobre la generacin espontnea tuvieron una
enorme importancia en el avance de la microbiologa a travs de su impacto
en la metodologa, las ideas sobre el origen de la vida y las tcnicas de
conservacin de alimentos, entre otros aspectos. Comente brevemente la
influencia de sus experimentos en cada uno de los temas sealados.
2.Describa las diferentes pruebas que Robert Koch us para asociar de
modo definitivo la bacteria Mycobacterium tuberculosis con la enfermedad
de la tuberculosis. Sin la disponibilidad de alguno de los procedimientos
que l desarroll, habra sido posible establecer estas pruebas para la
tuberculosis?
3.Imagine que por algn motivo los microorganismos desaparecieran
repentinamente de la Tierra. Considerando lo tratado en este captulo, por
qu piensa que los animales tambin desapareceran?, qu ocurrira con las
plantas? Por el contrario, si desaparecieran todos los organismos superiores,
qu datos de la Figura 1.6 indican que los microorganismos no seguiran
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un destino similar?
Nota: Este curso es un fragmento del libro: "Brock. Biologa de los microorganismos
12ED", de los autores Antonio Colmenar Michael T. Madigan, John M. Martinko, Paul
V. Dunlap y David P. Clark (SBN: 9788478290970). Puedes descubrir y adquirir
libros de Pearson en: www.jetlibros.com
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