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GRADO: 4 GRUPO: 2

EQUIPO:
6
INTEGRANTES:
CANDELARIO MARTNEZ ISRAEL
FLORES DE JESS ISMAEL
MARMOLEJO JUREZ ERICK E.
OLVERA ORTZ AZUCENA
RAMREZ ROJAS JAIRO OMAR

PRACTICA 10:
EXTRACTO ETREO

FECHA:
Martes 13-Mayo-2014




UNIVERSIDAD AUTNOMA
CHAPINGO
DEPARTAMENTO DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL







INTRODUCCIN
La creciente evolucin en el comercio internacional y el avance tecnolgico han
estimulado la necesidad de adquirir mayor informacin acerca de la calidad y la
composicin de los alimentos que ingerimos, con distintos propsitos, tanto de
estudio como para salud pblica. Asimismo, hay tambin mayor comprensin de la
utilizacin de nutrientes por el ganado, lo que ha llevado al desarrollo de
complejos modelos de gestin alimenticia y prediccin del rendimiento de los
animales domsticos. En esta prctica se pretende analizar algunas de las ms
utilizadas y las ms importantes a la hora de examinar el contenido graso de los
alimentos.
LIPIDOS:
Corresponde a un grupo grande y heterogneo de sustancias de origen biolgico,
formados bsicamente por O2 y H2. Se caracteriza por ser prcticamente
insolubles en agua y fcilmente solubles en disolventes no polares como el ter,
cloroformo, benceno, acetona, entre otros. Junto con las protenas y
carbohidratos, constituyen los principales componentes estructurales de los
alimentos.
Estos desempean diversas funciones biolgicas actuando como: formas de
transporte y almacenamiento del combustible catablico, componentes
estructurales de las membranas, cubierta protectora sobre la superficie de muchos
organismos, como componentes de la superficie celular relacionados con el
reconocimiento de las clulas, la especificidad de especie y la inmunidad de los
tejidos, adems de formar parte de algunas vitaminas y hormonas.

*METODO DE ANALISIS DE LIPIDOS; EXTRACTO ETREO:
La grasa bruta o extracto etreo corresponde al residuo obtenido de la
extraccin con ter etlico u otro disolvente no polar, de una muestra seca y
homogeneizada. Se refiere al conjunto de las sustancias extradas que
incluyen, adems de los steres de los cidos grasos con el glicerol, a los
fosfolpidos, las lecitinas, los esteroles, las ceras, los cidos grasos libres,
los carotenos, las clorofilas y otros pigmentos.
*TER DE EXTRACCION:
El mtodo clsico para la determinacin de lpidos en los alimentos para
animales es la utilizacin de ter como mtodo de extraccin, obteniendo
de este modo el extracto etreo.

La determinacin del extracto etreo es por medio del mtodo de
Weende o anlisis qumico proximal, siendo el extracto etreo uno de las
cuantas fracciones a determinar (adems de materia seca, cenizas,
protena cruda y fibra cruda).
En la AOAC especifica que el solvente a usar en el mtodo es el ter
dietlico, sin embargo, muchos laboratorios utilizar el ter de petrleo o
hexano. Los hexanos al ser menos polares, extraen menor porcentaje de
los lpidos de la membrana un valor ms bajo (96,7% del valor de ter
dietlico), Sin embargo, ter dietlico tambin extrae algunos componentes
solubles en agua, como la urea y hexosas


OBJETIVOS

I. Recordar la estructura, y funciones de los lpidos.
II. Comprender, que el anlisis de grasas (o lpidos) en un alimento es
un aspecto nutricional de gran exigencia hoy en da, por lo cual
debemos identificar las tcnicas de extraccin de lpidos (llamado
extracto etreo).
III. Conocer la base terica, para poder entender el proceso de
extraccin de lpidos.
IV. Llevar a cabo el proceso de extraccin etrea a la muestra a la cual
se ha determinado humedad, y cenizas, para realizar una tabla
comparativa; para ir estableciendo un pequeo anlisis del producto
asignado.

BASE TERICA

Contenido de lpidos en los alimentos:
Manteca, aceites: cerca de 100%
Mantequilla y margarina: 80%
Aderezos de ensalada: 40 - 70%
Almendras: 54%
Nueces: 64%
Leche: 3.5 - 4.3%
Huevos: 12%



Mtodos de extraccin de grasas por solventes semi-continua
El nivel del solvente sube en la cmara de extraccin y rodea
completamente a la muestra.
Luego regresa a manera de sifn al matraz de ebullicin.

Extraccin y cuantificacin de lpidos

1.- Mtodo de Soxhlet (James, 1999)
a) Colocar a peso constante un matraz bola de fondo plano con perlas o
piedras de ebullicin en la estufa a 100C, aproximadamente 2 hrs.
b) Pesar de 4 a 5 g de muestra sobre un papel, enrollarlo y colocarlo en un
cartucho de celulosa, tapar con un algodn (No apretar el algodn contra la
muestra) y colocar el cartucho en el extractor.
c) Conectar el matraz al extractor, en el que se debe encontrar el cartucho
con la muestra, y posteriormente conectar ste al refrigerante. (No poner
grasa en las juntas). Agregar dos cargas del disolvente (generalmente ter
etlico) por el refrigerante y calentar el matraz con parrilla a ebullicin suave.
Para verificar que se ha extrado toda la grasa, dejar caer una gota de la
descarga sobre papel filtro, al evaporarse el disolvente no debe dejar
residuo de grasa.
d) Una vez extrada toda la grasa, quitar el cartucho con la muestra
desengrasada, seguir calentando hasta la casi total eliminacin del
disolvente, recuperndolo antes de que se descargue. Quitar el matraz y
secar el extracto en la estufa a 100C por 30 min., enfriar y pesar.
e) Calcular el porcentaje de grasa.

2.-Mtodo de Goldfisch (Pomeranz, 2000)
a) Colocar un vaso para Goldfisch en la estufa a 100C hasta peso constante,
aproximadamente 2 hrs.
b) Pesar de 4 a 5 g de muestra sobre un papel, enrollarlo y colocarlo en un
cartucho de celulosa, tapar con un algodn. Situar el cartucho en un
recipiente con el fondo perforado y colocarlo en el sostenedor del equipo.
c) Adicionar en el vaso para Goldfisch aproximadamente 40 mL del disolvente
ter etlico) y colocarlo en el equipo mediante un anillo de hierro con
empaque de hule. Subir la parrilla girando hacia un lado y al contrario.
Calentar hasta la extraccin completa de la grasa. Para verificar que se ha
extrado toda la grasa, dejar caer una gota de la descarga sobre papel filtro,
al evaporarse el disolvente no debe dejar residuo de grasa.
d) Al finalizar, cambiar el sostenedor del cartucho por un recipiente sin
perforacin y calentar de nuevo para recuperar el disolvente del vaso.
e) Quitar el vaso del equipo y secar el extracto en una estufa a 100C por 30
min., enfriar y pesar.
f) Calcular el porcentaje de grasa.

3.-Mtodo por lotes (en batch)
a) Poner a peso constante un matraz bola de fondo plano con perlas o
piedras de ebullicin en la estufa a 100C, aproximadamente 2 horas.
b) Pesar de 5 a 10 g de muestra en un matraz Erlenmeyer de 250 mL.
Adicionar 40 mL de disolvente. Agitar durante 10 min, dejar sedimentar y
filtrar la parte superior sobre el matraz bola.
c) Recuperar el residuo y adicionarle 40 mL del disolvente, agitar, dejar
sedimentar y filtrar, juntar este filtrado con el anterior.
d) Repetir la extraccin hasta la extraccin total de la grasa. Para verificar que
se ha extrado toda la grasa, dejar caer una gota del filtrado sobre papel
filtro, al evaporarse el disolvente no debe dejar residuo de grasa.
e) Evaporar el disolvente en rotavapor, secar el extracto lipdico en la estufa a
100C durante 30 min.
f) Calcular el porcentaje de grasa.

4.-Mtodo Mojonier (James, 1999)
a) Pesar 10g de muestra y colocarla en el tubo de extraccin Mojonier
b) Adicionar 1 mL de hidrxido de amonio 0.88 y mezclar. Adicionar 10 mL de
etanol, mezclar y enfriar.

CLCULOS
%GRASA=gr. GRASA EN LA MUESTRAx100
gr. EN LA MUESTRA SECA

c) Adicionar 25 mL de ter etlico, tapar el tubo y agitar vigorosamente por un
minuto. Enfriar, adicionar 25 mL de ter de petrleo, agitar vigorosamente
por 30 s). Dejar reposar por 30 min o hasta que est completamente
separada la fase orgnica. Si es necesario, adicione agua destilada para
establecer una interface entre los 2 lquidos en la parte ms angosta del
tubo.
d) Decantar la fase etrea en un matraz bola previamente puesto a peso
constante.
e) Repetir la extraccin 3 veces usando una mezcla de 5 mL de etanol, 25 mL
de ter etlico y 25 mL de ter de petrleo. Adicionando el extracto en el
matraz bola.
f) Evaporar el disolvente en rotavapor, secar el extracto lipdico en la estufa a
100C durante 1 h y pesar.
g) Calcular el porcentaje de grasa.

5.-Mtodo Rose-Gottlieb (James, 1999)
Colocar a peso constante un matraz bola de fondo plano con perlas o piedras
de ebullicin en la estufa a 100C, aproximadamente 1 h.

A) Pretratamiento a la muestra
a) Leche. Pesar 10-11g de muestra en un tubo Rose Gottlieb. Adicionar 1
mL de hidrxido de amonio 0.88 y mezclar. Dejar reposar toda la noche a
temperatura ambiente.
b) Leche en polvo. Pesar 1g de muestra en un tubo de extraccin Rose
Glottlieb.
Adicionar cuidadosamente 9 mL de agua y mezclar hasta que
desaparezcan los grumos.
Adicionar 1 mL de hidrxido de amonio 0.88 y mezclar. Dejar reposar
toda la noche a temperatura ambiente.
c) Crema. Pesar 2g de muestra eb un tubo de extraccin Rose-Gottlieb.
Adicionar 8 mL de una solucin de cloruro de sodio 0.5% (m/v). Adicionar 1
mL de hidrxido de amonio 0.88 y mezclar. Dejar reposar toda la noche a
temperatura ambiente.
d) Yogurts, helado y toffes. Pesar 4 g de muestra en un tubo Rose-Gottlieb.
Adicionar 6 mL de agua a 60C, agitar hasta dispersar la muestra. Adicionar
1.5mL de hidrxido de amonio 0.88 y mezclar. Dejar reposar toda la noche
a temperatura ambiente.

B) Extraccin de grasa
Adicionar 10 mL de etanol, mezclar y enfriar. Adicionar 15 mL de ter
etlico, tapar el tubo y agitar por un minuto. Enfriar, adicionar 15 mL
de ter de petrleo y agitar por un minuto. Dejar reposar por 30-60
min o hasta que la capa etrea est completamente separada.
Quitar el tapn, enjuagarlo y el cuello del matraz con 5 mL de una
mezcla de ter etlico: ter de petrleo (1:1). Insertar el tubo sifn,
recuperar el solvente en el matraz bola a peso constante, enjuagar el
tubo sifn con solvente recuperando este en el matraz.
Repetir la extraccin y lavados 2 veces.
Eliminar el solvente en el rotavapor, secar el matraz por 1h a 100C y
pesar.
Calcular el contenido de grasa.


Mtodos instrumentales de determinacin de grasas

1. Mtodo de baja resolucin por resonancia nuclear magntica.
2. Mtodo de absorcin por rayos x.
3. Mtodo dielctrico.
4. Mtodo por rayos infrarrojos.
5. Mtodo ultrasnico.
6. Mtodo colorimtrico.
7. Mtodo por medicin de densidad.

Importancia de la determinacin de grasas
Para propsitos de informacin de etiquetas nutricionales.
Para determinar si el alimento rene los requisitos de estndar de identidad
y es uniforme.
Para entender los efectos de las grasas y aceites en las propiedades
funcionales y nutricionales de los alimentos.


Ventajas del uso del ter de petrleo en la extraccin de grasas
Es selectivo para ms lpidos hidrofbicos.
Es ms barato.
Ms no higroscpico.
Menos inflamable que el etil ter.




RESULTADOS







Extracto etreo en base seca

2.5761 g 100%
0.4503 g (E.e) x

(Porcentaje del extracto etreo en base seca)



Extracto etreo en base hmeda
La frmula para la obtencin en base seca es la siguiente:




Donde:

= Porcentaje en base seca

=Porcentaje en base hmeda


Porcentaje de humedad de la muestra. (Determinado en la prctica de
humedad el cual es 3.2797%)
Despejando

tenemos la siguiente ecuacin:


Sustituyendo valores

(Porcentaje del extracto etreo en base


hmeda)
Resultados obtenidos
Peso cartucho vaco 3.3649 g
Peso del cartucho + muestra seca 5.9410 g
Peso del cartucho + muestra
despus del extracto etreo
5.4907 g
Prdida de peso 0.4503 g
Peso de la muestra 2.5761 g
Tabla 1.Pesos obtenidos en la prctica del extracto etreo

ANLISIS DE RESULTADOS
La muestra de garbanzo con chile en base seca obtenemos un
resultado de 17.48% del extracto etreo, esto significa que en 100g.
de la muestra estn contenidos 17.48 g. de lpidos y sustancias que
son miscibles en solventes orgnicos tal es el caso del solvente
utilizado (ter de petrleo).
La muestra en base hmeda nos da un resultado de 16.90% como
se puede observar este dato es menor en el porcentaje de extract
etreo, comparado con la muestra en base seca, esto se debe a
que la muestra hmeda contiene una importante cantidad de agua
haciendo que su masa aumente.
La diferencia del porcentaje de extracto etreo entre la muestra en
base hmeda es de 0.58%, con esta diferencia se pueden hacer
anlisis de extracto etreo en garbanzo con chile en base hmeda y
solo interpolar para obtener el porcentaje en base seca.
Ilustracin 1. Muestra en la capsula antes de la extraccin. Ilustracin 2. Extraccin por mtodo de Goldfisch.
Ilustracin 3. Mtodo de extraccin Soxhlet
Ilustracin 4. Muestra despus de la extraccin en
desecador, se encuentra a peso constante.
Comparando el resultado obtenido con las Tablas de composicin de
alimentos mexicanos del Instituto Nacional de Nutricin Salvador
Zubiran, el garbanzo seco tiene porcentaje de 6.04% de grasas
totales y el chile picante seco 6.40%, haciendo la suma obtenemos
12.44% por lo que el dato obtenido en la prctica de 17.48% se
aproxima a esta cantidad, no sabemos exactamente cul es la
proporcin de los componentes de la mezcla por tal motivo tenemos
este margen de error.

CONCLUSIONES

Los objetivos planteados al inicio de la prctica, se realizaron
exitosamente. Al inicio se record de forma rpida la estructura de
los lpidos, gracias a esto, se pudo entender, como es que se
pueden solubilizar (o aislar de la muestra).
Tambin notamos que la determinacin de las grasas en un
alimento, como requerimiento de calidad, es uno de las pruebas ms
importantes en el rubro agroindustrial.
Se explic de forma comprensible el mtodo de extraccin de lpidos,
comprobamos que es un mtodo sencillo, recalcando que siempre la
muestra a usar ya se le debi extraer la humedad, ya que de no ser
as, el agua forma una barrera, impidiendo el paso del ter, y con
esto evitando realizar una extraccin exitosa de los lpidos.
En nuestra experiencia, se presentaron algunos percances, ya que la
muestra que se haba secado en clases anteriores se perdi, por lo
que tuvo que volver a repetirse el experimento, tomando ms tiempo
del indicado. Pero sin ms detalles la prctica se realiz de buena
manera.
BIBLIOGRAFA

Comisin Nacional de Alimentacin. Instituto Nacional de
Nutricin Salvador Zubirn. Tablas de uso prctico del valor
nutritivo de los alimentos de mayor consumo en Mxico. Segunda
edicin revisada. Mxico 1992.
Fundamentos y tcnicas de anlisis de alimentos. Laboratorio de
alimentos 1, Departamento de alimentos y biotecnologa, Facultad de
Qumica. UNAM. 2007-2008. Consultado el 18/05/14. Disponible en:
http://compositae.files.wordpress.com/2013/02/fundamentosytecnicas
deanalisisdealimentos_12286.pdf
Determinacin de grasa cruda. Docencia UAM-1. 2009. Consultado
el 18/05/14. Archivo electrnico. Disponible en:
http://docencia.izt.uam.mx/lyanez/analisis/material_adicional/notasgr
asas.ppt