Laboratorio de Biologa

MITOSIS EN MERISTEMAS VEGETAL

Objetivo. Hacer una preparacin microscpica de clulas meristemticas de la
raz de cebolla
Materiales:
pices de cebolla.
HCl diluido.
Colorante aceto - orcena.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Papel toalla
Aguja de diseccin.
Introduccin
La divisin celular es el fenmeno citolgico por el que una clula origina dos
clulas hijas, cada una de las cuales recibe idntica informacin gentica.
Dentro de las funciones que realiza la clula eucarionte, dos de las ms
importantes: la regulacin y la reproduccin celular descansan en el ncleo.
El ncleo contiene la mayor parte de la informacin hereditaria de la clula, es
decir, las instrucciones necesarias para el desarrollo y el metabolismo de las
especies. Este organlo es el encargado de duplicar su informacin gentica
para transmitirla a las nuevas generaciones cuando la clula se reproduzca.

Los procesos que se manifiestan desde la formacin de una clula hasta su
propia divisin en dos hijas, son lo que se denomina ciclo celular. Este ciclo
se divide en dos etapas principales: la interfase y la divisin celular, de acuerdo con los sucesos
que se presentan en la clula. La interfase se caracteriza por una serie de procesos que implican la
fabricacin activa de molculas tales como las protenas y la duplicacin del DNA. Mientras que la
divisin celular consta de la mitosis o cariocinesis en la que ocurre la condensacin y separacin
de los cromosomas y de la citocinesis o divisin citoplsmica. La mitosis se subdivide segn los
cambios que presente el ncleo y la morfologa que presenten los cromosomas en:
profase, metafase, anafase y telofase.
El significado biolgico de la mitosis es asegurar la conservacin del patrimonio hereditario nuclear
en el proceso de formacin de un individuo adulto a partir de una clula inicial o cigoto.

Preparacin previa. Tres o cuatro
das antes de hacer la prctica se pone un bulbo de cebolla en un vaso de
precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo est
en contacto con el agua. no permita que la cebolla caiga dentro del recipiente
sino que quede suspendida sobre el agua (si es necesario, inserte unos palillos
de dientes en los lados de la cebolla para que la sostengan).
Al cabo de esos tres o cuatro das se habrn formado numerosas raicillas,
cuyos pices se utilizarn en esta prctica. Conviene realizar la prctica
cuando las raicillas todava no han crecido demasiado. Se debe cambiar el
agua del frasco por agua limpia, al menos dos veces, a los 3 y 4 das. La raz
de la cebolla debe de estar sumergida en agua hasta el momento de realizar la
prctica

Procedimiento:

1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su
longitud sea de unos 2 a 3 mm., ya que es en esta zona de la raz donde se
encuentran las clulas en divisin.

2. Enjuague los pices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.

3. Coloque las races en un plato Petri que contenga unos 3mL de HCl 1% por
7-8 min. (esto se hace para romper la pared celular).

4. Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porcin del pice
de raz que posea un tejido blanquecino (casi 2-3 mm del extremo de la raz) y
deseche el resto.

5. Transferir los pices a agua destilada y dejarlos all 30 segundos
(enjuague).

6. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos
gotas de aceto-orcena sobre ste.

7. Coloque un cubreobjetos sobre el tejido y caliente la muestra suavemente
por 1 minuto, por medio de toques intermitentes sobre la superficie de un plato
de calentamiento o "hot plate" (durante este tiempo vigile que el tejido
permanece humedecido con el colorante, no permita que hierva ni que se
seque; agregue ms colorante si es necesario). Esta etapa es opcional (el
calentamiento intensifica la tincin).

8. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione fuerte y
cuidadosamente por medio de un borrador de lpiz (esta tcnica se llama
"extendido por aplastamiento" o "squach). Recuerde que mientras est ms
aplastado, las clulas se separarn ms unas de las otras y se encontrarn en
el mismo plano, distinguindose mejor las distintas etapas de mitosis.

9. Despus del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la
ayuda de una aguja de diseccin y agregue una gota adicional de aceto-
orcena; coloque nuevamente el cubreobjetos sobre la muestra.

10. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el rea
adecuada, luego pase a 40x para observar con detalles).

11. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, adems observe la apariencia de
las clulas que se encuentran en interface (aquellas que no estn en mitosis).
Realiza un conteo de campo.


RESULTADOS

Profase


Profase- Metafase


Metafase- Anafase


Telofase


ANLISIS DE RESULTADOS
1. Describe las etapas del ciclo celular.
Profase

Metafase
Anafase
Telofase
2. Explica las caractersticas de la mitosis.
proceso caracterstico de clulas diploides, que van a producir
nuevas clulas diploides.

Se presenta en clulas vegetales y animales
Se produce una duplicacin cromosmica y una divisin nuclear y
citoplasmtica en cada ciclo.
En cada ciclo se produce dos clulas hijas.
Cada una de las clulas hijas contiene el mismo nmero de cromosomas que
posee la clula madre.


3. Explica en que etapa del ciclo celular se encontraban la mayora de las
clulas observadas.
La mayora de las clulas se encontr en la Telofase.
4. Que etapas de la mitosis lograste observar?
Se logro observar la anafase
5. Por qu crees que se utilicen las partes en crecimiento de la cebolla
para observar la mitosis?
En un corte fino, tincionado correctamente, se puede observar este proceso ya
que por la presencia de pared celular, matriz intracelular y el ncleo, que en las
clulas de raz es, relativamente grande, se puede observar mejor este
proceso.
6. Para qu se utiliza la acetorcena, que funcin cumple en la preparacin?

la acetorceina es un colorante bsico, y por lo tanto tiene afinidad por los componentes cidos.


CONCLUSIONES
Si se cumplieron los objetos porque se pudo observar etapas de clula en las pices de la cebolla, lo
mas importante se pudo ver lo que se quera en el experimento.