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ISSN: 1677-2318

No. 02/06
Public. 16/10/2006
Artigo A
DESMISTIFICANDO A AO DO LACTATO NOS EENTOS DE
DO! M"SC"LA! TA!DIA IND"#IDA PELO E$E!C%CIO
F%SICO& P!OPOSTA DE "MA A"LA P!'TICA
Joaquim M. F. ANTUNES NETO; Patrcia MELO; Jairo Pinto AGOSTINHO FILHO; Nilda
Patrcia MAGALHES; Leonardo da Silva PILATTI; Mariana Ocanha SOLDER.
Faculdades Integradas Metropolitanas de Campinas (METROCAMP), curso de Educao
Fsica e Esporte. Laboratrio de Estudos Multidisciplinares do Estresse (LEME).
*joaquim_netho@yahoo.com.br
!ES"MO
Nosso estudo tem como objetivo desmistificar, para alunos de graduao que
cursam a disciplina Bioqumica do Exerccio Fsico, a ao do lactato nos eventos da
dor muscular tardia (DMT) induzida pelo exerccio fsico. Para tanto, realizamos um
exerccio de corrida exaustiva (3 corridas intensivas de 250 metros, em pista oficial de
400 metros, com intervalos de recuperao ativa de 150 metros de caminhada).
Participaram do exerccio 5 alunos (3 homens e 2 mulheres) com idade mdia de 212
anos. A tentativa foi desenvolver uma atividade no habitual e exaustiva, a fim de
elevar a concentrao de lactato sangnea e induzir um nvel de desconforto
muscular. Coletamos 3 mL de sangue antes do esforo fsico (valor controle - CO),
imediatamente aps (T0h), duas horas aps (T2h) e quatro horas aps a realizao da
corrida (T4h), para obtermos, assim, as dosagens de lactato (em sangue total) e de
creatina quinase (CK, no plasma). As anlises de concentrao de lactato no sangue
foram realizadas atravs do aparelho Accutrend Lactate (Roche) e as dosagens dos
nveis de CK atravs do mtodo reativo para determinao de quantidade plasmtica
(CK NAC - Mtodo Cintico, Laborlab) por meio de espectrofotmetro. Houve um
aumento significativo dos nveis de lactato no sangue imediatamente aps a
realizao do exerccio exaustivo, porm aps o tempo T2h e T4h os valores
encontraram-se nos nveis detectados para o grupo controle (CO), revelando uma
estratgia de remoo deste metablito. Pudemos observar que houve um
comportamento idntico quanto ao aumento de concentrao de CK plasmtica em
todos os indivduos, aps 4 horas da realizao do exerccio exaustivo, com aumento
significativo em T4h em comparao ao grupo controle. A concentrao plasmtica de
lactato volta aos nveis pr-exerccio 2h aps a realizao do exerccio intenso e muito
antes da instalao dos primeiros sintomas da dor muscular tardia. Conclumos que a
elevao das dosagens plasmticas de CK aps o exerccio exaustivo pode ser em
decorrncia de um aumento de permeabilidade ou perturbao mais efetiva do
sarcolema, constituindo um primeiro evento participativo no desencadeamento da
DMT.
Endereo para contato:
Joaquim M. F. Antunes Neto; Avenida Jlio de Mesquita, !", #airro$ %ambu&
%'($ )*"+,-".); %am/inas - 0(
Telefone: 1)23 +)"+-.444 5 1)23 *+,)-.444
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A2
A(ST!ACT
Our study aims at demystifying the action of lactate in events of delayed onset muscle
soreness (DOMS) resulting from vigorous physical exercise. For such, we have made
use of three exhaustion runs (3 X 250-meter runs in official 400-meter-long tracks,
with active recovery 150-meter-long breaks). Five students (3 men and 2 women
average age 212 years old) have participated in the test. Our objective was to
propose a non-habitual strenuous physical activity so as to increase the concentration
of lactate to induce a certain level of muscle discomfort. 3mL of blood were collected
before the physical activity (control value - CO), immediately afterwards (T0h), two
hours later (T2h) and four hours later (T4h), so as to obtain the amounts of lactate (in
whole blood) and of creatine kinase (in plasma). The analysis of the concentration of
lactate was conducted using the device Accutrend Lactate and the levels of CK in
plasma measured through the reactive method CK NAC - Kinetic Method, Laborlab
making use of a spectophotometer. There was a significant increase of lactate levels
in the blood immediately after the physical effort. Nevertheless, after T2h and T4h,
these levels decreased back to the same levels measured before the exercise,
evidencing a natural strategic elimination of this lactate. An identical increase of the
plasmatic concentration of CK could also be observed in all 5 individuals 4 hours after
the physical exercise, with a significant increase in T4h when compared to the CO.
The concentration of lactate in plasma goes back to the pre-exercise levels 2 hours
after the intensive physical activity, long before the first symptoms of DOMS. It can be
said, thus, that the significant increase of CK in the plasma 4 hours after the exercise
leads us to conclude that an increase of permeability or stronger perturbation of the
sarcolema constitutes a primary event in the development of the DOMS.
INT!OD"O
Um dos temas que mais propicia discusso - e controvrsia - junto a disciplina
de Bioqumica do Exerccio Fsico sobre os mecanismos indutores da dor muscular
tardia (DMT). Percebemos que os alunos possuem suas "explicaes muito em funo
das suas experincias como freqentadores de academias de ginstica, sendo que, na
maioria dos casos, h um discurso que reflete a explicao dos profissionais que os
acompanham nas atividades fsicas. A "hiptese que surge com maior freqncia
que o exerccio fsico, realizado em alta intensidade, aumenta a produo de lactato,
de forma que o acmulo deste metablito propicia a instalao de um processo tardio
de dor muscular (veja grfico 1).
A hiptese do lactato como indutor de DMT j uma questo bem superada
pelas pesquisas aplicadas da bioqumica do exerccio. Sabe-se que o desconforto
momentneo agudo durante a prtica de exerccios exaustivos devido aos produtos
finais do metabolismo que afetam as terminaes nervosas livres, ou a anxia
temporria devido isquemia muscular. Essa dor de curta durao e desaparece
quando a atividade cessada. Em contraste, a DMT a sensao de desconforto e
rigidez nos msculos que, muitas vezes depois de uma atividade fsica no habitual,
normalmente aumenta a intensidade nas primeiras 24 horas depois do exerccio, com
picos tardios [1]. A hiptese mais plausvel para explicar a instalao da dor muscular
tardia relaciona-se com os eventos de microleses celulares induzidos pelo exerccio
exaustivo [2-4]. Um marcador muito eficiente para verificar o grau de alterao da
clula muscular ou da permeabilidade da membrana a dosagem de enzimas
sarcoplasmticas no plasma, dentre elas, sobretudo, a creatina quinase (CK) [5].
Considerando esta problemtica, desenvolvemos um modelo de aula prtica,
que utiliza o campo e o laboratrio, para ilustrar aos alunos o metabolismo do lactato
e o mecanismo mais aceito para explicar a ocorrncia da DMT: os eventos de
microleso celular. O objetivo deste trabalho, portanto, o desenvolvimento de uma
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cintica de marcadores bioqumicos - lactato e a liberao da enzima CK, com o
intuito de mostrar o tempo de remoo de lactato da circulao sangnea e a
crescente liberao plasmtica de CK aps o exerccio fsico, muito provavelmente em
virtude das microleses e da instalao de processos ps-inflamatrios localizados.
MATE!IAIS E M)TODOS
Su*+ito,. Participaram do exerccio de corrida exaustiva 5 alunos - 3 homens e 2
mulheres - com idade mdia de 212 anos de idade. Todos os envolvidos, alunos de
Educao Fsica, possuem hbitos rotineiros de prtica de atividade fsica, porm no
realizam em suas atividades o protocolo proposto. Vale ressaltar que o nosso objetivo
no era realizar anlises comparativas quanto ao gnero, mas sim entender como
ocorre a cintica dos marcadores bioqumicos estudados, independente do sexo do
voluntrio, uma vez que as respostas tenderiam a ser as mesmas. Todos os alunos
envolvidos foram notificados dos objetivos das anlises, consentindo as realizaes
das coletas, estando os experimentos de acordo com o Comit de tica da Instituio.
E-+rc.cio E-/u,ti0o. Os alunos realizaram 3 corridas intensas de 250 metros, em
pista oficial de 400 metros, com intervalos de recuperao ativa de 150 metros de
caminhada. O objetivo foi desenvolver uma atividade no habitual e exaustiva, a fim
de elevar a concentrao de lactato sangnea e induzir um nvel de desconforto
muscular.
Col+t/ 1+ S/2gu+ + A23li,+, (io4u.5ic/,. Coletamos 3 mL de sangue total
imediatamente antes ao esforo fsico (valor controle- CO), imediatamente aps
(T0h), duas horas aps (T2h) e quatro horas aps a realizao da corrida exaustiva
(T4h). Tanto as dosagens de lactato e de CK foram obtidas em todos estes momentos
de coleta de sangue.
As anlises de concentrao de lactato em sangue total foram realizadas
atravs do aparelho Accutrend

Lactate (Roche) e as dosagens dos nveis de CK


atravs do mtodo reativo para determinao de quantidade plasmtica (CK NAC -
Mtodo Cintico, Laborlab) por meio de espectrofotometria a 340 nm.
A0/li/67o Sub*+ti0/ 8/r/ 9u/2ti:ic/r / E-t+2,7o 1/ DMT. Utilizamos o protocolo
de Howell e equipe [6], com modificaes em relao aos membros estudados.
Pontuam 4 nveis de instalao da DMT: 0, sensibilidade no percebida; 1,
sensibilidade percebida somente por palpao intensa; 2, sensibilidade levemente
percebida por completa extenso ou flexo do joelho; 3, sensibilidade
substancialmente percebida por completa extenso ou flexo; 4, sensibilidade
contnua. Apesar de termos coletado sangue at o tempo de 4 horas aps o exerccio
exaustivo, as avaliaes de quantificao de DMT aconteceram ao longo de 1 semana.
Como salientamos, construmos uma estratgia metodolgica para ser desenvolvida
durante um turno de aula, o que dificulta a coleta de sangue para anlises
posteriores.
A23li,+, E,t/t.,tic/,. Utilizamos o software GraphPad Instat

(San Diego-CA) para


conduzir as anlises estatsticas. O teste apropriado foi "one way ANOVA para
amostras pareadas e o teste Tukey foi adotado como ps teste.
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!ES"LTADOS
1; Co2<+ci5+2to Pr=0io 1o, Alu2o, 1+ Pri5+iro S+5+,tr+
1
1+ Cur,o +5
E1uc/67o F.,ic/ + E,8ort+ Sobr+ / T+53tic/ Dor Mu,cul/r T/r1i/
Figur/ 1. Fatores de instalao de dor muscular tardia (DMT) de acordo com as
respostas de alunos de primeiro semestre do curso de Educao Fsica e Esporte. * =
p < 0.001 em relao a todas as variveis questionadas.
Os dados nos mostram que os alunos possuem um conhecimento prvio do
conceito de lactato, porm apresentado de forma incorreta quando relacionado a
questo. De forma altamente significativa (p < 0.001), houve a correlao entre DMT
e nveis de lactato sangneo, enquanto que as outras variveis no obtiveram
significncia elevada ao compararmos com o nmero de respostas dadas para o
quesito produo de lactato. Esses dados vieram justificar a necessidade de abordar,
na disciplina Bioqumica da Atividade Fsica, como o ocorre o processo de remoo do
lactato atravs do mecanismo da gliconeognese e traar um paralelo entre DMT e
microleses celulares.
Os nveis de lactato no sangue tiveram aumento significativo imediatamente
aps a realizao do exerccio exaustivo no acostumado (p < 0.001). O
comportamento similar de declnio da concentrao de lactato aps T0h revela uma
estratgia de remoo bem apurada deste metablito. Observa-se que em T2h e T4h
os valores encontram-se praticamente nos nveis detectados para o grupo CO.
1
Os alunos pesquisados eram ingressantes no curso de Educao Fsica e Esporte da METROCM!" que esta#am
cursando a disciplina $iologia %eral" esta que ocorre no semestre anterior & disciplina $ioqumica da ti#idade Fsica'
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2; Ci2=tic/ 1/ Co2c+2tr/67o 1+ L/ct/to +5 S/2gu+ Tot/l A8>, ? @or/, 1+
E-+rc.cio E-/u,ti0o
A;
(;
Figur/ 2. Cintica de acmulo e remoo de lactato em sangue total aps 4 horas de
exerccio exaustivo. Onde A: valores individuais; B: valores de mdia e desvio-padro.
* = p < 0.001 em relao ao controle e T2h e T4h.
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A)
A; Ci2=tic/ 1+ Lib+r/67o 1+ Cr+/ti2/ 9ui2/,+ 2o Pl/,5/ A8>, ? <or/, 1+
E-+rc.cio E-/u,ti0o N7o Aco,tu5/1o
A;
(;
Figur/ A. Cintica de liberao da enzima creatina quinase no plasma aps 4 horas
da execuo de corrida exaustiva. Onde A: valores individuais; B: valores de mdia e
desvio-padro do grupo. * = p < 0.05 em relao ao grupo controle (CO).
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A*
Podemos observar atravs do grfico A que houve um comportamento idntico
quanto ao aumento de concentrao de CK plasmtica para todos os indivduos
analisados. Aps 4 horas da realizao do exerccio exaustivo, obtivemos um pico de
liberao plasmtica de CK, onde podemos observar, no grfico B, que houve um
aumento significativo em T4h (p < 0.05) em comparao ao grupo controle, mesmo
incluindo as anlises de homens e mulheres.
?; A0/li/67o Sub*+ti0/ 8/r/ 9u/2ti:ic/r / E-t+2,7o 1/ DMT
T/b+l/ 1. Avaliao Subjetiva da Extenso da DMT Durante o Perodo de 7 dias.
T ?< Di/ 1 Di/ 2 Di/ A Di/ ? Di/ B Di/ 6 Di/ C
Alu2/ 1 2 3 4 4 4 3 2 1
Alu2/ 2 1 3 4 4 3 1 0 0
O21+& 0, sensibilidade no percebida; 1, sensibilidade percebida somente por palpao intensa; 2, sensibilidade
levemente percebida por completa extenso ou flexo do joelho; 3, sensibilidade substancialmente percebida por
completa extenso ou flexo; 4, sensibilidade contnua (Adaptado de Howell et al. [6]). Os dados dos 3 alunos
voluntrios no foram apresentados por eles terem mostrados nveis de adaptao ao protocolo executado.
DISC"SSO
O nosso trabalho prope uma estratgia de aula prtica com o objetivo de
discutir os fatores que podem induzir a instalao da DMT. Para tanto, "pr-conceitos
formados pelos alunos, tal como a participao do lactato como agente metablico
efetivo na induo de DMT, devem ser reconstrudos e apresentados de forma correta
na perspectiva da bioqumica do exerccio. Uma vez realizada a aula prtica e os
dados j coletados e analisados pelos alunos, a estratgia que se segue deix-los
formular perguntas acerca dos resultados obtidos. Nesta perspectiva, o professor
consegue obter o levantamento das seguintes questes:
1. Por que houve a formao de alta taxa de lactato durante o exerccio proposto
pelo protocolo?
2. Como se deu a remoo do lactato do sangue de forma to efetiva aps um
pico de alta concentrao?
3. Qual a relao existente entre a presena da enzima CK no sangue e microleso
celular?
O levantamento destas problemticas pelos alunos apenas foi possvel atravs
da estratgia metodolgica aplicada na aula prtica. O professor, uma vez contendo
em mos tais "inquietaes dos alunos, tem a possibilidade de construir um
procedimento metodolgico elaborado a partir de uma situao-problema e oferecer
as explicaes atravs da contextualizao bioqumica dos eventos analisados. Desta
forma, instala-se o interesse, por parte do aluno, em estudar mecanismos complexos
da bioqumica - gliclise anaerbia, gliconeognese, microleses celulares. Sabemos
que muitos cursos de nvel superior em Educao Fsica no possuem a disciplina
"Bioqumica do Exerccio Fsico e cabe ao professor de "Fisiologia do Exerccio
desenvolver toda a temtica, apresentada em um mdulo muitas vezes classificado
como "Bioenergtica. O estudo do metabolismo energtico, dentro dos interesses da
Bioqumica, algo complexo e necessita do entendimento de muitos fatores
moleculares que no so abordados em uma disciplina de Fisiologia Humana. No final
do processo, o aluno pode ter apenas uma viso superficial da "mecnica operacional
das clulas na gerao de energia. A construo da motivao para os estudos dos
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A+
contedos da Bioqumica do Exerccio Fsico, a nosso ver, deve passar pela elaborao
de estratgias que partam de uma situao prtica e que essas possam gerar o
questionamento. A seguir, explicaremos, atravs do conhecimento cientfico, porm
de forma didtica, os questionamentos levantados pelos alunos:
Por 4u+ <ou0+ / :or5/67o 1+ /lt/ t/-/ 1+ l/ct/to 1ur/2t+ o +-+rc.cio
8ro8o,to 8+lo 8rotocoloD
Para o aluno, deve ficar claro que o metabolismo anaerbio e o metabolismo
aerbio no so estratgias concorrentes do organismo nos eventos de gerao de
energia, mas sim complementares. A produo de energia atravs do maquinrio
aerbio, que envolve o aparato mitocondrial (ciclo de Krebs e cadeia de transporte de
eltrons) um processo incessante, porm insuficiente, em algumas circunstncias,
para produo elevada de ATP (a molcula de energia). O ensino da Bioenergtica faz
a clssica distino de que o metabolismo anaerbio aquele onde no h
participao do oxignio nos processos geradores de ATP e que, de forma oposta, os
eventos aerbios so ativados pela presena do oxignio. O aluno, portanto, fica com
uma viso compartimentalizada do metabolismo como um todo: para ele, haver
momentos anaerbios e momentos aerbios de requerimento energtico. O que deve
ser apresentado que haver momento, durante a execuo de um exerccio de alta
intensidade, onde a produo constante de ATP via o metabolismo aerbio no ser
suficiente para o rendimento muscular; desta forma, a clula precisar acelerar um
mecanismo mais rpido para produo de ATP e que requeira menos enzimas
degradativas envolvidas no processo: o metabolismo anaerbio. Nesta perspectiva, o
aluno idealiza os eventos anaerbios como cooperativos do aparato mitocondrial.
O lactato um metablito final dos eventos ditos glicolticos anaerbios. A
glicose possui duas fases de degradao. Uma fase citoslica, atravs de um
maquinrio constitudo por dez enzimas, tendo como produto final piruvato e um
rendimento de dois ATP, e uma fase mitocondrial, onde o piruvato transforma-se em
substrato energtico para os dois sistemas mais efetivos de produo de ATP: o ciclo
de Krebs e a cadeia de transporte de eltrons, com produo final de 38 ATP. Este
segundo evento - fase mitocondrial - envolve um aparato mais complexo, o que deixa
o processo de produo de ATP mais lento, porm mais rentvel. Em condies onde
h a necessidade de uma alta taxa de produo de ATP, a clula no poder contar
apenas com o aparato mitocondrial: os eventos citoslicos so acelerados e a
produo de ATP por este mecanismo torna-se elevada: apesar de um rendimento
menor - 2 ATP -, a acelerao do processo supre as necessidades instantneas de
energia. O esquema 1 demonstra o que aconteceu na execuo de nosso protocolo de
corrida:
Glicose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD
+
2 Piruvato + 2 ATP + 2 H
2
O + 2 NADH + 2 H
+
E,4u+5/ 1. Equao geral da gliclise anaerbia.
Observe que a produo de 2 ATP resultou tambm na formao de 2 molculas
de piruvato. Isso foi possvel atravs das reaes enzimticas especficas da gliclise
anaerbia. Um ponto que precisa ficar claro para o aluno que o incio da via
glicoltica se d atravs de consumo de ATP: no haver degradao de glicose se no
houver investimento de ATP, da clula, para ativar o incio do processo (note que na
fase inicial da equao h a presena de 2 ADP, que so produtos de degradao de
ATP. Esta condio foi ilustrada apenas para mostrar um equilbrio da reao). Veja
tambm a presena de duas coenzimas NAD
+
. Sua funo transportar os eltrons
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dissipados das reaes enzimticas da gliclise at a mitocndria, em sua cadeia de
transporte de eltrons. A cadeia de transporte de eltrons, ao receber os eltrons das
coenzimas, gera um gradiente de prtons e utiliza este gradiente para promover a
sntese de ATP [7, 8]. Os piruvatos formados na gliclise anaerbia transformam-se
em substratos aceitveis (Acetil-CoA) de utilizao no ciclo de Krebs e a partir da
iniciam-se os eventos glicolticos oxidativos.
Mas compreenda: com o aumento da intensidade do exerccio, os dois
processos, simultaneamente, passam a ter funcionamento mais acelerado. O grande
problema que a concentrao de coenzimas NAD
+
no citosol limitada e h
impossibilidade destas transportarem todos os eltrons liberados nas reaes
qumicas da gliclise anaerbia at a mitocndria. A estratgia celular para poder
"liberar as coenzimas dos eltrons repassar tais eltrons para o produto que
tambm est sendo formado em excesso: piruvato. Veja o esquema 2:
2 Piruvato + 2 NADH + 2H
+
Lactato + 2 NAD
+
E,4u+5/ 2. Formao de lactato a partir da regenerao da coenzima NAD
+
.
Para que houvesse a liberao do eltron da coenzima NAD
+
(NADH), h a
oxidao do NADH pelo piruvato (recebimento dos eltrons) formando lactato e o
restabelecimento (reoxidao) de NAD
+
para poder voltar aos seus processos de
transporte de eltrons. Perceba que o termo oxidao, neste contexto, no envolve a
presena do oxignio. O piruvato, nestas condies, age como um agente "oxidante,
restabelecendo a funcionalidade da coenzima NAD
+
. Portanto, fica evidente que,
quanto mais intensa a atividade fsica, maior ser a participao dos eventos
glicolticos anaerbios para auxiliarem na produo de ATP. Nesta abordagem, o aluno
dever refletir sobre os seguintes pontos: papel das coenzimas NAD
+
, taxa de
formao de piruvato atravs das reaes enzimticas da gliclise, rendimento final
de ATP atravs da gliclise e dos eventos oxidativos, estabeler um paralelo entre
necessidade de formao de lactato e rendimento atltico.
Co5o ,+ 1+u / r+5o67o 1o l/ct/to 1o ,/2gu+ 1+ :or5/ t7o +:+ti0/ /8>, u5
8ico 1+ /lt/ co2c+2tr/67oD
De acordo com Marzzoco e Torres [7], h ainda a crena de que o lactato
produzido o grande responsvel pela fadiga muscular, cibra e DMT. Atravs dos
estudos da Bioqumica do Exerccio, desenvolvido em sala de aula, os alunos
aprendem que o lactato produzido durante a utilizao da via glicoltica anaerbia em
exerccios de alta intensidade pode ser drenado dos msculos para a circulao
sangnea, sendo absorvido pelo fgado em um processo chamado gliconeognese.
Como demostrado pelos nossos resultados (Figura 2), a concentrao plasmtica de
lactato volta aos nveis pr-exerccio 2 horas aps a realizao do exerccio intenso e
muito antes da instalao dos primeiros sintomas de DMT (Figura 4). A fadiga
instalada durante o exerccio exaustivo pode ter relao com o aumento da
concentrao de prtons (H
+
) que acompanhada durante a produo de lactato. A
quantidade limitada de transportadores de prtons (coenzimas NAD
+
) para a
mitocndria nestas circunstncias um fator de extrema relevncia. O aumento da
concentrao intracelular de H
+
poderia, ento, causar uma reduo do pH no
msculo, o que interferiria nos seus processos integrados de excitao-contrao [9,
10], tal como a inibio da liberao de Ca
2+
do retculo sarcoplasmtico [11].
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A1-
O fato do lactato ser drenado para fora da clula, para que possa ser
metabolizado no fgado, devido a existncia de protenas especficas que atuam
como transportadoras de lactato/H
+
na membrana do tecido msculo esqueltico. Tais
protenas, conhecidas como transportadoras de monocarboxilato (TMC), dividem-se
em 7 classes que j foram identificadas e clonadas [12-15]. A TMC1 a protena
transportadora mais expressa, tanto em msculo estriado esqueltico quanto em
cardaco, estando altamente relacionada capacidade oxidativa dos msculos
esquelticos [16]. As protenas da classe TCM3 e TCM4 so, juntamente com a TCM1,
as mais expressas, tanto em tecido msculo esqueltico animal quanto em humano. A
abundncia de TCM3 e TCM4 nos msculos ricos em fibras do tipo IIa e/ou IIb,
concomitantemente com uma baixa expresso em fibras do tipo I, sugere que tais
protenas atuam como transportadoras de lactato para fora do tecido, em direo a
circulao sangnea. O treinamento com exerccios de alta intensidade parece induzir
aumento de expresso destas protenas transportadoras [10, 16].
Sabe-se que o acmulo reduzido de lactato em msculos oxidativos ou
treinados aerobiamente durante exerccio fsico devido a uma diminuio da
atividade metablica da via glicogenoltica e a um aumento da capacidade de oxidao
de piruvato. Bonen [16] ressalta que as protenas TMC1 possuem capacidade tanto de
retirar o lactato da circulao como de remov-lo do tecido muscular. O aparente
conflito resolvido quando o autor explica que o aumento em consumo de lactato
pelo msculo pode ser estratgico para restituir os nveis de glicognio muscular. Por
outro lado, a forte liberao de lactato do msculo minimiza as perturbaes de pH
intracelular.
Uma vez o lactato removido para o sangue, seu caminho torna-se o fgado,
onde ocorrer o evento da gliconeognese.. Tecidos como o crebro e hemceas
apenas utilizam-se de glicose para sua sobrevivncia. Pelo fato da reserva heptica de
glicognio ser limitada e insuficiente para manter os nveis glicmicos normais alm
de 8 horas de jejum, h a necessidade de que uma outra via metablica possa utilizar
compostos que no so carboidratos (aminocidos, glicerol e lactato) para a sntese
de glicose. A primeira transformao que ocorre no fgado a converso de lactato a
piruvato atravs da enzima lactato desidrogenage. Marzzoco e Torres [7] relembram
que a transformao de piruvato em glicose pela gliconeognese processa-se no
sentido oposto ao da gliclise, porm com as alteraes das respectivas reaes:
Co20+r,7o 1+ 8iru0/to / :o,:o+2ol8iru0/to& atravs das aes das enzimas
piruvato carboxilase (reao 1 - veja Esquema 3) e fosfoenolpiruvato
carboxiquinase (reao 2);
Co20+r,7o 1+ :ruto,+ 1E6Fbi,:o,:/to / :ruto,+ 6F:o,:/to& essas reao
irreversvel torna-se catalisada pela frutose1,6-bisfosfatase (reao 3);
Co20+r,7o 1+ glico,+ 6F:o,:/to / glico,+& a irreversibilidade deste passo
contornada atravs da ao da enzima glicose 6-fosfatase (reao 4). Vejamos,
a seguir, as reaes envolvidas no mecanismo da gliconeognese:
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A11
E,4u+5/ A. A via gliconeognica a partir da metabolizao do lactato.
9u/l / r+l/67o +-i,t+2t+ +2tr+ / 8r+,+26/ 1/ +2Gi5/ CH 2o ,/2gu+ +
5icrol+,7o c+lul/rD
A enzima CK localiza-se no sarcoplasma e atua na reao de fornecimento de
energia por meio de um processo estritamente anaerbio [8]:

Creatina + ATP Fosfocreatina + ADP + H
+
E,4u+5/ ?. Libeao de energia a partir de fosfocreatina.
A literatura descreve de forma consistente que a realizao de exerccios no
acostumados ou aqueles dotados de grande requerimento de aes musculares
excntricas podem induzir eventos lesivos nas estruturas da fibra muscular [17].
Como conseqncia, haveria a caracterizao dos seguintes sintomas: DMT [18-20],
decrscimo na produo de fora muscular [1, 6], alteraes na amplitude de
movimento [22, 23] e liberao enzimtica no meio extracelular [24, 25].
A liberao de CK no sangue, durante um exerccio exaustivo e no
acostumado, reflete que o sarcolema sofreu alteraes induzidas pelos estresses
mecnico (aes musculares excntricas) e/ou metablicos (anoxia temporria
dificultando a produo de ATP). Os eventos de microleses celulares induzidos por
estresse mecnico envolvem desconfiguraes da Banda A e Linha Z dos sarcmeros
[26-28]; contudo, pode haver rompimento do retculo sarcoplasmtico, conduzindo a
um aumento na concentrao intracelular de clcio ([Ca
2+
]i), o que permite a ativao
de outros processos degradativos no sarcolema [29]. A condio que pode propiciar
uma maior caracterstica lesiva contrao excntrica, em comparao com a
contrao concntrica, o alongamento ativo dos sarcmeros [30]: o alto grau de
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A12
tenso miofibrilar desenvolvido no esforo excntrico pode distorcer ou romper os
elementos citoesquelticos e conjuntivos do msculo [31], principalmente na regio
miotendinosa [32].
Um sintoma bem conhecido das alteraes citoesquelticas ocasionadas pelo
exerccio excntrico a DMT [1, 6, 33-35]. As microleses acometidas pelo estresse
mecnico causam liberao de enzimas sarcoplasmticas na circulao, sendo as
principais encontradas a creatina quinase, lactato desidrogenase, aspartato
aminotransferase e mioglobina [2-4], o que sugere refletir uma significativa mudana
na estrutura e permeabilidade do sarcolema. Por isso, dosagens plasmticas dessas
protenas, em especial a creatina quinase, so utilizadas como biomarcadores de
alterao muscular [33, 36].
As rupturas nas fibras musculares levam a formao de fragmentaes
proticas que, em um perodo de 24 a 72 horas, atingem um pico de acmulo no
interstcio celular e promovem a sensao da DMT [33, 37]. A sensao de dor
causada pela presso do acmulo das fragmentaes ativando as terminaes
nervosas livres nos msculos [38], estas que so responsveis pelas captaes de
alteraes dos compartimentos qumicos celulares e da presso, que produzem a
sensao de dor, sensibilidade temperatura (calor), propriocepo e tato grosseiro
[39, 40].
9u/1ro 1. Principais caractersticas da DMT [34].
I. Incio em 8 a 24 horas aps o exerccio;
II. Picos de intensidade em 24 a 9 horas aps o exerccio e rec!pera"#o
completa no limite de $ a %& dias;
III. 'es!ltado de exerccios estressantes predispostos por a"(es
excntricas;
I). 'esposta mais acent!ada aps exerccio n#o acost!mado;
). *ssociada com les(es !ltraestr!t!rais do m+sc!lo e li,era"#o de
protenas intracel!lares;
)I. Pode ocorrer em con-!nto com dimin!i"#o de for"a e enc!rtamento
m!sc!lar .o /!e gera inflexi,ilidade m!sc!lar0;
)II. 1a!sada principalmente pela ati2a"#o de termina"(es ner2osas li2res.
Realizando uma anlise dos dados apresentados pela literatura, podemos
estabelecer uma seqncia para a ocorrncia dos eventos mecnicos e metablicos
envolvidos na manifestao de sensao de DMT. Como j exposto no Quadro 1,
sabe-se que a fase excntrica da contrao muscular favorece a desintegrao
miofibrilar: neste primeiro momento, portanto, tem-se a atuao da tenso mecnica
produzida pelo exerccio; dentro do perodo de dois dias, sugerido como "pico de
percepo de DMT, parece haver um acmulo de fluidos intersticiais ou intracelulares
- efeito resultante da ruptura das ultraestruturas musculares - desenvolvendo uma
condio de inchao [35, 41]; o estmulo desta presso mecnica intramuscular [6] e
a provvel formao de um processo inflamatrio [42] podem provocar tenso e
deformao sobre elementos de tecido conjuntivo, o que tender a afetar receptores
aferentes, localizados prximos unidade miotendinosa, e gerar importantes
estmulos para a sensao proprioceptiva e o distrbio da performance neuromuscular
[43]; o carter tardio do aparecimento da dor e da rpida perda de intensidade pode
ter relao com o processo inflamatrio que trilhado. A tabela 1, que demonstra
nveis de DMT de 2 alunas voluntrias, ilustra muito bem tal situao, uma vez que os
ndices mais elevados de sensibilidade muscular ocorreram num perodo de 48 horas
aps o exerccio exaustivo e, em seguida, havendo retorno para uma situao
estabelecida como normal. As informaes relativas dos alunos voluntrios no foram
apresentadas pelo fato dos mesmos no terem notado instalao severa de DMT. Vale
Antunes Neto, J.M.F et al. No.02/2006 A13
aqui ressaltar que, apesar dos alunos voluntrios no realizarem no seu dia-a-dia de
atividades fsicas o protocolo proposto, eles participam de partidas de futebol e
treinamento de musculao, o que minimiza os efeitos da DMT. Mas torna-se
interessante observar que os alunos voluntrios tambm apresentaram um aumento
na concentrao plasmtica de CK aps 4 horas do exerccio exaustivo, sugerindo que
houve aumento na permeabilidade do sarcolema, porm no desencadeando
alteraes lesivas importantes nas estruturas miofibrilares.
CONCL"SIES
Por se tratar de uma aula ilustrativa dos mecanismos indutores de DMT, no
houve o acompanhamento das dosagens plasmticas de CK at seu retorno aos nveis
controle, mas podemos aferir que a elevao vista para este parmetro, de forma
significativa 4 horas aps o exerccio exaustivo, remete-nos a concluir que um
aumento de permeabilidade ou perturbao mais efetiva do sarcolema constitui-se
num primeiro evento participativo no desencadeamento e DMT. O retorno dos nveis
sangneos de lactato para valores controle, 2 horas aps o exerccio exaustivo,
ilustra muito bem que a clula muscular possui um aparato de consumo e remoo do
lactato bem eficiente, desmistificando a influncia deste metablito em eventos
geradores de DMT. A apresentao dos dados, atravs de anlises pertinentes com o
conhecimento adquirido na disciplina, permitiu aos alunos uma compreenso reflexiva
dos eventos bioqumicos envolvidos no protocolo e o entendimento das complexidades
dos mecanismos de instalao da DMT.
AJ!ADECIMENTO
Agradecemos ao coordenador geral do ProMETRO - Programa de Qualidade e
Responsabilidade Social da METROCAMP, Sr. Marcelo Coelho, pela concesso das
bolsas de iniciao cientfica aos alunos voluntrios desta pesquisa, que hoje integram
o Laboratrio de Estudos Multidisciplinares do Estresse - METROCAMP.
!EFE!KNCIAS (I(LIOJ!'FICAS
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Edio semestral, publicada pela Sociedade Brasileira de Bioqumica e Biologia Molecular (SBBq), disponibilizada a todos os
interessados no site http://www.sbbq.org.br/revista, com artigos e materiais didticos, softwares e outros assuntos.
Editores: Bayardo B. Torres, Eduardo Galembeck - Fone: (19) 3521-6138 Fax: (19) 3521-6129