Cromatografa contracorriente o cromatografa de particin es una categora de tcnicas

cromatogrficas, tcnicas de laboratorio para la separacin de mezclas, en este caso

mezclas de lquido-lquido.
Cromatografa
Cromatografa en general se utiliza para separar los componentes de una mezcla basada
en sus diferentes afinidades para las fases mvil y estacionaria de una columna. Los
componentes se pueden analizar por separado por varios tipos de detectores que pueden
o no estar integrados en un aparato. Cromatografa de particin se basa en las
diferencias de factor de capacidad, k, y el coeficiente de distribucin, Kd, de los analitos
utilizando fase lquida lquida estacionaria y mvil. Un analito es la sustancia o
constituyente qumico que se est analizando.
Cromatografa en columna estndar utiliza un slido fase estacionaria y una fase mvil
lquida, cromatografa de gases, mientras que utiliza una fase estacionaria lquida sobre
un soporte slido y una fase mvil gaseosa. Por el contrario, en la cromatografa
lquido-lquido, tanto en la fase mvil y estacionaria son lquidos.
Mediante la eliminacin de soportes slidos, adsorcin permanente del analito en la
columna se evita, y una recuperacin de cerca de 100% del analito se puede lograr. El
instrumento tambin se puede cambiar fcilmente entre diferentes modos de
funcionamiento, simplemente mediante el cambio de disolventes. Con cromatografa
lquido-lquido, los investigadores no estn limitados por la composicin de las
columnas disponibles comercialmente para su instrumento. Casi cualquier par de
soluciones inmiscibles se puede usar en la cromatografa lquido-lquido, y la mayora
de instrumentos se puede operar en los modos estndar o de fase inversa.
Costos solventes tambin son generalmente ms baratos que los de cromatografa
lquida de alto rendimiento y el costo de la compra y disposicin de adsorbentes slidos
se eliminan por completo. Otra ventaja es que los experimentos realizados en el
laboratorio fcilmente se puede escalar a volmenes industriales. Cuando GC o HPLC
se lleva a cabo con grandes volmenes, la resolucin se pierde debido a problemas con
la superficie a relaciones de volumen y la dinmica de flujo; esto se evita cuando las dos
fases son lquidos.
Tcnicas
CCC puede ser pensado como ocurre en tres etapas: mezclar, la solucin, y la
separacin. La mezcla de las fases es necesario para que la interfaz entre ellos tiene un
rea grande, y el analito se puede mover entre las fases de acuerdo con su coeficiente de
particin.
Un coeficiente de particin es una relacin de la cantidad de analito que se encuentra en
cada uno de los disolventes en el equilibrio y se relaciona con la afinidad del analito
para el uno sobre el otro. La fase mvil se est mezclando con el entonces
sedimentacin a partir de la fase estacionaria a lo largo de la columna. El grado de
retencin de la fase estacionaria es un parmetro crucial. Instrumentos de mayor calidad
tienen una mayor retencin fase estacionaria. El tiempo de establecimiento es una
propiedad del sistema disolvente y la matriz de la muestra, ambos de los cuales influyen
grandemente en la retencin de la fase estacionaria.
Gotita Contracorriente Cromatografa
Gotita CCC es la forma ms antigua de CCC. Se utiliza slo la gravedad para mover la
fase mvil a travs de la fase estacionaria. En el modo descendente, las gotitas de la fase
mvil ms densa y la muestra se dejan caer a travs de una columna de la fase
estacionaria ms ligero utilizando slo la gravedad.
Si se utiliza una fase mvil menos denso que se elevar a travs de la fase estacionaria;
esto se llama modo ascendente. El eluyente de una columna se transfiere a otro; las ms
columnas que se utilizan, las placas ms tericos pueden ser alcanzados. La desventaja
de DCCC es que las tasas de flujo son bajos, y la mezcla pobre se consigue para la
mayora de sistemas de disolventes binarios, lo que hace esta tcnica consume mucho
tiempo e ineficaz.
Cromatografa contracorriente de Alto Rendimiento
El principio de funcionamiento de los equipos de CCC requiere una columna que
consiste en un tubo en espiral alrededor de un carrete. La bobina se gira en un
movimiento giratorio de doble eje, lo que provoca un campo de gravedad variable para
actuar sobre la columna durante cada rotacin. Este movimiento hace que la columna
para ver un paso particin por revolucin y los componentes de la muestra por separado
en la columna debido a su coeficiente de reparto entre las dos fases lquidas inmiscibles
utilizadas.
HPCCC funciona de la misma manera que HSCCC pero con una diferencia
fundamental. Un proceso de siete aos de I + D que se ha producido instrumentos
HPCCC que generaron 240 G, en comparacin con el 80 G es una de las mquinas
HSCCC. Este aumento en el nivel G y mayor dimetro de la columna ha permitido un
aumento de diez veces a travs de puesto, debido a la mejora de las tasas de flujo de la
fase mvil y la fase estacionaria de retencin mucho mayor.
Cromatografa contracorriente es una tcnica de cromatografa lquida preparativa, sin
embargo, con el advenimiento de los instrumentos de mayor G HPCCC ahora es
prossible para operar instrumentos con cargas de muestra como bajo como unos pocos
miligramos, mientras que en el pasado 100s de miligramos haba sido necesario.
Las principales reas de aplicacin de esta tcnica incluyen la purificacin de productos
naturales y el desarrollo de frmacos.
Cromatografa contracorriente de alta velocidad
La era moderna de la CCC comenz con el desarrollo por el Dr. Yoichiro Ito de la
centrfuga del planeta y de los muchos posibles geometras de columna que puede
soportar. Estos dispositivos hacen uso de un medio poco conocidos de realizar las
conexiones no giratorias entre el estator y el rotor de una centrifugadora.
Funcionalmente, el CCC de alta velocidad consiste en una bobina helicoidal de un tubo
inerte que gira sobre su eje planetario y al mismo tiempo gira excntricamente alrededor
de otro eje solar. El efecto es la creacin de zonas de mezcla y zonas de sedimentacin
que se avanza a lo largo de la bobina helicoidal a una velocidad vertiginosa. Esto
produce un ambiente muy favorable para la cromatografa.
Existen numerosas variantes posibles sobre este diseo del instrumento. El ms
importante de ellos es el CCC toroidal. Este instrumento no emplea el movimiento
planetario. En algunos aspectos, es muy parecido a CPC, pero conserva la ventaja de no
necesitar juntas rotativas. Tambin se emplea un tubo capilar en lugar de los tubos de
mayor dimetro empleadas en las hlices de los otros modelos de la CCC. Este pasaje
capilar hace que la mezcla de dos fases muy a fondo, a pesar de la falta de agitacin u
otras fuerzas de mezclado. Este instrumento proporciona separaciones analticas escala
rpidas, que, sin embargo, se pueden ampliar a cualquiera de los instrumentos de la
CCC de mayor escala.
Purificacin Xanthanolide
Cromatografa de reparto centrfuga
Cromatografa de reparto centrfuga fue inventado en los aos ochenta por la compaa
japonesa Sanki Engineering Ltd, cuyo presidente era el difunto Kanichi Nunogaki. CPC
se ha desarrollado ampliamente en Francia desde finales de los noventa. CPC utiliza la
fuerza centrfuga para acelerar la separacin y alcanza velocidades de flujo ms altas
que DCCC.
El cromatgrafo de particin centrfuga est constituida con un rotor nico. Este rotor
gira sobre su eje central. Con menos vibraciones y ruido, la CPC ofrece una gama de
velocidades de rotacin ms amplia que HSCCC. Esto permite una mejor decantacin y
retencin para el sistema bifsico inestable.
Fundamentos de la CPC: El rotor CPC est constituida por la superposicin de discos
grabados con pequeas celdas unidas con una canal de cabeza/cola. Estas clulas, en
donde la separacin cromatogrfica se lleva a cabo, pueden ser comparados con En fila
de embudos separados. El rotor est lleno con la fase estacionaria, que se mantiene
dentro del rotor gracias a la velocidad de rotacin, mientras que la fase mvil se bombea
a travs. CPC se puede operar ya sea en modo ascendente o descendente, donde la
direccin es relativa a la fuerza generada por el rotor en lugar de la gravedad. De
acuerdo a la evolucin rpida y permanente del diseo de las clulas, la tasa de
eficiencia y de flujo con la presin lumbar mejoran. El CPC ofrece ahora la escala
directa a partir de los aparatos de anlisis para aparatos industriales para la produccin
rpida de la hornada.
Modos de funcionamiento
La fase acuosa mvil - - fase inversa La fase ms densa se bombea a travs de
como la fase mvil.
Fase normal - Orgnica fase mvil - La fase menos densa se usa como la fase
mvil.
Dual-Mode: Las fases mviles y estacionarias se revierten en parte a travs de la
carrera.
Modo Gradiente: La concentracin de uno o ms componentes en la fase mvil
es variada a lo largo de la carrera para lograr la resolucin ptima a travs de
una gama ms amplia de las polaridades. Por ejemplo, un gradiente de metanol-
agua se puede emplear usando heptano puro como la fase estacionaria. Esto no
es posible con todos los sistemas binarios, debido a la prdida excesiva de la
fase estacionaria.
Modo de Extrusin de elucin: La fase mvil se extruye despus de un cierto
punto por conmutacin de la fase que se bombea en el sistema. Por ejemplo,
durante la parte de elucin de una separacin usando un sistema de EtOAc-agua
corriente cabeza a la cola, la fase mvil acuosa est siendo bombeado en el
sistema,. Con el fin de cambiar al modo de extrusin, la fase orgnica se bombea
en el sistema. Esto se puede lograr ya sea con una vlvula en la entrada de la
bomba simple, o, idealmente, con un sistema integrado de dos o tres bombas,
cada una dedicada ya sea a una sola fase de una mezcla binaria, o a un lavado
intermedio disolvente. Esto tambin permite una buena resolucin de
compuestos con altas afinidades de fase mvil. Se requiere slo un volumen de
columna de disolvente y sale de la columna completa de la fase estacionaria
fresca.
Zona de pH Refinacin: disolventes cidos y bsicos se utilizan para eluir
analitos en funcin de su pKa.