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Mantilla de calentamiento.
!ondensador de dedo 2ro.
!risoles de 2iltraci9n, ,orosidad $.
1rocedimiento
$. Muela la muestra en un molino de martillos ,ara que ,ase la malla de $ mm.
?. 5ome una su.muestra * s8quela durante la noc/e en un /orno a $@AK!.
:. En2re la muestra en un desecador.
%. 1ese con a,roximaci9n de miligramos un gramo de la muestra seca *
col9quela en un matra0 erlenma*er de A@@ ml.
A. Adicione $@@ ml de la soluci9n de detergente ;cido * ? ml del anties,umante.
(. !oloque el matra0 en la mantilla con el condensador instalado.
&. "le+e r;,idamente a e.ullici9n J: a A minutosC * contin<e el calentamiento ,or
? /oras.
B. Filtre el contenido del matra0 ,or gra+edad en un crisol ,re+iamente ,esado.
'. EnHuague el matra0 con agua destilada caliente * 2iltre.
$@. EnHuague el contenido del crisol con :@@ ml de agua destilada caliente. Use
succi9n d8.il J,or +acoC.
$$. EnHuague el residuo con acetona * seque.
$?. !oloque el crisol en el /orno a $@AK! durante $? /oras.
$:. En2re dentro de un desecador la muestra e inmediatamente des,u8s
determine el ,eso.
!;lculos
!ontenido de Fi.ra JRC M $@@ JW
?
QW
$
C
3onde
W
$
M 1eso de muestra JgC.
W
?
M 1eso del residuo JgC.
FI?URA 7
3eterminaci9n del contenido de 2i.ra ,or el m8todo de detergente ;cido.
4.2. D'/'!.i)$i() &' Fi7! :"! D'/'!@')/' N'1/!".
Este m8todo es <til ,ara la determinaci9n de 2i.ras +egetales en alimentos.
A,arentemente tiene la ca,acidad de se,arar los com,onentes nutricionales solu.les
de aquellos que no son totalmente a,ro+ec/a.les o que de,enden de la 2ermentaci9n
.iol9gica ,ara su a,ro+ec/amiento. El m8todo tiene limitaciones en su ,recisi9n
cuando los +alores de ,rotena son mu* altos * los +alores de 2i.ra son .aHos.
Reacti+os
Soluci9n detergente neutra. Agregue a un litro de agua destilada :@ mg de
sul2ato lauril s9dico US1, $B.($ g de etilendiamino tetra acetato dis9dico
di/idrogenado de/idratado, (.B$ g de .orato de sodio deca/idrato * %.A( g del
reacti+o 2os2ato ;cido dis9dico an/idro. Agtese /asta disol+er * mantenga el
,- entre (.' * &.$.
Amilasa JSigma A $?&BC ?g en '@ml -
?
O mas $@ ml de etilenglicol.
Acetona grado reacti+o.
Sul2ito de sodio an/dro. Se usa <nicamente en an;lisis de su.,roductos
animales.
Materiales * Equi,o
Equi,o de re2luHo. !ualquier equi,o est;ndar adecuado ,ara el an;lisis de 2i.ra.
!risoles de 2iltraci9n en +idrio. Use crisoles de ti,o alto, con ,orosidad gruesa *
,laca de 2iltraci9n de %@mm de di;metro con ca,acidad ,ara %@ [ A@ ml de
lquido.
!uando los crisoles se o.stru*en des,u8s de un uso continuo se ,re,ara una
soluci9n lim,iadora de ?@R GO-, AR de Na
:
1O
%
* @.AR de E35A de sodio que
se /ace ,asar caliente en en sentidi o,uesto a tra+8s del crisol. Se de.e de
e+itar el uso continuo de la soluci9n ,ues tiende a erosionar el +idrio.
1rocedimiento
$. 1ese a,roximadamente $ g de muestra molida ,ara ,asar el tami0 de $ mm *
de,ostela en un matra0 de 2ondo redondo ,ara iniciar el re2luHo.
?. Agregue en orden $@@ ml de detergente neutro a tem,eratura am.iente * ? ml
de amilasa ,or muestra.
:. !aliente ,ara que la soluci9n /ier+a en A a $@ minutos= en el momento de
iniciar la e.ullici9n redu0ca la tem,eratura ,ara e+itar la 2ormaci9n de es,uma.
AHuste la tem,eratura ,ara que la soluci9n /ier+a sua+emente * mantenga en
re2luHo ,or (@ minutos a ,artir del instante en que em,ie0a a /er+ir.
%. Agite el matra0 ,ara sus,ender * decante la muestra en un crisol ,re+iamente
,esado * ,re,arado ,ara succi9n al +aco. Use ,oco +aco al ,rinci,io
increment;ndolo a medida que lo +a*a requiriendo. 1ase toda la muestra al
crisol utili0ando un mnimo de agua caliente JB@K!C ,ara el la+ado del matra0.
Elimine el +aco, a2loHe con cuidado la ca,a de muestra en el 2ondo del crisol
sin remo+erla * agregue agua caliente, re,itiendo el la+ado +arias +eces.
Finalmente la+e dos +eces con acetona sin remo+er la muestra del 2iltro *
seque con +aco.
A. Seque los crisoles a $@AK! durante $? / * ,8selos en caliente Jesta o,eraci9n
no de.e durar m;s de :@ segC. Si no se ,uede ,esar de inmediato, en2re los
crisoles en un desecador que contenga como desecante ,ent9xido de 29s2oro
J1
?
O
A
C.
(. El residuo de 2i.ra recu,erado se registra en t8rminos de ,aredes celulares.
&. !alcule el contenido celular Jmaterial solu.leC su.stra*endo este +alor de $@@.
NOTAG
En el caso de granos * su.,roductos de molinos es ,osi.le que se 2orme un material
gelatinoso deri+ado de los almidones * la ,rotena, el cual o.stru*e el 2iltro e im,ide el
la+ado. 1ara meHorar la 2iltraci9n /aga ,asar aire en sentido in+erso en el crisol. As
mismo al e+ite que la muestra se ad/iera al 2ondo del matra0 durante el inicio del
calentamiento /asta la e.ullici9n, calentando r;,idamente con agitaci9n constante.
!;lculos
a. 1aredes celulares JRC en \.ase seca] o \como se o2rece]. $@@JJJ,eso del crisol
^ ,aredes celularesC - J,eso del crisolCCQ,eso de la muestra.
.. El ,orciento del contenido celular se calcula su.stra*endo de $@@ el R de
,aredes celulares.
R contenido celular M $@@ - R ,aredes celulares.
>an Soest, 1.4. and R.-. Wine, $'(&, 4. Assoc. O22icial Anal. !/em., A@:A@.
FI?URA 5
3eterminaci9n del contendido de 2i.ra ,or el m8todo de detergente neutro
4.3. C')i0 i)+"%17%' ') A$i&" C%"!<A&!i$"
Este m8todo determina el contenido de su.stancias minerales insolu.les en ;cido
clor/drico contenidos en los alimentos= de acuerdo con el contenido mineral de la
muestra se a,lica *a sea el m8todo A, ,ara alimentos con alto contenido de materia
org;nica, o el m8todo ), recomenda.le ,ara alimentos con un alto contenido de
minerales, inclu*8ndose aquellos cu*o contenido de ceni0a insolu.le es ma*or a $ R
al e+aluarse ,re+iamente con el m8todo A.
Reacti+os
Soluci9n -! :N.
Soluci9n A de ;cido tricloroac8tico al ?@R, ?@ g en $@@ ml.
Soluci9n ) de ;cido tricloroac8tico al $ R, $ g en $@@ ml.
Materiales * Equi,o
1laca de calentamiento.
Mu2la el8ctrica con termostato.
!risoles de calcinaci9n: 1latino o aleaci9n de ,latino * oro J$@R 1t, '@R AuC=
Rectangulares J(@ _ %@ _ ?A mmC o circulares J(@[&A mm de di;metro con ?@ [
?A mm de altoC.
M8todo A
!alcine la muestra siguiendo el m8todo de determinaci9n de ceni0a. 5rans2iera el
residuo a un +aso de ,reci,itado de ?A@ [ %@@ ml usando &A ml de ;cido clor/drico
:N * e+a,ore a sequedad, contin<e calentando durante una /ora m;s ,ara des/idratar
cualquier slice ,resente. En2re * agregue &A ml de soluci9n de -! :N * caliente a
e.ullici9n sua+emente ,or $A minutos. Filtre la soluci9n en caliente a tra+8s de un
,a,el 2iltro li.re de ceni0a * la+e el residuo con agua caliente /asta que el 2iltrado deHe
de ser ;cido.
Seque el ,a,el 2iltro conteniendo el residuo * calcine a AA@[&@@K! en un crisol de
,latino ,re,esado, en2re en un desecador * ,osteriormente ,ese.
FI?URA 9
3eterminaci9n de ceni0a insolu.le en ;cido clor/drico. M8todo A.
M8todo )
1ese alrededor de A g de muestra con una a,roximaci9n de @.@@$ g * trans2i8rala a un
+aso de ,reci,itado de ?A@ [ %@@ ml. Adicione ?A ml de agua destilada * ?A ml de
soluci9n de ;cido clor/drico :N. Me0cle con cuidado * es,ere /asta que *a no se
li.eren gases.
Agregue otros A@ ml de ;cido clor/drico * es,ere /asta que cese la li.eraci9n de
gases * coloque el +aso en un .aFo mara a e.ullici9n durante :@ minutos, con el 2in
de /idroli0ar los almidones ,resentes. Filtre la soluci9n cuando toda+a este caliente
con ,a,el 2iltro li.re de ceni0as, ,osteriormente la+e el 2iltro con A@ ml de agua ti.ia
/asta que el 2iltrado deHe de ser ;cido J+er notaC. !oloque el ,a,el 2iltro conteniendo el
residuo en un crisol de ,latino ,re+iamente ,esado, seque * calcine la muestra a AA@ [
&@@K!. 5rans2iera las ceni0as a un +aso de ,reci,itado usando &A ml de ;cido
clor/drico :N * contin<e el an;lisis como en el m8todo anterior a ,artir de la eta,a en
la que se calienta la muestra sua+emente ,or $A minutos.
NOTAG
Si se /ace di2cil 2iltrar, re,ita el an;lisis reem,la0ando los A@ ml de ;cido clor/drico
:N con A@ ml de la soluci9n A de ;cido tricloroac8tico * enHuague el 2iltro con una
soluci9n ti.ia de la soluci9n ) de ;cido tricloroac8tico.
!;lculos
!alcule el ,eso de residuo * ex,rese el resultado como ,orciento JRC de la muestra.
FI?URA 16
3eterminaci9n de ceni0a insolu.le en ;cido clor/drico. M8todo ).
4.4. C!7"<i&!/"+ T"/%'+ Di+:")i7%'+ EC%'@@-A)/<!")'F.
Este m8todo determina la cantidad de car.o/idratos totales, .as;ndose en su
contenido de almidones /idroli0a.les * a0<cares solu.les.
Reacti+os
Soluci9n de ;cido ,ercl9rico al A? R. ?&'ml de ;cido ,erclorico Jgrado
es,ec2ico $.&@C en $@@ ml de agua destilada= deHe en2riar antes de usar.
Soluci9n de ;cido sul2<rico. &(@ml de -
?
SO
%
Jgrado es,ec2ico $.B%C en ::@ml
de agua destilada= deHe en2riar antes de usar.
Reacti+o Ant/rone. 1re,are su2iciente reacti+o Ant/rone ,re,arando una
soluci9n de ;cido sul2<rico al @.$ R con el 2in de usarla el mismo da.
Soluci9n est;ndar de glucosa. 3isuel+a $@@mg de glucosa en $@@ml de agua.
Soluci9n est;ndar de glucosa diluida. 3ilu*a $@ml del est;ndar de glucosa a
$@@ ml de agua destilada J$ml M @.$mg de glucosaC.
Materiales * Equi,o
Es,ectro2ot9metro.
1a,el 2iltro Wat/man no. A%? o Sc/leic/er * Sc/ill no. $A@.
1rocedimiento
Extracci9n:
$. 1ese con a,roximaci9n de @.@@$g $.@g de muestra seca 9 ?.Ag de muestra
/<meda conteniendo a,roximadamente de (@ a :@@ mg de car.o/idratos
totales dis,oni.les.
?. 5rans2iera cuantitati+amente a una ,ro.eta graduada de $@@ ml con ta,9n.
:. Adicione $@ ml de agua * agite con una +arilla de +idrio ,ara dis,ersar la
muestra.
%. Adicione $: ml de la soluci9n de ;cido ,ercl9rico. Agite constantemente con la
+arilla de +idrio durante ?@ minutos.
A. EnHuague la +arilla con agua destilada * lle+e el +olumen a $@@ ml. Me0cle *
2iltre a un matra0 +olum8trico de ?A@ ml.
(. EnHuague la ,ro.eta graduada con agua destilada * adicione al matra0
+olum8trico. A2ore el matra0 con agua destilada * agite.
3eterminaci9n:
$. 3ilu*a $@ ml del extracto a $@@ ml con agua destilada. !on una ,i,eta ,ase a
un tu.o de ensa*e $ ml del 2iltrado diluido.
?. 5ome con la ,i,eta dos muestras de $ ml de agua destilada que ser+ir;n como
.lancos ,or du,licado * coloque cada uno de ellos en un tu.o de ensa*e.
:. 5ome dos .lancos du,licados de $ ml usando la soluci9n de glucosa diluida.
%. Agregue r;,idamente a todos los tu.os Aml de reacti+o de ant/rone reci8n
,re,arado. 5a,e los tu.os * me0cle +igorosamente. !ol9quelos en un .aFo
mara * caliente durante $? minutos.
A. En2re r;,idamente a tem,eratura am.iente. 5rans2iera la soluci9n a celdas
,ara es,ectro2ot9metro de $ cm. El color +erde es esta.le s9lo ,or ? /oras.
B. "ea la a.sor+ancia a (:@ nm contra el .lanco.
!;lculos
!ar.o/idratos totales dis,oni.les JR de glucosaC M J?A _ .CQJa _ WC
3onde
W M 1eso en g de la muestra.
a M A.sor+ancia del est;ndar diluido
$
.
. M A.sor+ancia de la muestra diluida.
$
El gr;2ico es una lnea recta 8n el rango de @ [ @.$A mg de glucosa JmanualC @.@ [ $.A mg de glucosa Jautom;ticoC.
!legg, H.M. J$'A(C. 4.Sci. Food Agric. &, %@.
FI?URA 11
3eterminaci9n de car.o/idratos totales dis,oni.les en alimentos.
4.4. Ni/!(@')" P!"/'i$" 9 N" P!"/'i$"
Esta t8cnica ,ermite reconocer la ,orci9n de nitr9geno de origen ,roteico * no ,roteico
de los materiales anali0ados. 1uede a,licarse a todo ti,o de materiales.
Reacti+os
Acetato de co.re mono/idratado en soluci9n al : R ,Q+.
Sul2ato de aluminio * ,otasio J? -
?
OC en soluci9n al $@R ,Q+.
Anties,umante de silicona.
Materiales * Equi,o
Matraces LHeld/al de B@@ ml.
Em.udos .uc/ner de $? cm de di;metro.
Matraces Lita0ato.
1a,el 2iltro W/atman no. A%$ 9 Sc/leic/er * Sc/ill no. $A@A, de $B cm.
1rocedimiento
1ese ? g de muestra con m;s de ?AR de ,rotena cruda, lg ,ara rangos de ?A [ A@R
de ,rotena * @.Ag ,ara materiales con m;s de A@R de ,rotena cruda. 5rans2ierala a
un matra0 LHelda/l * agregue a,roximadamente A@ ml de agua destilada, unos ,ocos
gr;nulos de antie.ullente * una o dos gotas del anties,umante.
!aliente a e.ullici9n durante :@ minutos Jteniendo cuidado de que no se sequeC.
!uando la muestra est8 toda+a caliente agregue ? ml de la soluci9n de sul2ato de
aluminio * ,otasio, me0cle ,er2ectamente * caliente a e.ullici9n, adicione A@ ml de la
soluci9n de acetato de co.re me0clando ,er2ectamente .ien * deHe en2riar. Filtre
usando +aco. "a+e el matra0 * el ,reci,itado con A@ ml de agua destilada 2ra.
1ara e+aluar el nitr9geno ,roteico analice el residuo ,or medio de la marc/a de
nitr9geno total de LHelda/l. El nitr9geno no ,roteico se anali0a ,or medio de la misma
t8cnica a ,artir del lquido 2iltrado. "os resultados res,ecti+os de los s9lidos * lquidos
,or medio de LHelda/l o2recer;n directamente los datos de nitr9geno ,roteico JN1C * no
,roteico JNN1C res,ecti+amente.
FI?URA 12
3eterminaci9n del contenido de nitr9geno ,roteico * no ,roteico en alimentos.
4.6. D'/'!.i)$i() &' P!"/'A)+ :"! '% M,/"&" &' L"I!9.
El m8todo m;s ,reciso ,ara la determinaci9n de concentraciones ,roteicas es
,ro.a.lemente el m8todo de /idr9lisis ;cida. "a ma*or ,arte de los otros m8todos son
sensi.les a la com,osici9n de amino;cidos de las ,rotenas * no ,ueden ser o.tenidas
concentraciones a.solutas. El ,rocedimiento de "oXr* no es la exce,ci9n, ,ero es
sensi.lemente constante de ,rotena a ,rotena, lo cual /a /ec/o que sea
am,liamente usado * que las determinaciones sean una alternati+a com,letamente
ace,ta.le con un rigor a.soluto en todas las determinaciones en casi todas las
circunstancias en donde se in+olucren me0clas de ,rotenas o extractos crudos.
Reacti+os
Reacti+o de 2ormaci9n com,leHa. 1re,;rese inmediatamente antes de usarse,
me0clando las soluciones A, ) * ! en ,ro,orci9n $@@:$:$ res,ecti+amente.
Soluci9n A: ?R J1Q>C Na
?
!O
:
en agua destilada.
Soluci9n ): $R J1Q>C !uSO
%
.A-
?
O en agua destilada.
Soluci9n !: ?R J1Q>C 5artrato de Sodio * 1otasio en agua destilada.
Soluci9n de -idr9xido de sodio ?N.
Reacti+o de Foln Jdis,oni.le comercialmenteC: <sese en concentraci9n ?$N.
Est;ndares: Use una soluci9n madre de ,rotena est;ndar J,or eHem. 2racci9n
> de al.<mina de suero .o+inoC conteniendo % mgQml de ,rotena en agua
destilada, almacenada a -?@K!. 1re,are los est;ndares dilu*endo la soluci9n
madre con agua destilada tal como se indica en la siguiente ta.la:
PREPARACION DE ESTANDARES DE PROTEINA
Soluci9n madre J`lC @ $.?A ?.A@ (.?A $?.A@ ?A.@@ (?.A@ $?A.@ ?A@.@
Agua J`lC A@@ %'' %'B %'% %BB %&A %:B %&A ?A@
!oncentraci9n de ,rotena J`gQmlC @ $@ ?@ A@ $@@ ?@@ A@@ $@@@ ?@@@
1rocedimiento
$. A @.$ ml de muestra o sol. est;ndar, adici9nele @.$ ml de sol. NaO- ?N.
!aliente a $@@K! durante $@ min a .aFo mara /ir+iendo ,ara /idroli0ar la
muestra.
?. 3eHe en2riar a tem,eratura am.iente * agr8guele $ ml del reacti+o de 2ormaci9n
de com,leHo reci8n ,re,arado * deHe re,osar a tem,eratura am.iente ,or $@
min.
:. Adicione @.$ ml de reacti+o de Foln, agite con un me0clador de +9rtice * deHe
re,osar a tem,eratura am.iente durante :@[(@ min Jno exceda este tiem,oC.
%. "ea la a.sor+ancia a &A@ nm si la concentraci9n de la ,rotena 2uera menor a
A@@ `gQml, 9 AA@ nm si 2uese entre $@@ * ?@@@ `gQml.
A. 5race una cur+a est;ndar de a.sor+ancia como 2unci9n de concentraci9n inicial
de ,rotena * <sela ,ara determinar el contenido de ,rotena en la muestra.
NOTA
a. Si la muestra se encuentra como ,reci,itado, disu8l+alo en NaO- ?N e
/idrolice como en el ,aso $. Use alcuotas de @.? ml del /idroli0ado ,ara el
,aso ?.
.. 5odas las c8lulas u otras muestras com,leHas ,ueden requerir un
,retratamiento como el descrito ,or )urton J$'B%C ,ara 3NA.
c. Me0cle r;,idamente en cuanto el reacti+o de Foln sea adicionado= esto es
im,ortante ,ara o.tener una adecuada re,roducti.ilidad.
d. Se requiere un gru,o de est;ndares ,ara cada ensa*o, ,re2erentemente ,or
tri,licado o du,licado.
FI?URA 13
3eterminaci9n de ,rotena en alimentos ,or el m8todo de "oXr*
4.7. D'/'!.i)$i() &' U!'
Este m8todo ,ermite cuanti2icar el contenido de urea en ingredientes alimenticios.
Reacti+os
!ar.9n acti+ado
Soluci9n !arre0 : disuel+a ?$.' g de acetato de 0inc de/idratado en agua,
agregue : ml de ;cido ac8tico glacial * dilu*a a $@@ ml con agua destilada.
Soluci9n !arre0 : disuel+a $@.( g de 2errocanuro de ,otasio en $@@ ml de
agua destilada.
Acido clor/drico @.@?N.
Soluci9n de acetato de sodio: disuel+a $:( g de acetato de sodio tri/idratado
en $@@@ ml de agua.
Soluci9n de %-dimetilamino.en0alde/do: disuel+a $.( g de %-
dimetilamino0en0alde/do J%-3MA)C en $@@ ml de etanol al '(R * adicione $@
ml de ;cido clor/drico JdM$.$B gQmlC.
Soluci9n est;ndar de urea: disuel+a @.$ g de urea en $@@ ml de agua.
Materiales * Equi,o
Agitador rotatorio
Es,ectro2ot9metro con celdas de $@ mm.
1rocedimiento
1ese a,roximadamente ? g de muestra con una ,recisi9n de @.@@$ g, o una cantidad
que se es,era contenga de A@ a ?@@ mg de urea * col9quela en un matra0 +olum8trico
de A@@ ml. Agregue $A@ ml de ;cido clor/drico @.@?N, agite ,or :@ min * adicione $@
ml de la soluci9n de acetato de sodio * me0cle. Agregue $ g de car.9n acti+ado, agite
,er2ectamente .ien * deHe re,osar la me0cla ,or $A min. Adicione A ml de la soluci9n
!arre0 , seguido ,or A ml de la soluci9n !arre0 , me0clando ,er2ectamente .ien
entre las adiciones. A2ore con agua destilada * me0cle .ien. Filtre una ,arte con un
,a,el 2iltro seco en un +aso de ,reci,itado de ?A@ ml lim,io * seco.
3eterminaci9n
5rans2iera $@ ml del 2iltrado a un tu.o de ensa*e con ta,9n esmerilado, adicione $@ ml
de la soluci9n %-3MA), me0cle * deHe re,osar ,or $A min. Mida la a.sor+ancia de la
soluci9n a %:A nm en una celda de $@ mm, contra una soluci9n de re2erencia
,re,arada con los reacti+os.
!ur+a de !ali.raci9n
3ilu*a A, $@, ?@, :@ * %@ ml de soluci9n de urea a $@@ ml de agua. 5rans2iera $@ ml de
cada soluci9n a tu.os de ensa*e con ta,9n esmerilado * adicione $@ ml de la soluci9n
%-3MA) a cada uno. Me0cle * deHe re,osar ,or $A minutos, mida la a.sor+ancia como
se seFal9 anteriormente contra una soluci9n de re2erencia ,re,arada con $@ ml de
soluci9n %-3MA) * $@ ml de agua, /aga una gr;2ica relacionando las a.sor+ancias
con la cantidad de urea ,resente.
Ex,resi9n de Resultados
3etermine la cantidad de urea en la muestra ,or re2erencia con la cur+a de cali.raci9n
ela.orada. Ex,rese los resultados como ,or ciento de la muestra.
R Urea _ @.%((A M R N urea.
NOTAG
Si la muestra est; mu* coloreada, la cantidad de car.9n acti+ado de.er; ser
incrementada arri.a de A g. "a soluci9n 2inal des,u8s del 2iltrado de.er; ser incolora.
FI?URA 14
3eterminaci9n del contenido de urea en ingredientes alimenticios.
4.5. A$i&" U!i$".
A tra+8s de este m8todo es ,osi.le determinar el contenido de ;cido <rico * sus sales
tanto en gallina0a como en alimentos e ingredientes que los constitu*en.
Reacti+os
Soluci9n de /idr9xido de sodio. 3isuel+a A@ g de NaO- en A@ ml de agua,
me0cle .ien * almacene la soluci9n en un en+ase de ,l;stico.
Soluci9n neutra de 2ormalde/ido.
a. >eri2ique la concentraci9n de la soluci9n dis,oni.le, ,ara lo cual me0cle :@ ml
de 8sta con A@ml de soluci9n de NaO- N * ?Aml de soluci9n de 1er9xido de
/idr9geno J?@ +ol<menesC. !aliente en .aFo de +a,or /asta que no /a*a m;s
e2er+escencia. En2re * titule con Na!l N usando indicador de 2eno2talena.
Realice una titulaci9n de .lanco usando : ml de agua en lugar del 2ormalde/do
* calcule la concentraci9n como sigue:
$ml de la soluci9n de NaO- N M @.@:@@ g de 2ormalde/do.
!onc. de 2ormalde/do JgQ$@@ mlC M JJ)-5C _ JJ@.@:@@ _ $@@CQ:C
3onde
) M 5itulaci9n del .lanco.
5 M 5itulaci9n de la muestra.
.. 1re,are una soluci9n neutra que contenga $&.Ag de 2ormalde/do con ?A@ml
de agua * A@@ml de etanol. AHuste el ,- a &.@ con una soluci9n de NaO- @.$N.
3ilu*a a $@@@ml con agua, me0cle * aHuste nue+amente el ,- de ser necesario.
Soluci9n .u22er de succinato. 3isuel+a con calentamiento ?'.Ag de ;cido
succnico en &A@ml de agua * ?@ml de la soluci9n de NaO-. 3eHe en2riar *
adicione una cantidad adecuada de soluci9n de 2ormol que contenga $&.Ag de
2ormalde/do, me0cle .ien * aHuste el ,- a (.@ con la soluci9n de NaO-. 3ilu*a
a $@@@ml con agua destilada, me0cle * aHuste el ,- si es necesario.
Soluci9n de tiosul2ato de sodio. 3isuel+a ?Ag de Na
?
S
?
O:.A-
?
O en $@@@ml de
agua destilada.
Soluci9n de lactato de ,lata. 3isuel+a con calentamiento :g de lactato de ,lata
en A@ml de agua destilada * $ml de ;cido l;ctico. 3ilu*a a $@@ml con agua,
2iltre * almacene en un 2rasco o.scuro. No lo ex,onga a la lu0 directa.
Soluci9n de magnesio amoniacal. 3isuel+a B.&Ag de MgSO
%
.&-
?
O * $&.Ag de
N-
%
!" en A@ml de agua. Agregue :@ml de N-
%
O- Jd M @.BBgQmlC, me0cle .ien
* dilu*a a $@@ml con agua.
Reacti+o de )enedict * -itc/cocL. Me0cle :Aml de soluci9n de lactato de ,lata
con $Aml de soluci9n de magnesio amoniacal. Adicione A@ml de /idr9xido de
amonio Jd M @.BB gQmlC m80clese .ien. 1re,;rese inmediatamente antes de
usarse.
Soluci9n est;ndar de ;cido <rico. 1ese ?A@mg de ;cido <rico con una ,recisi9n
de @.$mg * trans2i8ralo a un matra0 de 2ondo redondo aco,lado a un
condensador de re2luHo. Adicione $@@ml de la soluci9n de 2ormalde/do etlico *
caliente a re2luHo en un .aFo de +a,or ,or :@min agitando 2recuentemente.
En2re * trans2iera a un matra0 +olum8trico de ?A@ml, la+ando el matra0
redondo con sol. de 2ormalde/do etlico, a2ore con esta soluci9n * me0cle. $ ml
contiene $ mg de ;cido <rico.
Eter de ,etr9leo, ,unto de e.ullici9n %@ [ (@K!.
Materiales * Equi,o
E,ectro2ot9metro con celdas de cuar0o de $@ mm.
5u.os de cristal ,ara ,ercolaci9n, con a,roximadamente ?%@ mm de longitud,
$B mm de di;metro interno, * en la ,arte in2erior a,roximadamente $?@mm de
longitud * B mm de di;metro interno.
Extracci9n del ;cido <rico:
$. 3e la gallina0a: 1ese con una a,roximaci9n de @.@@$ g cerca de @.%g de
gallina0a seca * col9quela en un matra0 de 2ondo redondo de $A@ml. Adicione
(@ml de soluci9n neutra de 2ormalde/do, conecte a un condensador de re2luHo
* caliente en .aFo de +a,or ,or una /ora. En2re * 2iltre a tra+8s de un crisol
J1orosidad %C a un matra0 +olum8trico de $@@ml. EnHuague el matra0 : +eces
consecuti+as con ,orciones de $@ml de soluci9n de 2ormalde/do etlico,
,asando cada ,orci9n ,or el crisol de 2iltraci9n al matra0 +olum8trico. A2ore con
la misma soluci9n * agite.
?. 3e los alimentos: 1ese % a Ag de muestra con una a,roximaci9n de @.@@$ g *
desengrasela ,or extracci9n con 8ter de ,etr9leo. 5rans2iera cuantitati+amente
la muestra desengrasada a un matra0 de 2ondo redondo * remue+a el sol+ente
residual con una corriente sua+e de aire. !ontin<e el an;lisis como
,re+iamente se seFal9, iniciando con la adici9n de (@ ml de soluci9n de
2ormalde/do etlico.
3eterminaci9n
5rans2iera con una ,i,eta de ?@ ml de extracto de la muestra ,re,esado, seg<n los
m8todos descritos, a un tu.o de centr2uga de A@ ml. Adicione $@ ml del reacti+o de
)enedict * -itc/cocL, me0cle .ien * d8Helos re,osar en la oscuridad ,or una /ora.
!entri2uge a ?@@@ r,m ,or $A min. Retire el so.renadante * deHe escurrir ,or $@ min.
!uidadosamente lim,ie cualquier lquido remanente sin ,ertur.ar el ,reci,itado *
adicione ?@ ml de soluci9n de tiosul2ato de sodio. 3isuel+a el ,reci,itado, agitando con
una +arilla de +idrio delgada. !on una ,i,eta trans2iera A ml de esta soluci9n a un
matra0 +olum8trico de ?@@ ml conteniendo %@ ml de soluci9n .u22er de succinato, a2ore
con agua destilada * me0cle .ien. Mida la a.sor+ancia de la soluci9n a ?'% nm en
celdas de slice de $@ mm com,arada contra una soluci9n ,re,arada me0clando A ml
de soluci9n de tiosul2ato de sodio con %@ ml de soluci9n .u22er de succinato a2orada a
?@@ ml con agua destilada. 3etermine la cantidad de ;cido <rico mediante una cur+a
de cali.raci9n.
!ur+a de !ali.raci9n:
En una serie de tu.os de centr2uga de A@ ml de ca,acidad trans2iera con una ,i,eta ?,
%, (, B, $@ * $? ml de soluci9n est;ndar de ;cido <rico Jequi+alentes a una cantidad
similar de ;cido <rico en mgC * ll8+elos a ?@ ml con la soluci9n de 2ormalde/do etlico.
Adicione a cada tu.o $@ ml de reacti+o de )enedict * -itc/cocL, me0cle .ien * d8Helo
re,osar en la oscuridad ,or una /ora. !ontin<e el m8todo como en la determinaci9n a
,artir del centri2ugado. Mida la a.sor+ancia de la soluci9n * trace la cur+a de
cali.raci9n gra2icando a.sor+ancia J*C contra la cantidad corres,ondiente de ;cido
<rico en mg JxC.
Ex,resi9n de Resultados
El contenido de N del ;cido <rico como R de la muestra est; dado ,or la 29rmula:
R N M AQJ( _ WC
3onde
A M mg de ;cido <rico Jen la alicuota del extracto de la muestraC determinado ,or la
medici9n 2otom8trica.
W M ,eso de la muestra en g.
FI?URA 14
3eterminaci9n de ;cido <rico en gallina0a e ingredientes alimenticios
4.9. C')i0 S"%17%' ' I)+"%17%' ') A$i&".
Este m8todo ,ro,orciona una estimaci9n de la dis,oni.ilidad de minerales en .ase a
su digesti.ilidad en ;cido.
Reacti+os, Materiales * Equi,o
Acido clor/drico J$[?.A R +Q+C
1a,el 2iltro li.re de ceni0a
!risoles de ,orcelana
1rocedimiento
Use el residuo o.tenido de la determinaci9n de ceni0a. !aliente ?A ml de ;cido
clor/drico con cuidado ,ara e+itar sal,icar * 2iltre en el ,a,el * enHuague con agua
caliente /asta que quede li.re del ;cido. !oloque el ,a,el 2iltro * el residuo en un crisol
de ,orcelana ,re,esado seco * col9quelo en la mu2la a (@@ K! durante ? /oras o
/asta que quede li.re de car.9n.
!;lculos
!eni0a insolu.le JRC M $@@J1eso de la ceni0a tratada con ;cidoQ1eso de la muestraC
FI?URA 16
3eterminaci9n de ceni0a solu.le e insolu.le en ;cido clor/drico
4.16. D'/'!.i)$i() &' C%$i" ') '% A%i.')/".
"a e+aluaci9n de calcio en la dieta re+iste una gran im,ortancia *a que un des.alance
con el 29s2oro u otros minerales generar; un .aHo crecimiento.
Reacti+os
Acido clor/drico J$ [ : RC
Acido ntrico &@R
-idr9xido de amonio J$:$ +Q+C
ndicador de roHo de metilo J$ g en ?@@ ml de etanolC
Soluci9n de oxalato de amonio %.? R